CN1768740A - 一种含红花黄色素药物组合物及其制备方法与用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体公开了一种含红花黄色素药物组合物，其中含有一定配比的乙酰谷酰胺和红花黄色素，本发明药物组合物中乙酰谷酰胺和红花黄色素组配而成的复方制剂，通过二者相互补充协同作用于机体，充分发挥活血化瘀、改善脑代谢及脑功能作用，可作为制备治疗闭塞性脑血管疾病，肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等疾病药物方面的应用；也可用于制备治疗冠心病、脉管炎等疾病药物方面的应用。

Description

一种含红花黄色素药物组合物及其制备方法与用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体地说涉及一种由乙酰谷酰胺和红花黄色素，红花经提取有效部位后与乙酰谷酰胺制得可用剂型的新颖的药物组合物，其制备方法及其在治疗闭塞性脑血管疾病，肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等疾病方面的用途。

背景技术

乙酰谷酰胺为N₂-乙酰-L-谷氨酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)，为白色结晶性粉末，临床常用作脑功能改善药。该药能够通过血-脑脊液屏障，通过血-脑脊液屏障后分解为谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)发挥作用。谷氨酸参与中枢神经系统的信息传递，γ-氨基丁酸能拮抗谷氨酸兴奋性毒理作用，可改善神经细胞代谢，维持神经应激能力及降低血氨的作用，改善脑功能。该药物临床常用于肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等。

红花为菊科植物红花(Carthamus tinctorins L)的干燥花，它性温，味辛。能活血通经，散瘀止痛。用于月经不调、痛经和经闭跌打损伤。对冠心病、血管栓塞性疾病、传染性肝炎有一定疗效，单用或与其他活血化瘀配伍。红花含有黄酮醇(Flavonols)、查尔酮(Chalcones)、烷链双醇类(Alkane diols)、5-羟色胺衍生物(Serotonin derivatives)、木脂素苷(Lignan glycosides)、聚炔或聚烯类(Polyacetylenes)和糖类物质等成份。红花具有显著的活血化瘀功效，具有抗凝血、抗血栓形成，扩张血管、改善微循环，抗缺血乏氧脑病等作用。红花黄色素(Saffloryellow，SY)是从红花中提取的有效成分，它主要由红花中的查尔酮类物质组成，其中含有红花黄色素A(SY-A)、红花黄色素B(SY-B)、红花黄色素C(SY-C)和羟基红花黄色素A等组成；红花黄色素是红花活血化瘀作用的重要有效部位之一。在心脑血管系统疾病的治疗中，已经有红花注射液用于临床。其工艺标准主要参照部颁标准中药成方制剂20册：108页(WS₃-B-3825-98)生产。但红花注射液的稳定性尚有缺陷，且有不良反应报道。

中国专利《一种红花黄色素药物组合物、其制备方法及其用途)》(专利号：200410008337以下简称“红花专利”)公开了中药材红花重量为乙酰谷酰胺重量按1～50倍的红花黄色素药物组合物，其治疗用途涵盖了治疗闭塞性脑血管疾病，肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等疾病。但是，从疗效上讲，“红花专利”对于心脑血管疾病的治疗效果仍然有不足；从工艺而言，“红花专利”中采用醇沉处理红花提取液，处理繁杂、费时。本发明采用微波和结晶法得到红花黄色素与乙酰谷酰氨组合，其临床疗效优于“红花专利”，工艺上处理简捷、省时，质量标准明确。

发明内容

本发明的一个目的是公开一种含红花黄色素药物组合物。

本发明的又一目的是公开上述含红花黄色素药物组合物的制备方法。

本发明的另一目的是公开上述含红花黄色素药物组合物的用途。

本发明提供的一种药物组合物，该药物组合物由乙酰谷酰胺和红花黄色素组配而成的复方制剂。该复方的通用配比为：乙酰谷酰胺重量为红花黄色素重量的1～150倍，优选10～50。本发明研究人员进行大量实验发现，当药物组合物中乙酰谷酰胺重量为红花黄色素的15～18倍配比时，协同作用最好、疗效最佳，实验结果见表1。

