CN1586600A - 藏药独一味注射制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种藏药独一味注射制剂及其制备方法，该注射制剂是取独一味药材水煮醇沉提取后，再采取碱性醇沉除鞣质的精制方法提取，调pH值，用活性炭过滤，加热灭菌，得独一味提取物，制成注射制剂。在中医临床急症用药上，目前已有的独一味胶囊和片剂已远远满足不了急症的需要，因此，本发明对独一味注射制剂进行了研究，不仅增加了藏药新剂型，而且提高了独一味在临床上治疗急症的制剂疗效，促进了独一味在中医临床急症方面的应用。

Description

藏药独一味注射制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种以单味中药提取物为主要原料的注射制剂及其制备方法，特别是涉及一种以藏药独一味提取物为主要原料的注射制剂及其制备方法，属医药技术领域。

背景技术

独一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo为唇形科植物，原属糙苏属(Phlomis Linn)，现已从该属中分出成为独立的属，称独一味属，仅1种，又名独步通，藏语亦称“大巴”、“打布巴”。其根及根茎或全草人药，是我国藏、蒙及纳西等民族民间常用草药之一。是藏、蒙及纳西民间经常用来治疗刀、枪伤、跌打损伤、浮肿后流黄水，关节炎等疾患的草药，具有止血止痛、抗菌消炎、活血化瘀的功效。

藏药独一味经毒理实验证实其毒副作用小，它的止痛、止血、抑菌，增加机体免疫力的作用机理使其在外科创伤方面有着广泛的使用价值。外科临床可用于治疗骨折镇痛、腰椎间盘突出症、骨性关节炎、类风湿性关节炎等。

根据对独一味的化学和药理研究结果，其具有较好的镇痛和止血功能外。临床可用于治疗糜烂出血性胃炎、消化性溃疡出血、偏头痛、泌尿系统感染出血、泌尿道结石镇痛出血、慢性细菌前列腺炎等。

藏药独一味还具有扶正固本和提高免疫功能的作用，本药对计划生育手术引起的副作用亦有很好的疗效，特别是对放环及药流术后点滴状淋漓不尽的阴道流血，较西药疗效更好，表明本药是有发展前景的中药，值得临床推广应用。

另外，独一味还含有17种氨基酸和21种微量元素，可为关节软骨的修复提供丰富充足的营养物质，从而达到强筋壮骨的目的。

藏药独一味在临床应用广泛，效果好，毒副作用小，颇具临床价值。目前独一味只有胶囊和片剂二种口服固体制剂在临床上使用，主要用于止血、止痛、抗菌消炎、活血化瘀，属于中医临床急症用药。而中医临床急症用药中，尤其是针对出血、疼痛等病症的治疗，要求药物吸收快，能迅速起效，但目前独一味胶囊和片剂却远远满足不了临床用于急症的这种需要，因此，为了提高独一味在临床上治疗急症的制剂疗效，充分开发藏药资源，增加藏药新剂型，研究独一味注射制剂很有必要。

发明内容

本发明的目的是提供一种以藏药独一味的提取物为主要原料的注射制剂；本发明的第二个目的是提供一种以藏药独一味的提取物为主要原料的注射制剂的制备工艺。

通过以下技术手段可得到本发明所述的独一味注射制剂：

取独一味药材，加水煎煮三次，第一次加15～25倍的水浸泡0.5～1小时，煎煮0.5～1.5小时，第二次、第三次各加10～20倍量水，分别煎煮0.5～1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至药液浓度为1∶1～2的浓缩液(即每ml相当于1～2g药材)；加乙醇使含醇量达60％～80％，于5～8℃冷藏12～24小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达80％～90％，于5～8℃冷藏12～24小时，滤过；滤液用30％～50％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏12～24小时，滤过；滤液加10％～30％硫酸调PH至5～6，放置1～3小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水，5～8℃冷藏12～24小时，滤过，滤液加活性炭0.05％～0.20％，煮沸15～30分钟，过滤，得独一味提取物，取独一味提取物，按常规方法，制备成注射制剂如注射液、冻干粉针等。

