CN1800391A - 一群与口腔鳞癌发生发展相关基因 - Google Patents

Abstract

本发明关于在口腔鳞状细胞癌体外多因素、多阶段、多步骤癌变模型的基础上，筛选到与肿瘤发生发展相关基因。相关基因具有如SEQID：1、SEQI D：2、SEQID：3、SEQID：4、SEQID：5、SEQID：6、SEQID：7、SEQID：8、SEQID：9、SEQID：10、SEQID：11所示的核苷酸序列。本发明验证差异基因在细胞癌变过程中的表达情况，动态地研究口腔鳞癌癌变发生、发展进程中恶变相关基因表达情况，为进一步预防和治疗鳞癌提供候选基因。

Description

一群与口腔鳞癌发生发展相关基因

技术领域

本发明关于一群基因，特别关于一群与口腔鳞癌发生发展相关基因。

背景技术

口腔鳞癌占全身恶性肿瘤的4％，由于口腔位于呼吸道与消化道的重要位置，病变结果严重影响患者的生活和生存质量。目前研究肿瘤发生发展机制的常用方法之一是检测临床标本中的一些分子标记物的表达情况，从而推测这些分子标记物和肿瘤的相关性。方法二是以已经建立的肿瘤细胞系为研究对象。通过检测临床标本中的分子标记物表达情况的方法可以在一定程度上阐述某些因子和肿瘤发生发展的关系，但它受标本的限制，不能动态地观察细胞恶变过程，不能系统研究肿瘤的发生机制；目前已经建立的肿瘤细胞系在一定程度上为肿瘤发生机制的研究提供了实验平台，但也不能在纵向研究肿瘤的发生发展机制。上述技术一次性只能研究个别基因与肿瘤的相关性，而基因芯片技术可以满足高通量检测的要求，更加全面地研究肿瘤发生、发展机制相关基因。

发明内容

本发明的目的在于：提供一群与口腔鳞癌发生发展相关基因。

本发明的目的是通过以下技术方法来实现的：通过基因芯片技术筛选口腔鳞癌体外癌变模型各细胞系间的差异表达基因，进一步验证差异基因在细胞癌变过程中的表达情况，动态地研究口腔鳞癌癌变发生、发展进程中恶变相关基因表达情况，为进一步预防和治疗鳞癌提供候选基因。

首先通过转染HPV 16 E6/E7永生化口腔上皮细胞系，采用化学致癌剂苯丙芘或复合促癌剂佛波酯诱导永生化细胞恶变；这样在生物因素(人乳头状瘤病毒)，化学致癌因素(苯丙芘)，促癌因素(佛波酯)以及血清等方面体现了癌变过程中多因素作用的过程；细胞在从正常粘膜上皮细胞到永生化，然后逐步表现出恶性细胞特性，最终恶变的过程。这一过程很好地验证了肿瘤多因素、多阶段、多步骤发生学说。该模型在一定程度上反映了体内口腔黏膜上皮细胞的癌变过程。(上述部分已经申请专利见本申请人申请的中国发明专利“一种口腔粘膜上皮细胞癌变模型”其专利申请号200510028310.5)进一步通过Affymetrix PLUS 2.0(USA)寡核苷酸芯片检测永生化上皮细胞HIOEC、HIOEC-B(a)P(56G)和HIOEC-B(a)P(96G)细胞基因表达谱，采用GeneSpring 7.01软件分析芯片结果，得到上述各细胞系间的差异表达基因谱。筛选差异倍数在2倍以上的基因，选取可能与肿瘤发生、发展关系密切的候选基因。采用RT-PCR和实时定量PCR验证差异表达基因。在口腔鳞状细胞癌体外多因素、多阶段、多步骤癌变模型的基础上，筛选到与肿瘤发生发展相关基因。相关基因具有如SEQID：1、SEQID：2、SEQID：3、SEQID：4、SEQID：5、SEQID：6、SEQID：7、SEQID：8、SEQID：9、SEQID：10、SEQID：11所示的核苷酸序列。

本发明所公开一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其优点表现在：

(1)首先我们建立的口腔黏膜上皮细胞体外癌变模型可以动态地反映肿瘤发生发展过程；

(2)Affymetrix寡核苷酸基因芯片包含人类全基因组信息，具有高通量和高准确性的优点；

(3)芯片检测结果通过Genespring软件分析以及综合生物信息学分析可以筛选到与肿瘤发生发展相关候选基因。

附图说明

图1显示永生化上皮细胞在化学致癌剂诱导早期细胞形态学。

图2显示永生化上皮细胞在化学致癌剂和促癌剂诱导早期细胞形态学。

图3显示永生化上皮细胞在化学致癌剂作用后细胞形态学。

图4显示永生化上皮细胞在化学致癌剂和促癌剂作用后细胞形态学。

图5显示HIOEC-B(a)P细胞软琼脂集落形成能力。

图6显示HIOEC-B(a)P-TPA细胞软琼脂集落形成能力。

图7显示显微镜放大200倍观察第55代HIOEC-B(a)P细胞在裸小鼠皮下的成瘤性。

图8显示显微镜放大400倍观察第55代HIOEC-B(a)P细胞在裸小鼠皮下的成瘤性。

图9显示显微镜放大200倍观察第69代HIOEC-B(a)P细胞在裸小鼠皮下的成瘤性。

图10显示显微镜放大400倍观察第69代HIOEC-B(a)P细胞在裸小鼠皮下的成瘤性。

图11显示显微镜放大200倍观察第96代HIOEC-B(a)P细胞在裸小鼠皮下的成瘤性。

图12显示显微镜放大400倍观察第96代HIOEC-B(a)P细胞在裸小鼠皮下的成瘤性。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步描述。

实施例1

I、在已经建立的HPV 16 E6/E7永生化口腔上皮细胞系的基础上，采用化学致癌剂苯丙芘(benzo(a)pyrene，B(a)P)诱导培养，B(a)P的浓度为0.1-1.2μg/ml，体外递增浓度、间歇诱导培养6个月；诱导细胞第18代克隆培养，第21代改用含10％胎牛血清的DMEM培养液培养；体外连续传代培养1年，建立恶性细胞系HIOEC-B(a)P(见图1)。

II、通过软琼脂集落形成和裸小鼠皮下成瘤性鉴定诱导细胞的恶性表型。不同培养时期的细胞接种裸小鼠皮下形成不同恶性程度的肿瘤。(见图2，图3)

III、分别培养永生化上皮细胞HIOEC、HIOEC-B(a)P(56G)和HIOEC-B(a)P(96G)细胞，待细胞生长至80％铺满培养瓶(25cm²)底时，弃去培养液，每瓶细胞分别加入2ml TRIzol reagent(Invitrogen，USA)，充分吹打后将液体吸入1.5ml离心管中，-80℃保存备用。每种细胞分别收集4份，其中3份用于芯片检测重复实验3次，1份备做验证芯片结果。