         表1  活性成分配比优选实验

乙酰谷酰胺∶红花黄色素(g/g)	药理作用
		300∶1200∶1150∶1100∶150∶118∶110∶15∶12∶11∶1	±+++++++++++±±

注：±表示药理作用差；+表示药理作用一般；++表示药理作用较好；+++表示药理作用最好。

本发明的红花黄色素可以是任何公知的方法制备的。

本发明所述的红花黄色素也可以采用以下方法制备：

具体地说，红花黄色素制备过程为：红花原药材加水或5％～95％的乙醇或5％～95％丙酮溶媒或三种溶媒任意比的混合溶剂10～200倍体积(W/V)，45～100℃，采用频率为900～2500兆赫、功率为500～15000瓦的微波作用下，提取2～7次，每次15～90分钟，合并提取液，在提取液中加入10％～75％丙酮(V/V)，0.05～5％结晶助剂(W/V，辅助结晶析出的试剂)，静置12～70小时，析出红花黄色素的混合晶体，即得红花黄色素。结晶助剂选自有机碱或生物碱类，如三乙醇胺、乌头碱、钩藤碱、川芎嗪、咖啡因、苦参碱、柯蒲碱、麦角碱及盐类，如柠檬酸钠、醋酸钠、碳酸氢钠、草酸钠等。

优选的红花黄色素制备过程为：

红花原药材加水或5％～75％的乙醇或5％～75％丙酮溶媒30～200倍体积(W/V)，采用频率为1000～2500兆赫、功率为1000～15000瓦的微波作用下，45～85℃条件下提取2～5次，每次15～60分钟，合并提取液，在提取液中加入10％～50％丙酮(V/V)，0.05～2％结晶助剂(W/V，辅助结晶析出的试剂)，静置12～54小时，析出红花黄色素的混合晶体，即得红花黄色素。结晶助剂选自有机碱或生物碱类，如三乙醇胺、乌头碱、钩藤碱、川芎嗪、咖啡因、苦参碱、柯蒲碱、麦角碱及盐类，如柠檬酸钠、醋酸钠、碳酸氢钠、草酸钠等。

取所得红花黄色素10mg，溶于1ml乙醇，加入少许镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，显色不明显。取所得红花黄色素1mg，溶于10ml甲醇，200～500nm进行紫外扫描，在340～420nm(峰带I)和220～270nm(峰带II)之间各有一个强吸收峰，说明，该类化合物属于查尔酮类化合物。取所得红花黄色素1mg，溶于10ml甲醇，用毛细管滴于硅胶薄层板上，喷少量碘化铋钾，无黄色出现，说明生物碱阴性。结晶中无生物碱残留。

所得红花黄色素采用HPLC法检测，ODS柱(5μm，4.6mm*250mm)，流动相为水∶乙腈∶磷酸＝80∶20∶0.5，吸收波长为λ＝390nm，流速1ml/min。柱温30℃，其中羟基红花色素A含量大于等于50％。

本法所得的红花黄色素按照上文所述的比例与乙酰谷酰氨配比即得本发明所述药物组合物。

本发明还提供该药物组合物的制备方法。本发明所述的重量份可以是μg、mg、g、kg等医药领域公知的含量单位，乙酰谷酰胺可采用符合药用标准的原料。

本发明药物组合物中乙酰谷酰胺为临床常用作脑功能改善药，该药能够通过血-脑脊液屏障，通过血-脑脊液屏障后分解为谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)发挥作用，参与中枢神经系统的信息传递，可改善神经细胞代谢，维持神经应激能力及降低血氨的作用，改善脑功能。本发明药物组合物通过二者相互补充协同作用心脑部组织，充分发挥活血化瘀、改善脑功能、改善神经细胞代谢、抗血栓形成、改善微循环等作用，可作为制备治疗闭塞性脑血管疾病，肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等疾病药物方面的应用。也可用于制备治疗冠心病、脉管炎等疾病药物方面的应用。经过临床实验，发明人发现，本发明提供的药物组合物在临床疗效有意想不到的突破，其临床疗效优于“红花专利”，工艺上处理简捷、省时，设备成本低，质量标准明确。

