CN1451005A - 作为细胞增殖抑制剂的7－氧代吡啶并嘧啶 - Google Patents

Abstract

本发明提供了式(I)的化合物，其中R¹为氢或烷基；R²为取代的环烷基，杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基，杂取代的环烷基－烷基，杂环基，杂环基螺环烷基，芳烷氧基，烷氧基，亚烷基－S(O)_n－烷基(其中n为1或2)，或SO₂Ar²；R³为氢，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，酰基氨基，－NR^a－C(＝O)－R^b(其中R^a为氢或烷基和R^b为杂环基或杂烷基)，烷基，环烷基，芳基，芳烷基，卤代烷基，杂烷基，氰基烷基，－亚烷基－C(O)－R(其中R为氢，烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基或二烷基氨基)酰基，或苯二甲酰亚氨基烷基；以及每个Ar¹和Ar²独立地为芳基；其用于治疗选自关节炎、局限性回肠炎、阿尔茨海默氏病、过敏性肠综合症、成人呼吸窘迫综合症或慢性阻塞性肺病。

Description

作为细胞增殖抑制剂的7-氧代吡啶并嘧啶

本发明涉及7-氧代-吡啶并嘧啶。具体地，本发明提供了2，6-二取代的7-氧代-吡啶并[2，3-d]嘧啶，其制备方法，含有它们的药物制剂，以及应用它们的方法。

促分裂原活化的蛋白激酶(MAP)属于定向脯氨酸的丝氨酸/苏氨酸激酶家族，它们通过双磷酸化激活它们的底物。该激酶通过大量包括营养和渗透压应力、UV光、生长因子、内毒素和炎性细胞因子在内的信号激活。MAP激酶中有一组是包括多种同工型的p38激酶组(例如，p38α，p39β，p38γ和p38δ)。该p38激酶负责磷酸化和激活转录因子以及其它激酶，其被物理和化学应力、促炎性细胞因子和细菌脂多糖激活。

更重要的是，已经表明p38磷酸化的产物介导包括TNF和IL-1的炎性细胞因子的产生，以及环加氧酶-2的产生。这些细胞因子的每一种都涉及多种病症。例如，TNF-a是一种主要由激活的单细胞和巨嗜细胞产生的细胞因子。其过量或无控制的产生在类风湿性关节炎的病理学中发挥病因的作用。最近，已经表明TNF产生的抑制在治疗炎症、炎性肠病、多发性硬化和哮喘方面有广泛应用。

TNF还涉及病毒感染，例如HIV，流感病毒，以及包括1型单纯疱疹病毒(HSV-1)，2型单纯疱疹病毒(HSV-2)，巨细胞病毒(CMV)，水痘-带状疱疹病毒(VZV)，Epstein-Barr病毒，人疱疹病毒-6(HHV-6)，人疱疹病毒-7(HHV-7)，人疱疹病毒-8(HHV-8)在内的疱疹病毒，假狂犬病和鼻气管炎，等。

同样，IL-1也是由激活的单细胞和巨嗜细胞产生的，并且在许多包括类风湿性关节炎、发热、和骨重吸收的减弱在内的病理生理反应中起作用。

另外，p38的介入可能与中风、阿尔茨海默氏病、骨关节炎、肺损伤、脓毒性休克、血管发生、皮炎、牛皮癣和特异性皮炎有关，参见，例如，J.Exp.Opin.Ther.Patents，(2000)10(1)。

WO 96/34867公开了某些作为蛋白酪氨酸激酶介导的细胞增殖的抑制剂的吡啶并[2，3-d]嘧啶。

通过抑制p38激酶而对这些细胞因子进行抑制有益于控制、减少和缓解许多这些疾病的病症。

一方面，本发明提供了下式表示的化合物：

其中：

R¹为氢或烷基；

R²为取代的环烷基，杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基，杂取代的环烷基-烷基，杂环基，杂环基螺环烷基，芳烷氧基，烷氧基，烷基-S(O)_n-亚烷基-(其中n为1或2)，或SO₂Ar²；

R³为氢，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，酰基氨基，-NR^a-C(＝O)-R^b(其中R^a为氢或烷基和R^b为杂环基或杂烷基)，烷基，环烷基，芳基，芳烷基，卤代烷基，杂烷基，氰基烷基，-亚烷基-C(O)-R(其中R为氢，烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基或二烷基氨基)酰基，或苯二甲酰亚氨基烷基；

以及每个Ar¹和Ar²独立地为芳基；

或其药用盐或前体药物。

式I的化合物和其上述盐是蛋白激酶的抑制剂，表现有效的体内抗p38活性。因此，这类化合物可以用于治疗促炎性细胞因子例如TNF和IL-1介导的疾病。

因此，本发明的另一个方面提供了用于治疗p38介导的疾病或病症的方法，其中对需要该治疗的患者给药治疗有效量的式I化合物。

本发明的另一个方面提供了制备上述化合物的方法。

本发明的另一个方面提供了制备用于治疗p38介导的疾病或病症的药物的方法。

除非另有说明，用于说明书和权利要求的下列术语含义如下：

″酰基″是指基团-C(O)R，其中R为氢，烷基，环烷基，环烷基烷基，苯基或苯基烷基，其中烷基，环烷基，环烷基烷基和苯基烷基如本文中所定义。代表性的例子包括但不限于甲酰基，乙酰基，环己基羰基，环己基甲基羰基，苯甲酰基，苄基羰基等等。

″酰基氨基″是指基团-NR′C(O)R，其中R′为氢或烷基，和R为氢，烷基，环烷基，环烷基烷基，苯基或苯基烷基，其中烷基，环烷基，环烷基烷基和苯基烷基如本文中所定义。代表性的例子包括但不限于甲酰基氨基，乙酰基氨基，环己基羰基氨基，环己基甲基-羰基氨基，苯甲酰基氨基，苄基羰基氨基等等。

″烷氧基″是指基团-OR其中R为如本文中定义的烷基，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基，丁氧基等等。

″烷基″是指1-6个碳原子的直链饱和一价烃基或3-6个碳原子的支链饱和一价烃基，例如甲基，乙基，丙基，2-丙基，n-丁基，异-丁基，叔-丁基，戊基等等。

″亚烷基″是指1-6个碳原子的直链饱和二价烃基或3-6个碳原子的支链饱和二价烃基，例如亚甲基，亚乙基，2，2-二甲基亚乙基，亚丙基，2-甲基亚丙基，亚丁基，亚戊基等等。

″烷基磺酰基-烷基″是指基团R^a-S(O)₂-R^b-，其中R^a为烷基和R^b为亚烷基，如本文中所定义。

″烷硫基″是指基团-SR，其中R为为如上定义的烷基，例如甲硫基，乙硫基，丙硫基，丁硫基等等。

″芳烷氧基″是指基团-O-R^aR^b，其中R^a为如上定义的亚烷基，和R^b为如上定义的芳基。

″芳基″是指一价单环或双环芳香烃基，其任选地独立地被一个或多个取代基，优选一个、两个或三个取代基取代，取代基优选地选自烷基，羟基，烷氧基，卤代烷基，卤代烷氧基，杂烷基，卤素，硝基，氰基，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，亚甲基二氧基，亚乙基二氧基和酰基。更具体地，术语芳基包括但不限于苯基，氯苯基，甲氧基苯基，1-萘基，2-萘基及其衍生物。

″环烷基″是指3-7个环碳原子的饱和一价环烃基，例如环丙基，环丁基，环己基，4-甲基环己基等等。

″环烷基烷基″是指基团-R^aR^b，其中R^a为如本文中所定义的亚烷基和R^b为如本文中所定义的环烷基，例如环己基甲基等等。

″取代的环烷基″是指如本文中所定义的环烷基，其中一个、两个或三个(优选一个)环氢原子独立地被氰基或-Y-C(O)R(其中Y不存在或为亚烷基基团，和R为氢，烷基，卤代烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，或任选取代的苯基)取代。

″二烷基氨基″是指基团-NRR′，其中R和R′独立地表示如本文中定义的烷基，羟基烷基，环烷基，或环烷基烷基基团。有代表性的例子包括但不限于二甲基氨基，甲基乙基氨基，二(1-甲基乙基)氨基，(甲基)(羟基甲基)氨基，(环己基)(甲基)氨基，(环己基)(乙基)氨基，(环己基)(丙基)氨基，(环己基甲基)(甲基)氨基，(环己基甲基)(乙基)氨基等等。

″卤素″是指氟，氯，溴，或碘，优选氟和氯。

″卤代烷基″是指被一个或多个相同或不同的卤素原子取代的烷基，例如-CH₂Cl，-CF₃，-CH₂CF₃，-CH₂CCl₃等等。

″杂烷基″是指如本文中定义的烷基，其中一个、两个或三个氢原子被独立地选自-OR^a，-NR^bR^c，和-S(O)_nR^d的取代基所取代(其中n为0-2的整数)，可以理解杂烷基基团的连接点是通过碳原子，其中R^a为氢，酰基，烷基，环烷基，或环烷基烷基；R^b和R^c相互独立地为氢，酰基，烷基，环烷基，或环烷基烷基，和当n为0时，R^d为氢，烷基，环烷基或环烷基烷基，和当n为1或2时，R^d为烷基，环烷基，环烷基烷基，氨基，酰基氨基，单烷基氨基，或二烷基氨基。有代表性的例子包括但不限于2-羟基乙基，3-羟基丙基，2-羟基-1-羟基甲基乙基，2，3-二羟基丙基，1-羟基甲基乙基，3-羟基丁基，2，3-二羟基丁基，2-羟基-1-甲基丙基，2-氨基乙基，3-氨基丙基，2-甲基磺酰基乙基，氨基磺酰基甲基，氨基磺酰基乙基，氨基磺酰基丙基，甲基氨基磺酰基甲基，甲基氨基磺酰基乙基，甲基氨基磺酰基丙基等等。

″杂烷基取代的环烷基″是指如本文中定义的环烷基，其中环烷基中的一个、两个或三个氢原子已经被杂烷基基团取代，可以理解杂烷基基团通过碳碳键连接到环烷基基团上。有代表性的例子包括但不限于1-羟基甲基环戊基，2-羟基甲基环己基等等。

″杂取代的环烷基″是指如本文中定义的环烷基，其中环烷基中的一个、两个或三个氢原子已经被独立地选自下组的取代基所取代：羟基，烷氧基，氨基，酰基氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，氧代(C＝O)，亚氨基，肟基(＝NOH)，NR′SO₂R^a(其中R′为氢或烷基，和R^d为烷基，环烷基，氨基，单烷基氨基或二烷基氨基)，-X-C(O)R(其中X为O或NR′，R为氢，烷基，卤代烷基，烷氧基，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，或任选取代的苯基，和R′为H或烷基)，或-S(O)_nR(其中n为0-2的整数)，其中当n为0，R为氢，烷基，环烷基，或环烷基烷基，和当n为1或2，R为烷基，环烷基，环烷基烷基，氨基，酰基氨基，单烷基氨基或二烷基氨基。有代表性的例子包括但不限于2-，3-，或4-羟基环己基，2-，3-，或4-氨基环己基，2-，3-，或4-甲亚磺酰氨基(methanesulfonamido)-环己基等等，优选4-羟基环己基，2-氨基环己基，或4-甲亚磺酰氨基-环己基。

″杂取代的环烷基-烷基″是指基团R^aR^b-，其中R^a为杂取代的环烷基基团，和R^b为亚烷基基团。

″杂环基″是指3-8个环原子的饱和或不饱和的非芳香环基，其中一或两个环原子为选自N、O或S(O)_n(其中n为0-2的整数)的杂原子，其余的环原子为碳，其中一个或两个碳原子可以任选地被羰基基团取代。该杂环基环可以任选地被一个、两个或三个选自下组的取代基独立取代：烷基，卤代烷基，杂烷基，卤素，硝基，氰基，氰基烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，芳烷基，-(X)_n-C(O)R(其中X为O或NR′，n为0或1，R为氢，烷基，卤代烷基，羟基(当n为0)，烷氧基，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基或任选取代的苯基，和R′为H或烷基)，-亚烷基-C(O)R(其中R为OR或NR′R″，和R为氢，烷基或卤代烷基，和R′和R″独立地为氢或烷基，或R′和R″与它们相连的氮原子一起形成环)，或-S(O)_nR(其中n为0-2的整数)，其中当n为0时，R为氢，烷基，环烷基或环烷基烷基，和当n为1或2时，R为烷基，环烷基，环烷基烷基，氨基，酰基氨基，单烷基氨基或二烷基氨基。更具体地，术语杂环基包括但不限于四氢吡喃基，哌啶子基，N-甲基哌啶-3-基，哌嗪子基，N-甲基吡咯烷-3-基，3-吡咯烷子基，吗啉代，硫代吗啉代，硫代吗啉代-1-氧化物，硫代吗啉代-1，1-二氧化物，吡咯啉基，咪唑啉基，N-甲磺酰基-哌啶-4-基，及其衍生物。

在进一步的定义中，术语″杂环基″具有与此前定义相同的含义，但是，此外该杂环基还可以被4个取代基取代，其中取代基如此前所定义。此外，取代基-亚烷基-C(O)R还可以具有含义R为NR′R″，这样R′和R″与它们相连的氮原子一起形成环，在取代基-S(O)_nR中，其中n为1或2，R还可以具有卤代烷基的含义。更具体地，术语杂环基除了具有上述含义，还可以具有下列含义：四氢硫代吡喃基，四氢硫代呋喃基和四氢呋喃基，甚至更具体地，哌啶-4-基，哌啶-1-基，四氢吡喃-4-基，吡咯烷-3-基，吗啉代，哌嗪-1-基，四氢硫代吡喃-4-基，四氢硫代吡喃-3-基或四氢呋喃-3-基，优选哌啶-4-基，其中上述每个具体命名的杂环基取代基本身也可以被如上定义的，优选在表1和具体实施例中例举的任何具体取代基所取代。

″杂环基烷基″是指基团-R^aR^b，其中R^a为亚烷基基团，R^b为上述定义的杂环基基团，可以理解R^b通过杂环基环的碳原子连接到R^a上，例如四氢吡喃-2-基甲基，2-或3-哌啶基甲基等等。

″杂环基螺环烷基″是指由环烷基环和杂环组成的螺环基团，其中每个环具有5-8个环原子，并且两个环只具有一个共同的碳原子，可以理解杂环基螺环烷基的连接点是通过环烷基环。当环烷基基团的同一碳原子的两个氢原子被本文中定义的杂环基基团所取代时，形成螺环基团，其可以任选地被烷基，羟基，羟基烷基，或氧取代。例如，它们的例子包括但不限于1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基，1，3-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基，2，4-二酮(dione)-1，3-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基，1，5-二氧杂螺[5.5]十一烷-9-基，(3-羟基甲基-3-甲基)-1，5-二氧杂螺[5.5]十一烷-9-基等等，优选1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基和1，5-二氧杂螺[5.5]十一烷-9-基。

″羟基烷基″是指如本文定义的烷基基团，被一个或多个、优选一个、两个或三个羟基基团取代，条件是同一个碳原子不带有多于一个的羟基基团。有代表性的例子包括但不限于羟基甲基，2-羟基乙基，2-羟基丙基，3-羟基丙基，1-(羟基甲基)-2-甲基丙基，2-羟基丁基，3-羟基丁基，4-羟基丁基，2，3-二羟基丙基，2-羟基-1-羟基甲基乙基，2，3-二羟基丁基，3，4-二羟基丁基和2-(羟基甲基)-3-羟基丙基，优选2-羟基乙基，2，3-二羟基丙基和1-(羟基甲基)-2-羟基乙基。因此，在本文中使用的术语″羟基烷基″用于限定杂烷基基团的子集。

″离去基团″具有合成有机化学中常规的定义，即能够被亲核体置换的原子或基团，包括卤素(如氯，溴，和碘)，链烷烃磺酰氧基，芳烃磺酰氧基，烷基羰基氧(例如乙酰氧基)，芳基羰基氧，甲磺酰氧基，甲苯磺酰氧基，三氟甲烷磺酰氧基，芳氧基(例如2，4-二硝基苯氧基)，甲氧基，N，O-二甲基羟基氨基等等。

″单烷基氨基″是指基团-NHR，其中R为如上定义的烷基，羟基烷基，环烷基，或环烷基烷基基团，例如甲基氨基，(1-甲基乙基)氨基，羟基甲基氨基，环己基氨基，环己基甲基氨基，环己基乙基氨基等等。

″任选取代的苯基″是指任选被一个或多个、优选一个或两个选自下组的取代基独立地取代的苯环：烷基，羟基，烷氧基，卤代烷基，卤代烷氧基，杂烷基，卤素，硝基，氰基，氨基，亚甲基二氧基，亚乙基二氧基，和酰基。

″药用赋形剂″是指用于制备药学组合物的通常是安全、无毒并且既无生物学上的也无其它方面的不良作用的赋形剂，而且包括兽医以及人类药用可接受的赋形剂。说明书和权利要求书中使用的″药用赋形剂″包括一种或一种以上的赋形剂。

化合物的″药用盐″是指药学可接受并具有母体化合物的预期药理学活性的化合物。此类盐包括：(1)酸加成盐，与无机酸形成的酸加成盐，所述的无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或与有机酸形成的酸加成盐，有机酸例如是乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯代苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或(2)当母体化合物中存在的酸性质子或被金属离子代替时生成的盐，所述的金属离子例如是碱金属离子、碱土金属离子或铝离子；或与有机碱配位时生成的盐，所述的有机碱例如是乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。

本文中使用的″前药″和″前-药″可以互换使用，并且是指任何当将此类前药施用给哺乳动物对象时在体内可以释放出式(I)的活性母体药物的任何化合物。式(I)的化合物的前药是通过修饰式(I)的化合物中存在的一个或多个官能团来制得，制备所采用的方式应使该修饰可以体内裂解释放出母体化合物。前药包括式(I)的化合物，其中式(I)的化合物中羟基、氨基、巯基、羧基或羰基分别与任何可以在体内裂解再生出游离羟基、氨基或巯基的基团结合。前药的实例包括但不限于式(I)的化合物中的羟基官能团的酯(例如醋酸酯，二烷基氨基乙酸酯，甲酸酯，磷酸酯，硫酸酯，和苯甲酸酯衍生物)和氨基甲酸酯(例如N，N-二甲基氨基羰基)，羧基官能团基团的酯基(例如乙基酯，吗啉代乙醇酯)，氨基官能团的N-酰基衍生物(例如N-乙酰基)N-曼尼希碱类，席夫碱类和烯胺(enaminones)，酮和醛官能团的肟、缩醛、缩酮、烯醇酯，等等，参见Bundegaard，H.″前药的设计(Design of Prodrugs)″p 1-92，Elesevier，NewYork-Oxford(1985)。

″保护基团″是指当连接到分子中的反应性基团上时掩蔽、减少或防止该反应性的一组原子。保护基团的例子可以参见T.W.Green和P.G.Futs，有机化学的保护基团(Wiley，2nd ed.1991)，和Harrison和Harrison等，有机合成方法概要(Compendium of Synthetic Organic Methods)，1-8卷(JohnWiley和Sons，1971-1996)。有代表性的氨基保护基团包括甲酰基，乙酰基，三氟乙酰基，苄基，苄氧基羰基(CBZ)，叔-丁氧基羰基(Boe)，三甲基甲硅烷基(TMS)，2-三甲基甲硅烷基-乙烷磺酰基(SES)，三苯甲基和取代的三苯甲基基团，烯丙氧基羰基，9-芴基甲基氧基羰基(FMOC)，硝基-藜芦基氧基羰基(NVOC)等等。有代表性的羟基保护基团包括羟基或被酰基化或被烷基化的基团，如苄基和三苯甲基醚以及烷基醚，四氢吡喃基醚，三烷基甲硅烷基醚和烯丙基醚。

疾病的″治疗″或″疗法″包括：(1)预防疾病，也就是使疾病的临床症状不会在哺乳动物中发展，所述的哺乳动物可能与该疾病接触或易患有该疾病但不曾经历或显现出疾病的该症状，(2)抑制疾病，也就是阻止或减轻该疾病或其临床症状的发展，或(3)缓解疾病，也就是引起疾病或其临床症状的减退。

″治疗有效量″是指当施用给哺乳动物治疗疾病时，足以实现对该疾病的治疗的化合物的量。″治疗有效量″应根据化合物、疾病及其严重性、被治疗哺乳动物的体重等来改变。

如果在本说明书中的结构式的图中，″N″只显示一个或两个键连接到其余结构上，或者″O″显示一个键连接到其余结构上，本领域普通技术人员将会理解在式中，如果是″N″，分别存在两个或一个″H″原子，如果是″O″，存在一个″H″原子，但是没有被用于绘制结构式的计算机程序显示，例如ISIS图。因此，″-N″表示″-NH₂″，″-N-″表示″-NH-″，和″-O″表示″-OH″。

一方面，本发明提供了下式表示的化合物：

其中：

R¹为氢或烷基；

R²为取代的环烷基，杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基，杂取代的环烷基-烷基，杂环基，杂环基螺环烷基，芳烷氧基，烷氧基，烷基-S(O)_n-亚烷基-(其中n为1或2)，或SO₂Ar²；

R³为氢，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，酰基氨基，-NR^a-C(＝O)-R^b(其中R^a为氢或烷基和R^b为杂环基或杂烷基)，烷基，环烷基，芳基，芳烷基，卤代烷基，杂烷基，氰基烷基，-亚烷基-C(O)-R(其中R为氢，烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基或二烷基氨基)，酰基，或苯二甲酰亚氨基烷基；

