CN1857364A

CN1857364A - 一种含忍冬藤提取物的药物及制备方法

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Publication number: CN1857364A
Application number: CNA2006100461982A
Authority: CN
Inventors: 王学东; 吕志会; 曹翠香; 李志强; 马占之
Original assignee: SHUANGDING PHARMACEUTICAL CO Ltd SHENYANG
Current assignee: SHUANGDING PHARMACEUTICAL CO Ltd SHENYANG
Priority date: 2006-03-29
Filing date: 2006-03-29
Publication date: 2006-11-08

Abstract

一种含忍冬藤提取物的药物的制备方法是：1.取1000g忍冬藤药材，第一次加10－12倍量水煎煮1－2小时，第二次加6－8倍量水煎煮1小时，合并滤液，过滤，浓缩至每1ml相当于原生药量0.5－1.0g的提取液备用。2.纯化：取上述制备好的忍冬藤提取液用离心机高速离心，取离心液用聚酰胺柱吸附，先用水洗至流出液无色，再用3－6倍柱体积量50％－80％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5－1.0g，用截留分子量1万－3万的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。本发明的含忍冬藤提取物的药物在治疗流行性温病发热、腮腺炎、小儿感冒、发热等疾病疗效确切，见效快，有效成份含量高，价格低，稳定性好，生产中对环境无污染。

Description

一种含忍冬藤提取物的药物及制备方法

(一)技术领域

本发明涉及一种中药，特别是涉及一种具有清热解毒，祛风通络作用，可用于治疗流行性小儿感冒、腮腺炎和内热外感引起的、发热及伴有风疹、疱疹等疾病的中药。

(二)背景技术

根据部颁药品标准WS₃-B-3843-98中给出的制备方法制备而成的抗腮腺炎注射液，是一种具有清热解毒，通络作用，用于治疗流行性腮腺炎，内热外感引起的小儿感冒、发热及伴有风疹、疱疹的小儿感冒等疾病的中药肌肉注射剂，经临床应用，疗效确切，是临床和家庭治疗此类病症的常用药物。以下是药品标准中给出的配方和工艺及简要说明：

制法：取忍冬藤1000g，加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次各半小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏状，加乙醇使含醇量为70％，静置72小时，滤过，回收乙醇，加注射用水稀释至约970ml，冷藏24小时，滤过，加入10ml苯甲醇和10ml聚山梨酯80，加注射用水使成1000ml，过滤，灌封，灭菌，即得。

功能主治：清热解毒，通络。用于流行性腮腺炎，内热外感引起的小儿感冒、发热及伴有风疹、疱疹的小儿感冒。

由于受原有注射剂制备技术限制及中药成份复杂性的影响，中药肌肉注射往往容易产生急性过敏反应或不良反应，同时还存在操作难度大，患者痛苦大，不宜患者使用等缺点。

(三)发明内容

本发明的目的，在于补充现有用于治疗流行性腮腺炎，内热外感引起的小儿感冒、发热及伴有风疹、疱疹的小儿感冒等疾病的口服药物和注射制剂之不足，提供一种快速显效，有效成份含量高，使用剂量准确，价格低廉，且在生产中无污染，并便于运输和携带的静脉注射用抗腮腺炎和流行性感冒的含忍冬藤提取物的药物及制备方法。

剂型包括注射制剂、粉针剂、水针剂、输液和注射用冻干剂。

采用的技术方案是：

一、忍冬藤提取物的制备方法是：

1、取1000g忍冬藤药材，第一次加10-12倍量水煎煮1-2小时，第二次加6-8倍量水煎煮1小时，合并滤液，过滤，浓缩至每1ml相当于原生药量0.5-1.0g的提取液备用。

2、纯化：取上述制备好的忍冬藤提取液用离心机高速离心，取离心液用聚酰胺柱吸附，先用水洗至流出液无色，再用3-6倍柱体积量50％-80％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5-1.0g，用截留分子量1万-3万的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

