CN1867316A - 促进胶原蛋白生成的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种促进胶原蛋白生成的组合物，更具体而言，提供一种能促进人体真皮中胶原蛋白生成的组合物。进一步说，本发明还提供一种促进胶原蛋白生成的方法。本发明提供的组合物能促进胶原蛋白的生成，该组合物中包含了作为活性成分的嘌呤核酸相关物质，本发明还提供了一种促进胶原蛋白生成的组合物，该组合物包含嘌呤核酸相关物质和嘧啶核酸相关物质。本发明促进胶原蛋白生成的方法包括将嘌呤核酸相关物质单独或与嘧啶核酸相关物质组合施用在皮肤上。

Description

促进胶原蛋白生成的组合物
技术领域
本发明涉及一种促进胶原蛋白生成的组合物。本发明也涉及一种方法，该方法用来促进真皮中胶原蛋白的生成。
发明背景
皮肤真皮含有大约90％的胶原蛋白，因此，它具有支撑皮肤结构，提供细胞生存环境以及保湿的功能。众所周知，当皮肤受到某些特定外界影响，如紫外线照射，干燥时，胶原蛋白会丢失。此外也发现，当衰老和处于压力状态下时，皮肤中的胶原蛋白也会丢失。同时发现这些外界影响和/或衰老能引起皮肤成纤维细胞中胶原蛋白生成减少。
保留中等数量胶原蛋白以及表现很好的胶原蛋白生成能力的功能对保持健康皮肤是很重要的。因此，人们积极地寻找能促进胶原蛋白生成的物质(如日本未被审查的专利Nos.2001-316240和2003-278783，A)。然而，还没有报道认为核酸及其相关物质具有促进胶原蛋白生成的能力。
发明概述
本发明的目的是提供一种促进胶原蛋白生成的组合物，更具体一点，是提供一种能促进人体真皮中胶原蛋白生成的组合物。此外，本发明的目的是将上述的组合物用作一种促进胶原蛋白的生成的外用制剂。
本发明的发明者作了许多研究来达到上述的目标，并且发现嘌呤核酸相关物质，尤其是5’单磷酸腺苷及其盐类具有促进真皮中胶原蛋白生成的作用。而且，本发明的发明者发现嘧啶核酸相关物质具有增强嘌呤核酸相关物质对胶原蛋白生成的促进作用。
更具体而言，本发明涉及下列促进胶原蛋白生成的组合物。
第1条：一种促进胶原蛋白生成的组合物，包括嘌呤核酸相关物质，。
第2条：根据第1条所述促进胶原蛋白生成的组合物，进一步包括嘧啶核酸相关物质。
第3条：根据第1条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自腺嘌呤，腺苷，腺苷磷酸，腺苷磷酸代谢物及其盐类中的至少一种。
第4条：根据第1条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自单磷酸腺苷及其盐类中的至少一种。
第5条：根据第1条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自5’单磷酸腺苷及其盐类中的至少一种。
第6条：根据第2条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘧啶核酸相关物质选自尿嘧啶，尿苷，磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第7条：根据第2条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘧啶核酸相关物质选自单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第8条：根据第2条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘧啶核酸相关物质选自5’单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第9条：根据第2条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自腺嘌呤，腺苷，磷酸腺苷，磷酸腺苷代谢物及其盐类中的至少一种，而其中的嘧啶核酸相关物质选自尿嘧啶，尿苷，磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第10条：根据第2条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自一磷酸腺苷及其盐类，而其中的嘧啶核酸相关物质选自一磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第11条：根据第2条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自5’单磷酸腺苷及其盐类，其中的嘧啶核酸相关物质选自5’单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第12条：根据第2条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中组合物以每重量份的嘌呤核酸相关物质含有0.001-100重量份的嘧啶核酸相关物质。第13条：根据第1条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中基于组合物的总量，组合物含有0.01-10％重量的嘌呤核酸相关物质。
