CN1448383A - 从藻类提取、制备、纯化γ－亚麻酸甲酯的工艺 - Google Patents

从藻类提取、制备、纯化γ－亚麻酸甲酯的工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN1448383A
CN1448383A CN03113398A CN03113398A CN1448383A CN 1448383 A CN1448383 A CN 1448383A CN 03113398 A CN03113398 A CN 03113398A CN 03113398 A CN03113398 A CN 03113398A CN 1448383 A CN1448383 A CN 1448383A
Authority
CN
China
Prior art keywords
methyl esters
gamma
acid methyl
linolenic acid
methyl alcohol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN03113398A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1253426C (zh
Inventor
刘志礼
葛海涛
孔秀芹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing University
Original Assignee
Nanjing University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing University filed Critical Nanjing University
Priority to CNB031133983A priority Critical patent/CN1253426C/zh
Publication of CN1448383A publication Critical patent/CN1448383A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1253426C publication Critical patent/CN1253426C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/54—Improvements relating to the production of bulk chemicals using solvents, e.g. supercritical solvents or ionic liquids

Landscapes

  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

一种从藻类提取、制备、纯化γ－亚麻酸甲酯的工艺，它是将藻粉加入夹带剂甲醇匀浆后，CO2作为溶剂进行超临界萃取，浓缩后得到总脂类，将总脂类溶解于含氯乙酰5％的甲醇中酯化，得总脂肪酸甲酯，总甲酯分子蒸馏，收集馏出物。将馏出物加入丙酮，依次在4℃，－10℃，－30℃下结晶，过滤去析出物，浓缩后加入尿素和甲醇，在氮气保护下回流1小时，冷却，放置，滤去结晶，加水后，用石油醚萃取γ－亚麻酸甲酯，蒸馏回收石油醚，得γ－亚麻酸甲酯。将得到的γ－亚麻酸甲酯在高真空，100－150℃分级蒸馏，得到γ－亚麻酸甲酯纯品。