忍冬藤提取物还可以采用下述方法制备：

1、取忍冬藤药材，粉碎，加6-8倍量30％-90％乙醇，20KHz频率超声提取二次，第一次30min，第二次20min，提取液过滤，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5-1.0g的提取药液备用。

2、取忍冬藤药材1000g，粉碎，加6-8倍量30％-90％乙醇回流提取三次，每次1小时，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5-1.0g的提取药液备用。

3、取忍冬藤药材1000g，粉碎成粗粉，用30％-90％乙醇渗漉提取，收集6-8倍药材量的渗漉液，减压回收乙醇，浓缩至每1ml相当于原生药0.5-1.0g的提取药液备用。

上述的忍冬藤提取的纯化采用下述方法：

1、取忍冬藤提取药液高速离心，取离心液上D101大孔吸附树脂吸附，用3-6倍柱体积的水洗，再用3-6倍柱体积量10％-50％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5-1.0g，用截留分子量1万-3万的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

2、取忍冬藤提取药液，在搅拌下加10-30％氧化钙乳调pH10-11，放置12-24小时，离心，离心沉淀物悬浮于乙醇中使含醇量达80-90％，加10-30％硫酸调节pH值至3-5，充分搅拌使反应完全，离心，离心液加10-30％氢氧化钠溶液调pH值至6-8，抽滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5-1.0g，置5℃以下放置12小时以上，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

3、取忍冬藤提取药液加乙醇，搅拌均匀，使含醇量达60％，冷藏，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至1ml含生药0.5-1.0g，加乙醇搅拌均匀使含醇量达70-90％，冷藏，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml含生药0.5-1.0g，用截留分子量1万-3万的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

4、药液用经水饱和处理的正丁醇、醋酸乙酯等萃取，回收有机溶媒，加注射用水稀释至每1ml含生药0.5-1.0g，过滤，用截留分子量1万-3万的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

以上所述的从忍冬藤中提取抗茵、抗病毒活性部位的方法，提取工艺得到的忍冬藤抗菌、抗病菌毒的活性部位中以绿原酸、异绿原酸和木犀草素苷类化合物作为指标成份，其所测成份含量为25％-80％，该活性部位可制成忍冬藤静脉用注射制剂和口服制剂。

二、忍冬藤提取物制剂

1、忍冬藤提取物粉针剂制剂：取上述忍冬藤提取液纯化物5.0-50.0g，加入药用辅料(选择葡聚糖、葡萄糖、右旋果糖、甘露醇、聚乙二醇一种或几种)5.0-100.0g，喷雾干燥，制成25-200支。

2、忍冬藤提取物注射液：是由上述忍冬藤提取液纯化物5.0-50.0g，加注射用水至适量，分装，即得。

3、含忍冬藤提取物的药物冻干粉针剂：取忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，加适量注射用水溶解，再加重量百分比0.1-0.2％的活性炭煮沸15分钟，过滤，加入药用辅料(选择葡聚糖、葡萄糖、右旋果糖、甘露醇、聚乙二醇一种或几种)5.0-100.0g，加注射用水适量，调节pH值至6.0-8.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

4、含忍冬藤药物注射液，取上述忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，加注射用水溶解，加0.1％-0.2％活性炭煮沸15分钟，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-8.0，微孔滤膜过滤，灌装，即得。

5、含忍冬藤药物的大容量静脉输液法，是取忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，加注射用水溶解，加0.1％活性炭煮沸15分钟，过滤，加入葡萄糖和氯化钠，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-8.0，1万-3万微孔滤膜过滤，加注射用水稀释并加入葡萄糖或氯化钠，含量测定后，分装灭菌制成大容量注射剂，每瓶100ml-300ml，含忍冬藤提取物50mg-1500mg/瓶。

