CN1739682A - 一种用于腔道的裸花紫珠软胶囊及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于腔道的裸花紫珠软胶囊，由裸花紫珠提取物干膏粉和辅料，经滴制或者压制法而制成。本品通过腔道给药，局部药物浓度高，抗菌消炎，解毒止血，见效快，疗效更好，无全身毒副作用，安全性高，疗效稳定。

Description

一种用于腔道的裸花紫珠软胶囊及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药制剂及其制备工艺，特别涉及一种中药软胶囊及其制备方法。

背景技术

裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.)是一种地方民间习用药材，性味苦、平，具有清热解毒、收敛止血、消炎镇痛等功效，已被制成片剂、胶囊剂和栓剂等剂型，临床上广泛用于治疗各种出血症、炎症。其中，采用裸花紫珠制成的裸花紫珠栓，消炎解毒，收敛止血。临床上用于宫颈炎、白色念珠菌性阴道炎等。

现有裸花紫珠栓，是将裸花紫珠提取物与聚乙二醇6000和聚乙二醇1500作为基质制备而成。其缺点在于：1、溶出速度慢，导致人体吸收慢，影响药物疗效；2、由于栓剂基质的关系，药效成分不容易溶出，影响到药物的生物利用度。3、栓剂的硬度较大，使用时容易损伤腔道粘膜。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种起效快、患者容易接受、使用方便的裸花紫珠软胶囊。同时，提供一种裸花紫珠软胶囊的制备工艺。

本发明的目的是采用如下技术方案来实现：其特征在于它包括裸花紫珠提取物干膏粉和药用辅料，裸花紫珠提取物干膏粉和辅料的重量比为1∶1-1∶6。所述辅料还包括助悬剂，助悬剂选自蜂蜡，氢化植物油、椰子油、蔗糖酯或硬脂酸单甘酯、氢化棕榈油或棕榈油、聚乙二醇中的任意一种或者数种。裸花紫珠软胶囊中每1000粒含由1000g-4000g裸花紫珠药材进行提取得到的干膏粉。将裸花紫珠干膏粉与辅料混合均匀后研磨，制成软胶囊内容物，用囊壳材料将软胶囊内容物采用滴制或者压制法制成裸花紫珠软胶囊；所述的辅料包括选自稀释剂植物油或者PEG400中的一种或几种。其中，所述的辅料优选色拉油和PEG400的混合物。

1、本发明的裸花紫珠软胶囊处方由裸花紫珠一味药材组成。

裸花紫珠软胶囊的制备方法是：

(1)取裸花紫珠，加水煎煮三次，第一次两小时，第二次2小时，第三次1小时。合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏，喷雾干燥，得到裸花紫珠干膏粉；

(2)按制备1000粒裸花紫珠软胶囊，取裸花紫珠干膏粉100g-800g的用量备料；

(3)将(2)加适当的辅料，混合均匀后研磨，制成软胶囊内容物；

(4)用囊壳材料将软胶囊内容物(3)采用滴制或者压制法制成裸花紫珠软胶囊。

2、质量控制

裸花紫珠软胶囊的质量是采用薄层色谱鉴别和高效液相色谱测定含量来进行控制。

3、给药方法

裸花紫珠软胶囊的使用方法是采用腔道如阴道或直肠给药。

具体实施方式

下面通过具体的实施例来进一步说明本发明。

[实施例1]一种裸花紫珠软胶囊，它含有主要成分为裸花紫珠提取物干膏粉。以制备1000粒软胶囊为例，需用裸花紫珠药材2000g。

制备工艺如下：

(1)取裸花紫珠药材2000g，加水煎煮两次，第一次、第二次各2小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏。提取工艺考察总黄酮含量(以无水芦丁计算)。结果见表1。

