CN1703416A

CN1703416A - 包含一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂的组合物和方法

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Publication number: CN1703416A
Application number: CNA038092298A
Authority: CN
Inventors: M·T·史密斯; L·布朗; M·B·P·哈维; C·M·威廉斯
Original assignee: University of Queensland UQ
Current assignee: University of Queensland UQ
Priority date: 2002-03-20
Filing date: 2003-03-20
Publication date: 2005-11-30
Anticipated expiration: 2023-03-20
Also published as: CN100430399C; EP1495026A4; EP1495026A1; CA2479098A1; AU2003209850B2; US20030219494A1; WO2003078437A1; AU2003209850A1; JP2005524676A

Abstract

诱导、促进或利于疼痛缓解的组合物和方法被公开了。这些组合物和方法包括一氧化氮受体，它直接或间接的阻止、减轻或逆转阿片样物质敏感性降低的发展，还包括激活阿片样物质受体的化合物，其中阿片样物质受体是阿片样物质敏感性降低的主题。此组合物和方法阻止或减轻疼痛，特别是在神经病变病症中，更特别是在如疼痛性糖尿病性神经病变(PDN)之类的外周神经病变病症中。优选的一氧化氮供体是L－精氨酸，同时优选的激活阿片样物质受体的化合物是吗啡和羟考酮。包含一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂的缀合化合物也被公开了。

Description

包含一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂的组合物和方法

发明领域

本发明总体涉及诱导、促进或利于疼痛缓解的组合物和方法。更特别的是，本发明涉及在阻止或减轻疼痛的方法或组合物中使用直接或间接阻止、减轻或逆转阿片样物质敏感性降低的发展的化合物，以及激活阿片样物质敏感性降低主题的阿片样物质受体的化合物。甚至更特别的是，本发明计划在脊椎动物(特别是人)受试者疼痛相关的病症中，特别是在神经病变病症中，更特别是在如疼痛性糖尿病性神经病变(painful diabetic neuropathy)(PDN)之类的外周神经病变病症中，使用两种或更多的化合物减轻疼痛的症状。这些化合物可以被单独提供或与其它化合物(如对于控制神经病变病症，特别是外周神经病变病症(如PDN)有用的化合物)联用。本发明的一个实施方案涉及在为阻止或缓解包括人在内的脊椎动物的疼痛的治疗中使用一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂，特别是μ-阿片样物质受体激动剂，或K₂-阿片样物质受体激动剂。在另一实施方案中，本发明包括在包含人的脊椎动物中产生镇痛的方法，包括同时、连续或分别施用一氧化氮供体和μ-阿片样物质受体激动剂，或一氧化氮供体和K₂-阿片样物质受体激动剂。

发明背景

疼痛性糖尿病性神经病变(PDN)是糖尿病常见的衰弱性并发症，它会导致麻木、虚弱、麻刺感、敏感性上升、剧烈疼痛，以及受影响的神经的功能丧失，这可能发生于整个自主和躯体神经系统。有40％到60％的糖尿病人会发展成轻度到中度的PDN，有5％到10％的病人进一步发展成严重的临床症状，这可能使截指或截肢之类的外科手术干预成为必要。PDN的临床表现从对轻压或触及之类的温和刺激的过敏(感觉易位(allodynia))到对更强刺激的夸张反应(痛觉过敏)(Merskey，International Association for the Study of Pain.Elsevier 2261986)。

由于还没有对PDN的预防治疗(Sima等人，Diabetologia 42 773-881999)，因此对病症的治疗主要是缓解措施。这一缓解措施也代表了重大的治疗障碍，因为可获得的最有效的止痛药(μ-阿片样物质受体激动剂)对于PDN无效。对阿片样物质不敏感的机制还不清楚，但已有研究显示薄弱的低血糖(glycaemic)控制会降低疼痛耐受和疼痛阈值，因而降低吗啡之类的止痛剂的效果(Morley等人，Am J Med 77(1)：79-83 1984)。另外，可能存在与糖尿病相联系的吗啡药代动力学的改变(Courteix等人，J Pharmacol Exp Ther 285(1)：63-70 1998)和/或阿片样物质受体与激动剂亲和力的变化。

一些使病人发展成PDN的糖尿病危险因素包括薄弱的代谢控制、血脂异常、身体质量指数和微白蛋白尿，但是这些因素也不是绝对的：许多对糖尿病控制良好的病人发展成了PDN，相反许多对糖尿病控制较差的病人没有发展成此病症。这类观察结果的混淆，加之动物和人糖尿病模型的差异，使对PDN成因的阐释变得困难。目前，关于这一病症的发展有两个广泛的理论：血管功能障碍理论和代谢功能障碍理论。

血管功能障碍理论认为对神经(神经血管或神经滋养血管)的血液供给的变化继血液动力学的异常(如血小板的加速聚集和血液粘度的增加)而发生(Fusman等人，Acta Diabetol 38(3)：129-34 2001)。另外，可能发生神经血管的小血管的病理改变(如血管内皮细胞产生一氧化氮的降低和血管收缩物质反应的加速)(McAuley等人，ClinSci(Lond)99(3)：175-9 2000)。这些独立或协同发生的血液动力学和血管的改变能够导致神经束膜缺血性改变和在病人和动物糖尿病模型上观察到的随后的神经内膜缺氧(Cameron等人，Diabetologia 44(11)：1973-882001)。这些异常的最终结果是可能引起PDN症状和征候的神经损伤。

另一方面代谢功能障碍理论认为神经损伤是通过多元醇代谢途径的激活和非酶蛋白质的糖化介导引起的。这些途径诱导线粒体和胞质NAD+/NADH氧化还原失衡以及神经的能量缺失，这能最大程度的损伤神经和神经血管组织(Obrosova等人，FASEB J 16(1)：123-5 2002)。另外，这些代谢变化被认为会激活蛋白激酶C(PKC)，它能提高疼痛反应(Kamei等人，Expert Opin Investig Drugs 10(9)：1653-64 2001)和降低阿片样物质受体的敏感性(Wang等人，Brain Res 723(1-2)：61-91996)。另外，提高的PKC活力被认为会减小μ-阿片样物质受体与配体的结合亲和力(Ohsawa等人，Brain Res 764 244-8 1998)。这些代谢异常的结果是在PDN病人身上所见到的神经损伤和阿片样物质受体敏感性的降低。

这两种理论可能并不是相互排斥的，两理论的支持者都认为在血管功能障碍或代谢异常的下游，在神经滋养血管内的血管活性化合物的产生存在失衡，这导致了糖尿病神经的缺血性改变。

在所有的内源性血管扩张剂中，一氧化氮是最为有效的，因此可能是降低合成和随后的糖尿病诱导的血管紧张度(vascular tone)收缩的候选者。除了松弛血管平滑肌，它还抑制血小板的聚集过程、有丝分裂和培养的血管平滑肌的增殖、白细胞的粘附(Wroblewski等人，Prev Cardiol 3(4)：172-177 2000)。一氧化氮由血管内皮中一组被称为一氧化氮合酶的酶产生。一氧化氮合酶(NOS)有三种同工型，根据它们的活性或它们被首先描述的组织类型命名。这些酶都将内源性的底物(精氨酸)转变为瓜氨酸，在此过程中产生NO。

在获得本发明的工作中，发明者在糖尿病性神经病变动物模型中检测了所提供的一氧化氮供体(L-精氨酸)在促进神经滋养血管中小血管扩张中的作用，并且意外的发现此氨基酸的使用使动物对阿片样物质敏感，因而能够使用吗啡减轻神经病变性疼痛。根据先前的证据，此发现确实是令人吃惊的，先前的证据发现精氨酸通过改变吗啡的吸收和分布而减弱阿片样物质的止痛效果(Bhargava等人，Pharmacol BiochemBehav 61(1)：29-33 1998)，并发现抑制一氧化氮的产生能重建吗啡的止痛生理效果(Bian等人，Gen Pharmacol 30(5)：753-7 1998)。

发明概述

部分基于测定，本发明断言一氧化氮供体(如L-精氨酸)能够广泛的阻止、减弱和/或逆转对于阿片样物质受体激动剂减小的止痛敏感性的发展，包括由长期施用激动剂所导致的对阿片样物质受体激动剂耐受的发展和对与神经病变病症，特别是外周神经病变病症(如PDN)有关的阿片样物质受体激动剂低敏感性的发展。因此，本发明一方面对阿片样物质受体激动剂止痛敏感性降低(或处于发展的危险之中)的受试者提供产生镇痛的方法。在一实施方案中，通过对受试者施用对于阻止、减弱和/或逆转降低的止痛剂敏感性有效量的一氧化氮供体而产生镇痛。所述一氧化氮供体和产生镇痛有效量的阿片类物质止痛剂分开、同时或顺序施用。合适的，阿片样物质止痛剂作为阿片样物质受体激动剂激活导致止痛敏感性降低的相同阿片样物质受体。在一实施方案中，减小的止痛剂敏感性与神经病变病症有关，包括外周神经病变病症，如PDN或相关病症。一氧化氮供体和阿片样物质受体激动剂适合以一种或多种分别包含药物上可接受的载体和/或稀释剂的组合物的形式被使用。组合物可以通过注射、局部施用或口服途径被使用，包括持久释放模式的施用，其中施用的时间和数量足以在受试者中产生镇痛效果。

一氧化氮供体适合选自任何在体内被转变，或降解或代谢成一氧化氮，或提供一氧化氮资源的物质。在一实施方案中，一氧化氮供体是L-精氨酸或它的类似物或衍生物。在一实施方案中，阿片样物质受体激动剂是μ-阿片样物质受体激动剂或在体内被代谢或转变成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物。例如，阿片样物质受体激动剂可以选自吗啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氢吗啡酮、羟吗啡酮，它们的类似物、衍生物或前药和这些物质中的任何一种的药物兼容盐。合适的μ-阿片样物质受体激动剂是吗啡或它的类似物或衍生物或前药，或这些物质的药物兼容盐。在另一实施方案中，阿片样物质受体激动剂是K2-阿片样物质受体激动剂。合适的K₂-阿片样物质受体激动剂是羟考酮或它的类似物或衍生物或前药，或这些物质的药物兼容盐。

在另一方面，本发明提供对具有降低的阿片样物质受体激动剂止痛敏感性(或处于发展的危险之中)的对象产生镇痛的方法。在一实施方案中，通过对对象使用能够有效阻止、减弱和/或逆转降低的止痛剂敏感性的数量的L-精氨酸而产生镇痛。所述L-精氨酸与足以产生镇痛效果的量的阿片样物质止痛剂分开、同时或顺序施用，其中所述阿片样物质与作为止痛敏感性降低的主题的阿片样物质受体激动剂激活同一种阿片样物质受体。

在另一方面，本发明提供止痛组合物，它一般包含在数量上分别能使对象有效产生镇痛的一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂。典型的是，对象表现出降低的阿片样物质受体激动剂止痛敏感性，或处于其发展的危险之中。在一此类型的实施方案中，阿片样物质止痛剂与作为止痛敏感性降低的主题的阿片样物质受体激动剂激活相同阿片样物质受体。

在一实施方案中，一氧化氮供体与阿片样物质止痛剂相联系，包括以分离的化合物或缀合的形式提供一氧化氮受体和阿片样物质止痛剂。一氧化氮供体和阿片样物质受体激动剂合适以药物兼容的盐形式存在，并以以上广泛描述的有效的量被使用。在一实施方案中，组合物一般包含L-精氨酸和阿片样物质止痛剂，其中所述阿片样物质止痛剂与作为止痛敏感性降低的主题的阿片样物质受体激动剂激活相同的阿片样物质受体。适合的是，降低的止痛剂敏感性与神经病变病症相关，包括如PDN之类的外周神经病变病症或相关病症。

还在另一方面，本发明涉及一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂在制造用于在对象中产生镇痛的药物中的用途。适合的是，对象具有神经病变病症，包括如PDN之类的外周神经病变病症或相关病症，或处于其发展的危险之中。在一实施方案中，本发明包括L-精氨酸和阿片样物质止痛剂在制造用于在对象中产生镇痛的药物中的用途。

