CN1349797A - 用于保存猪精子的稀释剂 - Google Patents

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Abstract

用于保存猪精子的浓缩液体稀释剂,其特征在于它含有防腐剂、液体抗生素配方、至少一种碳水化合物、至少一种缓冲液、至少一种盐和至少一种抗氧化剂。

Description

用于保存猪精子的稀释剂
技术领域
本发明涉及一种用于保存猪精子的稀释剂。
背景技术
良好的繁殖卫生首先通过制约危险因素的预防性措施得以实现。这些措施涉及与人工授精相关的场所与操作、分娩等。一种这样的预防措施能够最大限度地抑制细菌的存在及其发育。这些细菌构成污染精液和子宫的原因，其结果使猪生产场所的性能水平严重变坏。
在准备精液时，稀释剂由于其生物学质量和细菌学质量构成保持精液剂量受精能力的重要因素。
人们知道一些粉状猪稀释剂。如果它们易于运输和储存，这些粉状猪稀释剂就有许多缺陷。
首先，它们不可能得到灭菌处理。
另外，用粉末制备待用猪稀释剂的时间长，也令人厌烦。对于一升备用猪稀释剂，事实上通常应该稀释50-60克粉末，混合与溶解过程日历时约10分钟，稳定时间约15分钟。
由于储存与搬运的原因，希望将稀释剂制成浓缩的形式。
与目前已知的粉状猪稀释剂相比，制备呈浓缩液体形式的猪稀释剂是极快速的。但是，人们尚不知道稳定的呈浓缩液体形式的猪稀释剂。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种稳定的尤其是不产生黄化问题的呈浓缩液体形式的猪稀释剂。
本发明的另一个目的是提供一种能够经过灭菌处理的猪稀释剂。
本发明的另一个目的是提供一种具有对种公猪精液的常见污染物产生功效的抗生细成的猪稀释剂。
本发明的其他目的和优点体现在下面的说明中。
具体实施方式
已知的猪稀释剂不能够解决所提出的这些问题。
大多数已知的猪稀释剂呈粉末状，然而，实际上不可能保证粉末无菌。
另外，尽管大量使用作为种公猪精液抗生素的庆大霉素，但是公猪精液在储存三天之后还可能受到严重污染。
人们尚不了解同时呈稳定与浓缩液体形式的猪稀释剂。
本发明的稀释剂满足所确定的目的，可克服上述问题。
本发明的稀释剂呈浓缩的液体状。该稀释剂的特征在于它含有防腐剂、液体抗生素配方、至少一种碳水化合物、至少一种缓冲剂、至少一种盐和至少一种抗氧化剂。
该防腐剂有利地选自在其上接枝磷脂酸以构成磷脂的分子，而磷脂是细胞膜中的一种化合物。本发明的防腐剂例如包括环己六醇，像肌醇，以及胆碱、乙醇胺和丝氨酸。肌醇是特别优选的防腐剂。
液体抗生素有利地选自恩氟沙星、林可霉素(lincomicyne)和壮观霉素。恩氟沙星是一种特别优选的液体抗生素。
恩氟沙星是1-环丙基-7-(4-乙基-1-哌嗪基)-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-3-喹啉羧酸。它由拜耳公司按照商品名Baytril以10％溶液的形式销售。
林可霉素和壮观霉素由Upjohn公司分别以商品名Lincocine和Trobicine销售。
碳水化合物可以选自非还原性碳水化合物和还原性碳水化合物。在非还原性碳水化合物中，可以列举蔗糖、海藻糖(tréalose)和棉子糖，在还原性碳水化合物中，可以列举(无水或一水合)葡萄糖和果糖。
在缓冲剂中，可以列举三羟甲基甲基胺，这种缓冲剂通常被称作三羟甲基氨基甲烷缓冲剂，或简单地被称作Tris，以及柠檬酸三钠和乙二胺四乙酸(EDTA)。应该指出，EDTA还可以起到抗凝集剂的作用。
在盐中，可以非限制性地列举柠檬酸、柠檬酸钠、氯化钾、碳酸氢钠。
在抗氧化剂中，可以列举氨基酸衍生物，如肽，例如像还原的谷胱甘肽、半胱氨酸、N-乙酰基-半胱氨酸和牛磺酸。
本发明的稀释剂通常制成浓缩形式，也被称作“浓缩物”。然后，液体浓缩物例如采用膜过滤进行灭菌，再稀释。
使用时，进行稀释，一般稀释十倍。
稀释时，优选地使用超纯水，如不致热的灭菌二次蒸馏水。
本发明提供一种呈“短期”保存(保存时间为3-4天)形式与“长期”保存(保存时间为5-6天)形式的猪稀释剂。通过将这些组分稀释在水中可得到“短期”保存形式。通过往“短期”保存形式中添加牛白蛋白(也称BSA)可得到“长期”保存形式。
在下表中给出了一个本发明稀释剂的浓缩物配方实例(浓缩十倍)：
                               表1
化合物 浓缩物的浓度克/升
无水葡萄糖 150-220，优选地，170-190
蔗糖 100-150，优选地，120-140
肌醇 60-70，优选地，65-68
Tris 30-50，优选地，38-42，
柠檬酸三钠 20-40，优选地，28-32
柠檬酸 18-28，优选地，20-25
KCl 5-10，优选地，7-8
EDTA 10-15，优选地，12-13
NaHCO3 10-15，优选地，12-13
N-乙酰基半胱氨酸 1-3，优选地，1.8-2.2
抗生素*
*每100毫升浓缩物为100-200微升10％恩氟沙星溶液和2.5-3毫升林可霉素/壮观霉素(spectomycine)(Upjohn的Linco-spectin)溶液。
制备1升浓缩溶液(“短期”保存配方或浓缩配方，在同业中还被称为“中长期膨胀剂”)，然后分装在10支100毫升瓶中。往每个100毫升瓶中添加抗生素配方。
对于本发明“长期”保存配方(在同业中也被称为“长期膨胀剂”)，往浓缩物添加BSA，优选地往1升浓缩物(浓缩溶液)添加8-15克/升BSA。
“短期”或“长期”保存配方的溶液采用双膜过滤灭菌，例如，第一个膜为0.45微米，第二个膜为0.22微米。