IV.总RNA的提取和纯化

1.样品置冰上融化后，用加样枪反复吸吹，使样品充分裂解，移入1.5ml离心管中，室温静置3～5分钟。

2.在离心管中每1mlTRIzol起始量加200ul氯仿，振荡混匀。

3.将离心管在4℃，12000rcf，离心15分钟。

4.用移液器小心吸出上层水相，加入另一离心管中，每ml TRIzol起始量加入500ul异丙醇。

5.-20℃，沉淀过夜。

6.4℃，12000rcf，离心10分钟。

7.小心移出上清。

8.沉淀中加入1mL 75％乙醇，4℃，12000rcf，离心10分钟。

9.重复用75％乙醇洗涤一次RNA沉淀。

10.去上清，稍微晾干，RNA略显透明，加入适当体积(30ul)的RNase-free的水，充分溶解。

V.定量和检测总RNA

a)紫外定量和检测

1)用紫外分光光度计检测RNA的产量，在260nm处的吸光度，1OD＝40ug/ml。

2)根据在260nm和280nm处的吸光值，检测RNA的纯度，纯RNA的OD260/OD280比值应接近2.0(比值最好在1.9～2.1之间)。

b)变性胶电泳质检

1)配制1.2％的电泳胶

10×MOPS Gel Buffer           10ml

Agrose                        1.2g

RNase-Free Water                            90ml

加热溶解Agrose，稍微冷却，加入37％甲醛      1.8ml

EB(10mg/ml)                                 1ul

摇匀后倒胶，待胶冷凝后，置于电泳槽中，浸于1×MOPS Gel Buffer中平衡10分钟，待用。

2)样品变性

5×Loading Buffer        2ul

RNA样品                  1ug

Rnase-Free water         调节至10ul

在65℃，变性5分钟，立即置于冰上冷却。

3)电泳

将处理好的RNA样品，稍微离心，70V恒压电泳1小时。在凝胶成像仪上观察结果。

VI.纯化总RNA

RNeasy Mini Kit

1.将总RNA的体积用RNase-free的水调整到100ul，(因QIAGEN纯化柱的最大上样量为100ugRNA，所以一般取RNA不大于100ug)。

2.加入350ul RLT工作液(1ml RLT中加10ul 2-ME，混匀而成)，充分混匀。

3.加入250ul无水乙醇，充分混匀(不要离心)。

4.将混好的700ul样品加到QIAGEN纯化柱中，＞8000rpm，离心15秒。

5.弃滤液，加入500ul RPE工作液(一份RPE加入4份无水乙醇混匀而成)，＞8000rpm，离心15秒。

6.弃滤液，加入500ul RPE工作液(一份RPE加入4份无水乙醇混匀而成)，＞8000rpm，离心2分钟。

7.将纯化柱放入一个新的收集管，最大转速，离心1分钟。

8.将纯化柱换入一个EP管中，在纯化柱膜中间加25ul RNase-free的水，室温放置1分钟，最大转速，离心1分钟。

9.将EP管中的样品移入一个新的EP管中。

VII.纯化总RNA的定量和检测(同V)

a紫外定量和检测：总RNA的浓度和OD260/OD280。

b变性胶电泳质检：

VIII.cDNA的合成和纯化

1.1^stcDNA的合成(Affymetrix one-cycle cDNA Synthesis Kit)

a)总RNA                        5～16ug(8ug，不足取10ul)

b)RNase-free water                          补至10ul

T7-(dT)24 Primer(50uM)                      2ul

混匀，70℃温浴10分钟，置于冰上至少2分钟，离心片刻；

c)5×1st Strand Buffer                      4ul

DTT(0.1M)                                   2ul

dNTP(10mM)                                  1ul

混匀，42℃，温浴2分钟；

d)SuperScript II RT(200U/ul)                2uL(8～16ug起始)

                                    1uL(5～8ug起始)

e)混匀，42℃，温浴1小时。

2.2^ndcDNA的合成(Affymetrix one-cycle cDNA Synthesis Kit)

a)将1st cDNA合成产物置于冰上，加入下列试剂：

Component                               Volume

RNase-Free water                        91ul

5×2nd Strand Buffer                    30ul

dNTP(10mM)                              3ul

E.coli DNA Ligase(10U/ul)               1ul

E.coli DNA Polymerase(10U/ul)           4ul

E.coli RNase H(10U/ul)                  1ul

Total Volume                            130ul

混匀，16℃，反应2小时；

b)加入2ul T4 DNA Polymerase，混匀，16℃，5分钟；

c)加入10ul EDTA(0.5M)，混匀，终止反应。

-20℃保存或进行下步纯化。

3.纯化cDNA(Affymetrix GeneChip Sample Cleanup Module)

a)将600ul cDNA Binding Buffer加入cDNA合成产物中，振荡混匀3秒。

b)将500ul液体移入cDNA Cleanup Spin Column管中，不要振荡，＞＝10000rpm，室温离心1分钟，弃滤液。

c)将剩余液体移入cDNA Cleanup Spin Column管中，不要振荡，＞＝10000rpm，室温离心1分钟，弃滤液。

d)换一个新收集管，加入750ul cDNA Wash Buffer，最大转速离心1Min，弃滤液。

e)打开盖子，最大转速离心5Min，弃滤液。

f)将柱子转移至1.5mL的收集管中，加入14ul的cDNA Elution Buffer。室温静置1分钟，最大转速离心1分钟。

IX.cRNA的合成和纯化

1.IVT合成cRNA(GeneChip IVT Labeling Kit)

Reagent                                Volume

Template cDNA                          12ul

RNase-Free water                       8ul

10×IVT Labeling Buffer                4ul

IVT Labeling NTP Mix                   12ul

IVT Labeling Enzyme Mix                4ul

Total Volume                           40ul

混匀，稍离心，37℃温浴16小时。

合成产物可保存在-20℃或直接进行下一步纯化。

2.纯化cRNA(Genechip Sample Cleanup Module)

1)加入60ul RNase Free水，振荡混匀3’。

2)加入350ul IVT cRNA binding Buffer，振荡混匀3’。

3)加入250ul无水乙醇，用加样枪混匀。

4)将以上混合液加入cRNA Cleanup Spin Colum，＞＝10000rpm，离心15’，弃滤液。

5)将柱子移至1.5mL的收集管，加入500ul的IVT cRNA WashBuffer，＞＝10000rpm，离心15’，弃滤液。

6)加入500ul 80％乙醇，＞＝10000rpm，离心15’，弃滤液。

7)换一个收集管，打开盖子，＞＝10000rpm，离心5min，弃滤液。

8)将柱子转移至1.5mL的收集管，加入11ul的Rnase Free水，＞＝10000rpm 1min。

9)加入10ul的Rnase Free水，＞＝10000rpm 1min。

cRNA的定量和检测

a.用紫外分光光度计测量cRNA的浓度和OD260/OD280：

b.变性胶检测cRNA：

取2ug cRNA在1.2％的变性胶上电泳，纯化的cRNA应该呈弥散状长条带。

X.cRNA片段化、配制杂交液

1.片段化cRNA

a.校正cRNA浓度

根据公式：

[cRNA]：cRNA的测量浓度；

V：cRNA的洗脱体积；

M：合成cRNA时所用总RNA的量；

R：cRNA的回收得率；

[校正cRNA]：cRNA校正后的浓度。

b.配制片段化反应体系

根据校正cRNA的浓度片段化(40ul)：

cRNA                                15ug

5×Fragmentation Buffer             6ul

RNase-Free Water              补充至30ul

c.片段化

混匀，94℃温浴35分钟，之后置于冰上。

d.片段化cRNA的质检：变性胶电泳质检，片段化cRNA约为35～200bp。

2.配制杂交液

根据芯片类型按下表配制适当量的杂交液：见表1

表1

配方	300ul	终浓度
			1  片段化cRNA(0.5mg/ml)	30ul	0.05ug/ul
2  Oligo B2对照(3nM)	5ul	50pM
			3  20×Hybridizition control	15ul	1×
4  鱼精DNA(9.3mg/ml)	3.3ul	0.1mg/ml
			5  乙酰化BSA(20mg/ml)	7.5ul	0.5mg/ml
6  2×杂交Buffer	150ul	1×
			7  DMSO	30ul
8  RNase-Free Water	59.2ul

