CN1843334A - 一种提高脂质体包封率的方法及其制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种提高脂质体包封率的方法。该方法利用柱交换、渗析、离子沉淀等技术实现具有醋酸镁梯度的脂质体。脂质体内水相为醋酸镁溶液，而外水相为另外一种除醋酸镁外的溶液所制备各种脂质体的方法。内水相醋酸镁的浓度应大于0.001mmol/L以用来形成足够的载药动力。该方法能获得较高的包封率，粒径均匀，稳定性高，可经受耐压灭菌。为水中溶解度不高，且通过其他方法无法得到较满意的包封率的药物提供了一种有效的方法。本发明制备的脂质体可得到较高的药物包封率，工艺简单，便于生产和操作，可制成注射、口服、外用等剂型。

Description

一种提高脂质体包封率的方法及其制剂

技术领域：

本发明涉及医药技术领域。确切的说是一种提高脂质体包封率的方法及其制剂。

背景技术：

脂质体作为药物的载体，具有优良的生物相容性，且对组织、细胞具有一定的靶向性，因而能提高药物的治疗指数，降低药物毒副作用。为了实现这些优点，通常是将药物载入脂质体。药物按其解离常数可分为酸性和碱性药物。制备脂质体的常规方法有：薄膜分散法、逆向蒸发法、乙醇注入法等十几种方法。

近年来有人针对于弱碱性药物还发明了pH梯度法和硫酸铵梯度法来提高药物的包封率。但对于有些弱酸性药物的研究几乎很少。由于大多数制备方法都是在使药物成分子型的状态下制备其脂质体，但是多数弱酸性药物在酸性条件下的溶解度不高，采用pH梯度法包封时，药物在外水相中的溶解度过低，脂质体内外水相无法形成足够的药物浓度差，即使采用pH梯度法也很难将药物成功的载入脂质体中。

发明内容：

本发明的目的是提供一种提高脂质体包封率的方法。该方法能获得较高的包封率，粒径均匀，稳定性高，可经受耐压灭菌。

该方法是通过柱交换、透析、离子沉淀等方法制备内水相为醋酸镁，外水相为除醋酸镁外的一种溶液，从而形成脂质体内水相和外水相醋酸镁的浓度梯度，为药物的载入提供动力。

所用的醋酸镁浓度应大于0.001mmol/L以用来形成足够的载药动力。所用外水相为除醋酸镁外的另一种溶液，包括各种缓冲盐在内的与醋酸镁等渗的溶液，以及NaSO₄，NaCl，KCl，葡萄糖溶液，以维持脂质体内外水相的渗透压。所用的实现醋酸镁梯度的手段包括柱交换、透析、离子沉淀等方法，以实现脂质体内外水相介质的不同。所用的交换柱的内填充物包括葡聚糖凝胶、大孔吸附树脂、阳离子交换树脂等。所用的离子沉淀剂为含有可与镁离子形成沉淀的阴离子的溶液。

本法的优点在于醋酸镁为一种强碱弱酸盐，并且镁离子渗透系数较小，不会跨过磷脂双分子层，醋酸分子渗透系数大，可以通过磷脂双分子层，因而，内水相可保持较高的pH值。而外水相可以根据药物的溶解度等性质的要求，更换成任意一种可与内水相等渗的溶液。最终，内水相的镁离子充分保证了浓度梯度的形成，同时，外水相又保证了可达到较高的药物浓度。我们称之为醋酸镁梯度。

附图说明：

图1为按本发明制备的阿魏酸脂质体粒径分布图。

从图1中可以看出阿魏酸脂质体的平均粒径为157nm

具体实施方式：

下列具体的实施方案仅作为本发明的解释，但绝不是对本发明的限制。

实施例1  通过常规方法制得的阿魏酸脂质体

处方：    阿魏酸      10mg

          磷酯        10-500mg

          胆固醇      2-60mg

          水          10-20mL

制法：(1)逆向蒸发法

①将磷脂、胆固醇溶于5ml的氯仿，然后边超声边加入处方量的蒸馏水，涡旋成w/o型乳剂。减压除去氯仿，35℃水化至少1h，得到脂质体混悬液。将得到的脂质体混悬液超声，然后，挤压至少通过0.8μm的混合纤维素膜。