Description

从藻类提取、制备、纯化γ-亚麻酸甲酯的工艺
一、技术领域
本发明涉及γ-亚麻酸甲酯，具体地说，涉及从藻类提取、制备、纯化γ-亚麻酸甲酯的工艺。
二、背景技术
γ-亚麻酸(GLA)及其衍生物是重要的抗肿瘤活性物质，也具有多种治疗心脑血管疾病的潜在疗效，所以GLA的分离纯化受到国内外的关注。目前普遍采用从月见草种子油(含GLA7％左右)中提取，但是由于GLA容易氧化和来源中存在大量和GLA物理性质类似的化合物如亚油酸等等，使GLA的分离纯化过程困难重重，成本巨大，一直没有能够应用于工业规模的合适流程。
现在存在的分离工艺如制备气相色谱方法，酶法定向水解法，层析法都存在效率低下，成本过高等等原因不能够应用于工业生产。单独使用一种超临界萃取，尿素包合，或分子蒸馏的方法都有着相关报道，但是由于GLA的本身性质，使得单独采用任何一种分离方法都没有能够得到满意的结果，或者终纯度太低，或者成本太高。从螺旋藻中提取GLA有报道采用有机溶剂抽提-柱层析方法，但是同样存在成本过高、纯度低的问题。
三、发明内容
本发明的目的是提供一种从藻类提取、制备、纯化得到高纯度的γ-亚麻酸甲酯的工艺。
藻类资源丰富、易得，某些藻类，如螺旋藻，富含γ-亚麻酸，因此从藻类提取、制备γ-亚麻酸甲酯比较经济，藻粉提取γ-亚麻酸以后，不影响其作为提取蛋白和多糖的原料。
本发明的技术方案如下：
一种从藻类提取、制备、纯化γ-亚麻酸甲酯的工艺，它由如下步骤组成：
步骤一、将藻粉加入夹带剂甲醇匀浆后(藻粉(g)∶甲醇(mL)＝1∶0.5-2)，在20-50MPa，20-60℃下，使用CO2作为溶剂进行超临界萃取，浓缩后得到总脂类，
步骤二、将步骤一得到的总脂类溶解于12倍其体积的含氯乙酰5％的甲醇中，在氮气氛保护下80℃回流反应2小时后，冷却至室温，加入两倍体积的0.3％碳酸钠溶液，洗涤，离心取上层油层，浓缩得到总脂肪酸甲酯并回收甲醇，总甲酯在高真空度6-10Pa下，160℃分子蒸馏，收集馏出物，
步骤三、将步骤二所得的馏出物加入三倍体积的丙酮，依次在4℃，-10℃，-30℃下平衡结晶24小时，以除去部分饱和脂肪酸甲酯，每次结晶后过滤去晶体(饱和脂肪酸甲酯)，最后再次在-30℃下结晶24小时并过滤去析出物，浓缩回收丙酮后按脂肪酸甲酯(升)∶尿素(公斤)∶甲醇(公斤)＝1∶2-4∶8-10的比例加入尿素和甲醇，在氮气保护下80℃回流1小时，缓慢冷却至室温，多数饱和及一烯二烯脂肪酸甲酯和尿素形成络合物而析出，放置24小时过滤去结晶，在零度环境下放置24小时后再次过滤去结晶，加入等体积水后，用两倍体积的石油醚萃取GLA甲酯(纯度可达70％)，浓缩回收石油醚后重复尿素包合结晶过程，再加入等体积的水后，用两倍体积的石油醚萃取GLA甲酯，浓缩回收石油醚，得GLA甲酯，纯度可达到80％左右，
步骤四、将步骤三得到的GLA甲酯在高真空(10Pa以下)，100-150℃分级蒸馏，得到GLA甲酯纯品(纯度90％以上)。
如需得到更高纯度的产品，可以采用下列步骤进一步纯化：
将硝酸银溶解于适量70％乙醇中，加入层析硅胶充分混合，硝酸银与硅胶的重量比为1∶10，避光用氮气吹干，混合于正己烷中上层析柱，取GLA甲酯溶解于正己烷中，上柱，用正己烷-丙酮混合溶剂梯度洗脱，得到GLA甲酯高纯品(纯度可达到99％以上)。本发明的从藻类提取、制备、纯化γ-亚麻酸甲酯的工艺，能从易得的藻类制得高纯度的γ-亚麻酸甲酯，并且提取了γ-亚麻酸后的藻粉还可以作为提取蛋白和多糖的原料，因此，本发明的工艺经济、合理。本发明工艺的优点还在于：
1、用含大量极性夹带剂的超临界萃取来抽提藻类中的总脂，首先避免了烦琐、效率低、耗费大、有污染、提取后原料无法作为其他用途的传统有机溶剂提取方法。其次采用大量夹带剂在较高压力下能够有效的提取出富含GLA的脂类，并且采用超临界萃取还能够避免有机抽提过程中GLA氧化的问题。
2、用两次分子蒸馏，分子蒸馏具有耗费低、收率高、真空度高，受热时间短的优点，对GLA这样的热敏感性物质来说比较适合，但是由于一般富含GLA的原料中都存在含量相似的亚油酸，其和GLA沸点只相差不到0.5度，使GLA蒸馏纯化很难实现，本专利申请工艺中，第一步除去非脂肪酸甲酯类杂质，以利于下面的冷冻和尿素包合分离过程的实现。第二步是在已经经过冷冻和尿素包合分离过程，去除了大部分干扰性物质如亚油酸、油酸等以后，进行分子蒸馏，提高了分子蒸馏的效率。
四、具体实施方式
实施例1：