XI.芯片杂交

先进行测试芯片的杂交、洗染和分析，根据测试芯片的结果再杂交表达谱芯片。

1和2同时进行，直到第3步：

1.预杂交芯片

1)取出芯片，平衡至室温；

2)加入1×杂交Buffer；

3)45℃，60rpm，预杂交10分钟。

2.杂交液的准备

1)杂交液混匀，离心片刻；

2)99℃，温浴5分钟；

3)将杂交液转至45℃，温浴5分钟；

4)离心机最大转速离心5分钟。

3.杂交芯片

1)吸出芯片中的1×杂交Buffer；

2)将杂交液加入到芯片中；

3)45℃，60rpm，杂交16小时；

4)杂交结束后，吸出芯片中的杂交液，加入洗液A，进行后面的洗染过程。

XII.洗脱芯片

在洗脱工作站上按照芯片类型，运行洗脱程序。

XII.扫描芯片

扫描仪上扫描芯片。

XIV.数据分析结果见表2

1.应用Genespring 7.01软件进行数据分析。

2.Normalization方法：将芯片所有探针组的Signal从小到大排序，去掉最大的2％和最小的2％后，将剩下探针组的平均信号值调整到500。

表2  一群与口腔鳞癌发生发展相关基因表达差异结果

编号	.SEQ	差异倍数
									B vs H	A vs H	D vs H	C vs H	基因描述
1	SEQID：1	2.844	2.828	4.137	2.931	pituitary tumor-transforming 1interacting protein垂体肿瘤转化1相互作用蛋白
							2	SEQID：2	6.915	3.08	1.829	4.938	RAB3B，member RAS oncogenefamilyRAB3B，RAS癌基因家族成员
3	SEQID：3	2.017	1.817	3.415	6.71	ras homolog gene family，member ERAS癌基因同源家族成员E
							4	SEQID：4	24.46	29.9	15.17	28.56	retinoic acid induced 3维甲酸诱导基因3
5	SEQID：5	0.0249	0.0317	0.052	0.0018	S100 calcium binding protein A8S100钙结合蛋白A8
							6	SEQID：6	0.276	0.242	0.444	0.629	signal transducer and activator oftranscription 1信号转导和激活转录因子1
7	SEQID：7	0.495	0.424	1.062	12.22	transcription factor 8转录因子8
							8	SEQID：8	9.241	9.266	1.586	3.146	translokin
9	SEQID：9	3.307	2753	3.881	3.008	tumor protein D52肿瘤蛋白D52
							10	SEQID：10	0.615	0.388	0.445	0.029	tumor protein p73-like类肿瘤蛋白p73
11	SEQID：11	8.755	7.544	1.99	0.393	tumor-associated calcium signaltransducer 1肿瘤相关钙信号转导因子1

H＝HIOEC细胞

A＝HIOEC-B(a)P细胞96G(成瘤)

B＝HIOEC-B(a)P细胞56G(不成瘤)

C＝HIOEC-B(a)P-TPA细胞75G(软琼脂克隆)

D＝HIOEC-B(a)P-TPA细胞47G(软琼脂无克隆)

                           序列表

<110>上海交通大学医学院附属第九人民医院

<120>一群与口腔鳞癌发生发展相关基因

<130>/

<160>11

<170>PatentIn version 3.1

<210>1

<211>2737

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>1

ctgaacctca gccgcgccgg gaggcgagcc cgttggcgag gggcggggca gatggcgagg     60

gagcggggcg agctgctttt tgaggctgcg cactcgcatg gccccacctc gcaggtccac    120

ttccggcgcc gcggctgttc cgggcggaga ccgcttgtgc tggagtcgga gttgtaacgc    180

tccactgact gatagagcga ccggccgacc atggcgcccg gagtggcccg cgggccgacg    240

ccgtactgga ggttgcgcct cggtggcgcc gcgctgctcc tgctgctcat cccggtggcc    300

gccgcgcagg agcctcccgg agctgcttgt tctcagaaca caaacaaaac ctgtgaagag    360

tgcctgaaga acgtctcctg tctttggtgc aacactaaca aggcttgtct ggactaccca    420

gttacaagcg tcttgccacc ggcttccctt tgtaaattga gctctgcacg ctggggagtt    480

tgttgggtga actttgaggc gctgatcatc accatgtcgg tagtcggggg aaccctcctc    540

ctgggcattg ccatctgctg ctgctgctgc tgcaggagga agaggagccg gaagccggac    600

aggagtgagg agaaggccat gcgtgagcgg gaggagaggc ggatacggca ggaggaacgg    660

agagcagaga tgaagacaag acatgatgaa atcagaaaaa aatatggcct gtttaaagaa    720

gaaaacccgt atgctagatt tgaaaacaac taaagcgctc cagcacatca gtcccgacgc    780

ttcctgtgag gtgcacgctc cgcagcccag cccagccggg agaccacgtg gccattgcgg    840

tctcctgacc ttggccagtg aacctgccag ccttccagga caggcggccg gagagctgcc    900

cctgaaggac agtcctctcg tcttgcagac tggtgacctt ctattccctg ttcatctctg    960

tttctagatt tagtcacttg aaataagaaa tctttggggt ttgggctttt ttatactctt   1020

ctcagtttgt gaaacgctaa ctgcacacga agccgcctga cggcacccag cgctgtggct   1080

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ttggacaatt tttaaaattt gtatctttac tagaacatga gaatcttttt cccttggaag   1500

cttgaattat aaatgtggtg tttggcctgc ctcagcagca ccagttgact gctcgtgtgc   1560

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cacgtgcccc ggaagcaggt gtgtccagag tcagctgagg gctctcccca caccacccag   1800

caggcgctgg tgctccttct gcctcatggg accagtccag cttccagccg ctctggctcg   1860

agggtggtct gagcacttcc ttctgagtgg gcttctctgg gagctctcca gtggcactgc   1920

tggacctgcc cacgtttctg taaaatcagg atacgtggct ttagtaagca gaccaagcgc   1980

ttcgtggcag ggaaagcagc gtgcggggaa gtcactgaaa agtgctgcct aaggaagttt   2040

ggaaatagtc cccgttccag attgccttga attttaaaac attttgcttt gggaaagtag   2100

gtcagcagca cctaagatca aggatgcgtt ccattttcac acttcacagt catgaaaact   2160

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ttttaaccagtttccaataaaacggtttac tacctga                              2737