6、含忍冬藤药物的口服固体制剂，取上述忍冬藤纯化提取物，加淀粉、可压性淀粉、滑石粉、硬脂酸镁、糊精、糖粉、乳糖、羧甲基淀粉钠和低取代羟丙基纤维素中的一种或几种，制成片剂，或胶囊剂，或颗粒剂。

7、含忍冬藤药物冻干粉针剂，是忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，药用辅料适量，制成25-500支；注射液是忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，制成500ml-3000ml，或25-200支；大容量静脉输液是忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，制成每瓶100ml-500ml，含忍冬藤提取物50mg-1500mg/瓶；口服固体制剂是忍冬藤提取物50.0-300g，制成胶囊剂1000粒，或片剂1000片，或颗粒剂1000g。

本发明的含忍冬藤提取物的药物在治疗流行性温病发热、腮腺炎、小儿感冒、发热等疾病疗效确切，见效快，有效成份含量高，价格低，稳定性好，生产中对环境无污染。

一、稳定性比较

将本发明忍冬藤注射液、忍冬藤输液和忍冬藤冻干粉针剂与市售抗腮腺炎注射液分别置常温下进行长期稳定性考察。本发明的忍冬藤注射液、输液和冻干粉针剂稳定性更好，放置24个月后，制剂中的总黄酮和绿原酸含量变化较小。说明本发明的制备方法合理、科学，制得的产品稳定性较好。

二、药理研究

1、忍冬藤注射液的体外抑菌作用

(1)试管法

取18h培养的各菌株营养肉汤培养物，用营养肉汤作10^-5稀释用于实验。取灭菌试管11支，于第一管加入营养肉汤液体培养基1.6ml，其余每管1ml，取忍冬藤注射液药液(65mg/ml)0.4ml加入第一管中，混匀后取1ml至第二管，依次稀释，第十管吸出1ml弃去，第十一管不加药液作为对照。每管加入菌液0.1ml，37℃培养20h，取出观察MIC，结果见表1。(n＝2)

表1：忍冬藤注射液的体外抗菌活性(试管法)MIC

菌株	忍冬藤注射液(mg/ml)	忍冬藤注射液(对照)(mg/ml)	环丙沙星(μg/ml)
菌株	忍冬藤注射液(mg/ml)	忍冬藤注射液(对照)(mg/ml)	环丙沙星(μg/ml)	肺炎双球菌洋葱假单孢杆菌人葡萄球菌金黄色葡萄球菌肺炎克雷百氏菌大肠杆菌乙型链球菌金黄色葡萄球菌(标准)大肠杆菌(标准)哈夫利亚杆菌不动杆菌产气杆菌表皮葡萄球菌	0.6093750.406251.0156250.6093751.218750.406250.6093750.6093751.218750.406250.406250.406250.40625	3.256.51.6250.406253.250.406253.256.50.406253.253.256.56.5	0.750.52.00.751.53.01.52.54.01.52.06.02.0

变形杆菌中葡萄球菌板畸杆菌溶葡萄球菌阴沟杆菌产碱杆菌奇变杆菌中葡萄球菌2金黄色葡萄球菌2金黄色葡萄球菌3阴沟杆菌2大肠杆菌3异型枸橼酸假单孢杆菌科代葡萄球菌

0.6093750.6093750.6093750.6093750.406250.406250.6093750.6093750.406250.3006250.81250.6093751.218750.300625

6.51.6256.56.56.53.253.253.253.251.6253.256.53.250.40625

3.03.04.01.51.53.03.03.01.52.02.04.04.02.0

实验结果所示：忍冬藤注射液具有较好的体外抑菌作用。

(2)平板法

在系列含药平皿上用6mm无菌钢圈打3个孔，每孔注入含菌量约为10^-5/ml(约相当于10^-5CFU/ml)0.1ml，37℃培养18h，以无菌生长平皿培养基中所含药物的最低浓度即为忍冬藤注射液对该菌的最低抑菌浓度(MIC)结果见表2。(n＝2)

表2：忍冬藤注射液的体外抗菌活性(平板法)