本发明所述的药物组合物可以制备成各种药剂学上的可用剂型，如冻干粉针剂、片剂、滴丸、舌下片、分散片、胶囊剂、颗粒剂、小容量注射剂、大容量注射剂，最优选的剂型为小容量注射剂。本发明所述的药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。比如使用该组合物与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。多种剂型的选择有利于患者治疗的顺应性，改善病人的生活质量具有积极意义。

本发明优选药物组合物小容量注射剂规格为5ml、10ml、20ml，每ml含有乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)30mg，另每ml稀释500倍后，再以蒸馏水为空白，在267±1nm波长处测定吸收度，不得低于0.3。用法如下：静脉滴注，一次5ml～20ml，用5％或10％葡萄糖注射液或0.9％氯化钠注射液250ml～500ml稀释后缓慢滴注，一日一次，10～15天为一疗程。本发明所述的药物组合物为红花黄色素和乙酰谷酰胺按特定比例组配而成的复方制剂，作为制备治疗闭塞性脑血管疾病，肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等疾病药物方面的应用。也可用于制备治疗冠心病、脉管炎等疾病药物方面的应用。

具体实施方式

下面用实施例进一步描述本发明，有利于对本发明及其优点、效果更好的了解，但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。

               实施例1-药物组合物的制备

红花原药材加30倍体积(W/V)15％的乙醇溶媒，采用频率为1100兆赫、功率为12000瓦的微波作用，70℃条件下提取5次，每次50分钟，合并提取液，提取液中加入30％丙酮(V/V)，0.3％结晶助剂咖啡因(W/V，辅助结晶析出的试剂)，静置36小时，析出晶体即为红花黄色素。

按照乙酰谷酰胺重量为红花黄色素的15倍进行配比，即得药物组合物。

              实施例2-药物组合物的制备

红花原药材加50倍体积30％的乙醇溶媒，采用频率为1100兆赫、功率为12000瓦的微波作用，70℃条件下提取5次，每次50分钟，合并提取液，在提取液中加入30％丙酮(V/V)，0.3％结晶助剂三乙醇胺(W/V，辅助结晶析出的试剂)，静置36小时，析出晶体即为红花黄色素。

按照乙酰谷酰胺重量为红花黄色素的18倍进行配比，即得药物组合物。

               实施例3-药物组合物的制备

红花原药材加100倍体积(W/V)45％的乙醇溶媒，采用频率为1100兆赫、功率为12000瓦的微波作用，70℃条件下提取5次，每次50分钟，合并提取液，在提取液中加入30％丙酮(V/V)，0.3％结晶助剂柯蒲碱(W/V，辅助结晶析出的试剂)，静置36小时，析出晶体即为红花黄色素。

按照乙酰谷酰胺重量为红花黄色素的18倍进行配比，即得药物组合物。

                实施例4-药物组合物的制备

红花原药材加120倍体积(W/V)60％的乙醇溶媒，采用频率为1100兆赫、功率为12000瓦的微波作用，70℃条件下提取5次，每次50分钟，合并提取液，在提取液中加入30％丙酮(V/V)，0.3％结晶助剂钩藤碱(W/V，辅助结晶析出的试剂)，静置36小时，析出晶体即为红花黄色素。