<210>2

<211>1565

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>2

cctgaccgga ccagaccatc ccgcagcgcc ccgccccggc cccctccgcg ccctcccgac     60

gccaggtcct gccgtcccgc cgaccgtccg ggagcgaacc cgtcgtcccg cactcggagt    120

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ttgactacat gtttaaactg cttatcattg gcaacagcag tgttggcaag acctccttcc    240

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ctgggcagga gcggtaccgg accatcacaa cagcctatta ccgtggggcc atgggcttca    420

ttctgatgta tgacatcacc aatgaagagt ccttcaatgc tgtccaagac tgggctactc    480

agatcaagac ctactcctgg gacaatgcac aagttattct ggtggggaac aagtgtgaca    540

tggaggaaga gagggttgtt cccactgaga agggccagct ccttgcagag cagcttgggt    600

ttgatttctt tgaagccagt gcaaaggaga acatcagtgt aaggcaggcc tttgagcgcc    660

tggtggatgc catttgtgac aagatgtctg attcgctgga cacagacccg tcgatgctgg    720

gctcctccaa gaacacgcgt ctctcggaca ccccaccgct gctgcagcag aactgctcat    780

gctaggcaag gcccaccttc ctgacctccc ctcattgtgg ccccacaccc agtctgcttc    840

tccctgttac acactgtccg ctctcagccc actctccctg ttacacactg cccacactca    900

gagcaagatg agttgctgct attctttgcc tgcccctggg gttctctgca gatggtccca    960

gtaatagata ctcagcacta gactaacata acaggtcact acacgggtgc agaatcactt   1020

tacaaaagaa gactctgttt tacgaagggg attcactaca gggacttaga gaacagtctc   1080

ttttctgcct ttaaaatgag agttcctcca tttaccaaaa tttgacacgc acacattctt   1140

caggggcatg ccaattgcgt aaagtgaggc tcgcctgcat agctaatcct gttaaagaca   1200

acttctcaaa gcacaacgtg cttgtttcct atcgggctcc ctgcggggct ttctctcact   1260

acaagtcaag cttgggctct caaagccctg cgcctgttac cacggatgcc cacagggcct   1320

gggcagttgc tgtggcgaca ggaagagcta atcttcagag agctcagact ctctaatgat   1380

gctgaaggag caaaggctga gtcagaaaca cacttaagag aaaaggattg gccgggcgcg   1440

gtggctcacg cctgtaatcc cagcactttg ggaggccgag gcgggtggat catgaggtca   1500

ggagatcgag accatcctgg ctaacaaggt gaaaccccgt ctctactaaa aaaaaaaaaa   1560

aaaaa                                                               1565

<210>3

<211>2683

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>3

cagtcggctc ggaattggac ttgggaggcg cggtgaggag tcaggcttaa aacttgttgg     60

aggggagtaa ccagcctgct cctctcgctc tcctcctcgt ctgcgccgcg tttcagagag    120

aaaattcctg ttccaagaga aaataaggca acatcaatga aggagagaag agccagccag    180

aaattatcca gcaaatctat catggatcct aatcagaacg tgaaatgcaa gatagttgtg    240

gtgggagaca gtcagtgtgg aaaaactgcg ctgctccatg tcttcgccaa ggactgcttc    300

cccgagaatt acgttcctac agtgtttgag aattacacgg ccagttttga aatcgacaca    360

caaagaatag agttgagcct gtgggacact tcgggttctc cttactatga caatgtccgc    420

cccctctctt accctgattc ggatgctgtg ctgatttgct ttgacatcag tagaccagag    480

accctggaca gtgtcctcaa aaagtggaaa ggtgaaatcc aggaattttg tccaaatacc    540

aaaatgctct tggtcggctg caagtctgat ctgcggacag atgttagtac attagtagag    600

ctctccaatc acaggcagac gccagtgtcc tatgaccagg gggcaaatat ggccaaacag    660

attggagcag ctacttatat cgaatgctca gctttacagt cggaaaatag cgtcagagac    720

atttttcacg ttgccacctt ggcatgtgta aataagacaa ataaaaacgt taagcggaac    780

aaatcacaga gagccacaaa gcggatttca cacatgccta gcagaccaga actctcggca    840

gttgctacgg acttacgaaa ggacaaagcg aagagctgca ctgtgatgtg aatctttcat    900

tatctttaat gaagacaaag gaatctagtg taaaaaacaa cagcaaacaa aaaggtgaag    960

tctaaatgaa gtgcacagcc aaagtcatgt ataccagagg cttaggaggc gtttgagagg   1020

atactcatct ttttggaatc ctgaccttag gttcggcatg tagaccaagt gatgagaagt   1080

gaatacatgg aagagttttt aagtgtgact tgaaaaatat gccaaaaaat gagagataca   1140

aatgagctag aggaagatga ggggggatgc gagtacctcc aagaagaaaa atcacactct   1200

gaatggtgct tgcatttttg ggtttttttt ttttgttata atctattcat ggatctccac   1260

tttgatttaa tttttaaatg ttttaatctc ctttacaaaa agtatacgtt aatataccgt   1320

cctcaagggg gaactggcac tgtgacctta gcatttagtt ttctagagga tgtgatctaa   1380

tttctttcta gctcatcatt aaaaaggaaa ttgtatcagg acccatggga tatatccaga   1440

ggcaaacttt atgaggcttt gaaatcttgc cttcctgaag atagctgagt aggatggttc   1500

taaggaaagc ctttgcaatc ttgcaagatt tgtagaccag cactacaaag atcgcataga   1560

tcaaatagga aaaaaaatgt cgatttttat tcagtctgat ggttctgttc ttcattgtga   1620

ttgtcattaa aaagtggtaa attgctcaat gtaatatttt tgtgcgctgt ttagaagttg   1680

tgtgattttt tgccatcgtt gataaaaatg caaagtcaaa taaaaggtgt cttggtttga   1740

tgtcatagaa tgatccaagg agagaaaaaa ggtagttact gttttcacca gaaaaggtaa   1800

tgagtgaagg aaagaatagt agcagaaagc acagtttgtg agtaaagctg tctggaatta   1860

agttaccaaa aatacaaagc aaaaggacta ttattttggg ttgaagctcc aaaactgaca   1920

gcatctgata atctgttggt ttatttcact tttcattaaa tgaacattga tgagagaaga   1980

tgccacttac ccaagcttta gagaatccct agtggaagat tatatgataa actttcagtc   2040

ctgacataac actagggcat ttctagagtg tcattgctaa aacctcactg aacagatgca   2100

gccaaggtct gtgttcagca cttggtctct gttgttacgt aaaataataa gcatttaaaa   2160

tagtttacag atatttttga ccagttcctt ttagagattc tttcagagaa gaaaccagat   2220

ctgacctgtt tattgttggc gcttgttgaa aacgagcttt ctttcccatg atagtgcttc   2280

gtttttgaag tgttgaagct gtgctcccct taaatcgtgg caggagagat taaggtaatt   2340

acaacactca gttctatgtc ttacaagcac tttgtcttgt ctctgcaaga aaattcgatt   2400