如上所述的一种独一味注射制剂的制备方法，在精制的工序中去除独一味提取物药液中鞣质的最佳方法采用的是碱性醇沉法，即加40％NaOH溶液调PH8～9，于5～8℃下冷藏12小时，过滤，滤液用20％H₂SO₄溶液调PH值5～6，静置1小时，过滤，回收乙醇至无醇味。

如上所述的一种独一味注射制剂的制备方法，用乙醇沉淀时，最佳的沉淀条件为药液的浓度为1∶2，用乙醇调节的含醇浓度70％。

其中注射液的制备方法为：取按上述方法制备的独一味提取物，加入注射用水，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于5ml安瓿中，灭菌，即得。

冻干粉针的制备方法为：取按上述方法制备的独一味提取物，加入注射用水，冷藏，过滤，滤液加入甘露醇、葡萄糖、氨基酸、乳糖、低分子右旋糖酐、氯化钠等药用辅料中的一种或几种及注射用水，搅拌溶解后用微孔膜过滤。滤液灌装于灭菌西林瓶中，冷冻干燥，压塞，即得。

本发明上述药材还可净选后切成1～2cm小段再煎煮；本发明所述的加热灭菌的冷却方式可以选择物理降温，即以不同温度的水，依温度梯度进行冲淋，来强制性散热，以确保注射液PH值不因受热时间长而变化。

现代药理研究独一味具有以下药理作用：

镇痛作用：10％独一味浸膏0.28ml/10g或0.14ml/10g，给小白鼠灌胃，有镇痛作用，持续时间约2小时；独一味浸膏0.19-3.0g/kg的镇痛作用与0.23g/kg的阿斯匹林相当。

止血作用：10％或5％独一味浸膏0.14ml/10g，给小白鼠灌胃，出血时间由给药前7.1-7.7分钟，分别缩短至4.7和3.2分钟(P＜0.01)，表明有止血作用。

抗菌作用：独一味浸膏对乙型溶血性链球菌和产气杆菌有抑菌作用。独一味叶皂甙对瘌疾杆菌、绿脓杆菌、产气杆菌、枯草杆菌和乙型溶血性链球菌均有抑菌作用。

免疫作用：独一味浸膏能提高巨噬细胞吞噬率、巨噬细胞吞噬指数、E一花环形成率及酯酶染色阳性率，表明独一味有提高非特异性免疫和特异性细胞免疫的作用。

中药注射剂是中医治疗急症的一种良好剂型，它吸收了现代药物制剂的特点，遵循中医理论体系而发展。注射剂可直接注射入人体，进入组织或血液，短期内可达到较高的血药浓度，所以吸收快，作用迅速。治疗急症的中成药中，注射剂占绝大多数。因此，本发明提供的独一味注射剂，不仅增加了藏药新剂型，更提高了独一味在临床治疗急症的制剂疗效，促进了独一味在中医临床急症方面的应用。

中药注射液的不良反应主要集中在过敏反应上，据统计中药注射液的过敏反应占其不良反应的80％以上。因此必须通过对中药有效成分提取物的精制来除去可能引起过敏反应的杂质。精制是制备中药注射剂的重要环节，对其质量起着决定性作用。

本发明独一味的制备工艺在水提后两次醇沉的基础上，对精制过程的条件进行了考察，经试验采用碱性醇沉法除鞣质后，注射制剂不但外观性状好，木犀草素含量高，而且整个制备工艺简单，降低了成本，可行性好，更适合于工业生产。

以下实验例用于进一步说明本发明。

实验例1  提取溶剂的选择

独一味主要化学成分有木犀草素、木犀草素-7-O葡萄糖苷、槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷、芹菜素-7-O-新陈皮糖苷及环烯醚萜类化合物。这些化合物均属苷类物质，分子中含有糖，水中易溶，另外采用水提取制成的独一味胶囊在临床上治疗骨外伤(有效率96.1％)、术后镇痛(有效率88％)及妇科疾病(有效率92％)确有疗效，说明独一味有效部分均为水溶性成分。水做为提取溶剂价廉易得，对药材的穿透力强，无污染有利于环保，所以选择水作为提取溶剂。