将原料极大螺旋藻(Spirulina maxia)藻粉2000克(内含GLA约14.5g)，加入1000mL甲醇匀浆后，在20MPa，40℃下，使用CO2作为溶剂进行超临界萃取，浓缩后得到56g总脂类，将总脂类溶解于12倍其体积的含氯乙酰5％的甲醇中，在氮气氛保护下80℃回流反应2小时后，冷却至室温，加入两倍体积的0.3％碳酸钠溶液，洗涤，离心取上层油层，浓缩得到总脂肪酸甲酯并回收甲醇，总甲酯在高真空度6-10Pa下，160℃分子蒸馏，收集馏出物，在馏出物中加入三倍体积的丙酮，依次在4℃，-10℃，-30℃下平衡结晶24小时，以除去部分饱和脂肪酸甲酯，每次结晶后过滤去晶体(饱和脂肪酸甲酯)，最后再次在-30℃下结晶24小时并过滤去析出物，浓缩回收丙酮后按脂肪酸甲酯(升)∶尿素(公斤)∶甲醇(升)＝1∶4∶10的比例加入尿素和甲醇，在氮气保护下80℃回流1小时，缓慢冷却至室温，除了GLA甲酯外，多数饱和及一烯二烯脂肪酸甲酯和尿素形成络合物而析出，放置24小时过滤去结晶，在零度环境下放置24小时后再次过滤去结晶，加入等体积水后，用两倍体积石油醚萃取GLA甲酯(纯度最高可达70％)，浓缩回收石油醚后重复尿素包合结晶过程，再加入等体积水后，用两倍体积石油醚萃取GLA甲酯，蒸馏回收石油醚，得GLA甲酯，GLA甲酯纯度可达到80％左右，最后再在高真空(10Pa以下)，100-150℃分级蒸馏，得到GLA甲酯纯品(纯度90％以上)1.4g，如需得到99％纯度的产品，将0.1g硝酸银溶解于适量70％乙醇中与1g硅胶充分混合，避光用氮气吹干，混合于4ml正己烷中上直径0.5cm层析柱，取30mgGLA甲酯溶解于2ml正己烷中，上柱，用不同浓度的正己烷∶丙酮梯度洗脱，得到GLA甲酯纯品(纯度可达到99％以上，该层析步骤中高纯度GLA收率可达21％)。
实施例2：
将原料极大螺旋藻(Spirulina maxia)藻粉2000克(内含GLA约14.5g)，加入4000ml甲醇匀浆后，在50Mpa，60℃下，使用CO2作为溶剂进行超临界萃取，浓缩后可得到98g总脂类，将总脂类溶解于12倍其体积的含氯乙酰5％的甲醇中，在氮气氛保护下80℃回流反应2小时后，冷却至室温，加入两倍体积0.3％碳酸钠溶液，离心取上层油层，浓缩得到总脂肪酸甲酯并回收甲醇，总甲酯在高真空度6-10Pa下，160℃分子蒸馏，收集馏出物，在馏出物中加入三倍体积的丙酮，依次在4℃，-10℃，-30℃下平衡结晶24小时，以除去部分饱和脂肪酸甲酯，每次结晶后过滤去晶体(饱和脂肪酸甲酯)，最后再次在-30℃下结晶24小时并过滤去析出物，浓缩回收丙酮后按脂肪酸甲酯(升)∶尿素(公斤)∶甲醇(升)＝1∶2∶8的比例加入尿素和甲醇，在氮气保护下80℃回流1小时，缓慢冷却至室温，除了GLA甲酯外，多数饱和及一烯二烯脂肪酸甲酯和尿素形成络合物而析出，放置24小时后，过滤去结晶，再在零度环境下放置24小时后再次过滤去结晶，加入等体积的水后，用两倍体积的石油醚萃取GLA甲酯(纯度最高可达70％)，浓缩回收石油醚后重复尿素包合结晶过程，再加入等体积的水后，用两倍体积的石油醚萃取GLA甲酯，浓缩回收石油醚，得GLA甲酯，GLA甲酯纯度可达到80％左右，最后再在高真空(10Pa以下)，100-150℃分级蒸馏，得到GLA甲酯纯品(纯度90.08％)2.2g。
如需得到99％纯度的产品，可将0.1g硝酸银溶解于适量70％乙醇中和1g硅胶充分混合，避光用氮气吹干，混合于4ml正己烷中上直径0.5cm层析柱，取30mgGLA甲酯溶解于2ml正己烷中，上柱，用不同浓度的正己烷∶丙酮梯度洗脱，得到GLA甲酯纯品(纯度可达到99％以上)。
实施例3：
将原料冻干念珠藻(Nostoc sp)藻粉2000克(内含GLA约36.4g)，加入4000ml甲醇匀浆后，在40MPa，60℃下，使用CO2作为溶剂进行超临界萃取，得到103g总脂类，以下步骤如实施例2，最后得到纯度为90％以上的GLA甲酯4.8g。
实施例4：
将原料冻干项圈藻(Anabaenopsis sp)藻粉2000克(内含GLA约6.2g)，加入4000ml甲醇匀浆后，在40MPa，60℃下，使用CO2作为溶剂进行超临界萃取，得到85g总脂类，以下步骤如实施例2，最后得到纯度为90％以上的GLA甲酯0.72g。
虽然不同藻中GLA含量可能占总脂肪酸含量的4％-34％，该方法同样可以应用于不同种类不同生长环境中的藻类的GLA甲酯的提取、制备、纯化。

