CN1724014A - 威灵仙总皂苷提取物、其制备方法及其在制备药物中的用途 - Google Patents
威灵仙总皂苷提取物、其制备方法及其在制备药物中的用途 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及天然药物领域，具体涉及中药威灵仙的有效部位提取物，由以下方法制备得到：用乙醇回流，离心，上大孔树脂，洗脱等步骤。本发明的威灵仙有效部位提取物总皂苷含量高达50－90％。药理学试验表明，本发明的威灵仙有效部位提取物可以用于治疗免疫性炎症。
Description
技术领域
本发明涉及天然药物领域，具体涉及中药威灵仙的有效部位提取物，其制备方法及其用于治疗免疫性炎症的新用途。
背景技术
类风湿性关节炎等免疫性炎症为临床常见病和多发病，类风湿性关节炎属于自身免疫性疾病，属于免疫性炎症范畴，世界范围内大约有1-2％的人口患有类风湿性关节炎，据卫生部统计，我国关节炎患者总数已超过1亿，其中至少有400万类风湿关节炎患者，药物治疗是最主要的治疗方法。目前国际上治疗该病的药物主要有非甾体类抗炎药(NASIDs，如双氯芬酸，阿司匹林、布洛芬、尼美舒利和萘丁美酮等)、DMARDs(disease-modifying antirheumaticdrugs，如甲氨喋呤，金盐，抗疟药，柳氮磺胺吡啶，雷公藤、四环素和环孢素等)，新的生物药(如来氟米特，Kineret)和免疫调节剂(Rnbrel，Remicade，Humira)等进行治疗，但这些药物均存在明显的不良反应，如损伤胃肠道黏膜导致消化性溃疡，肝损害、皮疹、骨髓抑制、作用选择性差，易于诱发感染等。因此，对于有效成分明确、质量可控及安全高效的中药有效部位或单体在研制类风湿性关节炎等免疫性炎症的治疗药物方面，具有诱人的市场前景和开发价值。
威灵仙为我国药典收载品种，其药材来源为毛茛科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck，棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎。秋季采挖，除去泥沙，晒干。具有祛风除湿，通络止痛的功效。用于风湿痹痛，肢体麻木，筋脉拘挛，屈伸不利，骨哽咽喉等症，这几种植物中富含皂苷类成分，现已从其中分离鉴定出十余种齐墩果烷型三萜皂苷，其苷元主要为齐墩果酸和常春藤苷元。由于中药的传统用药习惯，一般威灵仙作为药物使用时都采用水煎、或用其挥发油(已有注射液用于临床)，它们的缺点是有效部位含量低，疗效差，又由于受到制备技术的限制，目前还没有提取自威灵仙的总皂苷含量较高的产品问世，也未见其报道。迄今为止尚未发现有关威灵仙总皂苷类成分在治疗类风湿性关节炎等免疫性炎症方面的生物活性和临床研究的文献报道。
发明内容
本发明公开了一种利用现代分离技术得到的新的威灵仙有效部位提取物，其总皂苷含量高，达50-95％，药理活性好。药理试验证明，其安全性好，可以有效地治疗免疫性炎症。
本发明的具体技术方案如下：
本发明的威灵仙总皂苷提取物，由以下方法制备得到：取威灵仙药材，用20-60％浓度的乙醇液回流提取，提取液浓缩，过滤或离心，滤液或上清液上大孔树脂，依次用20-50％的碱水、水、20-30％乙醇液、50-70％乙醇液，洗脱至流出液无色，收集50-70％乙醇洗脱液，减压蒸干，即得威灵仙总皂苷。其中的碱水优选氨水。
上述的威灵仙总皂苷提取物，其中大孔树脂优选为HPD100型、HPD200型、HPD300型或101型大孔树脂。更优选的大孔树脂为HPD100型或101型大孔树脂。
上述的威灵仙总皂苷提取物，其中用于洗脱大孔树脂的洗脱液优选依次为20-30％氨水、水、20％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液。
本发明的威灵仙总皂苷提取物，其中总皂苷含量非常高，达50％-95％。