按照乙酰谷酰胺重量为红花黄色素的18倍进行配比，即得药物组合物。

                 实施例5-药物组合物的制备

红花原药材加200倍体积(W/V)75％的乙醇溶媒，采用频率为1100兆赫、功率为12000瓦的微波作用，70℃条件下提取5次，每次50分钟，合并提取液，在提取液中加入30％丙酮(V/V)，0.3％结晶助剂川芎嗪(W/V，辅助结晶析出的试剂)，静置36小时，析出晶体即为红花黄色素。

按照乙酰谷酰胺重量为红花黄色素的18倍进行配比，即得药物组合物。

             实施例6-药物组合物的制备

红花原药材加80倍体积(W/V)90％的乙醇溶媒，采用频率为1100兆赫、功率为12000瓦的微波作用，70℃条件下提取5次，每次50分钟，合并提取液，在提取液中加入30％丙酮(V/V)，0.3％结晶助剂草酸钠(W/V，辅助结晶析出的试剂)，静置36小时，析出晶体即为红花黄色素。

按照乙酰谷酰胺重量为红花黄色素的15倍进行配比，即得药物组合物。

           实施例7-药物组合物的大容量注射剂的制备

称取乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)1500g，与由100g红花黄色素(依照实施例1制备)配成50000ml药液，最终制成大容量注射剂500瓶(规格为100ml/瓶)。

在浓配罐中加适量80℃注射用水，向浓配罐中投入360g氯化钠，再加入红花黄色素，充分搅拌使，按配制总体积的0.04％加入活性炭，加热90℃，保温20分钟，降温至50℃，将药液脱炭过滤至稀配罐中，在稀配罐中加入已用适量NaOH溶解的乙酰谷酰胺，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为5.6±0.2，将药液脱炭过滤，药液再经终终端过滤，灌封于100ml输液瓶中，灌封时逐瓶充氮，灭菌，即得输液产品。

           实施例8-药物组合物的小容量注射剂的制备

称取乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)150g，与10 g红花黄色素(依照实施例2制备)可配成5000ml药液，最终制成小容量注射剂1000支(规格为5ml/支)。

在浓配罐中加适量85℃注射用水，向浓配罐中加入红花黄色素，充分搅拌，按配制总体积的0.04％加入活性炭，加热90℃，保温20分钟，降温至50℃，将药液脱炭过滤至稀配罐中，在稀配罐中加入已用适量NaOH溶解的乙酰谷酰胺，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为5.5±0.1，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，灌封于5ml安瓿中，灌封时安瓿逐支充氮，灭菌，即得小容量注射剂。

          实施例9-药物组合物的小容量注射剂的制备

称取乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)150g，与10 g红花黄色素(依照实施例3制备)可配成5000ml药液，最终制成小容量注射剂1000支(规格为5ml/支)。

在浓配罐中加适量88℃注射用水，向浓配罐中加入红花黄色素，充分搅拌，按配制总体积的0.04％加入活性炭，加热90℃，保温20分钟，降温至50℃，将药液脱炭过滤至稀配罐中，在稀配罐中加入已用适量NaOH溶解的乙酰谷酰胺，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为5.7±0.1，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，灌封于5ml安瓿中，灌封时安瓿逐支充氮，灭菌，即得小容量注射剂。

           实施例10-药物组合物的小容量注射剂的制备

称取乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)150g，与10g红花黄色素(依照实施例4制备)可配成5000ml药液，最终制成小容量注射剂1000支(规格为5ml/支)。

在浓配罐中加适量88℃注射用水，向浓配罐中加入红花黄色素，充分搅拌，按配制总体积的0.04％加入活性炭，加热90℃，保温20分钟，降温至50℃，将药液脱炭过滤至稀配罐中，在稀配罐中加入已用适量NaOH溶解的乙酰谷酰胺，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为5.7±0.1，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，灌封于5ml安瓿中，灌封时安瓿逐支充氮，灭菌，即得小容量注射剂。

           实施例11-药物组合物的冻干粉针剂的制备

称取乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)75g，与5g红花黄色素(依照实施例4制备)可配成2500ml药液，最终制成冻干粉针剂1000支。