表1 无水芦丁含量

提取次数	第一次	第二次	第三次
				无水芦丁，mg/g干膏	210.5	58.1	6.8

(2)将浸膏喷雾干燥，得到干膏粉。备用。

(3)将(2)得到的干膏粉加PEG400和菜籽色拉油，混合研磨，得到软胶囊内容物。

(一)考察其内容物的颗粒度及其稳定性和流动性，确定制剂处方。

颗粒度考察方法如下：过200目筛，不得有固形物残留。

稳定性和流动性考察方法：取制备好的软胶囊内容物，装入直径1cm左右的离心管中，装入高度5cm，然后按1000转/分离心0.5小时，计算其沉降比F(F＝离心后浊液的高度H/5)，用玻璃棒挑起配制好的软胶囊内容物，考察其流动性。结果见表2。结果显示，裸花紫珠提取物干膏粉和辅料的重量比为1∶4，其中药用辅料为PEG400∶色拉油＝1∶1时，过胶体磨能够得到较好的软胶囊内容物。

表2 裸花紫珠软胶囊内容的稳定性和流动性

编号	干膏粉	辅料成分及其配比		F值	流动性
						PEG400	色拉油
		1	100g					50g	100	0.86	-
2	100g			100	50	0.85	+
		3	100g					150	100	0.80	+
4	100g			150	150	0.55	++
		5	100g					200	200	0.50	+++

注：+流动，-不流动

最后确定软胶囊内容物处方如下：

裸花紫珠干膏粉                  200g

PEG400                          400g

色拉油                          400g

制成                            1000粒

(4)将(3)得到的软胶囊内容物在软胶囊压制机上以压制法制备成软胶囊。

(二)裸花紫珠软胶囊与裸花紫珠栓的溶出度对比。

采用浆法，用智能溶出度仪对裸花紫珠软胶囊与裸花紫珠栓中芦丁进行溶出度比较。试验方法：取裸花紫珠栓3粒(自制，按照国家药品监督管理局颁布的“裸花紫珠栓”质量标准WS-10072(ZD-0072)-2002中的处方和工艺制备而成)，裸花紫珠软胶囊6粒，置智能溶出度仪(天津大学仪器厂)内，加入0.1mol盐酸溶液500ml，转速100转/分，温度37℃，分别在10分钟，20分钟，30分钟，60分钟定时取样5ml(随即补充5ml溶出液)，滤过。测定溶液中的芦丁含量。

芦丁的测定方法：

对照品溶液的制备精密称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品15mg，置10ml量瓶中，加乙醇适量，置温水中加热使溶解，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每ml含无水芦丁0.3mg)。

标准曲线的制备精密量取对照品溶液1.0ml，2.0ml，3.0ml，4.0ml，5.0ml，6.0ml，分别置棕色量瓶中，各加水至6ml，加5％亚硫酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的溶液为空白。照分光光度法(中国药典2005年版一部附录VB)，在510nm波长处测定吸光度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法将取出的溶出液量取1ml，至25ml量瓶中，加水6ml，加5％亚硫酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中相当于芦丁的重量，计算，即得。

结果见表3。

结果表明，裸花紫珠软胶囊的芦丁溶出率远高于裸花紫珠栓中芦丁的溶出，证明了本发明的优势。

表3 裸花紫珠栓和裸花紫珠软胶囊中芦丁的溶出比较

溶出累计时间	裸花紫珠栓和裸花紫珠软胶囊中芦丁的溶出率(％)
										栓剂1	栓剂2	栓剂3	软胶囊1	软胶囊2	软胶囊3	软胶囊4	软胶囊5	软胶囊6
	0	0	0	0	0	0	0	0	0										0
10										1.5	1.6	1.4	4.5	4.6	4.5	4.8	5.0	5.1
	20	3.8	3.7	4.6	4.9	11.2	12.4	8.9	10.6										12.4
30										22.5	23.6	24.8	66.8	67.8	69.1	64.4	67.2	70.4
	60	51.4	55.4	51.2	92.5	91.5	94.5	93.6	96.7										95.8

本发明通过下面试验证明其毒理作用和药效作用：

一、动物急性毒性试验和长期毒性试验：

1、材料

药物裸花紫珠软胶囊  自制，批号：040112，临用前剪开软胶囊，倾出内容物，以1％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)液配制成所需浓度的混悬液备用(以下以代号LHZZT表示)；