实验例2  药材粉碎度考察

独一味是全草类药，在生产上为了提高提取效率，需将净制的药材切制或粉碎成粗粉，粉碎度的大小与提取效率有一定关系。为最大限度地把有效部分提出，将独一味分别以全草、切段(1～2cm)及粗粉加水煎煮，煎煮1小时，采用板框压滤，以煎煮药液的过滤速度、煎煮药液中木犀草素的含量为考察指标，考察药材粉碎度对提取效果影响，结果见表1。

                      表1药材粉碎度试验

投料量                   过滤    药液体积    木犀草素含量

           粉碎度

(g)

                         速度    (ml)        (mg/ml)

1000       全草          迅速    1000        0.103

1000       切段(1～2cm)  迅速    1000        0.186

1000       粗粉          很慢    1000        0.191

试验结果表明，将独一味药材以全草状煎煮，药液过滤迅速，木犀草素的含量较低，将独一味药材以段(1～2cm)状煎煮，药液过滤迅速，木犀草素的含量高，将独一味粉碎成粗粉状煎煮，木犀草素的含量虽高(与切段相接近)，但药液过滤速度很慢，不利于生产操作，故选择将独一味药材切段(1～2cm)，加水煎煮。

实验例3  吸水率的考察及水煎煮最佳条件的确定

一、吸水率的考察

取独一味药材，切段(1～2cm)，称取三份，各1000g，分别加20倍量的水浸泡12小时，使其吸水充分膨胀，滤去剩余水，再分别称取每份药材重量，计算吸水率，结果见表2。

                       表2吸水率试验结果

编号                       1               2               3

浸泡前药材重量(g)          1000            1000            1000

浸泡后药材重量(g)          4319            4271            4407

吸水率(％)                 331.9           327.1           340.7

平均吸水率(％)                             333.2

二、水煎煮最佳条件的确定

独一味中所含主要化学成分为水溶性成分，这些化合物在水中溶解度大，独一味注射液是采用水煎煮法提取独一味中有效部分，精制后制成灭菌水溶液，为确定最佳提取工艺参数，选用正交实验法，考察加水量，浸泡时间、煎煮次数、煎煮时间4个因素，每个因素3个水平的实验方案，见表3。

                                 表3  因素水平表

因素水平  A加水量(倍)    B浸泡时间  C煎煮次数(次)    D煎煮时间(h)

1         15(10、10)     0          1                1(1、0.5)

2         20(15、15)     0.5        2                1(0.5、0.5)

3         25(20、20)     1          3                1(1、1)

注：加水量及煎煮时间括号内的数值分别为第二、第三次加水量及煎煮时间。

取独一味药材，切成段(1～2cm)，按上述各个因素及水平提取，分别将各实验方法所得提取液过滤，浓缩至1000ml，以每次实验的煎煮液中木犀草的含量为考察指标，选L₉(3⁴)正交实验表进行实验，结果见表4，并对实验结果进行方差分析，结果见表5。

表4  正交试验表及结果[L₉(3⁴)]

    试验号       A             B            C             D                木犀草素含量            (mg/ml)

    1            1             1            1             1                 0.0509

    2            1             2            2             2                 0.1008

    3            1             3            3             3                 0.1059

    4            2             1            2             3                 0.1407

    5            2             2            3             1                 0.1727

    6            2             3            1             2                 0.1125

    7            3             1            3             2                 0.1239

    8            3             2            1             3                 0.1086

    9            3             3            2             1                 0.1179

                                                                         ∑_y＝1.0339

      K₁       0.2576        0.3155        0.2720        0.3415 

含    K₂       0.4259        0.3821        0.3594        0.3372

量    K₃       0.3504        0.3363        0.4025        0.3552

mg/ml R         0.1683        0.0666        0.1305        0.0180 

         S_k＝S_D

                                                                  S_A＝0.00474   S_B＝0.00078

                                                                  S_C＝0.00295   S_D＝0.00006

从表4中可知，以木犀草素百分含量为考察指标，A因素极差最大，其次是C因素、B因素及D因素，从K值分析A₂＞A₃＞A₁，B₂＞B₃＞B₁，C₃＞C₂＞C₁，D₃＞D₂＞D₁。