在浓配罐中加适量80℃～90℃注射用水，向浓配罐中加入红花黄色素，充分搅拌，按配制总体积的0.04％加入活性炭，加热90℃，保温20分钟，降温至50℃，将药液脱炭过滤至稀配罐中，在稀配罐中加入已用适量NaOH溶解的乙酰谷酰胺，充分搅拌使完全溶解，加入右旋糖酐40赋型剂，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为5.5～5.8，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，药液经终端过滤后灌装(装量2.5ml/支)，半加塞后冻干，制成冻干粉针剂产品。

           实施例12-药物组合物的片剂的制备

乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)150g和红花黄色素(依照实施例5制备)10g充分混匀，制成最终制成片剂1000片。

将处方量的红花黄色素、乙酰谷酰胺及80克淀粉混匀，加入20g10％淀粉浆，过20目筛制粒，干燥，过20目筛整粒，加0.5克硬脂酸镁压制成片，即得药物组合物片剂。

           实施例13-药物组合物的胶囊的制备

将200 g红花黄色素(依照实施例6制备)，粉碎后与乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)200g配制最终制成胶囊剂1000粒。

将处方量红花黄色素与乙酰谷酰胺及40g淀粉、3g硬脂酸镁混匀后，过100目筛，装胶囊，即得。

           实施例14-药物组合物的滴丸剂的制备

把200g聚乙二醇PEG600、100g聚乙二醇PEG400、50g乙酰谷酰胺(C7H12N2O4)1和10g红花黄色素(依照实施例1制备)制成滴丸10000粒。

处方量聚乙二醇PEG600和聚乙二醇PEG400在70～80℃条件下中加热熔融，加入处方量的乙酰谷酰胺和红花黄色素充分，充分搅拌均匀，保持熔融状态，由内径9mm、外径9.8mm的滴管，以每分钟80滴的速度滴入液状石蜡冷凝液中，冷凝成丸，挥去表面液状石蜡，即得。

          实施例15-药物组合物的舌下片的制备

乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)150g、红花黄色素(依照实施例5制备)10g、羧甲基淀粉钠100g、甘露醇500g和二氧化硅50g充分混匀，加入5％聚乙烯吡咯烷酮胶浆制粒，干燥，整粒，加入5g硬脂酸镁，压片，制成最终制成舌下片1000片。

实验例1-药物组合物小容量注射剂(依照实施例8-10制备)的外观性状、pH值、炽灼残渣、重金属、蛋白质、热原等注射剂检查项目的检测。

性  状本品为黄红色至棕红色的澄明液体。

pH  值 5.0～7.0(中国药典2000年版二部附录VI)。

炽灼残渣  取本品10ml，置已恒重的坩埚中，依法测定(附录IX J)，遗留残渣不超过2.0％(g/ml)。

重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸2.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后，残渣加水使溶解并移至10ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取1ml加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml，微热溶解后，移至纳氏比色管中，加水稀释成25ml作为样品管。另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干，残渣加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水15ml，微热溶解后，移至纳氏比色管中，加标准铅溶液1ml，再加水稀释成25ml，再在两管中分别加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，至上向下透视，样品管中显出的颜色与对照管比较，不得更深，即含重金属未过百万分之十。

热  原 取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录XI D)，剂量按家兔体重每1kg注射2ml，符合规定。

蛋白质  取本品1ml，加新配置的30％磺基水杨酸试液1ml，混匀，放置5分钟，未出现浑浊。

其  他 符合注射剂项下有关各项规定(中国药典2000版二部附录IB)。

实验例2-药物组合物小容量注射剂(依照实施例8～10制备)中主要组分的定性鉴别

1.本品，作为供试品溶液。另取红花对照药材0.5g，加水10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加无水乙醇，搅拌静置，弃取无水乙醇液，残渣加水1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000版二部附录VI B)试验，吸取供试品溶液0.5μl、对照药材溶液O.3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(6∶2.4∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的棕色斑点。