第14条：根据第1条所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中基于组合物的总量，组合物含有0.0001-10％重量的嘧啶核酸相关物质。
第15条：根据第1条所述的组合物，能用于化妆品，外用的药物或准药物(quasi-medical drug)上。
第16条：根据第1条所述用于化妆品的促进胶原蛋白生成的组合物。
本发明也涉及下列促进胶原蛋白生成的方法。
第17条：促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上施用嘌呤核酸相关物质。
第18条：根据第17条所述的促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上组合施用嘌呤核酸相关物质和嘧啶核酸相关物质。
第19条：根据第17条所述的促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上施用外用组合物，该组合物包括嘌呤核酸相关物质。
第20条：根据第18条所述的促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上施用外用组合物，该组合物包括嘌呤核酸相关物质及嘧啶核酸相关物质。
第21条：根据第17条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中的嘌呤核酸相关物质选自腺嘌呤，腺苷，磷酸腺苷，磷酸腺苷代谢物及其盐类中的至少一种。
第22条：根据第17条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中的嘌呤核酸相关物质选自单磷酸腺苷及其盐类中的至少一种。
第23条：根据第17条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中的嘌呤核酸相关物质选自5’单磷酸腺苷及其盐类中的至少一种。
第24条：根据第18条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中的嘧啶核酸相关物质选自尿嘧啶，尿苷，磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第25条：根据第18条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中的嘧啶核酸相关物质选自单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第26条：根据第18条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中的嘧啶核酸相关物质选自5’单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第27条：根据第18条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中的嘌呤核酸相关物质选自腺嘌呤，腺苷，磷酸腺苷，磷酸腺苷代谢物及其盐类中的至少一种，而其中的嘧啶核酸相关物质选自尿嘧啶，尿苷，磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第28条：根据第18条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中的嘌呤核酸相关物质选自单磷酸腺苷及其盐类，而其中的嘧啶核酸相关物质选自单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第29条：根据第18条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中的嘌呤核酸相关物质选自5’单磷酸腺苷及其盐类，其中的嘧啶核酸相关物质选自5’单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
第30条：根据第18条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中组合物以每重量份的嘌呤核酸相关物质含有0.001-100重量份的嘧啶核酸相关物质。
第31条：根据第19条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中基于组合物的总量，外用组合物含有0.01-10％重量的嘌呤核酸相关物质。