本发明威灵仙总皂苷中主要由齐墩果烷型三萜皂苷组成，在该总皂苷中含有三萜皂苷类化合物，如3-O-β-D-吡喃型核糖-(1-3)-α-L-鼠李糖-(1-2)-α-L-吡喃型阿拉伯糖基oleanolicacid，3-O-β-D-吡喃型核糖-(1-3)-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-2)-α-L-吡喃型阿拉伯糖基oleanolicacid，3-O-β-D-吡喃型葡萄糖-(1-4)-β-D-吡喃型核糖-(1-3)-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-2)-α-L-吡喃型阿拉伯糖hederagenin-28-O-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-4)-β-D-吡喃型葡萄糖-(1-6)-β-D-吡喃型葡萄糖酯，3-O-β-D-吡喃型核糖-(1-3)-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-2)-α-L-吡喃型阿拉伯糖oleanolic acid 28-O-β-D-吡喃型葡萄糖酯，hederagenin-28-O-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-4)-β-D-吡喃型葡萄糖-(1-6)-β-D-吡喃型葡萄糖酯，3-O-β-D-吡喃型核糖-(1-3)-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-2)-α-L-吡喃型阿拉伯糖hederagenin，3-O-β-D-吡喃型核糖-(1-3)-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-2)-α-L-吡喃型阿拉伯糖hederagenin28-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-4)-β-D-吡喃型葡萄糖-(1-6)-β-D-吡喃型葡萄糖酯，3-O-β-D-吡喃型葡萄糖-(1-4)-β-D-吡喃型核糖-(1-3)-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-2)-α-L-吡喃型阿拉伯糖hederagenin，3-O-β-D-吡喃型葡萄糖(1-4)-β-D-吡喃型葡萄糖-(1-4)-β-D-吡喃型核糖-(1-3)-α-L-吡喃型鼠李糖-(1-2)-α-L-吡喃型阿拉伯糖hederagenin等。
本发明的威灵仙总皂苷提取物可以作为药物活性成分制备成各种临床用药物制剂，其中含有治疗有效量的威灵仙总皂苷提取物及药学上可接受的载体。还可以作为活性部位与其它中药提取物/有效部位或相关化学合成药物与药学上可接受的赋型剂或辅料一起用于制备药物组合物。
上述两种药物组合物均可采用制剂学的常规方法制备成各种剂型，如胶囊、片剂、丸剂、口服液、颗粒剂、酊剂、缓释剂等胃肠道给药剂型及注射剂、外用制剂等胃肠外给药剂型。。
药理学试验表明，本发明威灵仙总皂苷提取物具有抗免疫性炎症的用途。本发明威灵仙总皂苷经口服给药，能明显抑制佐剂关节炎大鼠的原发性和继发性足跖肿胀，表明该提取物能明显抑制急慢性炎症，因此，可以用该总皂苷作为活性部位和成分制备治疗免疫性炎症的药物，优选治疗的疾病为类风湿性关节炎。
建议临床患者使用的威灵仙总皂苷的剂量约为200-800mg/天，具体可遵医嘱。
具体实施方式
实例1
威灵仙总皂苷的制备
取威灵仙药材10公斤，以12倍量60％乙醇回流提取2次，提取液合并，减压浓缩至无醇味，高速离心，上清液上HPD100型大孔树脂柱吸附后，依次用80L 10％氨水溶液、100L水、60L 20％乙醇液、60L 70％乙醇液洗脱至流出液无色，收集70％乙醇洗脱液，减压蒸干，即得威灵仙总皂苷提取物470克，含量63％。
实施例2
本发明威灵仙总皂苷的急性毒性试验
药物配制：取实施例1所制备的威灵仙总皂苷用0.9％氯化钠注射液溶解配制成所需浓度的澄清溶液。
动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重18-22g。
试验方法与结果：
1.威灵仙总皂苷灌胃给药小鼠急性毒性试验
取小鼠50只，按体重随机分为5组，每组10只，雌雄各半。小鼠禁食12h后，5组小鼠分别灌胃给予威灵仙总皂苷浸膏粉1.434、1.075、0.806、0.605、0.454g/kg。剂间比为1∶0.75，给药容积为0.4ml/20g，观察并累计给药后(一次给药)14天内动物死亡数，输入电脑用Bliss法计算LD50及95％可信限，结果见表1。
表1.威灵仙总皂苷(ig)小鼠LD50测定(Bliss法)
| 剂量(g/kg) | 对数剂量 | 动物数(只) | 逐日死亡情况1d 2-14d | 死亡数(只) | 死亡率(％) | 实验机率单位 | LD50(g/kg) | 95％可信限(g/kg) |
| 1.4341.0750.8060.6050.454 | 0.160.03-0.09-0.22-0.34 | 1010101010 | 108530 | 00000 | 108530 | 1008050300 | 6.965.845.004.483.04 | 0.78 | 0.67～0.91 |
由表1可见，威灵仙总皂苷灌胃给药小鼠LD50为0.78g/kg，95％可信限为0.67～0.91g/kg。中毒小鼠给药后1h开始出现自发活动减少、弓肩、缩背、竖毛、抽搐、最后呼吸困难而死亡，死亡发生在给药后1天之内。对死亡小鼠立即进行解剖，肉眼观察各脏器未见明显病变。
2.威灵仙总皂苷腹腔给药小鼠急性毒性试验
取小鼠50只，按体重随机分为5组，每组10只，雌雄各半。小鼠禁食6h后，5组小鼠分别腹腔给予威灵仙总皂苷浸膏粉1.246g/kg，0.934g/kg，0.700g/kg，0.525g/kg和0.394g/kg。剂间比为1∶0.75，给药容积为0.4ml/20g，观察并累计给药后(一次给药)14天内动物死亡数，输入电脑用Bliss法计算LD50及95％可信限，结果见表1。
表2.AR(ip)小鼠LD50测定(Bliss法)
| 剂量(g/kg) | 对数剂量 | 动物数(只) | 逐日死亡情况1d 2-14d | 死亡数(只) | 死亡率(％) | 实验机率单位 | LD50(g/kg) | 95％可信限(g/kg) |
| 1.2460.9340.7000.5250.394 | 0.10-0.03-0.15-0.28-0.40 | 1010101010 | 10 07 05 02 00 0 | 107520 | 1007050200 | 6.965.525.004.163.04 | 0.72 | 0.62～0.84 |
由表2可见，威灵仙总皂苷腹腔给药小鼠LD50为0.72g/kg，95％可信限为0.62～0.84g/kg。中毒小鼠给药后50min开始出现自发活动减少、弓肩、缩背、竖毛、抽搐、最后呼吸困难而死亡，死亡发生在给药后1天之内。对死亡小鼠立即进行解剖，肉眼观察各脏器未见明显病变。
试验结论：
威灵仙总皂苷灌胃给药小鼠LD50为0.78g/kg，95％可信限为0.67～0.91g/kg生药。该药腹腔给药小鼠LD50为0.72g/kg，95％可信限为0.62～0.84g/kg生药。
实施例3
本发明威灵仙总皂苷对大鼠佐剂性关节炎的影响
一、试验材料
1.1 药物与试剂
药物1号为用实施例1方法制备的威灵仙总皂苷。
药物2号为实施例1方法制备中氨水、水、20％乙醇液洗脱液浓缩制成，即非有效部位。
| 药物 | 批号 | 剂量 | 总皂苷含量 | 有效部位 |
| 1号2号 | 041020041021 | 0.047g浸膏＝1g药材0.165g浸膏＝1g药材 | 63.00％4.99％ | 有效部位非有效部位 |
剂量折算：
威灵仙药材人用量：6g生药/日/人，0.1g生药/kg。
大鼠剂量：0.1g/kg(人)×6倍＝0.6g生药/kg。故受试药1-2号药相当于0.6g生药/kg的浸膏粉作为低剂量；相当于1.2g生药/kg的浸膏粉作为高剂量。
1号药高、低剂量分别为56.4mg浸膏粉/kg和28.2mg浸膏粉/kg
2号药高、低剂量分别为198mg浸膏粉/kg和99 mg浸膏粉/kg
地塞米松磷酸钠注射液：由江苏吴中实业股份有限公司苏州第六制药厂。批号：020802(1ml∶5mg)；人用量4mg/日/人，0.07mg/kg；大鼠剂量：0.07mg/kg(人)×6倍＝0.4mg/kg
阿司匹林：南京恒生制药厂，批号：030505
Freund’s完全佐剂：由sigma公司提供
丙二醛(MDA)测定试剂盒，南京建成生物工程研究所提供，批号：20010330。
超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒，南京建成生物工程研究所提供，批号：20010402。
1.2 受试动物
SD大鼠，雄性，第二军医大学实验动物中心。
1.3 试验仪器
7550紫外—可见分光光度计，上海分析仪器厂生产
二、试验方法与结果
2.1 受试药1-2号预防给药对大鼠原发性佐剂性关节炎的影响：
取140g-190g雄性大鼠70只，按体重随机分为7组，每组10只，分别为模型对照组(0.5％CMC-Na)、阳1组(地塞米松0.4mg)和阳2组(阿司匹林500mg)，受试药1-2号各两个剂量组(高、低)。1号药高、低剂量分别为56.4和28.2mg浸膏粉/kg；2号药高、低剂量分别为198和99mg浸膏粉/kgmg；给药容积为0.5ml，各组每天灌胃给药一次，连续给药7天。于第7天(致炎前)用玻璃容积法测大鼠右后足体积，于末次给药后30分钟给大鼠右后足皮内注射0.05ml Freund’s完全佐剂致炎，18小时后测量大鼠右后足跖体积，并计算其肿胀率(％)和肿胀抑制率(％)，而后将大鼠处死，剖取胸腺和脾，计算其脏器指数。将各组数据作组间t检验。取右后足跖关节、胸腺和脾，做病理组织学检测。结果见表1和表2。
肿胀率＝(致炎后足跖容积-致炎前足跖容积)/致炎前足跖容积×100％
肿胀抑制率＝(对照组平均肿胀率-给药组平均肿胀率)/对照组平均肿胀率×100％
表1 受试药1-2号对原发性佐剂性关节炎大鼠足跖肿胀的影响
(
X±S，n＝10)
| 组别 | 剂量(mg浸膏粉/kg) | 肿胀率(％) | 抑制率(％) |
| 1高1低2高2低地塞米松阿司匹林模型对照 | 56.428.2198.099.00.4500.0 | 10.54±7.62*12.65±5.44*13.23±11.6818.26±14.0710.07±6.00**11.61±2.17*22.38±12.12 | 52.9343.4940.9018.4155.0248.13 |
注：*P＜0.05，**P＜0.01，与模型对照组比较
由表1可见，受试药1号高、低剂量及阿司匹林组可显著地降低由Freund’s完全佐剂引起的原发性右后足跖肿胀(P＜0.05)；地塞米松组可极显著地降低由Freund’s完全佐剂引起的原发性右后足跖肿胀(P＜0.01)。
表2受试药1-2号对原发性佐剂性关节炎大鼠胸腺及脾重指数及体重的影响
(
X±S，n＝10)
/kg)
| 组别 | 剂量(mg浸膏粉 | 体重(g) | 胸腺(g/100g体重) | 脾(g/100g体重) |
| 1高1低2高2低地塞米松阿司匹林模型对照 | 56.428.2198.099.00.4500.0 | 201.1±11.20**206.2±15.90**200.4±21.48**204.7±20.49**155±9.20203.6±12.49**194.8±0.80** | 0.162±0.021**0.165±0.015**0.168±0.021**0.169±0.019**0.063±0.0320.174±0.072**0.192±0.10** | 1.108±0.126**1.135±0.166**1.234±0.250**1.061±0.100**0.401±0.0760.935±0.136**1.257±0.308** |
注：**P＜0.01，与地塞米松组比较
由表2可见，各受试药组、阿司匹林和模型对照组动物胸腺、脾重指数及体重明显高于地塞米松组，与地塞米松组比较有极显著性差异(P＜0.01)；但与模型对照组比较无显著性差异。
病理检测结果表明，与模型对照组比较受试药1-2号低、高剂量组右后足跖关节形态好于模型对照组，其中1号低、高剂量组形态好于2号。但地塞米松组脾小体体积缩小，数目也减少。胸腺已部分被脂肪组织替代，胸腺组织内淋巴细胞数目减少。表明受试药1号、2号药可显著抑制大鼠原发性佐剂性关节炎，但对该模型大鼠的胸腺和脾重指数无明显抑制作用，而地塞米松对该模型大鼠的胸腺和脾重指数有明显抑制作用。
2.2 受试药1-2号治疗给药对大鼠继发性佐剂性关节炎的影响：
取体重140g-190g雄性70只大鼠，用玻璃容积法测量大鼠左后足跖容积，之后右后足跖皮内注射0.05ml Freund’s佐剂致炎，于致炎后19天测量大鼠左后足跖容积，之后称量体重，按体重随机分为7组，分组同2.1。即日给大鼠灌胃给药，每天给药一次，连续7天，给药剂量及给药容积同2.1。于末次给药后30分钟用玻璃容积法测大鼠左后足跖容积，计算其肿胀率(％)和肿胀抑制率(％)，并观察前肢、尾、耳部红色斑点的发生情况。之后将动物放血处死，取血和脏器(胸腺、脾、左踝关节)，血液离心后测血清MDA和SOD含量，称量胸腺、脾重，计算脏器指数。并将胸腺、脾、左后踝关节做病理组织学检测。将各组数据作组间t检验。结果见表3-5。
表3 受试药1-6号对继发性佐剂性关节炎大鼠足跖肿胀影响(
X±S，n＝10)
| 组别 | 剂量(mg浸膏粉/kg) | 肿胀率(％) | 抑制率(％) |
| 高1低1高2低2地塞米松阿司匹林模型对照 | 56.428.2198.099.00.4mg/kg500 | 4.62±5.42**10.72±9.24**10.34±9.54**11.65±10.36*3.06±2.53**5.12±4.35**25.64±27.34 | 83.1160.7762.1857.37186.1281.28 |
注：*P＜0.05，**P＜0.01，与模型对照组比较
由表3可见，1号受试药组(高、剂量)、2号受试药高剂量、地塞米松组及阿司匹林组可极显著降低由Freund’s完全佐剂引起的继发性左后足跖肿胀(P＜0.01)；2号受试药低剂量可显著地降低由Freund’s完全佐剂引起的继发性左后足跖肿胀(P＜0.05)。另外，动物前肢、尾、耳部红色斑点的发生率是1号＜2号＜模型对照组。2个阳性对照组动物前肢、尾、耳部红色斑点的发生率与1号相当。
表4 受试药1-2号对继发性佐剂性关节炎大鼠胸腺及脾重指数及体重
的影响(
X±S，n＝10)
| 组别 | 剂量(mg浸膏粉/kg) | 体重(g) | 胸腺(g/100g体重) | 脾(g/100g体重) |
| 高1低1高2低2地塞米松阿司匹林模型对照 | 56.428.2198990.4500.0 | 262.100±18.36**263.600±27.14**276.400±32.11**278.100±35.10**219.100±25.96283.200±28.13**279.500±35.05** | 0.164±0.031**0.163±0.047**0.149±0.049**0.145±0.057**0.065±0.0120.155±0.015**0.249±0.066** | 0.822±0.122**0.702±0.217**0.556±0.148**0.815±0.145**0.253±0.0470.727±0.113**1.022±0.253** |
注：*P＜0.05，**P＜0.01，与地塞米松组比较
由表4可见，各受试药组、阿司匹林组和模型对照动物体重和胸腺、脾重指数均明显高于地塞米松组。与地塞米松组比较有极显著性差异(P＜0.01)；各受试药组动物体重和胸腺、脾重指数与模型对照组比较无显著性差异；
病理检测结果表明，与模型对照组比较受试药1-2号低、高剂量组动物的左后足跖关节形态好于模型对照组，其中1号低、高剂量组形态好于2号。但地塞米松组动物的脾小体体积缩小，数目也减少。胸腺已部分被脂肪组织替代，胸腺组织内淋巴细胞数目减少。表明受试药1号、2号药可显著抑制大鼠原发性佐剂性关节炎，但对该模型大鼠的胸腺和脾重指数无明显抑制作用，而地塞米松对该模型大鼠的胸腺和脾重指数有明显抑制作用。
表5受试药1-2号对继发性佐剂性关节炎大鼠血清MDA和SOD的影响(
X±S，n＝10)
| 组别 | 剂量(mg浸膏粉/kg) | MDA(U/L) | SOD(U/L) |
| 高1低1高2低2地塞米松阿司匹林模型对照 | 56.428.2198.099.00.4mg/kg500.0 | 0.160±0.055**0.168±0.065**0.186±0.057*0.196±0.053*0.143±0.052**0.145±0.061**0.238±0.034 | 115.287±4.937**118.265±4.706**119.425±2.700**120.929±1.979**113.579±4.102**119.566±1.489**107.670±3.179 |
由表5可见，1号受试药组(高、低剂量)动物血清MDA显著低于模型对照组，与模型对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，2号受试药组(高、低剂量)动物血清MDA也显著低于模型对照组，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.05)；各受试药组、阿司匹林及地塞米松组动物血清SOD显著高于模型对照组，与模型对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)
三、试验结论：
在大鼠原发性佐剂性关节炎模型，受试药1号高、低剂量及阿司匹林组预防给药可显著地降低由Freund’s完全佐剂引起的原发性右后足跖肿胀(P＜0.05)。地塞米松组可极显著地降低由Freund’s完全佐剂引起的原发性右后足跖肿胀(P＜0.01)。各受试药组、阿司匹林和模型对照组动物胸腺、脾重指数及体重明显高于地塞米松组，与地塞米松组比较有极显著性差异(P＜0.01)；但与模型对照组比较无显著性差异。病理检测结果表明，与模型对照组比较受试药1-2号低、高剂量组动物的右后足跖关节形态好于模型对照组，其中1号低、高剂量组形态好于2号。但地塞米松组动物的脾小体体积缩小，数目也减少。胸腺已部分被脂肪组织替代，胸腺组织内淋巴细胞数目减少。表明受试药1号、2号药可显著抑制大鼠原发性佐剂性关节炎，但对该模型大鼠的胸腺和脾重指数无明显抑制作用，而地塞米松对该模型大鼠的胸腺和脾重指数有明显抑制作用。
在大鼠继发性佐剂性关节炎模型，1号受试药组(高、剂量)、2号受试药高剂量、地塞米松组及阿司匹林组治疗给药可极显著降低由Freund’s完全佐剂引起的继发性左后足跖肿胀(P＜0.01)；2号受试药低剂量可显著地降低由Freund’s完全佐剂引起的继发性左后足跖肿胀(P＜0.05)。另外，动物前肢、尾、耳部红色斑点的发生率是1号＜2号＜模型对照组。2个阳性对照组动物前肢、尾、耳部红色斑点的发生率与1号相当。各受试药组、阿司匹林组和模型对照动物体重和胸腺、脾重指数均明显高于地塞米松组。与地塞米松组比较有极显著性差异(P＜0.01)；各受试药组动物体重和胸腺、脾重指数与模型对照组比较无显著性差异；病理检测结果表明，与模型对照组比较受试药1-2号低、高剂量组动物的左后足跖关节形态好于模型对照组，其中1号低、高剂量组形态好于2号。但地塞米松组动物的脾小体体积缩小，数目也减少。胸腺已部分被脂肪组织替代，胸腺组织内淋巴细胞数目减少，表明受试药1号、2号药可显著抑制大鼠原发性佐剂性关节炎，但对该模型大鼠的胸腺和脾重指数无明显抑制作用，而地塞米松对该模型大鼠的胸腺和脾重指数有明显抑制作用。
1号受试药组(高、低剂量)动物血清MDA显著低于模型对照组，与模型对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，2号受试药组(高、低剂量)动物血清MDA也显著低于模型对照组，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.05)；各受试药组、阿司匹林及地塞米松组动物血清SOD显著高于模型对照组，与模型对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)。表明该药有抗氧化作用。
实施例4
威灵仙总皂苷片剂
取实施例1方法制备的威灵仙总皂苷100mg与淀粉100mg，糊精100mg混合，用适量30％乙醇作湿润剂，制成软材，常规方法制粒，加入适量硬脂酸镁混合，制成片剂。
实施例5
威灵仙总皂苷缓释胶囊
取实施例1方法制备的威灵仙总皂苷100mg与卡波姆934p30mg，羟丙基甲基纤维素K15M 90mg，微晶纤维素100mg，磷酸钙70mg混合，用10％聚乙烯吡咯烷酮k30乙醇溶液适量，制成软材，常规方法制粒，装入硬胶囊中，制成缓释胶囊。
Claims (9)
1、一种威灵仙总皂苷提取物，其特征在于由以下方法制备得到：取威灵仙药材，用20-60％浓度的乙醇液回流提取，提取液浓缩，过滤或离心，滤液或上清液上大孔树脂，依次用20-50％的碱水、水、20-30％乙醇液、50-70％乙醇液，洗脱至流出液无色，收集50-70％乙醇洗脱液，减压蒸干，即得威灵仙总皂苷。
2、权利要求1的威灵仙总皂苷提取物，其中大孔树脂为HPD100型、HPD200型、HPD300型或101型大孔树脂。
3、权利要求2的威灵仙总皂苷提取物，其中大孔树脂为HPD100型或101型大孔树脂。
4、权利要求1的威灵仙总皂苷提取物，其中的碱水是氨水。
5、权利要求1的威灵仙总皂苷提取物，其中用于洗脱大孔树脂的洗脱液依次为20-30％氨水、水、20％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液。
6、权利要求1至5中任一项的威灵仙总皂苷提取物，其特征是：其中总皂苷含量为50％-95％。
7、一种药物组合物，其特征是：含有治疗有效量的权利要求1至6中任一项的威灵仙总皂苷提取物及药学上可接受的载体。
8、权利要求1至6中任一项的威灵仙总皂苷提取物用于制备抗免疫性炎症药物的用途。
9、权利要求8的威灵仙总皂苷提取物，其中的免疫性炎症为类风湿性关节炎。
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