KR100571339B1 - 세포증식 억제제로서의 7-옥소 피리도피리미딘 - Google Patents

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 및 관절염, 크론스병, 알츠하이머병,민감성 장 질환, 성인 호흡 곤란 증후군 및 만성 폐색성 폐질환으로 구성된 군중에서 선택되는 질환을 치료하기 위한 상기 화합물의 용도에 관한 것이다:

화학식 I

상기 식에서

R¹은 수소 또는 알킬이고;

R²는 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬로 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬-알릴, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴 스피로 사이클로알킬, 아르알콕시, 알콕시, -알킬렌-S(O)_n-알킬(여기서, n은 1 또는 2이다) 또는 -SO₂Ar²이고;

R³은 수소, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노, 아실아미노, -NR^a-C(=O)-R^b(여기서, R^a는 수소 또는 알킬이고, R^b는 헤테로사이클릴 또는 헤테로알킬이다), 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 아르알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 시아노알킬,-알킬렌-C(O)-R(여기서, R은 수소, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다), 아실 또는 프탈이미도알킬이고;

Ar¹ 및 Ar²는 각각 독립적으로 아릴이다.

Description

세포증식 억제제로서의 7-옥소 피리도피리미딘{7-OXO PYRIDOPYRIMIDINES AS INHIBITORS OF A CELLULAR PROLIFERATION}

본 발명은 7-옥소-피리도피리미딘에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 2,6-이치환된 7-옥소-피리도[2,3-d]피리미딘, 이들의 제조방법, 이들을 포함하는 약학 제제 및 이들을 사용하는 방법을 제공한다.

미토젠 활성화 단백질 키나제(MAP)는 이중 인산화에 의해 이들의 기질을 활성화하는 프롤린-유도 세린/트레오닌 키나제의 부류이다. 키나제는 영양 및 삼투 스트레스, UV광, 성장 인자, 내독소 및 염증성 사이토카인을 비롯한 다양한 신호에 의해 활성화된다. MAP 키나제의 그룹으로는 다양한 하부형태(isoform)(예를 들어, p38α, p39β, p38γ 및 p38δ)를 비롯한 p38 키나제 그룹을 들 수 있다. p38 키나제는 전사 인자 및 기타 키나제의 인산화 및 활성화에 기여하고, 물리적 및 화학적 스트레스, 전-염증성 사이토카인 및 세균성 지질다당류에 의해 활성화된다.

보다 중요하게는, p38 인산화의 생성물은 TNF와 IL-1을 비롯한 염증성 사이토카인, 및 사이클로옥시게나제-2의 생성을 매개하는 것으로 보인다. 이러한 사이토카인 각각은 다양한 질환의 상태 및 증상과 관련된다. 예를 들어, TNF-α는 활성화 단핵구 및 대식세포에 의해 주로 생성되는 사이토카인이다. 이들의 과도하거나 비통제된 생성은 류마티스성 관절염의 발병기전에 있어서 원인 역할을 함으로써 영향을 미친다. 보다 최근에는, TNF 생성의 억제가 염증, 염증성 장 질환, 다발성 경화증 및 천식의 치료에 광범위한 용도를 보유하는 것을 보여 왔다.

또한, TNF는 이들중에서 바이러스 감염, 예를 들어 HIV, 독감 바이러스, 및 단순 포진 바이러스, 예를 들어 단순 포진 바이러스 타입-1(HSV-1) , 단순 포진 바이러스 타입-2(HSV-2), 시토메갈로바이러스(CMV), 바리셀라-조스터 바이러스(VZV), 엡스타인-바 바이러스(Epstein Barr virus), 인간 포진 바이러스-6(HHV-6), 인간 포진 바이러스-7(HHV-7), 인간 포진 바이러스-8(HHV-8), 의사광견병 및 후각기관염에 영향을 미친다.

유사하게, IL-1은 활성화 단핵구 및 대식세포에 의해 생성되며, 류마티스성 관절염, 고열 및 골 흡수의 감소를 비롯한 다수의 병리학적 반응에 주요한 역할을 한다.

추가로, p38의 병발은 발작, 알츠하이머병, 골관절염, 폐손상, 패혈성 쇼크, 혈관생성, 피부염, 건선 및 아토피성 피부염에 관련된다(문헌["J. Exp. Opin. Ther. Patents", 2000, 10(1)] 참조).

특정 피리도[2,3-d]피리미딘이 단백질 티로신 키나제 매개 세포 증식의 억제제로서 개시되어 왔다(국제특허 공개공보 제 WO 96/34867 호 참조).

p38 키나제의 억제에 의한 전술한 사이토카인의 억제는 이러한 다수의 질병 상태를 제어하고, 감소하고, 경감하는 장점을 갖는다.

본 발명의 제 1 실시양태는 하기 화학식 I에 따르는 화합물, 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들의 프로드러그를 제공한다:

상기 식에서

R¹은 수소 또는 알킬이고;

R²는 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬로 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴 스피로 사이클로알킬, 아르알콕시, 알콕시, 알킬-S(O)_n-알킬렌(여기서, n은 1 또는 2이다) 또는 SO₂Ar²이고;

R³은 수소, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노, 아실아미노, -NR^a-C(=O)-R^b(여기서, R^a는 수소 또는 알킬이고, R^b는 헤테로사이클릴 또는 헤테로알킬이다), 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 아르알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 시아노알킬, -알킬렌-C(O)-R(여기서, R은 수소, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다), 아실 또는 프탈이미도알킬이고;

AR¹ 및 Ar²는 각각 독립적으로 아릴이다.

화학식 I의 화합물 및 이들의 전술한 염은 단백질 키나제의 억제제이고 생체내에서 p38에 대해 효과적인 활성을 나타낸다. 따라서, 상기 화합물은 TNF 및 IL-1과 같은 전-염증성 사이토카인에 의해 매개되는 질환의 치료를 위해 사용될 수 있다.

따라서, 본 발명의 다른 양태는 치료효과량의 화학식 I의 화합물을 p38 매개 질환 또는 증상의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하는, p38 매개 질환 또는 증상의 치료방법을 제공한다.

본 발명의 다른 양태는 전술한 화합물의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 양태는 p38 매개 질환 및 증상의 치료에 유용한 약제의 제조방법을 제공한다.

다른 언급이 없는 한, 본 명세서 및 청구의 범위에서 사용된 하기 용어는 하기와 같은 의미를 지닌다:

"아실"이란, 라디칼 -C(O)R(여기서, R은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬, 페닐 또는 페닐알킬이며, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬 및 페닐알킬은 전술한 바와 같다)을 의미한다. 대표적인 예는 폼일, 아세틸, 사이클로헥실카보닐, 사이클로헥실메틸카보닐, 벤조일, 벤질카보닐 등을 들 수 있지만 이로서 한정되는 것은 아니다.

"아실아미노"란, 라디칼 -NR'C(O)R(여기서, R'는 수소 또는 알킬이고, R은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬, 페닐 또는 페닐알킬이며, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬 및 페닐알킬은 전술한 바와 같다)을 의미한다. 이들의 대표적인 예로는 폼일아미노, 아세틸아미노, 사이클로헥실카보닐아미노, 사이클로헥실메틸-카보닐아미노, 벤조일아미노, 벤질카보닐아미노 등을 들 수 있지만, 이로서 한정되는 것은 아니다.

"알콕시"란, 라디칼 -OR(여기서, R은 전술한 바와 같은 알킬이다)을 의미하며, 예를 들면, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시 등을 들 수 있다.

"알킬"이란, 탄소수 1 내지 6의 선형 포화 일가 탄화수소 라디칼 또는 탄소수 3 내지 6의 분지형 포화 일가 탄화수소 라디칼을 의미하며, 예를 들면, 메틸, 에틸, 프로필, 2-프로필, n-부틸, 아이소-부틸, 3급-부틸, 펜틸 등을 들 수 있다.

"알킬렌"이란, 탄소수 1 내지 6의 선형 포화 이가 탄화수소 라디칼 또는 탄소수 3 내지 6의 분지형 포화 이가 탄화수소 라디칼을 의미하며, 예를 들면, 메틸렌, 에틸렌, 2,2-다이메틸에틸렌, 프로필렌, 2-메틸프로필렌, 부틸렌, 펜틸렌 등을 들 수 있다.

"알킬설포닐-알킬"이란, 라디칼 R^a-S(O)₂-R^b-(여기서, R^a 는 알킬이고 R^b는 전술한 바와 같은 알킬렌이다)를 의미한다.

"알킬티오"란, 라디칼 -SR(여기서, R은 전술한 바와 같은 알킬이다)을 의미하며, 예를 들면, 메틸티오, 에틸티오, 프로필티오, 부틸티오 등을 들 수 있다.

"아르알콕시"란, 라디칼 -O-R^a-R^b(여기서, R^a는 알킬렌이고 R^b는 전술한 바와 같은 아릴이다)를 의미한다.

"아릴"이란, 일가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 탄화수소 라디칼이며, 이들은 알킬, 하이드록시, 알콕시, 할로알킬, 할로알콕시, 헤테로알킬, 할로, 니트로, 시아노, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노, 메틸렌다이옥시, 에틸렌다이옥시 및 아실로 구성된 군중에서 바람직하게 선택된 하나 이상의 치환체, 바람직하게는 1개, 2개 또는 3개의 치환체에 의해 임의로 치환된다. 보다 구체적으로 아릴이라는 용어는 페닐, 클로로페닐, 메톡시페닐, 1-나프틸, 2-나프틸 및 이들의 유도체를 포함하지만, 이로서 한정되는 것은 아니다.

"사이클로알킬"이란, 고리 탄소수 3 내지 7의 포화 일가 사이클릭 탄화수소 라디칼을 의미하며, 예를 들면, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로헥실, 4-메틸사이클로헥실 등을 들 수 있다.

"사이클로알킬알킬"이란, 라디칼 -R^aR^b(여기서, R^a는 알킬렌기이고 R^b는 전술한 바와 같은 사이클로알킬기이다)를 의미하며, 예를 들면 사이클로헥실메틸 등을 들 수 있다.

"치환된 사이클로알킬"이란, 하나, 2개 또는 3개(바람직하게는 하나)의 고리 수소 원자가 시아노 또는 -Y-C(O)R(여기서 Y는 존재하지 않거나 알킬렌기이고, R은 수소, 알킬, 할로알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노 또는 임의로 치환된 페닐이다)에 의해 독립적으로 치환된 전술한 바와 같은 사이클로알킬 라디칼을 의미한다.

"다이알킬아미노"란, 라디칼 -NRR'(여기서, R 및 R'는 독립적으로 전술한 바와 같은 알킬, 하이드록시알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬기이다)를 의미한다. 대표적인 예로는 다이메틸아미노, 메틸에틸아미노, 다이(1-메틸에틸)아미노, (메틸)(하이드록시메틸)아미노, (사이클로헥실)(메틸)아미노, (사이클로헥실)(에틸)아미노, (사이클로헥실)(프로필)아미노, (사이클로헥실메틸)(메틸)아미노, (사이클로헥실메틸)(에틸)아미노 등을 들 수 있지만, 이로서 한정되는 것은 아니다.

"할로"란, 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도이고, 바람직하게는 플루오로 및 클로로이다.

"할로알킬"이란, 하나 이상의 동일하거나 상이한 할로 원자로 치환된 알킬을 의미하며, 예를 들어 -CH₂Cl, -CF₃, -CH₂CF₃, -CH₂CCl₃ 등을 들 수 있다.

"헤테로알킬"이란, -OR^a, -NR^bR^c 및 -S(O)_nR^d(여기서, n은 0 내지 2의 정수이다)로 구성된 군중에서 독립적으로 선택된 치환체에 의해 하나, 2개 또는 3개의 수소 원자가 치환된 전술한 바와 같은 알킬 라디칼로서, 단 헤테로알킬 라디칼의 결합 지점이 탄소 원자이어야 하고, 여기서 R^a는 수소, 아실, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고; R^b 및 R^c는 각각 독립적으로 수소, 아실, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고; n이 0인 경우, R^d는 수소, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고, n이 1 또는 2인 경우, R^d는 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬, 아미노, 아실아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다. 대표적인 예로는 2-하이드록시에틸, 3-하이드록시프로필, 2-하이드록시-1-하이드록시메틸에틸, 2,3-다이하이드록시프로필, 1-하이드록시메틸에틸, 3-하이드록시부틸, 2,3-다이하이드록시부틸, 2-하이드록시-1-메틸프로필, 2-아미노에틸, 3-아미노프로필, 2-메틸설포닐에틸, 아미노설포닐메틸, 아미노설포닐에틸, 아미노설포닐프로필, 메틸아미노설포닐메틸, 메틸아미노설포닐에틸, 메틸아미노설포닐프로필 등을 들 수 있지만, 이로서 한정되는 것은 아니다.

"헤테로알킬치환된 사이클로알킬"이란, 사이클로알킬 라디칼내 하나, 2개 또는 3개의 수소 원자가 헤테로알킬기로 치환되는 전술한 바와 같은 사이클로알킬 라디칼을 의미하며, 단 헤테로알킬 라디칼이 탄소-탄소 결합을 통해 사이클로알킬 라디칼에 결합되어야 한다. 대표적인 예로는 1-하이드록시메틸사이클로펜틸, 2-하이드록시메틸사이클로헥실 등을 들 수 있지만, 이로서 한정되는 것은 아니다.

"헤테로치환된 사이클로알킬"이란, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 아실아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노, 옥소(C=O), 이미노, 하이드록스이미노(=NOH), NR'SO₂R^d(여기서, R'는 수소 또는 알킬이고, R^d는 알킬, 사이클로알킬, 아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다), -X-C(O)R(여기서 X는 O 또는 NR'이고, R은 수소, 알킬, 할로알킬, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노 또는 임의로 치환된 페닐이고, R'는 H 또는 알킬이다), 또는 -S(O)_nR(여기서, n은 0 내지 2의 정수이다)(여기서, n이 0이면, R은 수소, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고, n이 1 또는 2이면, R은 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬, 아미노, 아실아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다)로 구성된 군중에서 독립적으로 선택된 치환체에 의해 사이클로알킬 라디칼내 하나, 2개 또는 3개의 수소 원자가 치환된 전술한 바와 같은 사이클로알킬 라디칼을 의미한다. 대표적인 예로는 2-, 3- 또는 4-하이드록시사이클로헥실, 2-, 3- 또는 4-아미노사이클로헥실, 2-, 3- 또는 4-메탄설폰아미도-사이클로헥실 등, 바람직하게는 4-하이드록시사이클로헥실, 2-아미노사이클로헥실 또는 4-메탄설폰아미도-사이클로헥실을 들 수 있으나, 이로서 한정되는 것은 아니다.

"헤테로치환된 사이클로알킬-알킬"이란, 라디칼 R^aR^b-(여기서, R^a는 헤테로치환된 사이클로알킬 라디칼이고, R^b는 알킬렌 라디칼이다)를 의미한다.

"헤테로사이클릴"이란, 고리 원자가 3 내지 8인 포화 또는 불포화 비방향족 사이클릭 라디칼로서, 여기서 하나 또는 2개의 고리 원자는 N, O 또는 S(O)_n(여기서, n은 0 내지 2의 정수이다)중에서 선택된 헤테로원자이고, 나머지 고리 원자는 C이며, 여기서 하나 또는 2개의 C 원자는 카보닐기에 의해 임의로 치환될 수 있다. 헤테로사이클릴 고리는 알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 할로, 니트로, 시아노, 시아노알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노, 아르알킬, -(X)_n-C(O)R(여기서, X는 O 또는 NR'이고, n은 0 또는 1이고, R은 수소, 알킬, 할로알킬, 하이드록시(n이 0인 경우), 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노 또는 임의로 치환된 페닐이고, R'는 H 또는 알킬이다), -알킬렌-C(O)R(여기서, R은 OR 또는 NR'R"이고, 이 때 R은 수소, 알킬 또는 할로알킬이고, R' 및 R"는 독립적으로 수소 또는 알킬이거나, R' 및 R"은 질소와 함께 서로 결합하여 고리를 형성한다), 또는 -S(O)_nR(여기서, n은 0 내지 2의 정수이다)(여기서, n이 0이면, R은 수소, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고, n이 1 또는 2이면, R은 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬, 아미노, 아실아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다)중에서 선택된 하나, 2개 또는 3개의 치환체에 의해 독립적으로 임의로 치환될 수 있다. 보다 구체적으로, 헤테로사이클릴이라는 용어는 테트라하이드로피라닐, 피페리디노, N-메틸피페리딘-3-일, 피페라지노, N-메틸피롤리딘-3-일, 3-피롤리디노, 모르폴리노, 티오모르폴리노, 티오모르폴리노-1-옥사이드, 티오모르폴리노-1,1-다이옥사이드, 피롤리닐, 이미다졸리닐, N-메탄설포닐피페리딘-4-일 및 이들의 유도체를 포함하지만, 이로서 한정되는 것은 아니다.

추가의 의미에서, "헤테로사이클릴"이라는 용어는 상기 구체화된 바와 동일한 의미를 갖지만, 추가로, 헤테로사이클릴 고리는 4개의 치환체로 치환될 수 있으며, 여기서 치환체는 상기 구체화된 치환체일 수 있다. 추가로, 치환체 -알킬렌-C(O)R에서 R은 NR'R"를 의미할 수도 있으며, 여기서 R' 및 R"는 질소 원자와 함께 서로 결합되어 고리를 형성할 수 있고, 치환체 -S(O)_nR(여기서, n는 1 또는 2이다)에서, R은 할로알킬의 의미를 가질 수도 있다. 보다 구체적으로 헤테로사이클릴이라는 용어는, 전술한 바와 같은 의미외에도 테트라하이드로티오피라닐, 테트라하이드로티오퓨릴 및 테트라하이드로퓨릴, 보다 더욱 구체적으로 피페리딘-4-일, 피페리딘-1-일, 테트라하이드로피란-4-일, 피롤리딘-3-일, 모르폴리노, 피페르진-1-일, 테트라하이드로티오피란-4-일, 테트라하이드로티오피란-3-일 또는 테트라하이드로푸르-3-일, 바람직하게는 피페리딘-4-일을 의미하고, 여기서, 전술한 바와 같이 구체적으로 지칭되는 헤테로사이클릴 치환체는 그 자체로 전술한 바와 같이 치환될 수 있고, 바람직하게는 하기 표 1 및 구체적인 실시예에서 예시하는 임의의 구체적인 치환체에 의해 치환될 수 있다.

"헤테로사이클릴알킬"이란, 라디칼 -R^aR^b(여기서, R^a는 알킬렌기이고 R^b는 전술한 바와 같은 헤테로사이클릴기이고, 단 R^b가 헤테로사이클릴 고리의 탄소 원자를 통해 R^a에 결합된다)를 의미하며, 예를 들면 테트라하이드로피란-2-일메틸, 2- 또는 3-피페리디닐메틸 등을 들 수 있다.

"헤테로사이클릴 스피로 사이클로알킬"이란, 사이클로알킬 고리 및 헤테로사이클릭 고리로 구성된 스피로 라디칼로서, 여기서 각각의 고리는 5 내지 8개의 고리 원자를 갖고 2개의 고리는 공통적으로 하나의 탄소 원자를 공유하며, 단 헤테로사이클릴 스피로 사이클로알킬 라디칼의 결합 지점이 사이클로알킬 고리를 통해 결합된 스피로 라디칼을 의미한다. 스피로 라디칼은 사이클로알킬 라디칼의 동일한 탄소 원자로부터 2개의 수소 원자가 전술한 바와 같은 헤테로사이클릴기로 치환되는 경우 형성되고, 알킬, 하이드록시, 하이드록시알킬 또는 옥소에 의해 임의로 치환될 수 있다. 그의 예로는 1,4-다이옥사스피로[4.5]데칸-8-일, 1,3-다이아자스피로[4.5]데칸-8-일, 2,4-다이온-1,3-다이아자-스피로[4.5]데칸-8-일, 1,5-다이옥사-스피로[5.5]운데칸-9-일, (3-하이드록시메틸-3-메틸)-1,5-다이옥사-스피로[5.5]운데칸-9-일 등, 바람직하게는 1,4-다이옥사스피로[4.5]데칸-8-일 및 1,5-다이옥사-스피로[5.5]운데칸-9-일을 들 수 있지만, 이로서 한정되는 것은 아니다.

"하이드록시알킬"이란, 하나 이상, 바람직하게는 하나, 2개 또는 3개의 하이드록시기로 치환되되, 단 동일한 탄소 원자가 하나 이상의 하이드록실기를 포함하지 않는 전술한 바와 같은 알킬 라디칼이다. 그의 대표적인 예로는 하이드록시메틸, 2-하이드록시에틸, 2-하이드록시프로필, 3-하이드록시프로필, 1-(하이드록시메틸)-2-메틸프로필, 2-하이드록시부틸, 3-하이드록시부틸, 4-하이드록시부틸, 2,3-다이하이드록시프로필, 2-하이드록시-1-하이드록시메틸에틸, 2,3-다이하이드록시부틸, 3,4-다이하이드록시부틸 및 2-(하이드록시메틸)-3-하이드록시프로필, 바람직하게는 2-하이드록시에틸, 2,3-다이하이드록시프로필 및 1-(하이드록시메틸)-2-하이드록시에틸을 들 수 있지만, 이로서 한정되는 것은 아니다. 따라서, 본원에서 사용하는 바와 같이 "하이드록시알킬"이란 헤테로알킬기의 하부세트를 정의하는데 사용된다.

"이탈기"란, 합성 유기 화학에서 그와 통상적으로 관련된 의미, 즉 친핵체에 의해 탈착될 수 있는 원자 또는 기를 의미하며, 할로(예를 들어, 클로로, 브로모 및 요오도), 알칸설포닐옥시, 아렌설포닐옥시, 알킬카보닐옥시(예를 들어, 아세톡시), 아릴카보닐옥시, 메실옥시, 토실옥시, 트라이플루오로메탄설포닐옥시, 아릴옥시(예를 들어, 2,4-다이니트로페녹시), 메톡시, N,O-다이메틸하이드록실아미노 등을 포함한다.

"모노알킬아미노"란, 라디칼 -NHR(여기서, R은 전술한 바와 같은 알킬, 하이드록시알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이다)을 의미하며, 예를 들면, 메틸아미노, (1-메틸에틸)아미노, 하이드록시메틸아미노, 사이클로헥실아미노, 사이클로헥실메틸아미노, 사이클로헥실에틸아미노 등이다.

"임의로 치환된 페닐"이란, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 할로알킬, 할로알콕시, 헤테로알킬, 할로, 니트로, 시아노, 아미노, 메틸렌다이옥시, 에틸렌다이옥시 및 아실로 구성된 군중에서 선택된 하나 이상의 치환체, 바람직하게는 하나 또는 2개의 치환체로 독립적으로 임의로 치환된 페닐 고리를 의미한다.

"약학적으로 허용가능한 부형제"란, 약학 조성물을 제조하는데 유용한 부형제로서, 일반적으로 안전하고, 비-독성이고, 생물학적으로나 다른 면에서나 바람직한 부형제이며, 예를 들어 인간의 약학 용도 뿐만 아니라 수의학적 용도에도 허용가능한 부형제를 포함한다. 본원 명세서 및 청구의 범위에서 사용되는 바와 같은 "약학적으로 허용가능한 부형제"란 1종 이상의 이러한 부형제를 포함한다.

화합물의 "약학적으로 허용가능한 염"이란, 약학적으로 허용가능하고 모 화합물의 목적하는 약리학적 활성을 보유하는 염을 의미한다. 이러한 염으로는,

(1) 염산, 브롬산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나, 아세트산, 프로피온산, 헥산산, 사이클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-하이드록시벤조일)벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 1,2-에탄-다이설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄포르설폰산, 4-메틸바이사이클로[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로피온산, 트라이메틸아세트산, t-부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 하이드록시나프톤산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산 등과 같은 유기산으로 형성된 산 부가염; 또는

(2) 모 화합물내에 산성 양성자가 존재하는 경우 상기 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들어 알칼리 금속 이온, 알칼리 토금속 이온 또는 알루미늄 이온으로 치환되거나, 에탄올아민, 다이에탄올아민, 트라이에탄올아민, 트로메타민, N-메틸글루카민 등과 같은 유기 염기로 배위되어 형성되는 염을 들 수 있다.

"프로드러그" 및 "프로-드러그"란, 상호교환적으로 사용되며, 상기 프로드러그가 포유동물 개체에 투여되는 경우 생체내에서 화학식 I에 따른 활성 모 약물을 방출하는 임의의 화합물을 의미한다. 화학식 I의 화합물의 프로드러그는 생채내에서 절단되어 모 화합물을 방출하도록 하는 방식으로 화학식 I의 화합물내에 존재하는 하나 이상의 작용기(들)을 개질시킴으로써 제조된다. 프로드러그는 화학식 I의 화합물내 하이드록시, 아미노, 설프하이드릴기, 카복시 또는 카보닐기가 생체내에서 절단되어 각각 유리 하이드록실, 아미노 또는 설프하이드릴기를 발생시킬 수 있는 임의의 기에 결합되는 화학식 I의 화합물을 들 수 있다. 프로드러그의 예로는, 화학식 I의 화합물내 하이드록시 작용기의 에스터(예를 들면, 아세테이트, 다이알킬아미노아세테이트, 폼에이트, 포스페이트, 설페이트 및 벤조에이트 유도체)와 카바메이트(예를 들면, N,N-다이메틸아미노카보닐), 카복실 작용기의 에스터기(예를 들면, 에틸 에스터, 모르폴리노에탄올 에스터), 아미노 작용기의 N-아실 유도체(예를 들면, N-아세틸) N-만니흐(Mannich) 염기, 시프(Schiff) 염기 및 에나미논, 화학식 I의 화합물의 케톤 및 알데하이드 작용기의 옥심, 아세틸, 케탈 및 에놀 에스터 등을 들 수 있다(번드가드(Bundegaard H.)의 문헌["Design of Prodrugs", p 1-92, Elesevier, New York-Oxford, 1985] 참조).

"보호기"란, 분자 마스크내에 반응성 기에 결합되는 경우 반응성을 감소시키거나 억제하는 원자의 그룹을 지칭한다. 보호기에 대한 예는 그린(T.W. Green)과 퍼트(P.G. Futs)의 문헌["Protective Groups in Organic Chemistry", Wiley, 2^nded, 1991] 및 해리슨(Harrison)과 해리슨 등의 문헌["Compendium of Synthetic Organic Methods", Vols. 1-8, John Wiley and Sons, 1971 1996]에서 발견할 수 있다. 대표적인 아미노 보호기로는 폼일, 아세틸, 트라이플루오로아세틸, 벤질, 벤질옥시카보닐(CBZ), 3급-부톡시카보닐(Boc), 트라이메틸 실릴(TMS), 2-트라이메틸실릴-에탄설포닐(SES), 트리틸 및 치환된 트리틸기, 알릴옥시카보닐, 9-플루오레닐메틸옥시카보닐(FMOC), 니트로-베라트릴옥시카보닐(NVOC) 등을 들 수 있다. 대표적인 하이드록시 보호기는하이드록시기가 아실화 또는 알킬화된 기, 예를 들어 벤질 및 트리틸 에테르 뿐만 아니라 알킬 에테르, 테트라하이드로피라닐 에테르, 트라이알킬실릴 에테르 및 알릴 에테르 등을 들 수 있다.

질환을 "치료하는" 또는 질환의 "치료"는

(1) 질환을 예방하는 것, 즉 질환에 노출되거나 질환에 걸리기 쉽지만, 질환의 징후를 경험하거나 나타내지 않은 포유동물에서 질환의 임상적인 징후가 발현되지 않도록 하는 것;

(2) 질환을 억제하는 것, 즉 질환 또는 그의 임상적인 징후의 발현을 저지하거나 감소시키는 것;

(3) 질환을 경감시키는 것, 즉 질환 또는 그의 임상적인 징후의 퇴행을 유발하는 것을 들 수 있다.

"치료 효과량"이란, 질환을 치료하기 위해 포유동물에게 투여되는 경우 질환을 위한 상기 치료에 영향을 주는데 충분한 화합물의 양을 의미한다. "치료 효과량"은 화합물, 질환과 그의 경중도, 및 치료할 포유동물의 연령, 체중 등에 따라 변할 것이다.