Claims (3)

1.一种从藻类提取、制备、纯化γ-亚麻酸甲酯的工艺，其特征是它由如下步骤组成：
步骤一、将藻粉加入夹带剂甲醇匀浆后，在20-50MPa，20-60℃下，使用CO2作为溶剂进行超临界萃取，浓缩后得到总脂类，
步骤二、将步骤一得到的总脂类溶解于12倍其体积的含氯乙酰5％的甲醇中，在氮气氛保护下80℃回流反应2小时后，冷却至室温，加入两倍体积的0.3％碳酸钠溶液，洗涤，离心取上层油层，浓缩得到总脂肪酸甲酯并回收甲醇，总甲酯在高真空度6-10Pa下，160℃分子蒸馏，收集馏出物，
步骤三、将步骤二所得的馏出物加入三倍体积的丙酮，依次在4℃，-10℃，-30℃下平衡结晶24小时，每次结晶后过滤去晶体，最后再次在-30℃下结晶24小时并过滤去析出物，浓缩回收丙酮后按脂肪酸甲酯(升)∶尿素(公斤)∶甲醇(公斤)＝1∶2-4∶8-10的比例加入尿素和甲醇，在氮气保护下80℃回流1小时，缓慢冷却至室温，放置24小时过滤去结晶，在零度环境下放置24小时后再次过滤去结晶，加入等体积水后，用两倍体积的石油醚萃取γ-亚麻酸甲酯，浓缩回收石油醚后重复尿素包合结晶过程，再加入等体积的水后，用两倍体积的石油醚萃取γ-亚麻酸甲酯，蒸馏回收石油醚，得γ-亚麻酸甲酯，
步骤四、将步骤三得到的γ-亚麻酸甲酯在高真空，100-150℃分级蒸馏，得到γ-亚麻酸甲酯纯品。
2.根据权利要求1所述的工艺，其特征是加入夹带剂甲醇的量是每克藻粉加0.5～2毫升的甲醇。
3.根据权利要求1所述的工艺，其特征采用下列步骤进一步纯化：
将硝酸银溶解于适量70％乙醇中，加入层析硅胶充分混合，硝酸银与硅胶的重量比为1∶10，避光用氮气吹干，混合于正己烷中上层析柱，取γ-亚麻酸甲酯溶解于正己烷中，上柱，用正己烷-丙酮混合溶剂梯度洗脱，得到γ-亚麻酸甲酯高纯品。
CNB031133983A 2003-05-08 2003-05-08 从藻类提取、制备、纯化γ－亚麻酸甲酯的工艺 Expired - Fee Related CN1253426C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB031133983A CN1253426C (zh) 2003-05-08 2003-05-08 从藻类提取、制备、纯化γ－亚麻酸甲酯的工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB031133983A CN1253426C (zh) 2003-05-08 2003-05-08 从藻类提取、制备、纯化γ－亚麻酸甲酯的工艺

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1448383A true CN1448383A (zh) 2003-10-15
CN1253426C CN1253426C (zh) 2006-04-26

Family

ID=28684055

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB031133983A Expired - Fee Related CN1253426C (zh) 2003-05-08 2003-05-08 从藻类提取、制备、纯化γ－亚麻酸甲酯的工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1253426C (zh)

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100415335C (zh) * 2004-03-11 2008-09-03 南京农业大学 一种海藻抗氧化活性成分的制备方法
CN100453519C (zh) * 2007-01-19 2009-01-21 中国科学院山西煤炭化学研究所 一种亚麻酸或亚麻酸低级酯的生产方法
CN102517156A (zh) * 2011-12-31 2012-06-27 中国海洋大学 一种快速高效的微藻脂肪酸甲酯的制备方法
CN102630943A (zh) * 2012-05-08 2012-08-15 北京林业大学 一种螺旋藻γ-亚麻酸提取物及其制备方法
CN103071435A (zh) * 2013-02-01 2013-05-01 深圳市兰亭科技有限公司 一种γ-亚麻酸纳米微胶囊的制造方法
US8591825B2 (en) 2011-05-18 2013-11-26 Industrial Technology Research Institute Extraction apparatus
US8828318B2 (en) 2011-05-04 2014-09-09 Industrial Technology Research Institute High-pressure extraction apparatus and method
CN107778337A (zh) * 2016-08-26 2018-03-09 国家开发投资公司 超临界二氧化碳萃取螺旋藻中糖脂的方法
CN107874253A (zh) * 2016-09-30 2018-04-06 国家开发投资公司 一种富含γ‑亚麻酸的螺旋藻糖脂制备方法
CN109321352A (zh) * 2018-10-10 2019-02-12 浙江省海洋水产研究所 一种从南极磷虾中提取高脂肪酸含量虾油的方法