以及每个Ar¹和Ar²独立地为芳基。

式I的特别优选化合物，其中Ar¹为任选取代的苯基，优选为式II表示的化合物：

其中n为1或2，优选1，以及X为氢，烷基，卤素，硝基，氰基或甲氧基，尤其是卤素，烷基或甲氧基，优选在2-位取代(氟，氯，甲基和甲氧基)。

式I的更优选化合物为式III表示的化合物：

关于式I、II或III化合物和/或其上述优选化合物：

优选R¹为氢或烷基，例如甲基。更优选R¹为氢。

优选地，R²为烷基磺酰基-烷基，芳烷氧基，例如苄氧基，烷氧基，杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基，杂取代的环烷基-烷基，或杂环基。更优选R²为杂取代的环烷基，优选4-杂取代的环己基，例如4-羟基环己基或杂环基，优选取代的哌啶基，吗啉代，任选取代的哌嗪基，四氢呋喃基，四氢硫代呋喃基，S-氧-四氢硫代呋喃基，S，S-二氧-四氢硫代呋喃基，四氢硫代吡喃基，S-氧-四氢硫代吡喃基，S，S-二氧-四氢硫代吡喃基或四氢吡喃基，更优选取代的哌啶基，例如N-甲磺酰基-哌啶-4-基，或4-四氢吡喃基，由此更特别优选的取代基为在表和实施例中所示的用于具体实施例的那些取代基。更优选地，R²还可以是烷基-磺酰基烷基，例如(1，1-二甲基-2-甲基磺酰基)乙基或(1，1-二甲基-3-甲基磺酰基)丙基。

优选地，R³为氢，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，酰基氨基，-NR^a-C(＝O)-R^b(其中R^a为氢或烷基，和R^b为杂环基或杂烷基)，烷基，卤代烷基，环烷基，氰基甲基，杂烷基，芳基，芳烷基或-亚烷基-C(O)-R(其中R为氢，烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基或二烷基氨基)。最优选R³为氢，氨基，二甲基氨基，异丙基氨基，(吗啉代甲酰基)氨基(即-NR^a-C(＝O)-R^b，其中R^a为氢和R^b为吗啉代)，甲基，2，2，2-三氟乙基，环丙基，氰基甲基，2-羟基乙基，4-氟苯基，苄基，羧基甲基或甲氧基羰基甲基，乙基，2-氟乙基，2-羟基-2-甲基丙基，或2-苯二甲酰亚氨基丙基。更加优选地，R³为氢或甲基。

应该理解，每个取代基R¹、R²和R³的优选方案相互组合，与式I、II和III化合物及其上述优选方案相组合，也是本发明的目的。

应该理解，当R³为氢时，该化合物可以存在下列的互变异构型。

因此，除了上面和下面描述的化合物，本发明还包括所有的互变异构体。并且，本发明还包括所有的这些化合物的药用盐，以及该化合物的前药形式和所有的立体异构体，无论是纯的手性形式，还是外消旋混合物或其它形式的混合物。

另一方面，本发明提供了下式表示的化合物：

其中

R¹为氢或烷基；

R²为取代的环烷基，杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基，杂取代的环烷基-烷基，杂环基，杂环螺环烷基或SO₂Ar²；

R³为氢，烷基，环烷基，芳基，芳烷基，卤代烷基，杂烷基，氰基烷基，-亚烷基-C(O)-R(其中R为氢，烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基或二烷基氨基)，或酰基；

以及每个Ar¹和Ar²独立地为芳基。

按照本发明的更深层面，特别优选的式I化合物由下式II表示：

其中n为1或2，和X为氢，烷基，卤素，硝基，氰基或甲氧基，特别是卤素，烷基或甲氧基，更优选在2-位取代。

式I更优选的化合物由下式III表示：

按照本发明的更深层面，在式I化合物中：

优选地，R¹为氢或烷基。更优选地，R¹为氢。

优选地，R²为杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基，杂取代的环烷基-烷基或杂环基。更优选地，R²为杂取代的环烷基或杂环基，例如4-取代的环己基，取代的哌啶基，或四氢吡喃基。

优选地，式I化合物的R³为氢，烷基，卤代烷基，环烷基，氰基甲基，杂烷基，芳基，芳烷基或-亚烷基-C(O)-R(其中R为氢，烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基或二烷基氨基)。最优选R³为氢，甲基，2，2，2-三氟乙基，环丙基，氰基甲基，2-羟基乙基，4-氟苯基，苄基，羧基甲基，或甲氧基羰基甲基。甚至更优选地，R³为氢或甲基。

在本发明的另一个方面，提供了如下定义的化合物：

(i).下式的化合物：

或其药用盐，

其中：

R¹为氢或烷基；

R²为取代的环烷基，杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基，杂取代的环烷基-烷基，杂环基，杂环基螺环烷基，或-SO₂Ar²；

R³为氢，烷基，环烷基，芳基，芳烷基，卤代烷基，杂烷基，氰基烷基，-亚烷基-C(O)-R(其中R为氢，烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基或二烷基氨基)或酰基；和

每个Ar¹和Ar²独立为芳基。

(ii).如(i)定义的化合物，其中Ar¹为任选取代的苯基。

(iii).如(ii)定义的化合物，其中Ar¹为独立地被一个或两个卤素、烷基或甲氧基基团取代的苯基。

(iv).如(iii)定义的化合物，其中Ar¹为2-氯苯基，2-甲基苯基或2-甲氧基苯基。

(v).如(v)定义的下式化合物：

(vi).如(i)定义的化合物，其中R³为氢，烷基，卤代烷基，环烷基，氰基甲基，杂烷基，芳基，芳烷基或-亚烷基-C(O)-R。

(vii).如(vi)定义的化合物，其中R³为氢，甲基，2，2，2-三氟乙基，环丙基，氰基甲基，2-羟基乙基，4-氟苯基，苄基，羧基甲基，或甲氧基羰基甲基。

(viii).如(vii)定义的化合物，其中R³为氢或甲基。

(ix).如(i)定义的化合物，其中R³为氢或甲基，和Ar¹为独立地被一个或两个卤素，烷基或甲氧基基团取代的苯基。

(x).如(i)定义的化合物，其中R¹为氢或甲基。

(xi).如(x)定义的化合物，其中R¹为氢。

(xii).如(x)定义的化合物，其中R²为杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基或杂环基。

(xiii).如(xii)定义的化合物，其中R²为杂取代的环烷基或杂环基。

(xiv).如(xiii)定义的化合物，其中R²为4-杂取代的环己基。

(xv).如(xiv)定义的化合物，其中R²为4-羟基环己基。

(xvi).如(xiii)定义的化合物，其中R²为杂环基。

(xvii).如(xvi)定义的化合物，其中R²为取代的哌啶基。

(xviii).如(xvi)定义的化合物，其中R²为N-甲磺酰基-哌啶-4-基。

(xix).如(xvi)定义的化合物，其中R²为4-四氢吡喃基基团。

(xx).如(i)定义的化合物，其中R²为杂取代的环烷基或杂环基，和Ar¹为独立地被一个或两个卤素，烷基或甲氧基基团取代的苯基基团。

(xxi).如(xx)定义的化合物，其中R³为氢。

(xxii).如(xx)定义的化合物，其中R³为甲基。

参照本发明最宽的范围，一些有代表性的式I化合物如下表1所示：表1.式I的有代表性的化合物

在体外p38检测中，式I的IC₅₀小于10μM，优选小于5μM，更优选小于3μM，最优选小于1μM。具体地，在表I中式I化合物在体外p38检测中的IC₅₀在大约4.76μM至0.0003μM。

本发明的化合物可以以未溶剂化型以及溶剂化型(包括水合形式)形式存在。通常，溶剂化形式，包括水合形式等同于未溶剂化形式并且包括在本发明的范围内。此外，如上所述，本发明还包括所有的这些化合物的药用盐，以及该化合物的前体药物形式和所有的立体异构体，无论是纯的手性形式，还是外消旋混合物或其它形式的混合物。

本发明的化合物能够进一步形成药用酸加成盐。所有这些形式包括在本发明的范围内。

式I化合物的药用酸加成盐包括从无机酸衍生的盐，如盐酸、硝酸、磷酸、硫酸、氢溴酸、氢碘酸、亚磷酸等；以及从有机酸衍生的盐，如脂肪族单或二羧酸，苯基取代的链烷酸，羟基链烷酸，链烷二羧酸，芳香酸，脂肪族和芳香族磺酸等，这些盐包括硫酸盐，焦硫酸盐，硫酸氢盐，亚硫酸盐，硝酸盐，磷酸盐，磷酸氢盐，磷酸二氢盐，偏磷酸盐，焦磷酸盐，盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，乙酸盐，丙酸盐，辛酸盐，异丁酸盐，草酸盐，丙二酸盐，琥珀酸盐，辛二酸盐，癸二酸盐，富马酸盐，马来酸盐，扁桃酸盐，苯甲酸盐，氯代苯甲酸盐，甲基苯甲酸盐，二硝基苯甲酸盐，邻苯二甲酸盐，苯磺酸盐，甲苯磺酸盐，苯基乙酸盐，柠檬酸盐，乳酸盐，马来酸盐，酒石酸盐，甲烷磺酸盐，等等。还包括氨基酸的盐如精氨酸盐等，葡糖酸盐，半乳糖醛酸(例如参见Berge等“药物盐”，药物科学杂志(J.of Pharmaceutical Science)，1977，66，1-19)。

碱性化合物的酸加成盐的制备可以通过以常规方式将游离碱与足够量的所需的酸接触，制备盐。通过以常规方式将该盐形式与碱接触，分离游离碱，可以再生出游离碱的形式。该游离碱形式在某些物理性质如在极性溶剂中的溶解度有些不同于其各自的盐，但对于本发明的目的，这些盐在其它方面等同于其各自的游离碱。

碱性药用加成盐可以与金属离子或胺形成，如碱金属和碱土金属离子或有机胺。用作阳离子的金属离子的例子包括钠、钾、镁、钙等等。适合的胺的例子有N，N′-二苄基亚乙基二胺，氯普鲁卡因，胆碱，二乙醇胺，亚乙基二胺，N-甲基葡糖胺，和普鲁卡因(例如参见Berge等“药物盐”，药物科学杂志(J.of Pharmaceutical Science)，1977，66，1-19)。

酸性化合物的碱加成盐的制备可以通过以常规方式将游离酸与足够量的所需的碱接触，制备盐。通过以常规方式将该盐形式与酸接触，分离游离酸，可以再生出游离酸的形式。该游离酸形式在某些物理性质如在极性溶剂中的溶解度有些不同于其各自的盐，但对于本发明的目的，这些盐在其它方面等同于其各自的游离酸。

应用本领普通技术人员的公知技术，可以通过多种方法制备本发明的化合物。在本发明的一个方面，用于制备式I化合物的方法如下述反应路线1所示：反应路线1

用伯胺(R³-NH₂)处理式Ia化合物(本领普通技术人员熟悉其制备方法和/或从他可以购买的商业来源购买)，得到式Ib化合物。该反应通常于在反应条件下惰性的溶剂中进行，优选卤代脂肪族烃，尤其是二氯甲烷，任选卤代的芳香族烃，开链或环状醚(例如四氢呋喃)，甲酰胺或低级烷醇。该反应适宜在大约-20℃至大约120℃下进行。

还原式Ib化合物，得到式Ic的醇。按照本领域普通技术人员已知的方法，通常用氢化铝锂进行该还原(例如在在还原条件下是惰性的溶剂中，优选开链或环状醚，尤其是四氢呋喃，在大约-20℃至大约70℃，优选大约0℃至大约室温)。

在下步中，氧化式Ic的醇得到式Id的甲醛(carboxaldehyde)。该氧化通常使用二氧化锰进行，尽管也可以使用多种其它方法(例如参见“高级有机化学”(Advanced Organic Chemistry)，第4版，March，John Wiley & Sons，New York(1992))。根据使用的氧化剂，该反应通常在在特定的氧化条件下是惰性的溶剂中进行，优选卤代的脂肪族烃，尤其是二氯甲烷，或任选卤代的芳香族烃。该反应适宜在大约0℃至大约60℃下进行。

式Id的甲醛(carboxaldehyde)与芳基取代的乙酸酯Ar¹-CH₂-CO₂R(其中R为烷基基团)在碱存在下反应得到式Ie的化合物。可以使用任何相对非亲核性碱，包括碳酸盐，如碳酸钾、碳酸锂、碳酸钠；碳酸氢盐，如碳酸氢钾、碳酸氢锂、碳酸氢钠；胺，如仲胺和叔胺；和树脂结合的胺，如1，3，4，6，7，8-六氢-2H嘧啶并[1，2-a]嘧啶。方便地，该反应在相对极性、但在反应条件下是惰性的溶剂中进行，优选酰胺，如二甲基甲酰胺，N-取代的吡咯烷酮，尤其是1-甲基-2-吡咯烷酮，反应温度在在大约70℃至大约150℃，特别是在或接近溶剂回流温度下进行，以利于进行共沸除去水。

应用氧化剂，例如过酸如3-氯过苯甲酸(即MCPBA)和过硫酸氢钾制剂(Oxone)氧化Ie，可以提供砜(If)，其可以转化成多种目标化合物。Ie的氧化通常在氧化条件下是惰性的溶剂中进行。例如，当使用MCPBA作为氧化剂，溶剂优选卤代的脂肪族烃，尤其是氯仿。当使用过硫酸氢钾制剂(Oxone)作为氧化剂，溶剂可以是水、甲醇或有机溶剂(如甲醇，乙腈或四氢呋喃)和水的混合物。反应温度根据使用的溶剂而确定。对于有机溶剂，反应温度通常在大约-20℃至大约50℃，优选大约0℃至大约室温。当水用作溶剂，反应温度通常在大约0℃至大约50℃，优选大约0℃至大约室温。或者，氧化可以在应用基于铼/过氧化物试剂在催化条件下进行。例如参见“通过甲基三氧铼(VII)催化的应用过氧化氢进行的亚砜的氧化”，Lahti，David W.；Espenson，James H，无机化学2000，39(10)pp.2164-2167；“在催化氧化中的铼氧复合物”，Catal.Today，2000，55(4)，pp317-363；和“用于制备吡啶N-氧化物的简单和有效的方法”，Coperet，Christophe；Adolfsson，Hans；Khuong，Tinh-Alfredo V.；Yudin，Andrei K.；Sharpless，K.Barry，有机化学杂志(J.Org.Chem.)，1998，63(5)，pp1740-1741，这些文献在本文引用作为参考。

If化合物与胺(R₂-NH₂)反应提供式I’化合物(即化合物I，其中R¹为氢)。然后I’进一步烷基化提供式I化合物，其中R¹不为氢。该反应可以在溶剂存在或不存在的条件下进行。便利地，反应在大约0℃至大约200℃，优选大约室温至大约150℃的温度下进行。或者，在某些条件下不使用砜If，硫化物Ie或相应的亚砜可以直接与胺(R¹-NH₂)反应，提供式I’化合物。另外，还可以用胺R¹R²NH₂烷基化If直接提供式I化合物，其中R¹和R²如上所描述。

因此，本发明提供了制备式I化合物的方法，它是通过用胺(R¹-NH₂)处理通式式Ie或If的化合物，并任选将得到的产物与R¹-L反应，其中R¹如上所定义，但不包括氢，L为离去基团。

或者，式Ie的甲醛化合物可以如下述反应路线II所示制备，其不需要进行反应路线I的酯还原和醇氧化。反应路线II

在碱存在下，用烷基甲酸酯(例如甲酸甲酯)处理式II-a化合物(其中每个R^a独立为烷基；本领普通技术人员熟悉其制备方法和/或从他可以购买的商业来源购买)，得到式II-b化合物(其中M为金属)。该反应通常在大约0℃至大约100℃的温度范围内进行。通常可以使用醚，如THF，和其它在反应条件下为惰性的溶剂。适当的碱包括醇盐，如叔-丁醇金属，和其它能够使式II-a化合物脱质子化的相对非-亲核性的碱。

在碱存在下，用硫脲环化式II-b化合物，得到式II-c的嘧啶。典型地，应用相应的醇盐作为碱，在回流条件下、醇溶剂中进行该环化反应。

在碱存在下，用烷基化剂R-X¹(其中R为烷基基团，X¹为离去基团，如卤化物)进行式II-c化合物的烷基化，得到式II-d化合物。适当的碱包括相对非亲核性碱，包括碳酸盐，如碳酸钾、碳酸锂、和碳酸钠；碳酸氢盐，如碳酸氢钾、碳酸氢锂、和碳酸氢钠。方便地，该反应在在反应条件下惰性的相对极性的溶剂下进行，优选丙酮，二甲基甲酰胺(DMF)或甲基吡咯烷酮(MP)。

在与上述反应路线I制备式Ie化合物所描述的类似条件下，式II-d化合物与芳基取代的乙酸酯Ar¹-CH₂-CO₂R(其中R为烷基基团)反应，提供式II-e化合物。尽管式II-c化合物的烷基化通常在与芳基取代的乙酸酯反应前进行，但这两个反应的顺序并不重要，可以颠倒。因此，式II-c化合物可以与芳基取代的乙酸酯Ar¹-CH₂-CO₂R反应，得到的产物可以应用烷基化剂R-X¹进行烷基化，得到式II-e化合物。

然后应用烷基化剂R³-X²(其中R³如上所定义，X²为离去基团，如卤化物)烷基化式II-e化合物的胺基，提供化合物Ie，其可以如反应路线I所描述进一步转化为式I’化合物。

因此，本发明的另一个方面提供了制备式II-c的嘧啶化合物的方法，它是通过式IIa的缩醛与甲酸烷基酯反应，然后得到的产物与硫脲反应。

本发明的另一个方面提供了制备式II-e化合物的方法，它是通过式II-c化合物与烷基化剂或芳基取代的乙酸酯反应，然后得到的产物分别与芳基取代的乙酸酯或烷基化剂反应。

本领域普通技术人员可以理解对上述反应路线可以做出某些改变，但也在本发明的范围内。例如，某些步骤涉及与特定反应条件不相容的官能团的保护基团的使用。

木发明的式I化合物以及式I的碱性化合物与酸的药用盐可以用作药物，例如以药物制剂的形式。该药物制剂可以通过肠内给药，例如以片剂，包衣的片剂，糖锭剂，硬或者软明胶胶囊，溶液剂，乳剂或者混悬剂的形式口服给药，例如以鼻腔喷雾剂的形式鼻腔内给药，例如以栓剂的形式直肠内给药。但是它们也可以胃肠外给药，例如以注射溶液的形式。

式I化合物及其上述药用盐可以与用于制备药物制剂的药物惰性的有机或无机载体一起加工。例如，乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，或者硬脂酸或其盐等可以用作片剂，包衣的片剂，糖锭剂，硬或者软明胶胶囊的载体。软明胶胶囊的合适的载体包括例如植物油，蜡，脂肪，半固体或者液体多元醇等；但是，根据该活性成分的性质，可能有软明胶胶囊根本不需要任何赋形剂的情况。制备溶液剂和糖浆剂的合适的载体包括例如水，多元醇，糖类，转化糖和葡萄糖等。栓剂的合适的载体包括例如天然或者硬化油，蜡，脂肪，半固体或者液体多元醇等。

该药物组合物还可以含有防腐剂，增溶剂，稳定剂，润湿剂，乳化剂，甜味剂，着色剂，调味剂，改变渗透压的盐，缓冲剂，掩蔽剂或者抗氧化剂。除了式I化合物及其药用盐，它们也可以含有其它的治疗上有价值的活性剂。

含有式I化合物以及式I的碱性化合物与酸的药用盐和相容的药用载体材料的药物也是本发明的一个目的，以及同样地，还有制备该药物的方法，其包括将一种或多种这些化合物或其盐以及，必要时，一种或者多种其它的治疗上有价值的物质，与相容的药用载体制成盖仑(galenical)给药剂型。

如前所述，按照本发明，式I化合物及其上述药用盐可以作为治疗活性剂，尤其是作为抗炎剂或移植手术后防止移植排斥的药物应用。剂量在很宽的范围内变化，当然会适合于每个具体病例的个体需要。通常，如果对成年人给药，方便的每日剂量应该在约0.1mg/kg至约100mg/kg，优选约0.5mg/kg至约5mg/kg。每日剂量可以单剂量或分几次剂量给药，当发现征兆时，可以超过上述的剂量上限。

最后，本发明的另一个目的在于式I化合物及其上述药用盐用于生产药物的用途，所述药物尤其用于治疗或预防炎症、免疫性疾病、肿瘤性疾病、支气管肺病、皮肤病和心血管病，用于治疗哮喘、中枢神经系统疾病或糖尿病并发症，或用于预防移植手术之后的移植排斥。

式I化合物将用于，但不限于，治疗人或其它哺乳动物由于该哺乳动物过量或不受控制地产生TNF或p38激酶而加剧或导致的任何疾病或病症。因此，本发明提供一种治疗细胞因子介导的疾病的方法，其包括施用有效干扰细胞因子量的式I化合物或其药用盐或互变异构体。

式I化合物将用于，但不限于，治疗受治者中的炎症，和用作治疗发热的退热剂。本发明的化合物将用于治疗关节炎，包括但不限于，类风湿性关节炎、脊椎关节病、痛风性关节炎、骨关节炎、系统性红斑狼疮和青少年关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎、以及其它关节炎病症。该化合物将用于治疗肺病或肺炎症，包括成人呼吸窘迫综合症、肺肉瘤病、哮喘、矽肺病、和慢性肺炎性疾病。该化合物还用于治疗病毒和细菌感染，包括脓毒病、脓毒性休克、革兰氏阴性脓毒病、疟疾、脑膜炎、恶病质继发感染或恶性肿瘤、恶病质继发获得性免疫缺陷综合症(AIDS)、AIDS、ARC(AIDS相关性复症)、肺炎、和疱疹病毒。所述化合物还用于治疗骨吸收疾病，例如骨质疏松症、内毒素性休克、中毒性休克综合症、再灌注损伤、自身免疫性疾病，包括移植物对宿主的反应和同种异体移植排斥、心血管病，包括动脉粥样硬化症、血栓形成、充血性心力衰竭、和心脏再灌注损伤、肾再灌注损伤、肝病和肾炎，以及感染引起的肌痛。