附图简述

图1图示描述在6个月研究时期中，在STZ诱导的糖尿病大鼠中机械性异常性疼痛(PDN的定义症状)的发展和保持。对重量匹配的对照大鼠和注射STZ 8天(n＝10)、3(n＝10)、9(n＝46)、12(n＝53)和24(n＝36)周后的STZ糖尿病大鼠的左后足显示基线脚掌收缩阈值的时间进程。与非糖尿病对照大鼠(11.9±0.2g)的脚掌收缩阈值平均值(±SEM)相比，在STZ糖尿病大鼠中测定的相应值明显降低(p＜0.05)，在注射STZ 8天之后降到8.0(±0.3)g，3周之后降到5.2(±0.3)g。之后，基线脚掌收缩阈值保持相对恒定，直到注射STZ之后的12周(p＞0.05)。在注射STZ之后的12周到24周，脚掌收缩阈值从4.7(±0.1)g到3.3(±0.1)g进一步变小，但是明显降低。

图2图示表示在注射STZ 12周之后，吗啡的除痛觉能力被完全废除了。注射STZ之后3、9、12、24周的糖尿病大鼠对皮下注射吗啡的平均(±SEM)剂量-反应曲线被展示了。

图3图示表示在整个24周的研究时期，羟考酮的效率被保持，虽然在12周的时候其除痛觉能力降低了4倍，但是相对于非糖尿病对照大鼠这一能力保持到第24周未变。注射STZ之后3、9、12、24周的糖尿病大鼠对皮下注射羟考酮的平均(±SEM)剂量-反应曲线被展示了。

图4图示表示食物补充L-精氨酸3周之后，发生在注射STZ 9到12周之间的吗啡除痛觉能力的废除被阻止了。喂以标准大鼠料的雄性糖尿病DA大鼠或在注射STZ之后的9到24周给予L-精氨酸食物添加剂的大鼠在注射STZ后9、12和24周皮下注射吗啡之后的除痛觉平均(±SEM)剂量-反应曲线被展示了。与在喂以L-精氨酸食物添加剂一周之后的非糖尿病对照大鼠中测定的剂量反应曲线进行了比较。

图5图示表示食物补充L-精氨酸3周之后，发生在注射STZ后9到12周之间的羟考酮能力的两倍降低被阻止了。喂以标准大鼠料的雄性糖尿病DA大鼠或在注射STZ后9到24周给予L-精氨酸食物添加剂的大鼠在注射STZ后9、12和24周后皮下注射羟考酮的除痛觉剂量反应平均值(±SEM)曲线被展示了。与在喂以L-精氨酸食物添加剂一周之后的非糖尿病对照大鼠中测定的剂量反应曲线进行了比较。

图6图示表示在STZ糖尿病大鼠中，食物补充L-精氨酸将吗啡减轻机械性异常性疼痛的能力增加到约为在非糖尿病对照大鼠中发现的90％。特定的，附图分别表示对喂以和没有喂以食物L-精氨酸添加剂的注射STZ后9、12、16、20和24周的雄性糖尿病DA大鼠皮下注射吗啡(5.45和6.1mg/kg，n＝7、6、5、5和6，每剂量)之后，平均(±SEM)除痛觉程度对时间的曲线。

图7图示表示食物补充L-精氨酸将羟考酮减轻机械性异常性疼痛的能力增加到约为喂以标准饲料的、注射STZ后9周的糖尿病大鼠中发现的150％。特定的，附图分别表示对喂以和没有喂以食物L-精氨酸添加剂的注射STZ后9、12、20和24周的雄性糖尿病DA大鼠皮下注射羟考酮ED₅₀(2.0mg/kg，n＝7、7、6和4，每剂量)之后，平均(±SEM)除痛觉程度对时间的曲线。

发明详述

1.定义

除非另有定义，否则这里使用的所有技术和科学术语与本发明所属领域的普通技术人员的通常理解具有相同的意义。虽然任何与这里所描述的相似或等价的方法和材料能够被用于本发明的实践或测试中，优选的方法和材料被描述了。为了本发明的目的，以下的术语被定义如下：

这里使用的冠词“a”和“an”指的是一个或多个(即至少一个)该冠词在语法上所修饰的物体。例如，“元件”指的是一个或多于一个元件。

这里使用的术语“大约”指的是与参考的数量、水平、值、尺度、大小或总量相比，变化在30％、20％或10％以内的数量、水平、值、尺度、大小或总量。

这里使用的术语“异常性疼痛”指的是由无害刺激(即通常不会激起疼痛的刺激)引起的疼痛。异常性疼痛的例子包括(但不限于)冷异常性疼痛、触觉异常性疼痛(轻压或触摸引起疼痛)等等。

这里使用的术语“镇痛”描述的是降低疼痛知觉的状态，包括痛感缺失和对有害刺激降低感觉或没有感觉的状态。如本领域通常所理解的，这种降低或没有疼痛知觉的状态是通过施用疼痛控制试剂，并在不丧失意识的情况下被诱导的。术语“镇痛”包括术语“痛觉除去”，它被用于本领域作为动物模型镇痛或疼痛敏感性降低的定量测量。

这里使用的术语“灼痛”指的是燃烧疼痛，以及神经外伤损伤后的异常性疼痛和痛觉过敏，通常伴有血管收缩和泌汗功能障碍以及之后的向性改变。

“复杂性区域疼痛综合征”包括(但不限于)反射性交感神经萎缩症、灼痛、交感神经维持性疼痛等。

贯穿这一说明书，除非上下文需要，否则“包含”应该被理解为含有一规定的步骤或元件，或步骤或元件的组合，但并不排除其它步骤或元件，或步骤或元件的组合。

在上下文中治疗或预防病症时所用的“有效量”是指施用给需要这种治疗或预防的个体的活性成分的数量(可能是单独的剂量或者是一系列剂量的一部分)，该剂量对于阻止该病症的症状的发生，控制此症状和/或治疗现有症状等是有效的。

有效的量将依赖于被治疗个体的健康和身体状况、所属分类群、组合物的配方、医学状态的评估以及其它相关因子而变化。预计该剂量处于通过常规实验所能确定的相对宽的范围内。

“一氧化氮供体”、“NO供体”之类是指任何在体内被转变、降解、代谢成一氧化氮或NO，或提供一氧化氮或NO资源的物质。

“痛觉过敏”是指对通常引起疼痛的刺激的加大反应。

“神经病变性疼痛”是指由外周或中枢神经系统的原发性损伤或功能障碍所引发或导致的任何疼痛综合征。神经病变性疼痛的例子包括(但不限于)热或机械痛觉过敏、热或机械异常性疼痛、糖尿病疼痛、截留疼痛之类。

“伤害感受性疼痛”是指定位于未受损的皮肤、内脏和其它缺乏感受的器官的伤害感受器的激活所引起的正常的尖锐疼痛感。

这里所使用的术语“阿片样物质受体激动剂”是指任何在施用后能与阿片样物质受体结合并导致受体激动、部分激动或激动/拮抗混合的化合物。阿片样物质受体激动剂术语也包括所施用化合物的代谢物。优选的阿片样物质受体激动剂是产生镇痛的化合物。

这里使用的术语“疼痛”被给予了最广泛的含义，包括不快的感觉和与实际的或可能的组织损伤相关的情感经历，或根据这些术语所描述的，包括由专门的神经末梢的刺激所产生的或多或少的不适、忧伤或痛苦的局部感觉。疼痛有许多类型，包括(但不限于)lightning pain、幻痛、射痛、急性痛、发炎痛、神经病变性疼痛、复杂性区域疼痛、神经痛、神经病变等等(Dorland′s Illustrated Medical Dictionary，28thEdition，W.B.Saunders Company，Philadelphia，Pa.)。治疗疼痛的目标是降低被治疗对象所感觉到的疼痛的严重性。

“药物可接受的载体”是指固体或液体填充物、稀释剂或形成胶囊的物质，它能被安全的用于局部、体表(local)或系统给药。

这里使用的术语“药物兼容的盐”是指在毒理上能安全用于人和动物的盐。此盐可以选自氢氯化物、氢溴化物、氢碘化物、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、酒石酸氢盐、磷酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、萘磺酸盐(napsylate)、延胡索酸盐、琥珀酸盐、醋酸盐、对苯二酸盐、pamoate和果胶酸盐。

术语“前药”被用于其最广泛的含义，包括根据本发明在体内被转变为阿片样物质受体激动剂的化合物。本领域的技术人员将容易的想到这类化合物，包括例如，其自由羟基基团被转变成酯衍生物的化合物。化合物的前药形式可以被用来例如提高生物利用率，隐藏如苦味之类的令人不快的特征，改变静脉内使用的溶解性，或者提供化合物位点专一的递送。

这里可互换使用的术语“降低的阿片样物质止痛敏感性”、“降低的对阿片样物质受体激动剂的止痛敏感性”等等，指的是由使用一定量或一定浓度的阿片样物质受体激动剂所产生的镇痛的废除、削弱或降低，而在未用过阿片样物质的个体，特别是没有神经病变性疼痛病症的未用过阿片样物质的个体，更特别的是没有外周神经病变性疼痛病症的未用过阿片样物质的个体，甚至更特别的是在未用过阿片样物质的没有糖尿病的个体中则会产生镇痛。

这里可互换使用的术语“对象”或“个体”或“病人”，指的是任何需要治疗或预防的对象，特别是脊椎动物对象，甚至更特别的是哺乳动物对象。落入本发明范围的合适的脊椎动物包括(但不限于)灵长类、鸟类、家畜动物(如绵羊、奶牛、马、驴、猪)，实验室实验动物(如兔、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠)，宠物(如猫、狗)，捕获的野生动物(如狐狸、鹿、野狗)。优选的对象是需要治疗或预防外周神经病变病症(特别是PDN)的人。然而需要理解的是上述术语并没有已具有症状的含义。

2.产生镇痛的方法

本发明对具有(或处于发展的危险之中)降低的阿片样物质受体激动剂止痛敏感性的对象提供产生镇痛的方法。这些方法一般包括对对象分开、同时或顺序施用一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂，所述阿片样物质止痛剂与作为止痛敏感性降低主题的阿片样受体激动剂激活相同的阿片样物质受体。使用的一氧化氮供体的量能够有效的阻止、减弱和/或逆转对阿片样物质受体激动剂的降低的敏感性，而使用的阿片样物质受体激动剂的量能有效的产生镇痛，该效果通过施用一氧化氮供体而被赋予或者成为可能。一氧化氮供体或阿片样物质受体激动剂可以合适地与药物可接受的载体和/或稀释剂组合，并可以彼此分开或联合施用。

降低的止痛剂敏感性可能与长期使用阿片样物质受体激动剂导致的对该激动剂耐受的发展有关。在一实施方案中，降低的止痛剂敏感性与神经病变病症相关，因此本发明的方法在阻止和/或减轻与神经病变病症相关的疼痛症状上有特别的效用。神经病变病症有许多可能的病因，可以理解本发明企图治疗或阻止与任何神经病变病症相关的疼痛，而不论其病因如何。在一实施方案中，神经病变病症是神经疾病(初级神经病变)和系统疾病引起的神经病变(次级神经病变)的结果，次级神经病变包括但不限于糖尿病神经病变、Herpes Zoster(带状疱疹)相关神经病变、尿毒症相关神经病变、淀粉样变性病神经病变、HIV感觉神经病变、遗传性运动和感觉神经病变(HMSN)、遗传性感觉神经病变(HSNs)、遗传性感觉和自主神经病变、溃疡毁损性遗传神经病变、呋喃妥因神经病变、tumaculous神经病、营养缺乏导致的神经病变和肾衰竭导致的神经病变。其它的原因包括打字或在生产线上工作之类的反复行为、已知引起外周神经病变的药物治疗，如一些AIDS药物(DDC和DDI)、抗生素(用于克罗恩氏病的抗生素——甲硝唑，用于肺结核的异烟肼)、金化合物(用于风湿性关节炎)、一些化疗药物(如长春新碱及其它)和许多其它药物。已知化学化合物也会导致外周神经病变，包括醇类、铅、砷、水银和有机磷酸酯杀虫剂。一些外周神经病与感染过程相联系(如Gulllian-Barre综合征)。在另一实施方案中，神经病变病症是如PDN之类的外周神经病变病症或相关病症。

神经病变病症可能是急性或慢性的，在这一关系上，本领域的技术人员将会理解神经病变的时间进程会基于其病因而发生变化。在外伤的情况下，症状的发作可能是急性或突然的，最严重的症状出现于起始或随后发展。发炎和一些代谢神经病病具有持续几天至几周的亚急性过程。持续几周到几月的慢性过程通常表明是毒性或代谢性神经病病。慢性的、持续几年的缓慢进展性神经病病发生于大多数遗传性神经病变或慢性炎性脱髓鞘病变(CIDP)中。具有复发和缓和症状的神经病变病症包括Guillian-Barre综合征。

有利的是，一氧化氮供体和阿片样物质受体激动剂与具有其它有用的抗神经病变特性的组合物或利于减轻目标神经病变病症的症状和征兆的组合物一起使用。

不希望被任何特定的理论或操作模式所束缚，因此认为一氧化氮供体诱导直接的或间接的对阿片样物质受体的生理作用，以使它们能被相关的阿片样物质受体激动剂激活，由此产生除痛觉/镇痛效果。因此，在另一实施方案中，本发明提供对具有与阿片样物质受体低敏性相关病症(或处于发展的危险之中)的对象产生镇痛的方法，其中所述方法一般包括将能使阿片样物质受体被相关的阿片样物质受体激动剂激活的有效量的一氧化氮供体分别、同时或相继地与能在对象中激活该受体并产生镇痛的有效量的阿片样物质受体激动剂一起给对象使用。

一氧化氮供体包括任何在体内能被转变、降解或代谢成一氧化氮，或提供一氧化氮资源的物质。这一范畴包括具有不同结构特征的化合物。例如，一氧化氮供体包括(但不限于)L-精氨酸、硝普钠、硝化甘油、三硝酸甘油、单硝酸异山梨醇酯、二硝酸异山梨醇酯、S-亚硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸枣仁皂苷配糖类(pseudojujubogenin glycoside(如达玛烷型三萜皂苷(如bacopasaponins))和它们的衍生物或类似物。在一实施方案中，一氧化氮供体是L-精氨酸或其类似物或衍生物。因此，在另一方面，本发明向具有(或处于发展的危险之中)降低的阿片样物质受体激动剂止痛敏感性的对象提供产生镇痛的方法，包括向对象分别、同时或相继施用有效量的L-精氨酸(或其类似物或衍生物)和有效量的阿片样物质止痛剂，所述阿片样物质止痛剂与作为止痛敏感性降低地主题的阿片样物质受体激动剂激活相同的阿片样物质受体。

在一实施方案中，阿片样物质止痛剂是μ-阿片样物质受体激动剂或在体内被代谢或转变成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物。例如，阿片样物质受体激动剂可以选自吗啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氢吗啡酮、羟吗啡酮，它们的类似物、衍生物或前药和它们药物兼容的盐。合适的阿片样物质受体激动剂是吗啡或其类似物、衍生物或前药或其药物兼容的盐。在另一实施方案中，阿片样物质止痛剂是K₂-阿片样物质受体激动剂。K₂-阿片样物质受体激动剂在体内可被代谢成或转变成μ-阿片样物质受体激动剂。合适的K₂-阿片样物质受体激动剂是任何在施用后能与阿片样物质受体结合并导致该受体激动、部分激动或混合激动/拮抗的化合物，它的除痛觉效果会被nor-BNI(nor-binaltorphimine，一种假定的选择性K₁/K₂-阿片样物质受体配体)减弱或损害，它并不从大鼠脑膜中取代K₂-选择性放射配体[³H]U69,593的结合。施用的化合物的代谢物也包含于术语阿片样物质受体激动剂中。合适的阿片样物质受体激动剂是羟考酮和其类似物、衍生物或前药或它们的药物兼容的盐。

一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂可以分离的化合物或以缀合物的形式被提供。本发明设计的缀合物包含与至少一个阿片样物质止痛剂连接或偶联或结合的至少一个一氧化氮供体。在一实施方案中，缀合物包括通过合适的连接物与硝酸基基团偶联的阿片样物质受体激动剂。此类的缀合物包括(但不限于)：

吗啡羟吗啡酮

可待因羟考酮

其中R是H或下式表示的基团：

其中A不存在或代表基团-O-、-S-、-NH-、-C₆H₄-、-OC₆H₄-、-SC₆H₄-或-NHC₆H₄-；

m是0或从1到10的整数；和

n是从1到10的整数，或者当A不存在并且m是0时，n是3到10的整数，

和它们的药物兼容的盐。

合适的R是以下通式所代表的基团：

在本发明的实施方案中，缀合物是以下通式所代表的化合物和其药物兼容的盐：

一氧化氮供体的有效剂量是这样一种剂量，其能有效阻止、减轻和/或逆转降低的止痛剂敏感性，将止痛剂敏感性恢复到以前存在的敏感性水平，包括阻止、减轻和/或逆转对阿片样物质受体激动剂的止痛低敏性的发展，其与神经病变病症，包括如PDN之类的外周神经病变病症或相关病症相关。阿片样物质受体激动剂的有效剂量是这样一种剂量，其由于一氧化氮受体而能有效治疗或阻止疼痛相关病症中的疼痛，包括阻止疼痛的发生、控制疼痛，和/或治疗存在的疼痛。疼痛可以与任何疼痛相关病症相联，包括癌症和神经病变病症，特别是如PDN之类的外周神经病变病症。本发明的方法中所使用的施用模式、所用一氧化氮供体和阿片样物质受体激动剂的量和配剂将在下文公开。

疼痛是否被治疗是通过测试一项和多项指示疼痛的诊断参数(如主观疼痛评分、tail-flick test和触觉异常性疼痛)并与合适的对照相比较而得出的。在动物实验的情况下，“合适的对照”是没有用一氧化氮供体和/或阿片样物质受体激动剂治疗，或用不含一氧化氮供体和/或阿片样物质受体激动剂的药物组合物治疗的动物。在人类对象的情况下，“合适的对照”可以是治疗之前的个体，或用安慰剂治疗的人(如年龄匹配的或相似的对照)。根据本发明，对疼痛的治疗包括但不限于：(i)阻止对象所经历的疼痛，该对象可能会发展成某一病症，但是还没有被诊断出此病症，因此，所述治疗构成对该病理病症的预防治疗；(ii)抑制疼痛的发生或疼痛病症，即阻止它的发展；(iii)减轻疼痛，即导致疼痛起始或疼痛病症的衰退；或(iv)减轻被认为导致疼痛的疾病或病症的症状，如减轻疼痛的感觉但不解决其病因。

3.组合物

本发明的另一方面提供产生镇痛，特别是治疗、阻止和/或减轻神经病变病症的疼痛症状的组合物。这些止痛组合物一般包括有效阻止、减轻或逆转降低的对阿片样物质受体激动剂的止痛敏感性的一氧化氮供体，和阿片样物质止痛剂。合适的是，阿片样物质止痛剂与作为止痛敏感性降低的主题的阿片样物质受体激动剂激活相同的阿片样物质受体，并且以能够在对象中有效产生镇痛的剂量存在。

任何已知的一氧化氮供体和/或阿片样物质受体激动剂组合物能被用于本发明的方法中，只要一氧化氮供体和/或阿片样物质止痛剂具有药物活性。“药物活性的”一氧化氮供体处于这样一种形式，这种形式能够阻止、减轻或逆转对阿片样物质受体激动剂的降低的止痛敏感性的发展，如阻止、减轻或逆转与神经病变病症相关的阿片样物质受体激动剂低敏性的发展。“药物活性的”阿片样物质止痛剂处于这样一种形式，这种形式激活相应阿片样物质受体，或被赋予了激活相应阿片样物质受体的能力，或在体内被代谢或转变成能激活相应的阿片样物质受体。

本发明组合物的效果可以被本领域已知的一种或多种公开的疼痛/伤害感受模型，或神经病变，特别是外周神经病变，更特别的是PDN模型来检测。如这里所描述的例子，这可以通过使用评估痛觉过敏或触觉异常性疼痛发作和发展之类的模型来证明。本发明组合物的止痛活性可以通过本领域已知的任何方法来评估。这类方法的例子有Tail-flicktest(D’Amour等人1941，J.Pharmacol.Exp.and Ther.72：74-79)；Rat Tail Immersion Model、Carrageenan-诱导的脚掌异常性疼痛模型；Formalin Behavioral Response Model(Dubuisson等人1977，Pain 4：161-174)；Von Frey Filament Test(Kim等人1992，Pain 50：355-363)；Chronic Constriction Injury；Radiant Heat Model；Cold AllodyniaModel(Gogas等人1997，Analgesia 3：111-118)；poor pressuretest(Randall和Selitto，1997，Arch Int Pharmacodyn 111：409-414)以及paw pressure test(Hargreaves等人1998，Pain，32：77-88)。实施例2描述了测量神经病变大鼠中测试化合物对触觉异常疼痛反应的效果的体内分析。

在这类分析中被测试为阳性的组合物对于阻止、降低或逆转包括癌症在内的各种疼痛相关病症和病理的阿片样物质低敏性特别有用，并且对于阻止、降低或逆转神经病变性疼痛引起的阿片样物质低敏性(如在糖尿病人中发现的)特别有用。

本发明的活性化合物可以以盐与药物兼容的抗衡离子的形式被提供。药物兼容的盐可通过许多酸来形成，包括(但不限于)盐酸、硫酸、醋酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸等等。盐在水或其相应游离碱形式的质子溶剂中更易溶。

适合用于本发明的药物组合物包括含有能完成它们设计意图的有效量的药物活性化合物的组合物。用于病人的活性化合物的剂量应该在病人体内经过一段时间足以完成一有利的反应，如降低或减轻疼痛。使用的药物活性化合物的量可能依赖于被治疗的对象，包括他们的年龄、性别、体重和总体健康情况。在此考虑下，所使用的活性化合物的精确量将依赖于从业者的判断。在确定被用于产生镇痛的活性化合物的有效量时，医生可以评估与伤害性疼痛或发炎疼痛相关的疼痛症状的严重性，或与神经病变病症，特别是如PDN之类的外周神经病变病症相关的麻木、虚弱、疼痛、反射的丧失和触觉异常性疼痛的严重性。无论如何，本领域的技术人员可以容易的确定本发明一氧化氮供体和/或阿片样物质受体激动剂的合适的剂量，而无需过多的实验。

在一实施方案中，依赖于设计的施用模式，含有一氧化氮供体的组合物一般含有重量百分比约0.1％到90％、约0.5％到50％或约1％到约25％的一氧化氮供体，其余是合适的药物载体和/或稀释剂等等，以及任选阿片样物质受体激动剂。通常，对于二硝酸异山梨醇酯，每目的一氧化氮供体剂量可能是每天约5到250mg、约10到150mg或20到120mg。一氧化氮供体的剂量可能依赖于大量因素，如不同的一氧化氮供体、施用模式、作用对象的种类、年龄和/或个体状况。通常，口服的情况下，对于重量约为75kg的成年病人，每日所用L-精氨酸的剂量约10到5000mg，或者约200到2000mg，合适的剂量为500到1000mg。

在另一实施方案中，依赖于设计的施用模式，含有阿片样物质受体激动剂的组合物一般含有重量百分比约0.1％到90％、约0.5％到50％或约1％到约25％的阿片样物质受体激动剂，其余是合适的药物载体和/或稀释剂等等，和任选一氧化氮供体。通常，对于没有用过阿片样物质的成年人而言，一日的吗啡口服剂量可能是约每天10到300mg、约每天20到200mg或约每天30到180mg。通常，口服的情况下，对于没有用过阿片样物质的成年人而言，羟考酮一日的口服剂量可能是约每天5到200mg、每天约10到约150mg或每天约20到100mg，这是为体重约75公斤的人估算的。

依赖于所治疗的特定的神经病变病症，活性化合物可以配制成为系统、体表或局部使用。配制或施用的技术可见于″Remington′sPharmaceutical Sciences，″Mack Publishing Co.，Easton，Pa.最新版。合适的途径可包括如：口腔、直肠、跨粘膜或肠内施用；肠胃外施用，包括肌内、皮下、髓内注射，以及鞘内注射、直接心室注射、静脉注射、腹腔注射、鼻内注射、或眼内注射。为了注射，本发明的治疗试剂可在水溶液中配制，合适的是在Hanks′溶液、Ringer′s溶液或生理盐缓冲液之类的生理兼容的缓冲液中配制。为了跨粘膜给药，在配方中使用了适合透过障碍的渗透剂，这类渗透剂是本领域通常所熟悉的。

替代的是，本发明的组合物可以被配制来用于局部或体表给药。在这种情况下，目的组合物可以任何合适的方式被配制，包括(但不限于)霜剂、凝胶、油、软膏、溶液和栓剂。这类体表组合物可能包括苯扎氯铵、洋地黄皂苷、二氢细胞松弛素B、癸酸之类的渗透增强剂，将pH从7.0增加到8.0。在这种考虑下，加强活性化合物对表皮渗透的渗透增强物是有利的。替代的，体表组合物可以包括包裹本发明活性化合物的脂质体。

本发明的组合物可以以含有可接受的稀释剂(如盐水和无菌水)的液体形式，或以含有可接受的稀释剂或载体(以获得所需的结构、稠度、粘度和外观)的洗液、霜剂或凝胶形式被配制施用。可接受的稀释剂和载体是本领域的技术人员所熟悉的，包括(但不限于)：乙氧基化和非乙氧基化的表面活性剂、脂肪醇、脂肪酸、烃油(如棕榈油、椰子油和矿物油)、可可油蜡、硅油、pH平衡剂、纤维素衍生物、乳化剂(如非离子有机和无机基础的)、保存试剂、蜡酯、固醇、甘油三酯、磷脂(如卵磷脂和脑磷脂)、多羟基醇酯、脂肪醇酯、亲水羊毛酯衍生物和亲水蜂蜡衍生物。

替代的，可以用本领域众所周知的药物可接受载体将本发明的活性化合物配制成适合口服的剂型，这也是本发明的实践所优选的。这类载体能够使本发明的化合物配制成如药片、药丸、胶囊、液体、凝胶、糖浆、结晶浆液、悬浮液之类的药剂形式，以便被治疗病人口服摄取。这些载体可选自糖、淀粉、纤维素和其衍生物、麦芽、明胶、滑石、硫酸钙、植物油、合成油、多元醇、褐藻酸、磷酸缓冲溶液、乳化剂、等渗盐水和无热源水。

肠胃外给药的药物配方包括水溶形式的活性化合物的水溶液。另外，可制备活性化合物的悬浮液，作为适当的油性注射悬浮液。合适的亲脂性溶剂或载体包括脂肪油(如芝麻油)或合成脂肪酸酯(如油酸乙酯或甘油三脂)，或脂质体。水性注射悬浮液可能包括增加悬浮液粘性的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨醇或右旋糖酐。可选的，悬浮液还包括合适的稳定剂或增加化合物稳定性的试剂，以允许制备高浓度的溶液。

口服用途的药物制品可以通过将活性化合物与固体赋形剂混合获得，可选地在加入合适的辅料之后(如果需要)，研磨产生的混合物，并将混合物加工成颗粒，以得到药片或糖衣丸。特别的，合适的赋形剂是填充物，如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纤维素制品，如玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、土豆淀粉、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要的话，可以加入分解剂，如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或褐藻酸或其盐(如藻酸钠)。这类组合物可以通过药剂学的任何方法制备，但是所有的方法都包括将以上描述的一种或多种治疗试剂与组成一种或多种必要成分的载体相组合的步骤。总体而言，本发明的组合物可以通过它自身已知的方法被制造，如通过传统的混合、溶解、粒化、制作糖衣、磨细、乳化、装入胶囊、截留或冻干的方法。

给糖衣丸提供合适的包衣。为此目的可能使用合适的糖溶液，它可选地含有阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚羰乙烯胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。染料或色素可以被加入药片或糖衣，以用于鉴定或表征活性化合物剂量的不同组合。

能够被用于口服的药品包括由明胶制成的推入插合(push-fit)胶囊，和由明胶和可塑剂(如甘油或山梨醇)制成的柔软密封的胶囊。推入插合胶囊可以含有活性成分，并混合有填充剂(如乳糖)、粘合剂(如淀粉)和/或润滑剂(如滑石或硬脂酸镁)，可选地含有稳定剂。在软胶囊中，活性化合物可以被溶解或悬浮于合适的液体，如脂肪油、液体石蜡或液态聚乙二醇。另外，也可以加入稳定剂。

本发明活性化合物的剂型也可以包括为这一目的专门设计的注射或植入型控制释放装置或以这种方式附加运作地的其它形式的植入体。本发明活性化合物的控制释放可以通过包裹活性化合物来完成，如使用疏水性聚合物，包括丙烯酸树脂、蜡、高级脂肪醇、多聚乳酸和多聚乙醇酸以及一定的纤维素衍生物(如羟丙基甲基纤维素)。另外，通过使用其它聚合物基质、脂质体和/或微球体也可以完成控制释放。

依赖于一些因素，本发明活性化合物可以被施用几小时、几天、几周或几月，这些因素包括被治疗的神经病变病症的严重性，考虑病症是否会反复等等。施用可以是连续的，如持续几小时、几天、几周、几月的连续灌输等等。可选的，施用也可以是间断的，如活性化合物可以在若干天内每天施用一次，或若干小时内每小时施用一次，或任何其它认为合适的此类方案。

本发明的组合物也可以通过呼吸道施用，作为鼻或肺吸入的气雾剂或喷雾器用的溶液，或喷射用的超细粉末，单独或与惰性载体(如乳糖)或与其它药物接受的赋形剂组合。在这种情况下，配剂的颗粒直径低于50微米较为有利，合适的是低于10微米。

为了本发明能被容易的理解并付诸应用，通过以下非限制性的实施例描述了特定的优选实施方案。

实施例

实施例1

评估μ-阿片样物质受体激动剂在STZ糖尿病大鼠中的短暂除痛觉能力

材料和方法

颈静脉套管插入术和糖尿病诱导

使用氯胺酮(100mg/kg，腹膜内)和噻拉嗪(16mg/kg，腹膜内)的混合物诱导深度和稳定的麻醉，以便将聚乙烯管(事先填入0.1ml无菌盐水)插入右颈总静脉。通过抽出少量的血液来测试颈静脉管是否被正确放置。通过向颈静脉迅速静脉内注射链脲菌素(STZ)(85mg/kg)的0.1M柠檬酸缓冲液来诱导糖尿病。

通过监测单个大鼠的摄水量和血糖浓度来确证糖尿病。对于快速研究使用，用Glucostix^TM或Precision QID^TM测试试剂盒来监测血糖。

与本领域接受的标准规程一致，在注射STZ 7天后，每天饮水超过100ml的大鼠被归为糖尿病，只有血糖浓度超过15mM的大鼠被用于以后的实验。通过比较，对照的非糖尿病大鼠的摄水量约为每天20ml，血糖浓度在5-6mM范围，与之前本领域众所周知的研究相一致。各种实验中糖尿病诱导的整体成功率约为75％。首次用于实验的非糖尿病大鼠被用于对照实验(n＝36)。在使用STZ之后，使用苄青霉素(60mg，皮下)来防止感染，并在手术恢复过程中严密监控大鼠。依据它们所属的研究组，大鼠被单独或成对饲养3至38周的时间。

药物剂量溶液

通过将盐酸吗啡和盐酸羟考酮溶解于无菌盐水制备成浓度分别为45和80mg/ml(以游离碱计算)的用于皮下给药的吗啡和羟考酮储备液。这些储存溶液被等分成若干存与-20℃，直至使用。分装的吗啡或羟考酮储存液在溶化之后被无菌盐水连续稀释成皮下给药所需的阿片样物质药物浓度。在使用CO₂/O₂(50∶50％)轻度麻醉大鼠的同时，使用250μl Hamilton注射器于大鼠颈底脊区皮下注射100μl一种阿片样物质或载体(盐水)。

除痛觉的评估

用von Frey filament定量机械性异常性疼痛(疼痛性糖尿病性神经病变的区别特征)。大鼠被置于具有金属网底的代谢笼(20cm×20cm×20cm)，并允许约十分钟的适应。von Frey filament被用来定量敏捷脚掌收缩反应所需的最低机械阈值。将力量施加于左后脚的脚掌表面，并保持到纤维发生轻微弯曲。在5s之后没有反应则立即将增加力量施加下一根纤维。可使用的纤维包括产生2、4、5、6、8、10、12、14、16和18g弯曲重量的纤维。在进行除痛觉测试之前对纤维进行每日校准。对于使用任何von Frey filament在左后足脚底表面而没有反应的动物被计为20g。用药前(阿片样物质或盐水)反应取间隔5分钟的3次读数的平均值。von Frey filament反应的评估于使用阿片样物质(或盐水)之后的15、30、45、60、90、120和180分钟进行。

数据分析

根据公式：％MPE＝(用药后阈值-用药前阈值)/(最大阈值-用药前阈值)×100/1(其中最大VFF阈值＝20g)，将单个大鼠的von Frey记录转变成最大可能除痛觉效果(％MPE)的百分率。

使用梯形法则计算％MPE-时间曲线(时间＝0-180分钟)的面积(％MPE AUC)。根据以下公式：％Max AUC＝％MPE AUC/最大％MPE AUC×100/1(其中最大％MPE AUC＝263％MPE-h)，计算最大AUC(％Max AUC)平均百分数(±SEM)。

以每一吗啡或羟考酮剂量的％Max AUC对各自的药物剂量作图，产生单个剂量-反应曲线。统计分析包(GraphPad Prism^TM)对％Max AUC和剂量值对数进行非线性回归以估计吗啡或羟考酮的ED₅₀剂量(平均值±SEM)。通过引入理论最大和最小％Max AUC值而方便了ED₅₀估计。

研究设计和阿片样物质剂量方案

这一研究包括3组STZ-糖尿病DA大鼠。在使用STZ后第3周，组1(n＝36，207±5g，平均值±SEM)大鼠皮下接受3药丸之一剂量的吗啡或羟考酮。皮下注射羟考酮和吗啡的起始剂量是我们实验室先前用于减轻坐骨神经慢性收缩性损伤引起的触觉异常性疼痛的剂量。随后的剂量是为了构建减轻触觉异常性疼痛的剂量-反应曲线。使用校准的von Frey filament定量除痛觉。

作为比较，在9周的时期内研究了组2糖尿病大鼠(n＝25，256±3.6g，平均值±SEM)的急性除痛觉反应，以便单个大鼠在皮下接受3药丸之一剂量的吗啡或羟考酮，从而在使用STZ后第9周产生剂量-反应曲线。

组3糖尿病大鼠(n＝37，233.0±5.1g，平均值±SEM)在6个月的研究时期内被连续研究，以便单个大鼠皮下接受3药丸之一剂量的吗啡或羟考酮，从而在使用STZ后的12和24周产生剂量-反应曲线。

在每一次的除痛觉测试中，每一实验组的大鼠被随机分配皮下接受药丸剂量的羟考酮或吗啡，以便于每只大鼠接受两次或三次阿片样物质的剂量，并且在两次剂量间具有完整4天的清除时间。

另外，研究了一组重量匹配的首次用于实验的非糖尿病对照大鼠(n＝36，210±4g，平均值±SEM)，以便单个大鼠皮下接受3药丸之一剂量的吗啡或羟考酮，从而产生产生剂量-反应曲线。

结果

糖尿病性神经病变性疼痛

在短期(3周)和长期研究(6月)中糖尿病性神经病变性疼痛的发展

在注射STZ后的第8天，脚掌收缩阈值的平均值(±SEM)出现显著(p＜0.0001)降低，从对照非糖尿病大鼠的11.9(±0.15)g降到8.0(±0.3)g(图1)。注射STZ后3周，脚掌收缩阈值的平均值(±SEM)进一步显著(p＜0.0001)降低到5.23(±0.34)g(图1)。在接下来的两个月，脚掌收缩基线阈值平均值(±SEM)相对稳定，在注射STZ后的9和12周分别为5.0(±0.1)g和4.7(±0.1)g。在12到24周之间，脚掌收缩阈值基线平均值(±SEM)的减小幅度较小，但仍然显著(p＜0.0001)，以致注射STZ后24周，脚掌收缩阈值平均值(±SEM)为3.3(±0.1)g。综上，在对STZ诱导的糖尿病大鼠的6个月的研究中，这些数据与机械性异常性疼痛(PDN的定义症状)的发展和保持相一致。

STZ-糖尿病对吗啡和羟考酮减轻机械性异常性疼痛能力的影响的纵向研究

注射STZ后第3周

在皮下给药吗啡(4mg/kg)后，15分之内获得除痛觉峰值(70％MPE)。在注射之后的90分钟，除痛觉水平降到基线水平(＜20％MPE)。在药丸皮下给药羟考酮(1.7mg/kg)之后，注射的30分钟之后获得除痛觉峰值(90％MPE)，然后在注射的120分钟之后降到基线水平(＜20％MPE)。皮下施用其它药丸剂量的羟考酮和吗啡产生了相似的除痛觉程度(％MPE)对时间的曲线。吗啡和羟考酮在糖尿病大鼠中的相应平均(±SEM)ED₅₀剂量分别是6.1(±0.3)mg/kg和2.0(±0.15)mg/kg(表1)，表明在STZ-糖尿病大鼠中，羟考酮减轻机械性异常性疼痛的能力比吗啡高三倍。作为比较，在不具有糖尿病的大鼠(初次用于实验的对照大鼠)中，吗啡和羟考酮的ED₅₀剂量分别是2.4(±0.3)mg/kg和1.2(±0.04)mg/kg(表1)。综上，这些数据表明在施用STZ后第3周，STZ诱导的糖尿病使DA大鼠的吗啡剂量-反应曲线向右偏移约2.5倍(p＜0.05)，羟考酮曲线偏移约1.7倍(p＜0.05)。

注射STZ后第9周

皮下施用吗啡和羟考酮的除痛觉反应(％MPE)平均值(±SEM)对时间的曲线及剂量对数-反应的曲线被示于图2和3。对于皮下施用吗啡和皮下施用羟考酮来说，第9周的剂量-反应曲线与各自第3周的剂量-反应曲线并无显著差别。特别是，吗啡和羟考酮的平均(±SEM)ED₅₀值分别是6.1(±0.4)mg/kg和2.1(±0.4)mg/kg。

注射STZ后第12周

值得注意的是，在施用STZ后的12周，吗啡的除痛觉能力被完全废除了。为了测试高剂量的吗啡是否会引起除痛觉反应，使用了约为起始ED₅₀值2.5倍的剂量(14.2mg/kg)。然而，吗啡功效仍然被完全废除。皮下施用更高的吗啡剂量(18mg/kg)的初始实验在STZ糖尿病大鼠中产生了中度的神经兴奋行为(肌阵挛和撕咬金属网笼底部)和除痛觉反应的消失，进一步增加吗啡剂量得到了相似的结果。

相反，在注射STZ后的12周羟考酮仍然保持除痛觉功效，虽然在9到12周之间其能力进一步降低了两倍。特别是，在注射STZ 12周之后的糖尿病大鼠中，羟考酮减轻机械性异常性疼痛的平均(±SEM)ED₅₀剂量是4.1(±0.3)mg/kg(表1)，在第9周为2.1(±0.4)mg/kg。

注射STZ后第24周

与使用STZ后12周所观察到的结果相似，吗啡的功效被完全废除，即没有吗啡除痛觉功效丧失的短暂逆转。相反，发现羟考酮的能力与注射STZ后的12周所测定的相同(ED₅₀＝4.2(±0.3)mg/kg)。

总结

上述实验表明，羟考酮和吗啡的除痛觉能力都有短暂的逐步下降，但是这两种阿片样物质试剂的效能丧失的时间过程却不同。与临床上所广泛认为的吗啡对于减轻病人的PDN无效的观点一致，这些结果表明，在使用STZ后的12周，吗啡减轻糖尿病大鼠机械性异常性疼痛的功效被完全废除了。相比而言，在整个24周的研究时期内，羟考酮的功效被保持了，虽然在12周时其除痛觉能力下降了4倍，在24周时其相对于非糖尿病对照大鼠保持不变。

重要的是，羟考酮的除痛觉功效在注射STZ之后的整个24周的研究时期内被保持了，虽然相对于初次实验的非糖尿病大鼠的ED₅₀降低了4倍。推广到临床应用，此发现表明羟考酮(与吗啡相反)将保持其减轻病人疼痛性糖尿病性神经病变的功效，这与Watson等人最近报道的羟考酮能有效减轻带状疱疹后神经痛(另一难以治疗的持续疼痛)病人的神经病变性疼痛(Neurology，50 1837-41 1998)相一致。

与先前关于非糖尿病啮齿类的报道相一致，在皮下途径给予初次实验非糖尿病大鼠的情况下，在注射STZ之后的3周和9周，发现羟考酮的效力比吗啡高两倍。另外，发明者先前的实验室研究已表明用tailflick test在初次实验Dark Agouti大鼠中定量时，皮下施用羟考酮比吗啡的效力高三倍，而在具有坐骨神经慢性收缩性损伤(CCI)的大鼠中，羟考酮减轻机械性异常性疼痛的能力比吗啡高4倍(Smith等人，2001，Eur J Pain 5(Suppl A)：135-136)。

实施例2

L-精氨酸恢复阿片样物质受体激动剂在PDN中的除痛觉能力

材料和方法

研究设计，L-精氨酸的施用和阿片样物质的剂量方案

此研究包括3组STZ-糖尿病DA大鼠：组1的STZ-糖尿病DA大鼠(n＝25，256±3.6g，平均值±SEM)在6个月的时期内被连续研究，单个大鼠受到：(i)3药丸之一剂量的皮下吗啡或羟考酮，以产生施用STZ后9、12和24周的剂量-反应曲线，或(ii)施用STZ后16和20周的吗啡和/羟考酮ED₅₀剂量。在交叉实验中的一些情况下，每个实验组中大鼠有两次或三次机会皮下接受单剂量的吗啡或羟考酮，在两次剂量之间具有完整4天的清除时间。在使用STZ后第9周，组1的STZ-糖尿病大鼠受到加入鼠饲料的L-精氨酸添加剂(每天1g)的饮食干涉，直到24周的研究时期的结束。

组2的STZ-糖尿病大鼠(n＝17，233.7±4.1g，平均值±SEM)在6个月的时期内被连续研究，以便单个大鼠(n＝6)皮下接受ED₅₀剂量的吗啡和/或羟考酮(分别为6.1mg/kg或2.0mg/kg)，以评估使用STZ后14、18和22周的快速除痛觉反应。在使用STZ后第14周，开始持续8周的含有L-精氨酸添加剂(于鼠饲料中每天1g)的饮食干涉。

组3的STZ-糖尿病大鼠(n＝6，224.7±2.9g，平均值±SEM)是用于上述实施例1相同的大鼠。这些大鼠先前在注射STZ后第9、12和24周皮下接受了单一.药丸剂量的羟考酮或吗啡。此后，单个大鼠皮下接受ED₅₀剂量的吗啡或羟考酮，以产生34和38周的快速除痛觉反应-时间曲线。在使用STZ后的30周，开始含有L-精氨酸添加物(于鼠饲料中每天1g)的饮食干涉，并持续8周。

另外，研究了一组重量匹配的初次实验非糖尿病对照DA大鼠(n＝18，236.8±2.5g，平均值±SEM)，单个大鼠皮下接受3药丸之一剂量的吗啡或羟考酮，以产生除痛觉剂量-反应曲线。重量匹配的初次实验DA对照大鼠在快速施用阿片样物质以及同时进行的除痛觉测试之前至少接受一周的饮食补充L-精氨酸(于鼠饲料中每天1g)。重要的是，由于糖尿病大鼠的食量是初次实验非糖尿病对照大鼠的两倍，在喂给非糖尿病对照大鼠的鼠饲料中的L-精氨酸的浓度被加倍了，以保持STZ-糖尿病大鼠和非糖尿病对照大鼠的L-精氨酸剂量一致。

结果

糖尿病性神经病变性疼痛

糖尿病性神经病变性疼痛的发展及L-精氨酸添加剂对von Frey脚掌收缩阈值的影响的长期研究

未使用过药物的STZ-糖尿病DA大鼠的脚掌收缩阈值平均值(±SEM)显著低于(p＜0.0001)非糖尿病对照大鼠的脚掌收缩阈值平均值(±SEM)(11.9±0.2g)。特别是，在注射STZ后第9周，非糖尿病大鼠的脚掌收缩阈值平均值(±SEM)显著降低(p＜0.0001)，从11.9(±0.2)g降到6.8(±0.3)g(组1)。相似的，在注射STZ后第14周的组2 STZ-糖尿病大鼠(3.8±0.2g)和注射STZ后第24周的组3 STZ-糖尿病大鼠(3.1±0.3g)中观察到的相对于初次实验非糖尿病对照大鼠(11.9±0.2g)的脚掌收缩阈值平均值(±SEM)的显著降低(p＜0.0001)表明了在诱导大鼠糖尿病之后的累积6个月内，触觉异常性疼痛(PDN的定义症状)得到了发展和保持。这些发现说明了在我们实验室中STZ-糖尿病和相关触觉异常性疼痛的诱导和保持是具有重复性的。

组1

连续15周(从注射STZ之后的9周到24周)对组1的STZ-糖尿病大鼠的食物中加入L-精氨酸，导致脚掌收缩阈值在注射STZ后第9周为6.8(±0.3)g，在注射STZ后第12周为4.3(±0.1)g，并在注射STZ后第24周增加到5.2(±0.1)g。

组2

相似的，对组2的STZ糖尿病大鼠于注射STZ后第14周开始食物添加L-精氨酸，导致脚掌收缩阈值从注射STZ后第14周的3.8(±0.2)g少量增加到L-精氨酸治疗4周(注射STZ 18周后)后的4.9(±0.2)g和8周(注射STZ 22周后)后的6.1(±0.4)g。

组3

虽然在组3的STZ-糖尿病大鼠中直到注射STZ 30周后才使用含有L-精氨酸的食品添加剂，但是观察到了少量却显著的脚掌收缩阈值的增加，其中阈值从24周的3.1(±0.3)g增加到L-精氨酸治疗开始4周后的3.9(±0.2)g和8周后的5.0(±0.2)g(分别是注射STZ后的34和38周)。这些数据与整个实验时期注射STZ的大鼠的触觉异常性疼痛(PDN的定义症状)的发展和保持相一致。

使用L-精氨酸的对照组

相对于接受标准鼠饲料食物的非糖尿病对照大鼠的阈值(11.9±0.2g)而言，对重量匹配的非糖尿病对照大鼠食物加入L-精氨酸一周后，没有对基线脚掌收缩阈值(13.3±0.12g)产生明显的作用。

L-精氨酸食品添加对STZ-糖尿病大鼠体重的影响

组1

仅仅在使用STZ之前，组1大鼠的体重为256.0(±3.6)g。与发明者先前在实验室的研究相一致，STZ的使用导致体重下降约10％，以致于在注射STZ后第9周，STZ-糖尿病大鼠的体重为223.6(±5.5)g。在食物添加L-精氨酸3周和7周后(分别为注射STZ后的12周和16周)，重量平均值(±SEM)保持相对稳定，分别为229.0(±6.0)g和218.0(±7.2)g。发现在精氨酸治疗11和15周后(分别为使用STZ后的20周和24周)，体重平均值(±SEM)为253.4(±9.9)g(注射STZ之后20周，n＝6)和234.5(±5.1)g(注射STZ之后24周，n＝25)。使用L-精氨酸11周和15周之后(使用STZ之后的20和24周)的约5％的平均体重差异几乎肯定是由于两组样品大小的显著差异所致。重要的是，体重的保持贯穿于整个精氨酸治疗的长时期(15周)内，并在使用L-精氨酸食品添加约10周后发现体重的逐渐增加。

组2

对于组2 STZ-糖尿病大鼠，在使用STZ时的平均(±SEM)体重为239.7(±4.9)g，在使用STZ后的14周体重为211.5(±3.4)g，下降约10％。在食物添加L-精氨酸的4周和8周后(注射STZ后的18和22周)，糖尿病大鼠的平均(±SEM)体重保持相对稳定，分别为203.2(±6.4)g和220.9(±11.6)g。

组3

在使用STZ时，组3大鼠的平均(±SEM)体重为228.8(±4.18)g。这些大鼠的平均体重下降了约10％，降为201.0(±7.1)g，此结果一直保持到使用STZ之后的24周。食物L-精氨酸干涉后的第4周(注射STZ后的34周)，这些大鼠的体重平均值(±SEM)为207.8(±10.7)g。与接受食物L-精氨酸干涉8周的组2 STZ-糖尿病大鼠相一致，从开始添加食物L-精氨酸之后的4到8周内，这些大鼠的平均体重(±SEM)有少量却是显著的增长(p＜0.05)，在治疗的8周后(即注射STZ后的38周)体重达到了221.7(±11.7)g。

使用L-精氨酸的对照组

先于除痛觉测试之前添加食物L-精氨酸1周的重量匹配的非糖尿病对照大鼠的平均体重(±SEM)从215.2(±2.0，n＝8)g增加到236.3(±2.5，n＝18)g，与预期的此年龄非糖尿病对照大鼠的体重增加相一致。

食物精氨酸干涉对吗啡和羟考酮减轻STZ-糖尿病大鼠的机械性异常性疼痛能力的影响的纵向研究

使用L-精氨酸的对照大鼠

对先于除痛觉测试之前添加食物L-精氨酸1周的未使用过阿片样物质的非糖尿病对照大鼠皮下施用吗啡的剂量-反应曲线的统计比较表明，吗啡的ED₅₀与接受标准鼠饲料食物的对照大鼠所测定的值并无显著差异(p＞0.05)。相似的，接受食物L-精氨酸干涉的大鼠的羟考酮ED₅₀值(1.0±0.1mg/kg)与喂以标准鼠饲料食物的大鼠的值并无显著差异(p＞0.05)。这些发现表明，在未使用过阿片样物质的非糖尿病对照大鼠中长期使用L-精氨酸并不会并不会以与吗啡相似的方式调节羟考酮的除痛觉作用。

食物补充L-精氨酸的组1 STZ-糖尿病大鼠

注射STZ后9周—先于添加食物L-精氨酸之前

在发明者早期的实验室研究中，使用STZ后第9周的皮下吗啡和皮下羟考酮的剂量-反应曲线(图4和图5)都与可比的在使用STZ后第3周测定的剂量-反应曲线没有显著差异。特别的，吗啡和羟考酮的ED₅₀平均值(±SEM)分别为6.1(±0.3)mg/kg和2.1(±0.4)mg/kg。

注射STZ后的12周——食物添加L-精氨酸3周

出乎意料的是，在食物添加L-精氨酸3周后阻止了发生于使用STZ后9到12周、喂以标准鼠饲料食物的糖尿病大鼠的吗啡除痛觉功效的废除，以致于发现(±SEM)吗啡ED₅₀值(7.0±0.5mg/kg)与测定的喂以标准鼠饲料食物的、使用STZ后3和9周的糖尿病大鼠的值没有显著差异(6.1±0.3mg/kg)(图4)。

相似的，在同一组大鼠中羟考酮的除痛觉能力也被保持了，以致于羟考酮的ED₅₀值(2.0±0.3mg/kg)(图5)与发明者早期建立的使用STZ后3和9周的糖尿病大鼠的值没有显著差异(2.1±0.4mg/kg)。因此，食物添加L-精氨酸3周后能够阻止发生于使用STZ后9到12周的喂以标准鼠饲料食物的糖尿病大鼠的羟考酮能力的两倍降低。

注射STZ后第16周——食物添加L-精氨酸7周

对已经接受7周食物添加L-精氨酸的大鼠(注射STZ 16周后)使用ED₅₀剂量的吗啡(6.1mg/kg，测定于注射STZ 3和9周后)表明吗啡减轻机械性异常性疼痛的功效被保持了。特别的，在快速使用ED₅₀剂量的吗啡(6.1mg/kg)后，％MPE AUC(±SEM)值为101.9(±1.9)％MPE-h，这显著(p＜0.05)高于喂以标准鼠饲料的、注射STZ后第9周的糖尿病大鼠的％MPE AUC值(63.4±7.5％MPE-h)。这些发现表明食物添加L-精氨酸7周之后，相对于重量匹配的非糖尿病对照大鼠，皮下注射吗啡的功效增加了。

注射STZ后20周——食物添加L-精氨酸11周

食物添加L-精氨酸11周后，皮下单次ED₅₀剂量的吗啡(6.1mg/kg，注射STZ后3和9周)引起的％MPE AUC(±SEM)从喂以标准鼠饲料的糖尿病大鼠的63.4±7.5％MPE-h增加到喂以含有L-精氨酸添加剂的大鼠饲料的糖尿病大鼠的119.2(±19.1)％MPE-h。这些数据表明在STZ糖尿病大鼠食物中添加L-精氨酸将吗啡减轻机械性异常性疼痛的能力增加到在非糖尿病对照大鼠中发现的约90％(％MPE AUC＝136.9±16.1％MPE-h)(图6)。

另外，对同样的接受食物添加L-精氨酸11周的大鼠快速皮下给药ED₅₀剂量的羟考酮(2.0mg/kg)，其所激起的除痛觉反应(％MPE AUC(±SEM))的程度和持续时间(160.3 7.6％MPE-h)相对于相同剂量的皮下羟考酮对喂以标准饲料的、注射STZ后9周的糖尿病大鼠所引起的％MPEAUC值(108.7±13.2％MPE-h)显著(p＜0.05)增加(图7)。这些发现表明食物添加L-精氨酸将羟考酮减轻机械性异常性疼痛的能力增加到施用STZ后9周在喂以标准饲料的非糖尿病对照大鼠中发现的约150％。

注射STZ后第22周——食物添加L-精氨酸15周

与在接受食物添加L-精氨酸3、7和11周的糖尿病大鼠中观察到的结果相似，吗啡的功效被保持了(图4)，即在喂以标准大鼠饲料食物的24周的STZ糖尿病大鼠中观察到的吗啡功效的废除被阻止了，并且相对于食物L-精氨酸干涉11周后所测定的值而言，吗啡的能力增加了。这一结果通过皮下吗啡的剂量-反应曲线的明显向左迁移(图4)而被显示，以致于ED₅₀值(5.0±0.9mg/kg)低于在9周的STZ糖尿病大鼠中所测定的值(6.1±0.4mg/kg)。然而，ED₅₀值仍然接近在初次实验非糖尿病大鼠中所测定值(2.4±0.7mg/kg)的两倍。

作为比较，食物添加L-精氨酸15周的STZ糖尿病大鼠(注射STZ后第24周)保持的羟考酮能力(ED₅₀＝1.8±0.3mg/kg)(图5)与在注射STZ后第9周所测定的(2.1±0.4mg/kg)接近相同。

组2STZ糖尿病大鼠：食物L-精氨酸干涉8周对吗啡和羟考酮减轻机械性异常性疼痛能力的影响

在注射STZ后第14周—开始食物L-精氨酸干涉之前

对注射STZ后第14周的糖尿病大鼠皮下使用注射STZ后3和9周的ED₅₀剂量的吗啡，结果表明皮下快速使用的吗啡的除痛觉功效被完全废除了。

注射STZ后第18周——食物L-精氨酸干涉4周

值得注意的是，在组2糖尿病大鼠中食物添加L-精氨酸4周后(注射STZ后第18周)恢复了皮下吗啡的除痛觉能力(6.1mg/kg)，以致于除痛觉的程度和持续时间(％MPE AUC值)为109.8±28.6％MPE-h，相对于同样剂量的吗啡在喂以标准鼠饲料的、14周STZ糖尿病大鼠中所激起的除痛觉反应(AUC值)(5.2±2.5％MPE-h)而言，这代表吗啡除痛觉的程度和持续时间增长了21倍。

注射STZ后第22周——食物L-精氨酸干涉8周

对接受食物添加L-精氨酸8周(注射STZ后22周)的STZ糖尿病大鼠皮下使用同样剂量的吗啡(6.1mg/kg)激起了吗啡除痛觉效果的程度和持续时间的进一步增加，以致于％MPE AUC值为149.5±9.5％MPE-h，这显著高于(p＜0.05)仅食物添加L-精氨酸4周后所观察到的值，并且与在初次实验非糖尿病对照大鼠中所见的除痛觉反应(136.9±16.1％MPE-h)没有显著差异(p＜0.05)。在同样的大鼠(食物L-精氨酸干涉8周)中，由2.0mg/kg(9周STZ糖尿病大鼠的ED₅₀)剂量的羟考酮引起的除痛觉的程度和持续时间(％MPE AUC值)显著(p＜0.05)高于(139.4±9.4MPE-h)在喂以标准大鼠饲料的12周STZ糖尿病大鼠中所见到的(37.0±1.1％MPE-h)。

组3STZ糖尿病大鼠——食物L-精氨酸干涉8周对吗啡和羟考酮减轻机械性异常性疼痛能力的影响

注射STZ后第24周：无L-精氨酸治疗

与发明者早期在实验室完成的研究相一致，在注射STZ后24周，吗啡的功效被完全废除了。另外，发现羟考酮的能力与早期的研究所测定的使用STZ后12周的糖尿病大鼠相同(ED₅₀＝4.2(±0.3)mg/kg)。

注射STZ后第34周——食物L-精氨酸干涉4周

值得注意的是，尽管吗啡的除痛觉能力从注射STZ后的12周就被废除了，但食物添加L-精氨酸4周后(从注射STZ后的30到34周)，吗啡的除痛觉能力被部分的恢复了。特别是，由皮下单一药丸剂量的吗啡(6.1mg/kg，注射STZ后3周和9周的ED₅₀)激起的除痛觉的程度和持续时间为62.2±15.8％MPE-h，这与喂以标准大鼠饲料的糖尿病大鼠在注射STZ后9周时所测定的％MPE AUC值(63.4±7.5％MPE-h)几乎相同。

注射STZ后第38周：8周的食物L-精氨酸

食物L-精氨酸干涉从4周延长到8周(使用STZ后的30到38周)，导致吗啡除痛觉能力进一步恢复。特别是，皮下单一药丸剂量的吗啡(6.1mg/kg)激起的％MPE AUC为117.1(±15.4)％MPE-h，这几乎比使用L-精氨酸食品添加剂仅4周的％MPE AUC值(62.2±15.8％MPE-h)高出大约190％。

在同样的食物L-精氨酸干涉8周的大鼠中，皮下使用单次药丸剂量的羟考酮(2.0mg/kg，注射STZ后38周的ED₅₀)激起的除痛觉的程度和持续时间(％MPE AUC＝147.0±1.9％MPE-h)与剂量为4.0mg/kg的羟考酮在喂以标准大鼠饲料的、注射STZ后24周的糖尿病大鼠中激起的(144.0±13.7MPE-h)相似。这些数据表明食物添加L-精氨酸8周后恢复的羟考酮能力与在喂以标准大鼠饲料的、注射STZ后3周和9周的糖尿病大鼠中所测定的相当。

总结

与发明者早期的实验室研究的结果相似，到注射STZ后的第9周，吗啡和羟考酮的能力在具有糖尿病的诱导所引起的机械性异常性疼痛(PDN的定义症状)的大鼠中，相对于在重量匹配的非糖尿病对照大鼠中所表现的降低了大约2倍。然而，相对于喂以标准鼠饲料的糖尿病大鼠，从注射STZ后的9到12周向食物添加L-精氨酸，能阻止在注射STZ后的12周所观察到的吗啡功效的废除。相似的，从注射STZ后的9到12周，补充3周的食物L-精氨酸，能阻止注射STZ后9到12周之间在喂以标准鼠饲料的糖尿病大鼠中观察到的羟考酮能力的两倍下降。另外，从注射STZ后的9到12周向食物补充L-精氨酸添加剂不仅在糖尿病大鼠中保持了吗啡的功效，而且也类似地保持了羟考酮的功效，吗啡减轻机械性异常性疼痛的能力与在注射STZ后3周和9周的糖尿病大鼠中所观测到的没有显著差异。

值得注意的是，吗啡功效在糖尿病大鼠中被完全废除后(即分别为注射STZ后14周的组2和注射STZ后30周的组3)开始L-精氨酸食物干涉，仅4周的L-精氨酸食物干涉便恢复了吗啡功效。食物补充L-精氨酸8周后，吗啡的能力被进一步增加，以致于ED₅₀与喂以标准鼠饲料的、注射STZ后3周的糖尿病大鼠没有显著差异。这些关于吗啡的发现也反映出了羟考酮的情况，以致于晚开始的L-精氨酸食物干涉(即在注射STZ后的14周和30周)导致在注射STZ后的12周之前所见的羟考酮除痛觉能力的2倍降低被逆转。这些食物干涉4-8周之后的皮下单剂量羟考酮和吗啡的能力的显著提高发生在糖尿病大鼠潜在的异常疼痛状态不发生逆转的情况下。