动物SD系大鼠，6～8周龄，体重(105.4±14.1)g，雌雄各半；昆明种小鼠体重(20±2)g，雌雄各半，大小鼠均由广州中山医科大学实验动物中心提供，合格证号分别为粤检证字第04018/04010号；

仪器ACTdiff血球计数仪(美国库尔特公司)，全自动生化分析仪(美国贝克曼公司)。

2、方法

急性毒性

灌胃给药的最大耐受量(MTD)测定雌雄各半小鼠20只，禁食12h后一次性灌胃给予1.5g.ml^-1浓度(相当于生药量计，此浓度已达灌胃给药的最大浓度)的受试药0.4ml.10g^-1，于给药后4h内严密观察并记录小鼠毒性反应情况和死亡情况，然后每天上、下午各1次，连续观察7d。

长期毒性

分组与剂量大鼠60只，随机分为3组，每组20只，雌雄各半，分笼饲养，每笼5只，高剂量组(2.5g.g^-1)、低剂量组(1.25g.kg^-1)及CMC-Na对照组。

给药方法每日上午8时各组分别按体重灌胃给予LHZZT2.5g.kg^-1、1.25g.kg^-1及等容积1％CMC-Na，给药容积为1ml.100g^-1，连续28d，每周称体重1次，并按体重变化调整给药量。一般观察给药后观察记录动物活动、毛发、外观、粪便等情况，每d1次，连续4wk，第28d各组分别取12只大鼠(雌雄各半)，眼眶后静脉丛采血后脱臼处死，留存大量继续观察7d后取血并处死。

血液学检查  测定所取血液中血红蛋白(Hb)、白细胞(WBC)、中性白细胞、淋巴细胞(LC)、单核细胞含量。

血液生化检查对所采集血液进行丙氨酸氨基转换酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)等各项生化指标的检测，以观察LHZZT对大鼠肝肾功能的影响。

器官病检对大鼠进行系统尸检：取心、肝、脾、肾、肺等器官称重并计算脏器系数；取高剂量组及对照组大鼠上述5种脏器进行病理组织学检查。

3、结果

急性毒性连续观察7d，全部小鼠未见毒性反应及死亡，故其MTD＞60g.kg^-1。

长期毒性

一般观察  给药组及对照组大鼠在试验期间行为活动正常，毛发光滑，摄食量未见减少，粪便性状无异常，各组大鼠无一死亡，大鼠体重均见增加，给药组与对照组相比差异无显著性。血液学检查各给药组与对照组比较，血液学指标差异无显著性。

血液生化检查  各给药组与对照组比较，血液生化指标差异无显著性。

器官病检各组动物的5种脏器外观正常，脏器系数与对照组相比无明显差异，高剂量组2号标本心肌间质血管轻度扩张充血，其余均未见病理学改变，停药7d后上述脏器组织形态均未见改变。

3结果

由于预试验未能找出致死量，故只能测定MTD值，ig给药MTD值＞60g.kg^-1，相当于成人每日常用量(相当每日生药0.043g.kg^-1的1395倍以上，说明小鼠口服给药的LD₅₀必大于60g.kg^-1，提示本受试药安全。高剂量组给大鼠连续灌服28d，对动物外观、体重增长、摄食量、血象、肝肾功能、各脏器系数无明显改变，主要脏器病理学检查见高剂量2号组标本心肌间质血管轻度扩张充血，但停药7d后，留存动物病理学检查均未见改变，说明该受试药在体内无明显毒性的靶器官，提示裸花紫珠软胶囊临床用药安全。

二、裸花紫珠软胶囊的主要药效学实验：

1、实验材料

药物(1)裸花紫珠软胶囊，自制，批号：040122，实验时取囊心药液用生理盐水稀释。(2)肾上腺色腙片，中外合资河南精忠威尔药业有限公司，批号：0405091。(3)阿斯匹林片，焦作市化学制药厂，批号：0407031。(4)降酶灵胶囊，广东肇庆制药厂，批号：040102。