②将阿魏酸加入到制得的脂质体混悬液中，于37℃孵化10min-120min，测得包封率＜1％。

(2)薄膜分散法

①将磷脂、胆固醇、阿魏酸药品溶于适量氯仿和甲醇的混合溶液(5∶1)，35℃减压蒸发除去有机溶剂。

②水化至少1h。测得其包封率几乎为0。

(3)乙醇注入法

①将磷脂、胆固醇、阿魏酸药品溶于2mL乙醇，然后快速注入70℃，磁力搅拌的蒸馏水或缓冲盐溶液中，即得到阿魏酸脂质体。测得其包封率＜8％

(4)乙醚挥发法

①将磷脂、胆固醇、阿魏酸药品溶于2mL乙醚。

②缓慢滴入60℃磁力搅拌下的蒸馏水中或氯化钠溶液中。即得到阿魏酸脂质体溶液。测得其包封率＜5％

(5)pH梯度法

①将磷脂、胆固醇、阿魏酸药品溶于适量氯仿和甲醇的混合溶液(5∶1)，35℃减压蒸发除去有机溶剂。

②pH8缓冲盐溶液水化至少1h。

③调节pH值至4.5(＜pka)，即得阿魏酸脂质体溶液。测得包封率＜2％。

实例2醋酸镁梯度法制得的阿魏酸脂质体

处方：    阿魏酸          10mg

          磷酯            10-500mg

          胆固醇          2-60mg

          维生素E         1％

          十八胺          1-10mg

水                       10-20mL

淀粉                     80mg

3％羟丙基甲基纤维素      150-200mg

滑石粉                   20mg

制法：①将磷脂、胆固醇、十八胺、维生素E溶解于有机溶剂，在一定温度下加压蒸发出去有机溶剂，然后再加入少量有机溶解将容器壁上形成的磷脂双分子层溶解，边超声边加入一定量Mg(CHCOOH)₂溶液，然后迅速涡旋使成w/o乳剂。再减压蒸发出去有机溶解，35℃水化至少1小时的到脂质体混悬液。将得到的脂质体混悬液超声，然后，挤压至少通过0.8μm的混合纤维素膜。

②将得到的脂质体混悬液通过事先用Na₂SO₄平衡的sephadex G-50柱，收集脂质体部分流出液。制得具备Mg(CHCOOH)₂梯度的脂质体。

③将阿魏酸加入到制得的具备Mg(CHCOOH)₂梯度的脂质体混悬液中。再37℃孵化10min-120min。即得到阿魏酸脂质体溶液。测得其包封率＞80％。

④将上述脂质体进行喷雾干燥。进风温度60℃，进样速度5ml/min，雾化盘转速40Hz，旋风分离器压差50mmHZO。得到干燥粉末。

⑤将上述粉末与淀粉、羟丙基甲基纤维素、混合均匀、滑石粉，过20目筛压片，即得以此脂质体为中间体的片剂。

实施例3

处方：    没食子酸        10mg

          磷酯            10-500mg

          胆固醇          2-60mg

          维生素A         1％

          十八胺          1-10mg

          硬脂酸甘油酯    5g

          硬脂酸          10g

          白凡士林        12g

          液状石蜡        10g

          甘油            12g

          十二烷基硫酸钠  1g

          水              10-20mL

制法：①将磷脂、胆固醇、十八胺、维生素A溶解于有机溶剂，在一定温度下加压蒸发出去有机溶剂，然后再加入一定量Mg(CHCOOH)₂溶液，35℃水化至少1小时的到脂质体混悬液。将得到的脂质体混悬液超声，然后，挤压至少通过0.8μm的混合纤维素膜。

②将得到的脂质体混悬液装入透析袋中，将透析袋放入盛有至少250ml的K₂SO₄溶液的烧杯中，透析至少12h，中间3-4h更换一次透析液。制得具备Mg(CHCOOH)₂梯度的脂质体。

③将没食子酸加入到制得的具备Mg(CHCOOH)₂梯度的脂质体混悬液中。于37℃孵化10min-120min。脂质体的包封率达80％以上。

④去硬脂酸甘油酯，硬脂酸，白凡士林及液状石蜡加热熔融。

⑤甘油、脂质体加热至70℃，然后加入十二烷基硫酸钠，然后将水相缓缓倒入油相中，边加边搅拌，直至冷却，即得乳膏。

实施例4

阿魏酸冻干或喷雾干燥脂质体的制备

处方：    阿魏酸     10mg

          磷酯       10-500mg

          胆固醇     2-60mg

          维生素A    1％

          十八胺     1-10mg

          水         10-20mL

制法：①将磷脂、胆固醇、十八胺、维生素A溶解于有机溶剂，在一定温度下加压蒸发出去有机溶剂，然后再加入一定量Mg(CHCOOH)₂溶液，35℃水化至少1小时的到脂质体混悬液。将得到的脂质体混悬液超声，然后，挤压至少通过0.8μm的混合纤维素膜。