ccagtcattt cccataaaat acagacattt taccaacata atatgctttg attgatgcag   2460

cattatgctt tgggcagtat tacaaaatag ctggcgagtg ctttctgtat ttaaatattg   2520

taaaaagaaa ataagttata actgttataa agcagaactt ttgttgcatt ttttaaactg   2580

ttgaagtcac tgtgtatgtt tgtttggtca atgtttccgc agtatttatt aaaacatact   2640

ttttttttct tcaaataaaa aagtaaccat gtctttgtct aaa                     2683

<210>4

<211>2856

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>4

gcttcccata cggcagtggc tgggggagag tgatggagag aaaggctaag ctaaggtcaa     60

agaaagtgga ggaaggctgg cttgtcccgc tggacttgac ggcggagctg ctgcaatctc    120

gcgggctggg cccttgcccc gggtggaccc gagtgcctgc ggggaggcgg gtgtggctcc    180

cccgggaggt gacagctggc ggggcccgta aggagctggt ctgctccggc tcccctctcg    240

tagccggcgc cctgggacca gcgcgtgagc acgtctcgga ggagtccgat gcgctgggca    300

gggccgggtg gtcacccccg cccagcttcc aggggtgact gtgcctctga cgtcagacgg    360

tttttgggtc attccctggc acggggactt tattttcata acagcatgaa gtgccgtgga    420

actggaatag gcgtgtcctc tccctcgacc ctccccctcc ttgtccctct gctcacccct    480

cgctcgttcc ctccctccgg cgagggccgc ctttataaca actgctcaga gtgcgagggc    540

gggatagctg tccaaggtct cccccagcac tgaggagctc gcctgctgcc ctcttgcgcg    600

cgggaagcag caccaagttc acggccaacg ccttggcact agggtccaga atggctacaa    660

cagtccctga tggttgccgc aatggcctga aatccaagta ctacagactt tgtgataagg    720

ctgaagcttg gggcatcgtc ctagaaacgg tggccacagc cggggttgtg acctcggtgg    780

ecttcatgct cactctcccg atcctcgtct gcaaggtgca ggactccaac aggcgaaaaa    840

tgctgcctac tcagtttctc ttcctcctgg gtgtgttggg catctttggc ctcaccttcg    900

ccttcatcat cggactggac gggagcacag ggcccacacg cttcttcctc tttgggatcc    960

tcttttccat ctgcttctcc tgcctgctgg ctcatgctgt cagtctgacc aagctcgtcc   1020

gggggaggaa gcccctttcc ctgttggtga ttctgggtct ggccgtgggc ttcagcctag   1080

tccaggatgt tatcgctatt gaatatattg tcctgaccat gaataggacc aacgtcaatg   1140

tcttttctga gctttccgct cctcgtcgca atgaagactt tgtcctcctg ctcacctacg   1200

tcctcttctt gatggcgctg accttcctca tgtcctcctt caccttctgt ggttccttca   1260

cgggctggaa gagacatggg gcccacatct acctcacgat gctcctctcc attgccatct   1320

gggtggcctg gatcaccctg ctcatgcttc ctgactttga ccgcaggtgg gatgacacca   1380

tcctcagctc cgccttggct gccaatggct gggtgttcct gttggcttat gttagtcccg   1440

agttttggct gctcacaaag caacgaaacc ccatggatta tcctgttgag gatgctttct   1500

gtaaacctca actcgtgaag aagagctatg gtgtggagaa cagagcctac tctcaagagg   1560

aaatcactca aggttttgaa gagacagggg acacgctcta tgccccctat tccacacatt   1620

ttcagctgea gaaccagcct ccccaaaagg aattctccat cccacgggcc cacgcttggc   1680

cgagccctta caaagactat gaagtaaaga aagagggcag ctaactctgt cctgaagagt   1740

gggacaaatg cagccgggcg gcagatctag cgggagctca aagggatgtg ggcgaaatct   1800

tgagtcttet gagaaaactg tacaagacac tacgggaaca gtttgcctcc ctcccagcct   1860

caaccacaat tcttccatgc tggggctgat gtgggctagt aagactccag ttcttagagg   1920

cgctgtagta tttttttttt tttgtctcat cctttggata cttcttttaa gtgggagtct   1980

caggcaactc aagtttagac ccttactctt tttgtttgtt ttttgaaaca ggatcttgct   2040

ctgtcaccca ggcttgagtg cagtggtgcg atcacagccc agtgcagcct cgaccacctg   2100

tgctcaagca atcctcccat ctccatctcc caaagtgctg ggatgacagg cgtgagccac   2160

agctcccagc ctaggccctt aatcttgctg ttattttcca tggactaaag gtctggtcat   2220

ctgagctcac gctggctcac acagctctag gggcctgctc ctctaactca cagtgggttt   2280

tgtgaggctc tgtggcccag ageagacctg catatctgag caaaaatagc aaaagcctct   2340

ctcagcccac tggcctgaat ctacactgga agccaacttg ctggcacccc cgctccccaa   2400

cccttcttgc ctgggtagga gaggctaaag atcaccctaa atttaetcat ctctctagtg   2460

ctgcctcaca ttgggcctca gcagctcccc agcaccaatt cacaggtcac ccctctcttc   2520

ttgcactgtc cccaaacttg ctgtcaattc cgagatctaa tctcccccta cgctctgcca   2580

ggaattcttt cagacctcac tagcacaagc ccggttgctc cttgtcagga gaatttgtag   2640

atcattctca cttcaaattc ctggggctga tacttctctc atcttgcaec ccaacctctg   2700

taaatagatt taccgcattt acggctgcat tctgtaagtg ggeatggtct cctaatggag   2760

gagtgttcat tgtataataa gttattcacc tgagtatgca ataaagatgt ggtggccact   2820

ctttcatggtggtggcagcagttaccagta aaaaaa                               2856

<210>5

<211>428

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>5

atgtctcttg tcagctgtct ttcagaagac ctggtggggc aagtccgtgg gcatcatgtt     60

gaccgagctg gagaaagcct tgaactctat catcgacgtc taccacaagt actccctgat    120

aaaggggaat ttccatgccg tctacaggga tgacctgaag aaattgctag agaccgagtg    180

tcctcagtat atcaggaaaa agggtgcaga cgtctggttc aaagagttgg atatcaacac    240

tgatggtgca gttaacttcc aggagttcct cattctggtg ataaagatgg gcgtggcagc    300

ccacaaaaaa agccatgaag aaagccacaa agagtagctg agttactggg cccagaggct    360

gggcccctgg acatgtacct gcagaataat aaagtcatca atacctcaaa aaaaaaaaaa    420

aaaaaaaa                                                             428

<210>6

<211>2762

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>6

agcggggcgg ggcgccagcg ctgccttttc tcctgccggg tagtttcgct ttcctgcgca     60

gagtctgcgg aggggctcgg ctgcaccggg gggatcgcgc ctggcagacc ccagaccgag    120

cagaggcgac ccagcgcgct cgggagaggc tgcaccgccg cgcccccgcc tagcccttcc    180