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100415335C (zh) * 2004-03-11 2008-09-03 南京农业大学 一种海藻抗氧化活性成分的制备方法
CN100453519C (zh) * 2007-01-19 2009-01-21 中国科学院山西煤炭化学研究所 一种亚麻酸或亚麻酸低级酯的生产方法
US8828318B2 (en) 2011-05-04 2014-09-09 Industrial Technology Research Institute High-pressure extraction apparatus and method
US8591825B2 (en) 2011-05-18 2013-11-26 Industrial Technology Research Institute Extraction apparatus
CN102517156A (zh) * 2011-12-31 2012-06-27 中国海洋大学 一种快速高效的微藻脂肪酸甲酯的制备方法
CN102630943A (zh) * 2012-05-08 2012-08-15 北京林业大学 一种螺旋藻γ-亚麻酸提取物及其制备方法
CN103071435A (zh) * 2013-02-01 2013-05-01 深圳市兰亭科技有限公司 一种γ-亚麻酸纳米微胶囊的制造方法
CN103071435B (zh) * 2013-02-01 2014-11-05 深圳市兰亭科技股份有限公司 一种γ-亚麻酸纳米微胶囊的制造方法
CN107778337A (zh) * 2016-08-26 2018-03-09 国家开发投资公司 超临界二氧化碳萃取螺旋藻中糖脂的方法
CN107778337B (zh) * 2016-08-26 2020-12-08 国投生物科技投资有限公司 超临界二氧化碳萃取螺旋藻中糖脂的方法
CN107874253A (zh) * 2016-09-30 2018-04-06 国家开发投资公司 一种富含γ‑亚麻酸的螺旋藻糖脂制备方法
CN109321352A (zh) * 2018-10-10 2019-02-12 浙江省海洋水产研究所 一种从南极磷虾中提取高脂肪酸含量虾油的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN1253426C (zh) 2006-04-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1253426C (zh) 从藻类提取、制备、纯化γ－亚麻酸甲酯的工艺
CN110845328A (zh) 一种以迷迭香油膏副产品制备高纯度鼠尾草酸的方法
CN107778277B (zh) 回收角鲨烯、维生素e和/或甾醇的方法
CN114573421A (zh) 一种从香紫苏醇发酵液中提取和纯化香紫苏醇的方法
CN1686988A (zh) 一种高纯茄尼醇的生产方法
CN111499529A (zh) 一种紫外线吸收剂UVA Plus的合成方法
CN111875482B (zh) 一种从蒿属植物中提取白坚木皮醇的方法
CN104987952B (zh) 从红景天全草中提取挥发油及红景天甙的方法
CN102199159B (zh) 从银杏根皮中分离、纯化银杏内酯c的方法
CN1307583A (zh) 通过提取制备芦荟素的方法
CN1166634C (zh) 15n－l－脯氨酸的分离提纯方法
CN107033114B (zh) 一种二氢杨梅素的分离纯化方法
CN113372198B (zh) 一种高纯度丙泊酚的精制方法
CN113135972B (zh) 纯化24-脱氢胆固醇的方法
CN114014828A (zh) 一种从甜菊糖提取渣中回收槲皮素的方法及其应用
CN106631745A (zh) 一种从湖北海棠叶中提纯根皮素的方法
CN115504864A (zh) 从工业大麻中获取高纯度大麻二酚的方法
CN112645813A (zh) 一种(r)-3-环己烯甲酸的制备方法
CN101974014B (zh) 一种从银杏树根皮中提取银杏内酯a、c的制作工艺
CN1275957C (zh) 一种黄栌提取物的制备方法
CN1036776C (zh) 分离、提纯富勒烯碳60的方法
CN114478195B (zh) 一种从微生物发酵产物中提取大麻萜酚的方法
CN1472183A (zh) 高纯度番茄红素的制备方法
CN114349600B (zh) 一种富集l-异胡薄荷醇的制备方法
CN1401644A (zh) 高含量混合生育酚的提取方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C19 Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee