CN1330755C - 一种拟南芥转录因子及其编码基因与应用 - Google Patents

一种拟南芥转录因子及其编码基因与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种拟南芥转录因子基因及其编码蛋白与应用。本发明所提供的拟南芥转录因子基因，是下列核苷酸序列之一：1)序列表中SEQ ID NO：1的DNA序列；2)编码序列表中SEQ ID NO：2蛋白质序列的多核苷酸。本发明的基因可用于培育耐旱、耐盐、耐氧化等耐逆植物品种。

Description

一种拟南芥转录因子及其编码基因与应用
技术领域
本发明涉及基因工程领域中的一种植物转录因子及其编码基因与应用，特别涉及一种拟南芥转录因子及其编码基因与在培育植物耐逆品种中的应用。
背景技术
植物生长发育过程中的任何不适环境因素均可称为环境胁迫，一般分为生物胁迫(如病虫害)与非生物胁迫。后者包括水分(干旱与涝灾)，温度，盐碱，光照，营养等多方面的胁迫。
环境胁迫给农业生产带来的危害是世界性的，非生物胁迫，特别是干旱造成的危害尤重(Boyer JS.1982.Plant productivity and environment.Science218：443-448)，其严重性如表1所示，可使农作物减产50％至80％。正因为如此，很多科学家都将植物非生物胁迫生物学作为研究重点，以期加速发现植物耐非生物胁迫的基因和分子机理，为基因工程改良农作物耐逆性抢占制高点。
表1、八种不同作物的平均产量与最高记录产量
作物   最高记录产量(公斤/公顷)    平均产量(公斤/公顷)  平均损失(公斤/公顷)   非生物胁迫损失所占最高记录产量的％
  生物胁迫   非生物胁迫
玉米   19,300    4,600   1,952   12,700   65.8
小麦   14,500    1,880   726   11,900   82.1
大豆   7,390    1,610   666   5,120   69.3
高粱   20,100    2,830   1,051   16,200   80.6
燕麦   10,600    1,720   924   7,960   75.1
大麦   11,400    2,050   765   8,590   75.4
土豆   94,100    28,300   17,775   50,900   54.1
甜菜   121,000    42,600   17,100   61,300   50.7
注：生物胁迫包括病、虫和杂草；非生物胁迫主要包括干旱，盐硷，涝灾，低温和高温。
我国是农业大国，非生物胁迫给我国农业带来的危害非常严重，其中干旱与土壤盐碱化是限制我国农业可持续性发展的主要因素。我国可耕农地的50％受干旱影响，即使在降水较多的华中和华南地区，由于雨量分布不均，这些地区的水稻几乎每年在扬花的关键时期都受干旱的影响，直接影响产量，情节严重时甚至颗粒无收。我国北方大部分地区的降雨量偏低，加重土壤的盐碱化，严重影响农业生产。
研究非生物胁迫生物学和分离克隆耐逆基因非常重要，全世界的植物生物学家也为此做了大量的工作，并取得很多新进展，特别在利用高等模式植物拟南芥来研究植物的耐盐分子机理方面，使该领域的研究有了突破性的进展(Zhu JK.2002.Salt and drought stress signal transduction in plants.Annu.Rev.Plant Biol.53：1247-273；Xiong LM，Schumaker KS，Zhu JK.2002.Cell signaling duringcold，drought，and salt stress.Plant Cell.S165-S183)。高等植物细胞可有多种途径感受外界环境中物化参数的变化，从而将胞外的信号变为胞内信号，通过系列的信号传导最后将胁迫信号传递至细胞核内，激活转录因子，而激活转录因子再作用于功能基因，启动逆境应答基因的表达从而提高植物的耐逆性。在植物耐干旱胁迫的研究上大多停留在渗透压调节与脱落酸(ABA)信息传导方面，拟南芥功能缺失突变体为此作出重要贡献(Zhu JK.2002.Salt and drought stress signaltransduction in plants.Annu.Rev.Plant Biol.53：1247-273；Xiong LM，Schumaker KS，Zhu JK.2002.Cell signaling during cold，drought，and saltstress.Plant Cell.S165-S183)。与功能缺失突变体相比，功能获得性突变体对研究耐干旱胁迫的分子机理更为直接和优越，分离克隆的基因可以直接用于生产。
发明创造内容
本发明的目的是提供一种拟南芥转录因子及其编码基因。
本发明所提供的拟南芥转录因子基因，名称为AtHD/START1，来源于拟南芥突变体，是下列核苷酸序列之一：
1)序列表中SEQ ID №：1的DNA序列；