菌株	忍冬藤注射液(mg/ml)	忍冬藤注射液(对照)(mg/ml)	环丙沙星(μg/ml)
菌株	忍冬藤注射液(mg/ml)	忍冬藤注射液(对照)(mg/ml)	环丙沙星(μg/ml)	肺炎双球菌洋葱假单孢杆菌人葡萄球菌金黄色葡萄球菌肺炎克雷百氏菌大肠杆菌乙型链球菌金黄色葡萄球菌(标准)大肠杆菌(标准)	0.6093750.6003752.43751.218754.8751.218751.218753.256.5	6.56.53.251.6251.6250.406256.56.53.25	0.500.252.01.52.00.751.01.02.0

哈夫利亚杆菌不动杆菌产气杆菌表皮葡萄球菌变形杆菌中葡萄球菌板畸杆菌溶葡萄球菌阴沟杆菌产碱杆菌奇变杆菌科代葡萄球菌金黄色葡萄球菌2金黄色葡萄球菌3异型枸橼酸假单孢杆菌大肠杆菌3中葡萄球菌2阴沟杆菌2

1.218751.218751.6252.43753.252.43751.218752.43750.6093752.43750.6093751.218751.6252.43750.6093752.43752.43750.8125

3.253.256.56.56.53.253.256.56.56.56.51.6253.253.256.53.253.256.5

2.02.02.01.01.01.00.50.751.51.00.750.51.00.752.01.01.02.0

实验结果所示：忍冬藤注射液对肺炎双球菌、洋葱假单孢杆菌、人葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乙型链球菌、哈夫利亚杆菌、不动杆菌、产气杆菌、表皮葡萄球菌、中葡萄球菌、板畸杆菌、溶葡萄球菌、阴沟杆菌、产碱杆菌、奇变杆菌均具有较好的抑菌作用。MIC在0.609375mg/ml-6.5mg/ml之间，提示：忍冬藤注射液具有较好的体外抑菌作用。

2、忍冬藤注射液的体内抗菌作用

(1)对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用

取18-22g ICR种小鼠120只，随机分6组，每组20只，♀♂各半。正常对照组：等量NS；模型组：等量NS；双黄连组：20ml/kg；忍冬藤注射液(对照)325mg/kg；忍冬藤注射液I组：32.5mg/kg；忍冬藤注射液II组：65mg/kg；忍冬藤注射液III组：130mg/kg，以上各组小鼠均静脉注射给药(除第4组肌注外)，给药容量20ml/kg，1次/天×5天，第3天给药1小时后，腹腔注射金黄色葡萄球菌培养液0.5ml/只鼠(除正常对照组外)，继续给药2天，观察各细动物7日内存活天数，死亡数，结果见表3。

表3：忍冬藤注射液对金黄色葡萄球菌感染小鼠死亡的保护作用

组别	动物数(只)mg/kg)	剂量(只)	死亡数(％)	存活率( x±s)	存活天数
组别	动物数(只)mg/kg)	剂量(只)	死亡数(％)	存活率( x±s)	存活天数	正常对照组模型组双黄连组忍冬藤注射液(对照)忍冬藤注射液I组忍冬藤注射液II组忍冬藤注射液III组	20202020202020	--20ml32532.565130	01811121099	100.0^*10.045.0^40.050.0^55.0^55.0^*	7.00±0^*2.00±1.793.95±2.82^3.95±2.58^4.30±2.76^4.65±2.65^4.70±2.61^

与模型组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

实验结果所示：忍冬藤注射液32.5mg/kg、65mg/kg和130mg/kg剂量组可明显减少感染小鼠死亡数，并可延长感染小鼠存活天数，与模型组比较具有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。提示：忍冬藤注射液对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有明显保护作用。