动物昆明种小鼠，SD种大鼠，均由广州第一军医大学动物中心提供，合格证号：小鼠粤检证字04010号；大鼠粤检证字04018号。

菌种乙型溶血性链球菌(32210)、金黄色葡萄球菌(26001)、肺炎双球菌(31001)、大肠杆菌(44110)和伤寒沙门氏菌(5009)，均购自北京药品生物制品检定所，由海南省医院感染监控中、心细菌室传代冻干保存。

2、方法与结果

抗菌试验  取灭菌小试管，按液体试管法，用培养基稀释受试药使其最终的质量浓度为0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.0063和0.0031g.mL^-1，每管装1mL，再加入0.05mL新鲜相应菌液，置37℃培养箱中培养18h，因受试药颜色不透明，再用接种环从各试管中取一环分别接种于普通平板和血平板上，培养18h后观察有无细菌生长，以细菌不生长的最高药物稀释度为该药的最低抑菌浓度(MIC)。结果：裸花紫珠软胶囊是无菌的，置37℃培养箱中培养18h没有细菌生长。裸花紫珠软胶囊对金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、肺炎双球菌等均有不同程度的抑菌作用，其中以金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌的抑菌作用最强。

对小鼠毛细血管通透性的影响  小鼠40只，雌雄各半，体重(体质量)18～22g，随机均分4组：(1)对照组(给予等容积的蒸馏水)；(2)阿斯匹林组0.2g.kg^-1；(3)、(4)组分别给予裸花紫珠软胶囊内容物2g.kg^-1和1g.kg^-1。各组每日PO给药1次，连续3d，末次给药后30min各鼠静脉注射质量分数为0.1％的伊文思兰生理盐水溶液10mL.kg^-1，随即每只给予质量分数为0.16％的HAc生理盐水0.2mL，15min脱颈椎处死，每只小鼠用6mL生理盐水数次冲洗腹腔并吸出洗涤液，合并后加生理盐水至10mL，离心上清液于722分光光度计(590nm)测其光密度(OD)值，以OD值作组间统计学处理。结果：裸花紫珠软胶囊(内容物)2g.kg^-1和1g.kg^-1组对冰醋酸所致的小鼠毛细血管通透性增加有非常显著的抑制作用(P＜0.01)。

对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响  小鼠分组及给药同2.2，于末次给药后1h，给小鼠右耳滴以二甲苯0.05mL.只^-1，左耳作对照，15min后处死动物，用直径6mm的打孔器将双耳同部位等面积切下，在感量为1mg的精密分析天平上称重，以左右耳片重量之差，计出各组肿胀度，求出肿胀抑制率(％)，并与对照组比较组间差异.结果：裸花紫珠软胶囊2g.kg^-1和1g.kg^-1组能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀(P＜0.01)。

对蛋清所致大鼠足跖肿的影响  体质量为150～180g的大鼠40只，雌雄各半，随机均分4组：(1)对照组(给予等容积的蒸馏水)；(2)阿斯匹林组0.15g.kg^-1；(3)、(4)组分别给予裸花紫珠软胶囊内容物1.5g.kg^-1和0.75g.kg^-1，各组每日PO给药1次，连续3d，于末次给药后1h各组右后足垫皮下注射质量分数为100％的新鲜鸡蛋清0.05mL.只^-1致炎；测量致炎前后不同时间致炎的足跖关节以下的体积变化，以致炎前后体积差值为肿胀度，并与对照组比较差异的显著性。结果：裸花紫珠软胶囊1.5g.kg^-1和0.75g.kg^-1组，在蛋清致炎后2～6h有显著抑制大鼠足跖肿胀作用(P＜0.05和0.01)。