2)编码序列表中SEQ ID №：2蛋白质序列的多核苷酸；
3)与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列具有80％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列。
序列表1中的cDNA序列由2169个碱基组成，该基因的读码框为自5’端第1到第2169位碱基。
拟南芥转录因子，名称为AtHD/START1，是具有序列表中SEQ ID №：2氨基酸残基序列的蛋白质，或者是将SEQ ID №：2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有与SEQ ID №：2的氨基酸残基序列相同活性的由SEQ ID №：2衍生的蛋白质。
序列表中序列2氨基酸残基序列是由722个氨基酸残基组成的蛋白质。
含有本发明基因的表达载体及细胞系均属于本发明的保护范围。
扩增AtHD/START1中任一片段的引物对也在本发明的保护范围之内。
利用任何一种可以引导外源基因在植物中表达的载体，将本发明所提供的AtHD/START1过量表达导入植物细胞，植物就表现耐旱、耐盐、耐氧化胁迫等耐逆性状；或者将AtHD/START1敲除掉，植物就表现为不耐旱、不耐盐、不耐氧化胁迫等性状。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所使用的载体进行加工，如加入植物可选择性标记或具有抗性的抗生素标记物。被转化的植物宿主既可以是单子叶植物，也可以是双子叶植物，如水稻、小麦、玉米、黄瓜、番茄、杨树、草坪草、苜宿等。本发明的基因不但可以用来改良农作物的耐逆性，而且对植物生物学基础研究有十分重要的价值。
附图说明
图1a为拟南芥耐逆功能获得突变体地上部分的形态特征
图1b为拟南芥耐逆功能获得突变体的主根长度对比
图1c为拟南芥耐逆功能获得突变体的侧根数量对比
图1d为拟南芥耐逆功能获得突变体的侧根数和根系干重对比柱状图
图2a为野生型与耐逆突变体对干旱胁迫的反应对比
图2b为T2分离群体对干旱胁迫的反应
图2c为同盆生长条件下的干旱胁迫对比
图2d为野生型与突变体离体叶片失水对比
图3a为野生型与突变体在0.2M NaCl盐胁迫18天后的对比
图3b为野生型与突变体幼苗生长对盐胁迫反应的对比
图3c为野生型与突变体幼苗生长对盐胁迫反应的对比柱状图
图4为野生型与突变体幼苗生长对氧化胁迫反应的对比
图5为RT-PCR分析被标记基因在突变体T2植株莲苔叶中的表达
图6为拟南芥HD/START1的功能域
图7示35S-cDNA转化体，突变体和野生型拟南芥的发芽对盐胁迫(150mM NaCl)的反应
图8为35S-cDNA转化体，突变体和野生型拟南芥在含PARAQUAT的MS培养基上继续生长一星期后的大小对比柱状图
图9a为野生型，突变体和35S-cDNA转化体在不同盐浓度胁迫下的成活率对比柱状图
图9b为野生型，突变体和35S-cDNA转化体在200mMNaCl胁迫30天的成活率对比
图10为野生型，突变体和35S-cDNA转化体在不同盐浓度胁迫下的抽苔率对比柱状图
图11为野生型，突变体和35S-cDNA转化体在不同盐浓度胁迫下的果荚重对比柱状图
图12为野生型，突变体和35S-cDNA转化体在100mM盐浓度下的果荚种子数量对比柱状图
图13为野生型，突变体和35S-cDNA转化体在100mM盐浓度下的果荚和植株对比
图14为35S-cDNA转化体和野生型对干旱胁迫的反应对比
具体实施方式
实施例1、拟南芥耐逆功能获得性突变体的筛选与形态观察分析
为了分离功能获得性突变体，发明人创建了一个拟南芥(Arabidopsisthaliana)T-DNA激活标记突变体库(-55000株系)，(Weigel et al.，2000.Activation tagging in Arabidopsis.Plant Physiol.122：1003-13.)，并从T1群体中获得一株营养生长旺盛，耐逆性增强的突变体。
在长日照条件下，该突变体表型为营养生长旺盛，五星期大小的野生型与突变体植株比较，莲苔叶片数增加，是野生型的4倍以上，莲苔致密有序，其叶片的叶柄较野生型短(如图1a)。在短日照条件下，其地上部分的形态与野生型差异减小，但突变体叶片数仍然较野生型多。
突变体与野生型在根系上存在显著差异。突变体根系主根发育较野生型快，主根长度显著高于野生型，一星期大小突变体幼苗的主根长度几乎是野生型的两倍(如图1b)。此外，侧根数量以及整个根系的大小都明显地高于野生型：二星期大小突变体幼苗的侧根数量是野生型的两倍，根系干重显著高于野生型(图1c和图1d)。
以上所述突变体的形态及生长特性，特别是根系，正是众多农作物，园艺植物，和牧草植物改良所期望的优良性状。
实施例2、拟南芥耐逆功能获得性突变体对干旱胁迫的反应
1、野生型与耐逆突变体幼苗对干旱胁迫反应的对比
两星期大小的植株在高密度栽植条件下进行干旱胁迫实验，土壤，光照，温度，水份等生长条件完全相同，并且将野生型和突变体盆放置在同一托盘内，连续2个星期不浇水，然后恢复浇水以观察失水后植物生长的恢复情况，结果如图2a所示，表明野生型植物连续一个星期不浇水后出现萎蔫，而突变体在同一时间完好无损；将干旱胁迫持续到两个星期，野生型植物死亡，完全失去再给水后的生理恢复，而绝大部分突变体植物可以完全恢复。
2、突变体T2分离群体对干旱胁迫的反应
将T2分离群体随机栽种在土壤中(生长条件完全相同)，四星期大小时检测单株植物对除草剂的抗性，并连续2个星期不浇水，以观察植物失水叶片萎蔫情况。结果如图2b所示，表明突变体的耐旱性状与抗除草剂基因完全连锁。图2b中，叶片发黄者为野生型。
3、野生型与耐逆突变体在同盆生长条件下的对比
将一株突变体和一株野生型栽种在同一盆内，四星期大小时进行干旱胁迫，即连续2个星期不浇水，以观察植物失水叶片萎蔫情况。结果如图2c所示，表明突变体的耐干旱性明显优于野生型。
4、野生型与突变体离体叶片失水对比
将突变体和野生型栽种在同一盆内，四星期时取莲台叶进行离体失水对比实验，即将同龄叶片分别从野生型与突变体植株切下，称量初始重量，然后置于室温下的空气中，每20分钟称量一次叶片重量，叶片失水以[％＝(初始重-某时间后之重量)/初始重)来衡量。结果如图2d所示，表明野生型叶片失水显著高于突变体。叶片离体失水试验证明突变体耐旱的可能原因之一是与叶片失水降低有关。
实施例3、拟南芥耐逆功能获得性突变体对盐胁迫的反应
将突变体和野生型栽种在同一盘内，生长条件完全相同，当生长四星期时，浇灌0.2M NaCl溶液。盐胁迫处理后18天的结果如图3a所示，表明野生型(左盆)已经死掉，突变体(右盆)继续生长。说明该突变体除耐旱外，还兼具一定的耐盐性。
将突变体和野生型种子在不含NaCl的MS发芽培养基上发芽，当幼苗一星期大小时转移到含100与150mM NaCl的培养基上继续生长。观察记录生长情况，并以叶片数量来衡量其生长。两星期后，统计叶片数。结果如图3b和3c所示，表明在盐胁迫条件下，突变体叶片数显著高于野生型。图3b和3c中，wt表示野生型，mutant表示突变体。
实施例4、拟南芥耐逆功能获得性突变体对氧化胁迫的反应
将突变体和野生型种子在不含Paraquat的MS发芽培养基上发芽，幼苗一星期大小时转移到含0.2mM与2.0mM Paraquat的培养基上继续生长两星期后，统计叶片数。结果如图4所示，表明在0.2mM Paraquat氧化胁迫条件下，突变体(mutant)叶片数显著高于野生型(wt)，野生型植株普遍白化；2.0mM时，所有的野生型植株白化死亡，但大多数突变体苗仍然成活。
实施例5、标记基因(AtHD/START1)的克隆、表达
实施例2的步骤2表明突变体的耐旱性状与抗除草剂基因完全连锁。强烈暗示被标记基因与耐逆性增强相关。同时也为分离克隆被标记基因提供了充分的证据。
1、标记基因(AtHD/START1)的获得
首先按照Xiang et al.方法以BAR基因为探针进行(1997，DNA-bindingproperties，genomic organization and expression pattern of TGA6，a newmember of the TGA family of bZIP transcription factors in Arabidopsisthaliana.Plant Mol Biol.34：403-15.)DNA膜杂交，鉴定其基因组内的T-DNA为单拷贝，然后按照Weigel et al.所述方法进行(2000，Activation tagging inArabidopsis.Plant Physiol.122：1003-13)质粒拯救克隆T-DNA插入位点。最后DNA测序鉴定被标记的基因。该标记基因的核苷酸序列如序列表中的序列1所示，其编码的氨基酸序列如序列表中的序列2所示。将该标记基因命名为AtHD/START1。经过BLAST搜索，确定该基因(At1g73360)位于第一条染色体。T-DNA插入其启动子之中，从序列与结构上证实该突变确实系激活突变。
以拟南芥转录因子AtHD/START1在NCBI GenBank中进行BLAST检索，表明在拟南芥基因组中，这一基因家族至少有17个成员，拟南芥AtHD/START1(At1g73360)与成员之间的氨基酸序列相似性分别为At1g17920(80％)、At4g21750(66％)、At4g04890(66％)、At1g05230(65％)、At3g61150(65％)、At4g00730(63％)、At5952170(60％)、At5g46880(60％)、At2932370(58％)、At3g03260(58％)、At4g17710(58％)、At5g17320(57％)、At1g79840(57％)、At1g34650(57％)、At4g25530(51％)和At5g07260(46％)。并发现两个功能域，如图6所示，即HD和START。HD是一个与DNA特异结合的功能域，START可能是一个结合信号分子的功能域。
2、AtHD/START1的表达