表5 方差分析结果

    方差来源  偏差平方和    自由度    方差        F       P(显著性)

木

犀

    A         0.00474       2         0.00237     79.0    ＞0.05

草

    B         0.00078       2         0.00039     13.0    ＞0.10

素

    C         0.00295       2         0.001475    49.2    ＞0.05

含

    D         0.00006       2         0.00003     1       ＜0.10

量

(％)

F0.10(2.2)＝9.00  F0.05(2.2)＝19.00  F0.01(2.2)＝99.00

从方差分析结果可以看出，A因素有较显著性差异，其次是C因素，B因素及D因素影响差异不显著，结合表4可知，以得粉率及木犀草素百分含量为考察指标，最佳工艺为A₂B₂C₃D₃，综上所述，本制剂最佳选择工艺为A₂B₂C₃D₃(即加水煎煮三次，第一次加20倍的水，浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时)。

实验例4 精制条件考察

药材独一味加水煎煮时大多数有效部分均能提出，但同时也煎出了许多淀粉、蛋白质、粘液质、鞣质、色素等水溶性杂质，加入乙醇静置沉淀可将部分杂质除去，含醇量达70％，可除去蛋白质等杂质，达80～85％时除去全部蛋白和多糖，但鞣质、色素、树脂等不易除尽，还要进一步采用其它方法除去鞣质等杂质。

一、醇沉时药液浓度的确定

水提醇沉时药液浓度对醇沉效果影响较大，药液过稀，需用大量乙醇，造成浪费；过浓，醇沉时会迅速出现大量沉淀，易包裹有效成分，造成损失。本试验中将独一味煎煮液浓缩成不同浓度，加乙醇沉淀，以醇沉液中木犀草素的含量为考察指标，确定醇沉时药液的最佳浓度，具体方法如下。

取独一味，切成段(1～2cm)，称取三份，每份1000g，分别加水煎煮三次，第一次加20倍的水，浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时，滤过，滤液分别浓缩成1∶1(每ml相当1g药材)、1∶2(每ml相当2g药材)、1∶3(每ml相当3g药材)的药液，冷却至室温，加乙醇使含醇量达70％，于5～8℃静置12小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加水稀释成1000ml，测定木犀草素的含量，结果见表6。

                   表6醇沉时药液最佳浓度的确定

            药液浓度      药液体积    乙醇用量    木犀草素含量投料量(g)

             (g/ml)        (ml)        (ml)        (mg/ml)

1000         1∶1          1000        1714        0.170

1000         1∶2          500         857         0.167

1000         1∶3          330         566         0.089

试验结果表明药液浓度为1∶1醇沉后药液中木犀草素的含量与药液浓度为1∶2醇沉后药液中木犀草素的含量接近，但乙醇用量大，药液浓度为1∶3醇沉，乙醇用量虽少，但醇沉后药液中木犀草素的含量低，故选择药液浓度为1∶2为醇沉时药液的最佳浓度。

二、乙醇沉淀浓度考察

为了除去独一味煎煮液中淀粉、蛋白质、粘液质等杂质，需加入适当的乙醇使其沉淀除去，本试验取三份独一味水煎浓缩至1∶2(每ml相当于2g药材)的药液，加入不同量乙醇使其含量分别为60％，70％，80％，冷藏，静置12小时，滤过，回收乙醇，加注射用水定容至1000ml，以药液的色泽及木犀草素为指标确定最佳乙醇沉淀浓度，结果见表7。

                           表7乙醇沉淀浓度考察

投料量  药液体积  醇沉浓度

                                 溶液色泽            木犀草素含量(mg/ml)

(g)     (ml)      (％)