ggatcctgcg cgcagaaaag tttcatttgc tgtatgccat cctcgagagc tgtctaggtt    240

aacgttcgca ctctgtgtat ataacctcga cagtcttggc acctaacgtg ctgtgcgtag    300

ctgctccttt ggttgaatcc ccaggccctt gttggggcac aaggtggcag gatgtctcag    360

tggtacgaac ttcagcagct tgactcaaaa ttcctggagc aggttcacca gctttatgat    420

gacagttttc ccatggaaat cagacagtac ctggcacagt ggttagaaaa gcaagactgg    480

gagcacgctg ccaatgatgt ttcatttgcc accatccgtt ttcatgacct cctgtcacag    540

ctggatgatc aatatagtcg cttttctttg gagaataact tcttgctaca gcataacata    600

aggaaaagca agcgtaatct tcaggataat tttcaggaag acccaatcca gatgtctatg    660

atcatttaca gctgtctgaa ggaagaaagg aaaattctgg aaaacgccca gagatttaat    720

caggctcagt cggggaatat tcagagcaca gtgatgttag acaaacagaa agagcttgac    780

agtaaagtca gaaatgtgaa ggacaaggtt atgtgtatag agcatgaaat caagagcctg    840

gaagatttac aagatgaata tgacttcaaa tgcaaaacct tgcagaacag agaacacgag    900

accaatggtg tggcaaagag tgatcagaaa caagaacagc tgttactcaa gaagatgtat    960

ttaatgcttg acaataagag aaaggaagta gttcacaaaa taatagagtt gctgaatgtc   1020

actgaactta cccagaatgc cctgattaat gatgaactag tggagtggaa gcggagacag   1080

cagagcgcct gtattggggg gccgcccaat gcttgcttgg atcagctgca gaactggttc   1140

actatagttg cggagagtct gcagcaagtt cggcagcagc ttaaaaagtt ggaggaattg   1200

gaacagaaat acacctacga acatgaccct atcacaaaaa acaaacaagt gttatgggac   1260

cgcaccttca gtcttttcca gcagctcatt cagagctcgt ttgtggtgga aagacagccc   1320

tgcatgccaa cgcaccctca gaggccgctg gtcttgaaga caggggtcca gttcactgtg   1380

aagttgagac tgttggtgaa attgcaagag ctgaattata atttgaaagt caaagtctta   1440

tttgataaag atgtgaatga gagaaataca gtaaaaggat ttaggaagtt caacattttg   1500

ggcacgcaca caaaagtgat gaacatggag gagtccacca atggcagtct ggcggctgaa   1560

tttcggcacc tgcaattgaa agaacagaaa aatgctggca ccagaacgaa tgagggtcct   1620

ctcatcgtta ctgaagagct tcactccctt agttttgaaa cccaattgtg ccagcctggt   1680

ttggtaattg acctcgagac gacctctctg cccgttgtgg tgatctccaa cgtcagccag   1740

ctcccgagcg gttgggcctc catcctttgg tacaacatgc tggtggcgga acccaggaat   1800

ctgtccttct tcctgactcc accatgtgca cgatgggctc agctttcaga agtgctgagt   1860

tggcagtttt cttctgtcac caaaagaggt ctcaatgtgg accagctgaa catgttggga   1920

gagaagcttc ttggtcctaa cgccagcccc gatggtctca ttccgtggac gaggttttgt   1980

aaggaaaata taaatgataa aaattttccc ttctggcttt ggattgaaag catcctagaa   2040

ctcattaaaa aacacctgct ccctctctgg aatgatgggt gcatcatggg cttcatcagc   2100

aaggagcgag agcgtgccct gttgaaggac cagcagccgg ggaccttcct gctgcggttc   2160

agtgagagct cccgggaagg ggccatcaca ttcacatggg tggagcggtc ccagaacgga   2220

ggcgaacctg acttccatgc ggttgaaccc tacacgaaga aagaactttc tgctgttact   2280

ttccctgaca tcattcgcaa ttacaaagtc atggctgctg agaatattcc tgagaatccc   2340

ctgaagtatc tgtatccaaa tattgacaaa gaccatgcct ttggaaagta ttactccagg   2400

ccaaaggaag caccagagcc aatggaactt gatggcccta aaggaactgg atatatcaag   2460

actgagttga tttctgtgtc tgaagtgtaa gtgaacacag aagagtgaca tgtttacaaa   2520

cctcaagcca gccttgctcc tggctggggc ctgttgaaga tgcttgtatt ttacttttcc   2580

attgtaattg ctatcgccat cacagctgaa cttgttgaga tccccgtgtt actgcctatc   2640

agcattttac tactttaaaa aaaaaaaaaa aagccaaaaa ccaaatttgt atttaaggta   2700

tataaatttt cccaaaactg ataccctttg aaaaagtata aataaaatga gcaaaagttg   2760

aa                                                                  2762

<210>7

<211>4723

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>7

atgcggcgcg gccccggagg cagcagcagc ggcggcggca gccggagcag taggcacccg     60

agcagcgcca gcggccgagc gggcggcttc ctggcctggg cgctccggtg gcggcggagg    120

tgcgcgcgga gccatggtta tcatgtcgga gttcagcgcg gaccccgcgg gccagggtca    180

gggccagcag aagcccctcc gggtgggttt ttacgacatc gagcggaccc tgggcaaagg    240

caacttcgcg gtggtgaagc tggcgcggca tcgagtcacc aaaacgcagg ttgcaataaa    300

aataattgat aaaacacgat tagattcaag caatttggag aaaatctatc gtgaggttca    360

gctgatgaag cttctgaacc atccacacat cataaagctt taccaggtta tggaaacaaa    420

ggacatgctt tacatcgtca ctgaatttgc taaaaatgga gaaatgtttg attatttgac    480

ttccaacggg cacctgagtg agaacgaggc gcggaagaag ttctggcaaa tcctgtcggc    540

cgtggagtac tgtcacgacc atcacatcgt ccaccgggac ctcaagaccg agaacctcct    600

gctggatggc aacatggaca tcaagctggc agattttgga tttgggaatt tctacaagtc    660

aggagagcct ctgtccacgt ggtgtgggag ccccccgtat gccgccccgg aagtctttga    720

ggggaaggag tatgaaggcc cccagctgga catctggagc ctgggcgtgg tgctgtacgt    780

cctggtctgc ggttctctcc ccttcgatgg gcctaacctg ccgacgctga gacagcgggt    840

gctggagggc cgcttccgca tccccttctt catgtctcaa gactgtgaga gcctgatccg    900

ccgcatgctg gtggtggacc ccgccaggcg catcaccatc gcccagatcc ggcagcaccg    960

gtggatgcgg gctgagccct gcttgccggg acccgcctgc cccgccttct ccgcacacag   1020

ctacacctcc aacctgggcg actacgatga gcaggcgctg ggtatcatgc agaccctggg   1080

cgtggaccgg cagaggacgg tggagtcact gcaaaacagc agctataacc actttgctgc   1140

catttattac ctcctccttg agcggctcaa ggagtatcgg aatgcccagt gcgcccgccc   1200

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cttgttcttc ccggtggatg ccagctgcag cggagtgttc cggccccggc ccgtgtcccc   1440

aagcagcctg ctggacacag ccatcagtga ggaggccagg caggggccgg gcctagagga   1500

ggagcaggac acgcaggagt ccctgcccag cagcacgggc cggaggcaca ccctggccga   1560

ggtctccacc cgcctctccc cactcaccgc gccatgtata gtcgtctccc cctccaccac   1620

ggcaagtcct gcagagggaa ccagctctga cagttgtctg accttctctg cgagcaaaag   1680

ccccgcgggg ctcagtggca ccccggccac tcaggggctg ctgggcgcct gctccccggt   1740

caggctggcc tcgcccttcc tggggtcgca gtccgccacc ccagtgctgc aggctcaggg   1800

gggcttggga ggagctgttc tgctccctgt cagcttccag gagggacggc gggcgtcgga   1860

cacctcactg actcaagggc tgaaggcctt tcggcagcag ctgaggaaga ccacgcggac   1920

caaagggttt ctgggactga acaaaatcaa ggggctggct cgccaggtgt gccaggtccc   1980

tgccagccgg gccagcaggg gcggcctgag ccccttccac gcccctgcac agagcccagg   2040

cctgcacggc ggcgcagccg gcagccggga gggctggagc ctgctggagg aggtgctaga   2100

gcagcagagg ctgctccagt tacagcacca cccggccgct gcacccggct gctcccaggc   2160

cccccagccg gcccctgccc cgtttgtgat cgccccctgt gatggccctg gggctgcccc   2220

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agcgaaataa gcaatacgtt aggtgttttg gctttttagt ttatttttgt tttatttttt   2640

tcttgcactg agtgacctca actttgagta gggactggaa actttaggaa gaaagataat   2700

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gtatatgtat ctacatggga gacaggtaga cactacttat ttgttacatt ttgtactata   3600

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cctgctgctg ctgctgctgc tgctctgtgg ctgtttcaaa gactgggcga aaggctgtcc   4140

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agaagttttt gggatgggag agaatccaga ccatcttggg gcagccaggc ccttgccttc   4260

atttttacag aggtagcaca actgattcca acacaaaacc ccttcccctt tttaaaatga   4320

tttctgttct aatgccatag atcaaaggcc tcagaaacca ttgtgtgttt cctctttgaa   4380

gcaatgacaa gcactttact ttcacggtgg tttttgtttt ttcttattgc tgtggaacct   4440

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ttgtagattt cttgacagtg ctgtaataca gacggcaatg caatagccta tttaaagaca   4560

ctacgtgatc tgattgagat gtacatagtt ttttttttta ccataactga attattttat   4620

ctcttatgtt aacatgagaa atgtatgcca aatgattagt tgatgtatgt tttttaattt   4680

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<210>8

<211>3158

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>8

gtccgttagg acgtgttgcc ctttctgtgt aagctgtgag cgtaggcggc cctgaggggg     60

tgtgttgcag gggtttccaa gcccagcacc agcacccttg cccttttcca tcaggggttc    120

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gcatggttcg gcattcttca tctccatatg tagtatatcc ttcggataag cctttcctta    360

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tcaacagtat tcctttggca aagcaagtat cttcacgagg tggtaaaagt aagaagttgt   1260

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tacaggatga atttgggcaa atgagctttg atcaccagca gcttgcaaaa cttatccagg   1380

agtcgccaac cgttgaactg aaagacaagt tggagtgtga attggaggca ttagtgggaa   1440

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ctcatactca cttatgttgg aattaattaa tagcaggtgt taaaggaccc aggcttcatt   1860

acacaggctt ttcatgtatg caggatgact caatgttaaa gcatttaaat ggaaaccagg   1920

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acgctgcact ttgtaaacag attaccagtt ttttacttgt gggtgtgatt ttttaaaata   2040

gttctttata tataattaaa attaggttta aattttcaaa atatgagact atgctatagg   2100

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tttccaaagc aaccattaaa catactttgt ttctactatt ggtggagttt ttctatattt   2220

aaaaatacat atatatttca gaggattttt attttgcttt ttggcatttc agactttgat   2280

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cattttgagt tatatctata aaaattataa aaggattttt gaaagtataa acaaattgtc   2400

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tataccttca cagttcttaa tacctgtttt gtaatcatga tattcagtca aggcattatg   2520

gtttttaatc ttgaaactta gagaaccctt tgaatatttg cttttactgg tgtacagtat   2580

gagtggaata taaactgtac acataattat catgttgata taaatcataa tttcaactag   2640

atcaagacat gttaaccttt tataaattta aagtcaataa agcacctttt taaaggaaac   2700

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catgataaat atatgtgtca accaccattt cagctattaa aaactcctgt tatctccttg   3120

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<210>9

<211>4250

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>9

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aattaacacc aggtggtgaa tagagcccct cctaaggttg ctcaggataa atcatttatt    120

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tagcactatt taaaataagc acaccaagtt atatgactaa tataacttga aaatttttta   1980

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tatatgatta tggcctacaa tgttgtattt gttatttatt aaattgtgat tgttttatta   2280

ttgtttatgc caaatgttaa ctgccaagct tggagtgacc taaagcattt tttaaaagca   2340

tggctagatt tacttcagta taaattatct tatgaaaacc aaattttaaa agccacaggt   2400

gttgattgtt ataaaataac atgctgccat tcttgattgc tagagttttt gttagtactt   2460

tggatgcaat taaaactatg tgctatcaca tgtgaaaagc ttaataaatt ccatctatca   2520

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caattgaaac gtacaggcaa cagcaacagc agcagcacca gcacttactt cagaaacaga   1440

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cctaacatct gacctggcat ctaattctga ttctggcttt aagccttcaa aactatagct   2340