RT-PCR分析AtHD/START1在突变体T2植株莲苔叶中的表达，具体过程如下：总量RNA的抽提采用Trizol试(INVITROGEN)，使用1微克总量RNA作为反转录反应的模板，d(T)25作为反转录的引物，每个反转录反应使用200单位的SUPERSCRIPTII反转录酶(INVITROGEN)并按照反转录酶产品使用指南进行。RT-PCR所用引物序列按照AtHD/START1基因的序列设计，其5’末端引物是5’atgagtttcgtcgtcggcgt3’，3’末端引物是5’tcaagctgtagttgaagctgt3’，PCR反应使用1微升反转录反应液为模板，其它完全按照Takara公司的ExTaq酶的使用指南进行，淬火温度为56摄氏度，延伸时间为100秒，30个循环。反应完毕之后，取10微升电泳检测PCR产物。结果如图5所示，表明AtHD/START1(标记基因)在野生型(wt)叶片内几乎没有表达(检测不出)，而在突变体(纯合体(+/+)与杂合体(+/-))叶片中的表达量高。其表达完全与耐逆性状连锁，不但从功能上证实其激活突变，而且强烈暗示该标记基因的过量表达是造成耐逆性增强的直接原因。
实施例6、过量表达AtHD/START1 cDNA重演耐逆突变体表型
AtHD/START1 cDNA首先被克隆至载体pGEM-Teasy(利用T-A克隆)，然后利用SacI和SalI将AtHD/START1 cDNA切出，并应用SacII/SpeI和SstI/SalIlinkers将AtHD/START1 cDNA连接至载体pCB302-3的SpeI和SstI酶切位点之间(Xiang et al.，1999.A mini binary vector series for plant transformation.Plant Mol Biol.40：711-7.)中，该载体含CaMV 35S启动子驱动目的基因的过量表达。含有AtHD/START1 cDNA的pCB302-3转化拟南芥与下述鉴定参照文献(Xiangetal.，2001.The biological functions of glutathione revisited inarabidopsis transgenic plants with altered glutathione levels.PlantPhysiol.126：564-74)进行。将过量表达AtHD/START1的cDNA的株系、突变体和野生型的种子在含有150mM NaCl的MS培养基中培养7天，观察发芽对盐胁迫(150mM NaCl)的反应，结果如图7所示，表明过量表达AtHD/START1的cDNA的株系(35S-cDNA转化体)与突变体相似，在发芽率与植株鲜重都显著比野生型(wt)高；将过表达AtHD/START1 cDNA的株系(35S-cDNA转化体)、突变体和野生型的一星期大幼苗在含1μM PARAQUAT(氧化剂)MS培养基上继续生长一星期后，观察它们对氧化剂的反应，结果如图8所示，表明突变体和35S-cDNA转化体的平均单株鲜重显著大于野生型，说明其抗氧化能力比野生性强；将35S-cDNA转化体株系、突变体和野生型的种子在含有不同浓度的NaCl的MS培养基中培养30天，观察野生型，突变体和35S-cDNA转化体在不同盐浓度胁迫30天的成活率，结果如图9a和图9b所示，表明在150和200mM盐浓度下，突变体和35S-cDNA转化体的成活率显著高于野生型；将35S-cDNA转化体株系、突变体和野生型的种子播种在含有不同浓度的NaCl的MS培养基中，培养至抽苔，观察野生型，突变体和35S-cDNA转化体在不同盐浓度胁迫下的抽苔率，结果如图10所示，表明在所试验的4个盐浓度下，突变体和35S-cDNA转化体的抽苔率都显著高于野生型；将35S-cDNA转化体株系、突变体和野生型的种子播种在含有不同浓度的NaCl的MS培养基中，培养至结实成熟，观察野生型，突变体和35S-cDNA转化体在不同盐浓度胁迫下的果荚重和在100mM盐浓度下的果荚种子数量以及果荚和植株的形态，结果如图11、图12和图13所示，图11表明在100mM盐浓度下，突变体和35S-cDNA转化体的果荚重都显著高于野生型；图12表明在100mM盐浓度下，突变体和35S-cDNA转化体的果荚种子数量都显著高于野生型；图13表明在100mM盐浓度下，突变体和35S-cDNA转化体的果荚和植株都显著好于野生型；如图14所示，将野生型和35S-cDNA过量表达植株栽于同盆之中，左为35S-cDNA转化体植株，右为野生型植株，当植物三星期大小时，将盆内土壤充分吸水，然后开始干旱胁迫，即不给植物供水两星期，结果表明35S-cDNA转化体植株较野生型植株耐旱。
突变体表型的重演性是决定一个基因是否可以实际应用的重要指标，以上的实验结果说明通过AtHD/START1 cDNA的过量表达(由CaMV 35S启动子驱动表达)可以重演突变体的耐逆性状与形态和生长特性。
序列表
<160>2
<210>1
<211>2169
<212>DNA