(2)忍冬藤注射液的体内抗病毒作用

[1]忍冬藤注射液对甲型流感病毒感染小鼠的保护作用

取ICR小鼠120只，体重13-16g，雌雄各半，随机分6组，每组20只正常对照组：等量NS；模型对照组：等量NS；利巴韦林组：0.05g/kg；忍冬藤注射液325mg/kg；忍冬藤注射液I组：32.5mg/kg；忍冬藤注射液II组：65mg/kg；忍冬藤注射液III组：130mg/kg。以上各组小鼠均腹腔注射给药(除第4组肌肉注射外)，给药容量10ml/kg，1次/天×5天，于给药第1天各组小鼠(除正常对照组外)，在乙醚浅麻醉下，以血凝滴度640以上的尿囊液，给小鼠滴鼻感染，每鼠30ul(20个LD₅₀致死量)，观察动物感染后发病及死亡情况，记录14天内死亡数，结果见表4。

表4：忍冬藤注射液对甲型流感病毒感染小鼠死亡的保护作用

组别	动物数(只)	剂量(mg/kg)	死亡数(只)	死亡率(％)	保护率(％)	存活天数( x±s)
组别	动物数(只)	剂量(mg/kg)	死亡数(只)	死亡率(％)	保护率(％)	存活天数( x±s)	正常对照组病毒对照组利巴韦林组忍冬藤注射液(对照)忍冬藤注射液I组忍冬藤注射液II组忍冬藤注射液III组	20202020202020	--5032532.565130	01781112109	085.040.055.060.050.045.0	100.0^15.060.0^45.040.050.0^55.0^*	14±06.23±3.0110.40±3.88^*10.0±3.91^9.40±3.95^10.15±4.08^10.50±3.79^**

与病毒对照组比较^*P＜0.05 ^**P＜0.01

实验结果所示：忍冬藤注射液32.5mg/kg、65mg/kg和130mg/kg剂量组均可明显延长甲型流感病毒感染小鼠的存活天数，65mg/kg和130mg/kg剂量组并可显著降低甲型流感病毒感染小鼠死亡数，与模型对照组比较具显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)提示：忍冬藤注射液对甲型流感病毒感染小鼠具有明显的保护作用。

[2]忍冬藤注射液对甲型流感病毒感染小鼠肺指数的影响

取ICR小鼠72只，体重13-16g，♂♀各半。随机分6组，每组12只。正常对照组：等量NS；模型对照组：等量NS；利巴韦林组：50mg/kg；忍冬藤注射液(对照)325mg/kg；忍冬藤注射液I组：32.5mg/kg；忍冬藤注射液II组：65mg/kg；忍冬藤注射液III组：130mg/kg。以上各组小鼠均腹腔注射给药(除第4组肌肉注射外)，给药容量10ml/kg 1次/天×5天，于给药第1天各组小鼠(除正常对照组外)，在乙醚浅麻醉下以病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每鼠30ul(20个LD₅₀致死量)。实验前禁食不禁水，实验当日各组小鼠称重，脱颈处死，解剖，观察肺部病变，取全肺称重，计算各鼠肺指数值，肺指数抑制率，比较各组间差异，并随机抽取10只鼠肺用10％甲醛固定，作病理组织学检查，结果见表5。

表5：忍冬藤注射液对甲型流感病毒感染小鼠肺指数的影响( x±s)

组别	剂量(mg/kg)	动物数(只)	肺指数值(g/10g)	肺指数抑制率(％)
组别	剂量(mg/kg)	动物数(只)	肺指数值(g/10g)	肺指数抑制率(％)	正常对照组病毒对照组利巴韦林组忍冬藤注射液(对照)忍冬藤注射液I组忍冬藤注射液II组忍冬藤注射液III组	等量NS等量NS5032532.565130	12121212121212	0.0946±0.0118^0.1824±0.02950.1226±0.0364^0.1436±0.07350.1563±0.04050.1448±0.0378^0.1360±0.0292^*	32.821.214.320.630.4