对小鼠断尾出血时间的影响  体质量为18～22g的小鼠40只，雌雄各半，随机均分4组：(1)对照组(给予等容积的蒸馏水)；(2)肾上腺色腙片组0.0072g.kg^-1；(3)、(4)组分别给予裸花紫珠软胶囊内容物2g.kg^-1和1g.kg^-1，各组每日PO给药1次，连续3d，于末次给药后30min，以利剪将小鼠尾尖0.5cm处横断，待血液自然流出后计时，每隔15s用滤纸吸去血滴1次，直至血液自然停止，秒表记录并计算出血时间，与对照组比较差异的显著性。结果：裸花紫珠软胶囊2g.kg^-1和1g.kg^-1能非常显著地缩短小鼠出血时间(P＜0.01)。

对小鼠凝血时间的影响小鼠分组及给药同2.5，于末次给药后30min，采用玻片法，用眼科弯镊迅速摘去一侧眼球，载玻片2端各滴1滴血，血滴直径约5mm，每隔30s用清洁大头针自血滴边缘向内轻轻挑动1次，以有血丝挑起时间为凝血时间，另1滴血供复检用，与对照组进行显著性比较。结果：裸花紫珠软胶囊2g.kg^-1和1g.kg^-1组可明显缩短凝血时间(P＜0.01)。

3、结果

裸花紫珠软胶囊是以裸花紫珠叶为资源，具有消炎解毒、收敛止血功效，已有研究证明：紫珠叶抗菌作用均较其花、根、茎、皮强，如100％裸花紫珠叶煎液对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球敏感，对绿脓杆菌、伤寒杆菌、嗜盐菌及肠炎杆菌和脑膜炎双球菌较敏感。用紫珠叶粉敷出血处并稍加压迫，有良好的止血效果.

我们用中药实验方法观察了裸花紫珠软胶囊的抗菌消炎、止血药理作用，结果表明：裸花紫珠软胶囊对引起感染的常见细菌有抗菌作用，对冰醋酸所致的小鼠腹部毛细血管通透性增加，二甲苯引起的小鼠耳肿胀、大鼠蛋清性足跖肿均有明显的抑制作用，能使小鼠出血时间及凝血时间缩短，其实验结果与文献报道相一致。

研究表明，裸花紫珠软胶囊是一种较好的抗菌消炎、止血药，通过阴道给药，外用治疗，局部药物浓度高，疗效更好，主要治疗宫颈炎、白色念珠菌性阴道炎等妇科炎症。无全身副作用，安全性高，比口服吸收毒性更小，长期使用安全，因此，值得临床推广应用。

三、裸花紫珠软胶囊与裸花紫珠栓抗家兔细菌性阴道炎之比较试验

1、材料

药物  (1)裸花紫珠软胶囊，自制，批号：040122，(2)裸花紫珠栓，海南中元制药有限公司，批号：040401。

菌株  白色念珠菌，购自北京药品生物制品检定所。

2、方法

动物分组  将家兔36只随机分为对照组，模型组，裸花紫珠软胶囊组及裸花紫珠栓阳性对照组，每组9只。

细菌性阴道炎模型制备  将白色念珠菌复苏、传代，用无菌生理盐水配制成10⁵CFU·mL^-1的菌液，先用无菌的0.01mL·L^-1PBS(pH8.5)冲洗家兔阴道3次(每次间隔5min)，然后用无菌棉拭子蘸取感染液反复涂擦家兔阴道1～2min。隔日再复涂一次。接种细菌后逐日观察家兔阴道病变情况，并取阴道分泌物涂片染色镜检。当家兔阴道明显充血、红肿并伴有大量脓性分泌物，取分泌物涂片，镜下可见大量的感染菌和坏死细胞时，家兔细菌性阴道炎模型制备成功。27只试验家兔接种细菌后12d全部呈现阴道炎症状。

裸花紫珠软胶囊抗家兔细菌性阴道炎试验  感染对照组及各给药组家兔接种感染菌后逐日观察，待出现典型的阴道炎症状后，分别给予赋形剂阴道栓、裸花紫珠软胶囊及裸花紫珠栓，1枚·次^-1，bid；正常对照组家兔不接种细菌，给予赋形剂阴道栓1枚·次^-1，bid。观察记录感染动物给药后7d阴道病变情况，阴道局部拍片，取阴道拭子涂片染色镜检，家兔活杀，取阴道组织固定、切片、HE染色、镜检并拍片。