<213>拟南芥属拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400>1
atgagtttcg tcgtcggcgt cggcggaagt ggtagtggaa gcggcggaga cggtggtggt    60
agtcatcatc acgacggctc tgaaactgat aggaagaaga aacgttacca tcgtcacacc    120
gctcaacaga ttcaacgcct tgaatcgagt ttcaaggagt gtcctcatcc agatgagaaa    180
cagaggaacc agcttagcag agaattgggt ttggctccaa gacaaatcaa gttctggttt    240
cagaacagaa gaactcagct taaggctcaa catgagagag cagataatag tgcactaaag    300
gcagagaatg ataaaattcg ttgcgaaaac attgctatta gagaagctct caagcatgct    360
atatgtccta actgtggagg tcctcctgtt agtgaagatc cttactttga tgaacaaaag    420
cttcggattg aaaatgcaca ccttagagaa gagcttgaaa gaatgtctac cattgcatca    480
aagtacatgg gaagaccgat atcgcaactc tctacgctac atccaatgca catctcaccg    540
ttggatttgt caatgactag tttaactggt tgtggacctt ttggtcatgg tccttcactc    600
gattttgatc ttcttccagg aagttctatg gctgttggtc ctaataataa tctgcaatct    660
cagcctaact tggctatatc agacatggat aagcctatta tgaccggcat tgctttgact    720
gcaatggaag aattgctcag gcttcttcag acaaatgaac ctctatggac aagaacagat    780
ggctgcagag acattctcaa tcttggtagc tatgagaatg ttttcccaag atcaagtaac    840
cgagggaaga accagaactt tcgagtcgaa gcatcaaggt cttctggtat tgtcttcatg    900
aatgctatgg cacttgtcga catgttcatg gattgtgtca agtggacaga actctttccc    960
tctatcattg cagcttctaa aacacttgca gtgatttctt caggaatggg aggtacccat    1020
gagggtgcat tgcatttgtt gtatgaagaa atggaagtgc tttcgccttt agtagcaaca    1080
cgcgaattct gcgagctacg ctattgtcaa cagactgaac aaggaagctg gatagttgta    1140
aacgtctcat atgatcttcc tcagtttgtt tctcactctc agtcctatag atttccatct    1200
ggatgcttga ttcaggatat gcccaatgga tattccaagg ttacttgggt tgaacatatt    1260
gaaactgaag aaaaagaact ggttcatgag ctatacagag agattattca cagagggatt    1320
gcttttgggg ctgatcgttg ggttaccact ctccagagaa tgtgtgaaag atttgcttct    1380
ctatcggtac cagcgtcttc atctcgtgat ctcggtggag tgattctatc accggaaggg   1440
aagagaagca tgatgagact tgctcagagg atgatcagca actactgttt aagtgtcagc   1500
agatccaaca acacacgctc aaccgttgtt tcggaactga acgaagttgg aatccgtgtg   1560
actgcacata agagccctga accaaacggc acagtcctat gtgcagccac cactttctgg   1620
cttcccaatt ctcctcaaaa tgtcttcaat ttcctcaaag acgaaagaac ccgtcctcag   1680
tgggatgttc tttcaaacgg aaacgcagtg caagaagttg ctcacatctc aaacggatca   1740
catcctggaa actgcatatc ggttctacgt ggatccaatg caacacatag caacaacatg   1800
cttattctgc aagaaagctc aacagactca tcaggagcat ttgtggtcta cagtccagtg   1860
gatttagcag cattgaacat cgcaatgagc ggtgaagatc cttcttatat tcctctcttg   1920
tcctcaggtt tcacaatctc accagatgga aatggctcaa actctgaaca aggaggagcc   1980
tcgacgagct caggacgggc atcagctagc ggttcgttga taacggttgg gtttcagata   2040
atggtaagca atttaccgac ggcaaaactg aatatggagt cggtggaaac ggttaataac   2100
ctgataggaa caactgtaca tcaaattaaa accgccttga gcggtcctac agcttcaact   2160
acagcttga                                                           2169
<210>2
<211>722
<212>PRT
<213>拟南芥属拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400>2
Met Ser Phe Val Val Gly Val Gly Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Gly
1               5                   10                  15
Asp Gly Gly Gly Ser His His His Asp Gly Ser Glu Thr Asp Arg Lys
            20                  25                  30
Lys Lys Arg Tyr His Arg His Thr Ala Gln Gln Ile Gln Arg Leu Glu
        35                  40                  45
Ser Ser Phe Lys Glu Cys Pro His Pro Asp Glu Lys Gln Arg Asn Gln
    50                  55                  60
Leu Ser Arg Glu Leu Gly Leu Ala Pro Arg Gln Ile Lys Phe Trp Phe
65                  70                  75                  80
Gln Asn Arg Arg Thr Gln Leu Lys Ala Gln His Glu Arg Ala Asp Asn
                85                  90                  95
Ser Ala Leu Lys Ala Glu Asn Asp Lys Ile Arg Cys Glu Asn Ile Ala
            100                 105                 110
Ile Arg Glu Ala Leu Lys His Ala Ile Cys Pro Asn Cys Gly Gly Pro
        115                 120                 125
Pro Val Ser Glu Asp Pro Tyr Phe Asp Glu Gln Lys Leu Arg Ile Glu
    130                 135                 140
Asn Ala His Leu Arg Glu Glu Leu Glu Arg Met Ser Thr Ile Ala Ser
145                 150                 155                 160
Lys Tyr Met Gly Arg Pro Ile Ser Gln Leu Ser Thr Leu His Pro Met
                165                 170                 175
His Ile Ser Pro Leu Asp Leu Ser Met Thr Ser Leu Thr Gly Cys Gly
            180                 185                 190