②将得到的脂质体混悬液装入透析袋中，将透析袋放入盛有至少250ml的K₂SO₄溶液的烧杯中，透析至少12h，中间3-4h更换一次透析液。制得具备Mg(CHCOOH)₂梯度的脂质体。

③将阿魏酸加入到制得的具备Mg(CHCOOH)₂梯度的脂质体混悬液中。于60℃孵化10min-120min。

④上述制成的脂质体采用A步骤冷冻干燥，也可以采用B步骤喷雾干燥。A：将脂质体装入安瓿中，放入冷冻干燥机中，先冷冻至-50℃左右，此温度保持4-10小时，再开动抽真空马达，使保持10Pa的大气压10-24小时，再关闭冷冻开关，保持抽真空0.5-3小时。B：将脂质体喷雾干燥：进风温度60℃，进样速度5ml/min，雾化盘转速40Hz，旋风分离器压差50mmHZO。即得注射用阿魏酸脂质体粉针。

实例5

双氯酚酸    10mg

磷酯        10-500mg

胆固醇      2-60mg

维生素A     1％

水          10-20mL

①将磷脂、胆固醇、维生素A溶解于有机溶剂，在一定温度下加压蒸发出去有机溶剂，然后再加入一定量Mg(CHCOOH)₂溶液，35℃水化至少1小时的到脂质体混悬液。将得到的脂质体混悬液超声，然后，挤压至少通过0.8μm的混合纤维素膜。

②将得到的脂质体混悬液加入少量Na₂CO₃溶液，用于沉淀镁离子。将沉淀过滤除去，得到具有醋酸镁梯度的脂质体。

③将双氯酚酸加入到制得的具备Mg(CHCOOH)₂梯度的脂质体混悬液中。于60℃孵化10min-120min。包封率＞90％。

④上述制成的脂质体冷冻干燥。将脂质体装入安瓿中，放入冷冻干燥机中，先冷冻至-50℃左右，此温度保持4-10小时，再开动抽真空马达，使保持10Pa的大气压10-24小时，再关闭冷冻开关，保持抽真空0.5-3小时。得到的冻干粉末用于鼻粘膜给药。

Claims (10)

1、一种提高脂质体包封率的方法，其特征在于：脂质体内水相为醋酸镁溶液，而外水相为另外一种除醋酸镁外的溶液所制备各种脂质体的方法。

2、根据权利要求1所述的一种提高脂质体包封率的方法，其特征在于：内水相醋酸镁的浓度应大于0.001mmol/L以用来形成足够的载药动力。

3、根据权利要求1所述的一种提高脂质体包封率的方法，其特征在于：外水相为各种缓冲盐在内的与醋酸镁等渗的溶液。

4、根据权利要求3所述的一种提高脂质体包封率的方法，其特征在于：所述的除醋酸镁外的溶液为Na₂SO₄，NaCl，KCl，葡萄糖溶液。

5、根据权利要求1所述的一种提高物脂质体包封率的方法，其特征在于：所适应的药物优选酸性药物。

6、根据权利要求1所述的一种提高脂质体包封率的方法，其特征在于：提高脂质体包封率的方法所依靠的手段是可实现脂质体内外相介质不同的手段，柱交换、渗析、离子沉淀。

7、根据权利要求6所述的一种提高脂质体包封率的方法，其特征在于：所述柱交换所使用的介质包括葡聚糖凝胶，大孔吸附树脂，阳离子交换树脂。

8、根据权利要求6所述的一种提高脂质体包封率的方法所依靠的手段，其特征在于：所述离子沉淀使用的沉淀剂包括含有可与镁离子产生沉淀的阴离子的溶液。

9、根据权利要求1或3所述的一种提高脂质体包封率的方法，其特征在于：所述的除醋酸镁外的另外一种溶液中可以加入一些辅料乳糖、葡萄糖、海藻糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、纤维素衍生物、聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段聚合物及聚羧乙烯，以利于基于脂质体的其他剂型的制备。

10、一种如权利要求1所述的一种提高脂质体包封率的方法所制备的脂质体制剂，其特征在于：上述方法制得的脂质体可以作为中间体制成注射、口服、外用其他剂型；无菌粉针为脂质体溶液中加入支持剂或赋形剂，通过喷雾千燥或冷冻干燥途径获得。

Images