判定标准  痊愈：阴道外观无充血、红肿，无脓性分泌物，阴道拭子涂片镜检不见感染菌和坏死细胞，阴道组织切片中粘膜完整、粘膜下组织基本正常。好转：阴道外观有轻度充血、红肿，有少量脓性分泌物，阴道拭子涂片镜检可见少量感染菌和少量坏死细胞，组织切片镜检可见阴道粘膜有轻微的缺损，粘膜下组织中毛细血管扩张、红细胞增多，组织中有少量中性粒细胞浸润。无效：阴道外观充血、红肿，有大量脓性分泌物，阴道拭子涂片镜检见大量感染菌和坏死细胞，阴道组织切片镜检可见粘膜有缺损，粘膜下组织中大量的毛细血管扩张、红细胞增多，有大量中性粒细胞浸润。

3、结果  裸花紫珠软胶囊与裸花紫珠栓抗家兔细菌性阴道炎之比较结果见表4。

表4  裸花紫珠软胶囊与裸花紫珠栓抗家兔阴道炎之比较试验结果(n＝9)

组别	痊愈数    痊愈率    好转数    有效率/只       (％)      /只       (％)
		模型组裸花紫珠软胶囊组裸花紫珠栓组正常对照组	0         0         0         08         88.89     1         100.007         77.78     1         88.89无阴道炎症状

动物试验结果表明，裸花紫珠软胶囊是一种较好的抗菌消炎药，通过阴道给药，吸收快，局部药物浓度高，治疗宫颈炎、白色念珠菌性阴道炎等炎症比栓剂疗效更好，并且胶囊壳质软，不易损伤阴道粘膜，是一种比栓剂更有优势的阴道用剂型，值得临床推广应用。

Claims (8)

1、一种用于腔道的裸化紫珠软胶囊，其特征在于采用裸化紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.)为药材制成。

2、根据权利要求1所述的用于腔道的裸花紫珠软胶囊，其特征在于软胶囊中每1000粒含由1000g-4000g裸花紫珠药材进行提取得到干膏粉。

3、根据权利要求2所述的用于腔道的裸花紫珠软胶囊，其特征在于它包括裸花紫珠提取物干膏粉和药用辅料，裸花紫珠提取物干膏粉和辅料的重量比为1∶1-1∶6。

4、根据权利要求2所述的用于腔道的裸花紫珠软胶囊，其特征在于它包括裸花紫珠提取物干膏粉和药用辅料，裸花紫珠提取物干膏粉和辅料的重量比为1∶4，其中药用辅料为PEG400∶色拉油＝1∶1。

5、根据权利要求2所述的用于腔道的裸花紫珠软胶囊，其特征在于所述辅料还包括助悬剂，助悬剂选自蜂蜡，氢化植物油、椰子油、蔗糖酯或硬脂酸单甘酯、氢化棕榈油或棕榈油、聚乙二醇中的任意一种或者数种。

6、根据权利要求1所述的用于腔道的裸花紫珠软胶囊，其特征在于腔道是指阴道或直肠。

7、根据权利要求2所述的用于腔道的裸花紫珠软胶囊，其特征在于它是将裸花紫珠干膏粉与辅料混合均匀后研磨，制成软胶囊内容物，用囊壳材料将软胶囊内容物采用滴制或者压制法制成裸花紫珠软胶囊；其中，所述的辅料包括选自稀释剂植物油或者PEG400中的一种或几种。

8、根据权利要求2或7所述的用于腔道的裸花紫珠软胶囊，其特征在于所述裸花紫珠提取物干膏粉采用如下方法制成：

(1)取裸花紫珠，加水煎煮三次，第一、二次各2小时，第三次1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成稠膏，喷雾干燥成干膏粉；

(2)按制备1000粒裸花紫珠软胶囊，取裸花紫珠干膏粉100g-800g的用量备料。