该化合物还用于治疗阿尔茨海默氏病，流感、多发性硬化、癌症、糖尿病、系统性红斑狼疮(SLE)、皮肤相关性疾病例如牛皮癣、湿疹、烧伤、皮炎、瘢痕形成、和疤痕组织形成。本发明的化合物还将用于治疗胃肠道疾病例如炎性肠病、局限性回肠炎、胃炎、过敏性肠综合症、溃疡性结肠炎。该化合物还将用于治疗眼病，例如视网膜炎、视网膜病、葡萄膜炎、恐光症、和对眼组织的急性损伤。本发明的化合物还将用于治疗血管生成，包括瘤形成、转移、眼科疾病例如角膜移植排斥、眼新血管形成、视网膜新血管形成，包括损伤或感染后的新血管形成、糖尿病性视网膜病、晶状体后纤维增生和新生血管性青光眼；溃疡性疾病，例如胃溃疡；病理性，但非恶性病症，例如血管瘤，包括新生儿血管瘤、鼻咽血管纤维瘤和骨无血管形成性坏死；糖尿病性肾病和心肌病；以及妇女生殖系统疾病例如子宫内膜异位。本发明的化合物还可以用于预防环加氧酶-2的产生。

除了可用于人类的治疗，这些化合物还用于包括哺乳动物、嗫齿动物等的宠物动物(companion animals)、外来动物和家畜的兽医治疗。更优选的动物包括马、狗、和猫。

本发明的化合物还用于共同治疗，部分或完全代替其它常规抗炎药，例如与甾类、环加氧酶-2抑制剂、NSAIDs、DMARDS、免疫抑制剂、5-脂氧合酶抑制剂、LTB4拮抗剂和LTA4水解酶抑制剂共同给药。

本文中使用的术语“TNF介导的疾病”指TNF通过TNF本身的控制，或者通过TNF导致另一种单核因子(例如但不限于IL-1，IL-6或IL-8)被释放而发挥作用的任何和所有疾病和病症。例如，这样一种病症，其中IL-1是一种主要成分，其产生或作用响应于TNF而加剧或分泌，因此这种疾病被认为是TNF介导的疾病。

本文中使用的术语“p38介导的疾病”指通过p38本身的控制，或者通过p38导致另一种因子(例如但不限于IL-1，IL-6或IL-8)被释放，而发挥作用的任何和所有疾病和病症。例如，这样一种病症，其中IL-1是一种主要成分，其产生或作用响应于p38而加剧或分泌，因此这种疾病被认为是p38介导的疾病。

因为TNF-β与TNF-α(也称为恶液质素)存在密切的结构同源性，并且因为它们均诱导类似的生物反应，并结合同样的细胞受体，所以，TNF-α和TNF-β的合成都被本发明的化合物所抑制，因此被本发明总体称为“TNF”，除非另有具体说明。

实施例除非另有说明，所有温度包括熔点(即，Mpts.)均为摄氏度(℃)。实施例1：

                砜1

该实施例举例说明了从4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯制备砜1的方法。步骤1 4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯的制备

将20g(86mmol)4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯(Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，Wisconsin，USA)在250mL二氯甲烷中的溶液冷却至0℃，缓慢加入35mL(281mmol)33％甲基胺在乙醇中的溶液。搅拌30分钟后，加入150mL水，并进行相分离。通过硫酸镁干燥有机相并过滤。在减压下蒸发滤液，得到19g(97％)4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯，其为白色固体。步骤2制备4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇

将氢化铝锂(8.2g，215mmol)混悬于300mL冰浴冷却的无水四氢呋喃，向其中加入46g 4-甲基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯在450mL无水四氢呋喃中的溶液(215mmol)。将反应混合液搅拌15分钟，加入18mL水淬灭反应。逐滴加入8.5mL 15％氢氧化钠溶液，然后加入25.5mL水。得到的混悬液在室温下搅拌7小时，然后过滤。滤渣用100mL四氢呋喃洗涤两次。合并滤液，减压浓缩。将残留物混悬于200mL乙酸乙酯/己烷(1∶2)，过滤其中的固体，干燥得到32.7g(82％)4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇，其为黄色固体。步骤3 4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛的制备

向4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇(20g，108mmol)在1L二氯甲烷中的溶液中加入87g(1mol)二氧化锰。将得到的混合液搅拌24小时，然后通过助滤剂过滤。滤渣用100mL二氯甲烷洗涤。合并滤液，减压浓缩，得到15.8g(80％)4-甲基氨基-2甲硫基嘧啶-5-甲醛，其为白色固体。步骤4

向3.3g(18.1mmol)4-甲基氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛、4.0g(20.1mmol)2-氯苯基乙酸乙酯在30mL NMP中的混合液中加入1.5g树脂，结合1，3，4，6，7，8-六氢-2H-嘧啶并[1，2-a]嘧啶的聚合物。将反应混合物在120℃搅拌48小时，冷却到室温，过滤，用NMP和乙酸乙酯洗涤，混悬于水中。过滤分离产物。用乙酸乙酯萃取滤液另外得到一些产物。合并的产物用5％HCl水溶液和水洗涤，干燥得到4.0g硫化物(质谱MH⁺＝318.Mpt.193.0-193.4℃)。步骤5

将13.5g(42.5mmol)硫化物在氯仿中的溶液在冰浴中冷却，用20.5g(91mmol)3-氯过苯甲酸处理。将混合物在室温下搅拌16小时，然后用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，并进行相分离。通过硫酸镁干燥有机相，过滤，减压浓缩。将产物置于乙醚中搅拌，过滤，干燥得到13.1g砜1(质谱MH⁺＝350.MP＝232.6-232.8℃)。实施例2

              砜2

本实施例举例说明了从4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯起始制备6-(2-氯苯基)-2-甲磺酰基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(砜2)的方法。步骤2.1 4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯的制备

用50mL三乙胺和40mL氢氧化铵水溶液处理4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯(25.4g，106mmol，Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，Wisconsin，USA)在300mL四氢呋喃中的溶液。搅拌4小时后，加入300mL水并进行相分离。用300mL盐水洗涤有机层，真空浓缩，溶解于二氯甲烷中，通过硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到16.5g(95％)4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯，其为白色固体。步骤2.2 4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇的制备

在1.5小时内，将4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸酯(34.7g，163mmol)在500mL无水四氢呋喃中的溶液加入氢化铝锂(175mmol)在175mL二乙醚中的0℃溶液。反应混合液缓慢回温到环境温度，然后在用7mL水、7mL 2M氢氧化钠溶液、随后14mL水淬灭反应之前，冷却到0℃。过滤得到的混悬液，滤渣用2×300mL乙酸乙酯洗涤。合并滤液，浓缩得到23.0g(83％)4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇，其为白色固体。步骤2.3 4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛的制备

用活化的氧化锰粉末(63.0g，725mmol)处理4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇(21.8g，128mmol)在800mL二氯甲烷中的混悬液。将反应混合液搅拌18小时，然后通过硅藻土过滤。滤渣用热二氯甲烷和甲醇溶液反复洗涤。合并滤液，浓缩得到17.5g(81％)4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛，其为白色固体。步骤2.4 6-(2-氯苯基)-2-甲硫基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇的制备

向4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛(21.7g，128mmol)和2-氯苯基乙酸乙酯(31.3g，158mmol)在250mL无水1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液中加入碳酸钾(63.0g，491mmol)。将反应混合液在95℃搅拌16小时，通过TLC(20∶80，乙酸乙酯/己烷)监测。再加入12.0g(60mmol)2-氯苯基乙酸乙酯，将反应混合液置于95℃下再搅拌16小时。过滤冷却后的反应混合液，过滤得到的固体用乙酸乙酯洗涤。合并滤液，用400mL水和300mL乙酸乙酯稀释。分离有机相，用盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，直到形成黄色沉淀。得到的固体用乙酸乙酯洗涤，干燥产生少量产物。大多数产物保留在水层中，静置后缓慢沉淀出来。过滤沉淀，用水和乙酸乙酯洗涤。该过程重复6次，共产生31.9g(82％)6-(2-氯苯基)-2-甲磺酰基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(质谱M⁺＝303，mp＝234.5-235.3℃)。步骤2.5 6-(2-氯苯基)-2-甲基磺酰-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇的制备

向6-(2-氯苯基)-2-甲硫基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(25.2g，82.9mmol)在700mL四氢呋喃的溶液中加入过硫酸氢钾制剂(105g，171mmol)在200mL水中的稀浆。将反应混合物搅拌5小时，过滤，然后在真空下浓缩。过滤得到的稀浆，用水洗涤收集的固体，干燥得到23.2g(83％)6-(2-氯苯基)-2甲磺酰基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(砜2)，其为淡黄色固体。(质谱MH⁺＝336，mp＝215.1-221.1℃)实施例3

步骤1

在80℃下搅拌3.1g(8.9mmol)砜1和2.8g(17.7mmol)1，4二氧-螺[4，5]癸-8-基胺(参见WO 99/01452的制备方法)在15mL NMP中的混合液16小时，用水稀释，搅拌，过滤，干燥，得到3.7g缩酮中间体，其为黄色固体。步骤2

将3.8g(8.9mmol)缩酮在40mL 80％乙酸水溶液中的溶液在65℃下搅拌4小时，冷却，倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，通过硫酸钠干燥。减压浓缩。残留物在快速色谱上(梯度洗脱：20-30％丙酮/己烷)纯化，得到2.4g白色固体(质谱MH⁺＝383)。实施例4

通过Dean-Stark收集器(trap)加热回流0.4g(1.05mmol)化合物3、0.23ml(3.2mmol)1，3-丙二醇和0.25g(1.3mmol)pTsOH.H₂O在15mL甲苯中的混合液。16小时后，反应液冷却到室温，倒入碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。萃取液用盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物经快速色谱纯化(梯度洗脱：2-3％丙酮/己烷)，得到0.3g白色固体(质谱MH⁺＝441.Mpt.196.1-196.5℃)。实施例5

将0.3g(0.78mmol)化合物3、0.29g(2.4mmol)1，1，1-三(羟基甲基)乙醇和0.19g(1mmol)p-TsOH·H₂O在10mL甲苯中的混合液回流16小时，冷却到室温，倒入碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。萃取液用盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物经快速色谱纯化(用乙酸乙酯洗脱)，产物应用HCl/乙酸乙酯转化为盐酸盐，得到0.2g白色固体(质谱M+＝485.Mpt.180.3-181.2℃)。实施例6

将0.1g(0.26mmol)化合物3、0.09g(0.81mmol)2-(羟基甲基)-1，3-丙二醇和0.065g(0.34mmol)p-TsOH·H₂O在5mL甲苯中的混合液回流16小时，冷却到室温，倒入碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。萃取液用盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物经快速色谱纯化(用乙酸乙酯洗脱)，产物用HCl/乙醚转化成HCl盐，得到0.08g白色固体(质谱M⁺＝471.Mpt.146-150℃)。实施例7

将0.2g(0.5mmol)化合物3和0.16g(2.4mmol)羟基胺盐酸盐在5mL吡啶中的混合液在65℃下加热。2小时后，将反应液冷却到室温，倒入水中。过滤产物，用水洗涤，干燥得到白色固体，0.21g(质谱MH⁺＝398.Mpt.＞300℃)。实施例8

将0.26g(0.79mmol)化合物3、0.077g(1.2mmol)KCN和0.23g(2.4mmol)碳酸铵在10mL 50％乙醇水溶液中的混合液加热至65℃。16小时后，将反应混合液用10mL水稀释，加热至回流。15分钟后，冷却反应，通过过滤分离产物。将产物混悬于甲醇中，加入过量的盐酸/乙醚。在减压下浓缩溶液，用乙醚搅拌残渣，过滤，干燥得到0.24g产物，其为白色固体(质谱MH⁺＝453.Mpt.＞300℃)。实施例9

步骤1

在80℃下搅拌0.1g(0.3mmol)砜2和0.94g(0.6mmol)1，4-二氧杂-螺[4，5]癸-8-基胺(参见WO 99/01452的制备方法)在5mL NMP中的混合液16小时，冷却至室温，倒入用水稀释，饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。萃取液用水和盐水洗涤，然后通过硫酸钠干燥。减压浓缩溶液，然后经快速色谱纯化(梯度洗脱：40-80％乙酸乙酯/己烷)，得到0.1g缩酮中间体，其为白色固体。(质谱MH⁺＝413)。步骤2

将2.35g(5.7mmol)缩酮在40mL 80％乙酸水溶液中的溶液在65℃下搅拌3小时，冷却，倒入水中，过滤，干燥得到0.8g酮(质谱MH⁺＝369)，其为黄色固体。用HCl/乙醚将样品转化为HCl盐(质谱MH⁺＝369.Mpt.＝265.5-269.9℃)。实施例10

将0.2g(0.54mmol)化合物9、0.2g(1.7mmol)1，1，1-三(羟基甲基)乙醇和0.13g(0.7mmol)p-TsOH·H₂O在30mL甲苯中的混合液回流16小时，冷却到室温，过滤。分离出的白色固体产物即为p-甲苯磺酸盐(0.19g)(质谱MH⁺＝470.Mpt.＝223-226.5℃)。实施例11

向砜2(0.5g，1.3mmol)在3mL 1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液中加入反式-4-氨基环己醇(0.54g，4.7mmol)。将反应混合液在70℃搅拌2小时，冷却，用乙酸乙酯稀释，直到开始形成沉淀。过滤得到的混悬液，用水和乙酸乙酯洗涤固体，干燥得到0.40g(78％)题述化合物，其为亮黄色固体(质谱M+H⁺＝371，mp＝191.1-194.3℃)。将游离碱置于乙酸乙酯中，然后用1M HCl/Et₂O溶液处理，形成2-(反式-4-羟基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇(11)的盐酸盐，其为白色粉末，熔点为263.2-264.0℃。实施例12

向砜2(1.27g，3.78mmol)在15mL 1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液中加入反式-1，4-二氨基环己烷(3.75g，32.8mmol)。将反应混合液在65℃搅拌1.5小时，冷却，用80mL乙酸乙酯稀释。过滤得到的混悬液，用乙酸乙酯和甲醇洗涤几次。干燥固体，得到1.31g(94％)2-(反式-4-氨基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇，其为灰白色粉末(质谱M+H⁺＝370)。将游离碱置于乙酸乙酯中，然后用1M HCl/Et₂O溶液处理，形成题述化合物的二盐酸盐，其为白色粉末，熔点＞300℃。实施例13

向砜1(0.36g，1.0mmol)在10mL 1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液中加入反式-1，4-二氨基环己烷(1.05g，9.20mmol)。将反应混合液在80℃搅拌20分钟，冷却，用乙酸乙酯稀释。形成少量沉淀，过滤混悬液。向有机层中加入水，用3×60mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，浓缩得到黄色液体。经柱色谱(50∶50，甲醇/二氯甲烷)纯化，得到0.25g(62％)2-(反式-4-氨基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮，其为黄色泡沫(质谱M+H⁺＝384，mp＝190.3-191.4℃)。将游离碱置于乙酸乙酯中，然后用1M HCl/Et₂O溶液处理，形成题述化合物的二盐酸盐，其为白色粉末，熔点为224.0-228.5℃。实施例14

向胺13(70mg，0.18mmol)在10mL二氯甲烷中的溶液中加入三乙胺(0.040mL，0.29mmol)和甲磺酸酐(50mg，0.29mmol)。搅拌反应混合液1小时，真空浓缩。经柱色谱(3∶97，甲醇/二氯甲烷)纯化得到78mg(93％)2-(反式-4-甲磺酰基氨基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮，其为白色固体(质谱M+H⁺＝462，mp＝260.9-261.1℃)。将游离碱置于乙酸乙酯中，然后用1M HCl/Et₂O溶液处理，形成题述化合物的盐酸盐，其为白色粉末，熔点为250.8-252.2℃。实施例15

向胺13(116mg，0.302mmol)在15mL二氯甲烷中的溶液中加入三乙胺(0.050mL，0.36mmol)和二甲基氨磺酰氯(0.075mL，0.696mmol)。将反应混合液回流1小时。再加入0.075mL(0.696mmol)二甲基氨磺酰氯，在将反应混合液回流16小时，冷却，真空浓缩，经柱色谱(3∶97，甲醇/二氯甲烷)纯化，得到90mg(61％)2-(反式-4-N，N-2二甲基磺酰基氨基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮，其为白色固体(质谱M+H⁺＝491，mp＝226.5-229.0℃)。将游离碱溶解于二氯甲烷中，然后用1MHCl/Et₂O溶液处理，形成题述化合物的盐酸盐，其为淡黄色粉末，熔点为160.0-168.0℃。实施例16

本实施例举例说明了从6-(2氯苯基)-2-甲磺酰基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇起始，合成2-(反式-4-甲磺酰基酰氨基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。

向砜2(1.84g，5.48mmol)在18mL无水1-甲基-2-吡咯烷酮的溶液中加入氢化钠(0.31g，7.75mmol，在矿物油中60％的分散液)。将反应混合物搅拌10分钟，直到没有气体冒出，然后在5分钟内逐滴加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(0.10mL，5.7mmol)。将反应混合物搅拌1.5小时，其后向该反应混合物中加入反式-1，4-二氨基环己烷(6.24g，54.6mmol)在20mL无水1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液。将得到的反应混合物搅拌30分钟，倒入60mL水中。将得到的混浊混合物用2×100mL乙酸乙酯萃取。用2×150mL盐水洗涤合并的有机层，通过硫酸钠干燥，真空浓缩，得到粗制的棕色液体。通过柱色谱纯化(5-50∶95-50，甲醇/-二氯甲烷)得到1.66g(61％)产物16A，其为黄色泡沫(质谱M+H⁺＝500，mp＝96.5-105.0℃)

向胺16A(0.46g，0.91mmol)在20mL二氯甲烷中的溶液中加入三乙胺(0.15mL，1.1mmol)和甲磺酸酐(0.18g，1.1mmol)。将反应混合物搅拌19小时，然后在真空下浓缩。通过柱色谱纯化(3∶97，甲醇/二氯甲烷)得到0.34g(65％)产物16B，其为白色固体(质谱M+H⁺＝578，mp＝231-232.5℃)。

将SEM-保护的吡啶酮16B(320mg，0.553mmol)混悬于20mL甲醇中，用10mL 10％盐酸处理。将反应混合物回流26小时，冷却，然后在真空下浓缩，直到开始形成沉淀。过滤得到的混悬液，用水和乙酸乙酯洗涤，然后干燥得到白色固体。通过再浓缩母液，得到另一部分固体，过滤得到总共221mg(85％)2-(反式-4-甲磺酰基氨基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的盐酸盐(16)，其为白色固体(质谱M+H⁺＝448，mp＞300℃)。实施例17

该实施例举例说明了从SEM-保护的吡啶酮合成2-(反式-4-N，N-二甲基磺酰基-氨基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。

向胺16A(448mg，0.889mmol)在20mL二氯甲烷的溶液中，加入三乙胺(0.15mL，1.1mmol)和二甲基氨磺酰氯(0.22mL，2.1mmol)。将该反应混合物回流17小时。在真空下浓缩冷却的反应混合物，通过柱色谱纯化(3∶97，甲醇/二氯甲烷)得到290mg(54％)产物17A，其为白色固体(质谱M+H⁺＝607，mp＝104.3-114.4℃)。

将SEM-保护的化合物17A(270mg，0.445mmol)混悬于30mL甲醇中，用20mL 10％盐酸处理。将反应混合物回流2天，冷却，然后在真空下浓缩，直到开始形成沉淀。过滤得到的混悬液，用水和乙酸乙酯洗涤，然后干燥得到205mg(90％)2-(反式-4-二甲基磺酰基酰氨基环己基-氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的盐酸盐(17)，其为白色固体(质谱M+H⁺＝477，mp＝262.2-262.5℃)实施例18

将化合物11(300mg，0.8mmol)和96％甲酸(3mL)的混合物在60℃搅拌3小时，然后在25℃过夜。将反应混合液在减压下浓缩，用乙醚研制，过滤，干燥得到320mg 6-(2-氯苯基)-2-(4-反式-甲酰基氧基-环己基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(质谱MH⁺＝399，mpt.＞300℃)。实施例19

将化合物11(300mg，0.8mmol)，乙酸酐(0.23mL，2.4mmol)和吡啶(0.26mL，3.2mmol)在二氯甲烷(3mL)中的混悬液回流3天。过滤反应液，沉淀通过柱色谱在硅胶上用97∶3 CH₂Cl₂/MeOH纯化，得到158mg纯化的产物。加入盐酸(1.0M/Et₂O，2.0当量)得到盐，其通过过滤和干燥，得到155mg 6-(2-氯苯基)-2-(4-反式-乙酰基氧基环己基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(19)。(质谱MH⁺＝413，mmpt.＞300℃)。实施例20

将化合物11(250mg，0.68mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(DMAP)(6.8mg，0.06mmol)在THF(5mL)中的混悬液在冰浴中冷却，加入焦碳酸二甲酯(0.7mL，6.8mmol)，在25℃下搅拌混合液18小时。过滤反应液，沉淀通过用98∶2 CH₂Cl₂/MeOH洗脱的硅胶柱色谱纯化，产生33mg纯化的产物。加入盐酸(1.0M/Et₂O，2.0当量)得到盐，其通过过滤和干燥，得到34mg6-(2-氯苯基)-2-(4-反式甲氧基羰基氧基-环己基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(20)。(质谱MH+＝429)。实施例21

将化合物11(308mg，0.83mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混悬液于冰浴中冷却，加入氯磺酰基异氰酸盐(0.08mL，0.87mmol)。将混合液在25℃搅拌18小时，然后用水(0.5mL)处理。将两相混合液搅拌8小时，过滤，沉淀通过柱色谱在硅胶上用97∶3 CH₂Cl₂/MeOH纯化，得到108mg纯化的产物。加入盐酸(1.0M/Et₂O，2.0当量)得到盐，其通过过滤和干燥，得到94mg 6-(2-氯苯基)-2-(4-氨基甲酰基氧环己基氨基)-8-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(21)。(质谱MH+＝414，mpt.291.0-293.5℃)。实施例22