Pro Phe Gly His Gly Pro Ser Leu Asp Phe Asp Leu Leu Pro Gly Ser
        195                 200                 205
Ser Met Ala Val Gly Pro Asn Asn Asn Leu Gln Ser Gln Pro Asn Leu
    210                 215                 220
Ala Ile Ser Asp Met Asp Lys Pro Ile Met Thr Gly Ile Ala Leu Thr
225                 230                 235                 240
Ala Met Glu Glu Leu Leu Arg Leu Leu Gln Thr Asn Glu Pro Leu Trp
                245                 250                 255
Thr Arg Thr Asp Gly Cys Arg Asp Ile Leu Asn Leu Gly Ser Tyr Glu
            260                 265                 270
Asn Val Phe Pro Arg Ser Ser Asn Arg Gly Lys Asn Gln Asn Phe Arg
        275                 280                 285
Val Glu Ala Ser Arg Ser Ser Gly Ile Val Phe Met Asn Ala Met Ala
    290                 295                 300
Leu Val Asp Met Phe Met Asp Cys Val Lys Trp Thr Glu Leu Phe Pro
305                 310                 315                 320
Ser Ile Ile Ala Ala Ser Lys Thr Leu Ala Val Ile Ser Ser Gly Met
                325                 330                 335
Gly Gly Thr His Glu Gly Ala Leu His Leu Leu Tyr Glu Glu Met Glu
            340                 345                 350
Val Leu Ser Pro Leu Val Ala Thr Arg Glu Phe Cys Glu Leu Arg Tyr
        355                 360                 365
Cys Gln Gln Thr Glu Gln Gly Ser Trp Ile Val Val Asn Val Ser Tyr
    370                 375                 380
Asp Leu Pro Gln Phe Val Ser His Ser Gln Ser Tyr Arg Phe Pro Ser
385                 390                 395                 400
Gly Cys Leu Ile Gln Asp Met Pro Asn Gly Tyr Ser Lys Val Thr Trp
                405                 410                 415
Val Glu His Ile Glu Thr Glu Glu Lys Glu Leu Val His Glu Leu Tyr
            420                 425                 430
Arg Glu Ile Ile His Arg Gly Ile Ala Phe Gly Ala Asp Arg Trp Val
        435                 440                 445
Thr Thr Leu Gin Arg Met Cys Glu Arg Phe Ala Ser Leu Ser Val Pro
    450                 455                 460
Ala Ser Ser Ser Arg Asp Leu Gly Gly Val Ile Leu Ser Pro Glu Gly
465                 470                 475                 480