                              深棕红色，放置3

1000    500       含醇量60                              0.180

                              天出现沉淀

                              棕红色，放置7天

1000    500       含醇量70                              0.167

                              不出现沉淀

                              棕红色，放置7天

1000    500       含醇量80                              0.115

                              不出现沉淀

试验结果表明：含醇量为60％时，药液中的木犀草素含量最高，含醇量为80％时，药液中的木犀草素含量最低。但是含醇量为60％时，药液放置3天就出现沉淀现象，含醇量为70％时，药液中的木犀草素含量与含醇量60％时接近，而且放置7天未见出现沉淀。因此选择含醇量70％为最佳醇沉浓度。

三、除去药液中鞣质方法选择

取独一味，切成段(1～2cm)，称取3000g，加水煎煮三次，第一次加20倍的水，浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至1500ml(每ml相当于2g原生药)，放至室温，加入乙醇，使含醇量达70％，于5～8℃下静置12小时，滤过，滤液加乙醇使含醇量达85％，5～8℃静置12小时，过滤，滤液加20％硫酸调PH5～6，放置1小时，滤过，将该滤液均匀的分成三份，分别为A液、B液、C液，备用。

1.明胶沉淀法

取A液，回收乙醇至无醇味，加入2％明胶溶液，使药液不发生混浊为止，于5～8℃下冷藏12小时，滤过，滤液加入乙醇使含醇量达75％，放置，滤过，除去过量明胶，回收乙醇至无醇味，加入注射用水至800ml，冷藏12小时，过滤，滤液加0.05％活性炭，煮沸10分钟，过滤，加注射用水至1000ml，用10％NaOH调PH值5～6，用0.22μm微孔滤膜滤过，分装于5ml安瓿中，100℃流通蒸气灭菌30分钟，取出、放凉，即得。

2.碱性醇沉法

取B液，加40％NaOH溶液调PH8～9，于5～8℃下冷藏12小时，过滤，滤液用20％H₂SO₄溶液调PH值5～6，静置1小时，过滤，回收乙醇至无醇味，自明胶沉淀法，加入注射用水至800ml起，……依法操作，即得。

3.超滤法

取C液，回收乙醇至无醇味，加注射用水至800ml  5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液用10％NaOH调PH5～6℃，用膜孔载留值为10000以下的超滤膜过滤，滤液加注射用水至1000ml，微孔滤膜过滤，分装于5ml安瓿中，100℃流通蒸气灭菌30分钟，即得。

4.产品质量确认

上述A液、B液、C液、三种鞣质除去方法制得的样品分别检查其外观性状，不溶性微粒、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子，并测定每ml中固体物含量及木犀草素的含量，以评价除鞣质效果，结果见表8。

                           表8.除鞣质试验结果

以上结果表明采用明胶沉淀法，碱性醇沉法，超滤法制得的独一味注射剂其澄明度、不溶性微粒、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子均符合规定。

总固体物：明胶沉淀法＞碱性醇沉法＞超滤法。

外观性状：碱性醇沉法、超滤法优于明胶沉淀法。

木犀草素含量：碱性醇沉法＞明胶沉淀法＞超滤法

碱性醇沉法不但外观性状好，木犀草素含量高而且工艺简单，成本低，故选择碱性醇沉法为本品除鞣质方法。

实验例5 pH值调节剂的选择

仪器与试剂

MP220型酸度计：METTLER TOLEDO

邻苯二甲酸氢钾缓冲液(pH4.00，上海雷磁厂生产)

混合磷酸缓冲液(pH6.86，上海雷磁厂生产)

控制注射剂的pH值，目的是增强制剂稳定性，加速药物的吸收，减少局部刺激等，注射剂的pH应控制在4～9之间，对人体无刺激性。最常用的酸性pH值调节剂有盐酸、硫酸和枸橼酸。

pH值调节剂的选择试验如下。

取独一味，切成段(1～2cm)，称取三份，每份1000g，分别加水煎煮三次，第一次加20倍的水，浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时，滤过，滤液分别浓缩成至约500ml，冷却至室温，加乙醇使含醇量达70％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液再加乙醇使含醇量达85％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液用40％氢氧化钠调节pH值至8～9，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加20％硫酸调PH5～6，放置12小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加注射用水至800ml，分别用10％盐酸、20％硫酸和10％枸橼酸溶液调PH值至6.0，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加0.05％针用活性炭煮沸15分钟，滤过，滤液加注射用水至1000ml，用0.22μm的微孔滤膜过滤，灌封，100℃灭菌30min后，迅速冷却，分别测定pH值，结果见表9。