与病毒对照组比较^*P＜0.05 ^**P＜0.01

甲型流感病毒感染成功复制小鼠肺炎性病变。主要表现为支气管肺炎、间质性肺炎和肺脓肿。忍冬藤注射液低、中、高剂量肺部病变明显减轻。提示此种忍冬藤注射液对甲型流感病毒所致肺部感染疾病有一定治疗作用。

3、忍冬藤注射液对二甲苯所致的耳肿胀的抗炎作用

昆明种雄性小鼠50只，体重25-30g，按体重随机分为5组，每组10只。(1)模型对照组：给予等体积的生理盐水；(2)新鱼腥草素钠注射液组：20ml/kg(原液稀释10倍)；(3)忍冬藤注射液I组：32.5mg/kg；(4)忍冬藤注射液II组：65mg/kg；(5)忍冬藤注射液III组：130mg/kg；(6)忍冬藤注射液组(对照)：325mg/kg，给药体积20ml/kg，忍冬藤注射液各剂量组当天尾静脉注射(除第6组肌肉注射外)给药30min后，于小鼠右耳两面涂二甲苯0.05ml/只致肿，左耳不涂为正常耳。45min后脱颈椎处死小鼠，用9mm打孔分别在相同部位打下圆片，电子天平称重，每鼠右耳重量-左耳重量＝肿胀度。结果见表6。

表6忍冬藤注射液对二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎作用( x±s)

组别	动物数(只)	剂量(mg/kg)	耳廓肿胀度(mg)	肿胀抑制率(％)
组别	动物数(只)	剂量(mg/kg)	耳廓肿胀度(mg)	肿胀抑制率(％)	模型对照组新鱼腥草素钠组忍冬藤注射液I组忍冬藤注射液II组忍冬藤注射液III组忍冬藤注射液组(对照)	101010101010	--20ml32.565130325	0.0171±0.00490.0104±0.0050^*0.0139±0.00530.0118±0.0047^0.0110±0.0034^0.0112±0.0033^	----39.1818.7130.9935.6734.50

与模型对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

结果表明：忍冬藤注射液65mg/kg、130mg/kg剂量组可对抗二甲苯所致小鼠耳肿胀，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，提示忍冬藤注射液具有一定的抗炎作用。

4、忍冬藤注射液对小鼠化学致痛的影响

取昆明种小鼠50只，♀、♂各半，18-22g，随机分5组：(1)模型对照组：给予等容积生理盐水；(2)度冷丁组：4mg/kg，(3)忍冬藤注射液I组：32.5mg/kg；(4)忍冬藤注射液II组：65mg/kg；(5)忍冬藤注射液III组：130mg/kg；(6)忍冬藤对照组：325mg/kg，给药容积均为20ml.kg^-1，静脉注射给药(除第6组肌肉注射外)30min后，各鼠均腹腔注射0.6％醋酸溶液0.1ml/10g，观察注射后15min内出现的扭体反应次数(腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高)，并计算镇痛百分率。结果见表7。

(四)具体实施方式

实施例一

忍冬藤提取物的制备方法，包括忍冬藤药液提取和纯化。忍冬藤药液提取可采用以下方法：

方法一：取忍冬藤药材1000g，第一次加12倍量水煎煮2小时，第二次加8倍量水煎煮1小时，合并煎煮液，过滤，浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液。

方法二：取忍冬藤药材1000g，粉碎过30目筛，加8倍量60％乙醇，20kHz频率超声提取二次，第一次30min，第二次20min，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液。

方法三：取忍冬藤药材1000g，粉碎，加8倍量60％乙醇回流提取三次，每次1小时，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液。

方法四：取忍冬藤药材1000g，粉碎，用80％乙醇掺施，收集8倍量渗施液，渗施液减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液。

对上述忍冬藤药材提取液纯化可采用下述方法：

方法一：取忍冬藤提取液高速离心，取离心液用聚酰胺柱吸附，先用水洗至流出液无色，再用6倍柱体积量60％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5g，用截留分子量20000的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

方法二：取忍冬藤提取液高速离心，取离心液上D₁₀₁大孔吸附树脂吸附，用4倍柱体积的水洗，再用6倍柱体积量30％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5g，用截留分子量20000的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

方法三：取忍冬藤提取液在搅拌下加10％氧化钙乳调pH10，放置12小时，离心，离心沉淀物悬浮于乙醇中使含醇量达80％，加酸调节pH值至3-5，充分搅拌使反应完全，离心，离心液加30％氢氧化钠溶液至pH至6-8，抽滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每1ml相当于原生药1g，置5℃以下放置12小时以上，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

方法四：取忍冬藤提取液加乙醇，搅拌均匀，使含醇量达60％，冷藏，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩使含生药量为1g/ml，加乙醇搅拌均匀使含醇量达80％，冷藏，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水稀释每1ml含生药0.5g，用截留分子量20000的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

方法五：浓缩液用经水饱和处理的正丁醇、醋酸乙酯萃取，回收有机溶媒，干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

实施例二

忍冬藤注射液制备：取上述忍冬藤纯化提取物30g，加注射用水溶解，加0.2％活性炭煮沸15分钟，过滤，加注射用水至规定量1000ml，调节pH至6.0-8.0，1万-3万微孔滤膜过滤，灌装，即得。规格：5ml，10ml，20ml，40ml/支。

实施例三

忍冬藤粉针剂制备：取忍冬藤纯化提取物50g，甘露醇44g。提取物加注射用水溶解，加0.1％活性炭煮沸15分钟，过滤，加入甘露醇，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-8.0，1万-3万微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。规格：10-2000mg/支。

实施例四

忍冬藤粉针剂制备：忍冬藤纯化提取物50g，葡萄糖20g，甘露醇25g。

取提取物加注射用水溶解，加0.2％活性炭煮沸15分钟，过滤，加入葡萄糖、甘露醇，加注射用水至规定量，调节pH 6.0-8.0，1万-3万微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。规格：10mg-2000mg/支。

实施例五

忍冬藤粉针剂制备：忍冬藤纯化提取物30g，甘露醇28g，右旋果糖20g，取上述提取物加注射用水溶解，加0.1％活性炭煮沸15分钟，过滤，加入甘露醇和右旋果糖，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，1万-3万微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

实施例六

忍冬藤注射液制备：取上述忍冬藤纯化提取物40g，加注射用水溶解，加0.2％活性炭煮沸15分钟，过滤，加注射用水至规定量1000ml，调节pH值至6.0-8.0，1万-3万微孔滤膜过滤，灌装，即得。

实施例七

忍冬藤大容量静脉输液的制备：忍冬藤提取物50g、葡萄糖7g、氯化钠6g。制备方法：取上述提取物加注射用水溶解，加0.1％活性炭煮沸15分钟，过滤，加入葡萄糖和氯化钠，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-8.0，1万-3万微孔滤膜过滤，混合均匀加注射用水稀释并加入葡萄糖或氯化钠，含量测定后，分装灭菌制成大容量注射剂，每瓶100ml-300ml，含忍冬藤提取物20mg-1500mg/瓶。