Lys Arg Ser Met Met Arg Leu Ala Gln Arg Met Ile Ser Asn Tyr Cys
                485                 490                 495
Leu Ser Val Ser Arg Ser Asn Asn Thr Arg Ser Thr Val Val Ser Glu
            500                 505                 510
Leu Asn Glu Val Gly Ile Arg Val Thr Ala His Lys Ser Pro Glu Pro
        515                 520                 525
Asn Gly Thr Val Leu Cys Ala Ala Thr Thr Phe Trp Leu Pro Asn Ser
    530                 535                 540
Pro Gln Asn Val Phe Asn Phe Leu Lys Asp Glu Arg Thr Arg Pro Gln
545                 550                 555                 560
Trp Asp Val Leu Ser Asn Gly Asn Ala Val Gln Glu Val Ala His Ile
                565                 570                 575
Ser Asn Gly Ser His Pro Gly Asn Cys Ile Ser Val Leu Arg Gly Ser
            580                 585                 590
Asn Ala Thr His Ser Asn Asn Met Leu Ile Leu Gln Glu Ser Ser Thr
        595                 600                 605
Asp Ser Ser Gly Ala Phe Val Val Tyr Ser Pro Val Asp Leu Ala Ala
    610                 615                 620
Leu Asn Ile Ala Met Ser Gly Glu Asp Pro Ser Tyr Ile Pro Leu Leu
625                 630                 635                 640
Ser Ser Gly Phe Thr Ile Ser Pro Asp Gly Asn Gly Ser Asn Ser Glu
                645                 650                 655
Gln Gly Gly Ala Ser Thr Ser Ser Gly Arg Ala Ser Ala Ser Gly Ser
            660                 665                 670
Leu Ile Thr Val Gly Phe Gln Ile Met Val Ser Asn Leu Pro Thr Ala
        675                 680                 685
Lys Leu Asn Met Glu Ser Val Glu Thr Val Asn Asn Leu Ile Gly Thr
    690                 695                 700
Thr Val His Gln Ile Lys Thr Ala Leu Ser Gly Pro Thr Ala Ser Thr
705                 710                 715                 720
Thr Ala

Claims (3)

1、拟南芥转录因子基因在培育耐旱植物品种中的应用；所述拟南芥转录因子基因，是下列核苷酸序列之一：
1)序列表中SEQ ID NO：1的DNA序列；
2)编码序列表中SEQ ID NO：2蛋白质序列的多核苷酸。
2、拟南芥转录因子基因在培育耐盐植物品种中的应用；所述拟南芥转录因子基因，是下列核苷酸序列之一：
1)序列表中SEQ ID NO：1的DNA序列；
2)编码序列表中SEQ ID NO：2蛋白质序列的多核苷酸。
3、拟南芥转录因子基因在培育耐氧化植物品种中的应用；所述拟南芥转录因子基因，是下列核苷酸序列之一：
1)序列表中SEQ ID NO：1的DNA序列；
2)编码序列表中SEQ ID NO：2蛋白质序列的多核苷酸。
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