2.密量取本品1ml，置500ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀。照分光光度法(中国药典2000版二部附录VA)，以蒸馏水为空白，在267±1nm波长处测定吸收度，不得低于0.3。

3.取本品约5ml，加盐酸溶液2ml，加热煮沸约30分钟，并不断补充水分，冷却后调节pH为5～6，取2ml，加茚三酮约2mg，放置或加热，溶液显蓝紫色。

以上3种实验为本发明药物组合物所含组份的定性反应，说明本发明药物组合物中含有确定的组份。

实验例3-药物组合物小容量注射剂(依照实施例8-10制备)中乙酰谷酰胺含量定量测定

乙酰谷酰胺含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录V D)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.2％磷酸溶液(用三乙胺调节pH值3.5)-甲醇(95∶5)为流动相；检测波长为210nm。理论板数按乙酰谷酰胺峰计算不低于2500，每ml含乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)应为27mg～33mg。

测定法：取本品适量，精密称定，用流动相溶解，并定量稀释成每1ml中含乙酰谷酰胺0.1mg的溶液，作为供试品溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取乙酰谷酰胺对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含有0.1mg的溶液，作为对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算。

            对比例1-“红花专利”注射液的制备

             (依照“红花专利”实施例2制备)

取红花3000g，加水煎煮2次，第一次加10倍量水煎煮1.5小时，第二次加6倍量水煎煮80分钟，合并煎液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.22±0.02，加乙醇使含醇量达80％，冷藏，静置44小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.16±0.02，再加乙醇使含醇量达70％，冷藏，静置38小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.16，加9倍量水，冷藏，静置20小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05，约为1000ml，即得红花提取液备用，经适当稀释后，按WS3-B-3825-98的规定方法测定吸收度大于1.0。

称取乙酰谷酰胺(C₇H₁₂N₂O₄)100g，与3000g红花提取所得红花提取液可配成5000ml药液，最终制成小容量注射剂1000支(规格为5ml/支)。在浓配罐中加适量85℃注射用水，向浓配罐中加入红花提取液，充分搅拌，按配制总体积的0.04％加入活性炭，加热90℃，保温20分钟，降温至50℃，将药液脱炭过滤至稀配罐中，在稀配罐中加入已用适量NaOH溶解的乙酰谷酰胺，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为5.5±0.1，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，灌封于5ml安瓿中，灌封时安瓿逐支充氮，灭菌，即得小容量注射剂。

经检测，每ml适当稀释后，再以蒸馏水为空白，在267±1nm波长处测定吸收度，大于0.3(按WS3-B-3825-98的规定)

            对比例2-药物组合物小容量注射剂的临床验证

实验目的：观察药物组合物小容量注射剂(依照实施例9制备)治疗椎基底动脉供血不足的临床疗效。

实验方法：椎基底动脉供血不足患者45例，随机分成两组。治疗组20例用药物组合物小容量注射剂治疗；对照组25例给予”红花专利”注射液(依照“红花专利”实施例2制备)治疗。10天为1个疗程。

1临床资料

45例均为住院病人，根据1986年全国脑血管病会议“诊断椎基底动脉供血不足”的标准，结合脑彩超和脑动脉血管造影显示确诊：治疗组20例，男10例，女10例；年龄39～79岁，平均59岁；平均病程4.5年；合并高血压2例，抑郁症3例，糖尿病2例。对照组25例，男13例，女12例；年龄42～78岁，平均62岁；平均病程4.2年；合并高血压4例，抑郁症3例，糖尿病2例。两组年龄、性别、病程和病情具有可比性。

2治疗方法

对照组给予”红花专利”注射液(依照“红花专利”实施例2制备)静脉滴注，一次10～20ml，用0.9％氯化钠注射液500ml稀释后缓慢滴注，一日一次，有伴随症状者常规对症处理。10天1个疗程。高血压、抑郁症、糖尿病患者常规给予相应的药物治疗。