Claims

1、一种含忍冬藤提取物的药物的制备方法，包括忍冬藤药液提取和纯化，其特征在于所述的忍冬藤药液提取是取1000g忍冬藤药材，煎煮二次，第一次加10-12倍量水，煎煮1-2小时，第二次加6-8倍量水，煎煮1小时，合并滤液，过滤，浓缩至1ml相当于原生药量0.5-0.1g的提取液备用；或取忍冬藤药材，粉碎，加6-8倍量30％-90％乙醇，20KHz频率超声提取二次，第一次30min，第二次20min，提取液过滤，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5-1.0g的提取药液备用；或取忍冬藤药材1000g，粉碎，加6-8倍量30％-90％乙醇回流提取三次，每次1小时，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5-1.0g的提取药液备用；或取忍冬藤药材1000g，粉碎成粗粉，用30％-90％乙醇渗漉提取，收集6-8倍量渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5-1.0g的提取液备用。所述的纯化工艺是：将上述制备的忍冬藤药液用离心机高速离心，取离心液用聚酰胺柱吸附，先用水洗全流出液无色，再用3-6倍柱体积量50％-80％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5-1.0g，用截留分子量1万-3万的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物；或是将上述的忍冬藤提取药液高速离心，取离心液上D101大孔吸附树脂吸附，用3-6倍柱体积的水洗，再用3-6倍柱体积量10％-50％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5-1.0g，用截留分子量1万-3万的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物；或是将上述忍冬藤提取药液在搅拌下加10％-30％氧化钙乳调pH10-11，放置12-24小时，离心，离心沉淀物悬浮于乙醇中使含醇量达80％-90％，加10％-30％硫酸调节pH值至3-5，充分搅拌使反应完全，离心，离心液加10-30％氢氧化钠溶液调pH值至6-8，抽滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5-1.0g，置5℃以下放置12小时以上，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物；或是将上述的忍冬藤提取药液加乙醇，搅拌均匀，使含醇量达60％，冷藏，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩，使生药含量为0.5-1.0g/ml，加乙醇搅拌均匀使含醇量达70％-90％，冷藏，过滤，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5-1.0g，用截留分子量1万-3万的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物；或是将上述忍冬藤提取药液用经水饱和处理的正丁醇、醋酸乙酯等萃取，回收有机溶媒，加注射用水稀释至每1ml含生药0.5-1.0g，过滤，用截留分子量1万-3万的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到忍冬藤纯化提取物。

2、一种含忍冬藤药物冻干粉针剂，其特征是：忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，药用辅料适量，制成25-500支；注射液是忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，制成500ml-3000ml，或25-200支；大容量静脉输液是忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，制成每瓶100ml-500ml，含忍冬藤提取物50mg-1500mg/瓶；口服固体制剂是忍冬藤提取物50.0-300g，制成胶囊剂1000粒，或片剂1000片，或颗粒剂1000g。

3、含忍冬藤药物的冻干粉针剂的制备方法，其特征是取忍冬藤提取物5.0-50.0g，加注射用水溶解，加0.1-0.2％活性炭煮沸15分钟，过滤，选择加入药用葡聚糖、葡萄糖、右旋果糖、甘露醇、聚乙二醇辅料5.0-100.0g，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-8.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

4、含忍冬藤药物注射液的制备方法，其特征是：取上述忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，加注射用水溶解，加0.1％-0.2％活性炭煮沸15分钟，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-8.0，微孔滤膜过滤，灌装，即得。

5、含忍冬藤药物的大容量静脉输液的制备方法，其特征是取忍冬藤纯化提取物5.0-50.0g，加注射用水溶解，加0.1％活性炭煮沸15分钟，过滤，加入葡萄糖和氯化钠，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-8.0，1万-3万微孔滤膜过滤，加注射用水稀释并加入葡萄糖或氯化钠，含量测定后，分装灭菌制成大容量注射剂，每瓶100ml-300ml，含忍冬藤提取物50mg-1500mg/瓶。

6、含忍冬藤药物的口服固体制剂的制备方法，其特征是：取上述忍冬藤纯化提取物，加淀粉、可压性淀粉、滑石粉、硬脂酸镁、糊精、糖粉、乳糖、羧甲基淀粉钠和低取代羟丙基纤维素中的一种或几种，制成片剂，或胶囊剂，或颗粒剂。

7、根据权利要求1的制备方法制成的忍冬藤单味药制剂，其特征是一种可用于治疗流行性温病发热、小儿感冒、腮腺炎和内热外感引起的发热及伴有风疹、疱疹等病毒感染性疾病和治疗风湿性关节炎、关节红肿热痛的药物组合物。