实施例3

吗啡-一氧化氮缀合物1的制备

吗啡1

将三水合盐酸吗啡(1.5g)溶于最少量的水中(RO型)(～20mL)并加入足量的饱和碳酸氢钠以沉淀吗啡。用真空过滤收集吗啡1并先用蒸馏水(20mL)，再用少量冷的二乙醚(5mL)洗涤。白色固体用铝箔避光保护，并置于高度真空中(0.01mmHg)3小时。

5-硝酸基戊酸2

标题化合物按照EP 0 984 012 A2(K.M.Lundy，M.T.Clark)的方法制备。简要的，用高度真空(0.01mmHg)将硝酸银(23.48g，0.153mol)预干燥，然后在氩气环境中将其溶解于无水乙腈(70mL)。将溶液加热到50℃，并用注射器迅速加入5-溴戊酸(5g，0.028mol)(溶解于无水乙腈(3mL))。立即形成沉淀。混合物在80℃被加热20分钟。冷却后通过过滤除去沉淀(AgBr)。浓缩滤液，并用醋酸乙酯和水使剩余部分分层。用水洗涤醋酸乙酯层，干燥(Na₂SO₄)，浓缩，并在真空(0.01mm Hg)下进一步干燥。标题化合物不经进一步的纯化而被使用。

吗啡NO供体3

新制的吗啡1(500mg，1.75mmol)、二环己基碳二亚胺(362mg，1.75mmol)和5-硝酸基戊酸2(286mg，1.75mmol)在氩气环境中被溶解于无水氯仿(90mL)。混合物被回流12小时，并冷却。加入额外的二环己基碳二亚胺(362mg，1.75mmol)和5-硝酸基戊酸(286mg，1.75mmol)，继续回流6小时。冷却后真空除掉溶剂，剩余物溶解于加热的醋酸乙酯/甲醇(6∶4)(～5mL)中，过滤除去N，N-二环己脲。滤液被浓缩并经硅胶柱层析(醋酸乙酯/甲醇；6∶4)，此层析可获得吗啡衍生物3的浅黄色固体(600mg，80％)。¹H n.m.r(200MHz)1.70-1.95(m，5H)，2.07(dt，1H)，2.22-2.38(m，2H)，2.42(s，3H)，2.5 4-2.73(m，3H)，3.05(d，1H)，3.35(bs，OH)，3.33-3.40(m，2H)，4.08-4.20(m，1H)，4.40-4.55(m，2H)，4.90(d，1H)，5.20-5.34(m，1H)，5.67-5.78(m，1H)，6.65(dd，2H)。质普m/z(E1) 430(M+，27％)，384(1)，366(1)，354(18)，326(1)，285(100)，268(10)，215(18)，174(8)，162(21)，124(13)，94(6)。

3的酒石酸盐

上述化合物3(300mg，0.697mmol)被悬浮于水中(RO型)(15mL)，并加入酒石酸(105mg，0.697mmol)。在加入二甲亚砜(AR级)(15mL)之前将混合物搅拌30分钟。所得溶液被储存于-20℃。化合物1、2和3的结构如下：

实施例4

吗啡—一氧化氮缀合物2的制备

5-硝酸酸戊酰氯4

标题化合物根据EP 0 984 012 A2(K.M.Lundy，M.T.Clark)的方法被制备。简要的，用高度真空(0.01mmHg)将5-硝酸基戊酸(13.34g，0.082mol)预干燥，然后在氩气环境中将其溶解于无水二氯甲烷(200mL)。在2分钟内分批加入五氯化磷(17.03g，0.082mol)。混合物在室温搅拌15小时。真空除掉溶剂和多余的盐酸，并将残留物溶解于无水甲苯。然后在氩气环境中、大气压下蒸馏除掉90％的甲苯。[注意：不能用蒸馏来完全除掉甲苯，因为这会导致自发的爆炸性分解]。甲苯对于除掉次氯化磷(phosphorous oxy chloride)是必要的。不经进一步纯化而使用该甲苯酸氯化物的混合物。

吗啡一氧化氮供体5

三水合盐酸吗啡(50mg，0.133mmol)和5-硝酸基戊酰氯4(169mg，0.931mmol)被一起于135℃无水加热7分钟，以产生均一的混合物。冷却后用二氯甲烷(10mL)稀释液体并转移到含有饱和碳酸氢钠溶液(20mL)的分液漏斗。在洗涤几次之后，干燥有机相(Na₂SO₄)并蒸发。剩余物经硅胶柱层析(醋酸乙酯/甲醇，梯度)获得棕色油状的吗啡一氧化氮供体5。¹H n.m.r(200MHz)1.60-2.01(m，12H)，2.25-2.71(m，4H)，2.65(s，3H)，2.89-3.28(m，3H)，3.65-3.75(m，1H)，4.35-4.55(m，4H)，5.09-5.25(m，2H)，5.32-5.45(m，1H)，5.60-5.71(m，1H)，6.55-6.85(m，2H)。质谱m/z(EI) 575(M⁺，6％)，548(1)，530(1)，503(1)，472(1)，454(1)，430(1)，403(1)，385(1)，354(1)，285(20)，268(60)，215(22)，162(20)，146(13)，124(13)，100(24)，81(19)，42(100)。

化合物4和5的结构如下：

实施例5

羟考酮—一氧化氮缀合物的制备

羟考酮6

盐酸羟考酮(1.5g)被溶于最少量的水中(RO型)(约20mL)，并向其中加入足量的饱和碳酸氢钠，将溶液的pH上调至约11以沉淀羟考酮。通过真空过滤收集羟考酮6，先用蒸馏水(20mL)，再用少量冷的二乙醚(5mL)洗涤。白色固体用铝箔避光包护，并置于高度真空(0.01mm Hg)中3小时。

羟考酮NO供体7

新制的羟考酮6(500mg，1.59mmol)、二环己基碳二亚胺(327mg，1.59mmol)和5-硝酸基戊酸2(259mg，1.59mmol)在氩气环境中被溶解于无水氯仿(90mL)。混合物被回流12小时，并冷却。加入额外的二环己基碳二亚胺(327mg，1.59mmol)和5-硝酸基戊酸(259mg，1.59mmol)，并继续回流6小时。冷却后真空除掉溶剂，剩余物溶解于加热的醋酸乙酯溶液(～5mL)中，过滤除去N，N-二环己脲。滤液被浓缩并经硅胶柱层析(醋酸乙酯/二氯甲醇；梯度)，此层析可获得浅黄色固体形式的衍生物7。

7的酒石酸盐

上述化合物7(300mg，0.651mmol)被悬浮于水中(RO型)(15mL)，并加入酒石酸(98mg，0.651mmol)。在加入二甲亚砜(AR级)(15mL)之前将混合物搅拌30分钟。所得溶液被储存于-20℃。

化合物6和7的结构如下：

这里引用的每一专利、专利申请和出版物的公开内容以其整体引入作为参考。

这里对任何参考文献的引用不应被理解为承认这些参考文献是现有技术的一部分。

整个说明书的目的是描述本发明优选的实施方案，而不将本发明限制于任何实施方案和特定的特征集合。根据这里公开的本发明，本领域的技术人员将因此认识到可以对所示例的实施方案进行各种修饰和改变而不偏离本发明的范围。在附加的权利要求的范围中意图包括所有的这种修饰和改变。

表1

在使用STZ后的第3周，STZ诱导的糖尿病在DA大鼠中产生吗啡和羟考酮剂量-反应曲线的向右偏移

	平均(±SEM)ED₅₀
	平均(±SEM)ED₅₀			羟考酮(mg/kg)	吗啡(mg/kg)
初次实验的非糖尿病对照大鼠	1.2±0.1	2.4±0.3		羟考酮(mg/kg)	吗啡(mg/kg)
初次实验的非糖尿病对照大鼠	1.2±0.1	2.4±0.3	STZ-糖尿病大鼠3Wks	2.0±0.15^*	6.1±0.3^*
STZ-糖尿病大鼠9Wks	2.1±0.4^*	6.1±0.4^*	STZ-糖尿病大鼠3Wks	2.0±0.15^*	6.1±0.3^*
STZ-糖尿病大鼠9Wks	2.1±0.4^*	6.1±0.4^*	STZ-糖尿病大鼠12Wks	4.1±0.3^*	无功效
STZ-糖尿病大鼠24Wks	4.2±0.3^*	无功效	STZ-糖尿病大鼠12Wks	4.1±0.3^*	无功效

Claims

1.在具有或有可能具有对阿片样物质受体激动剂降低的止痛敏感性的对象中产生镇痛的方法，此方法包括向对象分别、同时或相继使用能阻止、减弱和/或逆转降低的止痛敏感性的有效量的一氧化氮供体和能产生镇痛的有效量的阿片样物质止痛剂，其中所述阿片样物质止痛剂与作为止痛敏感性降低主题的阿片样物质受体激动剂使相同的阿片样物质受体激动。

2.根据权利要求1的方法，其中一氧化氮供体选自能转化成一氧化氮的化合物、能降解或代谢成一氧化氮的化合物和提供体内一氧化氮来源的化合物。

3.根据权利要求1的方法，其中所述一氧化氮供体选自L-精氨酸、硝普钠、硝化甘油、三硝酸甘油、单硝酸异山梨醇酯、二硝酸异山梨醇酯、S-亚硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸枣仁皂苷配糖类、达玛烷型三萜皂苷、它们的衍生物或类似物和它们中任何一种的药物兼容的盐。

4.根据权利要求1的方法，其中一氧化氮供体是L-精氨酸或其类似物或衍生物。

5.根据权利要求1的方法，其中阿片样物质止痛剂选自μ-阿片样物质受体激动剂、代谢成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内被转变成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物。

6.根据权利要求5的方法，其中μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氢吗啡酮、羟吗啡酮、它们的类似物、衍生物或前药以及它们中任何一种的药物兼容的盐。

7.根据权利要求5的方法，其中μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、吗啡类似物、吗啡衍生物、吗啡前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

8.根据权利要求1的方法，其中阿片样物质受体激动剂选自K₂-阿片样物质受体激动剂、代谢成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内转变成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物。

9.根据权利要求8的方法，其中K₂-阿片样物质受体激动剂在体内被代谢或转变成μ-阿片样物质受体激动剂。

10.根据权利要求8的方法，其中K₂-阿片样物质受体激动剂选自羟考酮、羟考酮类似物、羟考酮衍生物、羟考酮前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

11.根据权利要求1的方法，其中一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂以单一组合物的形式被施用。

12.根据权利要求11的方法，其中一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂以分开的化合物的形式存在。

13.根据权利要求11的方法，其中一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂是缀合物形式。

14.根据权利要求1的方法，其中降低的止痛剂敏感性与神经病变病症相关。

15.根据权利要求14的方法，其中神经病变病症是原发性神经病变病症。

16.根据权利要求14的方法，其中神经病变病症是外周神经病变病症。

17.根据权利要求14的方法，其中神经病变病症是疼痛性糖尿病性神经病变(PDN)。

18.根据权利要求1的方法，其中一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂都通过选自下列的途径施用：肠胃外注射，包括肌内、皮下、髓内、鞘内、心室内、静脉内、腹膜内和眼内途径；局部应用，包括上皮和粘膜递送，如直肠、阴道和鼻内途径；和口腔递送。

19.根据权利要求1的方法，其中一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂都通过口腔施用。

20.根据权利要求1的方法，其中一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂都被配制成能在对象中持续释放。

21.根据权利要求1的方法，其中一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂都与药物可接受的载体和/或稀释剂一同施用。

22.在具有或可能具有神经病变病症的对象中产生镇痛的方法，此方法包括向对象施用能阻止、减弱或逆转降低的止痛敏感性的有效量的一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂。

23.根据权利要求22的方法，其中所述阿片样物质止痛剂是对象对其已经产生了降低的止痛剂敏感性的物质。

24.根据权利要求22的方法，其中所述阿片样物质止痛剂以能有效产生镇痛的量施用。

25.根据权利要求22的方法，其中所述神经病变病症与对阿片样物质受体激动剂的降低的止痛敏感性的发展有关。

26.根据权利要求25的方法，其中所述阿片样物质止痛剂与所述阿片样物质受体激动剂激动同样的阿片样物质受体。

27.根据权利要求22的方法，其中所述神经病变病症是原发性神经病变病症。

28.根据权利要求22的方法，其中所述神经病变病症是外周神经病变病症。

29.根据权利要求22的方法，其中所述神经病变病症是疼痛性糖尿病性神经病变(PDN)。

30.根据权利要求29的方法，其中所述神经病变病症与选自糖尿病、尿毒症、淀粉样变性病、tumaculous神经病变、营养缺乏和肾衰竭的病症有关。

31.根据权利要求22的方法，其中所述神经病变病症选自遗传性运动和感觉神经病变(HMSN)、遗传性感觉神经病变(HSNs)、遗传性感觉和自主神经病变、溃疡毁损性遗传性神经病变。