将化合物38，参见实施例38，(190mg，0.49mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混悬液在冰浴中冷却，加入氯磺酰基异氰酸酯(0.05mL，1.01mmol)。将混合液在25℃搅拌18小时，然后用水(0.5mL)处理。将两相混合液搅拌8小时，过滤，沉淀通过应用97∶3 CH₂Cl₂/MeOH洗脱的硅胶柱色谱纯化，得到108mg纯化的产物。加入盐酸(1.0M/Et₂O，2.0当量)得到盐，其通过过滤和干燥，得到94mg产物22。(质谱MH+＝428，mpt.234.7-235.4℃)。实施例23

将砜2(500mg，1.5mmol)与1-羟基甲基环戊基氨基(686mg，5.96mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(1mL)合并。将混合液加热到100℃保持3小时，然后冷却到室温。加入甲醇(3mL)。将混悬液搅拌10分钟，过滤，沉淀用甲醇彻底洗涤，干燥，悬浮于乙酸乙酯中。加入盐酸(1.0M/Et₂O，2.0当量)得到盐，其通过过滤和干燥，得到235mg产物23。(质谱MH+＝371，mpt.290-293℃)。实施例24

将砜2(250mg，0.71mmol)与4-氨基甲基环己醇(630mg，3.4mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(0.5mL)混合。将混合液加热到95℃保持3小时，然后冷却到室温。混合液通过硅胶柱色谱在用96∶4 CH₂Cl₂洗脱纯化。合并含有产物的柱级分，浓缩成固体，将其悬浮于乙酸乙酯中。加入盐酸(1.0M/Et₂O，2.0当量)得到盐，其通过过滤和干燥，得到85mg产物24。(质谱MH+＝385，mpt.205-213℃)。实施例25

将砜1(500mg，1.42mmol)与4-氨基甲基环己醇(630mg，3.4mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(0.5mL)混合。将混合液加热到95℃保持3小时，然后冷却到室温。混合液通过硅胶柱色谱用96∶4 CH₂Cl₂洗脱纯化。合并含有产物的柱级分，浓缩成固体，将其悬浮于乙酸乙酯中。加入盐酸(1.0M/Et₂O，2.0当量)得到盐，其通过过滤和干燥，得到79mg产物25。(质谱MH+＝399，mpt.148-151.5℃)。实施例26

将化合物38(350mg，0.9mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(DMAP)(55.5mg，0.45mmol)在THF(5mL)中的混悬液在冰浴中冷却，加入焦碳酸二甲酯(0.3mL，2.8mmol)，在25℃下搅拌得到的混合液18小时。过滤，沉淀通过硅胶柱色谱用99∶1 CH₂Cl₂/MeOH洗脱纯化，得到205mg纯化的产物。加入盐酸(1.0M/Et₂O，2.0当量)得到盐，其通过过滤和干燥，得到200mg产物26.(质谱MH+＝443：mpt 213.9-214.4℃)。实施例27

在室温下向化合物38(0.36g，0.94mmol)在10mL二氯甲烷中的溶液中依次加入吡啶(0.60g，7.6mmol)和乙酸酐(0.58g，5.6mmol)。将得到的混合液在室温下搅拌3天，然后减压浓缩。得到的残留物通过柱色谱纯化，产生250mg灰色固体，其为纯产物(质谱MH⁺＝427，mpt.200.9-201.2℃)。实施例28

将化合物38(0.34g，0.89mmol)在6mL甲酸中的溶液在60℃搅拌3天。将得到的混合液在减压下浓缩。得到的泡沫用己烷稀释，浓缩产生固体。通过柱色谱纯化，得到340mg产物28，其为粉末状、棕色固体。(质谱MH⁺＝413，mpt.196.1-196.6℃)。实施例29

将1，4-二氧杂-螺[4，5]癸-8-基胺(参见WO 99/01452的制备方法)(0.157g，1.00mmole)、N-甲基吡咯烷酮(1mL)和砜1(0.350g，1.00mmole)的混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合液冷却，倒入水中，用乙酸乙酯萃取，用饱和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，真空蒸发。粗产物经硅胶快速色谱(0-3％甲醇/二氯甲烷)纯化。合并含有产物的柱级分，真空浓缩。将浓缩部分(0.100g)置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.070g化合物29的盐酸盐(M⁺＝427)。

向在5mL THF中的剩余的游离碱(0.167g，3.56mmole)中加入2N盐酸水溶液(1mL)。6小时后，将反应混合液倒入饱和碳酸氢钠溶液中，并用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用饱和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，真空蒸发。残留物经硅胶快速色谱(20-30％丙酮/己烷)纯化。合并含有产物的柱级分，真空浓缩。将产物溶解于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.102g化合物的盐酸盐(M⁺＝382)。实施例30

将砜1(0.500g，1.43mmole)在4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯(1.0mL，5.83mmole)中的溶液在120℃下搅拌3小时。将反应混合液倒入水中，用二氯甲烷萃取。合并有机层，用硫酸镁干燥，真空蒸发。残留物经硅胶快速色谱(20-30％丙酮/己烷)纯化。合并含有产物的柱级分，真空浓缩。

将纯化的氨基甲酸乙酯(0.617g，1.40mmole)加入氢氧化钾的热乙醇溶液(6.58g，117mmole；37mL EtOH)，并在80℃下搅拌3小时。然后将反应混合液在冰浴中冷却，用柠檬酸的水溶液(6.6g，31.4mmole；37mLH₂O)淬灭。将得到的溶液在真空下浓缩，得到一种粘稠的水溶液，将它用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用碳酸钠干燥，真空浓缩。残留物经快速色谱在硅胶柱上(10-30％甲醇/二氯甲烷)纯化。合并含有产物的柱级分，真空浓缩，得到30B。

将哌啶产物的一部分溶解于甲醇中，用1eq 1N HCl/乙醚处理。将溶液在真空下浓缩。干燥的残留物用乙醚洗涤，干燥后得到化合物30B的盐酸盐(mp＞300.0℃)。

将化合物30B(0.100g，0.270mmole)和溴乙酰胺(0.100g，0.724mmole)在2mL DMF中的溶液加热到120℃维持几小时。将反应混合液冷却，经硅胶快速色谱(3-5，10％[1∶9氢氧化铵/甲醇]/二氯甲烷)纯化。合并含有产物的柱级分，真空浓缩，溶解于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理。浓缩溶液，用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.117g化合物30A的盐酸盐(mp76.3-136.5；M+.427)。实施例31

将化合物30B(0.100g，0.270mmole)、溴乙腈(0.091mL，1.35mmole)和碳酸钠(0.114g，1.35mmole)在1mL DMF中的混合物在室温下搅拌。然后将该混合物经硅胶快速色谱(2-5[1∶9氢氧化铵/甲醇]/二氯甲烷)纯化。合并含有产物的柱级分，真空浓缩，得到0.086g所需产物。将该游离碱的部分(0.016g)溶解于甲醇中，用盐酸(1.0 M/Et₂O，1.0当量)处理。浓缩该溶液，用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.012g化合物31的盐酸盐(mp228.3-228.9；M+.409)。实施例32

将化合物30B(0.050g，0.135mmole)和溴乙酸甲酯(0.030mL，0.317mmole)在1mL DMF中的混合物在室温下搅拌。通过硅胶快速色谱(10-40％甲醇/二氯甲烷+1％氢氧化铵)纯化该混合物。合并含有产物的柱级分，真空浓缩。将残渣溶解于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理。浓缩该混合物，用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.013g化合物32的盐酸盐(mp150-168；M+.442)。实施例33

将化合物30B(0.050g，0.135mmole)置于具有异氰酸三甲基甲硅烷基酯(0.021mL，0.149mmole)的1mL THF中，在室温下搅拌3小时，然后在真空下蒸发。将残渣通过硅胶快速色谱纯化(10％[1∶9氢氧化铵/甲醇]/二氯甲烷)。合并含有产物的柱级分，真空浓缩。将终产物置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.057g化合物33的盐酸盐(mp192.0-202.0；M+.413)。实施例34

将咪唑(0.28g，4.06mmole)和碳酸钠(0.43g，4.06mmole)与DMF(0.63mL，8.11mmole)合并，向其滴加氯代三甲基硅烷(0.63mL，4.06mmole)。在加入干粉末状的化合物30B(0.50g，1.35mmole)前，在室温下搅拌稀浆20分钟。在室温下搅拌2小时，然后倒入水中，用二氯甲烷和乙酸乙酯萃取。用饱和盐水洗涤合并的有机萃取液，用硫酸镁干燥，并在真空下蒸发。将残渣通过快速色谱(2-3％甲醇/二氯甲烷)纯化，合并含有产物的柱级分，真空浓缩。将终产物置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.259g化合物34的盐酸盐(mp105.0-115.0C，M+.427)。实施例35

按照己描述的方法，从相应的苄基砜制备氨基甲酸乙酯，用碘代三甲基硅烷裂解得到哌啶中间体35A(mp＞300.0)。

将化合物35A(0.030g，0.084mmole)的游离碱的一部分置于具有溴乙腈(0.009mL，0.126mmole)和碳酸钠(0.015g，0.141mmole)的1mL DMF中，在室温下搅拌3小时，然后通过硅胶快速色谱纯化(1-10％[1∶9氢氧化铵/甲醇]/二氯甲烷)。合并含有产物的柱级分，真空浓缩。将终产物置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.006g化合物35B的盐酸盐(M+.395)。实施例36

将化合物35A(0.050g，0.141mmole)的游离碱的一部分置于具有2-氯-，N-二甲基乙酰胺(0.026g，0.211mmole)和N，N-二异丙基乙基胺(0.037mL，0.211mmole)的1mL DMF中，在60℃下搅拌3小时，在120℃下搅拌2小时，然后通过硅胶快速色谱纯化(3-20％[1∶9氢氧化铵/甲醇]/二氯甲烷)。合并含有产物的柱级分，真空浓缩。将终产物置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.006g化合物36的盐酸盐(mp103.0-120.0℃)。实施例37

将化合物11置于具有叔丁醇钾(0.95g，8.42mmole)和甲基碘化物(0.11mL，1.68mmole)的5mL四氢呋喃中。在室温(rt)下搅拌4小时后，将反应混合物通过快速色谱纯化(1-3％甲醇/二氯甲烷；25-35％丙酮/己烷)，得到上述两种产物(即化合物37A和37B)。将它们单独置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.157g二-甲基化产物(化合物37A)(mp182.3-183.1℃)和0.069g一-甲基化产物(化合物37B)(mp218.2-218.5℃)。实施例38

将硫化物1a(317mg，1.0mmole)溶解于NMP(0.3mL)中，向该溶液中加入反式4-氨基环己醇(570mg，5毫摩尔)。将该反应在120℃下加热12小时。将反应冷却至室温，加入水(50mL)，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用水洗涤2次，真空浓缩。将残渣通过应用10∶90 MeOH/CH₂Cl₂的硅胶柱色普纯化。合并含有所需产物的柱级分，浓缩产生泡沫。将泡沫混悬于MeOH，然后加入盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)，得到化合物38的盐。蒸发溶剂。将得到的固体用Et₂O/MeOH的混合液稀释，过滤，干燥。产率282mg.Mp 163.4-171.1℃.MS(M+H)⁺385。实施例39

将砜1(350mg，1.0mmole)与1-氨基-1-环戊烷甲醇(345mg，3.0毫摩尔)和NMP(0.3mL)混合，在120℃下搅拌1小时。将反应混合液加入水中，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用水洗涤两次，真空浓缩得到粗产物。残留物通过用10∶90MeOH/CH₂Cl₂洗脱的硅胶柱色谱纯化。合并含所需产物的级分，真空蒸发，得到泡沫状所需产物。将残留物悬浮于MeOH中，加入盐酸(1.0M/Et₂O，1当量)，搅拌20分钟，减压浓缩。将残留物与MeOH/Et₂O的混合液一起搅拌1小时，过滤，得到产物39，其为白色固体。产率263mg.Mp 213.7-214.6℃，MS(M+H)⁺385。实施例40

将砜1(350mg，1.0mmole)与1-氨基-1-环戊烷甲醇(387mg，3.0毫摩尔)和NMP(0.3mL)混合，在120℃下搅拌90分钟。将反应混合液冷却到室温，加入水中，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，通过硫酸镁干燥，减压浓缩。残留物通过用10∶90 MeOH/CH₂Cl₂洗脱的硅胶柱色谱纯化。合并含所需产物的级分，减压蒸发，得到泡沫状所需产物。将泡沫悬浮于MeOH中，加入盐酸(1.0M/Et₂O，1当量)。将混合液搅拌20分钟，真空蒸发，与MeOH/Et₂O的混合液一起搅拌2小时，过滤，干燥得到产物40，其为白色固体。产率242mg.Mp185-188.6℃，MS(M+H)⁺399。实施例41

将砜1(350mg，1.0mmole)与顺式/反式氨基环己烷羧酸乙酯(520mg，3毫摩尔)混合，在100℃下搅拌30分钟。将得到的溶液冷却到室温，用65∶35己烷/丙酮通过硅胶柱色谱纯化。合并含所需产物的级分，浓缩产生泡沫。将残留物悬浮于MeOH，加入盐酸溶液(1.0M/Et₂O，1当量)。将得到的混合液搅拌30分钟，蒸发溶液。将得到的残留物与MeOH/Et₂O的混合液一起搅拌1小时，过滤，得到产物41，其为白色固体。产率414mg。Mp192.1-198.3℃，MS(M+H)⁺441。实施例42

向化合物41(300mg，0.67mmole)在EtOH中的溶液中加入浓盐酸水溶液(3.0mL)。将得到的溶液回流24小时。在加入盐酸(1.0mL)，将溶液再回流24小时。将反应混合液在减压下蒸发至干，在高真空度下干燥得到化合物42的盐酸盐，其为白色固体。产率：225mg。Mp：263.6-264.2℃，MS：(M+H)⁺413。实施例43

将砜1(350mg，1.0mmole)与4-氨基环己基甲醇(1∶1顺式/反式)(Chem.Ber：96；1963；2377-2386)(400mg，3.3毫摩尔)和NMP(0.4ml)混合，在100℃下搅拌1小时。将反应混合液冷却到室温，加入水，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用水洗涤5次，通过硫酸镁干燥，浓缩得到粗产物，其为油状物。残留物通过用70∶30己烷/丙酮洗脱的硅胶柱色谱纯化。合并含所需产物的级分，减压下浓缩产生泡沫状产物。将该物质混悬于MeOH中，加入盐酸(1.0M/Et₂O，1当量)酸化，在室温下搅拌30分钟，减压浓缩。将得到的残留物与MeOH/Et₂O的混合液一起搅拌2小时，过滤，得到化合物43的盐酸盐，其为白色固体。产率335mg。Mp153.6-157℃，MS(M+H)⁺339。实施例44

步骤1

向化合物11(3.0g，8.1毫摩尔)在NMP(35mL)中的混悬液中加入叔-丁基二甲基甲硅烷基氯(1.7g，11.3毫摩尔)和咪唑(1.2g，17.6毫摩尔)。将反应混合物在50℃下搅拌12小时，冷却至室温，加入水(150-200mL)。将混合物搅拌1小时，过滤得到化合物44A，其为白色固体。产率3.71。Mp289.9-291.4℃ MS(M+H)⁺485。步骤2：烷基化

向甲硅烷基保护的醇44A(483mg，1.0mmole)在NMP中的混悬液中加入氢化钠(44mg，1.1mmole(60％油混悬液)。将反应混合物搅拌25分钟，其后加入2-(碘乙氧基)三-异丙基硅烷(328mg，1.0mmole)，在室温下搅拌得到的混合物4小时。将该反应混合物加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用水洗涤5次，通过硫酸镁干燥，浓缩得到甲硅烷基保护的中间体44B，其为油状物。将残渣通过应用25∶75丙酮/己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱纯化，得到产物44B，其为油状物。产率650mg。MS(M+H)⁺685。步骤3：去保护

向化合物44B(650mg，0.94mmole)在THF(15mL)中的溶液中加入四丁基铵氟化物(1.0M在THF中，1.1当量)。将得到的溶液在室温下搅拌12小时，加入水，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，通过硫酸镁干燥，浓缩得到产物，其为油状物。将残留物用90∶10 CH₂Cl₂/MeOH通过硅胶柱色谱纯化，得到产物44，其为油状物。将其混悬于MeOH，用盐酸(1.0M/Et₂O，1当量)酸化，搅拌20分钟，浓缩，再次用Et₂O/MeOH的混合液稀释，并搅拌2小时。过滤溶液，得到化合物44的盐酸盐，其为白色固体。产率270mg。MP210.5-212.0℃.MS(M+H)⁺415。实施例45

步骤1：烷基化

向甲硅烷基保护的醇44A(483mg，1.0mmole)在NMP中的混悬液中加入氢化钠(44mg，1.1mmole(60％油分散液)。将反应混合物在室温下搅拌25分钟。向该溶液中加入碘乙腈(0.167mg，1.0mmole)，将得到的溶液在室温下搅拌4小时。将该反应混合物加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用水洗涤5次，通过硫酸镁干燥，浓缩得到油。该残留物通过应用25∶75丙酮/己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱纯化，得到产物，其为白色固体。产率480mg。MS(M+H)⁺524。步骤2：去保护

向上述步骤1的得到的产物(480mg，0.92mmole)在THF中的溶液中加入四丁基铵氟化物(1.0M/THF，1.1当量)，并在室温下搅拌12小时。将反应混合液加入水，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，通过硫酸镁干燥，浓缩得到产物，其为油状物。将残留物用90∶10 CH₂Cl₂/MeOH作为洗脱液通过硅胶柱色谱纯化，得到产物45，其为白色固体。产率260mg.MP245.8-246.8℃.MS(M+H)⁺410。

将产物45混悬于MeOH中，加入盐酸溶液(1.0M/Et₂O，1当量)。将混合液在室温下搅拌30分钟并浓缩。将残留物置于Et₂O/MeOH的混合液中搅拌2小时，过滤得到化合物45的盐酸盐，其为白色固体。产率255mg.Mp 232.1-233.4℃.MS(M+H)⁺410。实施例46步骤1：烷基化

向甲硅烷基保护的醇44A(483mg，1.0mmole)在NMP中的混悬液中加入氢化钠(44mg，1.1mmole(60％油分散液)。将得到的溶液在室温下搅拌30分钟。向该反应混合物中加入苄基溴(0.12ml，1.0mmole)，将得到的溶液在室温下搅拌12小时，其后向该反应混合物加入水，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用水洗涤5次，通过硫酸镁干燥，浓缩，并通过应用25∶75丙酮/己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱纯化，得到产物，其为白色固体。产率502mg。Mp188.8-191.0℃ MS(M+H)⁺575步骤2：去保护

向上述步骤1的得到的产物(480mg，0.84mmole)在THF中的溶液中加入四丁基铵氟化物(1.0M/THF，1.1当量)。将得到的反应混合物在室温下搅拌12小时，加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，通过硫酸镁干燥，浓缩，并通过应用10∶90 MeOH/CH₂Cl₂作为洗脱液通过硅胶柱色谱纯化，得到产物46，其为白色固体。产率320mg。Mp119-131℃.MS(M+H)⁺461。

将上述产物在MeOH中的溶液加入到盐酸溶液(1.0M/Et₂O，1当量)。将得到的溶液在室温下搅拌20分钟，浓缩至得到泡沫状物。将该泡沫状物溶解于Et₂O/MeOH的混合液中，并搅拌2小时，过滤得到化合物46的盐酸盐，其为白色固体。产率305mg。Mp202-206℃.MS(M+H)⁺461。实施例47步骤1：烷基化

向甲硅烷基保护的醇44A在NMP中的混悬液中加入氢化钠(44mg，1.1mmole(60％油分散液)。将得到的溶液在室温下搅拌25分钟。向该反应混合物中加入溴乙酸甲酯(0.095ml，1.0mmole)，在室温下搅拌12小时。将该反应混合物加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用水洗涤5次，通过硫酸镁干燥，浓缩，并通过应用25∶75丙酮/己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱纯化，得到产物，其为白色固体。产率480mg。Mp182-187℃.MS(M+H)⁺＝557。步骤2：去保护

向上述步骤1的得到的产物(480mg，0.86mmole)在四氢呋喃(15mL)中的溶液中加入四丁基铵氟化物(1.0M/THF，1.1当量)。将得到的反应混合物在室温下搅拌12小时，加入到水中，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，通过硫酸镁干燥，浓缩得到产物47，其为泡沫状物。产率225mg.Mp118-130℃.MS(M+H)⁺443。实施例48

向化合物47(210mg，0.475mmole)在MeOH(4.0mL)的混悬液中加入氢氧化钠水溶液(0.477mL 1.0N NaOH)。在室温下搅拌得到的混悬液5天，蒸发至干燥。将残渣用Et₂O稀释，搅拌2小时，过滤并干燥，得到产物48，其为淡黄色固体。产率205mg.Mp260-265℃.MS(M+H)⁺429。实施例49

在室温下，向4-甲氧基苯磺酰胺(0.417g，2.23mmol)在3mL N-甲基吡咯烷酮的溶液中加入60％氢化钠(107mg，2.68mmol)。将该混合物搅拌10分钟。然后加入砜1(189mg)，将得到的混合物在130℃下搅拌6小时。将该反应混合物冷却至室温，加入水(50mL)。过滤得到的固体，连续用水、乙酸乙酯和甲醇洗涤，真空下干燥，得到产物49(190mg)，mp＞300℃；ms457(M+H)⁺。实施例50 6-(2-氯苯基)-2-(N-2-氰基乙基哌啶基-4-氨基)-吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7-醇步骤1：制备4-三氟乙酰氨基-1-苄基哌啶

在30-45分钟内，向25g(131mmol)4-氨基-1-苄基哌啶和15.36g(152mmol)三乙胺在130mL二氯甲烷中的冷(5℃)溶液中逐滴加入28g(18.8mL，133mmol)三氟乙酸酐，调整速率以将反应温度保持在5-10℃之间。加入完成后，将该反应混合物再搅拌15分钟。在减压下除去溶剂和挥发物。将残渣溶解于100mL乙酸乙酯中，然后用100mL己烷稀释。通过硅胶垫(50g)过滤溶液，用1L50％乙酸乙酯/己烷洗涤。减压下浓缩滤液，得到37g(定量产率)所需的4-三氟乙酰氨基-1-苄基哌啶，(淡黄色固体)。步骤2：制备4-三氟乙酰氨基哌啶

在氮气氛下，向500mL、三颈圆底烧瓶中加入4g10％碳上钯(Palladium on Carbon)和100mL甲醇。将该混悬液冷却至5℃，一次性加入10g甲酸铵(观察到有气体冒出)。然后逐渐滴加10g(35mmol)4-三氟乙酰氨基-1-苄基哌啶在100mL甲醇中的溶液。将得到的反应混合物回流2.5hr.，然后在室温下过夜。在氮气隔离下，通过硅藻土过滤掉催化剂，用乙醇洗涤。在减压下浓缩滤液，得到6.9g(定量产率)淡黄色固体状的题述化合物。步骤3：制备N-(2-氰基乙基)-4-氨基哌啶

在室温下，搅拌3g(15.3mmol)4-三氟乙酰氨基哌啶、3g(4.25mL，30.6mmol)三乙胺、3mL(45.9mmol)丙烯腈在10mL THF中的混合物17小时。在减压下除去溶剂和挥发物。将残渣溶解于20mL甲醇和4mL 30％NH₄OH中，将该溶液回流5小时。在减压下蒸发溶剂，残渣通过硅胶柱色谱纯化，开始用500mL二氯甲烷，然后用500mL 0.5％甲醇/二氯甲烷，随后用1000mL 9∶1∶0.1二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵洗脱，得到0.7g(30％产率)N-(2-氰基乙基)4-氨基哌啶。步骤4：制备6-(2-氯苯基)-2-(N-2-氰基乙基哌啶基-4-氨基)-吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7-醇.