본 명세서의 구조식중에서, "N"은 구조의 다른 부분에 대해 하나 또는 2개의 결합을 갖도록 도시되거나 "O"는 구조의 나머지 부분에 대해 하나의 결합을 갖도록 도시되지만, 당 분야의 숙련자라면, "N"의 경우 2개 또는 하나의 "H" 원자가 각각 구조식내에 존재하고, "O"의 경우에는 하나의 "H" 원자가 구조식내에 존재하지만, 구조를 도시하기 위해 사용되는 컴퓨터 프로그램, 즉 ISIS 드로우(ISIS draw)에서는 도시되지 않음을 이해할 것이다. 따라서, "-N"은 "-NH₂"를 의미하고, "-N-"은 "-NH-"를 의미하고, "-O"는 "-OH"를 의미한다.

본 발명의 한가지 양태는 하기 화학식 I의 화합물의 화합물을 제공한다:

화학식 I

상기 식에서

R¹은 수소 또는 알킬이고;

R²는 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬로 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴 스피로 사이클로알킬, 아르알콕시, 알콕시, -알킬-S(O)_n-알킬렌(여기서, n은 1 또는 2이다) 또는 SO₂Ar²이고;

R³은 수소, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노, 아실아미노, -NR^a-C(=O)-R^b(여기서, R^a는 수소 또는 알킬이고, R^b는 헤테로사이클릴 또는 헤테로알킬이다), 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 아르알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 시아노알킬, -알킬렌-C(O)-R(여기서, R은 수소, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다), 아실 또는 프탈이미도알킬이고;

AR¹ 및 Ar²는 각각 독립적으로 아릴이다.

AR¹이 임의로 치환된 페닐, 바람직하게는 하기 화학식 II의 화합물이 특히 바람직하다:

상기 식에서,

n은 1 또는 2, 바람직하게는 1이고,

X는 수소, 알킬, 할로, 니트로, 시아노 또는 메톡시이고, 특히 할로, 알킬 또는 메톡시이며, 2-위치에서 치환체(플루오로, 클로로, 메틸 및 메톡시로)로 치환되는 것이 바람직하다.

화학식 I의 보다 바람직한 화합물은 하기 화학식 III의 화합물이다:

화학식 I, 화학식 II 또는 화학식 III 및/또는 상기 구체화된 바와 같은 이들의 바람직한 양태를 참고로,

바람직하게는, R¹은 수소 또는 알킬, 예를 들어 메틸이다. 보다 바람직하게는, R¹은 수소이다.

바람직하게는, R²는 알킬설포닐-알킬, 아르알콕시, 예를 들어, 벤질옥시, 알콕시, 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬-알킬 또는 헤테로사이클릴이다. 보다 바람직하게는 R²가 헤테로치환된 사이클로알킬, 바람직하게는 4-헤테로치환된 사이클로헥실, 예를 들어 4-하이드록시사이클로헥실, 또는 헤테로사이클릴, 바람직하게는 치환된 피페리디닐, 모르폴리노, 임의로 치환된 피페라지닐, 테트라하이드로퓨릴, 테트라하이드로티오퓨릴, S-옥소-테트라하이드로티오퓨릴, S,S-다이옥소-테트라하이드로티오퓨릴, 테트라하이드로티오피라닐, S-옥소-테트라하이드로티오피라닐, S,S-다이옥소-테트라하이드로티오피라닐 또는 테트라하이드로피라닐이고, 보다 바람직하게는 치환된 피페리디닐, 예를 들어 N-메탄설포닐-피페리딘-4-일, 또는 4-테트라하이드로피라닐이며, 여기서 특히 바람직한 치환체는 표 및 실시예에서 도시한 구체적인 실시예에서 사용된 치환체이다. 보다 바람직하게는, R²가 알킬-설포닐알킬, 예를 들어 (1,1-다이메틸-2-메틸설포닐)에틸 또는 (1,1-다이메틸-3-메틸설포닐)프로필일 수 있다.

바람직하게는, R³은 수소, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노, 아실아미노, -NR^a-C(=O)-R^b(여기서, R^a는 수소 또는 알킬이고, R^b는 헤테로사이클릴 또는 헤테로알킬이다), 알킬, 할로알킬, 사이클로알킬, 시아노메틸, 헤테로알킬, 아릴, 아르알킬 또는 -알킬렌-C(O)-R(여기서, R은 수소, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다)이다. 가장 바람직하게는 R³은 수소, 아미노, 다이메틸아미노, 아이소프로필아미노, (모르폴리노폼일)아미노(즉, -NR^a-C(=O)-R^b(여기서, R^a는 수소이고, R^b는 모르폴리노이다)), 메틸, 2,2,2-트라이플루오로에틸, 사이클로프로필, 시아노메틸, 2-하이드록시에틸, 4-플루오로페닐, 벤질, 카복시메틸 또는 메톡시카보닐메틸, 에틸, 2-플루오로에틸, 2-하이드록시-2-메틸프로필 또는 2-프탈이미도프로필이다. 보다 더 바람직하게는, R³은 수소 또는 메틸이다.

화학식 I, 화학식 II 및 화학식 III의 화합물 및 상기 구체화된 이들의 바람직한 양태와 함께, R¹, R² 및 R³의 각각 치환체의 임의의 바람직한 양태의 임의의 조합도 본 발명의 목적임이 이해될 것이다.

R³이 수소인 경우, 화합물은 하기와 같은 토토머 형태로 존재할 수 있음이 이해될 것이다:

따라서, 전술하거나 후술할 화합물 이외에, 본 발명은 모든 토토머 형태를 포함한다. 게다가, 본 발명은 또한 화합물의 프로드러그 형태와 함께 모든 약학적으로 허용가능한 염, 및 순수한 키랄 형태 또는 라세믹 혼합물 또는 기타 혼합물의 형태의 모든 입체이성체를 포함한다.

추가적인 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물을 포함한다.

화학식 I

상기 식에서

R¹은 수소 또는 알킬이고;

R²는 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬로 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴 스피로 사이클로알킬 또는 SO₂Ar²이고;

R³은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 아르알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 시아노알킬,-알킬렌-C(O)-R(여기서, R은 수소, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다) 또는 아실이고;

AR¹ 및 Ar²는 각각 독립적으로 아릴이다.

본 발명의 추가의 양태의 화학식 I의 화합물중에서 특히 바람직한 화합물은 하기 화학식 II의 화합물이다:

화학식 II

상기 식에서,

n은 1 또는 2이고,

X는 수소, 알킬, 할로, 니트로, 시아노 또는 메톡시이고, 특히 할로, 알킬 또는 메톡시이고, 2-위치에서 치환되는 것이 바람직하다.

화학식 I의 보다 바람직한 화합물은 하기 화학식 III의 화합물이다:

화학식 III

본 발명의 추가의 양태중 화학식 I의 화합물을 참고로 하여,

바람직하게는, R¹은 수소 또는 알킬이다. 보다 바람직하게는, R¹은 수소이다.

바람직하게는, R²는 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬-알킬 또는 헤테로사이클릴이다. 보다 바람직하게는 R²는 헤테로치환된 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴, 예를 들어 4-치환된 사이클로헥실, 치환된 피페리디닐 또는 테트라하이드로피라닐이다.

바람직하게는, 화학식 I의 화합물중 R³은 수소, 알킬, 할로알킬, 사이클로알킬, 시아노메틸, 헤테로알킬, 아릴, 아르알킬 또는 -알킬렌-C(O)-R(여기서, R은 수소, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다)이다. 가장 바람직하게는 R³은 수소, 메틸, 2,2,2-트라이플루오로에틸, 사이클로프로필, 시아노메틸, 2-하이드록시에틸, 4-플루오로페닐, 벤질, 카복시메틸 또는 메톡시카보닐메틸이다. 보다 더 바람직하게는, R³은 수소 또는 메틸이다.

본 발명의 추가적인 양태에서, 본 발명은 하기와 같이 정의되는 화합물을 제공한다

(i) 하기 화학식 I의 화합물 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염:

화학식 I

상기 식에서

R¹은 수소 또는 알킬이고;

R²는 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴 스피로 사이클로알킬 또는 SO₂Ar²이고;

R³은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 아르알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 시아노알킬, -알킬렌-C(O)-R(여기서, R은 수소, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노) 또는 아실이고;

AR¹ 및 Ar²는 각각 독립적으로 아릴이다.

(ii) Ar¹이 임의로 치환된 페닐인 상기 (i)에서 정의된 화합물.

(iii) Ar¹이 하나 또는 2개의 할로, 알킬 또는 메톡시기로 독립적으로 치환된 페닐기인 상기 (ii)에서 정의된 화합물.

(iv) Ar¹이 2-클로로페닐, 2-메틸페닐 또는 2-메톡시페닐인 상기 (iii)에서 정의된 화합물.

(v) 하기 화학식 III의 상기 (v)에서 정의된 화합물:

화학식 III

(vi) R³이 수소, 알킬, 할로알킬, 사이클로알킬, 시아노메틸, 헤테로알킬, 아릴, 아르알킬 또는 -알킬렌-C(O)-R인 상기 (i)에서 정의된 화합물.

(vii) R³이 수소, 메틸, 2,2,2-트라이플루오로에틸, 사이클로프로필, 시아노메틸, 2-하이드록시에틸, 4-플루오로페닐, 벤질, 카복시메틸 또는 메톡시카보닐메틸인 상기 (vi)에서 정의된 화합물.

(viii) R³이 수소 또는 메틸인 상기 (vii)에서 정의된 화합물.

(ix) R³이 수소 또는 메틸이고, Ar¹이 하나 또는 2개의 할로, 알킬 또는 메톡시기에 의해 독립적으로 치환된 페닐인 상기 (i)에서 정의된 화합물.

(x) R¹이 수소 또는 메틸인 상기 (i)에서 정의된 화합물.

(xi) R¹이 수소인 상기 (x)에서 정의된 화합물.

(xii) R²가 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬치환된 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴인 상기 (i)에서 정의된 화합물.

(xiii) R²가 헤테로치환된 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴인 상기 (xii)에서 정의된 화합물.

(xiv) R²가 4-헤테로치환된 사이클로헥실인 상기 (xiii)에서 정의된 화합물.

(xv) R²가 4-하이드록시-사이클로헥실인 상기 (xiv)에서 정의된 화합물.

(xvi) R²가 헤테로사이클릴인 상기 (xiii)에서 정의된 화합물.

(xvii) R²가 치환된 피페리디닐기인 상기 (xvi)에서 정의된 화합물.

(xviii) R²가 N-메탄설포닐-피페리딘-4-일인 상기 (xvi)에서 정의된 화합물.

(xix) R²가 4-테트라하이드로피라닐기인 상기 (xvi)에서 정의된 화합물.

(xx) R²가 헤테로치환된 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴이고, Ar¹이 하나 또는 2개의 할로, 알킬 또는 메톡시기로 독립적으로 치환된 페닐기인 상기(i)에서 정의된 화합물.

(xxi) R³이 수소인 상기 (xx)에서 정의된 화합물.

(xxii) R³이 메틸인 상기 (xx)에서 정의된 화합물.

본 발명의 최광의 양태에 있어서 화학식 I의 대표적인 일부 화합물을 하기 표 1a 내지 표 1q에 제시하였다(표 1a 내지 표 1q의 제목은 화학식 I의 대표적인 화합물이다).

시험관내 p38 검정에서 화학식 I의 화합물의 IC₅₀은 10 μM 미만, 바람직하게는 5 μM 미만, 더욱 바람직하게는 3 μM 미만, 가장 바람직하게는 1 μM 미만이다. 특히, 표 I에서 화학식 I의 화합물은 시험관내 p38 검정에서 약 4.76 내지 약 0.0003 μM의 IC₅₀을 갖는다.

본 발명의 화합물은 수화된 형태를 비롯한 용매화 형태 뿐만 아니라 비용매화 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 수화된 형태를 비롯한 용매화 형태는 비용매화 형태와 동등하며, 본 발명의 범주내에 속하는 것이다. 또한, 전술한 바와 같이, 본 발명은 또한 상기 화합물들의 전구약물 형태, 및 순수한 키랄 형태 또는 라세미 혼합물 또는 다른 형태의 혼합물인 입체이성체와 함께 상기 화합물들의 약학적으로 허용가능한 염 모두를 포함한다.

화학식 I의 화합물은 약학적으로 허용가능한 산 부가염을 추가로 형성할 수 있다. 이들 모든 형태는 본 발명의 범주내에 속한다

화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용가능한 산 부가염으로는 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 아인산 등과 같은 무기산으로부터 유도된 염 뿐만 아니라 지방족 모노- 및 다이카복실산, 페닐-치환된 알칸산, 하이드록시 알칸산, 알칸이산, 방향족산, 지방족 및 방향족 설폰산과 같은 유기산으로부터 유도된 염이 포함된다. 따라서, 이러한 염은 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로젠포스페이트, 다이하이드로젠포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 카프릴레이트, 아이소부티레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 숙시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 만델레이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 다이니트로벤조에이트, 프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 페닐아세테이트, 시트레이트, 락테이트, 말리에이트, 타르트레이트, 메탄설포네이트 등이 포함된다. 또한, 아미노산의 염(예; 아르기네이트 등) 및 글루코네이트, 갈락투로네이트가 고려된다(예를 들면, 베르게(Berge) 등의 문헌["Pharmaceutical Salts," J. of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19] 참조).

기본 화합물의 산 부가염은 통상의 방식으로 유리 염기 형태를 상기 염을 제조하는데 충분량의 요구되는 산과 접촉시킴으로써 제조될 수 있다. 유리 염기 형태는 염 형태를 염기와 접촉시키고 통상의 방식으로 유리 염기를 단리시킴으로써 재생시킬 수 있다. 유리 염기 형태는 특정 물리적 특성(예; 극성 용매의 용해도)에서 그들 각각의 염 형태와 다소 상이할 수 있으나, 다른 언급이 없는 한 상기 염은 본 발명의 목적을 위해 각각의 유리 염기와 동등하다.

약학적으로 허용가능한 염기 부가염은 금속 이온 또는 아민, 예를 들면 알칼리 및 알칼리성 토금속 이온 또는 유기 아민을 사용하여 형성될 수 있다. 양이온으로서 사용되는 금속 이온의 예로는 나트륨, 칼륨, 마그네슘, 칼슘 등이 포함된다. 적합한 아민의 예로는 N,N'-다이벤질에틸렌다이아민, 클로로프로카인, 콜린, 다이에탄올아민, 에틸렌다이아민, N-메틸글루카민 및 프로카인이 있다(예를 들면, 베르게 등의 문헌["Pharmaceutical Salts, " J. of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19] 참조).

산성 화합물의 염기 부가염은 통상의 방식으로 유리 산 형태를 상기 염을 제조하는데 충분량의 요구되는 염기와 접촉시킴으로써 제조될 수 있다. 유리 산 형태는 염 형태를 산과 접촉시키고 통상의 방식으로 유리 산을 단리시킴으로써 재생시킬 수 있다. 유리 산 형태는 특정 물리적 특성(예; 극성 용매중 용해도)에서 각각의 염 형태와 다소 상이할 수 있으나, 다른 언급이 없는 한 상기 염은 본 발명의 목적을 위해 각각의 유리 산과 동일하다.

본 발명의 화합물은 당 분야의 숙련자에게 공지된 절차를 사용하여 다양한 방법에 의해 제조할 수 있다. 본 발명의 한 양태에서, 화학식 I의 화합물의 제조방법은 하기 반응식 1에 제시된 바와 같다.

(당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 용이하게 제조되거나 당 분야의 숙련자에게 공지된 공급원으로부터 구입될 수 있는) 화학식 Ia의 화합물을 1급 아민(R³-NH₂)으로 처리하여 화학식 Ib의 화합물을 수득한다. 이 반응은 반응 조건하에서 불활성인 용매, 바람직하게는 할로겐화 지방족 탄화수소, 특히 다이클로로메탄, 선택적으로 할로겐화된 방향족 탄화수소, 개방 쇄 또는 사이클릭 에테르, 예를 들면 테트라하이드로퓨란, 폼아마이드 또는 저급 알칸올중에서 통상적으로 수행된다. 적합하게는, 반응은 약 -20 내지 약 120℃에서 수행된다.

화학식 Ib의 화합물을 환원시켜 화학식 Ic의 알콜을 수득한다. 이 환원은 전형적으로 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법으로(예를 들면, 약 -20 내지 약 70℃, 바람직하게는 약 0℃ 내지 대략 실온에서, 환원 조건하에서 불활성인 용매, 바람직하게는 개방 쇄 또는 사이클릭 에테르, 특히 테트라하이드로퓨란중에서) 리튬 알루미늄 하이드라이드를 사용하여 수행한다.

다음 단계에서, 화학식 Ic의 알콜을 산화시키면 화학식 Id의 카복스알데하이드가 수득된다. 산화는 전형적으로 이산화망간을 사용하여 수행하지만, 많은 다른 방법들도 또한 이용할 수 있다(예를 들면, 문헌["Advanced Organic Chemistry, 4^TH ed., March, John Wiley & Sons, New York(1992)"] 참조). 사용된 산화제에 따라, 반응은 특정 산화 조건하에서 불활성인 용매, 바람직하게는 할로겐화 지방족 탄화수소, 특히 다이클로로메탄 또는 선택적으로 할로겐화된 방향족 탄화수소중에서 편리하게 수행된다. 적합하게는, 산화는 약 0 내지 약 60℃에서 수행된다.

화학식 Id의 카복스알데하이드를 염기의 존재하에서 아릴-치환된 아세테이트 Ar¹-CH₂-CO₂R(여기서, R은 알킬기이다)과 반응시켜 화학식 Ie의 화합물을 수득한다. 카보네이트(예; 탄산칼륨, 탄산리튬 및 탄산나트륨), 바이카보네이트(예; 중탄산칼륨, 중탄산리튬 및 중탄산나트륨), 아민(예; 2급 및 3급 아민), 및 수지-결합된 아민(예; 1,3,4,6,7,8-헥사하이드로-2H-피리미도[1,2-a]피리미딘)을 비롯한 임의의 비교적 비-친핵성인 염기가 사용될 수 있다. 편리하게는, 상기 반응은 반응 조건하에서 비교적 극성이지만 불활성인 용매, 바람직하게는 아마이드, 예를 들면 다이메틸 폼아마이드, N-치환된 피롤리디논, 특히 1-메틸-2-피롤리디논중에서 약 70 내지 약 150℃, 특히 언급한 물의 공비 제거를 보조하는 용매의 환류 온도 또는 그와 근접한 온도에서 수행된다.

화학식 Ie의 화합물을 산화제(예를 들면, 3-클로로퍼벤조산, 즉 MCPBA 또는 옥손(Oxone; 등록상표))와 같은 과산으로 산화시켜 설폰(If)을 수득하고, 이는 다양한 표적 화합물들로 전환시킬 수 있다. 전형적으로, 화학식 Ie의 화합물은 산화 조건하에서 불활성인 용매중에서 산화된다. 예를 들면, MCPBA가 산화제로서 사용되는 경우, 용매는 할로겐화 지방족 탄화수소, 특히 클로로폼이 바람직하다. 옥손(등록상표)이 산화제로서 사용되는 경우, 용매는 물, 메탄올 또는 유기 용매(예; 메탄올, 아세토나이트릴 또는 테트라하이들퓨란)와 물의 혼합물일 수 있다. 반응 온도는 사용되는 용매에 따라 달라진다. 유기 용매에서, 반응 온도는 일반적으로 약 -20 내지 약 50℃, 바람직하게는 약 0℃ 내지 대략 실온이다. 물이 용매로서 사용되는 경우, 반응 온도는 일반적으로 약 0 내지 약 50℃, 바람직하게는 약 0℃ 내지 대략 실온이다. 다르게는, 레늄/과산화물계 시약을 사용하는 촉매 조건하에서 산화될 수 있다. 예를 들면, 본원에 전체로서 참고로 인용되고 있는 문헌["Oxidation of Sulfoxides by Hydrogen Peroxide, Catalyzed by Methyltrioxorhenium(VII)", Lahti, David W.; Espenson, James H, Inorg. Chem. 2000, 39(10) pp. 2164-2167; "Rhenium oxo complexes in catalytic oxidations," Catal. Today, 2000, 55(4), pp317-363 and "A Simple and Efficient Method for the Preparation of Pyridine N-Oxides", Coperet, Christophe; Adolfsson, Hans; Khuong, Tinh-Alfredo V.; Yudin, Andrei K.; Sharpless, K. Barry, J. Org. Chem., 1998, 63 (5), pp1740-1741]을 참조한다.

화학식 If의 화합물을 아민(R²-NH₂)으로 처리하면 화학식 I'의 화합물(즉, R¹이 수소인 화합물(I))이 수득된다. 그다음, 상기 화학식 I'의 화합물을 추가로 알킬화시켜 R¹이 수소가 아닌 화학식 I의 화합물을 수득한다. 상기 반응은 용매의 존재 또는 부재하에 수행할 수 있다. 편리하게는, 상기 반응은 약 0 내지 약 200℃, 더욱 바람직하게는 대략 실온 내지 약 150℃의 온도에서 수행한다. 다르게는, 화학식 If의 설폰을 사용하는 것 이외의 몇몇 경우에는, 화학식 Ie의 설파이드 또는 상응하는 설폭사이드가 아민(R²-NH₂)과 직접 반응하여 화학식 I'의 화합물을 수득할 수 있다. 또한, 화학식 If의 화합물을 R¹R²NH의 아민으로 직접 알킬화하여 화학식 I(여기서, R¹ 및 R²는 전술된 바와 같다)의 화합물을 수득할 수 있다.

따라서, 본 발명은 화학식 Ie 또는 If의 화합물을 아민(R²-NH₂)으로 처리하고, 선택적으로는 생성물을 R¹-L(여기서, R¹은 전술한 바와 같지만 수소는 아니고, L은 이탈기이다)과 반응시켜 화학식 I의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.

다르게는, 화학식 Ie의 화합물인 카복스알데하이드는 하기 반응식 2에 도시된 바와 같이 제조하여 반응식 1에서의 에스터 환원 및 알콜 산화의 필요성을 제거한다.

화학식 II-a(여기서, R^a은 각각 독립적으로 알킬이다)의 화합물(이는 당 분야에 공지된 방법에 의해 용이하게 제조될 수 있거나, 또는 당 분야의 숙련자에게 공지된 공급원으로부터 구입가능하다)을 염기의 존재하에서 알킬 폼에이트(예; 메틸폼에이트)로 처리하여 화학식 II-b(여기서, M은 금속이다)의 화합물을 수득한다. 이 반응은 약 0 내지 약 100℃의 온도에서 실시하는 것이 편리하다. 전형적으로, 에테르(예; THF) 및 반응 조건에 불활성인 다른 용매가 사용된다. 적합한 염기로는 알콕사이드(예; 3급-부톡사이드) 및 화학식 II-a의 화합물을 탈양성자화할 수 있는 기타 상대적으로 비친핵성인 염기가 포함된다.

티오유레아를 사용하여 염기의 존재하에서 화학식 II-b의 화합물을 고리화하여 화학식 II-c의 피리미딘을 수득하였다. 전형적으로, 이 고리화 반응은 염기로서 상응하는 알콕사이드를 사용하는 환류 조건하에서 알콜 용매중에서 수행된다.

염기의 존재하에서 알킬화제 R-X¹(여기서, R은 알킬기이고, X¹은 이탈기, 예를 들면 할라이드이다)을 사용하여 화학식 II-c의 화합물을 알킬화하여 화학식 II-d의 화합물을 수득한다. 적합한 염기로는 카보네이트(예; 탄산칼륨, 탄산리튬 및 탄산나트륨) 및 바이카보네이트(예; 중탄산칼륨, 중탄산리튬 및 중탄산나트륨)를 비롯한 비교적 비친핵성인 염기가 포함된다. 편리하게는, 상기 반응은 반응 조건하에서 불활성인 비교적 극성인 용매, 바람직하게는 아세톤, 다이메틸폼아마이드(DMF) 또는 메틸피롤리디논(MP)중에서 수행된다.

화학식 II-d의 화합물을 상기 반응식 1에서 화학식 Ie의 화합물의 제조에 대해 기술된 바와 유사한 조건하에서 아릴-치환된 아세테이트 Ar¹-CH₂-CO₂R(여기서, R은 알킬기이다)과 반응시켜 화학식 II-e의 화합물을 수득한다. 화학식 II-c의 화합물의 알킬화를 아릴-치환된 아세테이트와의 반응 전에 일반적으로 수행하지만, 이들 2개의 반응의 순서는 중요하지 않으며 반대로 될 수 있다. 따라서, 화학식 II-c의 화합물을 아릴-치환된 아세테이트 Ar¹-CH₂-CO₂R과 반응시키고, 생성된 생성물을 알킬화제 R-X¹을 사용하여 알킬화시켜 화학식 II-e의 화합물을 수득할 수 있다.

알킬화제 R³-X²(여기서, R³은 상기 정의된 바와 같고, X²는 이탈기, 예를 들면 할라이드이다)를 사용하여 화학식 II-e의 화합물의 아민기를 알킬화하여 화학식 Ie의 화합물을 수득하였으며, 이를 반응식 1에 기술된 바와 같이 화학식 I'의 화합물로 추가로 전환시킬 수 있다.

따라서, 본 발명의 다른 양태는 화학식 II-a의 아세탈을 알킬 폼에이트와 반응시키고, 생성된 생성물을 티오유레아와 반응시켜 화학식 II-c의 피리미딘 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.

본 발명의 또다른 양태는 화학식 II-c의 화합물을 알킬화제 또는 아릴-치환된 아세테이트와 반응시키고, 생성된 생성물을 아릴-치환된 아세테이트 또는 알킬화제와 각각 반응시켜 화학식 II-e의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.

당 분야의 숙련자는 상기 반응식에 대한 특정한 개질법이 본 발명의 범주내에 속하는 것을 이해할 것이다. 예를 들면, 특정 단계들은 특정 반응 조건과 상용되지 않는 작용기를 위한 보호기의 사용과 관련될 것이다.

화학식 I의 화합물, 및 산에 의한 화학식 I의 기본 화합물의 약학적으로 허용가능한 염은, 예를 들면 약학 제제 형태의 약제로서 사용될 수 있다. 약학 제제는 장내 투여 예를 들면 정제, 피복정, 당의정, 경질 젤라틴 캡슐, 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 유화액 또는 현탁액의 형태로 경구 투여되거나, 예를 들면 비강 스프레이 형태로 비강 투여되거나, 또는 예를 들면 좌제 형태로 직장 투여될 수 있다. 그러나, 이들은 또한 예를 들어 주사용 용액의 형태로 비경구 투여될 수 있다.

화학식 I의 화합물 및 그의 전술된 약학적으로 허용가능한 염은 약학 제제를 제조하기 위해 약학적으로 불활성인 무기 또는 유기 담체와 함께 가공될 수 있다. 락토즈, 옥수수 전분 또는 그의 유도체, 탈크, 스테아르산 또는 그의 염 등, 예를 들면 정제, 피복정, 당의정 및 경질 젤라틴 캡슐의 담체로서 사용될 수 있다. 연질 젤라틴 캡슐에 적합한 담체는, 예를 들면 식물성 오일, 왁스, 지방, 반고체 및 액체 폴리올 등이지만, 활성 성분의 속성에 따라 연질 젤라틴 캡슐의 경우 담체가 통상 필요하지 않다. 용액 및 시럽의 제조에 적합한 담체는, 예를 들면 물, 폴리올, 슈크로즈, 전화당, 글루코즈 등이다. 좌약에 적합한 담체는, 예를 들면 천연유 또는 경화유, 왁스, 지방, 반액체 또는 액체 폴리올 등이다.

또한, 약학 제제는 방부제, 가용화제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 감미제, 착색제, 향미제, 삼투압을 변화시키기 위한 염, 완충액, 차폐제 또는 산화방지제를 함유할 수 있다. 이들은 또한 화학식 I의 화합물 또는 그의 전술된 약학적으로 허용가능한 염 이외에 치료적으로 가치있는 물질을 함유할 수 있다.

상용성 약학 담체 물질과 함께, 화학식 I의 화합물 또는 산에 의한 화학식 I의 기본 화합물의 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 약제는 또한 본 발명의 목적이며, 하나 이상의 이들 화합물 또는 염, 및 필요한 경우 하나 이상의 기타 치료적으로 가치있는 물질을 상용성 약학 담체와 함께 생약 투여형에 포함시키는 것을 포함하는, 상기 약제의 제조방법도 본 발명의 목적이다.