        表9灭菌前后pH值测定结果

        调节剂    10％盐酸    10％枸橼酸     20％硫酸

        灭菌前    6.0         6.0            6.0

        灭菌后    5.1         5.3            5.8

        pH值下降  0.9         0.7            0.2

以上试验结果表明，以10％盐酸为调节剂的药液pH值下降幅度最大，以20％硫酸为调节剂的药液pH值下降的幅度较小，故选择以20％硫酸为调节剂。

实验例6  活性炭用量选择

为了提高产品的质量，往往采用活性炭吸附原辅料中的杂质、色素、热源，以改善产品的澄明度，达到较好的稳定性，为此我们考察了不同用量的活性炭对产品澄明度、木犀草素含量及热源的影响，试验方法如下：取调节PH值后的溶液三份，分别加入不同量的活性炭，煮沸加热15分钟，搅拌，取出，冷却，加注射用水稀释到规定体积，微孔滤膜(孔径0.22μm)精滤，收集滤液，罐装，灭菌。照《中国药典》2000年版一部附录IU注射剂项下方法检查澄明度和热源，结果见表l0。

                   表10  活性炭加入量考察结果

活性炭加入量(％)           0.05       0.1         0.2

澄明度                     符合规定   符合规定    符合规定

热源                       符合规定   符合规定    符合规定

木犀草含量(mg/ml)          0.136      0.128       0.121

活性炭从0.05％～0.2％，澄明度、热源均符合规定，但木犀草含量(mg/ml)在活性炭加入量为0.05％时最高，故活性炭加入量选择0.05％。

实验例7  加热灭菌后冷却方式的选择

经过100℃加热灭菌后的溶液，采用自然降温冷却需要3小时才能降至室温，但采用物理降温只需要0.5小时就能达到冷却。对两种不同的冷却方式对产品的外观色泽、pH值及含量的影响进行了考察，方法及结果如下：将灌装好的注射液分为两组，每组50支，同在100℃加热灭菌30分钟后，一组采用室温自然冷却，一组以热水、温水、冷水依次冲淋，进行强制性散热，然后分别检查制剂的外观色泽、pH值及含量测定结果见表11。

                 表11  不同冷却方式对质量的影响

冷却方式    外观性状            pH值      木犀草素含量(g/ml)

灭菌前      浅棕黄色澄明液体    5.85          0.137

自然降温    浅棕色澄明液体      5.53          0.128

物理降温    浅棕黄色澄明液体    5.72          0.135

以上结果显示，自然降温由于受热时间较长，对其pH值影响较大，pH值下降了0.32，色泽没有明显变化，木犀草素含量无显著性变化，因此工艺中选择物理降温，即以不同温度的水，按照不同的温度梯度依次冲淋，进行强制性散热，以确保注射液PH值不因受热时间长而变化。

实验例8 三批中试产品试验

按照工艺研究优化选出的工艺，进行了三批中试样品(处方量10倍投料)的制备，三批样品的试验数据见表12、13、14。按《中国药典》、《中药注射剂研制指导原则及有关规定汇编》中有关方法进行试验、检查。

          表12    中试实验(10000ml)  批号040315

药材		独一味  10000g
			制法		取独一味药材，净选，切成1～2cm小段，称取10000g，加水煎煮三次，第一次加20倍的水浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至约5000ml，加乙醇使含醇量达70％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达85％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液用40％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加20％硫酸调PH5～6，放置1小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水至8000ml，5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加活性炭0.05％，煮沸15分钟，过滤，加入注射用水至10000ml，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于5ml安瓿中，灭菌，即得。制得成品1950支，得率97.5％。
检查	pH重金属不溶性微粒热源灭菌澄明度	5.6符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定
			含量测定(mg/ml)		0.132