第32条：根据第20条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中基于组合物的总量，外用组合物含有0.0001-10％重量的嘧啶核酸相关物质。
第33条：根据第19条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中外用的组合物能用于化妆品，外用的药物或准药物上。
第34条：根据第19条所述的促进胶原蛋白生成的方法，其中外用的组合物能用于化妆品。
第35条：根据第17条所述的促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上施用第1条所述的促进胶原蛋白生成的组合物。
第36条：根据第18条所述的促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上施用第2条所述的促进胶原蛋白生成的组合物。
此外，本发明也涉及在下列几方面的用法。
第37条：嘌呤核酸相关物质在制备促进胶原蛋白生成的组合物中的应用。
第38条：嘌呤核酸相关物质和嘧啶核酸相关物质在制备促进胶原蛋白生成的组合物中的应用。
第39条：嘌呤核酸相关物质在促进胶原蛋白生成中的应用。
第40条：嘌呤核酸相关物质和嘧啶核酸相关物质在促进胶原蛋白生成中的应用。
附图简述
图1是一个图表，表示的是在实验实施例1中，把人皮肤成纤维细胞培养在含不同AMP2Na浓度的培养基中所产生的PICP浓度。
图2是一个图表，表示的是在实验实施例2中，把人皮肤成纤维细胞培养在含不同AMP2Na和UMP2Na浓度的培养基中所产生的PICP浓度。
本发明的实施最佳方式
(I)促进胶原蛋白生成的组合物
本发明促进胶原蛋白生成的组合物，包含作为活性成分的嘌呤核酸相关物质。本发明中使用的“嘌呤核酸相关物质”指的是嘌呤，具有嘌呤骨架的各种嘌呤衍生物及其盐类。
对本发明中使用的嘌呤核酸相关物质没有限制，在这个范围之内的嘌呤核酸物质能混合在化妆品、外用的药物/准药物中。那些水溶性的或亲水的是优选的。通常，这样的嘌呤核酸相关物质的例子包括腺嘌呤核酸相关物质，如腺嘌呤，腺苷，磷酸腺苷(如2’磷酸腺苷，3’磷酸腺苷，5’磷酸腺苷，5’二磷酸腺苷，5’三磷酸腺苷，环磷酸腺苷，腺苷酸基琥珀酸，烟酰胺腺嘌呤单核苷酸(NMN)，烟酰胺嘌呤二核苷酸(NAD)，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(FAD)，黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)等)，磷酸腺苷代谢物(如次黄嘌呤，肌苷，肌苷酸等)及其盐类；以及鸟嘌呤核酸相关物质，如鸟嘌呤，鸟苷，磷酸鸟苷(如3’磷酸鸟苷，5’磷酸鸟苷，5’二磷酸鸟苷，5’三磷酸鸟苷等)，其代谢物(如黄嘌呤核苷酸，黄嘌呤等)及其盐类。
在这些核酸相关物质中，本发明优选的嘌呤核酸相关物质的例子包括上述的腺嘌呤核酸相关物质。更优选的是磷酸腺苷，磷酸腺苷代谢物及其盐类，而尤其优选的是磷酸腺苷及其盐类。在磷酸腺苷中，2’磷酸腺苷，3’磷酸腺苷，5’磷酸腺苷(AMP)适合使用，而5’磷酸腺苷(AMP)是尤其优选的。
这些盐的例子包括碱金属盐，如钠盐，钾盐等；碱土金属盐，如钙盐，镁盐，钡盐等；碱性氨基酸盐，如精氨酸，赖氨酸等；铵盐，如铵盐，三环已基铵盐等；不同的链烷醇胺盐，如单乙醇胺盐，二乙醇胺盐，三乙醇胺盐，单异丙醇胺盐，二异丙醇胺盐和三异丙醇胺盐等。在这些盐中，优选的是碱金属盐，如钠盐等。碱金属盐的具体例子如腺苷-单磷酸单钠盐和腺苷单磷酸二钠盐。
作为组合物的活性成分促进胶原蛋白的生成的这些嘌呤核酸相关物质可以单独使用，也可以两种或多种的组合使用。
本发明中可以促进胶原蛋白生成的组合物中，嘌呤核酸相关物质的比例可以变化，取决于嘌呤核酸相关物质的种类，以及后面将要介绍的嘧啶核酸相关物质的存在与种类，打算的用途以及/或者组合物的形状等，但通常合适的重量范围0.01-10％之间调整，优选的重量范围是1-10％，更优选的重量范围是3-6％。
优选的是，除了上述的嘌呤核酸相关物质之外，本发明促进胶原蛋白生成的组合物还包括嘧啶核酸相关物质。它们的组合使用能进一步增强嘌呤核酸相关物质促进胶原蛋白生成的作用。本发明使用的“嘧啶核酸相关物质”指的是嘧啶，具有嘧啶骨架的不同嘧啶衍生物及其盐类。