将0.2g(0.58mmol)砜2，6-(2-氯苯基)-2-甲磺酰基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇、0.18g(1.16mmol)N-(2-氰基乙基)-4-氨基哌啶在0.5mL NMP中的混合物在60℃油浴中加热2.5hr.，冷却，用5mL二氯甲烷稀释。将该溶液通过40g硅胶的柱色谱纯化，应用200mL二氯甲烷洗脱出NMP，随后用5％甲醇/二氯甲烷洗脱出产物。合并含有产物的级分，并浓缩。向产物中加入乙醚，研制后，过滤固体，用乙醚洗涤，干燥，得到165mg(70％产率)所需产物。将大约50mg该固体溶解于3mL二氯甲烷中。加入1mL 1M HCl/乙醚溶液，将混合物在室温下搅拌1小时。在减压下蒸发溶剂，得到54mg化合物50。(质谱MH⁺＝408，mpt.217.5-219.5℃)。实施例51

将2g(5.8mmol)6-(2-氯苯基)-2-甲磺酰基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇、1.97g(11.4mmol)4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯在2mL NMP中的混合物在60℃油浴中加热1.5hr.。该混悬液迅速变为透明的棕色溶液。将混合物在150mL水和150mL乙酸乙酯中分配。用150mL乙酸乙酯萃取水层一次或多次。用水，2×150mL，然后用盐水洗涤合并的乙酸乙酯溶液，干燥，过滤，并在减压下浓缩滤液。在乙醚中研制后，在减压下除去溶剂，分离出2.5g(定量产率)化合物51。将大约0.13g该物质溶解于1.5mL乙酸乙酯中，加入1mL 1M HCl(在乙醚中)。在室温下搅拌该混悬液1小时，用乙醚稀释，过滤，用乙醚洗涤得到0.12g化合物51的盐酸盐。(质谱M⁺＝441.9，mpt.190-191℃)实施例52

将0.3g(0.8mmol)6-(2-氯苯基)-2-(哌啶基-4-氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇、0.3g(2.4mmol)2-溴乙醇、0.22mL(1.6mmol)三乙胺、1.5mL NMP和10mL甲苯的混合物在100℃油浴中加热2.5hr。将混合物用75mL乙酸乙酯和100mL水稀释。进行相分离，水层再用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。然后用盐水洗涤合并的有机萃取液，过滤并在减压下浓缩。将残渣溶解于少量甲醇中，通过应用8.5∶1.5∶0.2乙酸乙酯/甲醇/氢氧化铵作为洗脱液的40g硅胶柱色谱纯化，得到0.115g白色固体(35％产率)。将其溶解于2mL EtOAc中，加入2mL 1M HCl (在乙醚中)。将该混悬液在室温下搅拌30分钟。过滤并干燥，得到0.13g化合物52。(质谱MH⁺＝414，mpt.265.9-266.6℃)。实施例53

将0.2g(0.54mmol)6-(2-氯苯基)-2-(哌啶基-4-氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇、0.11g(1.6mmol)甲基乙烯基砜、0.5mL三乙胺在5mL THF中的混合物在室温下搅拌17小时。在减压下蒸发三乙胺和THF。残渣在75mL水和100mL乙酸乙酯中分配。相分离后，水层再次用75mL乙酸乙酯萃取。用水、盐水洗涤合并的有机溶液，干燥并过滤。在减压下浓缩滤液。粗产物通过应用90∶10∶5二氯甲烷/乙酸乙酯/氢氧化铵作为洗脱液的40g硅胶柱色谱纯化。将回收的产物溶解于1.5mL乙酸乙酯中，加入2mL 1M HCl(在乙醚中)。将该混悬液搅拌1小时，过滤，并用乙醚洗涤，得到165mg化合物53的盐酸盐(盐酸盐)。(质谱MH⁺＝476，mpt.204.6-205.6℃)。实施例54

制备4-氨基-1-(2，2，2，-三氟乙基)哌啶，54A

将4-N-BOC-氨基哌啶(商业购买)(5g，24.96mmol)、三氯甲烷磺酸2，2，2-三氟乙基酯(7.03g，1eq)和碳酸钾(4.1g，1.2eq)在丙酮(80mL)中的溶液加热回流17小时。在40℃、减压下除去溶剂，向残渣中加入乙酸乙酯(250mL)和水(150mL)。分离有机层，连续用水(1×150mL)和盐水(1×200mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤，浓缩得到暗色固体。通过应用15％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶色谱纯化，得到4-NBOC-氨基-1-(2，2，2-三氟乙基)-哌啶(4.45g)，其为灰白色粉末，M.P99.2-99.8℃，(M+H)⁺＝283。然后将该胺置于二噁烷(80mL)中，向溶液中鼓入HCl气体10分钟(马上形成沉淀)。将反应容器的盖拧紧，搅拌1.5小时，浓缩得到白色粉末。将该盐酸盐溶解于42mL 0.5M甲醇钠/甲醇溶液中，在室温下搅拌3小时。通过中等玻璃料过滤溶液，并浓缩滤液。将残渣溶解于乙酸乙酯(100mL)中，碾碎固体，过滤混合物。浓缩滤液得到4-氨基-1-(2，2，2-三氟乙基)-哌啶，54A，其为暗色油(1.0g)，(M+H)⁺＝183。

将砜2(200mg，0.614mmol)、化合物54A(224mg，2eq)和N-甲基吡咯烷酮(0.3mL)在10mL烧瓶中混合，在110℃下搅拌10分钟。冷却反应，然后加入甲醇(10mL)，碾碎固体，过滤并收集得到灰白色粉末。在高真空、56℃下干燥游离的胺2小时，m.p.＝267.4-267.6℃，(M+H)⁺＝438。在室温下将该游离的胺置于二噁烷(20mL)中，搅拌下加入1M HCl在二乙醚中的溶液(0.5mL，1.3eq)。在室温下搅拌得到的混合物1小时，过滤，并在高真空、56℃下干燥8小时，得到化合物54，其为灰白色粉末.M.p.＝260.0-265.0℃，(M+H)⁺＝438(游离胺)。实施例55制备55B

向砜2(1.485g，4.56mmol)在二甲基甲酰胺(25mL)的0℃溶液中，加入60％氢化钠溶液(200mg，1.1eq)。在0℃下将得到的混合物剧烈搅拌15分钟，其后加入2，2，2-三氟乙基三氯甲烷磺酸酯55A(4.2g，3.3eq)(在二甲基甲酰胺(15mL)中)。将得到的混合物在0℃至室温下搅拌4天。将反应混合物用乙酸乙酯(300mL)和水(100mL)稀释。分离有机层，用水(100mL)和盐水(2×100mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残渣用乙醚/己烷洗涤几次，每次滗析上清液。在高真空下浓缩并干燥残渣，得到化合物55B，其为定量产率的半固体。制备55

将化合物55B(0.9g，2.15mmol)、化合物55C(743mg，3eq)和N-甲基吡咯烷酮加入到10mL烧瓶中，在110℃下搅拌25分钟。冷却反应混合物，用10mL甲醇稀释，并浓缩。将残渣溶解于乙酸乙酯(35mL)中，用水(7×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤。通过硫酸镁干燥有机层，过滤并浓缩。通过应用5％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂的制备薄层色谱3(20×40cm，1000μM)plate纯化，得到55，其为灰白色粉末，m.p.＝227.2-230.4，(M+H)⁺＝453。实施例56

将化合物3(0.13g，0.34mmol)溶解于无水四氢呋喃中，在冰浴中搅拌。逐滴加入甲基氯化镁(3M，在THF中溶液，0.25mL，0.75mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应在冰浴中冷却，加入氯化铵的饱和溶液(2mL)，随后加入水。将反应混合物用乙酸乙酯萃取两次，通过硫酸钠干燥合并的乙酸乙酯层。浓缩后，纯化反应混合物，通过应用5％甲醇/二氯甲烷的硅胶色谱分离异构体。极性更小的产物级分被指定为反式-异构体(即化合物56A)，通过反相HPLC检测发现该级分是纯的。极性更大的产物级分被指定为顺式-异构体(即化合物56B)，通过反相HPLC检测发现该级分是顺式：反式98∶2。将每个产物级分分别溶解于二氯甲烷中，用1当量1M HCl/乙醚处理，蒸发至泡沫状残渣。得到13mg反式异构体化合物56A的盐酸盐(质谱MH⁺＝399，熔点＝155-168℃)，和26mg顺式异构体，化合物56B的盐酸盐(质谱MH⁺＝399，熔点＝156-169℃)。实施例57

该实施例举例说明了从4-氯-2-甲硫基嘧啶制备6-(2-氯苯基)-8-环丙基-2-(4-反式-羟基-环己基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。步骤1制备4-氟-2-甲硫基嘧啶

通过Ple等，J.Het.Chem.，31，1311(1994)的方法制备该化合物。应用该方法，从11.5g4-氯-2-甲硫基嘧啶(71.7mmol)制备7.6g产物4-氟-2-甲硫基嘧啶。步骤2制备4-环丙基氨基-5-甲酰基-2-甲硫基嘧啶

在-30℃下，将丁基锂(10.2mL，2.5M，在己烷中的溶液)加入到55mLTHF(从钠/二苯甲酮蒸馏)中。从冰浴中取出该丁基锂溶液，逐滴加入二异丙基胺(4mL，28.9mmol)。将该反应搅拌30分钟，然后在干冰/乙醚浴中冷却至大约-80℃。逐滴加入4-氟-2-甲硫基嘧啶(1.6g，11.1mmol)在4mLTHF中的溶液，将得到的混合物搅拌2小时。然后逐滴加入甲酸乙酯(2.1mL，22.2mmol，用K₂CO₃处理，并从P₂O₅蒸馏)，并将得到的反应混合物再搅拌1小时。加入0.1eq甲酸乙酯，将反应混合物再搅拌1小时。加入环丙胺(1.5mL，22.2mmol，Aldrich Chemical)和水，将反应搅拌90分钟。加入大约50mL 1M HCl/乙醚，将反应混合物搅拌至室温。加入更多的水，通过蒸发除去THF。用二氯甲烷萃取该残留物两次。通过硫酸钠干燥合并的二氯甲烷层，并蒸发至浆状。将残渣通过应用7％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶色谱纯化。

合并含有亚胺的级分，浓缩，用10当量3M盐酸水溶液(在THF中)处理3小时，用碳酸氢钠溶液中和，浓缩，用二氯甲烷萃取。用水和碳酸氢溶液洗涤该二氯甲烷溶液，通过硫酸钠干燥并浓缩。将得到的物质与先前得到的纯物质合并，得到1.8g4-环丙基氨基-5-甲酰基-2-甲硫基嘧啶。步骤3

将4-环丙基氨基-5-甲酰基-2-甲硫基嘧啶(1.8g，8.6mmol)溶解于17mL 1-甲基-2-吡咯烷酮中，加入2-氯苯基乙酸乙酯(2.1g，10.75mmol)和碳酸钾，将该混合物在95℃下搅拌过夜。加入总共多于0.8g的酯，再次将反应搅拌过夜。将反应在120mL乙酸乙酯和100mL水中分配。分离后，用乙酸乙酯萃取水层一次以上。用盐水洗涤合并的乙酸乙酯层，通过硫酸钠干燥，浓缩，并通过应用20-25％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶60色谱纯化，得到1.78g产物。步骤4

将步骤3的产物(1.66g，4.82mmol)溶解于20mL THF中，在冰浴中冷却。逐滴加入过硫酸氢钾制剂(5.9g，9.64mmol)在水中的溶液。除去冰浴，将反应搅拌过夜。过滤反应，加入大约40mL水，将该混合物搅拌30分钟。过滤固体，再混悬于水中，再搅拌60分钟。过滤混合物，用水和20％乙醚/己烷漂洗，干燥得到1.08g产物。步骤5

合并步骤4的产物(0.35g，0.93mmol)、反式-4-氨基环己醇(0.322g，2.79mmol，TCI America)和0.5mL 1-甲基-2-吡咯烷酮，加热至90℃。1小时后，将反应冷却至室温，加入乙酸乙酯和水。进行相分离，再次用乙酸乙酯萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，通过硫酸钠干燥，浓缩，应用5％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂通过硅胶60纯化。蒸发产物级分后，将残渣再溶解于甲醇/二氯甲烷中，用1当量1M HCl/乙醚处理。蒸发该溶液，将残渣在20％乙醚/己烷中研制，干燥得到366mg产物(化合物57的盐酸盐).质谱MH⁺＝411，熔点＝241.7-242.3℃。实施例58

将化合物30B(0.300g，0.811mmole)、乙酰氯(0.061mL，0.852mmole)和碳酸钠(0.090g，0.852mmole)置于5mL二氯甲烷中，在室温下搅拌过夜。18小时后，通过快速色谱纯化反应(3-5％(1∶9氢氧化铵/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有产物58的柱级分，并在真空下浓缩。将终产物置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.288g化合物58的盐酸盐(mp215.3-218.6℃，M+.427)。实施例59

将化合物30B(0.300g，0.811mmole)、甲磺酰酰氯(0.066mL，0.852mmole)和碳酸钠(0.090g，0.852mmole)置于5mL二氯甲烷中，在室温下搅拌过夜。18小时后，通过快速色谱纯化反应(3-5％(1∶9氢氧化铵/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有产物59的柱级分，并在真空下浓缩。将终产物置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.326g化合物59的盐酸盐(mp185.0-194.0℃，M+.427)。实施例60

将化合物35A(0.086g，0.242mmole)、碳酸钠(0.026g，0.242mmole)和溴乙腈(0.016mL，0.242mmole)置于2mL DMF中。在室温下30分钟后，消耗最初的起始原料。加入氢化钠(60％在油中，0.011g，0.266mmole)，再搅拌30分钟，然后再加入另外的1eq溴乙腈(0.016mL，0.242mmole)，在室温下搅拌过夜。将反应通过快速色谱纯化(1-5％(1∶9氢氧化铵/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有产物60的柱级分，并在真空下浓缩。将终产物置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.054g化合物60的盐酸盐(mp143.0-158.5℃)。实施例61

将化合物30B(0.709g，1.92mmole)、氯甲酸甲酯(0.16mL，2.01mmole)和碳酸钠(0.213g，2.01mmole)置于5mL二氯甲烷中，在室温下搅拌过夜。18小时后，通过快速色谱纯化反应(2-10％(1∶9氢氧化铵/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有产物61的柱级分，并在真空下浓缩。将终产物置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.063g化合物61的盐酸盐(mp133.5-136.5℃)。实施例62

将化合物30B(1.0g，2.81mmole)、碳酸钠(0.447g，4.22mmole)和2-氯-N-甲基乙酰胺(0.453g，4.22mmole)置于5mL DMF中，在室温下搅拌过夜。20小时后，通过快速色谱纯化反应(3-5％(1∶9氢氧化铵/甲醇)/二氯甲烷)，合并含有产物62的柱级分，并在真空下浓缩。将终产物置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，再蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.708g化合物62的盐酸盐(mp64.0-102.6℃)。实施例63

该实施例举例说明了合成化合物30B的备选的方法。

将该甲基硫化物(15g，49.4mmole)置于70mL NMP中，在室温下搅拌；向该溶液中加入N-氯琥珀酰亚胺(7.6g，56.8mmole)在6mL NMP中的溶液，并加入水(0.87mL，48.1mmole)。将开始的稀浆迅速溶解成澄清黄色溶液。在室温下20分钟后，然后用4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯(12.7mL，74.1mmole)处理亚砜30C。反应迅速变暗，升温至接触温度，在室温下搅拌4天。结束时，将该不透明黄色混悬液转移至装有250mL水的大锥形瓶中，在冰浴中搅拌4小时。然后过滤该混悬液，收集黄色滤饼，将其用水和己烷漂洗，真空下干燥。显示该氨基甲酸乙酯中间体重量过多，尽管延长干燥，仍没有减少至低于31.6g。

将氢氧化钾(111g，1.98mol)置于400mL乙醇中，加热直到溶解，然后慢慢冷却，之后加入上述氨基甲酸酯中间体(理论上49.4mmole)。将该溶液回流下搅拌3小时，然后冷却至室温，之后将其置于冰浴中，用柠檬酸水溶液(111g，577mmole，溶解于400mL水中)中和。将该溶液搅拌30分钟，然后在真空下蒸发至浆状水溶液。将该浆状物用二氯甲烷(x3)萃取；饱和盐水洗涤合并的萃取液，碳酸钠干燥，真空下蒸发，得到12g黄色泡沫状物(32.4mmole)。

将该泡沫状物的一部分(500mg)通过快速色谱(5-20％甲醇/二氯甲烷+1％氢氧化铵)纯化，合并含有产物的柱级分，并在真空下浓缩。将纯化的产物置于甲醇中，用2当量1N HCl/Et₂O处理，真空下蒸发；用乙醚洗涤得到的固体，收集得到520mg化合物30B的二盐酸盐(mp＞300℃，(M+H)⁺370)。

将该甲基硫化物(15g，49.4mmole)置于70mL NMP中，在室温下搅拌；向该溶液中加入N-氯琥珀酰亚胺(7.6g，56.8mmole)在6mL NMP和水(0.87mL，48.1mmole)中的溶液。将初始的稀浆迅速溶解至澄清黄色溶液。在室温下20分钟后，向该溶液中加入4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯(12.7mL，74.1mmole)，在室温下搅拌4天。将该不透明黄色混悬液转移至装有250mL水的大锥形瓶中，在冰浴中搅拌4小时。然后过滤该混悬液，收集黄色滤饼，将其用水和己烷漂洗，真空下干燥。显示该氨基甲酸乙酯中间体重量过多，尽管延长干燥，仍没有减少至低于31.6g。

将氢氧化钾(111g，1.98mol)置于400mL乙醇中，加热直到溶解，然后慢慢冷却，之后加入上述氨基甲酸酯中间体(理论上49.4mmole)。将该溶液回流下搅拌3小时，然后冷却至室温，之后将其置于冰浴中，用柠檬酸水溶液(111g，577mmole，溶解于400mL水中)中和。将该溶液搅拌30分钟，然后在真空下蒸发至浆状水溶液。将该浆状物用二氯甲烷(x3)萃取；饱和盐水洗涤合并的萃取液，碳酸钠干燥，真空下蒸发，得到12g黄色泡沫状物(32.4mmole)。

将该泡沫状物的一部分(500mg)通过快速色谱(5-20％甲醇/二氯甲烷+1％氢氧化铵)纯化，合并含有产物的柱级分，并在真空下浓缩。将纯化的产物置于甲醇中，用2当量1N HCl/Et₂O处理，真空下蒸发；用乙醚洗涤得到的固体，收集得到520mg化合物30B的二盐酸盐(mp＞300℃，(M+H)⁺370)。实施例64

向0.25g(0.68mmol)化合物30B和0.11g(0.74mmol)二甲基氨磺酰氯在20mL二氯甲烷的溶液中加入0.11mL(0.81mmol)三乙胺。将该混合物加热回流6hr，在减压下除去溶剂，将残渣通过应用5％甲醇/乙酸乙酯作为洗脱剂的40g硅胶柱色谱纯化，得到200mg白色粉末。将其溶解于2mL乙酸乙酯中，加入0.75mL 1M HCl/乙醚。将其搅拌1小时，减压下蒸发得到化合物64的盐酸盐(200mg).质谱MH⁺＝477，mp207.2-208℃)。实施例65