表13    中试实验(10000ml)  批号040320

药材		独一味 10000g
			制法		取独一味药材，净选，切成1～2cm小段，称取10000g，加水煎煮三次，第一次加20倍的水浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至约5000ml，加乙醇使含醇量达70％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达85％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液用40％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加20％硫酸调PH5～6，放置1小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水至8000ml，5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加活性炭0.05％，煮沸15分钟，过滤，加入注射用水至10000ml，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于5ml安瓿中，灭菌，即得，制得成品1912支，得率95.6％。
检查	pH重金属不溶性微粒热源灭菌澄明度	6.1符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定
			含量测定(mg/ml)		0.141

表14    中试实验(10000ml)  批号040324

药材		独一味10000g
			制法		取独一味药材，净选，切成1～2cm小段，称取10000g，加水煎煮三次，第一次加20倍的水浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至约5000ml，加乙醇使含醇量达70％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达85％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液用40％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加20％硫酸调PH5～6，放置1小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水至8000ml，5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加活性炭0.05％，煮沸15分钟，过滤，加入注射用水至10000ml，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于5ml安瓿中，灭菌，即得，制得成品1971支，得率98.6％。
检查	pH重金属不溶性微粒热源灭菌澄明度	5.8符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定
			含量测定(mg/ml)		0.128

4.结论

经三批中试试验结果表明，本工艺稳定，重复性好，三批样品指纹图谱经计算与标准指纹图谱比较相似度大于0.9，符合要求，说明该产品工艺质量可控。三批样品按《中国药典》、《中药注射剂研制指导原则及有关规定汇编》中有关方法检查PH值、炽灼残渣、重金属、砷盐、蛋白质、鞣质、草酸盐、树脂、钾离子、热源，三批样品均符合规定。

实施例1：

称取独一味药材1000g，加水煎煮三次，第一次加20倍的水浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水分别煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至药液浓度为1∶2的浓缩液500ml，加乙醇使含醇量达70％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达85％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液用40％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加20％硫酸调PH5～6，放置1小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水至800ml，5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加活性炭0.05％，煮沸15分钟，过滤，加入注射用水至1000ml，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于5ml安瓿中，灭菌，即得。

本品为独一味药材经加工制成的灭菌水溶液，规格5ml，每ml相当于1g独一味药材，含独一味以木犀草素计为每1ml不得少于0.1mg。

实施例2：

取独一味药材，净选，切成1～2cm小段，称取1000g，加水煎煮三次，第一次加15倍的水浸泡0.5小时，煎煮1.5小时，第二次、第三次各加20倍量水，分别煎煮0.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至药液浓度为1∶1的浓缩液500ml，加乙醇使含醇量达80％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达90％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液用30％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加30％硫酸调PH5～6，放置2小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水至800ml，5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加活性炭0.10％，煮沸20分钟，过滤，加入注射用水至1000ml，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于5ml安瓿中，灭菌，物理降温，即得。

本品为独一味药材经加工制成的灭菌水溶液，规格5ml，每ml相当于1g独一味药材，含独一味以木犀草素计为每1ml不得少于0.1mg。

实施例3：

取独一味药材，净选，切成1～2cm小段，称取1000g，加水煎煮三次，第一、二次加20倍的水浸泡0.5小时，煎煮1小时，第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至药液浓度为1∶2的浓缩液500ml，加乙醇使含醇量达60％，于5～8℃冷藏24小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达80％，于5～8℃冷藏24小时，滤过，滤液用50％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏24小时，滤过，滤液加10％硫酸调PH5～6，放置3小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水至800ml，5～8℃冷藏24小时，滤过，滤液加活性炭0.20％，煮沸30分钟，过滤，加入甘露醇80g和葡萄糖20g及注射用水至1000ml，用0.22μm微孔滤膜过滤，滤液灌装于5ml灭菌西林瓶中，冷冻干燥，压塞，即得。