治疗组给予药物组合物小容量注射剂(依照实施例9制备)静脉滴注，一次10～20ml，用5％或10％葡萄糖注射液250ml～500ml稀释后缓慢滴注，一日一次，10天1个疗程。高血压、抑郁症、糖尿病患者常规给予相应的药物治疗。

观察项目：病人症状及体征：眩晕、共济失调、眼球震颤、复视、脑彩超和脑动脉血管造影。

3治疗结果

3.1疗效标准

3.1.1症状及体征好转：眩晕时间减少50％以上，共济失调、眼球震颤、复视3项中有2项消失.

3.1.2近愈：眩晕时间减少75％以上，共济失调、眼球震颤、复视三项全部消失。

3.2结果见表2。

     表2两组好转、近愈率和脑彩超和脑动脉血管造影比较比较

组别	n/例	好转(％)	近愈(％)	脑彩超和脑动脉血管造影比较
					对照组治疗组	2520	80.095.0	48.080.0	32.0％75.0％，

两组比较，P均＜0.05。

4结论

椎基底动脉供血不足主要由于椎基底动脉血管变窄、痉挛或血流变慢所致。临床用药原则是活血化瘀，改善脑功能和扩张血管。实验结果：治疗组的脑彩超和脑动脉血管造影显示治疗组椎基底动脉供血不足的改善及病人主诉眩晕、共济、失调、眼球震颤、复视的改善均优于对照组，说明药物组合物小容量注射剂是一种治疗椎基底动脉供血不足的有效药物。

      对比例3-药物组合物小容量注射剂的临床验证

实验目的：观察药物组合物小容量注射剂(依照实施例9制备)治疗瘫痪的临床疗效。

1.临床资料

共50例患者均为我院脑外科住院病人，其中男24例，女26例；年龄最小36岁，最大78岁，平均年龄56.4岁；肌力0级6例，级10例，级20例，级16例，入院病例随机分为2组，各25例，对照组与治疗组年龄、性别、病因、肌力相似，具有可比性。

2.治疗方法

治疗组：药物组合物小容量注射剂静脉滴注，一次10～30ml，用0.9％氯化钠注射液500ml稀释后缓慢滴注，一日一次，有伴随症状者常规对症处理。

对照组：”红花专利”注射液(依照“红花专利”实施例2制备)静脉滴注，一次10～30ml，用0.9％氯化钠注射液500ml稀释后缓慢滴注，一日一次，有伴随症状者常规对症处理。

3治疗结果

3.1疗效标准

按照0～5级肌力分级法，治疗后肌力上升2个级别或以上为显效，1个级别为有效，无改变者为无效。

3.2统计方法：数据结果以X检验，P＜0.05，认为有显著差异。

3.3结果

表3药物组合物小容量注射剂治疗偏瘫的对比

组别	n	显效	有效	无效	总有效率％
						治疗组对照组	2525	95	117	513	80.0％48.0％

治疗组疗效明显优于对照组，差异有显著性意义，P＜0.05。

4.结论

用药物组合物小容量注射剂作为注射药物，疗效显著，对严重偏瘫者疗效较好。

           对比例4-药物组合物小容量注射剂的临床验证

实验目的：观察药物组合物小容量注射剂(依照实施例9制备)治疗冠心病的临床疗效。

1.一般资料：

共诊治冠心病患者80例，其中男48例，女32例；年龄40～49岁10例，50～59岁46例，60～70岁24例。冠心病诊断标准均符合1979年WHO“关于缺血性心脏病的命名及诊断标准”。随机选取80例患者分成治疗组40例和对照组40例。