在30分钟内，将0.914g(2.7mmol)6-(氯苯基)2-甲磺酰基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇、1.041g(5.4mmol)N-(2-羟基乙基)-苯邻二甲酰亚胺，1.43g(5.4mmol)三苯膦在15mL 1，4-二噁烷中的冷(5℃)混悬液逐滴加入到0.95g(0.86mL，5.4mmol)二乙基偶氮基二羧酸酯在5mL 1，4-二噁烷中的溶液中。加入完成后，除去冰-水冷却浴。该混悬液迅速变为澄清淡棕色溶液。在室温下使其搅拌过夜。在减压下浓缩该反应混合物，通过应用90∶10∶0.5乙酸乙酯/二氯甲烷/氢氧化铵作为洗脱剂的120g硅胶柱色谱纯化，得到0.38g N-乙基苯邻二甲酰亚胺中间体。将0.18g(0.35mmol)该中间体和0.05g(0.42mmol)反式-4-氨基环己醇在1mL NMP中的混合物在120℃下加热30分钟。冷却反应混合物，用75mL水稀释，乙酸乙酯(3×75mL)萃取。用水(3×75mL)、盐水洗涤合并的乙酸乙酯溶液，干燥，过滤并浓缩。该物质通过应用5％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂的40g硅胶柱色谱纯化，得到45mg化合物65。(质谱MH⁺＝544，mp208-210℃)。实施例66

在室温、氮气氛下，向0.179g(0.4mmol)6-(2-氯苯基)-2-(N-乙酯基哌啶基-4-氨基)吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7-醇在1mL DMF的混悬液中，一次性全部加入0.012g(0.46mmol)氢化钠(95％)。5分钟后，观察有气体冒出。该混悬液变为澄清黄色溶液。将其在室温下搅拌30分钟，然后通过注射器加入0.068g(0.05mL，0.4mmol)苄基溴。将该反应混合物搅拌过夜，用浓的氯化铵水溶液淬灭，乙酸乙酯(3×60mL)萃取。用水(3×60mL)、盐水洗涤合并的乙酸乙酯溶液，干燥，过滤并浓缩。该物质通过应用20％乙酸乙酯/二氯甲烷作为洗脱剂的40g硅胶柱色谱纯化，得到75.6mg化合物66。将其溶解于2mL乙酸乙酯中，加入1mL 1M HCl/乙醚。将该混悬液搅拌1小时，浓缩得到74mg化合物66的盐酸盐。(质谱MH⁺＝518，mp.162-173℃)。实施例67

将0.350g(1.0mmol)砜和0.303g(3.0mmol)4-氨基-四氢吡喃在0.7mL NMP中的混合物在100℃下加热。1小时后，冷却该反应，倒入水中，用乙酸乙酯萃取。将有机级分用水洗涤5次，盐水洗涤1次，通过硫酸镁干燥，并在减压下浓缩。将残渣通过柱色谱纯化(5％甲醇/二氯甲烷)，得到化合物67，其为泡沫状物。将残渣混悬于MeOH中，加入盐酸(1.0M/Et₂O，1当量)。将得到的混合物搅拌20分钟，并在减压下浓缩。将残渣与MeOH/Et₂O的混合物搅拌1小时，过滤出化合物67的盐酸盐，其为白色固体。产率330mg.Mp217.2-218.9℃.MS(M+H)⁺371。实施例68

将砜(350mg，1.04mmol)与4-氨基四氢吡喃(303mg，3.0mmol)和0.7mLNMP合并，在100℃下加热30分钟。冷却至室温，加入水，过滤得到化合物68，其为棕色固体。将该溶液溶解于MeOH中，用盐酸(1.0M/Et₂O)调成酸性，并蒸发。将该残渣通过应用10∶90 MeOH/CH₂Cl₂作为洗脱剂的硅胶纯化。合并含有化合物68盐酸盐的级分，在减压下蒸发，得到化合物68的盐酸盐，其为白色泡沫状物。将残渣混悬于MeOH中，加入盐酸(1.0M/Et₂O，1当量)，搅拌20分钟，并在减压下浓缩。将残渣与MeOH/Et₂O的混合物搅拌1小时，过滤出产物，其为白色固体。产率228mg.Mp＞300℃.MS(M+H)⁺357。实施例69

该实施例举例说明了从SEM-保护的吡啶酮合成2-(反式-4-甲氧基酰胺基-环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮步骤1

向胺(218mg，0.436mmol)在10mL无水四氢呋喃的0℃溶液中，加入焦碳酸二甲基酯(0.080mL，0.746mmol)、二甲基氨基吡啶(2mg，0.016mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌15分钟，然后缓慢升温至室温过夜。在真空下浓缩粗制的反应混合物，通过柱色谱纯化(5∶95，甲醇/二氯甲烷)，得到230mg(95％)产物，其为白色固体(质谱M+H⁺＝558，mp＝110.0-112.0℃)。步骤2

将步骤1得到的SEM-保护的吡啶酮(320mg，0.553mmol)混悬于10mL甲醇中，用10mL 10％盐酸处理。将反应混合物回流24小时，冷却，然后在真空下浓缩，直到开始形成沉淀。过滤得到的混悬液，用水和乙酸乙酯洗涤，然后干燥得到95mg(53％)2-(反式-4-甲氧基酰胺基-环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮69，其为白色固体(质谱M+H⁺＝428，mp＝294.6-296.8℃)。实施例70

将胺(0.49mg，1.3mmol)混悬于6mL乙酸酐中，在环境温度下搅拌16小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物，并过滤。用水和乙酸乙酯洗涤收集的固体，然后干燥得到2-(反式-4-甲基酰胺基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮，其为白色固体。将该游离的碱混悬于乙酸乙酯中，用1M HCl/乙醚溶液处理，形成0.51g(87％)化合物70的盐酸盐，其为白色粉术(质谱M+H⁺＝412，mp＞300℃)。实施例71

该实施例举例说明了从SEM-保护的吡啶酮起始合成2-(反式-4-酰氨基酰胺基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。步骤1

向胺(0.20g，0.39mmol)在15 mL二氯甲烷中的溶液中加入三甲基甲硅烷基异氰酸盐(0.12mL，0.73mmol)，在室温下搅拌5小时。用5mL甲醇淬灭反应混合液，在真空下浓缩，通过柱色谱纯化(5∶95，甲醇/二氯甲烷)，得到0.14g(66％)产物，其为白色固体(质谱M+H⁺＝543，mp＝182.2-188.9℃)。步骤2

将步骤1得到的SEM-保护的化合物(130mg，0.245mmol)混悬于5mL甲醇，用5mL 10％盐酸处理。将反应混合液回流18小时。过滤得到的混恳液，用水、乙酸乙酯洗涤收集到的固体，干燥得到68mg(62％)2-(反式-4-酰氨基酰胺基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(71)的盐酸盐，其为白色固体(质谱M+H⁺＝413，mp＞300℃)。实施例72

该实施例举例说明了从6-(2-氯苯基)-2-甲磺酰基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-醇起始，合成2-(顺式-4-甲磺酰基酰氨基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。步骤1

向砜(1.93g，5.75mmol)在15mL无水1-甲基-2-吡咯烷酮中的0℃溶液中加入氢化钠(0.160g，6.33mmol，95％干燥粉末)。将反应混合液搅拌10分钟，直到没有气体蒸发为止，然后在5分钟内滴加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(1.10mL，6.22mmol)。将反应混合液搅拌30分钟，然后加入含有顺式-1，4-二氨基环己烷(6.27g，54.9mmol，TCI America，Portland，OR，顺式和反式异构体的混合物)经0℃冷却的摇瓶。将反应混合液在室温下搅拌3小时。加入100mL水和100mL乙酸乙酯，相分离，再用100mL乙酸乙酯萃取水层。用4×200mL盐水洗涤合并的有机层，通过硫酸钠干燥，真空浓缩，得到粗黄色液体。通过柱色谱纯化(30-40∶70-60，甲醇/二氯甲烷和氢氧化铵)，得到1.62g(56％)亮黄色泡沫状产物(质谱M+H⁺＝500，mp＝79.0-81.5℃。步骤2

向步骤1中得到的胺(0.26g，0.53mmol)在12mL二氯甲烷中的溶液中加入三乙胺(0.11mL，0.79mmol)和甲磺酸酐(0.18g，1.0mmol)。将反应混合液搅拌3小时，然后在真空下浓缩。通过柱色谱纯化(3∶97，甲醇/二氯甲烷)，得到0.30g(98％)白色泡沫状产物(质谱M+H⁺＝578，mp＝117.0-144.0℃)。通过¹H NMR色谱测定，分离的产物为顺式和反式立体异构体按照82∶18的比率混合形成的混合物。步骤3

将步骤2得到的SEM-保护的吡啶酮(0.29g，0.50mmol)混悬于10mL甲醇，用10mL 10％盐酸处理。将反应混合液回流5小时，冷却，然后在真空下浓缩，直到开始形成沉淀。过滤得到的混悬液，用水和乙酸乙酯洗涤，然后干燥得到0.17g(70％)2-(顺式-4-甲磺酰基氨基-环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(72)的盐酸盐，其为白色固体(mp＞300℃)。通过¹H NMR色谱测定，分离的产物为顺式和反式立体异构体按照82∶18的比率混合形成的混合物。实施例73

向砜(0.20g，0.57mmol)和三乙胺(0.24mL，1.7mmol)在25mL四氢呋喃的溶液中加入顺式-4-氨基环己醇(Aust.J.Chem.，1961，14,610)。将反应混合物在80℃下搅拌48小时，冷却，然后加入1N HCl。用氯仿萃取，碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，通过硫酸镁干燥.过滤并浓缩，得到0.398g粗制固体，将其通过柱色谱纯化(4％甲醇/二氯甲烷)，得到0.118g(54％)2-(顺式-4-羟基环己基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(73)，其为白色固体(质谱M+H⁺＝385，mp＝209.5-216.5℃)。实施例74

制备74B：

将化合物74A(800mg，1.91mmol)、1，4-二氧杂-螺[4，5]癸-8-基胺(制备参见WO 99/001452)和N-甲基吡咯烷酮(0.5mL)一起混合，在搅拌下加热至110℃。35分钟后，将反应冷却至室温，用乙酸乙酯(25mL)/水(25mL)稀释，分配，进行相分离，合并有机层，用水(2×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到化合物74B，其为灰白色粉末(990mg，(M+H)⁺＝495，M.P.＝200.0-206.5℃)。制备化合物74：

将化合物74B(990mg)置于10mL 80％乙酸(aq)中，在搅拌下加热至65℃4小时。用乙酸乙酯(1×70mL)萃取反应混合物。用饱和碳酸氢钠(4×50mL)洗涤有机层，直到pH＝8，并用盐水(1×50mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到800mg粗产物。通过应用70％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的制备TLC纯化，得到349mg化合物74，(M+H)⁺＝451，M.P.＝251.2-252℃)。实施例75

将化合物74A(2g，4.79mmol)、4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯(Aldrich，2.5g，3eq)和N-甲基吡咯烷酮(1.5mL)一起混合，在110℃下搅拌3.5小时。将反应冷却至室温，用乙酸乙酯(80mL)和水(20mL)稀释。分离有机层，用水(2×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗产物在硅胶上用25％到50％的乙酸乙酯在己烷中的溶液作为洗脱液进行梯度洗脱纯化，得到1.023g游离胺((M+H)⁺＝510，M.P.＝194.2-221.4℃)。将200mg游离胺溶解于乙酸乙酯(15mL)，然后加入1.0M HCl(在二乙醚中)(0.5mL，1.25eq)，并搅拌1小时。然后在50℃减压下除去溶剂。向残留物中加入20ml二乙醚，碾碎固体。将得到的悬浆搅拌30分钟，过滤，在56℃高真空度下干燥灰白色粉末2小时，得到65mg化合物75((M+H)⁺＝510，M.P.＝107.0-110.0℃)。实施例76

将化合物74A(365mg，0.87mmol)，4-氨基四氢吡喃，76A，(265mg，3eq)和N-甲基吡咯烷酮(0.3mL)混合起来，在110℃加热30分钟。将反应液冷却到室温，用乙酸乙酯(30mL)和水(25mL)稀释。分离有机层，用水(2×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到440mg粗产物。通过用70％乙酸乙酯(在己烷中)作洗脱液通过制备性TLC纯化，得到游离胺(405mg)，其为灰白色粉末((M+H)⁺＝439，M.P.＝200.9-202.1℃)。将游离胺溶解于乙酸乙酯(25mL)，然后加入1.0M HCI(在二乙醚中)(1.4mL，1.5eq)，将得到的混合液搅拌1小时。然后在50℃减压下除去溶剂，将得到的残留物在56℃高真空度下干燥，得到339mg化合物76的盐酸盐((M+H)⁺＝439，M.P.＝198.2-201℃)。实施例77制备化合物77B

将化合物77A(TCI Chemicals，5g，26mmol)和氰酸钾(10.1g，5eq)溶解于甲醇(60mL)和水(60mL)。将得到的混合液在搅拌下加热到80℃保持4小时，然后在室温下搅拌24小时。用乙酸乙酯(350mL)稀释反应混合液。分离有机层，用盐水(5×150mL)和稀释的HCl/盐水(1×150mL)洗涤，浓缩到约50mL，直到开始出现固体。过滤这些固体，干燥得到化合物77B(2g，(M+H)⁺＝230，M.P.＝170.4-173.5℃)。制备化合物77C：

将化合物77B(2g)置于二噁烷(125mL)中，将HCl(_g)鼓入该非均匀混合液15分钟，然后严密封紧容器，并搅拌5小时。在50℃减压下除去溶剂。将粗产物置于甲醇(250mL)中，加入2.5mL甲醇钠(在甲醇中)(25wt％，1eq)。将得到的混合液搅拌1小时，然后浓缩到约75mL，通过中等玻璃料过滤。浓缩滤液，干燥得到化合物77C(1.76g，(M+H)⁺＝130)。制备化合物77：

将化合物74A(500mg，1.2mmol)，化合物77C(660mg，3eq)4-氨基四氢吡喃，76A，(265mg，3eq)和N-甲基吡咯烷酮(0.8mL)一起混合，在110℃搅拌下加热30分钟。将反应液冷却到室温，用乙酸乙酯(80mL)和水(40mL)稀释。分离有机层，用水(2×40mL)和盐水(1×40mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。用纯乙酸乙酯作洗脱液通过制备性TLC纯化，得到游离胺型的化合物77(120mg)。然后将游离胺溶解于乙酸乙酯(25mL)，然后加入1.0M HCI(在二乙醚中)(0.4mL，1.5eq)，将得到的混合液搅拌1小时。然后在50℃减压下除去溶剂，将得到的残留物在56℃高真空度下干燥，得到化合物77的盐酸盐，其为灰白色粉末(126mg，(M+H)⁺＝467，M.P.＝164.5-168.0℃)。实施例78 2-(4-四氢硫代吡喃基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮步骤1

将5g(43mmol)四氢硫吡喃-4-酮、29.26g(215mmol)醋酸钠三水合物和14.94g(215mmol)羟基胺盐酸盐在200mL乙醇中的混合物回流6小时。将该混合物用400mL冰-水混合物稀释，用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。用盐水洗涤萃取液，干燥，在减压下过滤并浓缩，得到5.6g(定量产率)肟(白色固体)。在室温下将2g(15mmol)上述肟(在30mL THF中)滴加到76mL(76mmol)1M LAH/THF溶液中。滴加完后，将混合物回流7小时，然后冷却到5℃。小心地向反应混合液中滴加2.9mL水，然后滴加入2.9mL 15％NaOH水溶液和8.7mL水。将混悬液搅拌30分钟，通过硅藻土过滤，用300mL乙酸乙酯洗涤。减压下除去滤液(＜50℃)，得到1.62g 4-氨基四氢硫代吡喃，(92.3％产率)。步骤2

将1g(2.9mmol)砜1和0.67g(5.7mmol)4-氨基四氢硫吡喃在1.5mLNMP中的混合液在85℃的油浴中加热1.5小时，直到完成反应。冷却反应混合液，用100mL水稀释，用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。用水(2×75mL)和盐水再次洗涤合并的乙酸乙酯溶液，干燥，过滤，减压浓缩。用5％甲醇(在二氯甲烷中)作洗脱液在硅胶(100g)上通过柱色谱纯化，得到0.77g(77％产率)。将0.2g上述硫化物(在2mL二氯甲烷中)与0.62mL(1.2eq)1M HCI/乙醚一起搅拌30分钟。蒸发掉溶剂，得到206mg所需的2-(4-四氢硫代吡喃基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d嘧啶-7-酮的HCl盐，(质谱MH⁺＝387，mp232.1-233.1℃)。实施例792-(S-氧-4-四氢硫代吡喃基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮2-(S，S-二氧-4-四氢硫代吡喃基氨基)-6-(2-氯苯基)-8-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮

向0.2g(0.5mmol)该硫化物在50mL二氯甲烷的冷却溶液(5℃)中加入0.13g(0.57mmol)77％3-氯过苯甲酸。15分钟后，反应的一部分进行TLC分析，显示该硫化物完全转化为亚砜(n＝1)和痕量的砜(n＝2)。加入另外量的0.04g 77％3-氯过苯甲酸，将反应物再搅拌30分钟，更多的亚砜转化为砜。将混合物倒入10％亚硫酸氢钠水溶液中，用二氯甲烷萃取。用10％碳酸氢钠水溶液，然后用盐水洗涤有机层，干燥，过滤并浓缩。在20×40cm制备性TLC SiO₂板进行亚砜和砜的纯化和分离三次，其中使用5％甲醇(在二氯甲烷中)洗脱。回收到68mg亚砜(外消旋物)，溶解于3mL二氯甲烷中。加入0.25mL 1M HCI/乙醚，将混悬液搅拌30分钟。在减压下蒸发溶剂，得到70mg所需的亚砜的盐酸盐(质谱MH⁺＝403，m.p.205.6-207.3℃)。

从制备性TLC板还回收到0.15g砜(更高Rf)。将其溶解于3mL二氯甲烷中，加入0.54mL 1M HCl/乙醚。将该混悬液搅拌30分钟，过滤，用乙醚洗涤，得到122mg所需的砜的盐酸盐(质谱MH⁺＝419，m.p)。实施例80

该实施例举例说明了制备6-(2-氯苯基)-8-甲基-2-甲硫基-8-氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(VI)的备选的方法制备3，3-二乙氧基-2-甲酰基丙腈钾盐(11)

向3，3-二乙氧基丙腈(I，283.80g，1.98摩尔)和甲酸甲酯(148.80g，2.48摩尔)在无水THF(1.1L)的10℃、搅拌溶液中，加入1.0M叔-丁醇钾(在THF中)(2.2L，2.2摩尔)。在整个45分钟的加入期间，将温度维持在10-15℃。加入后，在环境温度下搅拌得到的稀浆2小时。然后加入己烷(400mL)，再继续搅拌20分钟。过滤稀浆，用1/1己烷/THF洗涤滤饼，在60℃、真空烘箱中干燥过夜。灰褐色粉末的产率为302.5g(73.0％)。¹H-NMR(CD₃OD)显示与所需结构II一致。制备4-氨基-2-硫烷基嘧啶-5-甲醛(III)

在回流下加热硫脲(92.8g，1.22摩尔)在乙醇(90mL)中的稀浆，剧烈搅拌。在10分钟内，分5次向该稀浆中加入3，3-二乙氧基-2-甲酰基丙腈钾盐II(222.20g，1.06摩尔)在25％甲醇钠/甲醇(85.5mL，0.37mole)和乙醇(285mL)中的混悬液，同时维持回流条件(或者为了加入，可以将该稀浆加热至50℃以得到均一溶液)。加入另一部分乙醇(150mL)以利于搅拌。加入后，粘稠的稀浆变为亮黄色，在回流下保持另外1小时。然后冷却混合物，在旋转蒸发仪上蒸发至接近干燥。将残渣溶解于水(940mL)中。通过加入30％乙酸(280mL)从溶液中沉淀粗产物，然后通过应用烧结玻璃过滤漏斗进行过滤分离。用水(800mL)洗涤滤饼。通过在热水(1L)中研制30分钟进行纯化，随后冷却并过滤，在真空炉中60℃下干燥过夜后，得到118.9g(72.3％)产物，其为亮黄色固体(后面的制备显示该研制是非必须的)。HPLC得到纯度为98.67％。¹H-NMR(DMSO-d₆)显示与所需结构III一致。制备4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛(IV)

在20分钟内、温和冷却下，向4-氨基-2-硫烷基-嘧啶-5-甲醛III(100.00g，644.4毫摩尔)和过325目筛的碳酸钾(178.10g，1.29摩尔)在丙酮(1.5L)中的溶液中，逐滴加入碘甲烷(128.10g，902.2毫摩尔)。将该混合物在环境温度下搅拌过周末。TLC显示仍残留有III，加入另一部分碘甲烷(8mL)，连续搅拌过夜。TLC仍显示仍残留有一些III，加入另一部分碘甲烷(8mL)，再连续搅拌24小时。HPLC显示为95.9％S-烷基化产物和3.7％化合物III。将反应混合物通过旋转蒸发仪气提至接近干燥状态。向残渣中加入水(1L)，通过过滤器收集产物，用水(200mL)洗涤。将产物在真空炉中60℃下干燥过夜。产率为103.37g(94.8％)，HPLC显示为95.8％IV和4.2％III。制备6-(2-氯苯基)-2-甲硫基-8-氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(V)

将IV(10.00g，59.1毫摩尔)、2-(2-氯苯基)乙酸乙酯(14.40g，71.8毫摩尔)、NMP(115mL)和过325目筛的碳酸钾(29.00g，209.8毫摩尔)在90℃下加热过夜。冷却反应混合物，用水(800mL)稀释。将得到的稀浆搅拌过夜，过滤分离产物(V)。用水洗涤滤饼，在真空炉中60℃下干燥过夜。分离产率为14.9g(83.0％)，其为暗棕色固体。HPLC分析显示为98.3％纯度。制备6-(2-氯苯基)-8-甲基-2-甲硫基-8-氢吡啶并[2，3d]嘧啶-7-酮(VI)

将V(0.25g，0.82mmole)、NMP(5mL)、碳酸钾(0.11g，0.82mmole)和碘甲烷(0.14g，0.96mmole)的混合物在氮气氛、环境温度下搅拌过夜。加入水(15mL)，连续搅拌24小时。过滤稀浆，用水(10mL)洗涤滤饼。HPLC分析显示为97.8％纯度。实施例81