tgcagaactg tagctgccat ggctaggtag aagtgagcaa aaaagagttg ggtgtctcct   2400

taagctgcag agatttctca ttgactttta taaagcatgt tcacccttat agtctaagac   2460

tatatatata aatgtataaa tatacagtat agatttttgg gtggggggca ttgagtattg   2520

tttaaaatgt aatttaaatg aaagaaaatt gagttgcact tattgaccat tttttaattt   2580

acttgttttg gatggcttgt ctatactcct tcccttaagg ggtatcatgt atggtgatag   2640

gtatctagag cttaatgcta catgtgagtg acgatgatgt acagattctt tcagttcttt   2700

ggattctaaa tacatgccac atcaaacctt tgagtagatc catttccatt gcttattatg   2760

taggtaagac tgtagatatg tattcttttc tcagtgttgg tatattttat attactgaca   2820

tttcttctag tgatgatggt tcacgttggg gtgatttaat ccagttataa gaagaagttc   2880

atgtccaaac gtcctcttta gtttttggtt gggaatgagg aaaattctta aaaggcccat   2940

agcagccagt tcaaaaacac ccgacgtcat gtatttgagc atatcagtaa cccccttaaa   3000

tttaatacca gataccttat cttacaatat tgattgggaa aacatttgct gccattacag   3060

aggtattaaa actaaatttc actactagat tgactaactc aaatacacat ttgctactgt   3120

tgtaagaatt ctgattgatt tgattgggat gaatgccatc tatctagttc taacagtgaa   3180

gttttactgt ctattaatat tcagggtaaa taggaatcat tcagaaatgt tgagtctgta   3240

ctaaacagta agatatctca atgaaccata aattcaactt tgtaaaaatc ttttgaagca   3300

tagataatat tgtttggtaa atgtttcttt tgtttggtaa atgtttcttt taaagaccct   3360

cctattctat aaaactctgc atgtagaggc ttgtttacct ttctctctct aaggtttaca   3420

ataggagtgg tgatttgaaa aatataaaat tatgagattg gttttcctgt ggcataaatt   3480

gcatcactgt atcattttct tttttaaccg gtaagagttt cagtttgttg gaaagtaact   3540

gtgagaaccc agtttcccgt ccatctccct tagggactac ccatagacat gaaaggtccc   3600

cacagagcaa gagataagtc tttcatggct gctgttgctt aaaccactta aacgaagagt   3660

tcccttgaaa ctttgggaaa acatgttaat gacaatattc cagatctttc agaaatataa   3720

cacatttttt tgcatgcatg caaatgagct ctgaaatctt cccatgcatt ctggtcaagg   3780

gctgtcattg cacataagct tccattttaa ttttaaagtg caaaagggcc agcgtggctc   3840

taaaaggtaa tgtgtggatt gcctctgaaa agtgtgtata tattttgtgt gaaattgcat   3900

actttgtatt ttgattattt tttttttctt cttgggatag tgggatttcc agaaccacac   3960

ttgaaacctt tttttatcgt ttttgtattt tcatgaaaat accatttagt aagaatacca   4020

catcaaataa gaaataatgc tacaatttta agaggggagg gaagggaaag ttttttttta   4080

ttattttttt aaaattttgt atgttaaaga gaatgagtcc ttgatttcaa agttttgttg   4140

tacttaaatg gtaataagca ctgtaaactt ctgcaacaag catgcagctt tgcaaaccca   4200

ttaaggggaa gaatgaaagc tgttccttgg tcctagtaag aagacaaact gcttccctta   4260

ctttgctgag ggtttgaata aacctaggac ttccgagcta tgtcagtact attcaggtaa   4320

cactagggcc ttggaaattc ctgtactgtg tctcatggat ttggcactag ccaaagcgag   4380

gcacccttac tggcttacct cctcatggca gcctactctc cttgagtgta tgagtagcca   4440

gggtaagggg taaaaggata gtaagcatag aaaccattag aaagtgggct taatggagtt   4500

cttgtggcct cagctcaatg cagttagctg aagaattgaa aagtttttgt ttggagacgt   4560

ttataaacag aaatggaaag cagagttttc attaaatcct tttacctttt ttttttcttg   4620

gtaatcccct aaaataacag tatgtgggat attgaatgtt aaagggatat ttttttctat   4680

tatttttata attgtacaaa attaagcaaa tgttaaaagt tttatatgct ttattaatgt   4740

tttcaaaagg tattatacat gtgatacatt ttttaagctt cagttgcttg tcttctggta   4800

ctttctgtta tgggcttttg gggagccaga agccaatcta caatctcttt ttgtttgcca   4860

ggacatgcaa taaaatttaa aaaataaata aaaactaatt aagaaaaaaa aaaaaaaaaa   4920

aaaaaaaaaaaa                                                         4932

<210>11

<211>1528

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>11

cggcgagcga gcaccttcga cgcggtccgg ggaccccctc gtcgctgtcc tcccgacgcg     60

gacccgcgtg ccccaggcct cgcgctgccc ggccggctcc tcgtgtccca ctcccggcgc    120

acgccctccc gcgagtcccg ggcccctccc gcgcccctct tctcggcgcg cgcgcagcat    180

ggcgcccccg caggtcctcg cgttcgggct tctgcttgcc gcggcgacgg cgacttttgc    240

cgcagctcag gaagaatgtg tctgtgaaaa ctacaagctg gccgtaaact gctttgtgaa    300

taataatcgt caatgccagt gtacttcagt tggtgcacaa aatactgtca tttgctcaaa    360

gctggctgcc aaatgtttgg tgatgaaggc agaaatgaat ggctcaaaac ttgggagaag    420

agcaaaacct gaaggggccc tccagaacaa tgatgggctt tatgatcctg actgcgatga    480

gagcgggctc tttaaggcca agcagtgcaa cggcacctcc acgtgctggt gtgtgaacac    540

tgctggggtc agaagaacag acaaggacac tgaaataacc tgctctgagc gagtgagaac    600

ctactggatc atcattgaac taaaacacaa agcaagagaa aaaccttatg atagtaaaag    660

tttgcggact gcacttcaga aggagatcac aacgcgttat caactggatc caaaatttat    720

cacgagtatt ttgtatgaga ataatgttat cactattgat ctggttcaaa attcttctca    780

aaaaactcag aatgatgtgg acatagctga tgtggcttat tattttgaaa aagatgttaa    840

aggtgaatcc ttgtttcatt ctaagaaaat ggacctgaca gtaaatgggg aacaactgga    900

tctggatcct ggtcaaactt taatttatta tgttgatgaa aaagcacctg aattctcaat    960

gcagggtcta aaagctggtg ttattgctgt tattgtggtt gtggtgatag cagttgttgc   1020

tggaattgtt gtgctggtta tttccagaaa gaagagaatg gcaaagtatg agaaggctga   1080

gataaaggag atgggtgaga tgcataggga actcaatgca taactatata atttgaagat   1140

tatagaagaa gggaaatagc aaatggacac aaattacaaa tgtgtgtgcg tgggacgaag   1200

acatctttga aggtcatgag tttgttagtt taacatcata tatttgtaat agtgaaacct   1260

gtactcaaaa tataagcagc ttgaaactgg ctttaccaat cttgaaattt gaccacaagt   1320

gtcttatata tgcagatcta atgtaaaatc cagaacttgg actccatcgt taaaattatt   1380

tatgtgtaac attcaaatgt gtgcattaaa tatgcttcca cagtaaaatc tgaaaaactg   1440

atttgtgatt gaaagctgcc tttctattta cttgagtctt gtacatacat acttttttat   1500

gagctatgaaataaaacattttaaactg                                        1528

Claims (11)

1、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：1所示的核苷酸序列。

2、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：2所示的核苷酸序列。

3、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：3所示的核苷酸序列。

4、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：4所示的核苷酸序列。

5、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：5所示的核苷酸序列。

6、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：6所示的核苷酸序列。

7、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：7所示的核苷酸序列。

8、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：8所示的核苷酸序列。

9、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：9所示的核苷酸序列。

10、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：10所示的核苷酸序列。

11、一群与口腔鳞癌发生发展相关基因，其特征在于它具有如SEQ ID：11所示的核苷酸序列。

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