2.治疗方法：

2.1治疗组：药物组合物小容量注射剂静脉滴注，一次10～30ml，用0.9％氯化钠注射液500ml稀释后缓慢滴注，一日一次，7天为1个疗程，连续2个疗程。

2.2对照组：口服消心痛10mg次，1日3次；心痛定10mg次，1日3次。7天1个疗程，连服2个疗程。

3.结果用药前后观察症状、体征及心电图变化情况，以判定疗效。

3.1疗效判定标准：

3.1.1胸痛、心悸等症状基本消失，心电图显示缺血状态基本恢复正常为显效；

3.1.2胸痛、心悸症状减轻或发作次数减少，心电图显示心肌缺血状态改善为有效；

3.1.3用药2周后症状无明显改善，心电图显示缺血状态未有好转为无效。

3.2治疗结果

治疗组显效21例，有效15例，无效4例，总有效率为90％。对照组显效22例，有效8例，无效10例，总有效率为75％。

临床观察结果表明，药物组合物小容量注射剂治疗冠心病总有效率为90％，对照组为75％，在改善临床症状和恢复心胆缺血状态方面，治疗组优于对照组，而且未见明显毒副作用。

Claims (9)

1.一种含红花黄色素药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括乙酰谷酰胺及红花黄色素，乙酰谷酰胺重量为红花黄色素重量的1～150倍。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，其中所述的乙酰谷酰胺重量为红花黄色素重量的10～50倍，优选15～18倍。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，红花黄色素采用HPLC法检测，ODS柱，流动相为水∶乙腈∶磷酸＝80∶20∶0.5，吸收波长为λ＝390nm，流速1ml/min，柱温30℃，其中羟基红花色素A含量大于等于50％。

4.根据权利要求1～3之任一所述的药物组合物，其特征在于，所述的红花黄色素按照以下方法制备：

红花原药材加溶媒在微波作用下，提取，合并提取液，提取液中加入丙酮，和结晶助剂，静置，析出混合晶体，即得红花黄色素。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述的红花黄色素按照以下方法制备：红花原药材加溶媒，45～100℃，采用频率为900～2500兆赫、功率为500～15000瓦的微波作用下，提取2～7次，每次15～90分钟，合并提取液，在提取液中加入10％～75％丙酮，0.05～5％结晶助剂，静置12～70小时，析出红花黄色素的混合晶体，即得红花黄色素，结晶助剂选自有机碱或生物碱类，如三乙醇胺、乌头碱、钩藤碱、川芎嗪、咖啡因、苦参碱、柯蒲碱、麦角碱及盐类，如柠檬酸钠、醋酸钠、碳酸氢钠、草酸钠等。

6.根据权利要求5所述的红花黄色素药物组合物，其特征在于，所述的红花黄色素按照以下方法制备：红花原药材加水或5％～75％的乙醇或5％～75％丙酮溶媒30～200倍体积，采用频率为1000～2500兆赫、功率为1000～15000瓦的微波作用下，45～85℃条件下提取2～5次，每次15～60分钟，合并提取液，在提取液中加入10％～50％丙酮，0.05～2％结晶助剂，静置12～54小时，析出红花黄色素的混合晶体，即得红花黄色素，结晶助剂选自有机碱或生物碱类，如三乙醇胺、乌头碱、钩藤碱、川芎嗪、咖啡因、苦参碱、柯蒲碱、麦角碱及盐类，如柠檬酸钠、醋酸钠、碳酸氢钠、草酸钠等。

7.根据权利要求1～6之任一所述的药物组合物，其特征在于，所述的组合物可以制备成各种药剂学上的可用剂型，如冻干粉针剂、片剂、滴丸、舌下片、分散片、胶囊剂、颗粒剂、小容量注射剂、大容量注射剂；优选的可以制备成剂型为小容量注射剂。

8.权利要求1～6之任一所述的药物组合物作为制备治疗闭塞性脑血管疾病，肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍疾病药物方面的应用。

9.权利要求1～6之任一所述的药物组合物作为制备治疗冠心病、脉管炎疾病药物方面的应用。