Claims (17)

1、用于保存猪精子的液体稀释剂，其特征在于它含有防腐剂、液体抗生素配方、至少一种碳水化合物、至少一种缓冲剂、至少一种盐和至少一种抗氧化剂。
2、权利要求1的稀释剂，其特征在于所述防腐剂选自在其上接枝磷脂酸以构成磷脂的分子，而磷脂是细胞膜中的一种化合物。
3、权利要求2的稀释剂，其特征在于所述防腐剂选自环己六醇、胆碱、乙醇胺和丝氨酸。
4、权利要求3的稀释剂，其特征在于所述防腐剂是环己六醇。
5、权利要求4的稀释剂，其特征在于所述环己六醇是肌醇。
6、权利要求1-5中任一项的稀释剂，其特征在于所述液体抗生素选自恩氟沙星、林可霉素和壮观霉素。
7、权利要求6的稀释剂，其特征在于所述抗生素是恩氟沙星。
8、权利要求1-7中任一项的稀释剂，其特征在于所述碳水化合物选自非还原性碳水化合物和还原性碳水化合物。
9、权利要求8的稀释剂，其特征在于所述非还原性碳水化合物选自蔗糖、海藻糖和棉子糖。
10、权利要求9或10的稀释剂，其特征在于所述还原性碳水化合物选自葡萄糖和果糖。
11、权利要求1-10中任一项的稀释剂，其特征在于所述缓冲剂选自三羟甲基甲基胺，这种缓冲剂也被称作三羟甲基氨基甲烷缓冲剂或Tris，以及柠檬酸三钠和乙二胺四乙酸(EDTA)。
12、权利要求1-11中任一项的稀释剂，其特征在于所述盐选自柠檬酸、柠檬酸钠、氯化钾和碳酸氢钠。
13、权利要求1-12中任一项的稀释剂，其特征在于所述抗氧化剂选自肽和氨基酸衍生物。
14、权利要求13的稀释剂，其特征在于氨基酸衍生物选自肽化合物、牛磺酸、半胱氨酸和N-乙酰基-半胱氨酸。
15、权利要求1-14中任一项的稀释剂，其特征在于它还含有牛白蛋白。
16、权利要求1-15中任一项的稀释剂，其特征在于它经过灭菌处理。
17、权利要求16的稀释剂，其特征在于通过膜过滤进行灭菌。
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