앞서 언급한 바와 같이, 화학식 I의 화합물 및 이들의 전술한 약학적으로 허용가능한 염은 치료 활성 물질, 특히 소염제로서 또는 이식 수술에 따른 이식 거부반응의 예방을 위해 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 투여량은 광범위하게 변할 수 있으며, 물론 각각의 개별적인 경우에 개별적인 필요에 따라 조절된다. 일반적으로, 성인에게 간편하게 일일 투여되는 경우, 투여량은 약 0.1 내지 약 100㎎/kg, 바람직하게는 약 0.5 내지 약 5㎎/kg이다. 일일 투여량은 단일 투여 또는 분리 투여로서 투약될 수 있으며, 또한 앞서 언급된 상위 투여량 한계는 지시되는 경우 초과될 수 있다.

마지막으로, 특히 염증성, 면역성, 종양성, 폐기관지성, 피부성 및 심혈관계 장애의 치료 또는 예방, 천식, 중추 신경계 장애 또는 당뇨 합병증의 치료, 또는 이식 수술에 따른 이식 거부반응의 예방을 위한 약제의 제조를 위한 화학식 I의 화합물 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염의 용도 또한 본 발명의 목적이다.

화학식 I의 화합물은 인간 또는 다른 포유동물에 의해 TNF 또는 p38 키나제 생성이 과량이거나 통제되지 않음으로써 악화 또는 유발된 상기 인간 또는 다른 포유동물의 임의의 장애 또는 질환 상태를 치료하는데 유용하지만, 이에 한정되지는 않는다. 따라서, 본 발명은 사이토카인의 억제 효과량의 화학식 I의 화합물, 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들의 토토머를 투여함을 포함하는, 사이토카인-매개 질환을 치료하는 방법을 제공한다.

화학식 I의 화합물은 대상의 염증을 치료하는데 유용하고 열병을 치료하기 위한 해열제로서의 용도를 갖지만, 이에 한정되지는 않는다. 본 발명의 화합물은 류마티스성 관절염, 척추 관절병증, 통풍성 관절염, 골관절염, 전신성 홍반성 낭창(SLE), 연소성 관절염, 골관절염, 통풍 관절염 및 기타 관절염 증상을 포함하는 관절염을 치료하는데 유용할 것이나, 이에 한정되지는 않는다. 이러한 화합물은 성인 호흡기 곤란 증후군, 폐형 유육종증, 천식, 규폐증 및 만성 폐 염증성 질환을 포함하는 폐 장애 또는 폐 염증을 치료하는데 유용할 것이다. 또한, 상기 화합물은 패혈증, 패혈성 쇼크, 그램 네거티브 패혈증, 말라리아, 뇌막염, 감염 또는 악성에 대한 2차 악액질, 후천성 면역 결핍증(AIDS)에 대한 2차 악액질, AIDS, ARC(AIDS 관련 합병증), 폐렴 및 포진 바이러스를 포함하는 바이러스성 및 세균성 감염을 치료하는데 유용하다. 또한, 상기 화합물은 골 재흡수 질환(예를 들면, 골다공증), 내독성 쇼크, 독성 쇼크 증후군, 재관류 손상, 자가 면역 질환(예를 들면, 이식조직 대 피이식 조직의 반응 및 동종 이식 거부반응), 심장 혈관 질환(예를 들면, 아테롬성 동맥경화증, 혈전증, 울혈성 심부전 및 심장 재관류 손상), 신장 재관류 손상, 간 질환 및 신장염, 및 감염에 기인한 근육통을 치료하는데 유용하다.

또한, 상기 화합물은 알쯔하이머병, 독감, 다발성 경화증, 암, 당뇨병, 전신성 홍반성 낭창(SLE), 피부 관련 증상(예를 들면, 건선, 습진, 화상, 피부염 및 켈로이드 형성), 및 반흔 조직 형성을 치료하는데 유용하다. 또한, 본 발명의 화합물은 염증성 장 질환, 크론병, 위염, 과민성 대장 증후군 및 궤양성 대장염과 같은 위장관 증상을 치료하는데 사용될 것이다. 또한, 상기 화합물은 망막염, 망막병증, 포도막염, 안구 수명 및 안구 조직의 급성 손상과 같은 안과 질환을 치료하는데 유용할 것이다. 또한, 본 발명의 화합물은 신생물을 포함하는 혈관 신생; 전이; 각막 이식조직 거부반응, 안구 혈관 신생, 망막 혈관 신생(예를 들면, 손상 또는 감염 후 혈관 신생), 당뇨성 망막병증, 후수정체 섬유 증식증 및 혈관 신생성 녹내장과 같은 안과적 증상; 위궤양과 같은 궤양성 질환; 유아 혈관종을 포함하여 혈관종, 비강인두의 맥관 섬유종, 및 골의 무혈관성 괴사와 같은 병적이지만 악성이 아닌 증상; 당뇨성 신장병 및 심근증; 및 자궁내막증과 같은 여성 생식계 질환을 치료하는데 유용할 것이다. 또한, 본 발명의 화합물은 사이클로옥시게나제-2의 생성을 예방하는데 유용할 수 있다.

본 발명의 화합물은 인간을 치료하는데 유용할 뿐만 아니라 포유동물, 설치류 등을 포함하여 애완 동물, 외래 동물 및 가축을 수의학적으로 치료하는데 유용하다. 더욱 바람직한 동물로는 말, 개 및 고양이가 포함된다.

또한, 본 발명의 화합물은 기타 통상적인 항염증제, 예를 들어 스테로이드, 사이클로옥시게나제-2 억제제, NSAID(non-steroidal anti-inflammatory drug; 비스테로이드성 항염증제), DMARD(disease-modifying antirheumatic drug; 질병 조절 항류마티스제), 면역 억제제, 5-리폭시게나제 억제제, LTB₄ 길항제 및 LTA₄ 하이드롤라제 억제제 대신에 부분적으로 또는 완전히 보조 치료제로서 사용될 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이, "TNF 매개 장애"란 용어는 TNF가 자체적으로 제어하거나, 다른 모노카인(예를 들어, IL-1, IL-6 또는 IL-8이며, 이로서 제한되지는 않음)을 방출하게 하는 TNF에 의해, TNF가 주요 역학을 하는 임의 및 모든 장애와 상태를 지칭한다. 따라서, 이를테면, IL-1이 주성분이고 그의 생성 또는 작용이 TNF에 반응하여 악화되거나 분비되는 질환 상태가 TNF에 의해 매개된 장애로 간주될 것이다.

본원에 사용된 바와 같이, "p38 매개된 장애"란 용어는 p38이 자체적으로 제어하거나, 다른 인자(예를 들어, IL-1, IL-6 또는 IL-8이며, 이에 제한되지는 않음)를 방출하게 하는 p-38에 의해, p38이 주요한 역할을 하는 임의 및 모든 장애와 질환 상태를 지칭한다. 이를테면, IL-1이 주성분이고 그의 생성 또는 작용이 p38에 반응하여 악화되거나 분비되는 질환 상태가 p38에 의해 매개된 장애로 간주될 것이다.

TNF-β는 TNF-α(또한, 악액질로도 알려짐)와 밀접한 구조 유사성을 가지며, 이들 각각은 유사한 생물학적 반응을 유도하고 동일 세포 수용체에 결합하기 때문에, TNF-α 및 TNF-β의 합성은 본 발명의 화합물에 의해 저해되므로, 본원에서는 달리 특별히 서술되지 않는다면 "TNF"로서 총괄하여 나타낸다.

다른 언급이 없는 한, 융점(즉, Mpt)을 비롯한 모든 온도의 단위는 "℃"이다.

실시예 1

하기 실시예는 에틸 4-클로로-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트로부터 설폰 1을 제조하는 방법을 예시한다.

단계 1: 에틸 4-메틸아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트의 제조

250㎖ 다이클로로메탄내 에틸 4-클로로-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트(미국 위스콘신주 밀워키 소재의 알드리흐 케미칼 캄파니(Aldrich Chemical Co.)) 20g(86mmol)의 0℃ 용액에 35㎖(281mmol)의 에탄올내 메틸아민 33% 용액을 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, 150㎖의 물을 첨가하고, 상을 분리하였다. 유기상을 황산마그네슘상에서 건조하고, 여과하였다. 감압하에서 여액을 증발시켜 19g (97%)의 에틸 4-메틸아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트를 백색 고형물로서 수득하였다.

단계 2: 4-메틸아미노-2-메틸티오피리미딘-5-메탄올의 제조

빙욕에서 냉각된 300㎖의 무수 테트라하이드로퓨란내 리튬 알루미늄 하이드라이드(8.2g, 215mmol)의 현탁액에 450㎖의 무수 테트라하이드로퓨란내 46g(215mmol)의 에틸 4-메틸아미노-2-메틸티오-피리미딘-5-카복실레이트의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 18㎖의 물을 첨가하여 반응을 중지시켰다. 8.5㎖의 15% 수산화나트륨 용액을 적가하고, 그다음 25.5㎖의 물을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 17시간 동안 교반하고, 그다음 여과하였다. 여과기 잔류물을 100㎖의 테트라하이드로퓨란으로 2회 세척하였다. 여액을 모아 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 200㎖의 에틸아세테이트/헥산(1:2)에 현탁시키고, 고형물을 여과하고, 건조시켜 32.7g(82%)의 4-메틸아미노-2-메틸티오피리미딘-5-메탄올을 황색 고형물로서 수득하였다.

단계 3: 4-메틸아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복스알데하이드의 제조

1ℓ의 다이클로로메탄내 4-메틸아미노-2-메틸티오피리미딘-5-메탄올(20g, 108mmol)의 용액에 87g(1mol)의 이산화망간을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 24시간 동안 교반하고, 여과 보조제를 통해 여과하였다. 여과기 잔류물은 100㎖의 다이클로로메탄으로 세척하였다. 여액을 모아 감압하에서 농축시켜 15.8g(80%)의 4-메틸아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복스알데하이드를 백색 고형물로서 수득하였다.

단계 4

30㎖의 NMP내 3.3g(18.1mmol)의 4-메틸아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복스알데하이드 및 4.0g(20.1mmol)의 에틸-2-클로로페닐아세테이트의 혼합물에 1.5g의 수지, 1,3,4,6,7,8-헥사하이드로-2H-피리미도[1,2-a]피리미딘계 중합체를 첨가하였다. 반응 혼합물을 48시간 동안 120℃에서 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 여과하고, NMP 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 물에 현탁시켰다. 생성물을 여과하여 단리하였다. 에틸 아세테이트로 여액을 추출함으로써 추가로 생성물을 수득하였다. 생성물을 모아서 5% HCl 수용액 및 물로 세척하고, 건조시켜 4.0g의 설파이드(질량 분석: MH⁺=318, Mpt: 193.0-193.4)를 수득하였다.

단계 5

클로로폼내 13.5g(42.5mmol)의 설파이드 용액을 얼음에서 냉각시키고, 20.5g(91mmol)의 3-클로로퍼벤조산으로 처리하였다. 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하고, 그다음 포화 중탄산나트륨 수용액으로 세척하고, 상을 분리하였다. 유기상을 황산마그네슘상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에서 농축시켰다. 생성물을 에틸 에테르에서 교반하고, 여과하고, 건조시켜 13.1g의 설폰 1(질량 분석: MH⁺=350, MP: 232.6-232.8℃)을 수득하였다.

실시예 2

이 실시예는 에틸 4-클로로-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트에서 출발하여 6-(2-클로로페닐)-2-메탄설포닐-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올(설폰 2)을 제조하는 방법을 예시한다.

단계 2.1: 에틸 4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트의 제조

300㎖의 테트라하이드로퓨란내 에틸 4-클로로-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트(25.4g, 106mmol, 미국 위스콘신 밀워키 소재의 알드리흐 케미칼 캄파니)의 용액을 트라이에틸아민 50㎖ 및 수산화암모늄 수용액 40㎖로 처리하였다. 4시간 동안 교반한 후, 300㎖의 물을 첨가하고, 상을 분리하였다 유기층을 300㎖의 염수로 세척하고, 진공하에서 농축시키고, 메틸렌 클로라이드로 용해시키고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 진공하에서 농축하여 16.5g(95%)의 에틸 4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트를 백색 고형물로서 수득하였다.

단계 2.2: 4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-메탄올의 제조

175㎖의 다이에틸 에테르내 리튬 알루미늄 하이드라이드(175mmol)의 0℃ 용액에 500㎖의 무수 테트라하이드로퓨란내 4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트(34.7g, 163mmol)의 용액을 1.5시간에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 천천히 실온으로 승온시키고, 그다음 다시 0℃로 냉각시킨 후, 7㎖의 물, 7㎖의 2M 수산화나트륨 용액 및 14㎖의 물로 반응을 중지시켰다. 생성된 현탁액을 여과하고, 여과기 잔류물을 300㎖의 에틸 아세테이트로 2회 세척하였다. 여액을 모아 농축시켜 23.0g(83%)의 4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-메탄올을 백색 고형물로서 수득하였다.

단계 2.3: 4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복스알데하이드의 제조

800㎖의 메틸렌 클로라이드내 4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-메탄올(21.8g, 128mmol)의 현탁액을 활성화 산화망간 분말(63.0g, 725mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 교반하고, 그다음 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과기 잔류물을 고온의 메틸렌 클로라이드 및 메탄올 용액으로 반복하여 세척하였다. 여액을 모아 농축시켜 17.5g(81%)의 4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복스알데하이드를 백색 고형물로서 수득하였다.

단계 2.4: 6-(2-클로로페닐)-2-메틸티오-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올의 제조

250㎖의 무수 1-메틸-2-피롤리디논내 4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복스알데하이드(21.7g, 128mmol) 및 에틸-2-클로로페닐아세테이트(31.3g, 158mmol)의 용액에 탄산칼륨(63.0g, 491mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 95℃에서 교반하고, TLC(20:80, 에틸 아세테이트/헥산)로 모니터링하였다. 추가로 12.0g(60mmol)의 에틸-2-클로로페닐아세테이트를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 16시간 동안 95℃에서 교반하였다. 냉각된 반응 혼합물을 여과하고, 여과된 고형물을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 모아 400㎖의 물 및 300㎖의 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 황색 침전물이 형성될 때까지 진공하에서 농축시켰다. 생성된 고형물을 에틸 아세테이트로 세척하고, 건조시켜 소량의 생성물을 수득하였다. 대부분의 생성물은 수상층에 잔류하고, 정치시키자 서서히 침전되었다. 침전물을 여과하고, 물 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 이러한 과정을 6회 반복하여 31.9g(82%)의 6-(2-클로로페닐)-2-메탄설포닐-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올(질량 분석: M⁺=303, mp=234.5-235.3℃)을 수득하였다.

단계 2.5: 6-(2-클로로페닐)-2-메탄설포닐-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올의 제조

700㎖의 테트라하이드로퓨란내 6-(2-클로로페닐)-2-메틸티오-피리도[2,3-d] 피리미딘-7-올(25.2g, 82.9mmol)의 용액에, 200㎖의 물내 옥손(등록상표)(105g, 171mmol)의 슬러리를 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 교반하고, 여과하고, 그다음 진공하에서 농축시켰다. 생성된 슬러리를 여과하고, 고형물을 수거하여 물로 세척하고, 건조시켜 23.2g(83%)의 6-(2-클로로페닐)-2-메탄설포닐-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올(설폰 2)을 연황색 고형물로서 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=336, mp=215.1-221.1℃).

실시예 3

단계 1

15㎖의 NMP내 3.1g(8.9mmol)의 설폰 1 및 2.8g(17.7mmol)의 1,4 다이옥사-스피로[4,5]데스-8-일아민(제조에 관해서는 국제특허 공개공보 제 WO 99/01452 호 참조)의 혼합물을 16시간 동안 80℃에서 교반하고, 물로 희석하고, 교반하고, 여과하고, 건조시켜 3.7g의 케탈 중간체를 황색 고형물로서 수득하였다.

단계 2

40㎖의 80% 아세트산 수용액내 3.8g(8.9mmol)의 케탈 용액을 4시간 동안 65℃에서 교반하고, 냉각시키고, 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 분획을 포화 중탄산나트륨 및 염수로 세척하고, 황산나트륨에서 건조하고, 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(구배 용출액: 20-30% 아세톤/헥산)로 정제하여 2.4g의 백색 고형물을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=383).

실시예 4

15㎖ 톨루엔내 0.4g(1.05mmol)의 화합물 3, 0.23㎖(3.2mmol)의 1,3-프로판다이올 및 0.25g(1.3mmol)의 pTsOH·H₂0의 혼합물을 딘-스탁(Dean-Stark) 트랩을 통해 환류하면서 가열하였다. 16시간 후에, 반응물을 실온으로 냉각하고, 중탄산나트륨 수용액에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 감압하에서 농축하였다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(구배 용출액: 2 내지 3% 아세톤/헥산)로 정제하여 0.3g의 백색 고형물을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=441, Mpt. 196.1-196.5℃).

실시예 5

10㎖ 톨루엔내 0.3g(0.78mmol)의 화합물 3, 0.29g(2.4mmol)의 1,1,1-트리스(하이드록시메틸)에탄올 및 0.19g(1mmol)의 p-TsOH·H₂0의 혼합물을 16시간 동안 환류하고, 실온으로 냉각시키고, 중탄산나트륨 수용액에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출액을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 감압하에서 농축하였다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(에틸 아세테이트로 용출함)로 정제하고, 생성물을 HCl/에틸 에테르로 HCl 염으로 전환시켜 0.2g의 백색 고형물을 수득하였다(질량 분석: M⁺=485, Mpt. 180.3-181.2℃).

실시예 6

5㎖의 톨루엔내 0.1g(0.26mmol)의 화합물 3, 0.09g(0.81mmol)의 2-(하이드록시메틸)-1,3-프로판다이올 및 0.065g(0.34mmol)의 p-TsOH·H₂O의 혼합물을 16시간 동안 환류하고, 실온으로 냉각하고, 중탄산나트륨 수용액에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출액을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(에틸 아세테이트로 용출함)로 정제하고, 생성물을 HCl/에틸 에테르를 사용하여 HCl 염으로 전환시켜 0.08g의 백색 고형물을 수득하였다(질량 분석: M⁺=471, Mpt. 146-150℃).

실시예 7

5㎖의 피리딘내 0.2g(0.5mmol)의 화합물 3 및 0.16g(2.4mmol)의 하이드록실아민 하이드로클로라이드의 혼합물을 65℃에서 가열하였다. 2시간 후 반응물을 실온으로 냉각하고 물에 부었다. 생성물을 여과하고, 물로 세척하고, 건조시켜 0.21g의 백색 고형물을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=398, Mpt.>300℃).

실시예 8

10㎖의 50% 에탄올 수용액내 0.26g(0.79mmol)의 화합물 3, 0.077g(1.2mmol)의 KCN 및 0.23g(2.4mmol)의 탄산암모늄의 혼합물을 65℃로 가열하였다. 16시간 후, 반응 혼합물을 10㎖의 물로 희석하고, 환류 온도로 가열하였다. 15분 후에, 반응물을 냉각하고, 생성물을 여과하여 단리하였다. 생성물을 메틸 알콜에 현탁시키고, 과량의 HCl/에틸 에테르를 첨가하였다. 용액을 감압하에서 농축한 후, 잔류물을 에틸 에테르를 사용하여 교반하고, 여과하고, 건조시켜 0.24g의 백색 고형물을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=453, Mpt.=>300℃).

실시예 9

단계 1

5㎖의 NMP내 0.1g(0.3mmol)의 설폰 2 및 0.94g(0.6mmol)의 1,4 다이옥사-스피로[4,5]데스-8-일아민(제조에 관해서는 국제특허 공개공보 제 WO 99/01452 호 참조)의 혼합물을 16시간 동안 80℃에서 교반하고, 실온으로 냉각하고, 중탄산나트륨 포화 수용액에 붓고, 과량의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 추출물을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시켰다. 용액을 감압하에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피(구배 용출액: 40-80% 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 0.1g의 케탈 중간체를 백색 고형물로 수득하였다(질량 분석: MH⁺=413).

단계 2

40㎖의 80% 아세트산 수용액내 2.35g(5.7mmol)의 케탈 용액을 3시간 동안 65℃에서 교반하고, 냉각하고, 물에 붓고, 여과하고, 건조시켜 0.8g의 케톤을 황색 고형물로 수득하였다(질량 분석: MH⁺=369). 샘플을 HCl/에틸 에테르를 사용하여 HCl 염으로 전환시켰다(질량 분석: MH⁺=369, Mpt.=265.5-269.9℃).

실시예 10

30㎖ 톨루엔내 0.2g(0.54mmol)의 화합물 9, 0.2g(1.7mmol)의 1,1,1-트리스(하이드록시메틸)에탄올 및 0.13g(0.7mmol)의 p-TsOH·H₂O의 혼합물을 16시간 동안 환류하고, 실온으로 냉각하고, 여과하였다. 백색 고형물 생성물을 p-톨루엔 설폰산 염(0.19g)으로서 단리하였다(질량 분석: MH⁺=470, Mpt.=223-226.5℃).

실시예 11

3㎖의 1-메틸-2-피롤리디논내 설폰 2(0.45g, 1.3mmol)의 용액에 트랜스-4-아미노사이클로헥산올(0.54g, 4.7mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 70℃에서 교반하고, 냉각하고, 침전물이 형성되기 시작할 때까지 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 현탁액을 여과하고, 고형물을 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 건조시켜 0.4g(78%)의 표제 화합물을 연황색 고형물로서 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=371, mp=191.1-194.3℃). 유리 염기를 에틸 아세테이트에 녹이고 HCl/Et₂O의 1M 용액으로 처리하여 2-(트랜스-4-하이드록시사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올(11)의 염산염을 백색 분말로서 수득하였다. 융점: 263.2-264.0℃.

실시예 12

15㎖의 1-메틸-2-피롤리디논의 설폰 2(1.27g, 3.78mmol)의 용액에 트랜스-1,4-다이아미노사이클로헥산(3.75g, 32.8mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 65℃에서 교반하고, 냉각하고, 80㎖의 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 현탁액을 여과하고, 에틸 아세테이트 및 메탄올로 수회 세척하였다. 고형물을 건조시켜 1.31g(94%)의 2-(트랜스-4-아미노사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올을 회백색 분말(질량 분석: M+H⁺=370)로 수득하였다. 유리 염기를 에틸 아세테이트에 녹이고, HCl/Et₂O의 1M 용액으로 처리하여 표제 화합물의 다이염산염을 백색 분말로 수득하였다. 융점: >300℃.

실시예 13

10㎖의 1-메틸-2-피롤리디논내 설폰 1(0.36g, 1.0mmol)의 용액에 트랜스-1,4-다이아미노사이클로헥산(1.05g, 9.20mmol)을 첨가하였다 반응 혼합물을 20분 동안 80℃에서 교반하고, 냉각하고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 소량의 침전물이 형성되고, 이 현탁액을 여과하였다. 물을 유기층에 첨가하고, 60㎖의 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기층을 모아 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 농축시켜 황색 액체를 수득하였다. 컬럼 크로마토그래피(50:50, 메탄올/메틸렌 클로라이드)로 정제하여 0.25g(62%)의 2-(트랜스-4-아미노사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-8-메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온을 황색 발포체로서 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=384, mp=190.3-191.4℃). 유리 염기를 에틸 아세테이트에 녹이고, HCl/Et₂O의 1M 용액으로 처리하여 표제 화합물의 다이염산염을 백색 분말로 수득하였다. 융점: 224.0-228.5℃.

실시예 14

10㎖의 메틸렌 클로라이드내 아민 13(70mg, 0.18mmol)의 용액에 트라이에틸아민(0.040㎖, 0.29mmol) 및 메탄설폰 무수물(50mg, 0.29mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 진공하에서 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(3:97, 메탄올/메틸렌 클로라이드)로 정제하여 78mg(93%)의 2-(트랜스-4-메탄설포닐아미노사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-8-메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온을 백색 고형물(질량 분석: M+H⁺=462, mp=260.9-261.1℃)로서 수득하였다. 유리 염기를 에틸 아세테이트에 녹이고 HCl/Et₂O의 1M 용액으로 처리하여 백색 분말로서 표제 화합물의 염산염을 수득하였다. 융점: 250.8-252.2℃.

실시예 15

15㎖의 메틸렌 클로라이드내 아민 13(116mg, 0.302mmol)의 용액에 트라이에틸아민(0.050㎖, 0.36mmol) 및 다이메틸설파모일 클로라이드(0.075㎖, 0.696mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 환류하였다. 추가로 0.075㎖ (0.696mmol)의 다이메틸설파모일 클로라이드를 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 추가로 환류하고, 냉각하고, 진공하에서 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(3:97, 메탄올/메틸렌 클로라이드)로 정제하여 90mg(61%)의 2-(트랜스-4-N,N-다이메틸설포닐아미노사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-8-메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온을 백색 고형물(질량 분석: M+H⁺=491, mp=226.5-229.0℃)로 수득하였다. 유리 염기를 메틸렌 크로라이드에 용해시키고, HCl/Et₂O의 1M 용액으로 처리하여 융점이 160.0-168.0℃인 연황색 분말로서 표제 화합물의 염산염을 수득하였다.

실시예 16

본 실시예는 6-(2-클로로페닐)-2-메탄설포닐-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올로부터 출발하여 2-(트랜스-4-메탄설포닐아미도-사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온의 합성방법을 예시한다.

18㎖의 무수 1-메틸-2-피롤리디논내 설폰 2(1.84g, 5.48mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(0.31g, 7.75mmol, 광유내 60% 분산액)를 첨가하였다. 기체 발생이 가라앉을 때까지 반응 혼합물을 10분 동안 교반하고, 그다음 5분에 걸쳐2-(트라이메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(0.10㎖, 5.7mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 교반하고, 그 후에 20㎖의 무수 1-메틸-2-피롤리디논내 트랜스-1,4-다이아미노사이클로헥산(6.24g, 54.6mmol)의 용액을 반응 혼합물에 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 60㎖의 물에 부었다. 생성된 흐린 혼합물을 100㎖의 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 유기층을 모아 150㎖의 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 진공하에서 농축하여 조질의 갈색 액체를 수득하였다. 컬럼 크로마토그래피(5-50: 95-50, 메탄올/메틸렌 클로라이드)로 정제하여 1.66g(61%)의 생성물 16A를 황색 발포체(질량 분석: M+H⁺=500, mp=96.5-105.0℃)로서 수득하였다.

20㎖의 메틸렌 클로라이트내 아민 16A(0.46g, 0.91mmol)의 용액에 트라이에틸아민(0.15㎖, 1.1mmol) 및 메탄설폰산 무수물(0.18g, 1.1mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 19시간 동안 교반하고, 그다음 진공하에서 농축하였다. 컬럼 크로마토그래피(3:97, 메탄올/메틸렌 클로라이드)로 정제하여 0.34g(65%)의 생성물 16B를 백색 고형물(질량 분석: M+H⁺=578, mp=231-232.5℃)로서 수득하였다.

SEM-보호화 피리돈 16B(320mg, 0.553mmol)를 20㎖의 메탄올에서 현탁하고, 10㎖의 10% 염산으로 처리하였다. 반응 혼합물을 26시간 동안 환류하고, 냉각하고, 그다음 침전물이 형성될 때까지 진공하에서 농축하였다. 생성된 현탁액을 여과하고, 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 건조하여 백색 고형물을 수득하였다. 모액을 다시 농축시키고, 여과하여 고형물을 추가로 수득하여 총 221mg (85%)의 2-(트랜스-4-메탄설포닐아미노사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온(16)의 염산염을 백색 고형물(질량 분석: M+H⁺=448, mp>300℃)로서 수득하였다.

실시예 17

본 실시예는 SEM-보호화 피리돈으로부터 출발하여 2-(트랜스-4-N,N-다이메틸설포닐-아미노사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온의 합성방법을 예시한다.

20㎖의 메틸렌 클로라이드내 아민 16A(448mg, 0.889mmol)의 용액에 트라이에틸아민(0.15㎖, 1.1mmol) 및 다이메틸설파모일 클로라이드(0.22㎖, 2.1mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 17시간 동안 환류하였다. 냉각된 반응 혼합물을 진공하에서 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(3:97, 메탄올/메틸렌 클로라이드)로 정제하여 290mg(54%)의 생성물 17A를 백색 고형물(질량 분석: M+H⁺=607, mp=104.3-114.4℃)로서 수득하였다.

SEM-보호화 화합물 17A(270mg, 0.445mmol)를 30㎖의 메탄올에 현탁시키고, 20㎖의 10% 염산으로 처리하였다. 반응 혼합물을 2일 동안 환류하고, 냉각하고, 침전물을 형성될 때까지 진공하에서 농축시켰다. 생성된 현탁액을 여과하고, 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 그다음 건조시켜 205mg(90%)의 2-(트랜스-4-다이메틸설포닐아미도사이클로헥실-아미노)-6-(2-클로로페닐)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온(17)의 염산염을 백색 고형물(질량 분석: M+H⁺=477, mp=262.2-262.5℃)로서 수득하였다.

실시예 18

화합물 11(300mg, 0.8mmol) 및 96% 폼산(3㎖)의 혼합물을 3시간 동안 60℃에서 교반하고, 그다음 25℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축하고, 에테르로 분쇄하고, 여과하고, 건조하여 320mg의 6-(2-클로로페닐)-2-(4-트랜스-폼일옥시-사이클로헥실아미노)-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=399, mpt.>300℃).

실시예 19

메틸렌 클로라이드(3㎖)내 화합물 11(300mg, 0.8mmol), 아세트산 무수물(0.23㎖, 2.4mmol) 및 피리딘(0.26㎖, 3.2mmol)의 현탁액을 3일 동안 환류하였다. 반응물을 여과하고, 침전물을 97:3의 CH₂Cl₂/MeOH를 사용하여 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 158mg의 정제된 생성물을 수득하였다. 추가로 염산(1.0M/Et₂O, 2.00당량)을 첨가하여 염을 수득하고, 상기 염을 여과하고, 건조하여 155mg의 6-(2-클로로페닐)-2-(4-트랜스-아세틸옥시-사이클로헥실아미노)-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온(19)을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=413, mpt.>300℃).

실시예 20

THF(5㎖)내 화합물 11(250mg, 0.68mmol) 및 4-(다이메틸아미노)피리딘 (DMAP)(6.8mg, 0.06mmol)의 현탁액을 빙욕내에서 냉각하고, 다이메틸피로카보네이트(0.7㎖, 6.8mmol)를 첨가하고, 혼합물을 18시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응물을 여과하고, 침전물을 98:2의 CH₂Cl₂/MeOH를 사용하여 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 33mg의 정제된 생성물을 수득하였다. 염산(1.0M/Et₂0, 2.0당량)을 첨가하여 염을 형성하고, 상기 염을 여과하고, 건조시켜 34mg의 6-(2-클로로페닐)-2-(4-트랜스-메톡시카보닐옥시-사이클로헥실아미노)-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온(20)을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=429).

실시예 21

메틸렌 클로라이드(5ml)내 화합물 11(308mg, 0.83mmol)의 현탁액을 빙욕에서 냉각하고 클로로설포닐아이소시아네이트(0.08㎖, 0.87mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 25℃에서 교반하고, 그다음 물(0.5㎖)로 처리하였다. 2상 혼합물을 8시간 동안 교반하고, 여과하고, 침전물을 97:3의 CH₂Cl₂/MeOH를 사용하여 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 108mg의 순수한 생성물을 수득하였다. 염산(1.0M/Et₂O, 2.0당량)을 첨가하여 염을 수득하고, 상기 염을 여과하고, 건조하여 94mg의 6-(2-클로로페닐)-2-(4-카바모일옥시사이클로-헥실아미노)-8-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온(21)을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=414, mpt. 291.0-293.5℃).

실시예 22

메틸렌 클로라이드(5㎖)내 화합물 38(실시예 38 참조)(190mg, 0.49mmol)의 현탁액을 빙욕내에서 냉각하고, 클로로설포닐아이소시아네이트(0.05㎖, 1.01mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 18시간 동안 25℃에서 교반하고, 그다음 물(0.5㎖)로 처리하였다. 2상 혼합물을 8시간 동안 교반하고, 여과하고, 침전물을 97:3의 CH₂Cl₂/MeOH를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 108mg의 정제된 생성물을 수득하였다. 염산(1.0M/Et₂O, 2.0당량)을 첨가하여 염을 수득하고, 상기 염을 여과하고, 건조하여 94mg의 생성물 22를 수득하였다(질량 분석: MH⁺=428, mpt. 234.7-235.4℃).

실시예 23

설폰 2(500mg, 1.5mmol)를 1-하이드록시메틸-사이클로펜틸아미노 (686mg, 5.96mmol) 및 1-메틸-2-피롤리디논(1㎖)과 혼합하였다. 혼합물을 3시간 동안 100℃로 가열하고, 그다음 실온으로 냉각시켰다. 메탄올(3㎖)을 첨가하였다. 현탁액을 10분 동안 교반하고, 여과하고, 침전물을 메탄올로 완전히 세척하고, 건조하고, 에틸 아세테이트에서 현탁시켰다. 염산(1.0M/Et₂O, 2.0당량)을 첨가하여 염을 수득하고, 상기 염을 여과하고, 건조시켜 235mg의 생성물 23을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=371, mpt. 290-293℃).

실시예 24

설폰 2(250mg, 0.71mmol)를 4-아미노메틸-사이클로헥산올(630mg, 3.4mmol) 및 1-메틸-2-피롤리디논(0.5㎖)과 혼합하였다. 혼합물을 3시간 동안 95℃로 가열하고, 그다음 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 96:4의 CH₂Cl₂를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피하여 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 고형물이 될 때까지 농축하고, 상기 고형물을 에틸 아세테이트에 분산시켰다. 염산(1.0M/Et₂O, 2.0당량)을 첨가하여 염을 수득하고, 상기 염을 여과하고, 건조하여 85mg의 생성물 24를 수득하였다(질량 분석: MH⁺=385, mpt. 205-213℃).

실시예 25

설폰 1(500mg, 1.42mmol)을 4-아미노메틸-사이클로헥산올(630mg, 3.4mmol) 및 1-메틸-2-피롤리디논(0.5㎖)과 혼합하였다. 혼합물을 3시간 동안 95℃로 가열하고, 그다음 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 96:4의 CH₂Cl₂를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피하여 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 고형물이 될 때까지 농축하고, 상기 고형물을 에틸 아세테이트에 현탁시켰다. 염산(1.0M/Et₂O, 2.0당량)을 첨가하여 염을 수득하고, 상기 염을 여과하고, 건조시켜 79mg의 생성물 25를 수득하였다(질량 분석: MH⁺=399, mpt. 148-151.5℃).

실시예 26

THF(5㎖)내 화합물 38(350mg, 0.9mmol) 및 4-(다이메틸아미노)피리딘(DMAP) (55.5mg, 0.45mmol)의 현탁액을 빙욕에서 냉각시키고, 다이메틸피로카보네이트(0.3㎖, 2.8mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 18시간 동안 25℃에서 교반하고, 여과하고, 침전물을 99:1의 CH₂Cl₂/MeOH를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 205mg의 정제된 생성물을 수득하였다. 염산 (1.0M/Et₂O, 2.0당량)을 첨가하여 염을 수득하고, 상기 염을 여과하고, 건조시켜 200mg의 생성물 26을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=443, mpt 213.9-214.4℃).

실시예 27

실온의 10㎖ 메틸렌 클로라이드내 화합물 38(0.36g, 0.94mmol)의 용액에 피리딘 (0.60g, 7.6mmol) 및 아세트산 무수물(0.58g, 5.6mmol)을 순서대로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3일 동안 교반하고, 그다음 감압하에서 농축하였다. 생성된 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 순수한 생성물로 250㎎의 회색 고형물을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=427, mpt. 200.9-201.2℃).

실시예 28

6㎖ 폼산내 화합물 38(0.34g, 0.89mmol)의 용액을 60℃에서 3일 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압하에서 농축하였다. 생성된 발포체를 헥산으로 희석하고, 농축시켜 고형물을 수득하였다. 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 분말형 갈색 고형물로서 340㎎의 화합물 28을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=413, mpt. 196.1-196.6℃).

실시예 29

1,4 다이옥사-스피로[4,5]데스-8-일아민(제조에 관해서는 국제특허 공개공보 제WO 99/01452 호 참조)(0.157g, 1.00mmol), N-메틸피롤리디논(1㎖) 및 설폰 1 (0.350g, 1.00mmol)의 혼합물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 포화 염수로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조하고, 진공하에서 증발시켰다. 조질의 생성물을 실라카겔상 플래쉬 크로마토그래피(0-3% 메탄올/다이클로로메탄)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축하였다. 농축물의 분획(0.100g)을 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조할 때까지 재증발시키고, 그다음 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.070g의 화합물 29의 염산염을 수득하였다(M⁺=427).

5㎖의 THF내 나머지 유리 염기(0.167g, 3.56mmol)에 2N 염산 수용액(1㎖)을 첨가하였다. 6시간 후, 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액에 붓고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 포화 염수로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조하고, 진공하에서 증발시켰다. 잔류물을 실리카겔상 플래쉬 크로마토그래피(20-30% 아세톤/헥산)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시켰다. 생성물을 메탄올내 용해시키고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조할 때까지 재증발시키고, 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조하여 0.102g의 염산염 화합물을 수득하였다(M⁺=382).

실시예 30

에틸 4-아미노-1-피페리딘카복실레이트(1.0㎖, 5.83mmol)내 설폰 1 (0.500g, 1.43mmol)의 용액을 3시간 동안 120℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 붓고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 모아 황산마그네슘으로 건조하고, 진공하에서 농축시켰다. 잔류물을 실라카겔상 플래쉬 크로마토그래피(20-30% 아세톤/헥산)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시켰다.

정제된 에틸 카바메이트(0.617g, 1.40mmol)를 수산화칼륨 에탄올계 고온 용액(6.58g, 117mmol; 37㎖ EtOH)에 첨가하고, 3시간 동안 80℃에서 교반하였다. 그다음, 반응 생성물을 빙욕에서 냉각시키고, 시트르산 수용액(6.6g, 31.4mmol ; 37㎖ H₂O)으로 반응 중지시켰다. 생성된 용액을 진공하에서 농축시켜 진한 수용액을 수득하고, 상기 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 탄산나트륨으로 건조하고, 진공하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔상 플래쉬 크로마토그래피(10-30% 메탄올/다이클로로메탄)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축하여 화합물 30B를 수득하였다.

피페리딘 생성물의 분획을 메탄올에 용해하고, 1당량의 1N HCl/에테르로 처리하였다. 용액을 진공하에서 농축시켰다. 무수 잔류물을 에틸 에테르로 세척하고, 건조시켜 화합물 30B의 염산염을 수득하였다(mp>300.0℃).

2㎖ DMF내 화합물 30B(0.100g, 0.270mmol) 및 브로모아세트아마이드(0.100g, 0.724mmol)의 용액을 수시간에 걸쳐 120℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 실리카겔상 플래쉬 크로마토그래피(3-5, 10% [1:9 수산화암모늄/메탄올]/다이클로로메탄)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시키고, 메탄올에서 용해하고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하였다. 용액을 농축하고, 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.117g의 화합물 30A의 염산염(mp 76.3-136.5, M⁺. 427)을 수득하였다.

실시예 31

1㎖ DMF내 화합물 30B(0.100g, 0.270mmol), 브로모아세토나이트릴(0.091㎖, 1.35mmol) 및 탄산나트륨(0.114g, 1.35mmol)의 혼합물을 실온에서 교반하였다. 그다음, 혼합물을 실리카겔상 플래쉬 크로마토그래피(2-5% [1:9 수산화암모늄/메탄올]/다이클로로메탄)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시켜 0.086g의 목적하는 생성물을 수득하였다. 유리 염기 분획(0.016g)을 메탄올내에 용해시키고 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하였다. 용액을 농축하고, 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.012g의 화합물 31의 염산염(mp 228.3-228.9; M⁺. 409)을 수득하였다.

실시예 32

1㎖의 DMF내 화합물 30B(0.050g, 0.135mmol) 및 메틸 브로모아세테이트(0.030㎖, 0.317mmol)의 혼합물을 실온에서 교반하였다. 혼합물을 실리카겔상 플래쉬 크로마토그래피(10-40% 메탄올/다이클로로메탄 + 1% 수산화암모늄)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 메탄올에 용해시키고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하였다. 혼합물을 농축하고, 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조하여 화합물 32의 염산염(mp 150-168; M⁺. 442)을 수득하였다.

실시예 33

화합물 30B(0.050g, 0.135mmol)를 트라이메틸실릴 아이소시아네이트(0.021㎖, 0.149mmol)를 함유하는 1㎖ THF에 녹이고, 실온에서 3시간 동안 교반하고, 진공하에서 증발시켰다. 잔류물은 실리카겔상 플래쉬 크로마토그래피(10% [1:9 수산화암모늄/메탄올]/다이클로로메탄)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시켰다. 최종 생성물을 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조할 때까지 재증발시키고, 그다음 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 화합물 33의 염산염(mp 192.0-202.0; M⁺. 413)을 수득하였다.

실시예 34

이미다졸(0.28g, 4.06mmol) 및 탄산나트륨(0.43g, 4.06mmol)을 DMF (0.63㎖, 8.11mmol)와 혼합하고, 여기에 클로로트라이메틸실레인(0.63㎖, 4.06mmol)을 적가하였다. 슬러리를 실온에서 20분 동안 교반하고, 그다음 무수 분말 형태로 화합물 30B(0.50g, 1.35mmol)fmf 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하고, 그다음 물에 붓고, 다이클로로메탄 및 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출액을 모아 포화 염수로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조하고, 진공하에서 증발시졌다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(2-3% 메탄올/다이클로로메탄)로 정제하고, 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시켰다. 최종 생성물을 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조할 때까지 재증발시키고, 그다음 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.259g의 화합물 34의 염산염(mp 105.0-115.0℃, M⁺. 427)을 수득하였다.

실시예 35

에틸 카바메이트를 전술한 바와 같은 방식으로 상응하는 벤질 설폰으로부터 제조하고, 절단하여 요오도트라이메틸실레인과 함께 피페리딘 중간체 35A(mp>300.0)를 수득하였다.

화합물 35A (0.030g, 0.084mmol)의 유리 염기의 분획을 1㎖ DMF에 브로모아세토나이트릴 (0.009㎖, 0.126mmol) 및 탄산나트륨(0.015g, 0.141mmol)과 함께 용해시키고, 3시간 동안 실온에서 교반하고, 그다음 실리카겔상 플래쉬 크로마토그래피(1-10% [1:9 수산화암모늄/메탄올]/다이클로로메탄)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시켰다. 최종 생성물을 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조할 때까지 재증발시키고, 그다음 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.006g의 화합물 35B의 염산염(M⁺. 395)을 수득하였다.

실시예 36

화합물 35A의 유리 염기의 분획(0.050g, 0.141mmol)을 2-클로로-N,N-다이메틸아세트아마이드(0.026g, 0.211mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민(0.037㎖, 0.211mmol)과 함께 1㎖ DMF에 용해시키고, 3시간 동안 60℃에서 교반하고, 2시간 동안 120℃에서 교반하고, 그다음 실리카겔상 플래쉬 크로마토그래피(3-20% [1:9 수산화암모늄/메탄올]/다이클로로메탄)하여 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시켰다. 최종 생성물을 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 세척하고, 건조할 때까지 재증발시키고, 그다음 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.006g의 화합물 36의 염산염(mp 103.0-120.0℃)을 수득하였다.

실시예 37

화합물 11을 칼륨 3급-부톡사이드(0.95g, 8.42mmol) 및 메틸 요오다이드(0.11㎖, 1.68mmol)를 포함하는 5㎖ 테트라하이드로퓨란에 녹였다. 실온에서 4시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 플래쉬 크로마토그래피(1-3% 메탄올/다이클로로메탄; 25-35% 아세톤/헥산)로 정제하여 전술한 바와 같은 2종의 생성물(즉, 화합물 37A 및 37B)을 수득하였다. 이들을 개별적으로 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조할 때까지 재증발시키고, 그다음 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.157g의 비스-메틸화 생성물(화합물 37A)(mp 182.3-183.1℃) 및 0.069g의 모노메틸화 생성물(화합물 37B)(mp 218.2-218.5℃)을 수득하였다.

실시예 38

설파이드 1a(317mg, 1.0mmol)를 NMP(0.3㎖)에 용해하고, 상기 용액에 트랜스 4-아미노사이클로헥산올(570mg, 5mmol)을 첨가하였다. 반응물을 12시간 동안 120℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 물(50㎖)을 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 물로 2회 세척하고, 진공하에서 농축시켰다. 잔류물을 10:90MeOH/CH₂Cl₂를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 농축시켜 발포체를 수득하였다. 발포체를 MeOH에 현탁시키고, 그다음 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)을 첨가하여 화합물 38의 염을 수득하였다. 용매를 증발시켰다. 생성된 고형물을 Et₂O/MeOH의 혼합물로 희석하고, 여과하고, 건조시켰다. 수율: 282mg, Mp 163.4-171.1℃, MS (M+H)⁺ 385.

실시예 39

설폰 1(350mg, 1.0mmol)을 1-아미노-1-사이클로펜탄 메탄올(345mg, 3.0mmol) 및 NMP(0.3㎖)와 혼합하고, 1시간 동안 120℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 물로 2회 세척하고, 진공하에서 농축시켜 조질의 생성물을 수득하였다. 잔류물을 10:90MeOH/CH₂Cl₂를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 모아 진공하에서 증발시켜 발포체로서 목적하는 생성물을 수득하였다. 잔류물을 MeOH에서 현탁시키고, 염산(1.0M/Et₂O, 1당량)을 첨가하고, 20분 동안 교반하고, 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 1시간 동안 MeOH/Et₂O의 혼합물과 함께 교반하고, 여과하여 백색 고형물로서 생성물 39를 수득하였다. 수율: 263mg, Mp 213.7-214.6℃, MS (M+H)⁺ 385.

실시예 40

설폰 1(350mg, 1.0mmol)을 1-아미노-1-사이클로헥산 메탄올(387mg, 3.0mmol) 및 NMP(0.3㎖)와 혼합하고, 90분 동안 120℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 MgSO₄로 건조하고, 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 10:90MeOH/CH₂Cl₂를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피함으로써 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 모아 감압하에서 증발시켜 목적하는 생성물을 발포체로서 수득하였다. 발포체를 MeOH에 현탁시키고, 염산을 첨가하였다(1.0M Et₂O, 1.0당량). 혼합물을 20분 동안 교반하고, 진공하에서 증발시키고, MeOH/Et₂O의 혼합물과 함께 2시간 동안 교반하고, 여과하고, 건조시켜 백색 고형물로서 생성물 40을 수득하였다. 수율: 242mg, Mp 185-188.6℃, MS (M+H)⁺ 399.

실시예 41

설폰 1(350mg, 1.0mmol)을 시스/트랜스 에틸 아미노사이클로헥산카복실레이트(520mg, 3mmol)와 혼합하고, 30분 동안 100℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 실온으로 냉각하고, 65:35의 헥산/아세톤을 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 모아 농축시켜 발포체를 수득하였다. 잔류물을 MeOH에 현탁시키고, 염산(1.0M/Et₂O 1.0당량)의 용액을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하고, 용액을 증발시켰다. 생성된 잔류물을 MeOH/Et₂O의 혼합물과 함께 1시간 동안 교반하고, 여과하여 백색 고형물로서 생성물 41을 수득하였다. 수율: 414mg, Mp 192.1-198.3℃, MS (M+H)⁺ 441.

실시예 42

EtOH내 화합물 41(300mg, 0.67mmol)의 용액에 염산 농축 수용액(3.0㎖)을 첨가하였다. 생성된 용액을 24시간 동안 환류하였다. 추가로 염산을 첨가하고(1.0㎖), 용액을 추가로 24시간 동안 환류하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 건조될 때까지 증발시키고, 고도의 진공하에서 건조하여 백색 고형물로서 화합물 42의 염산염을 수득하였다. 수율: 225mg, Mp: 263.6-264.2℃, MS: (M+H)⁺ 413.

실시예 43

설폰 1(350mg, 1.0mmol)을 4-아미노사이클로헥실메탄올(1:1 시스/트랜스)(문헌["Chem. Ber", 96, 1963, 2377-2386] 참조)(400mg, 3.3mmol) 및 NMP (0.4㎖)와 혼합하고 1시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 물로 5회 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 농축시켜 오일로서 조질의 생성물을 수득하였다. 잔류물은 70:30의 헥산/아세톤을 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피하여 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획을 모아 감압하에서 농축시켜 발포체로 생성물을 수득하였다. 상기 물질을 MeOH에 현탁시키고, 염산(1.0M/Et₂O, 1당량)으로 산성화하고, 30분 동안 실온에서 교반하고, 감압하에서 농축시켰다. 생성된 잔류물을 MeOH/Et₂O의 혼합물로 2시간 동안 교반하고, 여과하고, 건조시켜 백색 고형물로서 화합물 43의 염산염을 수득하였다. 수율: 335mg, Mp 153.6-157℃, MS (M+H)⁺ 399.

실시예 44

단계 1

NMP(35㎖)내 화합물 11(3.0g, 8.1mmol)의 현탁액에 3급-부틸다이메틸실릴클로라이드(1.7g, 11.3mmol) 및 이미다졸(1.2g, 17.6mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 50℃에서 교반하고, 실온으로 냉각하고, 물(150-200㎖)에 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 여과하여 백색 고형물로서 화합물 44A를 수득하였다. 수율: 3.71, Mp 289.9-291.4℃, MS (M+H)⁺ 485.

단계 2: 알킬화

NMP내 실릴 보호화 알콜 44A(483mg, 1.0mmol)의 현탁액에 나트륨 하이드라이드(44mg, 1.1mmol(60% 오일 분산액))을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25분 동안 교반하고, 그 후에 2-(요오도에톡시)트라이-아이소프로필실레인(328mg, 1.0mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 물로 5회 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 농축시켜 오일로서 실릴 보호화 중간체 44B를 수득하였다. 잔류물은 25:75 아세톤/헥산을 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 오일로서 생성물 44B를 수득하였다. 수율: 650mg, MS (M+H)⁺ 685.

단계 3: 탈보호화

THF(15㎖)내 화합물 44B(650mg, 0.94mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 플루로라이드(THF내 1.0M, 1.1당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 12시간 동안 실온에서 교반하고, 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 MgSO₄상에서 건조하고, 농축시켜 오일로서 생성물을 수득하였다. 잔류물을 90:10 CH₂Cl₂/MeOH를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 오일로서 생성물 44를 수득하였다. 상기 생성물을 MeOH에 현탁시키고, 염산(1.0M/Et₂O, 1당량)으로 산성화하고, 20분 동안 교반하고, 농축시키고, 다시 Et₂O/MeOH의 혼합물로 희석하고, 2시간 동안 교반하였다. 용액을 여과하여 백색 고형물로서 화합물 44의 염산염을 수득하였다. 수율: 270mg, MP210.5-212.0℃, MS (M+H)⁺ 415.

실시예 45

단계 1: 알킬화

NMP내 실릴 보호화 알콜 44A(483mg, 1.0mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(44mg, 1.1mmol, 60% 오일 분산액)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 25분 동안 교반하였다. 상기 용액에 요오도아세토나이트릴(0.167mg, 1.0mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 물로 5회 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 농축시켜 오일을 수득하였다. 이러한 잔류물을 25:75 아세톤/헥산으로 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고형물로서 생성물을 수득하였다. 수율 480mg, Mp 193-195.8℃, MS (M+H)⁺ 524

단계 2: 탈보호화

THF내 전술한 단계 1의 생성물(480mg, 0.92mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 플루오라이드(1.0M/THF, 1.1당량)를 첨가하고, 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 MgSO₄로 건조하고, 농축시켜 오일로서 생성물을 수득하였다. 잔류물을 90:10 CH₂Cl₂/MeOH를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고형물로서 생성물 45를 수득하였다. 수율: 260mg, Mp 245.8-246.8℃, MS (M+H)⁺ 410.

MeOH내 생성물 45의 현탁액에 염산(1.0M/Et₂O, 1당량)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 농축시켰다. 잔류물은 Et₂O/MeOH의 혼합물내에서 2시간 동안 교반하고, 여과하여 백색 고형물로서 화합물 45의 염산염을 수득하였다. 수율: 255mg, Mp 232.1-233.4℃, MS (M+H)⁺ 410.

실시예 46

단계 1: 알킬화

NMP내 실릴 보호화 알콜 44A(483mg, 1.0mmol)의 현탁액에 나트륨 하이드라이드(44mg, 1.1mmol, 60% 오일 분산액)를 첨가하고, 생성된 용액을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물에 벤질 브로마이드(0.12㎖, 1.0mmol)를 첨가하고, 실온에서 12시간 동안 교반하고, 그 이후에 반응 혼합물을 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 물로 5회 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 농축하고, 25:75 아세톤/헥산을 사용하여 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고형물로서 생성물을 수득하였다. 수율: 502mg, Mp 188.8-191.0℃, MS (M+H)⁺ 575.

단계 2: 탈보호화

THF내 전술한 단계 1로부터 수득된 물질(480mg, 0.84mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 플루오라이드(1.0M/THF, 1.1당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하고, 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 MgSO₄로 건조하고, 농축하고, 10:90MeOH/CH₂Cl₂를 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고형물로서 생성물 46을 수득하였다. 수율: 320mg, Mp 119-131℃, MS (M+H)⁺ 461.

MeOH내 전술한 물질의 용액에 염산(1.0M/Et₂O, 1당량)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 20분 동안 교반하고, 농축하여 발포체를 수득하였다. 발포체를 Et₂O/MeOH의 혼합물에 용해하고, 2시간 동안 교반하고, 여과하여 백색 고형물로서 화합물 46의 염산염을 수득하였다. 수율: 305mg, Mp 202-206℃, MS (M+H)⁺ 461.

실시예 47

단계 1: 알킬화

NMP내 실릴 보호화 알콜 44A의 현탁액에 나트륨 하이드라이드(44㎎, 1.1당량(60% 오일 분산액))를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 25분 동안 교반하였다. 상기 용액에 메틸 브로모아세테이트(0.095㎖, 1.0mmol)를 첨가하고, 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 물로 5회 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 농축시키고, 25:75 아세톤/헥산을 사용하여 실라카겔상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고형물로 생성물을 수득하였다. 수율: 480㎎, Mp 182-187℃, MS(M+H)⁺ =557.

단계 2: 탈보호화

테트라하이드로퓨란(15㎖)내 전술한 단계 1에서 수득된 물질(480㎎, 0.86mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 플루오라이드(1.0M/THF, 1당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하고, 물에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 모아 MgSO₄로 건조하고, 농축하여 발포체로서 생성물 47을 수득하였다. 수율: 225mg, Mp 118-130℃, MS (M+H)⁺ 443.

실시예 48

MeOH(4.0㎖)내 화합물 47(210mg, 0.475mmol)의 현탁액에 수산화나트륨(1.0N NaOH의 0.477㎖)의 수용액을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5일 동안 실온에서 교반하고, 건조할 때까지 증발시켰다. 잔류물을 Et₂O로 희석하고, 2시간 동안 교반하고, 여과하고, 건조하여 연황색 고형물로서 생성물 48을 수득하였다. 수율: 205mg, Mp 260-265℃, MS (M+H)⁺ 429.

실시예 49

3㎖의 N-메틸피롤리디논내 4-메톡시벤젠설폰아마이드(0.417g, 2.23mmol)의 용액에 60% 나트륨 하이드라이드(107mg, 2.68mmol)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 설폰 1(189mg)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 6시간 동안 130℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물(50㎖)에 첨가하였다. 생성된 고형물을 여과하고, 물, 에틸 아세테이트 및 메탄올로 순차적으로 세척하고, 진공하에서 건조시켜 생성물 49(190mg)를 수득하였다. mp>300℃; ms 457 (M+H)⁺.

실시예 50

6-(2-클로로페닐)-2-(N-2-시아노에틸피페리딜-4-아미노)-피리도[2,3-d]-피리미딘-7-올

단계 1:4-트라이플루오로아세트아미도-1-벤질피페리딘의 제조

130㎖의 다이클로로메탄내 25g(131mmol)의 4-아미노-1-벤질피페리딘 및 15.36g(152mmol)의 트라이에틸아민의 냉각된(5℃) 용액에, 30 내지 45분 동안 반응 온도가 5 내지 10℃를 유지하는 속도로 트라이플루오로아세트산 무수물 28g(18.8㎖, 133mmol)을 적가하였다. 적가를 마친 후, 반응 혼합물을 추가로 15분 동안 교반하였다. 용매 및 휘발성 물질을 감압하에서 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트 100㎖에 용해하고, 100㎖의 헥산으로 희석하였다. 용액을 실라카겔의 덩어리(50g)에서 여과하고, 헥산내 50% 에틸 아세테이트 1리터로 세척하였다. 여액을 감압하에서 농축하여 37g(정량적인 수율)의 목적하는 4-트라이플루오로아세트아미도-1-벤질피페리딘(연황색 고형물)을 수득하였다.

단계 2: 4-트라이플루오로아세트아미도피페리딘의 제조

질소 대기하에서 500㎖ 들이 3구 둥근바닥 플라스크를 탄소상 10% 팔라듐 4g 및 메탄올 100㎖로 채웠다. 현탁액을 5℃로 냉각하고, 10g의 폼산 암모늄을 배치에 첨가하였다(기체 발생이 관찰되었다). 그다음, 100㎖의 메탄올내 10g(35mmol)의 4-트라이플루오로아세트아미도-1-벤질피페리딘의 용액을 점차적으로 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 2.5시간 동안 환류하고, 그다음 밤새 실온에서 정치시켰다. 질소 분위기하에서 촉매를 셀라이트를 통해 여과하고, 에탄올로 세척하였다. 여액을 감압하에서 농축시켜 6.9g(정량적인 수율)의 표제 화합물을 연황색 고형물로 수득하였다.

단계 3: N-(2-시아노에틸)-4-아미노피페리딘의 제조

10㎖의 THF내 3g(15.3mmol)의 4-트라이플루오로아세트아미도피페리딘, 3g(4.25㎖, 30.6mmol)의 트라이에틸아민 및 3㎖(45.9mmol)의 아크릴로나이트릴의 혼합물을 17시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매 및 휘발성 물질을 감압하에서 증발하였다. 잔류물을 20㎖의 메탄올 및 4㎖의 30% NH₄OH에 용해하고, 용액을 5시간 동안 환류하였다. 용매를 감압하에서 증발하고, 잔류물은 우선 500㎖의 다이클로로메탄, 그다음 500㎖의 0.5%의 메탄올/다이클로로메탄, 그다음 1000㎖의 9:1:0.1의 다이클로로메탄/메탄올/수산화암모늄으로 용출하는 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 0.7g(30% 수율)의 N-(2-시아노에틸)-4-아미노피페리딘을 수득하였다.

단계 4: 6-(2-클로로페닐)-2-(N-2-시아노에틸피페리딜-4-아미노)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올의 제조

0.5㎖의 NMP내 0.2g(0.58mmol)의 설폰 2,6-(2-클로로페닐)-2-메탄설포닐-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올 및 0.18g(1.16mmol)의 N-(2-시아노에틸)-4-아미노피페리딘의 혼합물을 2.5시간 동안 60℃의 오일 배쓰에서 가열하고, 냉각하고, 5㎖의 다이클로로메탄으로 희석하였다. 용액을 200㎖의 다이클로로메탄을 사용하여 40g의 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 NMP를 용출시키고, 그다음 5% 메탄올/다이클로로메탄을 사용하여 생성물을 용출시켰다. 생성물 함유 분획을 모아 농축하였다. 에테르를 생성물에 첨가하고, 분쇄한 후, 고형물을 여과하고, 에테르로 세척하고, 건조하여 165㎎(수율: 70%)의 목적하는 생성물을 수득하였다. 이 고형물중 약 50㎎을 3㎖의 다이클로로메탄에 용해하였다. 1㎖의 1M HCl/에테르 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에서 증발시켜 54㎎의 화합물 50을 수득하였다(질량 분석: MH⁺ = 408, mpt. 217.5-219.5℃).

실시예 51

2㎖ NMP내 2g(5.8mmol)의 6-(2-클로로페닐)-2-메탄설포닐피리도[2,3-d]피리미딘-7-올 및 1.97g(11.4mmol)의 에틸 4-아미노-1-피페리딘 카복실레이트의 혼합물을 1.5시간 동안 60℃ 오일 배쓰에서 가열하였다. 현탁액은 곧바로 투명한 갈색 용액으로 변했다. 혼합물을 150㎖의 물과 150㎖의 에틸 아세테이트 사이에서 분배시켰다. 수성층은 150㎖의 에틸 아세테이트로 1회 이상 추출하였다. 에틸 아세테이트 용액을 모아 150㎖의 물로 2회 세척하고, 그다음 염수로 세척하고, 건조하고, 여과하고, 여액을 감압하에서 농축하였다. 에테르에서 분쇄한 후, 감압하에서 용매를 제거하여 2.5g(정량적인 수율)의 화합물 51을 단리하였다. 약 0.13g의 상기 물질을 1.5㎖의 에틸 아세테이트에 용해하고, 에테르내 1M HCl 1㎖를 첨가하였다. 현탁액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 에테르로 희석하고, 여과하고, 에테르로 세척하여 0.12g의 화합물 51의 염산염을 수득하였다(질량 분석:M⁺=441.9, mpt. 190-191℃).

실시예 52

0.3g(0.8mmol)의 6-(2-클로로페닐)-2-(피페리딜-4-아미노)-피리도[2,3-d] 피리미딘-7-올, 0.3g(2.4mmol)의 2-브로모에탄올, 0.22㎖(1.6mmol)의 트라이에틸아민, 1.5㎖의 NMP 및 10㎖의 톨루엔의 혼합물을 2.5시간 동안 100℃의 오일 배쓰에서 교반하였다. 혼합물을 75㎖의 에틸 아세테이트 및 100㎖의 물로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트(2×75㎖)로 추출하였다. 그다음, 유기 용액을 모아 염수로 세척하고, 여과하고, 감압하에서 농축하였다. 잔류물을 소량의 메탄올에 용해하고, 8.5:1.5:0.2의 에틸 아세테이트/메탄올/수산화암모늄을 사용하여 40g의 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 0.115g의 백색 고형물(수율 35%)을 수득하였다. 이것을 2㎖의 EtOAc에 용해하고, 에테르내 1M HCl 2㎖를 첨가하였다. 현탁액을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 여과하고, 건조시켜 0.13g의 화합물 52을 수득하였다(질량 분석: MH⁺ = 414, mpt. 265.9-266.6℃).

실시예 53

5㎖ THF내 0.2g(0.54mmol)의 6-(2-클로로페닐)-2-(피페리딜-4-아미노)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올, 0.11g(1.6mmol)의 메틸 비닐 설폰 및 0.5㎖의 트라이에틸아민의 혼합물을 17시간 동안 실온에서 교반하였다. 트라이에틸아민 및 THF를 감압하에서 증발시켰다. 잔류물은 75㎖의 물 및 100㎖의 에틸 아세테이트에 분배하였다. 층을 분리한 후, 수성층을 다시 75㎖의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 용액을 모아 물, 염수로 세척하고, 건조하고, 여과하였다. 여액을 감압하에서 농축하였다. 조질의 생성물은 90:10:5의 다이클로로메탄/에틸 아세테이트/수산화암모늄을 사용하여 실라카겔 40g상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 회수된 생성물을 1.5㎖의 에틸 아세테이트에 용해하고, 2㎖의 에테르내 1M HCl를 첨가하였다. 현탁액을 1시간 동안 교반하고, 여과하고, 에테르로 세척하여 165㎎의 화합물 53의 염산염(HCl 염)을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=476, mpt. 204.6-205.6℃).

실시예 54

4-아미노-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-피페리딘, 54A의 제조

아세톤(80㎖)내 4-N-BOC-아미노피페리딘(시판중임)(5g, 24.96mmol), 2,2,2-트라이플루오로에틸 트라이클로로메탄 설포네이트(7.03g, 1당량) 및 탄산칼륨(4.1g, 1.2당량)의 용액을 17시간 동안 환류하에서 교반하였다. 용매를 감압하에서 40℃에서 제거하고, 에틸 아세테이트(250㎖) 및 물(150㎖)을 잔류물에 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 물(1×150㎖) 및 염수(1×200㎖)로 순차적으로 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켜 어두운 색상의 고형물을 수득하였다. 용출액으로 헥산내 15% 에틸 아세테이트를 사용하여 실라카겔상 크로마토그래피로 정제하여 4-N-BOC-아미노-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-피페리딘(4.45g)을 회백색 분말로 수득하였다(m.p. 99.2-99.8℃, (M+H)⁺=283). 상기 아민을 다이옥산(80㎖)에 녹이고, HCl 기체를 10분 동안 용액을 통해 버블링하였다(곧바로 침전물이 형성됨). 반응 용기를 단단히 막고, 1.5시간 동안 교반하고, 농축하여 백색 분말을 수득하였다. 이러한 HCl 염을 메탄올내 0.5M 나트륨 메톡사이드 용액 42㎖에 용해하고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그다음, 용액을 중간 프리츠를 통해 여과하고, 여액을 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트(100㎖)로 희석하고, 고형물을 깨고, 혼합물을 여과하였다. 여액을 농축하여 4-아미노-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-피페리딘, 54A를 어두운 색상의 오일(1.0g)로서 수득하였다. (M+H)⁺=183.

설폰 2(200mg, 0.614mmol), 화합물 54A(224mg, 2당량) 및 N-메틸 피롤리디논(0.3㎖)을 10㎖의 플라스크에서 혼합하고, 10분 동안 110℃에서 교반하였다. 반응물을 냉각하고, 그다음 메탄올(10㎖)을 첨가하고, 고형물을 깨서 여과하고, 수거하여 회백색 분말을 수득하였다. 유리 아민을 2시간 동안 56℃에서 고도의 진공하에서 건조하였다(m.p. = 267.4-267.6℃, (M+H)⁺=438). 그다음, 유리 아민을 다이옥산(20㎖)내에 실온에서 녹이고, 교반하면서 다이에틸 에테르내 1M HCL 용액(0.5㎖, 1.3당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하고, 여과하고, 8시간 동안 56℃ 동안 고도의 진공하에서 건조하여 회백색 분말로서 화합물 54를 수득하였다. M.p. = 260.0-265.0℃, (M+H)⁺ = 438 (유리 아민).

실시예 55

화합물 55B의 제조

다이메틸폼아마이드(25㎖)내 설폰 2(1.485g, 4.56mmol)의 0℃ 용액에 60% 나트륨 하이드라이드(200㎎, 1.1당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 15분 동안 0℃에서 격렬하게 교반하고, 그 후에 다이메틸폼아마이드(15㎖)내 2,2,2-트라이플루오로에틸트라이클로로메탄 설포네이트 55A(4.2g, 3.3당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃ 내지 실온에서 4일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(300㎖) 및 물(100㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 물(100㎖) 및 염수(2×100㎖)로 세척하고, 황산마그네슘에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 에테르/헥산으로 수회 세척하고, 각각 상청액을 따라내었다. 잔류물을 고도의 진공하에서 농축하고 건조시켜 정량적인 수율의 반고형물로서 화합물 55B를 수득하였다.

화합물 55의 제조

화합물 55B(0.9g, 2.15mmol), 화합물 55C(743mg, 3당량) 및 N-메틸 피롤리디논을 10㎖의 플라스크에 첨가하고, 25분 동안 110℃로 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 10㎖의 메탄올로 희석하고, 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트(35㎖)에 용해하고, 물(7×25㎖) 및 염수(1×25㎖)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 용출액으로서 다이클로로메탄내 5% 메탄올을 사용하여 3개의 판 위의 즉제 박막 크로마토그래피(20×40㎝, 1000μM)로 정제하여 회백색 분말로서 화합물 55를 수득하였다. m.p.=227.2-230.4℃, (M+H)⁺=453.

실시예 56

화합물 3(0.13g, 0.34mmol)을 무수 테트라하이드로퓨란에 용해시키고, 빙욕내에서 교반하였다. 메틸 마그네슘 클로라이드(THF내 3M 용액, 0.25㎖, 0.75mmol)를 적가하였다. 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응물을 빙욕내에서 재냉각하고, 염화암모늄(2ml)의 포화 용액을 첨가하고, 그다음 물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 에틸 아세테이트 층을 모아 황산나트륨으로 건조하였다. 농축한 후, 반응 혼합물을 정제하고, 5% 메탄올/다이클로로메탄내 실리카겔상 크로마토그래피에 의해 이성체를 분리하였다. 덜 극성인 생성물 분획을 트랜스-이성체로서 지정하고(즉, 화합물 56A), 역상 HPLC에 의해 순수한 것임을 확인하였다. 보다 극성인 생성물 분획을 시스-이성체로서 지정하고(즉, 화합물 56B), 역상 HPLC에 의해 시스:트랜스의 비율이 98:2임을 발견하였다. 각각의 생성물 분획을 분리하여 다이클로로메탄에 용해하고, 1당량의 에테르내 1M HCl로 처리하고, 포아밀 잔류물이 될 때까지 증발하였다. 13mg의 트랜스-이성체, 화합물 56A의 HCl 염(질량 분석: MH⁺=399, 융점=155-168℃) 및 26mg의 화합물 56B의 시스-이성체 HCl 염(질량 분석: MH⁺=399, 융점=156-169℃)을 수득하였다.

실시예 57

본 실시예는 4-클로로-2-메틸티오피리미딘으로부터 6-(2-클로로페닐)-8-사이클로프로필-2-(4-트랜스-하이드록시-사이클로헥실아미노)-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온의 제조방법을 예시한다.

단계 1: 4-플루오로-2-메틸티오피리미딘의 제조

상기 화합물은 플레(Ple) 등의 문헌["J. Het. Chem.", 31, 1311, 1994]의 방법에 의해 제조하였다. 이러한 방법을 사용하여 11.5g의 4-클로로-2-메틸티오피리미딘(71.7mmol)로부터 7.6g의 생성물, 4-플루오로-2-메틸티오피리미딘을 제조하였다.

단계 2: 4-사이클로프로필아미노-5-폼일-2-메틸티오피리미딘의 제조

부틸 리튬(10.2㎖, 헥산내 2.5 M 용액)을 55㎖의 THF(나트륨/벤조페논으로부터 증류됨)에서 -30℃에 첨가하였다. 부틸 리튬 용액을 빙욕으로 옮기고, 다이아이소프로필아민(4㎖, 28.9mmol)을 적가하였다. 반응물을 30분 동안 교반하고, 그다음 무수 얼음 에테르 욕내에서 약 -80℃로 냉각하였다. 4㎖ THF내 4-플루오로-2-메틸티오피리미딘(1.6g, 11.1mmol)의 용액을 적가하고, 생성된 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 그다음, 에틸 폼에이트(2.1㎖, 22.2mmol, K₂CO₃로 처리하고, P₂0₅로 증류시킴)를 적가하고, 생성된 반응 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반하였다. 0.1당량의 에틸 폼에이트를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반하였다. 사이클로프로필아민(1.5㎖, 22.2mmol, 알드리흐 케미칼) 및 물을 첨가하고, 반응물을 90분 동안 교반하였다. 약 50㎖의 1M HCl/에테르를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 교반하였다. 추가로 물을 첨가하고, THF는 증발하여 제거하였다. 잔류 물질을 다이클로로메탄으로 2회 추출하였다. 다이클로로메탄층을 모아 황산나트륨으로 건조하고, 증발하여 시럽으로 수득하였다. 잔류물을 7% 메탄올/다이클로로메탄내 실라카겔상 크로마토그래피에 의해 정제하였다.

이민을 함유하는 분획을 모아 농축하고, 3시간 동안 THF내 3M HCl 수용액 10당량으로 처리하고, 중탄산나트륨 용액으로 중화하고, 농축하고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 다이클로로메탄을 물 및 중탄산 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 농축하였다. 잔류 물질은 앞서 정제한 물질과 혼합하여 1.8g의 4-사이클로프로필아미노-5-폼일-2-메틸티오피리미딘을 수득하였다.

단계 3

4-사이클로프로필아미노-5-폼일-2-메틸티오피리미딘(1.8g, 8.6mmol)을 17㎖의 1-메틸-2-피롤리디논에 용해하였다. 에틸 2-클로로페닐아세테이트(2.1g, 10.75mmol) 및 탄산칼륨을 첨가하고, 혼합물을 95℃에서 밤새 교반하였다. 총 0.8g 초과의 에스터를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 120㎖의 에틸 아세테이트 및 100㎖의 물에서 분배하였다. 분리한 후, 수성층을 에틸 아세테이트로 1회 이상 추출하였다. 에틸 아세테이트 층을 모아 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 농축하고, 20-25% 에틸 아세테이트/헥산으로 실라카겔 60에서 크로마토그래피로 정제하여 1.78g의 생성물을 수득하였다.

단계 4

단계 3의 생성물(1.66g, 4.82mmol)을 20㎖ THF에 용해하고, 빙욕에서 냉각하였다. 물내 옥손(5.9g, 9.64mmol)의 용액을 적가하였다. 빙욕을 제거하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 반응물을 여과하고, 약 40㎖의 물을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 고형물을 여거하고, 물에 재현탁하고, 추가로 60분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 물 및 20% 에테르/헥산으로 세정하고, 건조시켜 1.08g의 생성물을 수득하였다.

단계 5

단계 4의 생성물(0.35g, 0.93mmol), 트랜스-4-아미노사이클로헥산올 (0.322g, 2.79mmol, TCI 아메리카(America)) 및 0.5㎖ 1-메틸-2-피롤리디논을 모아 90℃로 가열하였다. 1시간 후, 반응물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트 및 물을 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트로 다시 추출하였다. 유기층을 모아 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 농축하고, 5% 메탄올/다이클로로메탄을 사용하여 실라카겔 60에서 정제하였다. 생성물 분획을 증발시킨 후, 잔류물을 메탄올/다이클로로메탄에 재용해하고, 1M HCl/에테르의 1당량으로 처리하였다. 용액을 증발하고, 잔류물을 20% 에테르/헥산으로 분쇄하고, 건조시켜 생성물 366mg(화합물 57의 HCl 염)을 수득하였다. 질량 분석: MH⁺=411, 융점=241.7-242.3℃.

실시예 58

화합물 30B(0.300g, 0.811mmol), 아세틸 클로라이드(0.061㎖, 0.852mmol) 및 탄산나트륨(0.090g, 0.852mmol)을 5㎖의 다이클로로메탄에 녹이고, 실온에서 밤새 교반하였다. 18시간 후, 반응물을 플래쉬 크로마토그래피(3-5% (1: 9 수산화암모늄/메탄올)/다이클로로메탄)로 정제하고, 생성물 58을 함유하는 컬럼 분획을 모아진공에서 농축하였다. 최종 생성물을 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조될 때가지 재증발시키고, 그다음 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조하여 0.288g의 화합물 58의 염산염(mp 215.3-218.6 C, M⁺. 427)을 수득하였다.

실시예 59

화합물 30B(0.300g, 0.811mmol), 메탄설포닐 클로라이드(0.066㎖, 0.852mmol) 및 탄산나트륨(0.090g, 0.852mmol)을 5㎖의 다이클로로메탄에 녹이고, 실온에서 밤새 교반하였다. 18시간 후, 반응물을 플래쉬 크로마토그래피(3-5% (1:9 수산화암모늄/메탄올)/다이클로로메탄)로 정제하고, 생성물 59를 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축하였다. 최종 생성물을 메탄올에 녹이고 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조될 때까지 재증발하고, 그다음 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.326g의 화합물 59의 염산염(mp 185.0-194.0℃, M⁺=427)을 수득하였다.

실시예 60

화합물 35A(0.086g, 0.242mmol), 탄산나트륨(0.026g, 0.242mmol), 및 브로모아세토나이트릴(0.016㎖, 0.242mmol)을 2㎖의 DMF에 녹였다. 실온에서 30분이 경과한 후, 초기 출발 물질이 소모되었다. 나트륨 하이드라이드(오일내 60%, 0.011g, 0.266mmol)를 첨가하고 실온에서 추가로 30분 동안 교반하고, 그다음 추가로 1당량의 브로모아세토나이트릴(0.016㎖, 0.242mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 플래쉬 크로마토그래피(1-5% (1:9 수산화암모늄/메탄올)/다이클로로메탄)로 정제하고, 생성물 60을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축하였다 최종 생성물을 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조될 때까지 재증발하고, 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.054g의 화합물 60의 염산염(mp 143.0-158.5℃)을 수득하였다.

실시예 61

화합물 30B (0.709g, 1.92mmol), 메틸 클로로폼에이트 (0.16㎖, 2.01mmol) 및 탄산나트륨(0.213g, 2.01mmol)을 5㎖ 다이클로로메탄에 녹이고, 밤새 실온에서 교반하였다. 18시간 후, 반응물을 플래쉬 크로마토그래피(2-10% (1:9 수산화암모늄/메탄올)/다이클로로메탄)로 정제하고, 생성물 61을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축하였다. 최종 생성물을 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조할 때까지 재증발하고, 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.063g의 화합물 61의 염산염(mp 133.5-136.5℃)을 수득하였다.

실시예 62

화합물 30B(1.0g, 2.81mmol), 탄산나트륨(0.447g, 4.22mmol) 및 2-클로로-N-메틸아세트아마이드(0.453g, 4.22mmol)를 5㎖의 DMF에 녹이고 실온에서 밤새 교반하였다. 20시간 후, 반응물을 플래쉬 크로마토그래피(3-5% (1:9 수산화암모늄/메탄올)/다이클로로메탄)로 정제하고, 생성물 62를 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축하였다. 최종 생성물을 메탄올에 녹이고, 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 건조할 때까지 재증발시키고, 그다음 에틸 에테르로 세척하고, 여과하고, 건조시켜 0.708g의 화합물 62의 염산염(mp 64.0-102.6℃)을 수득하였다.

실시예 63

본 실시예는 화합물 30B의 선택적인 합성방법을 예시한다.

메틸 설파이드(15g, 49.4mmol)를 70㎖의 NMP에 녹이고, 실온에서 교반하고, 상기 용액에 6㎖의 NMP내 N-클로로숙신이미드(7.6g, 56.8mmol)의 용액을 첨가하고, 물(0.87㎖, 48.1mmol)을 첨가하였다. 초기 슬러리는 빠르게 용해되어 투명한 황색 용액이 수득되었다. 실온에서 20분 후에, 설폭사이드 30C를 에틸 4-아미노-1-피페리딘카복실레이트(12.7㎖, 74.1mmol)로 처리하였다. 반응물은 빠르게 어두운 색으로 변하고, 만질 수 있을 정도로 승온하고, 실온에서 4일동안 교반하면서 정치하였다. 상기 기간의 만료 시점에서, 불투명한 황색 현탁액을 250㎖의 물이 담겨있는 큰 삼각 플라스크에 옮기고, 4시간 동안 빙욕에서 교반하였다. 그다음, 현탁액을 여과하여 황색 덩어리를 수거하고, 이것을 물 및 헥산으로 세정하고, 진공하에서 건조하였다. 에틸 카바메이트 중간체가 과량의 덩어리로 보였으나, 장시간 건조시킨 경우에도 31.6g 미만으로 감소되지 않았다.

수산화칼륨(111g, 1.98mol)을 400㎖의 에탄올에 녹이고, 용해될 때까지 가열하고, 그다음 서서히 냉각시키고, 전 단계로부터의 카바메이트 중간체를 첨가하였다(이론치: 49.4mmol). 용액을 3시간 동안 환류하면서 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 시트르산 수용액(111g, 577mmol, 물 400㎖에 용해됨)으로 중화시키기 위해 빙욕에 배치하였다. 용액을 30분 동안 교반하고, 그다음 진공하에서 증발시켜 수성 시럽을 수득하였다. 상기 시럽을 메틸렌 클로라이드로 추출하고(3회), 추출액을 모아 포화 염수로 세척하고, 탄산나트륨으로 건조하고, 진공하에서 증발시켜 12g의 황색 발포체(32.4mmol)를 수득하였다.

상기 발포체의 분획(500mg)을 플래쉬 크로마토그래피(5-20% 메탄올/다이클로로메탄 + 1% 수산화암모늄)로 정제하고, 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공상태에서 농축시켰다. 정제된 생성물을 메탄올에 녹이고, 2당량의 1 N HCl/Et₂O로 처리하고, 진공 상태에서 증발시키고, 생성된 고형물을 에틸 에테르로 세척하고, 수거하여 화합물 30B의 비스 염산염 520mg을 수득하였다(mp>300℃, (M+H)⁺ 370).

메틸 설파이드(15g, 49.4mmol)를 70㎖의 NMP에 녹이고 실온에서 교반하고, 상기 용액에 6㎖의 NMP 및 물(0.87㎖, 48.1mmol)내 N-클로로숙신이미드(7.6g, 56.8mmol)의 용액을 첨가하였다. 초기 슬러리는 빠르게 용해되어 투명한 황색 용액이 되었다. 실온에서 20분 후에, 에틸 4-아미노-1-피페리딘카복실레이트(12.7㎖, 74.1mmol)을 용액에 첨가하고, 4일 동안 실온에서 교반하였다. 불투명한 황색 현탁액을 250㎖의 물이 담긴 큰 삼각플라스크에 옮기고, 4시간 동안 빙욕에서 교반하였다. 그다음, 현탁액을 여과하여 황색 덩어리를 수거하고, 이것을 물 및 헥산으로 세정하고, 진공하에서 건조시켰다. 에틸 카바메이트 중간체는 과도한 덩어리로 보이지만, 장기간 건조시킨 후에도 31.6g 미만으로는 줄지 않았다.

수산화칼륨(111g, 1.98mol)을 400㎖의 에탄올에 녹이고, 용해될 때까지 가열하고, 그다음 천천히 냉각하고, 전술한 카바메이트 중간체를 첨가하였다(이론치: 49.4mmol). 용액을 3시간 동안 환류하고, 그다음 실온으로 냉각하고, 시트르산 수용액(111g, 577mmol, 물 400㎖에 용해함)으로 중화하기 위해서 얼음에 배치하였다. 용액을 30분 동안 교반하고, 그다음 진공하에서 증발시켜 수성 시럽을 수득하였다. 상기 시럽을 메틸렌 클로라이드로 3회 추출하고, 추출액을 모아 포화 염수로 세척하고, 탄산나트륨으로 건조하고, 진공하에서 증발시켜 12g의 황색 발포체(32.4mmol)를 수득하였다.

이러한 발포체 분획(500mg)을 플래쉬 크로마토그래피(5 내지 20% 메탄올/다이클로로메탄 + 1% 수산화암모늄)로 정제하고, 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시켰다. 정제된 생성물을 메탄올에 녹이고, 2당량의 1N HCl/Et₂O로 세척하고, 진공하에서 증발시켜 생성된 고형물을 에틸 에테르로 세척하고, 수거하여 520㎎의 화합물 30B의 비스 염산염을 수득하였다(mp>300℃, (M+H)⁺ 370).

실시예 64

20㎖의 다이클로로메탄내 0.25g(0.68mmol)의 화합물 30B 및 0.11g(0.74mmol)의 다이메틸설파모일 클로라이드의 용액에 0.11㎖(0.81mmol)의 트라이에틸아민을 첨가하였다. 혼합물을 가열하여 6시간 동안 환류하고, 용매를 감압하에서 제거하고, 잔류물은 5% 메탄올/에틸 아세테이트를 사용하여 실라카겔 40g상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 200mg의 백색 분말을 수득하였다. 이것을 2㎖의 에틸 아세테이트에 용해하고, 0.75㎖의 1M HCl/에테르를 첨가하였다. 이것을 1시간 동안 교반하고, 용매를 감압하에서 증발시켜 화합물 64의 HCl 염(200mg)을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=477, mp 207.2-208℃).

실시예 65

15㎖의 1,4-다이옥산내 0.914g(2.7mmol)의 6-(클로로페닐)-2-메탄설포닐-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올, 1.041g(5.4mmol)의 N-(2-하이드록시에틸)-프탈이미드, 1.43g(5.4mmol)의 트라이페닐포스핀의 냉각된(5℃) 현탁액에 5㎖의 1,4-다이옥산내 0.95g(0.86㎖, 5.4mmol)의 다이에틸아조다이카복실레이트의 용액을 30분 동안 적가하였다. 적가를 완료한 후, 얼음-물 냉각용 배쓰를 제거하였다. 곧바로 현탁액은 투명한 밝은 갈색 용액이 되었다. 이것을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축하고, 90:10:0.5 에틸 아세테이트/다이클로로메탄/수산화암모늄을 사용하여 실라카겔 120g에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 0.38g의 N-에틸프탈이미드 중간체를 수득하였다. 1㎖의 NMP내 0.18g(0.35mmol)의 상기 중간체 및 0.05g(0.42mmol)의 트랜스-4-아미노사이클로헥산올의 혼합물을 30분 동안 120℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 75㎖의 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3×75㎖). 에틸 아세테이트 용액을 모아 물(3 X 75㎖)로 세척하고, 염수로 세척하고, 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 물질은 5% 메탄올/다이클로로메탄을 사용하여 용리된 실리카 40g상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 45mg의 화합물 65를 수득하였다(질량 분석: MH⁺=544, mp 208-210℃).

실시예 66

1㎖의 DMF내 0.179g(0.4mmol)의 6-(2-클로로페닐)-2-(N-카브에톡시피페리 딜-4-아미노)피리도[2,3-d]-피리미딘-7-올의 현탁액에 실온에서 질소하에서 0.012g(0.46mmol)의 나트륨 하이드라이드(95%)를 한번에 첨가하였다. 기체 발생이 관찰되고, 5분 후 현탁액이 투명한 황색 용액으로 변하였다. 이것을 30분 동안 실온에서 교반하고, 그다음 0.068g(0.05㎖, 0.4mmol)의 벤질 브로마이드를 주사기를 사용하여 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하고, 농축된 염화암모늄 수용액으로 반응 중지하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3×60㎖). 에틸 아세테이트 용액을 모아 물(3×60㎖)로 세척하고, 염수로 세척하고, 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 물질을 20% 에틸 아세테이트/다이클로로메탄을 사용하여 실리카 40g에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 75.6mg의 생성물 66을 수득하였다. 이것을 2㎖의 에틸 아세테이트에 용해하고, 1㎖의 1M HCl/에테르를 첨가하였다. 현탁액을 1시간 동안 교반하고, 농축하여 화합물 66의 염산염 74㎎을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=518, mp. 162-173℃).

실시예 67

0.7㎖의 NMP내 0.350g(1.Ommol)의 설폰 및 0.303g(3.0mmol)의 4-아미노-테트라하이드로피란의 혼합물을 100℃에서 가열하였다. 1시간 후, 반응물을 냉각하고, 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 분획을 물로 5회 세척하고, 염수로 1회 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조하고, 감압하에서 농축하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(5% 메탄올/다이클로로메탄)로 정제하여 발포체로서 화합물 67을 수득하였다. 잔류물을 MeOH에 현탁하고, 염산(1.0M/Et₂O, 1당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20분 동안 교반하고, 감압하에서 농축하였다. 잔류물을 1시간 동안 MeOH/Et₂O의 혼합물과 함께 교반하고, 화합물 67의 염산염을 백색 고형물로서 여거하였다. 수율: 330mg, Mp 217.2-218.9℃, MS (M+H)⁺ 371.

실시예 68

설폰(350mg, 1.04mmol)을 4-아미노테트라하이드로피란(303mg, 3.0mmol) 및 0.7㎖ NMP와 혼합하고, 30분 동안 100℃에서 가열하였다. 실온으로 생각하고, 물에 첨가하고, 여과하여 갈색 고형물로서 화합물 68을 수득하였다. 고형물을 MeOH에 용해하고, 염산(1.0M/Et₂O)으로 산성을 만들고, 증발시켰다. 이러한 잔류물을 10:90MeOH/CH₂Cl₂를 사용하여 실라카겔상 정제하였다. 화합물 68의 염산염을 함유하는 분획을 모아 감압하에서 증발시켜 백색 발포체로서 화합물 68의 염산염을 수득하였다. 잔류물을 MeOH에 현탁시키고, 염산(1.0M/Et₂O, 1당량)을 첨가하고, 20분 동안 교반하고, 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 1시간 동안 MeOH/Et₂O의 혼합물과 함께 교반하고, 생성물을 백색 고형물로서 여거하였다. 수율: 228mg, Mp>300℃, MS (M+H)⁺ 357.

실시예 69

본 실시예는 SEM-보호화 피리돈에서 출발하는, 2-(트랜스-4-메톡시카복스아미도-사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온의 합성방법을 예시한다.

단계 1

10㎖의 무수 테트라하이드로퓨란내 아민(218mg, 0.436mmol)의 0℃ 용액에 다이메틸 피로카보네이트(0.080㎖, 0.746mmol), 다이메틸아미노 피리딘(2mg, 0.016mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 0℃에서 교반하고, 그다음 밤새 주위 온도까지 서서히 승온하였다. 조질의 반응 혼합물을 진공하에서 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(5:95, 메탄올/메틸렌 클로라이드)로 정제하여 백색 고형물로서 생성물 230mg(95%)을 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=558, mp=110.0-112.0℃).

단계 2

단계 1로부터의 SEM-보호화 피리돈(320mg, 0.553mmol)을 10㎖의 메탄올에 현탁하고, 10% 염산 10㎖로 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 환류하고, 냉각하고, 그다음 침전물이 형성될 때까지 진공하에서 농축하였다. 생성된 현탁액을 여과하고, 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 건조하여 95㎎(53%)의 화합물 69인 2-(트랜스-4-메톡시카복스아미도-사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온 69의 염산염을 백색 고형물로서 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=428, mp=294.6-296.8℃).

실시예 70

아민(0.49mg, 1.3mmol)을 6㎖의 아세트산 무수물에 현탁하고, 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 여과하였다. 수거된 고형물을 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 그다음 건조시켜 백색 고형물로서 2-(트랜스-4-메틸카복스아미도사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온을 수득하였다. 유리 염기를 에틸 아세테이트로 현탁하고, HCl/에테르의 1M 용액으로 처리하여 백색 분말로서 화합물 70의 염산염 0.51g(87%)을 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=412, mp>300℃).

실시예 71

본 실시예는 SEM-보호화 피리돈으로 출발하는, 2-(트랜스-4-아미도카복스아미도사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온의 합성방법을 예시한다.

단계 1

15㎖의 메틸렌 클로라이드내 아민(0.20g, 0.39mmol)의 용액에 트라이메틸실릴 아이소시아네이트(0.12㎖, 0.73mmol)를 첨가하고, 5시간 동안 상온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 5㎖의 메탄올로 반응 중지하고, 진공하에서 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(5:95, 메탄올/메틸렌 클로라이드)로 정제하여 0.14g(66%)의 생성물을 백색 고형물로서 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=543, mp=182.2-188.9℃).

단계 2

단계 1로부터의 SEM-보호화 화합물(130mg, 0.245mmol)을 5㎖ 메탄올에 현탁시키고, 5㎖의 10% 염산으로 처리하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 환류하였다 생성된 현탁액을 여과하고, 수거된 고형물을 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 건조시켜 68mg(62%)의 2-(트랜스-4-아미도카복스아미도사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온(71)의 염산염을 백색 고형물로서 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=413, mp>300℃).

실시예 72

본 실시예는 6-(2-클로로페닐)-2-메탄설포닐-피리도[2,3-d]피리미딘-7-올에서 출발하는, 2-(시스-4-메탄설포닐아미도-사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온의 합성방법을 예시한다.

단계 1

15㎖의 무수 1-메틸-2-피롤리디논내 설폰(1.93g, 5.75mmol)의 0℃ 용액에 나트륨 하이드라이드(0.160g, 6.33mmol, 95% 건조 분말)를 첨가하였다. 반응 혼합물은, 기체 발생이 가라앉을 때까지 10분 동안 교반하고, 그다음 5분 동안 2-(트라이메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(1.10㎖, 6.22mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 그다음 시스-1,4-다이아미노사이클로헥산(6.27g, 54.9mmol, 미국 오레곤주 포틀랜드 TCI 아메리카, 시스 및 트랜스 이성체의 혼합물)을 함유하는 0℃로 냉각된 플라스크에 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 100㎖의 물 및 100㎖의 에틸 아세테이트를 첨가하고, 층을 분배하고, 수성층을 추가의 100㎖의 에틸 아세테이트 분획으로 추출하였다. 유기층을 모아 200㎖의 염수로 4회 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 진공하에서 농축시켜 조질의 황색 액체를 수득하였다. 컬럼 크로마토그래피(30-40:70-60, 메탄올/메틸렌 클로라이드 및 수산화암모늄)로 정제하여 1.62g(56%)의 생성물을 연황색 발포체로서 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=500, mp=79.0-81.5℃).

단계 2

12㎖의 메틸렌 클로라이드내 단계 1로부터의 아민(0.26g, 0.53mmol)의 용액에 트라이에틸아민(0.11㎖, 0.79mmol) 및 메탄 설폰산 무수물(0.18g, 1.0mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하고, 그다음 진공하에서 농축하였다. 컬럼 크로마토그래피(3:97, 메탄올/메틸렌 클로라이드)로 정제하여 0.30g(98%)의 생성물을 백색 발포체로서 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=578, mp=117.0-144.0℃). 생성물은 ¹H NMR 분광광도법으로 각각 측정된 바와 같이 82:12 비율로 시스 및 트랜스 입체이성체 혼합물로 분리되었다.

단계 3

단계 2로부터의 SEM-보호화 피리돈(0.29g, 0.50mmol)을 10㎖의 메탄올에 현탁하고, 10㎖의 10% 염산으로 처리하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 환류하고, 냉각하고, 그다음 침전물이 형성될 때까지 진공하에서 농축하였다. 생성된 현탁액을 여과하고, 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 그다음 건조하여 0.17g(70%)의 2-(시스-4-메탄설포닐아미노-사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온(72)의 염산염을 백색 고형물로서 수득하였다(mp>300℃). 생성물은 ¹H NMR 분광광도법으로 각각 측정된 바와 같이 82:18의 비율로 시스 및 트랜스 입체이성체 혼합물로 분리되었다.

실시예 73

25㎖의 테트라하이드로퓨란내 설폰(0.20g, 0.57mmol) 및 트라이에틸아민 (0.24㎖, 1.7mmol)의 용액에 시스-4-아미노사이클로헥산올(문헌["Aust. J. Chem.", 1961, 14, 610] 참조)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 48시간 동안 80℃로 교반하고, 냉각하고, 그다음 1N HCl을 첨가하였다. 클로로폼으로 추출하고, 중탄산나트륨 및 염수로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시켰다. 여과하고, 농축시켜 0.398g의 조질의 고형물을 수득하고, 이것을 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄내 4% 메탄올)로 정제하여 0.118g(54%)의 2-(시스-4-하이드록시사이클로헥실아미노)-6-(2-클로로페닐)-8-메틸-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온(73)을 백색 고형물로서 수득하였다(질량 분석: M+H⁺=385, mp=209.5-216.5℃).

실시예 74

화합물 74B의 제조

화합물 74A (800mg, 1.91mmol), 1,4-다이옥사-스피로[4,5]데스-8-일아민(제조에 관해서 국제특허 공개공보 제 WO 99/001452 호 참조) 및 N-메틸 피롤리디논 (0.5㎖)을 함께 혼합하고 교반하면서 110℃로 가열하였다. 35분 후에, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트(25㎖)/물(25㎖)로 희석하고, 분배하고, 층을 분리하였다. 유기층을 모아 물(2×25㎖) 및 염수(1×25㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조하고, 여과하고, 농축시켜 회백색 분말로서 화합물 74B를 수득하였다(990mg, (M+H)⁺=495, M.P.=200.0-206.5℃).

화합물 74의 제조

화합물 74B(990mg)를 10㎖의 80% 아세트산(수용액)에 녹이고, 4시간 동안 교반하면서 65℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(1×70㎖)로 추출하였다. 유기층은 pH가 8이 될 때까지 포화 중탄산나트륨(4×50㎖)으로 세척하고, 염수(1×50㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조하고, 여과하고, 농축하여 800mg의 조질의 생성물을 수득하였다. 헥산내 70% 에틸 아세테이트를 사용하여 즉제 TLC로 정제하여 349mg의 화합물 74를 수득하였다((M+H)=451, M.P.=251.2-252℃).

실시예 75

화합물 74A(2g, 4.79mmol), 에틸 4-아미노-1-피페리딘 카복실레이트(알드리흐, 2.5g, 3당량) 및 N-메틸 피롤리디논(1.5㎖)을 함께 혼합하고 110℃에서 3.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 에틸 아세테이트(80㎖) 및 물(20㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고 물(2×25㎖) 및 염수(1×25㎖)으로 세척하고 황산마그네슘으로 건조시키고 여과시킨 다음, 농축시켰다. 헥산중의 25% 내지 50% 구배의 에틸 아세테이트로 용출시킨 실리카겔상 상기 조질의 물질을 정제하여 유리 아민((M+H)⁺=510, M.P.=194.2-221.4℃) 1.023g을 수득하였다. 유리 아민 200mg을 에틸 아세테이트(15㎖)에 용해시킨 다음, 다이에틸 에테르중의 1.0M HCl(0.5㎖, 1.25당량)을 첨가하고 1시간 동안 교반하였다. 50℃ 및 감압하에서 용매를 제거하였다. 상기 잔류물에 다이에틸 에테르 20㎖를 첨가하고 고형물을 분쇄하였다. 생성된 슬러리를 30분 동안 교반하고, 여과시키고, 회백색 분말을 56℃의 고 진공하에서 2시간 동안 건조시켜 화합물 75((M+H)⁺=510, M.P.=107.0-110.0℃) 65mg을 수득하였다.

실시예 76

화합물 74A(365mg, 0.87mmol), 4-아미노테트라하이드로피란 76A(265mg, 3당량) 및 N-메틸피롤리디논(0.3㎖)을 함께 혼합하고 110℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 에틸 아세테이트(30㎖) 및 물(25㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고 물(2×25㎖) 및 염수(1×25㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 물질 440mg을 수득하였다. 헥산중의 70% 에틸 아세테이트로 용출시킨 즉제 TLC로 정제하여 회백색 분말의 유리 아민(405mg)((M+H)⁺=439, M.P.=200.9-202.1℃)을 수득하였다. 유리 아민을 에틸 아세테이트(25㎖)에 용해시킨 다음, 다이에틸 에테르(1.4㎖, 1.5당량)중의 1.0M HCl을 첨가하고 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 50℃ 및 감압하에서 용매를 제거하고 생성된 잔류물을 56℃의 고 진공하에서 건조시켜 화합물 76의 염산염((M+H)⁺=439, M.P.=198.2-201℃) 339mg을 수득하였다.

실시예 77

화합물 77B의 제조

화합물 77A(TCI 케미칼 제조, 5g, 26mmol) 및 칼륨 시아네이트(10.1g, 5당량)를 메탄올(60㎖) 및 물(60㎖)에 용해시켰다. 생성된 혼합물을 교반하면서 4시간 동안 80℃로 가열한 다음, 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(350㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고 염수(5×150㎖) 및 HCl/염수 희석액(1×150㎖)으로 세척하고, 고형물이 형성되기 시작할 때 약 50㎖까지 농축시켰다. 상기 고형물을 여과 및 건조시켜 화합물 77B(2g, (M+H)⁺=230, M.P.=170.4-173.5℃)를 수득하였다.

화합물 77C의 제조:

화합물 77B(2g)를 다이옥산(125㎖)에 녹이고 15분 동안 상기 불균질 혼합물을 HCl 기체로 15분 동안 버블링시킨 다음, 용기를 단단히 막고 5시간 동안 교반하였다. 50℃ 및 감압하에서 용매를 제거하였다. 조질의 물질을 메탄올(250㎖)에 녹이고 메탄올중의 나트륨 메톡사이드(25중량%, 1당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고 약 75㎖까지 농축시킨 다음, 중간 프릿으로 여과하였다. 여액을 농축 및 건조시켜 화합물 77C(1.76g, (M+H)⁺=130)를 수득하였다.

화합물(77)의 제조:

화합물 74A(500mg, 1.2mmol), 화합물 77C(660mg, 3당량) 및 N-메틸 피롤리디논(0.8㎖)을 함께 혼합하고 30분 동안 교반하면서 110℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 에틸 아세테이트(80㎖) 및 물(40㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고 물(2×40㎖) 및 염수(1×40㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고 여과 및 농축시켜 조질의 생성물을 수득하였다. 순수 에틸 아세테이트로 용출시킨 즉제 TLC로 정제하여 유리 아민으로서의 화합물 77(120mg)을 수득하였다. 이어서, 상기 유리 아민을 에틸 아세테이트(25㎖)에 용해시키고 다이에틸 에테르중의 1M HCl(0.4㎖, 1.5당량)을 첨가하고 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 50℃ 및 감압하에서 용매를 제거하고 생성된 잔류물을 56℃ 및 고 진공하에서 건조시켜 회백색 분말의 화합물 77의 HCl 염(126mg, (M+H)⁺=467, M.P.=164.5-168.0℃)을 수득하였다.

실시예 78

2-(4-테트라하이드로티오피라닐아미노)-6-(2-클로로페닐)-8-메틸-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온

단계 1

에탄올 200㎖중의 테트라하이드로티오피란-4-온 5g(43mmol), 나트륨 아세테이트 트라이하이드레이트 29.26(215mmol) 및 하이드록실아민 하이드로클로라이드 14.94g(215mmol)의 혼합물을 6시간 동안 환류시켰다. 혼합물을 얼음물 400㎖로 희석시키고 에틸 아세테이트(2×150㎖)로 추출하였다. 추출액을 염수로 세척하고, 건조 및 여과시키고 감압하에서 농축시켜 옥심(백색 고형물) 5.6g(정량적 수율)을 수득하였다. THF 30㎖중의 상기 옥심 2g(15mmol)을, 실온에서 1M LAH/THF 용액 76㎖(76mmol)에 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 혼합물을 7시간 동안 환류시키고 5℃로 냉각시켰다. 물 2.9㎖를 조심스럽게 상기 반응 혼합물에 적가하고, 이어서 15% NaOH 수용액 2.9㎖ 및 물 8.7㎖을 적가하였다. 현탁액을 30분 동안 교반하고 셀라이트로 여과시키고 에틸 아세테이트 300㎖로 세척하였다. 여액을 감압하에서 제거하여(50℃ 미만) 4-아미노테트라하이드로티오피란 1.62g(92.3% 수율)을 수득하였다.

단계 2

NMP 1.5㎖중의 설폰 1 1g(2.9mmol) 및 4-아미노테트라하이드로티오피란 0.67g(5.7mmol)의 혼합물을 반응이 완결될 때까지 1.5시간 동안 85℃의 오일 배쓰에서 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고 물 100㎖로 희석시킨 다음, 에틸 아세테이트(2×75㎖)로 추출하였다. 에틸 아세테이트 용액을 모아 물(2×75㎖), 염수로 재세척하고, 건조 및 여과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 화합물을 다이클로로메탄중의 5% 메탄올을 사용하여 실리카겔(100g) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 0.77g(77% 수율)을 수득하였다. 다이클로로메탄 2㎖중의 상기 설파이드 0.2g을 1M HCl/에테르 0.62㎖(1.2당량)와 함께 30분 동안 교반하였다. 용매를 증발시켜 목적하는 2-(4-테트라하이드로티오피라닐아미노)-6-(2-클로로페닐)-8-메틸-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온의 HCl 염(질량 분석: MH⁺=387, mp 232.1-233.1℃) 206mg을 수득하였다.

실시예 79

2-(S-옥소-4-테트라하이드로티오피라닐아미노)-6-(2-클로로페닐)-8-메틸-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온

2-(S,S-다이옥소-4-테트라하이드로티오피라닐아미노)-6-(2-클로로페닐)-8-메틸-8H-피리도[2,3-d]피리미딘-7-온

다이클로로메탄 50㎖중의 설파이드 0.2g(0.5mmol)의 용액을 5℃로 냉각시키고, 여기에 77% 3-클로로퍼벤조산 0.13g(0.57mmol)을 첨가하였다. 15분 후, 일부 반응의 TLC는 상기 설파이드가 설폭사이드(n=1) 및 소량의 설폰(n=2)으로 완전히 전환되었음을 보여주었다. 77% 3-클로로퍼벤조산 0.04g을 추가로 첨가하고 보다 많은 설폭사이드가 설폰으로 전환되도록 30분 동안 추가로 교반하였다. 혼합물을 10% 나트륨 바이설파이트 수용액에 붓고 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 용액을 10% 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고 건조하고, 여과 및 농축시켰다. 다이클로로메탄중의 5% 메탄올로 용출시킨 3개의 20×40cm 즉제 TLC SiO₂ 판으로 상기 설폭사이드 및 설폰을 정제 및 분리하였다. 설폭사이드(라세미체) 68mg을 회수하고 다이클로로메탄 3㎖에 용해시켰다. 1M HCl/에테르 0.25㎖를 첨가하고 현탁액을 30분 동안 교반하였다. 용매를 감압하에서 증발시켜 목적하는 설폭사이드의 HCl 염(질량 분석: MH⁺=403, m.p. 205.6-207.3℃) 70mg을 수득하였다.

또한, 상기 즉제 TLC판으로부터 설폰(보다 높은 R_f) 0.15g을 회수하였다. 이를 다이클로로메탄 3㎖에 용해시키고 1M HCl/에테르 0.54㎖를 첨가하였다. 현탁액을 30분 동안 교반하고 여과하고 에테르로 세척하여 목적하는 설폰의 HCl 염(질량 분석: MH⁺=419) 122mg을 수득하였다.

실시예 80

본 실시예는 6-(2-클로로페닐)-8-메틸-2-메틸티오-8-하이드로피리디노[2,3-d]피리미딘-7-온(VI)의 다른 제조방법을 예시한다.

3,3-다이에톡시-2-폼일프로피오나이트릴 칼륨 염(II)의 제조

무수 THF(1.1ℓ)중의 3,3-다이에톡시프로판-나이트릴(I, 283.80g, 1.98mol) 및 메틸 포메이트(148.80g, 2.48mol)의 용액을 10℃에서 교반하고, 여기에 THF중의 1.0M 칼륨 t-부톡사이드(2.2ℓ, 2.2mol)를 첨가하였다. 45분에 걸쳐 첨가하는 동안, 온도를 10℃ 내지 15℃로 유지시켰다. 첨가 후, 생성된 슬러리를 주변 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 헥산(400㎖)을 첨가하고 다시 20분 동안 교반하였다. 슬러리를 여과하고 덩어리를 1/1의 헥산/THF로 세척하고 60℃의 진공 오븐에서 밤새 건조시켰다. 연한 황갈색 분말 302.5g(73.0%)을 수득하였다. ¹H-NMR(CD₃OD)은 목적하는 구조 II와 일치하였다.

4-아미노-2-설파닐피리미딘-5-카브알데하이드(III)의 제조

에탄올(90㎖)중의 티오유레아(92.8g, 1.22mol)의 슬러리를 환류하에서 가열하고 격렬하게 교반하였다. 상기 슬러리에, 환류 조건을 유지시키면서 25% 나트륨 메톡사이드/메탄올(85.5㎖, 0.37mol) 및 에탄올(285㎖)중의 3,3-다이에톡시-2-폼일프로피오나이트릴 칼륨 염(II)(222.20g, 1.06mol)의 현탁액을 10분 간격으로 5회에 걸쳐 첨가하였다(다르게는, 상기 슬러리를 50℃로 가열하여 첨가 용액을 균질하게 만들 수 있다). 에탄올(150㎖)을 추가적으로 첨가하여 교반을 촉진시켰다. 첨가 후, 농축 슬러리는 담황색으로 변하였고 1시간 동안 추가로 환류시켰다. 이어서, 혼합물을 냉각시키고 회전 증발기를 사용하여 거의 무수 상태로 증발시켰다. 잔류물을 물(940㎖)에 용해시켰다. 30% 아세트산(280㎖)을 첨가하여 용액으로부터 조질의 생성물을 침전시키고 중간 프릿 소결 유리 여과 깔때기로 여과시킴으로써 단리하였다. 상기 덩어리를 물(800㎖)로 세척하였다. 30분 동안 고온수(1ℓ)에서 분쇄를 통해 정제하고, 냉각 및 여과시키고 60℃의 진공 오븐에서 밤새 건조시킴으로써 담황색 고형물의 생성물 118.9g(72.3%)을 수득하였다(후속 제조는 상기 분쇄가 불필요함을 증명한다). HPLC에 의한 순도는 98.67%이었다. ¹H-NMR(DMSO-d₆)은 목적하는 구조 III과 일치하였다.

4-아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카브알데하이드(IV)의 제조

아세톤(1.5ℓ)중의 4-아미노-2-설파닐-피리미딘-5-카브알데하이드 III(100.00g, 644.4mmol) 및 325 메쉬 칼륨카보네이트(178.10g, 1.29mol)의 용액에 요오도메탄(128.10g, 902.2mmol)을 가볍게 냉각시키며 20분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 주변 실온에서 주말 동안 교반하였다. TLC를 통해 잔류 III을 확인하고 추가분의 요오도메탄(8㎖)을 첨가하고 밤새 교반하였다. 다시 TLC로 일부 III 잔류물을 확인하고 추가분의 요오도메탄(8㎖)을 첨가하고 밤새 교반하고 24시간 동안 추가로 교반하였다. HPLC를 통해 95.9%의 S-알킬화된 생성물 및 3.7%의 화합물 III이 존재함을 알 수 있었다. 상기 반응 혼합물을 회전 증발기로 거의 무수 상태로 증발시켰다. 물(1ℓ)을 잔류물에 첨가하고 여과를 통해 생성물을 수거하고 물(200㎖)로 세척하였다. 생성물을 밤새 60℃의 진공 오븐에서 건조시켰다. 103.37g(94.8%)을 수득하였다. HPLC를 통해 95.8%의 IV 및 4.2%의 III을 확인할 수 있었다.

6-(2-클로로페닐)-2-메틸티오-8-하이드로피리디노[2,3-d]피리미딘-7-온(V)의 제조

화합물 IV(10.00g, 59.1mmol), 에틸 2-(2-클로로페닐)아세테이트(14.40g, 71.8mmol), NMP(115㎖) 및 325 메쉬의 칼륨 카보네이트(29.00g 209.8mmol)의 혼합물을 95℃에서 밤새 건조시켰다. 반응 혼합물을 냉각시키고 물(800㎖)로 희석하였다. 생성된 슬러리를 밤새 교반하고 단리된 생성물(V)로 여과하였다. 여과 덩어리를 물로 세척하고 60℃의 진공 오븐에서 밤새 건조시켰다. 암황갈색 고형물의 단리 수율은 14.9g(83.0%)이었다. HPLC 분석을 통한 순도는 98.3%이었다.

6-(2-클로로페닐)-8-메틸-2-메틸티오-8-하이드로피리디노[2,3-d]피리미딘-7-온(VI)의 제조

화합물 V(0.25g, 0.82mmol), NMP(5㎖), 칼륨 카보네이트(0.11g, 0.82mmol) 및 요오도메탄(0.14g, 0.96mmol)의 혼합물을 질소 및 주변 실온에서 밤새 교반하였다. 물(15㎖)을 첨가하고 24시간 동안 교반하였다. 슬러리를 여과하고 여과 덩어리를 물(10㎖)로 세척하였다. HPLC를 통한 순도는 97.8%이었다.

실시예 81

NMP(10㎖)중의 피리돈 68(1.6g, 4.5mmol)에 나트륨 하이드라이드(188mg, 4.7mmol)를 첨가하고 혼합물을 45분 동안 교반한 다음, (2-요오도에톡시)트라이아이소프로필실레인(1.62g, 5mmol)을 첨가하였다. 12시간 후, 혼합물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하고 황산나트륨으로 건조시킨 다음 진공하에서 농축시키고 잔류물에 대하여 95:5의 다이클로로메탄/메탄올을 사용한 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피를 수행하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공에서 농축시켜 에틸 아세테이트에 현탁되어 있는 고형물로 하였다. 염산(1.0M/Et₂O, 1.2당량)을 첨가하여 염을 수득하고 이를 여과 및 건조시켜 목적하는 생성물(질량 분석: MH⁺=401, mpt 217-220) 262mg을 수득하였다.

실시예 82

NMP(5㎖)중의 피리돈 68에 나트륨 하이드라이드(56mg, 1.4mmol)를 첨가하고 혼합물을 45분 동안 교반한 다음, 요오도아세토나이트릴(0.11㎖, 1.54mmol)을 첨가하였다. 12시간 후, 혼합물을 물에 붓고 에틸 아세테이트로 추출하고 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 진공하에서 농축시키고 잔류물을 97:3의 다이클로로메탄/메탄올을 사용한 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 컬럼 분획을 모아 진공하에서 농축시켜 에틸 아세테이트에 현탁된 고체로 하였다. 염산(1.0M/Et₂O, 1.2당량)을 첨가하여 염을 수득하고 이를 여과 및 건조시켜 목적하는 생성물(질량 분석: MH⁺=395, mpt. 230.2-230.4℃) 62mg을 수득하였다.

실시예 83

NMP(1㎖)중의 설폰 1(0.4g, 1.2mmol)에 4-아미노-2,2,6,6-테트라메틸피페리딘(0.74mg, 4.7mmol)을 첨가하고 혼합물을 75℃에서 20분 동안 교반하였다. 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고 현탁액을 30분 동안 교반하였다. 고형물을 여과하고 물 100㎖ 및 에테르 50㎖로 세척하였다. 30분간의 공기 건조 후, 목적하는 생성물 0.376g을 수득하였다. 다이클로로메탄 2㎖중의 상기 고형물 0.27g에 염산(1.0M/Et₂O 1.2당량)을 첨가하고, 생성된 염을 여과 및 건조시켜 목적하는 생성물 264mg을 수득하였다(질량 분석: MH⁺=426, mpt.>300℃).

실시예 84

NMP(1㎖)중의 설폰 1(0.16g, 0.47mmol)에 테트라하이드로-3-티오펜 아민 1,1-다이옥사이드(0.19g, 1.4mmol)를 첨가하고 혼합물을 70℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 물로 희석시키고 고형물을 여과하고 물 및 에테르로 세척하였다. 이어서, 조질의 고형물을 5:95:0.01의 메탄올/다이클로로메탄/NH₄OH를 사용한 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 생성된 고형물을 다이클로로메탄에 현탁시키고 염산(1.0M/Et₂O, 1.2당량)을 첨가하였다. 생성된 염을 여과 및 건조시켜 목적하는 생성물(질량 분석: MH⁺=405, mpt. 256-260) 150mg을 수득하였다. .

실시예 85

설폰 1(105mg, 0.3mmol) 및 4-아미노모르폴린(0.3㎖, 3.0mmol)의 혼합물을 60℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 다이클로로메탄으로 용출시킨 실리카겔상 크로마토그래피로 정제하여 백색 분말(91mg, (M+H)⁺=372, M.P.=243.3-244.0℃)을 수득하였다.

실시예 86

단계 1

S-3-(N-트리틸아미노)테트라하이드로퓨란(클레오메니스(Barlos, Kleomenis), 디오니시오스(Papaioannou, Dionysios), 스텔라(Patrianakou, Stella), 차리클리아(Sanida, Chariklia), 테오도로스(Tsegenidis, Theodoros)의 문헌["J.Chem.Soc.Chem.Commun.", EN; 6, 1987, 474-475]에 따라 제조됨)(5.12g, 0.0155mol) 및 농축 염산(5㎖)을 에탄올(60㎖)에서 15분 동안 가열하여 환류시키고 농축시켰다. 잔류물을 고온 에테르(100㎖)에서 교반하고, 여과하고, 에테르로 세척하고, 진공 건조시켜 (S)-3-아미노테트라하이드로퓨란 하이드로클로라이드를 수득하였다.

단계 2

설폰 1(1.877g), (S)-3-아미노테트라하이드로퓨란 하이드로클로라이드 (0.66g) 및 다이-아이소프로필 아민(3.73㎖)의 혼합물을 TLC가 설폰이 모두 소비되었음을 표시할 때까지 무수 아세토나이트릴(20㎖)에서 환류시켰다. 용매를 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트 및 염수로 층 분리시켰다. 유기층을 분리하고, 건조 및 농축시켰다. 조질의 생성물을 실리카겔 크로마토그래피(1% MeOH/CH₂Cl₂)로 정제하여 목적하는 생성물(0.6g)을 수득하였다. 상기 생성물을 MeOH/CH₂Cl₂에 용해시키고 에테르중의 1N HCl 2㎖로 처리하고 증발 및 건조시켜 염산염(MP 171.9-173℃, MS 357(M+H))을 수득하였다.

실시예 87

단계 1

무수 DMF중의 설파이드 2.4(8.2g)의 용액을 K₂CO₃(4.1g) 및 에틸 요오다이드(5㎖)와 함께 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(300㎖) 및 염수(200㎖)에서 교반하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 건조 및 농축시켜 조질의 생성물을 수득하였다.

단계 2

THF(170㎖)중의 상기 생성물의 용액에 물(170㎖)중의 옥손(등록상표)(41g)을 0 내지 5℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하고 EtOAc(600㎖) 및 물(200㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고(3회), 건조 및 농축시켜 설폰을 수득하였다.

단계 3

NMP(0.4㎖)중의 설폰(2.23g) 및 4-아미노-테트라하이드로피란(1.17g)의 혼합물을 120℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올(5㎖)을 첨가하고 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 고형물을 여과하고 차가운 메탄올로 세척하였다. 생성된 고형물을 CH₂Cl₂에 용해시키고 메탄올중의 1 내지 2N HCl 5㎖로 처리하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 아이소프로판올/에틸 아세테이트로 재결정하여 최종 생성물(MP 185.3-190.1℃)(1.45g)을 수득하였다.

실시예 88

단계 1

DMF(20㎖)중의 설파이드(5.0g), 아이소부티렌 옥사이드(3㎖) 및 칼륨 카보네이트(2.6g)의 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 아이소부티렌 옥사이드(1.0㎖)를 추가적으로 첨가하고 혼합물을 8시간 동안 추가로 교반하였다. EtOAc 및 염수로 수성 후처리한 후, 조질의 생성물 5.8g을 수득하였다.

단계 2

0 내지 5℃의 THF(150㎖)중의 상기 설파이드(5.8g)에 물(150㎖)중의 옥손(등록상표)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 서서히 승온시키고 4시간 동안 교반하였다. EtOAc(400㎖)를 첨가하고 층을 분리하였다. 유기층을 염수(3×200㎖)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 목적하는 설폰(6.0g)을 수득하였으며, 이를 추가의 정제과정 없이 후속 단계에 사용하였다.

단계 3

NMP(4㎖)중의 설폰(5.0g) 및 4-아미노테트라하이드로티오피란(2.4g)의 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. EtOAc 및 염수로 수성 후처리하여 조질의 생성물을 수득하였으며, 이를 컬럼 크로마토그래피(실리카겔, 30 내지 35% EtOAc/헥산)로 정제하여 고형물(MP 105-108.5℃, MS 445(M+H)) 2.3g을 수득하였다.

단계 4

0 내지 5℃의 CH₂Cl₂ 90㎖중의 상기 화합물(2.3g)의 용액에 CH₂Cl₂ 70㎖중의 MCPBA(2.6g)의 용액을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc 및 염수로 층 분리시켰다. 유기층을 분리하고, 포화 NaHCO₃으로 세척하고(5회), 건조 및 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(실리카겔, 2 내지 3%의 MeOH/CH₂Cl₂)로 정제하였다. 생성물(1.3g)을 CH₂Cl₂/EtOAc에 용해시키고 에테르중의 1M HCl 3㎖로 처리하였다. 생성된 고형물을 여과하고, 에테르로 세척하고, MeOH/EtOH로 재결정하여 염산염(MP 223.72-230.2℃, MS 477(M+H))(0.65g)을 수득하였다.

실시예 89

설폰 89

단계 1

실온의 아세토나이트릴 250㎖중의 에틸 4-클로로-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트(알드리흐, 24g, 103mmol)의 용액에 4-플루오로아닐린(22.75g, 205mmol)을 첨가하였다. 2일 동안 교반한 후, 혼합물을 4시간 동안 60℃로 가열하였다. 생성된 고형물을 여과하고 EtOAc로 세척하였다. 여액을 농축시키고, EtOAc(300ℓ)로 희석시키고, 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 여과 및 농축시켜 조질의 생성물을 수득하였다. 상기 조질의 생성물을 헥산(400㎖)과 함께 교반한 다음, 여과하여 백색 고형물의 에틸-4-(4-플루오로페닐)아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복실레이트 23g을 수득하였다.

단계 2

리튬 알루미늄 하이드라이드(3.0g)를 5℃의 무수 테트라하이드로퓨란(300㎖)에서 교반하고 무수 테트라하이드로퓨란(250㎖)중의 에틸 4-(4-플루오로페닐)아미노-2-메틸티오-피리미딘-5-카복실레이트(22.5g)의 용액으로 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. THF 55㎖중의 1.0M 리튬 알루미늄 하이드라이드 용액(55㎖)을 5℃에서 첨가하고 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 물(9㎖)을 적가하고 생성된 혼합물을 30분 동안 교반한 다음, 수산화나트륨 수용액(2M, 9㎖)을 적가하고 물(12㎖)을 적가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 17시간 동안 교반한 다음, 여과하였다. 여과 잔류물을 테트라하이드로퓨란(2회, 100㎖)으로 세척하고, 모은 여액 및 세척액을 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트/헥산-1/2(200㎖)에 현탁시키고 고형물을 여과 및 건조시켜 황색 고형물의 4-(4-플루오로페닐)아미노-2-메틸티오피리미딘-5-메탄올 14g을 수득하였다.

단계 3

다이클로로메탄 260㎖중의 4-(4-플루오로페닐)아미노-2-메틸티오피리미딘-5-메탄올(14.5g)의 용액을 이산화망간(58g)으로 처리하였다. 생성된 현탁액을 5시간 동안 교반하고 셀라이트로 여과시켰다. 여과 잔류물을 다이클로로메탄(100㎖)으로 세척하고 모은 여액 및 세척액을 농축시켜 고형물을 수득하였다. 고형물을 에테르(100㎖)와 함께 교반하고 여과시켜 백색 고형물의 4-(4-플루오로페닐)아미노-2-메틸티오피리미딘-5-카복스알데하이드 8.6g을 수득하였다.

단계 4

상기 알데하이드(8,6g, 0.033mol), 에틸 o-클로로페닐아세테이트(8g) 및 1,3,4,6,7,8-헥사하이드로-2H-피리미도[1,2a]피리미딘 중합체 결합체(알드리흐에서 시판중인 염기, 2.5g)를 NMP(60㎖)에서 혼합시키고 4일 동안 120℃에서 교반하였다. 상기 염기 1.4g을 추가로 첨가하고 혼합물을 3일 동안 120℃에서 추가로 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 패드로 여과시키고 NMP(10㎖)로 세척하였다. 여액을 물(600㎖)에 붓고 EtOAc(3×500㎖)로 추출하였다. 유기층을 모아 염수로 세척하고(3회), Na₂SO₄로 건조시키고, 여과 및 농축시켰다. 생성된 고형물을 고온의 에테르로 분쇄하여 생성물(6.5g)을 수득하였다.

단계 5

THF(70㎖)중의 상기 설파이드(6.4g)의 용액에 물(90㎖)중의 옥손(27.3g)의 용액을 0 내지 5℃에서 첨가하였다. 이어서, 상기 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하고 EtOAc(600㎖) 및 물(250㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고(3회), Na₂SO₄로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 설폰 89(MP 115.5-117℃, MS 430(M+H))(5.5g)을 수득하였다.

실시예 90

단계 1

다이클로로메탄(50㎖)중의 2-플루오로에탄올(13.85g, 216.2mmol, 알드리흐 케미칼) 및 피리딘(50㎖)의 용액에 톨루엔설포닐 클로라이드(61.9g, 1.5당량)를 0℃에서 교반하며 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5시간 동안 0℃에서 교반한 다음, 냉장고에 밤새 놓아두었다. 다음날, 반응물을 얼음물 150㎖로 반응 중지시키고 다이클로로메탄 및 피리딘을 0℃ 및 감압하에서 제거하고 에틸 아세테이트(600㎖)로 희석하였다. 수성층을 분리하고 에틸 아세테이트로 추출하였다(1×200㎖). 유기층을 모아 pH 2가 될 때까지 0.5N HCl(3×200㎖)로 세척한 다음, 포화 중탄산나트륨(2×200㎖) 및 염수(1×200㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 무색 오일을 수득하였고, 이를 재결정하여 백색 분말의 토실레이트(46.5g, M⁺=218)를 수득하였다.

단계 2

DMF(200㎖)중의 설파이드 2.4(4.06g, 13.4mmol)의 용액에 오일중의 60% NaH 분산액(0.59g, 1.1당량)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고 DMF(25㎖)중의 상기 토실레이트(3.8g, 1.3당량)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃부터 실온으로 밤새 교반한 다음, 에틸 아세테이트(600㎖) 및 물(200㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 물(3×200㎖), 포화 중탄산나트륨(1×200㎖) 및 염수(2×200㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 반고형물 물질(9.16g)을 수득하였다. 헥산(400㎖)을 조질의 물질에 첨가하고 15분 동안 교반하였다. 용매를 따라내고, 잔류물을 농축시켜 황갈색 분말인 N-모노플루오로에틸 화합물(4.92g, (M+H)⁺=350, M.P.=114.7-118.1℃)을 수득하였다.

단계 3

테트라하이드로퓨란(75㎖)중의 상기 N-모노플루오로에틸 화합물(4.8g, 13.4mmol)의 용액에 물(75㎖)중의 옥손(등록상표)(20.6g, 2.5당량)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 첨가가 완결된 후, 빙욕을 제거하고 생성된 혼합물을 실온에서 7시간 동안 교반하고, 밤새 0℃로 유지시켰다. 반응물을 실온에서 5시간 동안 추가로 교반한 다음, 에틸 아세테이트(600㎖) 및 물(250㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고 물(3×250㎖) 및 염수(1×250㎖)으로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고 여과 및 농축시켜 황갈색-황색 분말의 목적하는 설폰(5.4g, (M+H)⁺=382, M.P.=156.0-168.0℃)을 수득하였다.

단계 4

상기 설폰(2.7g, 7.07mmol), 4-아미노-테트라하이드로피란(2.15g, 3당량) 및 NMP(2.7㎖)의 혼합물을 3.5시간 동안 110℃에서 교반하였다. 이어서, 가열 및 교반하고 상기 혼합물을 밤새 정치시켰다. 다음날, 에틸 아세테이트(180㎖) 및 물(65㎖)을 첨가하고 층 분리한 다음, 분리시켰다. 유기층을 물(2×65㎖) 및 염수(1×65㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 생성물 2.6g을 수득하였다. 헥산중의 25% 에틸 아세테이트로 용출시킨 실리카겔상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 유리 아민(1.267g, (M+H)⁺=403)을 수득하였다. 상기 유리 아민을 다이클로로메탄(50㎖)에 녹이고 다이에틸 에테르중의 1M HCl(4.5㎖, 1.5당량)을 교반하며 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 다음, 55℃ 및 감압하에서 용매를 제거하였다. 56℃의 고 진공하에서 24시간 동안 건조시켜 HCl 염으로서의 목적하는 화합물(1.247g, (M+H)⁺=403)을 수득하였다.

실시예 91

DMF(60㎖)중의 설파이드 2.4(2.10g, 6.59mmol)의 용액에 오일중의 60% 나트륨 하이드라이드 분산액(266mg, 1.0당량)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반한 다음, 다이페닐 포스피닐-O-하이드록실아민(문헌["Tetrahedron Let.", vol 23, No. 37, 3835-3836, 1982)(1.854g, 1.26당량)을 한번에 첨가하였다. 1분 후, 부피가 큰 침전물이 형성되었으며 DMF 100㎖를 추가로 첨가하여 교반하였다. 1시간 동안 교반하고 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(700㎖) 및 물(200㎖)의 혼합물에 첨가하였다. 수성층을 분리하고 에틸 아세테이트(125㎖)로 추출하였다. 에틸 아세테이트층을 모아 물(5×150㎖) 및 염수(1×150㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 회백색 분말의 설파이드 하이드라자이드(2.3g, M.P.=183.4-184.2℃, (M+H)⁺=319)를 수득하였다.

실시예 92

상기 설파이드 하이드라자이드 91(250mg, 0.78mmol) 및 4-아미노-테트라하이드로피란(397mg, 5당량)을 혼합하고 10시간 동안 150℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 에틸 아세테이트(35㎖) 및 물(25㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고 물(2×25㎖) 및 염수(1×25㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 생성물(300mg)을 수득하였다. 다이클로로메탄중의 5% 메탄올로 용출시킨 즉제 TLC로 정제하여 유리 아민(209mg, M.P.=117.4-121.3℃, (M+H)⁺=372.1)을 수득하였다. 상기 유리 아민(200mg, 0.538mmol)을 다이클로로메탄(5㎖) 및 에틸 아세테이트(20㎖)에 첨가하였다. 상기 용액에 다이에틸 에테르중의 1M HCl(0.8㎖, 1.5당량)을 첨가하고 2시간 동안 교반하였다. 55℃ 및 감압하에서 용매를 제거하고 56℃ 및 감압하에서 24시간 동안 건조시켜 회백색 분말의 목적하는 화합물(171mg, M.P.=207.1-215.9℃, (M+H)⁺=372)을 수득하였다.

실시예 93

단계 A: 벤질 1-벤질피페리딘-4-일카바메이트의 제조

0℃의 테트라하이드로퓨란 600㎖중의 4-아미노-1-벤질피페리딘(41.2g, 216.5mmol) 및 트라이에틸아민(51.3㎖, 369mmol)의 용액에 벤질 클로로포메이트(31㎖, 217mmol)를 반응 온도가 5℃ 내지 10℃로 유지되는 속도로 30 내지 45분에 걸쳐 적가하였다. 첨가가 완결된 후, 반응 혼합물을 실온으로 승온시켜 12시간 동안 교반하였다. 용매 및 휘발성 물질을 감압하에서 제거하였다. 이어서, 물(500㎖) 및 에틸 아세테이트(1.2ℓ)를 첨가하고 상을 분리시켰다. 유기층을 포화 중탄산나트륨 수용액(2회, 150㎖) 및 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 황갈색 액체를 수득하였으며, 이를 컬럼 크로마토그래피(SiO₂, EtOAc/헥산-30/70에서 EtOAc-100)로 정제하여 백색 고형물의 아민(질량 분석: M⁺=324, MP=79.1-79.6℃) 27.8g을 수득하였다.

단계 B: 벤질 피페리딘-4-일카바메이트의 제조

실온의 메틸렌 클로라이드 400㎖중의 벤질 아민(27.8g, 85.7mmol)의 용액에 메틸렌 클로라이드 50㎖중의 1-클로로-에틸클로로포메이트(25.4g, 178mmol)의 용액을 적가 깔때기로 적가하였다. 첨가가 완결된 후, 반응 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매 및 휘발성 물질을 감압하에서 제거하고 메탄올(500㎖)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 1시간 동안 가열하여 환류시키고, 실온으로 냉각시킨 다음, 농축시켜 회백색 고형물의 피페리딘(질량 분석: M+1=235, MP=190.7-192.2℃) 26.3g을 수득하였다.

단계 C: 벤질 1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일카바메이트의 제조

상기 보호된 피페리딘(10g, 42.7mmol) 및 트라이에틸아민(12㎖, 86.7mmol)을 실온의 메틸렌 클로라이드 500㎖에 용해시켰다. 메틸렌 클로라이드 20㎖중의 메탄 설포닐클로라이드(4.3㎖, 55.5mmol)를 적가 깔때기로 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 감압하에서 용매 및 휘발성 물질을 제거하였다. 에틸 아세테이트(500㎖) 및 염산 수용액(0.5M, 350㎖)을 반응 혼합물에 첨가하고 두 개의 상을 분리시켰다. 유기층을 염산 수용액(0.5M, 2×100㎖), 포화 중탄산나트륨 수용액(3×100㎖) 및 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 메탄 설폰아마이드(MP=148.6-152.8℃) 9.2g을 수득하였다.

단계 D: 1-(메틸설포닐)피페리딘-4-아민의 제조

질소 대기 하의 500㎖ 용적의 둥근바닥 플라스크내 테트라하이드로퓨란 200㎖중의 메탄 설폰아마이드(9.2g, 29.5mmol)의 용액에 팔라듐/C(10%, 2 내지 3g)을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 수소 기체로 3회 플러싱하였다. 수소 기체의 풍선을 반응 플라스크에 장착하고 용액을 15시간 동안 교반하였다(경우에 따라 다른 촉매를 첨가하고 수소 풍선을 재충전시켰다). 메틸렌 클로라이드(100㎖)를 반응에 첨가하고 셀라이트 패드로 여과시켰다. 여액을 농축시켜 목적하는 아민 4.63g(질량 분석: M+1=179, MP=65.3-65.7℃)을 수득하였다.

단계 E:

설파이드 하이드라자이드 91(255mg, 0.8mmol), 4-아미노-1-메탄설포닐피페리딘(200mg, 1.4당량) 및 NMP(0.3㎖)의 혼합물을 2일 동안 150℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 메탄올(8㎖), 에틸 아세테이트(180㎖) 및 물(65㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고 물(2×60㎖) 및 염수(1×60㎖)로 세척하고 농축시켜 조질의 생성물 640mg을 수득하였다. 다이클로로메탄중의 8% 메탄올로 용출시킨 즉제 TLC로 정제하여 유리 아민(180mg, M.P.=180.0-194.0℃, (M+H)⁺=449)을 수득하였다.

에틸 아세테이트(150㎖), 다이클로로메탄(20㎖) 및 메탄올(3㎖)중의 상기 유리 아민(180mg, 0.40mmol)의 용액에 다이에틸 에테르중의 1M HCl(0.6㎖, 1.5당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 감압하에서 용매를 제거하였다. 56℃ 및 고 진공하에서 잔류물을 건조시켜 회백색 분말의 목적하는 화합물(168mg, M.P.=180.7-213.2℃, (M+H)⁺=449)을 수득하였다.

실시예 94

단계 1

0℃의 1.0N NaOH(25㎖, 25mmol) 및 4-아미노테트라하이드로티오피란(2.34g, 20mmol)의 혼합물에 벤질클로로포메이트 3.14㎖(22mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 여과하고, 물로 2회 세척하고, 헥산과 함께 교반한 후, 여과 및 진공 오븐에서 건조시켜 백색 고형물의 카바메이트((M+H)⁺=252) 4.4g을 수득하였다.

단계 2

다이클로로메탄중의 카바메이트(40g, 159mmol)의 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산(75%, 75g, 320mmol)을 1시간 동안 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 교반하고, 여과하고, 10% 나트륨 설파이트 용액으로 2회 세척하고, 10% 중탄산나트륨 용액으로 3회 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 감압하에서 농축시켜 설폰(M⁺=283)(37.5g)을 수득하였다.

단계 3

에탄올 50㎖중의 설폰(3.0g, 10.6mmol)의 혼합물에 5% 팔라듐/C(300mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40psi에서 8시간 동안 파르(Paar) 수소화기로 수소화시켰다. 생성된 용액을 셀라이트로 여과시키고, 여액을 농축시켜 아민((M+H)⁺=150) 1.5g을 수득하였다.

실시예 95

상기 설파이드 하이드라자이드 91(660mg, 2.07mmol), 아미노-설폰(500mg, 2당량) 및 NMP(0.5㎖)의 혼합물을 3일 동안 150℃에서 교반하였다. TLC에 의해 여전히 상당량의 출발물질이 존재하는 것으로 나타나 추가의 아미노-설폰(200mg, 1.34mmol)을 첨가하고 혼합물을 1일 동안 추가로 교반하였다. TLC에 의해 잔여 출발물질이 존재하지 않음을 알 수 있었다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 메탄올(230㎖) 및 다이클로로메탄(150㎖)으로 희석시키고 실리카겔 10g을 첨가하였다. 혼합물을 농축시키고 잔류물을 플래쉬 컬럼(실리카겔, 20g)에 주입시킨 다음, 다이클로로메탄중의 1% 메탄올로 용출시켜 불순물이 포함된 생성물 623mg을 수득하였다. 상기 혼합물을 순수 에틸 아세테이트로 용출시킨 즉제 TLC로 추가 정제하여 유리 아민(70mg, (M+H)⁺=420)을 수득하였다. 상기 유리 아민(70mg, 0.17mmol)을 다이클로로메탄(10㎖) 및 메탄올(10㎖)에 녹인 다음, 다이에틸 에테르중의 1M HCl(0.3㎖, 1.5당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하고, 농축시키고, 56℃ 및 고 진공하에서 16시간 동안 건조시켜 회백색 분말의 목적하는 생성물(62mg, M.P.=240.0-243.0℃)을 수득하였다.

실시예 96

단계 1

메탄올(30㎖) 및 아세트산(10㎖)중의 설파이드 하이드라자이드 91(291mg, 0.913mmol)의 용액에 아이소부티르알데하이드(0.11㎖, 1.3당량)를 첨가하고 나트륨 시아노보로하이드라이드(58mg, 1당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 40분 동안 교반한 다음, 에틸 아세테이트(175㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 염기성이 될 때까지 포화 중탄산나트륨(4×60㎖)으로 세척하고, 염수(1×60㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 생성물 400mg을 수득하였다. 헥산중의 20% 에틸 아세테이트로 용출시킨 즉제 TLC로 정제하여 회백색 발포성 분말인 N-알킬화 설파이드 하이드라자이드(319mg, (M+H)⁺=375))를 수득하였다.

단계 2

테트라하이드로퓨란(15㎖)중의 N-알킬화된 설파이드 하이드라자이드(319mg, 0.85mmol)의 용액에 물(15㎖)중의 옥손(등록상표)(523mg, 1당량)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 4시간에 걸쳐 서서히 실온으로 승온시킨 다음, 에틸 아세테이트(300㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고 물(4×150㎖) 및 염수(1×150㎖)로 세척시키고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 회백색 발포체인 목적하는 화합물(308mg, (M+H)⁺=391)을 수득하였다.

단계 3

N-알킬화 설폭사이드 하이드라자이드(300mg, 0.768mmol), 4-아미노-테트라하이드로피란(233mg, 3당량) 및 NMP의 혼합물을 35분 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 에틸 아세테이트(90㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 물(3×25㎖) 및 염수(1×25㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 생성물 327mg을 수득하였다. 다이클로로메탄올중의 5% 메탄올로 용출시킨 즉제 TLC로 정제하여 유리 아민을 수득하였다. 이어서, 상기 유리 염기를 다이클로로메탄(20㎖)에 용해시키고 다이에틸 에테르중의 1M HCl(1.15㎖, 1.5당량)을 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2분 동안 교반한 후, 감압하에서 용매를 제거하였다. 56℃ 및 고 진공하에서 24시간 동안 잔류물을 건조시켜 회백색 분말의 목적하는 화합물(239mg, M.P.=111.3-117.5℃, (M+H)⁺=428)을 수득하였다.

실시예 97

단계 1

피리딘(40㎖)중의 설파이드 하이드라자이드 91(500mg, 1.57mmol) 및 4-모르폴린 카보닐 클로라이드(0.5㎖, 2.6당량)의 혼합물을 7시간 동안 90℃에서 교반하였다. 피리딘을 50℃ 및 감압하에서 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트(175㎖)로 희석하였다. 유기층을 희석 HCl/염수(3×75㎖) 및 염수(75㎖)로 세척하고 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 N-아실화된 설파이드 하이드라자이드((M+H)⁺=432))를 정량적인 수율로 수득하였다.

단계 2

테트라하이드로퓨란(15㎖)중의 N-아실화 설파이드 하이드라자이드(0.785mmol)의 용액에 물(15㎖)중의 옥손(등록상표)(483mg, 1당량)을 0℃에서 적가하였다. 생성된 용액을 4시간 동안 실온으로 서서히 승온시키고 에틸 아세테이트(175㎖) 및 물(50㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 물(3×50㎖) 및 염수(1×50㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 발포체로서 N-아실화 설폭사이드 하이드라자이드(209mg, (M+H)⁺=448)를 수득하였다.

단계 3

N-아실화 설폭사이드 하이드라자이드(209mg, 0.0468mmol), 4-아미노-테트라하이드로피란(142mg, 3당량) 및 NMP의 혼합물을 1시간 동안 90℃에서 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트(35㎖) 및 물(25㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 물(2×25㎖) 및 염수(1×25㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 생성물 293mg을 수득하였다. 다이클로로메탄중의 5% 메탄올로 용출시킨 즉제 TLC로 정제하여 유리 아민(36mg, (M+H)⁺=485)을 수득하였다. 상기 유리 염기를 다이클로로메탄에 용해시킨 다음, 다이에틸 에테르중의 1.0M HCl(0.11㎖, 1.5당량)을 첨가하고 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 55℃ 및 감압하에서 용매를 제거하고 56℃ 및 고 진공하에서 24시간 동안 건조시켜 회백색 분말의 목적하는 화합물(36mg, (M+H)⁺=485)을 수득하였다.

실시예 98

단계 1

아세토나이트릴(10㎖)중의 설파이드 하이드라자이드 91(500mg, 1.57mmol)의 용액에 37% 폼알데하이드 수용액(0.65㎖, 5당량)을 첨가한 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(155mg, 1.6당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 15분 동안 교반한 다음, 중성 pH가 유지되는데 필요한 양으로 아세트산을 첨가하였다. pH를 중성으로 유지시키도록 종종 아세트산을 첨가하면서, 상기 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(300㎖) 및 물(150㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 포화 중탄산나트륨(3×150㎖) 및 염수(1×150㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 생성물 651mg을 수득하였다. 헥산중의 15% 에틸 아세테이트로 용출시킨 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N,N-다이알킬화된 설파이드 하이드라자이드(37mg, (M+H)⁺=347)를 수득하였다.

단계 2

테트라하이드로퓨란(3㎖)중의 N,N-다이알킬화된 설파이드 하이드라자이드(37mg, 0.107mmol)의 용액에 물(3㎖)중의 옥손(등록상표)(66mg, 1당량)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 4시간에 걸쳐 실온으로 서서히 승온시키고 0℃에서 밤새 저장하고, 에틸 아세테이트(35㎖) 및 물(20㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 물(2×20㎖) 및 염수(1×20㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 N,N-다이알킬화된 설폭사이드 하이드라자이드(35mg, (M+H)⁺=363)를 수득하였다.

단계 3

N,N-다이알킬화된 설폭사이드 하이드라자이드(35mg, 0.0965mmol), 4-아미노-테트라하이드로피란(39mg, 4당량) 및 NMP의 혼합물을 35분 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 에틸 아세테이트(35㎖) 및 물(25㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 물(2×25㎖) 및 염수(1×25㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 생성물 39mg을 수득하였다. 다이클로로메탄중의 5% 메탄올로 용출시킨 즉제 TLC로 정제하여 유리 아민(29mg)을 수득하였다. 유리 아민을 다이클로로메탄(5㎖)에 용해시키고 다이에틸 에테르중의 1M HCl(0.1㎖, 1.5당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2분 동안 교반하였다. 감압하에서 용매를 제거하고, 잔류물을 56℃ 및 고 진공하에서 24시간 동안 건조시켜 회백색 분말의 목적하는 생성물(29mg, (M+H)⁺=400)을 수득하였다.

실시예 99

설폰 89(354mg, 0.823mmol), 4-아미노-테트라하이드로피란(250mg, 3당량) 및 NMP(0.3㎖)의 혼합물을 35분 동안 110℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 에틸 아세테이트(170㎖) 및 물(70㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 물(2×70㎖) 및 염수(1×70㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 생성물 393mg을 수득하였다. 헥산중의 65% 에틸 아세테이트로 용출시킨 즉제 TLC로 정제하여 유리 아민(261mg, (M+H)⁺=451, M.P.=281.7-283.4℃)을 수득하였다. 아민을 다이클로로메탄(15㎖) 및 메탄올(2㎖)에 용해시키고 다이에틸 에테르중의 1M HCl(0.8㎖, 1.5당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고 감압하에서 용매를 제거한 후, 56℃ 및 고 진공하에서 상기 물질을 건조시켜 목적하는 화합물(252mg, (M+H)⁺=451, M.P.=150.0-154.0℃)을 수득하였다.

실시예 100

단계 1

DMF(50㎖)중의 벤질 설파이드(5g, 12.1mmol)의 용액에 칼륨 카보네이트(1.05당량, 1.76g)를 첨가하고 2-요오도에탄올(1.42㎖, 1.5당량)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(300㎖) 및 물(150㎖)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 가열없이 약 150㎖의 부피까지 농축시켰다. 진공 여과시켜 백색 고형물을 수거하고 이를 2시간 동안 프릿상에서 공기 건조시켰다. 상기 고형물을 진공하에서 추가로 건조시켜 N-알킬화된 하이드록시에틸 설파이드(4.139g, M.P.=155.6℃-156.2℃, (M+H)⁺=424)를 수득하였다.

단계 2

테트라하이드로퓨란(200㎖)중의 N-알킬화된 하이드록시에틸 설파이드(4.13g, 9.06mmol)의 용액에 물(200㎖)중의 옥손(등록상표)(11.13g, 2당량)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 첨가가 완결된 후, 빙욕을 제거하고 생성된 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(700㎖) 및 물(400㎖)의 혼합물에 부었다. 유기층을 분리하고, 물(7×500㎖) 및 염수(5×500㎖)으로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 N-알킬화된 하이드록시에틸 설폰 2.2g을 수득하였다. 황산마그네슘으로 건조시 일부 화합물이 결정화되었으며 이를 분별 깔때기로 옮겼다. 수성층을 모아 다이클로로메탄(3×300㎖)으로 추가로 추출하였다. 상기 추출물에 제 1 유기층으로부터의 황산마그네슘 건조 분말을 첨가하고 슬러리를 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과 및 농축시켜 목적하는 생성물(M.P.=197.1-198.7, (M+H)⁺=456) 2g을 수득하였다.

단계 3

N-알킬화된 하이드록시에틸 설폰(1g, 2.19mmol), 4-아미노-테트라하이드로티오피란(385mg, 1.5당량) 및 NMP(0.5㎖)의 혼합물을 100℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트(50㎖) 및 물(40㎖)로 희석시키고 20분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, 물(2×45㎖) 및 염수(1×45㎖)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 생성물 1g을 수득하였다. 다이클로로메탄중의 20% 에틸 아세테이트로 용출시킨 실리카겔상 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 회백색 분말의 목적하는 화합물(519mg, M.P.=195.1-195.4℃, (M+H)⁺=417)을 수득하였다.

단계 4

다이클로로메탄(50㎖)중의 설파이드 유리 아민(500mg, 1.2mmol)의 용액에 다이클로로메탄(50㎖)중의 MCPBA(724mg, 3.5당량)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 실온으로 밤새 서서히 승온시켰다. 55℃ 및 감압하에서 상기 반응 혼합물을 농축시키고, 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트(180㎖) 및 포화 중탄산나트륨(60㎖)으로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 포화 중탄산나트륨(3×60㎖) 및 염수(1×60㎖)으로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과 및 농축시켜 조질의 설폰 유리 아민 528mg을 수득하였다. 다이클로로메탄중의 1% 메탄올에서 다이클로로메탄중의 2% 메탄올의 구배로 용출시킨 실리카겔상 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 회백색 분말의 설폰 유리 아민(279mg, M.P.=155.0-155.9℃, (M+H)⁺=449)을 수득하였다. 유리 아민(278mg, 0.62mmol)을 에틸 아세테이트(50㎖)에 녹이고 다이에틸 에테르중의 1M HCl(1㎖, 1.5당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 감압하에서 용매를 제거하였다. 잔여물을 56℃ 및 고 진공하에서 건조시켜 회백색 분말의 목적하는 화합물(242mg, M.P.=182.0-186.0, (M+H)⁺=449)을 수득하였다.

실시예 101

물 5㎖중의 질산은(1.10g, 6.50mmol) 및 수산화나트륨(0.52g, 13.0mmol)의 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 산화은을 진공 여과에 의해 수거하고, 물로 세척하고 진공 건조시킨 다음, 테트라하이드로퓨란 2㎖중의 트랜스-아미노사이클로헥산올 부가물 38(0.500g, 1.30mmol)의 용액을 첨가하고, 여기에 메틸 요오다이드(0.16㎖, 2.60mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합몰을 40℃에서 밤새 교반한 다음, 5일 동안 60℃로 승온시키며, 이 때 60℃로 승온시킨지 하루 후에 메틸 요오다이드(1.30mmol, 0.08㎖)를 추가로 첨가하였다.

플래쉬 크로마토그래피(10 내지 50%의 아세톤/헥산)로 정제하여 상기 목적하는 생성물 및 N-메틸화된 이성체를 수득하였다. 각각의 생성물을 개별적으로 메탄올에 녹이고 염산(1.0M/Et₂O, 1.0당량)으로 처리하고, 무수 상태로 재증발시킨 다음, 에틸 에테르로 세척하고, 여과 및 건조시켜 목적하는 O-메틸화된 생성물(mp 189.0-192.0℃) 0.157g 및 N-메틸화된 생성물(mp 130.3-130.5℃) 0.069g을 수득하였다.

실시예 102

단계 A: 4-에틸설파닐-부탄-2-온의 제조:

5℃의 THF 50㎖중의 에탄티올(6.2g, 7.4㎖, 0.1mol), DBU 3 방울의 용액에 메틸 비닐 케톤(7.3g, 8.45㎖, 0.105mol)을 적가하였다. 상기 용액 혼합물을 주변 온도에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 진공에서 농축시켜 목적하는 케톤 13.6g을 수득하였다.

단계 B: 4-에틸설파닐-부탄-2-온 옥심의 제조:

에탄올 500㎖중의 4-에틸설파닐-부탄-2-온(13.6g, 0.1mol), 나트륨 아세테이트 트라이하이드레이트(68g, 0.5mol) 및 하이드록실아민 하이드로클로라이드(34.7g, 0.5mol)의 혼합물을 3시간 동안 가열하여 환류시켰다. 혼합물을 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 물로 희석시키고 에틸 아세테이트(2×200㎖)로 추출하였다. 유기층을 모아 염수로 세척하고, 건조 및 여과하고, 진공에서 농축시켜 옥심 14.7g을 수득하였다.

단계 C: 2-아미노-4-에틸설파닐-부탄의 제조:

테트라하이드로퓨란중의 리튬 알루미늄 하이드라이드(1M, 120㎖, 0.12mol)의 용액에 테트라하이드로퓨란 30㎖중의 4-에틸설파닐-부탄-2-온 옥심(6g, 0.04mol)을 적가하였다. 첨가가 완결된 후, 혼합물을 4시간 동안 환류하에서 교반하였다. 현탁액을 얼음물 배쓰로 냉각시키고 물(4.6㎖) 및 테트라하이드로퓨란 20㎖을 적가하고, 수산화나트륨 수용액(15%, 4.6㎖)을 적가하였다. 이어서, 물(13.8㎖)을 추가로 첨가하고 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 셀라이트 패드로 여과하고 에틸 아세테이트(300㎖)로 세정하였다. 여액을 건조시키고(염수, MgSO₄) 감압하에서 증발시켜 2-아미노-4-에틸설파닐-부탄(질량 분석: M+1=134) 3.43g을 수득하였다.

단계 D:

테트라하이드로퓨란 10㎖중의 상기 설폰 1(0.55g, 1.6mmol) 및 2-아미노-4-에틸설파닐-부탄(0.63g, 4.8mmol)의 용액을 1시간 동안 환류시켰다. 용액을 냉각시키고 진공하에서 농축시키고 다이클로로메탄중의 5% 에틸 아세테이트로 용출시킨 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 102A의 라세미 혼합물(질량 분석: M+1=403) 421mg 및 아지리딘 화합물 102B(질량 분석: M+1=401, MP=160-167℃) 31mg을 수득하였다.

실시예 103

이 실시예는 시험관내 p38 (MAP) 키나제의 억제를 측정하기 위한 검정 프로토콜을 예시한다.

본 발명의 화합물의 시험관내 p-38 MAP 키나제 억제 활성은 안(Ahn, N.G.) 등의 문헌["J. Biol. Chem.", 266(7), 4220-4227, 1991]에 기술된 방법을 약간 변형시킨 방법을 이용하여 γ-포스페이트를 p-38 키나제에 의해 γ-³³P-ATP로부터 마이엘린(Myelin) 염기성 단백질(MBP)로 이동시키는 것을 측정함으로써 평가하였다.

재조합 p38 MAP 키나제의 포스포릴화 형태는 이. 콜라이(E. Coli)에서 SEK-1 및 MEKK를 이용하여 발현시킨 다음, 니켈 컬럼을 사용하여 친화성 크로마토그래피로 정제하였다.

포스포릴화 p38 MAP 키나제를 키나제 완충액(20 mM 3-(N-모르폴리노)프로판설폰산, pH 7.2, 25 mM β-글리세롤 포스페이트, 5 mM 에틸렌 글리콜-비스(베타-아미노에틸 에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산, 1 mM 나트륨 바나데이트, 1 mM 다이티오트레이톨, 40 mM 염화 마그네슘)중에 희석하였다. DMSO중에 용해시킨 시험 화합물 또는 단지 DMSO만(대조용)을 첨가하고, 샘플을 30℃에서 10분간 배양하였다. MBP 및 γ-³³P-ATP를 함유하는 기질 칵테일을 첨가하여 키나제 반응을 개시하였다. 30℃에서 20 분간 더 배양한 후, 0.75% 인산을 첨가하여 반응을 종료하였다. 그다음, 포스포릴화 MBP는 포스포셀룰로즈 막(미국 메사추세츠주 베드포드 소재의 밀리포어(Millipore))을 사용하여 잔류 γ-³³P-ATP로부터 분리하고, 섬광 계수기(미국 코넥티컷주 메리덴 소재의 패커드(Packard))를 이용하여 정량화하였다.

본 발명의 화합물은 이 검정법에서 활성적이었다. 본 발명의 몇몇 화합물의 p38 억제 활성(IC₅₀으로 나타냄, 분석된 p38 효소를 50%로 억제하는 농도)은 하기와 같다.

실시예 104

본 실시예는 THP1 세포에서 LPS-유도된 TNF-α 생성의 억제를 평가하기 위한 시험관내 검정을 예시한다.

본 발명 화합물의 TNF-α 방출 억제능은 블리펠드(Blifeld) 등의 문헌["Transplantation", 51:498-503, 1991]에 기술된 방법을 약간 변형한 방법을 이용하여 측정하였다.

(a) TNF 생합성의 유도

THP-1 세포를 2.5×10⁶세포/㎖의 농도로 배양 배지[15% 소 태아 혈청, 0.02 mM 2-머캅토-에탄올을 함유하는 RPMI(미국 미들랜드주 게일터스버그 소재의 깁코(Gibco)-BRL)]중에 현탁한 후, 96 웰 플레이트(각 웰에 0.2㎖의 분취량)에 플레이팅하였다. 시험 화합물을 DMSO중에 용해시킨 후, 최종 DMSO 농도가 5%가 되도록 배양 배지로 희석하였다. 25㎕ 분취량의 시험 용액, 또는 DMSO만을 함유한 배지(대조용)를 각 웰에 첨가하였다. 세포를 37℃에서 30 분간 배양하였다. LPS(미국 미저리주 세인트 루이스 소재의 시그마(Sigma))를 0.5㎍/㎖의 최종 농도로 웰에 첨가하고, 세포를 2시간 동안 추가로 배양하였다. 배양시간의 종료시, 배양물 상청액을 수거하고 존재하는 TNF-α의 양을 하기 기술하는 바와 같은 ELISA 검정을 이용하여 측정하였다.

(b) ELISA 검정

레이먼드(Reimund, J.M.) 등의 문헌["GUT.", Vol. 39(5), 684-689, 1996]에 기술된 2개의 안티-TNF-α 항체(2TNF-H12 및 2TNF-H34)를 이용하여 특이적 포획 ELISA 검정에 의해 존재하는 인간 TNF-α의 양을 측정하였다.

폴리스티렌 96-웰 플레이트를 PBS(10㎍/㎖)중, 웰 당 50㎕의 항체 2TNF-H12로 코팅하고 4℃에서 가습 챔버에서 밤새 배양하였다. 플레이트를 PBS로 세척한 다음 실온에서 1시간 동안 PBS중 5% 무지 분유(nonfat-dry milk)로 봉쇄하고 PBS중 0.1% BSA(소 혈청 알부민)로 세척하였다.

인간 재조합 TNF-α의 원액(미국 미네소타주 미네아폴리스 소재의 알 앤 디 시스템즈(R&D Systems))으로부터 TNF 표준물질을 제조하였다. 검정하는 동안 표준물질의 농도는 10ng/㎖에서 출발한 후 6회에 걸쳐 1/2 로그로 단계적으로 희석하였다.

25㎕ 분취량의 상기 배양물 상청액 또는 TNF 표준물질 또는 배지만(대조용)을 25㎕ 분취량의 비오티닐화 단일클론 항체 2TNF-H34(0.1% BSA를 함유하는 PBS중 2㎍/㎖)와 혼합한 다음 각 웰에 첨가하였다. 샘플을 실온에서 약하게 진탕시키면서 2시간동안 배양한 다음 PBS중 0.1% BSA로 3회 세척하였다. PBS중 0.416㎍/㎖의 퍼옥시다제-스트렙타비딘 및 0.1% BSA를 함유하는 퍼옥시다제-스트렙타비딘(캘리포니아주 샌프란시스코 소재의 지메드(Zymed)) 용액 50㎕를 각 웰에 첨가하였다. 샘플을 실온에서 1시간 동안 더 배양한 후 PBS중 0.1% BSA로 4회 세척하였다. 50㎕의 O-페닐렌다이아민 용액(0.2M 시트레이트 완충액(pH 4.5) 중 1㎍/㎖ O-페닐렌-다이아민 및 0.03% 과산화수소)을 각 웰에 첨가하고 샘플을 실온에서 어두운 상태로 30 분간 배양하였다. 샘플의 광학 밀도 및 기준치를 각각 450nm 및 650nm에서 판독하였다. 450nm에서의 광학 밀도 대 사용된 농도에 관한 그래프로부터 TNF-α 수준을 측정하였다.

IC₅₀ 값은 450 nm 흡광도의 최대값이 절반으로 감소하는 시험 화합물의 농도로 정의하였다.

실시예 105

이 실시예는 마우스(또는 래트)에서 LPS-유도된 TNF-α 생성의 억제를 평가하기 위한 생체내 검정을 예시한다.

본 발명 화합물의 생체내 TNF-α 방출능은 자네티(Zanetti) 등의 문헌["J. Immunol.", 148:1890, 1992] 및 세컷(Sekut) 등의 문헌["J. Lab. Clin. Med.", 124:813, 1994]에 기술된 방법을 약간 변형한 방법을 이용하여 측정하였다.

18 내지 21g으로 칭량된 암컷 BALB/c 마우스(미국 캘리포니아주 홀리스터 소재의 찰스 리버(Charles River))를 1주일간 적응시켰다. 각각 8마리의 마우스를 포함하는 그룹들에 0.9% 염화나트륨, 0.5% 나트륨 카복시메틸-셀룰로즈, 0.4% 폴리소르베이트 80, 0.9% 벤질 알콜을 함유하는 수성 비히클(CMC 비히클)에 현탁시키거나 용해시킨 시험 화합물 또는 비히클만(대조군)을 경구 투여하였다. 30 분후에, 마우스에게 20㎍의 LPS(미국 미저리주 세인트 루이스 소재의 시그마)를 복강내 주사하였다. 1.5시간 후에, 마우스를 CO₂ 흡입시켜 죽이고 심장천자로 혈액을 수거하였다. 혈액을 15,600×g에서 5 분간 원심분리하여 정화시키고, 혈청을 깨끗한 튜브로 옮기고, 제조업자의 프로토콜에 따라 ELISA 검정(미국 캘리포니아주 카마릴로 소재의 바이오소스 인터내셔날(Biosource International))으로 TNF-α에 대해 분석할 때까지 -20℃에서 냉동시켰다.

Claims (29)

1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염:

   화학식 I

   

   상기 식에서

   R¹은 수소 또는 알킬이고;

   R²는 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬로 치환된 사이클로알킬, 헤테로치환된 사이클로알킬-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴 스피로 사이클로알킬, 아르알콕시, 알콕시, -알킬렌-S(O)_n-알킬(여기서, n은 1 또는 2이다) 또는 -SO₂Ar²이고;

   R³은 수소, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노, 아실아미노, -NR^a-C(=O)-R^b(여기서, R^a는 수소 또는 알킬이고, R^b는 헤테로사이클릴 또는 헤테로알킬이다), 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 아르알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 시아노알킬,-알킬렌-C(O)-R(여기서, R은 수소, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이다), 아실 또는 프탈이미도알킬이고;

   Ar¹ 및 Ar²는 각각 독립적으로 아릴이고,

   이 때, 치환된 사이클로알킬이란, 하나, 2개 또는 3개의 고리 수소 원자가 시아노 또는 -Y-C(O)R(여기서, Y는 존재하지 않거나 알킬렌기이고, R은 수소, 알킬, 할로알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노 또는 임의로 치환된 페닐이다)에 의해 독립적으로 치환된 사이클로알킬을 의미하고;

   헤테로치환된 사이클로알킬이란, 사이클로알킬 라디칼내 하나, 2개 또는 3개의 수소 원자가 헤테로알킬기로 치환된 사이클로알킬을 의미하며, 단 헤테로알킬 라디칼이 탄소-탄소 결합을 통해 사이클로알킬 라디칼에 결합되고;

   알킬이란, 탄소수 1 내지 6의 선형 포화 일가 탄화수소 라디칼 또는 탄소수 3 내지 6의 분지형 포화 일가 탄화수소 라디칼을 의미하고;

   사이클로알킬이란, 고리 탄소수 3 내지 7의 포화 일가 사이클릭 탄화수소 라디칼을 의미하고;

   헤테로알킬이란, -OR^a, -NR^bR^c 및 -S(O)_nR^d(여기서, n은 0 내지 2의 정수이다)로 구성된 군중에서 독립적으로 선택된 치환체에 의해 하나, 2개 또는 3개의 수소 원자가 치환된 알킬로서, 단 헤테로알킬 라디칼의 결합 지점이 탄소 원자이어야 하고, 여기서 R^a는 수소, 아실, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고; R^b 및 R^c는 각각 독립적으로 수소, 아실, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고; n이 0인 경우, R^d는 수소, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고, n이 1 또는 2인 경우, R^d는 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬, 아미노, 아실아미노, 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노이고;

   헤테로사이클릴이란, 고리 원자가 3 내지 8인 포화 또는 불포화 비방향족 사이클릭 라디칼로서, 여기서 하나 또는 2개의 고리 원자는 N, O 또는 S(O)_n(여기서 n은 0 내지 2의 정수이다)중에서 선택된 헤테로원자이고, 나머지 고리 원자는 C이며, 여기서 하나 또는 2개의 C 원자는 임의로 카보닐기에 의해 치환되고;

   아르알콕시란, 라디칼 -O-R^a-R^b(여기서, R^a는 알킬렌이고, R^b는 아릴이다)를 의미하고;

   알콕시란, 라디칼 -OR(여기서, R은 알킬이다)을 의미하고;

   알킬렌이란, 탄소수 1 내지 6의 선형 포화 이가 탄화수소 라디칼 또는 탄소수 3 내지 6의 분지형 포화 이가 탄화수소 라디칼을 의미하고;

   아실이란, 라디칼 -C(O)R(여기서, R은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬알킬, 페닐 또는 페닐알킬이다)을 의미하며;

   아릴이란, 일가 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 탄화수소 라디칼이며, 이들은 알킬, 하이드록시, 알콕시, 할로알킬, 할로알콕시, 헤테로알킬, 할로, 니트로, 시아노, 아미노, 모노알킬이미노, 다이알킬아미노, 메틸렌다이옥시, 에틸렌다이옥시 및 아실로 구성된 군중에서 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된다.
2. 제 1 항에 있어서,

   Ar¹이 임의로 치환된 페닐이고, 이 때 임의로 치환된 페닐이란, 알킬, 하이드록시, 알콕시, 할로알킬, 할로알콕시, 헤테로알킬, 할로, 니트로, 시아노, 아미노, 메틸렌다이옥시, 에틸렌다이옥시 및 아실로 구성된 군중에서 선택된 하나 이상의 치환체로 독립적으로 치환되거나 비치환된 페닐을 의미하는 화합물.
3. 청구항 3은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

   제 2 항에 있어서,

   Ar¹이 할로, 알킬 또는 메톡시기중 하나 또는 2개로 독립적으로 치환된 페닐기인 화합물.
4. 청구항 4은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

   제 3 항에 있어서,

   Ar¹이 2-클로로페닐, 2-플루오로페닐, 2-메틸페닐 또는 2-메톡시페닐인 화합물.
5. 청구항 5은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

   제 4 항에 있어서,

   하기 화학식 III인 화합물:

   화학식 III

   
6. 제 1 항에 있어서,

   R³이 수소, 아미노, 모노알킬아미노, 다이알킬아미노, 아실아미노, -NR^a-C(=O)-R^b(여기서, R^a는 수소 또는 알킬이고, R^b는 헤테로사이클릴 또는 헤테로알킬이다), 알킬, 할로알킬, 사이클로알킬, 시아노메틸, 헤테로알킬, 아릴, 아르알킬 또는 -알킬렌-C(O)-R(여기서, R은 제 1 항에서 정의된 바와 같다)인 화합물.
7. 청구항 7은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

   제 6 항에 있어서,

   R³이 수소, 아미노, 다이메틸아미노, 아이소프로필아미노, (모르폴리노폼일)아미노, 메틸, 2,2,2-트라이플루오로에틸, 사이클로프로필, 시아노메틸, 2-하이드록시에틸, 4-플루오로페닐, 벤질, 카복시메틸 또는 메톡시카보닐메틸, 에틸, 2-플루오로에틸, 2-하이드록시-2-메틸프로필 또는 2-프탈이미도프로필인 화합물.
8. 청구항 8은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

   제 7 항에 있어서,

   R³이 수소인 화합물.
9. 청구항 9은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

   제 7 항에 있어서,

   R³이 메틸인 화합물.
10. 제 1 항 내지 제 9 항중 어느 한 항에 있어서,

    R¹이 수소인 화합물.
11. 제 1 항 내지 제 9 항중 어느 한 항에 있어서,

    R¹이 메틸인 화합물.
12. 제 1 항 내지 제 9 항중 어느 한 항에 있어서,

    R²가 헤테로치환된 사이클로알킬, 헤테로알킬로 치환된 사이클로알킬, 아르알콕시, 알콕시, 알킬설포닐-알킬, 헤테로사이클릴 또는 헤테로치환된 사이클로알킬-알킬인 화합물.
13. 청구항 13은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

    제 12 항에 있어서,

    R²가 헤테로치환된 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴인 화합물.
14. 청구항 14은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

    제 13 항에 있어서,

    R²가 4-헤테로치환된 사이클로헥실인 화합물.
15. 청구항 15은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

    제 14 항에 있어서,

    R²가 4-하이드록시-사이클로헥실인 화합물.
16. 청구항 16은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

    제 13 항에 있어서,

    R²가 헤테로사이클릴인 화합물.
17. 청구항 17은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

    제 16 항에 있어서,

    R²가 치환된 피페리디닐기인 화합물.
18. 청구항 18은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

    제 17 항에 있어서,

    R²가 N-메탄설포닐-피페리딘-4-일인 화합물.
19. 청구항 19은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

    제 16 항에 있어서,

    R²가 4-테트라하이드로피라닐기인 화합물.
20. 청구항 20은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

    제 12 항에 있어서,

    R²가 알킬설포닐-알킬인 화합물.
21. 청구항 21은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.

    제 20 항에 있어서,

    R²가 (1,1-다이메틸-2-메틸설포닐)에틸 및 (1,1-다이메틸-3-메틸설포닐)프로필로 구성된 군중에서 선택된 화합물.
22. 제 1 항 내지 제 9 항중 어느 한 항에 따르는 화합물 및 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는, 해열, 관절염, 성인 호흡기 곤란 증후군, 폐형 유육종증, 천식, 규폐증, 만성 폐 염증성 질환, 만성 폐색성 폐질환, 패혈증, 패혈성 쇼크, 그램 네거티브 패혈증, 말라리아, 뇌막염, 감염 또는 악성에 대한 2차 악액질, 후천성 면역 결핍증(AIDS)에 대한 2차 악액질, AIDS, ARC(AIDS 관련 합병증), 폐렴, 포진 바이러스, 골다공증, 내독성 쇼크, 독성 쇼크 증후군, 재관류 손상, 이식조직 대 피이식 조직의 반응, 동종 이식 거부반응, 아테롬성 동맥경화증, 혈전증, 울혈성 심부전, 심장 재관류 손상, 신장 재관류 손상, 간 질환, 신장염, 감염에 기인한 근육통, 알츠하이머병, 독감, 다발성 경화증, 암, 당뇨병, 전신성 홍반성 낭창(SLE), 건선, 습진, 화상, 피부염, 켈로이드 형성, 반흔 조직 형성, 염증성 장 질환, 크론병, 위염, 과민성 대장 증후군, 궤양성 대장염, 망막염, 망막병증, 포도막염, 안구 수명, 안구 조직의 심한 손상, 혈관 신생, 전이, 각막 이식조직 거부반응, 안구 혈관 신생, 손상 또는 감염 후 혈관 신생, 당뇨성 망막병증, 후수정체 섬유 증식증, 혈관 신생성 녹내장, 위궤양, 유아 혈관종, 비강인두의 맥관 섬유종, 골의 무혈관성 괴사, 당뇨성 신장병, 심근증, 및 자궁내막증으로 구성된 군으로부터 선택된 질환을 치료하기 위한 조성물.
23. 하기 화학식 Ig의 화합물을 화학식 I의 화합물을 생성하기에 충분한 조건하에서 화학식 R¹R²NH의 아민과 접촉시키는 단계를 포함하는, 제 1 항에 따르는 화합물의 제조방법:

    

    화학식 I

    

    상기 식에서

    R¹, R², R³ 및 Ar¹은 제 1 항에서 정의된 바와 같고;

    n은 0 내지 2의 정수이고;

    R⁶은 알킬기이다.
24. 삭제
25. 삭제
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27. 삭제
28. 제 22 항에 있어서,

    상기 질환이 관절염, 크론병, 알츠하이머병, 염증성 장 질환, 성인 호흡기 곤란 증후군, 및 만성 폐색성 폐질환으로 구성된 군으로부터 선택된 조성물.
29. 삭제