向吡啶酮68(1.6g，4.5mmol)在NMP(10mL)中加入氢化钠(188mg，4.7mmol)，将混合液搅拌45分钟，然后加入(2-碘乙氧基)三异丙基硅烷(1.62g，5mmol)。12小时后，将混合液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，通过硫酸钠干燥，真空浓缩，残留物用95∶5二氯甲烷/甲醇作为洗脱液在硅胶上通过柱色谱纯化。合并含有产物的柱级分，真空浓缩成固体，将其混悬于乙酸乙酯。加入盐酸(1.0M/Et₂O，1.2当量)得到盐，将其过滤，干燥，得到262mg所需产物。质谱MH⁺＝401，mpt.217-220℃。实施例82

向吡啶酮68(500mg，1.4mmol)在NMP(5mL)中加入氢化钠(56mg，1.4mmol)，将混合液搅拌45分钟，然后加入碘乙腈(0.11mL，1.54mmol)。12小时后，将混合液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，通过硫酸钠干燥，真空浓缩，残留物用97∶3二氯甲烷/甲醇作为洗脱液在硅胶上通过柱色谱纯化。合并含有产物的柱级分，真空浓缩成固体，将其混悬于乙酸乙酯。加入盐酸(1.0M/Et₂O，1.2当量)得到盐，将其过滤，干燥，得到62mg所需产物。质谱MH⁺＝395，mpt.230.2-230.4℃。实施例83

向砜1(0.4g，1.2mmol)在NMP(1mL)中加入4-氨基-2，2，6，6-四甲基哌啶(0.74mg，4.7mmol)，将混合液在75℃下搅拌20分钟。用水(30mL)稀释混合液，将混悬液搅拌30分钟。过滤固体，用100mL水和50mL乙醚洗涤。空气干燥30分钟后，得到0.376g所需产物。向0.27g该固体在2mL二氯甲烷中加入盐酸(1.0M/Et₂O，1.2当量)，过滤得到的盐，干燥，得到264mg所需产物。质谱MH⁺＝426，mpt.＞300℃。实施例84

向砜1(0.16g，0.47mmol)在NMP(1mL)中加入四氧-3-噻吩胺1，1-二氧化物(0.19g，1.4mmol)，将混合液在70℃下搅拌30分钟。用水稀释混合液，过滤固体，用水和乙醚洗涤。粗制的固体用5∶95∶0.01甲醇/二氯甲烷/NH₄OH作为洗脱液通过硅胶柱色谱纯化。将得到的固体混悬于二氯甲烷中，加入盐酸(1.0M/Et₂O，1.2当量)。过滤得到的盐，干燥，得到150mg所需产物。质谱MH⁺＝405，mpt.256-260℃。实施例85

将砜1(105mg，0.3毫摩尔)和4-氨基吗啉(0.3mL，3.0毫摩尔)的混合物在60℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却，然后通过用二氯甲烷洗脱的硅胶色谱纯化，得到白色粉末(91mg，(M+H)⁺＝372，M.P.＝243.3-244.0℃)。实施例86

步骤1

将S-3-(N-三苯甲基氨基)四氢呋喃(按照文献报道的方法制备，Barlos，Kleomenis；Papaioannou，Dionysios；Patrianakou，Stella；Sanida，Chariklia；Tsegenidis，Theodoros；J.Chem.Soc.Chem.Commun.；EN；6；1987；474-475)(5.12g，0.0155mol)和浓盐酸(5mL)的混合液在乙醇(60mL)中加热回流15分钟，浓缩。将残留物置于热乙醚(100mL)中搅拌，过滤，用乙醚洗涤，真空干燥，得到(S)-3-氨基四氢呋喃盐酸盐。步骤2

将砜1(1.877g)，(S)-3-氨基四氢呋喃盐酸盐(0.66g)和二-异丙基胺(3.73mL)的混合物在无水乙腈(20mL)中回流，直到TLC显示砜已反应完全。除去溶剂，将残留物在乙酸乙酯和盐水之间进行相分离。分离有机层，干燥，浓缩。粗产物在硅胶上(1％MeOH/CH₂Cl₂)通过柱色谱纯化，得到所需产物(0.6g)。将产物溶于MeOH/CH₂Cl₂，用2mL 1N HCl(在乙醚中)处理，蒸发，干燥得到盐酸盐，MP171.9-173℃，MS357(M+H)。实施例87

步骤1

将上述硫化物2.4(8.2g)在无水DMF中的溶液与K₂CO₃(4.1g)和乙基碘化物(5mL)在室温下搅拌过夜。将混合液在EtOAc(300mL)和盐水(200mL)中搅拌。分离有机层，用盐水洗涤，干燥，浓缩得到粗产物。步骤2

在0-5℃向上述产物在THF(170mL)中的溶液中加入过硫酸氢钾制剂(41g)(在水(170mL)中)。在室温下搅拌混合液4小时，用EtOAc(600mL)和水(200mL)稀释。分离有机层，用盐水(3X)洗涤，干燥，浓缩得到砜。步骤3

在120℃下将上述砜(2.23g)和4-氨基-四氢吡喃(1.17g)在NMP(0.4mL)中的混合液搅拌1小时，然后冷却到室温。加入甲醇(5mL)，将混合液搅拌10分钟。过滤固体，用冰甲醇洗涤。将得到的固体溶解于CH₂Cl₂，用5mL 1-2 N HCl(在甲醇中)处理。蒸发掉溶剂后，将残留物从异丙醇/乙酸乙酯中重结晶，得到终产物(1.45g)。MP185.3-190.1℃。实施例88

步骤1

将该硫化物(5.0g)、环氧异丁烷(isobutyren oxide)(3mL)和碳酸钾(2.6g)在DMF(20mL)中的混合物在80℃下搅拌过夜。加入另外量的环氧异丁烷(1.0mL)，将该混合物再搅拌8小时。用EtOAc和盐水进行水相加工，得到5.8g粗产物。步骤2

向上述硫化物(5.8g)在THF(150mL)中的0-5℃溶液中，加入过硫酸氢钾制剂(3.5g)在水(150mL)中的溶液。将该混合物升温至室温，搅拌4小时。加入EtOAC(400mL)，进行相分离。用盐水(3×200mL)洗涤有机层，通过硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到所需的砜(6.0g)，其不经过纯化用于下一步。步骤3

将砜(5.0g)和4-氨基四氢硫代吡喃(2.4g)在NMP(4mL)中的混合物在100℃下加热1小时。用EtOAc和盐水进行水相加工，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化(硅胶，30-35％EtOAc/己烷)，得到2.3g固体。MP105-108.5℃，MS445(M+H)。步骤4

向上述化合物(2.3g)在90mL二氯甲烷中的0-5℃溶液中，加入MCPBA(2.6g)在70mL二氯甲烷中的溶液。将该混合物在室温下搅拌过夜，并浓缩。将残渣在EtOAc和盐水之间分配。分离有机层，用饱和NaHCO₃(5x)洗涤，干燥，浓缩，并通过柱色谱纯化(硅胶，2-3％MeOH/二氯甲烷)。将产物(1.3g)溶解于二氯甲烷/EtOAc中，用3mL 1M HCl(在乙醚中)处理。过滤得到的固体，用乙醚洗涤，从MeOH/EtOH中重结晶，得到盐酸盐(0.65g)，MP223.72-230.2℃，MS477(M+H)。实施例89 砜89步骤1

在室温下，向4-氯-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯(Aldrich，24g，103mmol)在250mL乙腈的溶液中，加入4-氟苯胺(22.75g，205mmol)。搅拌2天后，将混合物在60℃下加热4小时。过滤得到的固体，用EtOAc萃取。浓缩过滤液，用EtOAc(300L)稀释，盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，过滤并浓缩，得到粗产物。将粗产物用己烷(400mL)搅拌，过滤得到23g 4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯，其为白色固体。步骤2

在5℃下，将氢化铝锂(3.0g)在无水四氢呋喃(300mL)中搅拌，逐滴加入4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯(22.5g)在无水四氢呋喃(250mL)中的溶液进行处理。将该反应混合物在室温下搅拌过夜。在5℃下再加入氢化铝锂在THF(55mL)中的1.0M溶液，将混合物在室温下搅拌3小时。逐滴加入水，将得到的混合物搅拌30分钟，其后加入氢氧化钠(2M，9mL)水溶液，随后加入水(12mL)。将得到的混悬液在室温下搅拌17小时，然后过滤。用四氢呋喃(2X，100mL)洗涤过滤的残渣，浓缩合并的滤液和洗涤液。将残渣混悬于乙酸乙酯/己烷-1/2(200mL)中，过滤固体，干燥得到14g 4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇，其为黄色固体。步骤3

用二氧化锰(58g)处理4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇(14.5g)在260mL二氯甲烷中的溶液。将得到的混悬液搅拌5小时，通过硅藻土过滤。用二氯甲烷(100mL)洗涤过滤的残渣，浓缩合并的滤液和洗涤液，得到固体。用乙醚(100mL)搅拌固体，得到8.6g 4-(4-氟苯基)氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛，其为白色固体。步骤4

将该醛(8.6g，0.033mol)、o-氯苯基乙酸乙酯(8g)和1，3，4，6，7，8-六氢-2H-嘧啶并[1，2a]嘧啶结合的聚合物(来自Aldrich的碱，2.5g)在NMP(60mL)混合，在120℃下搅拌4天。加入另外的1.4g碱，将该混合物在120℃下再搅拌3天。将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤，用NMP(10mL)洗涤。将滤液倒入水(600mL)中，用EtOAc(3x500mL)萃取。合并有机层，用盐水(3x)洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将得到的固体用热乙醚研制，得到产物(6.5g)。步骤5

在0-5℃下，向上述硫化物(6.4g)在THF(70mL)中的溶液中，加入过硫酸氢钾制剂(27.3g)在水(90mL)中的溶液。将该混合物在室温下搅拌5小时，用EtOAC(600mL)和水(250mL)稀释。分离有机层，用盐水(3x)洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到砜89(5.5g)，MP 115.5-117℃，MS430(M+H)。实施例90

步骤1

在搅拌下向2-氟乙醇(13.85g，216.2mmol，Aldrich Chemicals)和吡啶(50mL)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入甲苯磺酰氯(61.9g，1.5当量)。将得到的混合物在0℃下搅拌5小时，然后置于冰箱中过夜。第二天加入150mL冰水淬灭反应，在0℃减压下除去二氯甲烷和吡啶，用乙酸乙酯(600mL)稀释。分离有机层，用乙酸乙酯(1×200mL)萃取。合并有机层，用0.5N HCl(3×200mL)洗涤，直到pH＝2，用饱和碳酸氢钠(2×200mL)和盐水(1×200mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到无色油，将其静置结晶，得到甲苯磺酸酯(46.5g，M＝218)，其为白色粉末。步骤2

向硫化物2.4(4.06g，13.4mmol)在DMF(200mL)的0℃溶液中，加入60％NaH在油中的混悬液(0.59g，1.1当量)。将得到的混合物在0℃下搅拌30分钟，逐滴加入上述甲苯磺酸酯(3.8g，1.3当量)在DMF(25mL)中的溶液。将得到的混合物在0℃至室温下搅拌过夜，然后用乙酸乙酯(600mL)和水(200mL)稀释。分离有机层，用水(3×200mL)、饱和碳酸氢钠(1×200ml)和盐水(2×200mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到半固体物质(9.16g)。将己烷(400mL)加入到粗产物中，搅拌15分钟。滗析溶剂，浓缩残渣，得到N-单氟乙基化合物(4.92g，(M+H)⁺＝350，M.P.＝114.7-118.1℃)，其为棕褐色粉末。步骤3

向上述N-单氟乙基化合物(4.8g，13.4mmol)在四氢呋喃(75mL)中的0℃溶液中，逐滴加入过硫酸氢钾制剂(20.6g，2.5当量)在水(75mL)中的溶液。加入完成后，除去冰浴，将得到的混合物在室温下搅拌7小时，在0℃下保持过夜。将反应在室温下再搅拌5小时，然后用乙酸乙酯(600mL)和水(250mL)稀释。分离有机层，用水(3×250mL)和盐水(1×250mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到所需的砜(5.4g，(M+H)⁺＝382，M.P.＝156.0-168.0℃)，其为褐色-微黄色粉末。步骤4

将上述砜(2.7g，7.07mmol)、4-氨基四氢吡喃(2.15g，3当量)和NMP(2.7mL)的混合物在110℃下搅拌3.5小时。然后停止加热和搅拌，将混合物放置过夜。下一天，加入乙酸乙酯(180mL)和水(65ml)，在各层中分配，然后分离。用水(2×65mL)和盐水(1×65mL)洗涤有机层，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到2.6g粗产物。通过应用25％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱纯化，得到游离胺(1.267g，(M+H)⁺＝403)。将该游离胺置于二氯甲烷(50mL)，搅拌下加入1M HCl(在二乙醚中)(4.5mL，1.5当量)。将得到的混合物搅拌5分钟，然后在减压、55℃下除去溶剂。在高真空、56℃下干燥24小时，得到所需化合物(1.247g，(M+H)⁺＝403)，其为盐酸盐。实施例91硫化物酰肼91

向硫化物2.4(2.10g，6.59mmol)在DMF(60mL)的0℃溶液中，加入氢化钠在油中的60％混悬液(266mg，1.0当量)。将得到混合物在0℃下搅拌30分钟，然后一次性加入二苯基氧膦基-O-羟基胺(Tetrahedron Let.，vol23，No.37，3835-3836，1982)(1.854g，1.26当量)。1分钟后，出现大量沉淀，在搅拌下加入另外的100mL DMF。搅拌1小时，将反应倒入乙酸乙酯(700mL)和水(200mL)的混合物中。分离水相，用乙酸乙酯(125mL)萃取。用水(5×150mL)和盐水(1×150mL)洗涤合并的乙酸乙酯层，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到硫化物酰肼(2.3g，M.P.＝183.4-184.2℃，(M+H)⁺＝319)，其为灰白色粉末。实施例92

将该硫化物酰肼91(250mg，0.78mmol)和4-氨基四氢吡喃(397mg，5当量)合并，在150℃下搅拌10小时。将该反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(35mL)和水(25mL)稀释。分离有机层，用水(2×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到粗产物(300mg)。通过应用5％甲醇/二氯甲烷洗脱的制备性TLC纯化，得到胺(209mg，M.P.＝117.4-1213℃，(M+H)⁺＝372.1)。将游离的胺(200mg，0.538mmol)置于二氯甲烷(5mL)和乙酸乙酯(20mL)中。向该溶液中加入1M HCl/二乙醚(0.8mL，1.5当量)，搅拌2小时。在减压、55℃下除去溶剂，在真空、56℃下干燥24小时，得到所需化合物(171mg，M.P.＝207.1-215.9℃，(M+H)⁺＝372)，其为灰白色粉末。实施例93步骤A：制备1-苄基哌啶-4-基氨基甲酸苄基酯

在30-45分钟内，将4-氨基-1-苄基哌啶(41.2g，216.5mmol)和三乙胺(51.3mL，369mmol)在600mL四氢呋喃中的0℃溶液逐滴加入到氯甲酸苄基酯(31mL，217mmol)中，调整速率以将反应温度保持在5-10℃之间。加入完成后，将该反应混合物升温至室温，搅拌12小时。在减压下除去溶剂和挥发物。然后加入水(500mL)和乙酸乙酯(1.2L)，并进行相分离。用饱和碳酸氢钠水溶液(2X，150mL)和盐水洗涤有机层，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到棕褐色液体，将其通过柱色谱纯化(二氧化硅，EtOAc/己烷-30/70至EtOAc-100)，得到27.8g胺，其为白色固体(质谱M+＝324，MP＝79.1-79.6℃)。步骤B：制备哌啶-4-基氨基甲酸苄基酯

在室温下，向苄基胺(27.8g，85.7mmol)在400mL二氯甲烷的溶液中，通过加液漏斗逐滴加入1-氯乙基氯甲酸酯(25.4g，178mmol)在50mL二氯甲烷中的溶液。加入完成后，将反应混合物在室温下搅拌3小时。在减压下除去溶剂和挥发物，加入甲醇(500mL)。将反应混合物在搅拌下加热回流1小时，冷却至室温，浓缩得到26.3g哌啶，其为灰白色固体(质谱M+1＝235，MP＝190.7-192.2℃)。步骤C：制备1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基氨基甲酸苄基酯

在室温下将保护的哌啶(10g，42.7mmol)和三乙胺(12mL，86.7mmol)溶解于500mL二氯甲烷中。通过加液漏斗逐滴加入在20mL二氯甲烷中的甲磺酰氯(4.3mL，55.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。在减压下除去溶剂和挥发物，向反应混合物中加入乙酸乙酯(500mL)和盐酸水溶液(0.5M，350mL)，分离两相。有机层用盐酸水溶液(0.5M，2×100mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(3×100mL)和盐水洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到甲磺酰胺(MP＝148.6-152.8℃)。步骤D：制备1-(甲基磺酰基)哌啶-4-胺

在室温、氮气氛下下，向500mL圆底烧瓶中的甲磺酰胺(9.2g，29.5mmol)在200mL四氢呋喃中的溶液中加入碳上钯(10％，2-3g)。将反应容器用氢气(3X)冲洗，通过氢气球向反应烧瓶中充氢气，将溶液搅拌15小时(如果需要，加入更多的催化剂和氢气球充请气)。向反应中加入二氯甲烷(100mL)，通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液得到4.63g所需的胺(质谱M+1＝179，MP＝65.3-65.7℃)。步骤E：

将硫化物酰肼91(255mg，0.8mmol)、4-氨基-1-甲磺酰基哌啶(200mg，1.4eq)和NMP(0.3mL)的混合物在150℃下搅拌2天。将得到的混合物用甲醇(8mL)、乙酸乙酯(180mL)和水(65mL)稀释。分离有机层，用水(2×60mL)和盐水(1×60mL)洗涤，浓缩得到640mg粗产物。通过应用8％甲醇/二氯甲烷洗脱的制备性TLC纯化，得到游离的胺(180mg，M.P.＝180.0-194.0℃，(M+H)⁺＝449)。

向游离的胺(180mg，0.40mmol)在乙酸乙酯(150mL)、二氯甲烷(20mL)和甲醇(3mL)的溶液中加入1M HCl(在二乙醚中)(0.6mL，1.5当量)。将得到的混合物搅拌2小时，然后在减压下除去溶剂。在56℃、高真空下干燥残渣18小时，得到所需化合物(168mg，M.P.＝180.7-213.2℃，(M+H)⁺＝449)，其为灰白色粉末。实施例94 1，1-二氧-4-氨基硫吡喃步骤1

向1.0N NaOH(25mL，25mmol)和4-氨基四氢硫代吡喃(2.34g，20mmol)的0℃混合物中，逐滴加入苄基氯甲酸酯，3.14mL(22mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时，过滤，用水洗涤两次，己烷搅拌，过滤，真空炉中干燥，得到4.4g氨基甲酸酯，其为白色固体。(M+H)⁺252。步骤2

在1小时内，向氨基甲酸酯(40g，159mmol)在二氯甲烷的溶液中一次性加入3-氯过苯甲酸(75％，75g，320mmol)。将该反应混合物搅拌12小时，过滤，用10％亚硫酸钠溶液洗涤两次，10％碳酸氢钠溶液洗涤三次，用硫酸镁干燥，减压下浓缩，得到砜(37.5g)。M⁺＝283。步骤3

向砜(3.0g，10.6mmol)在50mL乙醇的混合物中加入5％碳上钯(300mg)。应用Paar氢化器在40psi下氢化反应混合物8小时。通过硅藻土过滤得到的溶液，浓缩滤液，得到1.5g胺。(M+H)⁺＝150。实施例95

将硫化物酰肼91(660mg，2.07mmol)、氨基砜(500mg，2当量)，和NMP(0.5mL)的混合物在150℃下搅拌3天。TLC显示仍有大量的起始原料存在，因此加入另外量的氨基-砜(200mg，1.34mmol)，再将混合物搅拌1天。通过TLC分析，已没有起始原料残留。将反应混合物冷却至室温，用甲醇(230mL)和二氯甲烷(150mL)稀释，加入10g硅胶。浓缩混合物，将残留物装载到快速柱(硅胶，20g)上，用1％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到623mg不纯的产物。将该混合物进一步在制备性TLC上纯化，用纯的乙酸乙酯洗脱，得到游离的胺(70mg，(M+H)⁺＝420)。将该游离的胺(70mg，0.17mmol)置于二氯甲烷(10mL)和甲醇(10mL)中，然后加入1M HCl(在二乙醚中)(0.3mL，1.5当量)。将得到的混合物搅拌5分钟，浓缩，在高真空、56℃下干燥，得到所需的产物(62mg，M.P.＝240.0-243.0℃)。实施例96步骤1

向硫化物酰肼91(291mg，0.913mmol)在甲醇(30mL)和乙酸(10mL)的溶液中，加入异丁醛(0.11mL，1.3当量)，随后加入氰基氢化硼钠(58mg，1当量)。将得到的混合物在室温下搅拌40分钟，然后用乙酸乙酯(175mL)稀释。分离有机层，用饱和碳酸氢钠溶液(4×60mL)洗涤直到碱性，用盐水(1×60mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到400mg粗产物。通过应用20％乙酸乙酯/己烷洗脱的制备性TLC纯化，得到N-烷基化的硫化物酰肼(319mg，(M+H)⁺＝375)，其为灰白色泡沫状粉末。步骤2

向N-烷基化的硫化物酰肼(319mg，0.85mmol)在四氢呋喃(15mL)的0℃溶液中，逐滴加入在水(15mL)中的过硫酸氢钾制剂(523mg，1当量)。在4小时内，将得到的混合物逐渐升温至室温，然后用乙酸乙酯(300mL)稀释。分离有机层，用水(4×150mL)和盐水(1×150mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到灰白色泡沫状的所需化合物(308mg，(M+H)⁺＝391)。步骤3