本品为独一味药材经加工制成的冻干粉，规格1g/支，每支相当于5g独一味药材，含独一味以木犀草素计为每1g不得少于0.5mg。

Claims (10)

1、一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于该方法为：取独一味药材，加水煎煮三次，第一次加15～25倍的水浸泡0.5～1小时，煎煮0.5～1.5小时，第二次、第三次各加10～20倍量水，分别煎煮0.5～1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至药液浓度为1∶1～2的浓缩液；加乙醇使含醇量达60％～80％，于5～8℃冷藏12～24小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达80％～90％，于5～8℃冷藏12～24小时，滤过；滤液用30％～50％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏12～24小时，滤过；滤液加10％～30％硫酸调PH至5～6，放置1～3小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水，5～8℃冷藏12～24小时，滤过，滤液加活性炭0.05％～0.20％，煮沸15～30分钟，过滤，得独一味提取物；取独一味提取物，按常规方法，制备成注射制剂：注射液或冻干粉针。

2、如权利要求1所述的一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于该方法为：取独一味药材，加水煎煮三次，第一次加20倍的水浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至药液浓度为1∶2的浓缩液，加乙醇使含醇量达70％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达85％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液用40％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加20％硫酸调PH5～6，放置1小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水，5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加活性炭0.05％，煮沸15分钟，过滤，得独一味提取物；取独一味提取物，按常规方法，制备成注射制剂：注射液或冻干粉针。

3、如权利要求1所述的一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于该方法为：取独一味药材，加水煎煮三次，第一次加15倍的水浸泡0.5小时，煎煮1.5小时，第二次、第三次各加20倍量水，分别煎煮0.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至药液浓度为1∶1的浓缩液，加乙醇使含醇量达80％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达90％，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液用30％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加30％硫酸调PH5～6，放置2小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水，5～8℃冷藏12小时，滤过，滤液加活性炭0.10％，煮沸20分钟，过滤，得独一味提取物；取独一味提取物，按常规方法，制备成注射制剂：注射液或冻干粉针。

4、如权利要求1所述的一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于该方法为：取独一味药材，加水煎煮三次，第一、二次加20倍的水浸泡0.5小时，煎煮1小时，第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至药液浓度为1∶2的浓缩液，加乙醇使含醇量达60％，于5～8℃冷藏24小时，滤过，滤液再加乙醇使含量达80％，于5～8℃冷藏24小时，滤过，滤液用50％的氢氧化钠调PH至8～9，于5～8℃冷藏24小时，滤过，滤液加10％硫酸调PH5～6，放置3小时，滤过，回收乙醇至无醇味，加入注射用水，5～8℃冷藏24小时，滤过，滤液加活性炭0.20％，煮沸30分钟，过滤，得独一味提取物；取独一味提取物，按常规方法，制备成注射制剂如注射液或冻干粉针。

5、如权利要求1所述的一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于：在精制的工序中去除独一味提取物药液中鞣质的方法采用的是碱性醇沉法，即加40％NaOH溶液调PH值8～9，于5～8℃下冷藏12小时，过滤，滤液用20％H₂SO₄溶液调PH值5～6，静置1小时，过滤，回收乙醇至无醇味。

6、如权利要求1所述的一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于：用乙醇沉淀时，沉淀条件为药液的浓度为1∶2，用乙醇调节的含醇浓度为70％。

7、如权利要求1所述的一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于该方法中独一味药材还可净选后切成1～2cm小段再煎煮。

8、如权利要求1所述的一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于该方法中所述的加热灭菌的冷却方式是物理降温。

9、如权利要求1所述的一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于：取独一味提取物，加入注射用水，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于5ml安瓿中，灭菌，即得独一味注射液。

10、如权利要求1所述的一种独一味注射制剂的制备方法，其特征在于：取独一味提取物，加入甘露醇、葡萄糖、氨基酸、乳糖、低分子右旋糖酐、氯化钠等辅料中的一种或几种以及注射用水，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于5ml灭菌西林瓶中，冷冻干燥，即得独一味粉针剂。