对本发明促进胶原蛋白生成的组合物中使用的嘧啶核酸相关物质没有限制，只要嘧啶核酸物质能混合在化妆品、外用的药物和准药物中。那些水溶性的或亲水的是优选的。这样的嘧啶核酸相关物质的实施例包括尿嘧啶核酸相关物质，如尿嘧啶，尿苷，磷酸尿苷[单磷酸尿苷(5’磷酸尿苷，3’磷酸尿苷，2’磷酸尿苷)，二磷酸尿苷，三磷酸尿苷，环磷酸尿苷等]，脱氧尿苷，磷酸脱氧尿苷[5’二磷酸脱氧尿苷(dUDP)，5’磷酸脱氧尿苷(dUMP)等]及其盐类；胞嘧啶核酸相关物质，如胞嘧啶，胞苷，磷酸胞苷(CMP)[单磷酸胞苷(5’磷酸胞苷，3’磷酸胞苷，2’磷酸胞苷)，三磷酸胞苷(CTP)，二磷酸胞苷(CDP)等]，脱氧胞苷，磷酸脱氧胞苷[5’二磷酸脱氧胞苷(dCTP)，5’磷酸脱氧胞苷(dCMP)等]及其盐类；还有胸腺嘧啶核酸相关物质，如胸腺嘧啶，胸苷，磷酸胸苷[单磷酸胸苷(dTMP)，二磷酸胸苷(dTDP)，三磷酸胸苷(dTTP)等]，乳清酸，5-磷酸乳清苷及其盐类。
任何嘧啶核酸相关物质都可以使用，而不用考虑它的纯度，只要包含了各上述成分都。合用的嘧啶核酸相关物质有包括这些成分中任何一种的植物提取物，如十字花科(brassicaceae)植物提取物(尤其是种子提取物)，豆科(leguminosae)植物提取物等。
上述的尿嘧啶核酸相关物质优选用作嘧啶核酸相关物质，因为它们能有效地进一步增强嘌呤核酸相关物质对胶原蛋白生成的促进作用。上述这些物质优选的是尿苷，磷酸尿苷及其盐类，而磷酸尿苷及其盐类更优选。优选的是利用单磷酸尿苷，尤其是5’磷酸尿苷作为磷酸尿苷。
上述盐的例子包括钠盐，钾盐，类似的碱金属盐；，钙盐，镁盐，钡盐以及类似的碱土金属盐；精氨酸，赖氨酸以及类似的碱性氨基酸盐；铵盐，三环己基铵盐及类似的铵盐；范围广泛的链烷醇胺盐，如单乙醇胺盐，二乙醇胺盐，三乙醇胺盐，单异丙醇胺盐，二异丙醇胺盐和三异丙醇胺盐等。
在这些盐中，优选的是碱金属盐，如钠盐等。碱金属盐的具体例子如尿苷-单磷酸单钠盐和腺苷单磷酸二钠盐。
这些嘧啶核酸相关物质可以单独使用，或者两种或更多的组合使用，作为组合物的活性成分，促进胶原蛋白的生成。
对用于本发明促进胶原蛋白生成的组合物中的嘧啶核酸相关物质的比例没有限制，只要嘧啶核酸相关物质对胶原蛋白生成的促进作用能得到证明。例如，在组合物中，嘧啶核酸相关物质和嘌呤核酸相关物质在重量上的比例在0.001-100∶1之间合适地调节。嘧啶核酸相关物质和嘌呤核酸相关物质重量的比例优选的在0.01-100∶1范围内，更优选的重量比例是0.01-10∶1，进一步优选的重量比例是0.01-1∶1。基于促进胶原蛋白生成的组合物的总量，嘧啶核酸相关物质重量的比例是，例如0.0001-10％，优选的是0.0001-1％，更优选的是0.0001-0.1％。
将上述的成分与化妆品或药用上可接受的基质、载体和/或添加剂组合使用，可以配制成不同剂型的促进胶原蛋白生成的组合物。可以使用已知的化妆品或药用上可接受的基质、载体和/或添加剂。如果有必要的话，本发明促进胶原蛋白生成的组合物包括的成分范围更宽，这些成分都是已知的适合皮肤和/或粘膜的外用组合物，如化妆品和外用的药物/准药物。这些成分的例子如表面活性剂，着色剂(染料，色素)，香料，防腐剂，杀菌剂(抗菌药)，增稠剂，抗氧化剂，螫合剂，制冷剂，除臭剂，保湿剂，紫外吸收剂，紫外分散剂，维生素，植物提取物，收敛剂，抗炎试剂(消炎药)，增白剂，细胞活化剂，血管扩张药，血液循环加速剂，皮肤功能促进剂等。
上述提及的成分的例子包括阴离子表面活性剂，如高级脂肪酸的盐类，烷基磺酸盐，聚氧乙烯烷基醚硫酸盐，烷基醚磷酸盐，N-酰基氨基酸盐，酰基N-甲基氨基乙磺酸盐等；阳离子表面活性剂如烷基三甲基氯化铵，二烷基二甲氯化基铵等；两性表面活性剂如烷基二甲基氨基乙酸酯三甲铵乙内酯，烷基酰胺二甲基氨基乙酸酯三甲铵乙内酯，2-烷基-N-羧基-N-羟基咪唑啉三甲铵乙内酯等；非离子表面活性剂如聚氧乙烯型，多元醇酯型，环氧乙烷/环氧丙烷嵌段共聚物等。任何高分子量的表面活性剂或天然的表面活性都可以不加限制的使用。
防腐剂的例子包括对羟基苯甲酸乙酯，水杨酸，山梨酸等。增稠剂的例子包括黄原胶，羧甲基纤维素钠，羧乙烯基聚合物等。螯合剂的例子包括乙二胺四乙酸钠盐，磷酸，柠檬酸等。
本发明促进胶原蛋白生成的组合物可以用作一种外用的制剂，可以敷或喷在皮肤上。更具体而言，本发明促进胶原蛋白生成的组合物可以广泛地用在化妆品或外用的药物/类似药物上(皮肤科制剂)。上述物质中优选的是如果从每天来看能促进皮肤胶原蛋白的生成的化妆品。这些外用的试剂的例子包括范围更宽的护发产品，如生发剂和毛发生长剂，以及具有生发和/或毛发生长功效的洗发精，染发剂以及生发水(包括养发剂和液体)。
本发明的促进胶原蛋白生成的组合物可以不加限制地采用任何形式，只要它可以应用到皮肤或粘膜。所述形式的例子包括膏状，摩丝，凝胶，液体，乳胶，悬浮液，乳霜，油膏，薄片，气溶胶，喷雾剂以及擦剂。化妆品的例子包括洗剂，润肤乳剂，乳液，滋养乳剂，洁面乳剂以及类似的乳剂；滋养霜，按摩霜，洁肤霜，化妆霜以及类似的面霜等。护发产品的例子包括养发剂，护发霜，生发水，气溶胶(空气喷雾)，摩丝，洗发水，染发剂，液体等。
本发明促进胶原蛋白生成的组合物能作为一种化妆品或外用的药物/准药物直接应用或喷到皮肤或粘膜上。根据使用者(人)的年龄，性别，使用的意图，受影响皮肤部分的状况等在皮肤和粘膜上以有效地促进胶原蛋白生成的量施用这些组合物一天1-5或6次。
本发明的组合物能促进胶原蛋白生成，因此，表示出抗衰老，滋润皮肤，抗痤疮，抗皱，抗松垂，抗晦暗，生发，去头屑，美甲，创面愈合等作用。因此，本发明促进胶原蛋白生成的组合物能用作化妆品或外用药物/准药物，用来抗衰老，滋润皮肤，抗痤疮，抗皱，抗松垂，抗晦暗，生发，去头屑，美甲，创面愈合等。在上述这些用途中，本发明用来促进胶原蛋白生成的组合物为抗衰老，滋润皮肤，抗痤疮，抗皱，抗松垂，抗晦暗，生发，去头屑，美甲，创面愈合等而作为外用制剂是有利的。特别是，本发明的促进胶原蛋白生成的组合物有效用作抗皱目的的各种外用制剂。
当本发明的促进胶原蛋白生成的组合物施用在皮肤上时，表示出优秀的促进胶原蛋白生成的作用。因此，，本发明提供了嘌呤核酸相关物质用于制备促进胶原蛋白生成的组合物的应用，以及嘌呤核酸相关物质和嘧啶核酸相关物质用于制备促进胶原蛋白生成的组合物的应用。
(II)促进胶原蛋白生成的方法
本发明也提供了一种促进胶原蛋白生成的方法。通过在皮肤上施用嘌呤核酸相关物质来执行本方法。
在本发明方法中，通过在皮肤上施用嘧啶核酸相关物质和嘌呤核酸相关物质，促进胶原蛋白生成的作用变得更突出了。
根据本发明的方法，在皮肤上施用这些物质可以通过涂抹，喷涂或黏贴(I)中所述的促进胶原蛋白生成的组合物来完成。
在本发明的方法中，在皮肤或类似的结构上单独施用嘌呤核酸相关物质或组合施用嘌呤核酸相关物质和嘧啶核酸相关物质的频率没有限制，而且它们的施用量也没有限制。例如，根据施用对象的年龄，性别，使用意图，皮肤受影响部分的状况等在皮肤上每天1-5或6次施用合适量的一种或两种上述物质。更具体而言，当利用上面(I)中所述的促进胶原蛋白生成的组合物来执行本发明的方法时，可以适当地调节单剂量，使得在皮肤及其类似结构上施用的组合物的量范围介于0.5-10mg/cm2。
实施例
通过参考实施例和实验实施例，进一步详细地的介绍本发明。然而，本发明的范围不仅限于这些实施例的范围。在下列的实验实施例中，除了另外说明，“W/V”指的是每100ml中的重量(g)。
实施例1洗液(pH6.5)
单磷酸腺苷二钠盐                            3.0(％重量)
单磷酸尿苷二钠                              0.1
聚氧乙烯(E.0.60)硬化蓖麻油                  0.7
乙醇                                        5.0
丙三醇                                      2.0
防腐剂                                      0.2
香料                                        适量
pH调节物                                    适量
纯化水                                      余量
总量                                        100.0％重量
根据上述的配方，按常规的方法制备洗液。
实施例2乳液(pH6.5)
单磷酸腺苷二钠盐                            1.5(％重量)
单磷酸尿苷二钠                              0.01
羧基乙烯基聚合物                            0.3
单肉豆蔻酸十甘油酯                          2.0
鲨烯                                        5.0
乙醇                                        1.0
丙三醇                                      6.0
防腐剂                                      0.2
pH调节物                                    适量
纯化水                                      余量
总量                                        100.0％重量
根据上述的配方，按常规的方法制备乳液。
实施例3生发剂
单磷酸腺苷二钠盐                            10.0(％重量)
单磷酸尿苷二钠                              1.0
水杨酸                                      0.1
乙醇                                        20.0
丙三醇                                      2.0
防腐剂                                      0.2
香料                                        适量
pH调节物                                    余量
总量                                        100.0％重量
根据上述的配方，按常规的方法制备生发剂。
实施例4乳液(pH6.5)
单磷酸腺苷二钠盐                            4.0(％重量)
单磷酸尿苷二钠                              1.0
羧基乙烯基聚合物                                    0.3
单肉豆蔻酸十甘油酯                                  2.0
鲨烯                                            5.0
乙醇                                            1.0
丙三醇                                          6.0
防腐剂                                          0.2
pH调节物                                        适量
纯化水                                          余量
总量                                            100.0％重量
根据上述的配方，按常规的方法制备乳液。
实验实施例1：评估单磷酸腺苷二钠盐对培养的人皮肤成纤维细胞中胶原蛋白生成的促进作用
原代培养的人皮肤成纤维细胞(由Kurabo Industries有限公司制造)培养在10cm的培养皿中，生长至汇合前期时，收集培养的细胞，冷冻保存。利用这些冷冻保存的细胞，评估单磷酸腺苷二钠盐(后文称作“AMP2Na”)对胶原蛋白生成的促进作用。在下面的方法中，AMP2Na的比例是根据AMP的浓度而定的。
评估方法
1)冷冻的细胞溶解在含有LSGS(低血清生长添加物)的液体培养基106S(由Kurabo Industries有限公司制造)中，将细胞浓度和培养基数量调整到30000个细胞/100μl。将这样获得的100μl含细胞的液体倒入测试板的每个孔中。
2)利用灭菌的磷酸缓冲液制备不同浓度的AMP2Na溶液，然后用过滤器过滤，紧接着灭菌。将得到的溶液加入液体培养基106S(由Kurabo Industries有限公司制造)中，制备不同浓度(0-1×10-5W/V％)的含AMP2Na的培养基。
3)将细胞注射进测试板小孔24小时后，确认人成纤维细胞已经黏附到孔上，并且从每个孔中取出培养基。随后，将2)中制备的含AMP2Na的不同浓度的培养基(200μl)中的一种加入每个孔中。将混合物在37℃，5％的CO2条件下培养2天。
4)培养2天后，收集每个孔中的上清，根据培养基上清中的胶原蛋白数量，利用I型前胶原蛋白羧基末段肽EIA试剂盒(Takara生物公司制造)检测I型前胶原蛋白羧基末段肽(PICP)的数量。
结果
结果如图1所示。如图1所看到的那样，和培养在不含AMP培养基的细胞相比，培养在含从1×10-8-1×10-5W/V％不同浓度的AMP2Na培养基的细胞中的PICP数量是增加的。具体而言，当培养基中AMP2Na的浓度是1×10-5W/V％时，其中培养的细胞中的PICP的数量是不含AMP培养基中细胞的大约1.4倍。
实验实施例2评估组合使用单磷酸腺苷二钠盐和单磷酸尿苷二钠对培养的人皮肤成纤维细胞中胶原蛋白生成的促进作用
对AMP2Na和单磷酸尿苷二钠(后文称作‘UMP2Na’)组合使用对胶原蛋白生成的促进作用进行了评估。更具体而言，根据表1所示的配方，制备含AMP2Na和UMP2Na的培养基(实验培养基1-4)。除了使用这些培养基外，培养的人皮肤胶原蛋白细胞对胶原蛋白生成的促进作用的评估程序和实验实施例1中所介绍的一样。在表1中，AMP2Na和UMP2Na的比例分别根据AMP2Na和UMP2Na的浓度而定。
表1
         比例(W/V％)
  AMP2Na   UMP2Na
 实验培养基1   1×10-6   1×10-8
 实验培养基2   1×10-6   0
 实验培养基3   0   1×10-8
 实验培养基4   0   0
结果如图2所示。从图2可以看出，AMP2Na具有促进胶原蛋白生成的作用，而尽管UMP2Na本身对胶原蛋白生成没有促进作用，却能剧烈的增强AMP2Na对胶原蛋白的促进作用。
工业实用性
本发明的组合物能促进胶原蛋白的生成，其中包含的作为活性成分的嘌呤核酸相关物质对胶原蛋白生成表现出了优良的促进作用。具体而言，当同时存在嘧啶核酸相关物质时，嘌呤核酸相关物质对胶原蛋白生成的这种促进作用得到了增强。因此，本发明的促进胶原蛋白生成的组合物能用作胶原蛋白生成的促进剂，促进胶原蛋白的生成，特别是，能有效地促进真皮中胶原蛋白的生成。
进一步说，本发明提供了一种外用的试剂，它具有优良的促进胶原蛋白生成的作用，并且有效用在抗衰老，滋润皮肤，抗痤疮，抗皱，抗松垂，抗晦暗，生发，去头屑，美甲，创面愈合等方面。

Claims (21)

1.一种促进胶原蛋白生成的组合物，包括嘌呤核酸相关物质。
2.根据权利要求1所述的促进胶原蛋白生成的组合物，进一步包括嘧啶核酸相关物质。
3.根据权利要求1所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自腺嘌呤，腺苷，磷酸腺苷，磷酸腺苷代谢物及其盐类中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自单磷酸腺苷及其盐类中的至少一种。
5.根据权利要求1所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自5’单磷酸腺苷及其盐类中的至少一种。
6.根据权利要求2所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘧啶核酸相关物质选自尿嘧啶，尿苷，磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
7.根据权利要求2所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘧啶核酸相关物质选自单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
8.根据权利要求2所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘧啶核酸相关物质选自5’单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
9.根据权利要求2所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自腺嘌呤，腺苷，磷酸腺苷，磷酸腺苷代谢物及其盐类中的至少一种，而其中的嘧啶核酸相关物质选自尿嘧啶，尿苷，磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
10.根据权利要求2所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自单磷酸腺苷及其盐类，而其中的嘧啶核酸相关物质选自单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
11.根据权利要求2所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中的嘌呤核酸相关物质选自5’单磷酸腺苷及其盐类，其中的嘧啶核酸相关物质选自5’单磷酸尿苷及其盐类中的至少一种。
12.根据权利要求2所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中组合物以每重量份的嘌呤核酸相关物质含有0.001-100重量份的嘧啶核酸相关物质。
13.根据权利要求1所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中基于组合物的总量，组合物含有0.01-10％重量的嘌呤核酸相关物质。
14.根据权利要求2所述的促进胶原蛋白生成的组合物，其中基于组合物的总量，组合物含有0.0001-10％重量的嘧啶核酸相关物质。
15.根据权利要求1所述的促进胶原蛋白生产的组合物，能用于化妆品、外用的药物或准药物上。
16.促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上施用嘌呤核酸相关物质。
17.根据权利要求16所述的促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上组合施用嘌呤核酸相关物质和嘧啶核酸相关物质。
18.根据权利要求16所述的促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上施用权利要求1所述的促进胶原蛋白生成的组合物。
19.根据权利要求17所述的促进胶原蛋白生成的方法，包括在皮肤上施用权利要求2所述的促进胶原蛋白生成的组合物。
20.嘌呤核酸相关物质在制备促进胶原蛋白生成的组合物中的应用。
21.嘌呤核酸相关物质和嘧啶核酸相关物质在制备促进胶原蛋白生成的组合物中的应用。
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