将N-烷基化的亚砜酰肼(300mg，0.768mmol)、4-氨基-四氢吡喃(233mg，3当量)和NMP的混合物在80℃下搅拌35分钟。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(90mL)稀释。分离有机层，用水(3×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到327mg粗产物。通过应用5％甲醇/二氯甲烷洗脱的制备性TLC纯化，得到游离的胺。然后将游离的碱溶解于二氯甲烷(20mL)中，在室温下加入1M HCl(在二乙醚中)(1.15mL，1.5当量)。将得到的混合物搅拌2分钟，然后在减压下除去溶剂。在高真空、56℃下干燥24小时，得到所需的产物(239mg，M.P.＝111.3-117.5℃，(M+H)⁺＝428)，其为灰白色粉末。实施例97

步骤1

将硫化物酰肼91(500mg，1.57mmol)和4-吗啉羰基氯(0.5mL，2.6当量)在吡啶(40mL)中的混合物在90C下搅拌7小时。在减压、50℃下除去吡啶，将残渣用乙酸乙酯(175mL)稀释。用HCl/盐水(3×75mL)和盐水(75mL)洗涤有机层，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，以定量产率得到N-酰基化的硫化物酰肼((M+H)⁺＝432)。步骤2

向N-酰基化的硫化物酰肼(0.785mmol)在四氢呋喃(15mL)的0℃溶液中，逐滴加入在水(15mL)中的过硫酸氢钾制剂(483mg，1当量)。在4小时内，将得到的溶液逐渐升温至室温，然后用乙酸乙酯(175mL)和水(50mL)稀释。分离有机层，用水(3×50mL)和盐水(1×50mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到泡沫状的N-酰基化的亚砜酰肼(209mg，(M+H)⁺＝448)。步骤3

将N-酰基化的亚砜酰肼(209mg，0.0468mmol)、4-氨基-四氢吡喃(142mg，3当量)和NMP的混合物在90℃下搅拌1小时，冷却至室温，用乙酸乙酯(35mL)和水(25mL)稀释。分离有机层，用水(2×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到293mg粗产物。通过应用5％甲醇/二氯甲烷洗脱的制备性TLC纯化，得到游离的胺(36mg，(M+H)⁺＝485)。然后将游离的碱溶解于二氯甲烷中，然后加入1.0M HCl(在二乙醚中)(0.11mL，1.5当量)，将得到的混合物搅拌2小时。在减压、55℃下除去溶剂，然后在高真空、56℃下干燥24小时，得到所需的化合物(38mg，(M+H)⁺＝485)，其为灰白色粉末。实施例98

步骤1

向硫化物酰肼91(500mg，1.57mmol)在乙腈(10mL)的溶液中，加入37％甲醛(水溶液)(0.65mL，5当量)，随后加入氰基硼钠化氢(155mg，1.6当量)。将得到的混合物搅拌15分钟，然后加入乙酸以维持中性pH值。将得到的混合物搅拌2小时，偶尔加入乙酸以维持中性pH值。用乙酸乙酯(300mL)和水(150mL)稀释反应混合物。分离有机层，用饱和碳酸氢钠(3×150mL)和盐水(1×150mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到651mg粗产物。通过应用15％乙酸乙酯/己烷洗脱的快速柱色谱纯化，得到N，N-二烷基化的硫化物酰肼(37mg，(M+H)⁺＝347)。步骤2

向N，N-二烷基化的硫化物酰肼(37mg，0.107mmol)在四氢呋喃(3mL)的0℃溶液中，逐滴加入在水(3mL)中的过硫酸氢钾制剂(66mg，1当量)。在4小时内，将得到的混合物逐渐升温至室温，在0℃下储存过夜，用乙酸乙酯(35mL)和水(20mL)稀释。分离有机层，用水(2×20mL)和盐水(1×20mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到N，N-二烷基化的亚砜酰肼(35mg，(M+H)⁺＝363)。步骤3

将N，N-二烷基化的亚砜酰肼(35mg，0.0965mmol)、4-氨基-四氢吡喃(39mg，4当量)和NMP的混合物在80℃下搅拌35分钟。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(35mL)和水(25mL)稀释。分离有机层，用水(2×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到39mg粗产物。通过应用5％甲醇/二氯甲烷洗脱的制备性TLC纯化，得到游离的胺(29mg)。然后将游离的碱溶解于二氯甲烷(5mL)中，加入1M HCl(在二乙醚中)(0.1mL，1.5当量)。将得到的混合物搅拌2分钟，然后在减压下除去溶剂。在高真空、56℃下干燥24小时，得到所需的产物(29mg，(M+H)⁺＝400)，其为灰白色粉末。实施例99

将砜89(354mg，0.823mmol)、4-氨基-四氢吡喃(250mg，3当量)和NMP(0.3mL)的混合物在110℃下搅拌35分钟。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(170mL)和水(70mL)稀释。分离有机层，用水(2×70mL)和盐水(1×70mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到393mg粗产物。通过应用65％乙酸乙酯/己烷洗脱的制备性TLC纯化，得到游离的胺(261mg，(M+H)⁺＝451，M.P.＝281.7-283.4℃)。将该胺溶解于二氯甲烷(15mL)和甲醇(2mL)中，加入1M HCl(在二乙醚中)(0.8mL，1.5eq)。将得到的混合物搅拌1小时，然后在减压下除去溶剂。在高真空、56℃下干燥该物质，得到所需的产物(252mg，(M+H)⁺＝451，M.P.＝150.0-154.0℃)。实施例100步骤1

向苄基硫化物(5g，12.1mmol)在DMF(50mL)的溶液中加入碳酸钾(1.05当量，1.76g)，随后加入2-碘乙醇(1.42mL，1.5当量)，将得到的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用乙酸乙酯(300mL)和水(150mL)稀释。分离有机层，在不加热下浓缩至体积大约150mL。通过真空过滤收集白色固体，在玻璃料上空气干燥2小时。在真空下进一步干燥固体，得到N-烷基化羟基乙基硫化物(4.139g，M.P.＝155.6-156.2℃，(M+H)⁺＝424)。步骤2

向N-烷基化羟基乙基硫化物(4.13g，9.06mmol)在四氢呋喃(200mL)的0℃溶液中，逐滴加入过硫酸氢钾制剂(11.13g，2当量)在水(200mL)中的溶液。加入完成后，除去冰浴，将得到的混合物在室温下搅拌过夜。将该反应混合物倒入乙酸乙酯(700mL)和水(400mL)的混合物中。分离有机层，用水(7×500mL)和盐水(5×500mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到2.2gN-烷基化羟基乙基砜。当通过硫酸镁干燥和在分液漏斗中时，该化合物的一些已经被结晶。合并水层，进一步用二氯甲烷(3×300mL)萃取，加入来自第一有机相的硫酸镁干燥的粉末，将该稀浆搅拌过夜。过滤并浓缩混合物，得到另外2g所需产物(M.P.＝197.1-198.7℃，(M+H)⁺＝456)。步骤3

将N-烷基化的羟基乙基砜(1g，2.19mmol)、4氨基-四氢硫代吡喃(385mg，1.5当量)和NMP(0.5mL)的混合物在100℃下搅拌2.5小时。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(50mL)和水(40mL)稀释，搅拌20分钟。分离有机层，用水(2×45mL)和盐水(1×45mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到1g粗产物。通过应用20％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱的硅胶快速柱色谱纯化，得到所需化合物(519mg，M.P.＝195.1-195.4C，(M+H)+＝417)，其为灰白色粉末。步骤4

向该硫化物游离胺(500mg，1.2mmol)在二氯甲烷(50mL)的0℃溶液中，加入MCPBA(724mg，3.5eq)在二氯甲烷(50mL)中的溶液。将得到的混合物逐渐升温至室温。将该反应混合物在减压、55℃下浓缩，得到的残留物用乙酸乙酯(180mL)和饱和碳酸氢钠溶液(60mL)稀释。分离有机层，用饱和碳酸氢钠溶液(3×60mL)和盐水(1×60mL)洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到528mg粗制的砜游离胺。通过应用1％甲醇/二氯甲烷至2％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱的硅胶快速柱色谱洗脱，得到砜游离胺(279mg，M.P.＝155.0-155.9℃，(M+H)⁺＝449)，其为灰白色粉末。将该游离胺(278mg，0.62mmol)置于乙酸乙酯(50mL)中，然后加入1M HCl(在二乙醚中)(1mL，1.5eq)。将得到的混合物搅拌1小时，然后在减压下除去溶剂。在高真空、56℃下干燥残渣，得到所需的产物(242mg，M.P.＝182.0-186.0℃，(M+H)⁺＝449)，其为灰白色粉末。实施例101

在室温下，将硝酸银(1.10g，6.50mmole)和氢氧化钠(0.52g，13.0mmole)在5mL水中的混合物搅拌15分钟。真空过滤收集合成的银氧化物，用水洗涤，真空干燥，然后加入反式-氨基环己醇加成物38(0.500g，1.30mmole)在2mL四氢呋喃中的溶液，再向其中加入甲基碘化物(0.16mL，2.60mmole)。将反应混合液在40℃搅拌过夜，然后升温到60℃保持5天，在60℃的第一天后再加入甲基碘化物(1.30mmole，0.08mL)。

通过快速色谱(10-50％丙酮/己烷)纯化，产生前面所示的所需产物，以及N-甲基化的异构体。将每种产物分别置于甲醇中，用盐酸(1.0M/Et₂O，1.0当量)处理，重蒸发至干燥，然后用乙醚洗涤，过滤，干燥得到0.157g所需O-甲基化产物(mp189.0-192.0℃)和0.069g N-甲基化产物(mp130.3-130.5℃)。实施例102步骤A：制备4-乙硫烷基-丁-2-酮：

向5℃的乙硫醇(6.2g，7.4mL，0.1mol)溶液、3滴DBU(在50mL THF中)中滴加入甲基乙烯基酮(7.3g，8.45mL，0.105mol)。将混合液在环境温度下搅拌过夜。然后在真空下浓缩混合物，得到13.6g所需的酮。步骤B：4-乙硫烷基-丁-2-酮肟的制备：将4-乙硫烷基-丁-2-酮(13.6g，0.1mol)，醋酸钠三水合物(68g，0.5mol)和羟基胺盐酸盐(34.7g，0.5mol)在500mL乙醇中的混合液加热回流3小时。将混合液冷却，真空浓缩。残留物用水稀释，用乙酸乙酯(2×200mol)萃取。合并有机层，用盐水洗涤，干燥，过滤，真空浓缩，得到14.7g肟。步骤C：2-氨基-4-乙硫烷基-丁烷的制备：

向氢化铝锂(1M，120mL，0.12mol)在四氢呋喃中的溶液中滴加入4-乙硫烷基-丁-2-酮肟(6g，0.04mol)(在30mL四氢呋喃中)。全部滴加完后，将混合液在回流下搅拌4小时。将混悬液用冰水浴冷却，滴加入水(4.6mL)和20mL四氢呋喃，然后加入氢氧化钠水溶液(15％，4.6mL)。然后再加入水(13.8mL)，将反应混合液搅拌30分钟，通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯(300mL)漂洗。干燥滤液(盐水，硫酸镁)，在减压下蒸发，得到3.43g 2-氨基-4-乙硫烷基-丁烷(质谱M+1＝134)。步骤D：

将砜1(0.55g，1.6mmol)和2-氨基-4-乙硫烷基-丁烷(0.63g，4.8mmol)在10mL四氢呋喃中的溶液回流1小时。将溶液冷却，真空浓缩，产物用硅胶经5％乙酸乙酯(在二氯甲烷中)洗脱通过柱色谱纯化，得到421mg102A的外消旋混合物(质谱M+1＝403)，和31mg氮丙啶化合物102B(质谱M+1＝401，MP＝160-167℃)。实施例103

本实施例描述了测定体外抑制p-38(MAP)激酶的分析方案。

本发明的化合物在体外抑制p-38 MAP激酶的活性，通过测定p-38激酶将γ-³³p-ATP中的γ-磷酸转移给髓鞘碱性蛋白(MBP)而确定，使用对Ahn，N.G.；等J.Biol.Chem.Vol.266(7)，4220-4227，(1991)中介绍的方法进行微小改进的方法。

重组p38 MAP激酶的磷酸化型用SEK-1和MEKK在大肠杆菌中表达，然后用镍柱通过亲合色谱纯化。

磷酸化的p38 MAP激酶在激酶缓冲液(20mM 3-(N-吗啉代)丙磺酸，pH7.2，25mM β-磷酸甘油，5mM乙二醇-双(β-氨基乙醚)-N，N，N′，N′-四乙酸，1mM钒酸钠，1mM二硫苏糖醇，40mM氯化镁)中稀释。加入溶解于DMSO的实验化合物或仅DMSO(对照)，样品在30℃保温10分钟。通过加入含有MBP和γ-³³p-ATP的底物混合物引发激酶反应。在30℃下继续培养20分钟后，加入0.75％磷酸终止该反应。利用磷酸纤维素膜(Millipore，Bedford，MA)从残余γ-³³p-ATP分离出磷酸化MBP，并且利用闪烁计数器定量测定(Packard，Meriden，CT)。

本发明的化合物在本试验中具有活性。一些木发明化合物的p-38抑制活性(表示为IC₅₀，导致被检测的p-38酶50％抑制时的浓度)为：

CPD#(来自表1)	IC50，M
		1	2.05×10-8
2	4.19×10-8
		11	4.80×10-9
24	3.55×10-8
		29	4.15×10-8
37	3.05×10-8
		38	6.2×10-9
41	5.1×10-9
		44	7.8×10-9
63	7.30×10-9
		73	2.09×10-8
126	3.00×10-10
		128	6.00×10-10
136	8.20×10-9

实施例104

本实施例描述了评价在THP1细胞中对LPS诱导的TNF-α的产生的抑制作用的体外分析实验。

利用Blifeld，等Transplantation，51(2)，498-503(1991)所述方法的小改进方法，测定本发明的化合物抑制TNF-α释放的能力。

(a)TNF生物合成的诱导

使THP-1细胞混悬于培养基[RPMI(Gibco-BRL，Gailthersburg，MD)含有15％胎牛血清，0.02mM 2-巯基乙醇]，达到2.5×10⁶细胞/ml的浓度，随后铺板在96孔平板中(各孔中含0.2ml等份试样)。将试验化合物溶于DMSO，此后用培养基稀释，使DMSO的终浓度为5％。向各孔中加入25μl等份的试验溶液或只含有DMSO(对照)的培养基。细胞在37℃下培养30分钟。向孔中加入LPS(Sigma，St.Louis，MO)达到终浓度为0.5μg/ml，并且令细胞继续培养2小时。培养期结束后，收集培养上清液，利用下面所述的ELISA试验测定TNF-α存在的量。

(b)ELISA试验：

通过Reimund，J.M.等GUT.Vol.39(5)，684-689(1996)所述的特异性捕捉ELISA试验、利用两种抗TNF-α抗体(2TNF-H12和2TNF-H34)测定人TNF-α存在的量。

聚苯乙烯96孔平板用50μl/孔的存在于PBS中的抗体2TNF-H12(10μg/ml)包被，并且在4℃的潮湿培养箱内培养过夜。平板用PBS洗涤，进而用存在于PBS中的5％脱脂奶粉室温下封被1小时，后用存在于PBS中的0.1％BSA(牛血清白蛋白)洗涤。

TNF标准品是由人重组TNF-α(R & D Systems，Minneapolis，MN)的储备溶液制备。标准品在该试验中的浓度从10ng/ml开始，随后进行6次半对数连续稀释。

25μl等份的上述培养上清液或TNF标准品或仅仅是培养基(对照)与25μl等份的生物素化单克隆抗体2TNF-H34(2μg/ml，存在于含0.1％BSA的PBS中)混合，此后加入到各孔中。室温下培养样本2小时同时轻轻振摇，随后用含0.1％BSA的PBS洗涤3次。向各孔中加入50μl的过氧化酶-链霉抗生物素(Zymed，S.San Francisco，CA)溶液，其中含有在PBS中的0.416μg/ml的过氧化物酶-链霉抗生物素和0.1％BSA。室温下样本继续培养1小时，随后用含0.1％BSA的PBS洗涤4次。向各孔中加入50μl的O-苯二胺溶液(1ug/ml O-苯二胺和0.03％过氧化氢，存在于0.2M柠檬酸盐缓冲液pH4.5中)，并且室温下将样本在黑暗条件下培养30分钟。分别读取样品和参照物在450nm和650nm下的光密度。利用在450nm下的光密度对所用浓度的图测定TNF-α的水平。

IC₅₀值被定义为对应于在450nm的吸光度的半-最大值降低的试验化合物的浓度。实施例105

该实施例描述了评价小鼠(或大鼠)中LPS-诱导的TNF-α产生的抑制作用的体内分析试验。

利用Zanetti.等J.Immunol.，148，1890，(1992)和Sekut等J.Lab.Clin.Med.，124，813，(1994)所述方法的微小改进方法，测定本发明的化合物体内抑制TNF-α释放的能力。

体重18-21g的雌性BALB/c小鼠(ChaRles River，Hollister，CA)适应环境1周。包括8只小鼠的各组口服施用混悬于或溶解于含有0.9％氯化钠、0.5％羧甲基纤维素钠、0.4％吐温80、0.9％苄醇(CMC载体)的水性载体中的实验化合物或者只施用载体(对照组)。30分钟后，给小鼠腹膜内注射20μg LPS(Sigma，St.Louis，MO)。1.5小时后，通过吸入CO₂处死小鼠，并通过心穿刺术采集血液。在15,600Xg下离心5分钟使血液沉降，把血清转移到干净的试管中且在-20℃下冷冻，直至通过ELISA试验按照制造商的方案测定TNF-αα(Biosource International，Camarillo，CA，USA)。

Claims (29)

1.下式的化合物：

或其药用盐或前药，

其中

R¹为氢或烷基；

R²为取代的环烷基，杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基，杂取代的环烷基-烷基，杂环基，杂环基螺环烷基，芳烷氧基，烷氧基，亚烷基-S(O)_n-烷基(其中n为1或2)，或SO₂Ar²；

R³为氢，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，酰基氨基，-NR^a-C(＝O)-R^b(其中R^a为氢或烷基，R^b为杂环基或杂烷基)，烷基，环烷基，芳基，芳烷基，卤代烷基，杂烷基，氰基烷基，-亚烷基-C(O)-R(其中R为氢，烷基，羟基，烷氧基，氨基，单烷基氨基或二烷基氨基)酰基，或苯二甲酰亚氨基烷基；以及每个Ar¹和Ar²独立地为芳基。

2.按照权利要求1的化合物，其中Ar¹为任选取代的苯基。

3.按照权利要求2的化合物，其中Ar¹为独立地被一个或两个，优选一个卤素、烷基或甲氧基基团取代的苯基基团。

4.按照权利要求3的化合物，其中Ar¹为2-氯苯基，2-氟苯基，2-甲基苯基，或2-甲氧基苯基。

5.按照权利要求4的下式化合物：

6.按照权利要求1-5中任何一项的化合物，其中R³为氢，氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，酰基氨基，-NR^a-C(＝O)-R^b(其中R^a为氢或烷基，和R^b为杂环基或杂烷基)，烷基，卤代烷基，环烷基，氰基甲基，杂烷基，芳基，芳烷基，或-亚烷基-C(O)-R(如权利要求1所定义)。

7.按照权利要求6的化合物，其中R³为氢，氨基，二甲基氨基，异丙基氨基，(吗啉代甲酰基)氨基，甲基，2，2，2-三氟乙基，环丙基，氰基甲基，2-羟基乙基，4-氟苯基，苄基，羧基甲基或甲氧基羰基甲基，乙基，2-氟乙基，2-羟基-2-甲基丙基，或2-苯二甲酰亚氨基丙基。

8.按照权利要求7的化合物，其中R³为氢。

9.按照权利要求7的化合物，其中R³为甲基。

10.按照权利要求1-9中任何一项的化合物，其中R¹为氢。

11.按照权利要求1-9中任何一项的化合物，其中R¹为甲基。

12.按照权利要求1-11中任何一项的化合物，其中R²为杂取代的环烷基，杂烷基取代的环烷基，芳烷氧基，烷氧基，烷基磺酰基-烷基，杂环基，或杂取代的环烷基-烷基。

13.按照权利要求12的化合物，其中R²为杂取代的环烷基或杂环基。

14.按照权利要求13的化合物，其中R²为4-杂取代的环己基。

15.按照权利要求14的化合物，其中R²为4-羟基环己基。

16.按照权利要求13的化合物，其中R²为杂环基。

17.按照权利要求16的化合物，其中R²为取代的哌啶基基团。

18.按照权利要求17的化合物，其中R²为N-甲磺酰基-哌啶-4-基。

19.按照权利要求16的化合物，其中R²为4-四氢吡喃基基团。

20.按照权利要求12的化合物，其中R²为烷基磺酰基烷基。

21.按照权利要求20的化合物，其中R²为选自(1，1-二甲基-2-甲基磺酰基)乙基和(1，1-二甲基-3-甲基磺酰基)丙基的基团。

22.一种药物组合物，其含有药用赋型剂和权利要求1-20中任何一项要求的化合物。

23.一种制备权利要求1的化合物的方法，包括下列步骤：在足以制备式I化合物的条件下，

将式Ig化合物

与式R¹R²NH的胺接触，

其中R¹，R²，R³和Ar¹如权利要求1所定义；

n为0-2的整数，优选1或2；和

R⁶为烷基基团。

24.按照权利要求23的方法制备的化合物。

25.作为治疗活性剂的权利要求1-21任何一项所要求保护的化合物。

26.一种治疗p38介导的疾病的方法，包括给需要该治疗的患者施用有效量的权利要求1的化合物。

27.一种用于制备治疗p38介导的疾病的药物的方法。

28.按照权利要求26或27的方法，其中所述p38介导的疾病选自关节炎、局限性回肠炎、阿尔茨海默氏病、过敏性肠综合症、成人呼吸窘迫综合症或慢性阻塞性肺病。

29.前面所述的本发明。