32.根据权利要求22的方法，其中所述神经病变病症与重复性活动有关，所述重复性活动选自打字和在装配线上的工作。

33.根据权利要求22的方法，其中所述神经病变病症与外伤有关。

34.根据权利要求22的方法，其中所述神经病变病症与向对象施用选自AIDS药物、抗生素、金化合物和化疗试剂的药物有关。

35.根据权利要求34的方法，其中所述药物选自呋喃妥因、双脱氧胞苷、双脱氧次黄苷、甲硝唑、长春新碱和顺铂。

36.根据权利要求22的方法，其中所述神经病变病症与对象暴露于选自醇类、铅化合物、砷化合物、水银化合物和有机磷酸酯化合物的化学化合物有关。

37.根据权利要求22的方法，其中所述病症与感染过程有关。

38.根据权利要求37的方法，其中所述感染过程选自Guillian-Barre综合征HIV和带状疱疹。

39.在对象中阻止、减弱或逆转阿片样物质受体激动剂止痛低敏性的发展的方法，此方法包括对对象施用能阻止、减弱或逆转对阿片样物质受体激动剂的止痛低敏性的有效量的一氧化氮供体。

40.根据权利要求39的方法，其中所述一氧化氮供体和药物可接受的载体和/或稀释剂一同施用。

41.根据权利要求39的方法，其中所述一氧化氮供体选自转变为一氧化氮的化合物、降解或代谢成一氧化氮的化合物和提供体内一氧化氮来源的化合物。

42.根据权利要求39的方法，其中所述一氧化氮供体选自L-精氨酸、硝普钠、硝化甘油、三硝酸甘油、单硝酸异山梨醇酯、二硝酸异山梨醇酯、S-亚硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸枣仁皂苷配糖类、达玛烷型三萜皂苷、它们的衍生物或类似物和它们中任何一种的药物兼容的盐。

43.根据权利要求39的方法，其中所述一氧化氮供体是L-精氨酸或它的类似物或衍生物。

44.根据权利要求39的方法，其中所述阿片样物质受体激动剂选自μ-阿片样物质受体激动剂、代谢成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内被转变成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物。

45.根据权利要求44的方法，其中所述μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氢吗啡酮、羟吗啡酮、它们的类似物、衍生物或前药以及它们中任何一种的药物兼容的盐。

46.根据权利要求44的方法，其中所述μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、吗啡类似物、吗啡衍生物、吗啡前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

47.根据权利要求39的方法，其中所述阿片样物质受体激动剂选自K₂-阿片样物质受体激动剂、代谢成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内被转变成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物。

48.根据权利要求47的方法，其中所述K₂-阿片样物质受体激动剂在体内被代谢或转变成μ-阿片样物质受体激动剂。

49.根据权利要求47的方法，其中所述K₂-阿片样物质受体激动剂选自羟考酮、羟考酮类似物、羟考酮衍生物、羟考酮前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

50.在具有或可能具有对阿片样物质受体激动剂的降低的止痛敏感性的对象中产生镇痛的方法，此方法包括向对象施用一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂。

51.根据权利要求50的方法，其中所述阿片样物质止痛剂是阿片样物质受体激动剂。

52.根据权利要求50的方法，其中所述一氧化氮供体以能有效逆转阿片样物质受体激动剂止痛低敏性的发展的量施用。

53.根据权利要求50的方法，其中所述一氧化氮供体以能有效逆转对阿片样物质受体激动剂耐受的发展的量施用。

54.根据权利要求50的方法，其中所述对象受到或可能受到神经病变病症的折磨。

55.根据权利要求50的方法，其中所述神经病变病症是外周神经病变病症。

56.根据权利要求55的方法，其中所述神经病变病症是PDN。

57.根据权利要求50的方法，进一步包括施用药物可接受的载体和/或稀释剂。

58.根据权利要求50的方法，其中所述阿片样物质止痛剂选自μ-阿片样物质受体激动剂、代谢成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内被转变成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物。

59.根据权利要求58的方法，其中所述μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氢吗啡酮、羟吗啡酮、它们的类似物、衍生物或前药以及它们中任何一种的药物兼容的盐。

60.根据权利要求58的方法，其中所述μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、吗啡类似物、吗啡衍生物、吗啡前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

61.根据权利要求50的方法，其中所述阿片样物质止痛剂选自K₂-阿片样物质受体激动剂、代谢成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内被转变成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物。

62.根据权利要求50的方法，其中所述K₂-阿片样物质受体激动剂在体内被代谢或转变成μ-阿片样物质受体激动剂。

63.根据权利要求62的方法，其中所述K₂-阿片样物质受体激动剂选自羟考酮、羟考酮类似物、羟考酮衍生物、羟考酮前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

64.根据权利要求50的方法，其中所述阿片样物质止痛剂是吗啡。

65.根据权利要求50的方法，其中所述阿片样物质止痛剂是羟考酮。

66.根据权利要求50的方法，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂被分开施用。

67.根据权利要求50的方法，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂在组合物中被联合施用。

68.根据权利要求67的方法，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂被同时施用。

69.根据权利要求50的方法，其中所述对象具有降低的阿片样物质止痛敏感性。

70.根据权利要求50的方法，其中所述对象发展了对阿片样物质受体激动剂的耐受性。

71.在对象中阻止或逆转阿片样物质受体激动剂止痛低敏性的发展的方法，此方法包括施用一氧化氮供体和阿片样物质受体激动剂。

72.在对象中阻止或逆转对阿片样物质受体激动剂的耐受发展的方法，此方法包括施用一氧化氮供体和阿片样物质受体激动剂。

73.根据权利要求71或72的方法，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质受体激动剂在组合物被联合施用中，该组合物进一步包括药物可接受的载体。

74.包括一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂的止痛组合物，其中一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂各自的量足以在具有可能具有降低的阿片样物质受体激动剂止痛敏感性的对象有效产生镇痛。

75.根据权利要求74的组合物，其中所述一氧化氮供体选自转变成一氧化氮的化合物、降解或代谢成一氧化氮的化合物和提供体内一氧化氮来源的化合物。

76.根据权利要求74的组合物，其中所述一氧化氮供体选自L-精氨酸、硝普钠、硝化甘油、三硝酸甘油、单硝酸异山梨醇酯、二硝酸异山梨醇酯、S-亚硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸枣仁皂苷配糖类、达玛烷型三萜皂苷、它们的衍生物或类似物和它们中任何一种的药物兼容的盐。

77.根据权利要求76的组合物，其中所述一氧化氮供体是L-精氨酸或它的类似物或衍生物。

78.根据权利要求76的组合物，其中所述阿片样物质止痛剂与所述阿片样物质受体激动剂使同样的受体激动。

79.根据权利要求78的组合物，其中所述阿片样物质止痛剂是阿片样物质受体激动剂。

80.根据权利要求74的组合物，其中所述阿片样物质止痛剂选自μ-阿片样物质受体激动剂、代谢成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内被转变成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物。

81.根据权利要求80的组合物，其中所述μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氢吗啡酮、羟吗啡酮、它们的类似物、衍生物或前药以及它们中任何一种的药物兼容的盐。

82.根据权利要求80的组合物，其中所述μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、吗啡类似物、吗啡衍生物、吗啡前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

83.根据权利要求74的组合物，其中所述阿片样物质受体激动剂选自K₂-阿片样物质受体激动剂、代谢成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内被转变成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物。

84.根据权利要求83的组合物，其中所述K₂-阿片样物质受体激动剂在体内被代谢或转变成μ-阿片样物质受体激动剂。

85.根据权利要求83的组合物，其中所述K₂-阿片样物质受体激动剂选自羟考酮、羟考酮类似物、羟考酮衍生物、羟考酮前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

86.根据权利要求74的组合物，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂以分开的化合物形式存在。

87.根据权利要求74的组合物，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂是缀合物形式。

88.根据权利要求74的组合物，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂是选自如下化合物的缀合物形式：

其中R是H或下面通式表示的基团：

m是0或从1到10的整数；

和它们的药物兼容的盐。

89.根据权利要求88的组合物，其中R是如下通式表示的基团：

90.根据权利要求88的组合物，其中所述缀合物是如下通式表示的化合物和它们的药物兼容的盐：

91.根据权利要求74的组合物，进一步包括药物可接受的载体。

92.包含L-精氨酸和吗啡的组合物。

93.包含L-精氨酸和羟考酮的组合物。

94.一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂在制备使对象产生镇痛的药物中的应用。

95.根据权利要求94的应用，其中所述对象已经发展了或处于发展神经病变病症的风险中。

96.根据权利要求94的应用，其中所述病症是外周神经病变病症。

97.根据权利要求96的应用，其中所述病症是PDN或相关病症。

98.根据权利要求94的应用，其中所述一氧化氮供体选自转变成一氧化氮的化合物、降解或代谢成一氧化氮的化合物和提供体内一氧化氮来源的化合物。

99.根据权利要求94的应用，其中所述一氧化氮供体选自L-精氨酸、硝普钠、硝化甘油、三硝酸甘油、单硝酸异山梨醇酯、二硝酸异山梨醇酯、S-亚硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸枣仁皂苷配糖类、达玛烷型三萜皂苷、它们的衍生物或类似物和它们中任何一种的药物兼容的盐。

100.根据权利要求94的应用，其中所述一氧化氮供体是L-精氨酸或它的类似物或衍生物。

101.根据权利要求94的应用，其中所述阿片样物质止痛剂与所述阿片样物质受体激动剂使同样的受体激动。

102.根据权利要求101的应用，其中所述阿片样物质止痛剂是阿片样物质受体激动剂。

103.根据权利要求94的应用，其中所述阿片样物质止痛剂选自μ-阿片样物质受体激动剂、代谢成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内被转变成μ-阿片样物质受体激动剂的化合物。

104.根据权利要求103的应用，其中所述μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氢吗啡酮、羟吗啡酮、它们的类似物、衍生物或前药以及它们中任何一种的药物兼容的盐。

105.根据权利要求103的应用，其中所述μ-阿片样物质受体激动剂选自吗啡、吗啡类似物、吗啡衍生物、吗啡前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

106.根据权利要求94的应用，其中所述阿片样物质受体激动剂选自K₂-阿片样物质受体激动剂、代谢成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物和在体内被转变成K₂-阿片样物质受体激动剂的化合物。

107.根据权利要求106的应用，其中所述K₂-阿片样物质受体激动剂在体内被代谢或转变成μ-阿片样物质受体激动剂。

108.根据权利要求106的应用，其中所述K₂-阿片样物质受体激动剂选自羟考酮、羟考酮类似物、羟考酮衍生物、羟考酮前药和它们中任何一种的药物兼容的盐。

109.根据权利要求94的应用，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂以分开的化合物形式存在。

110.根据权利要求94的应用，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂是缀合物形式。

111.根据权利要求94的应用，其中所述一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂是选自如下化合物的缀合物形式：

其中R是H或下面通式表示的基团：

m是0或从1到10的整数；

和它的药物兼容的盐。

112.根据权利要求111的应用，其中R是如下通式表示的基团：

113.根据权利要求111的应用，其中所述缀合物是如下通式表示的化合物和它们的药物兼容的盐：

114.根据权利要求94的组合物，进一步包括药物可接受的载体。

115.L-精氨酸和吗啡在制备使对象产生镇痛的药物中的应用。

116.L-精氨酸和羟考酮在制备使对象产生镇痛的药物中的应用。

117.包含一氧化氮供体和阿片样物质止痛剂的缀合物。

118.根据权利要求117的缀合物，其中所述缀合物选自如下化合物：

其中R是H或下面通式表示的基团：

m是0或从1到10的整数；

和它的药物兼容的盐。

119.根据权利要求118的缀合物，其中所述R是如下通式表示的基团：

120.根据权利要求118的缀合物，其中所述缀合物是如下通式表示的化合物和它们的药物兼容的盐：