CN1307452A - 从蛋黄中选择性取得磷脂的湿式提取方法 - Google Patents
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Abstract
湿法提取从蛋黄中选择性取得磷脂,通常采用湿法用离子强度、pH和离心力从蛋黄材料中分离大部分蛋白质。该方法以将蛋黄与蛋白分离为开始。然后用水混合蛋黄材料将蛋黄稀释成DY组分。然后通过添加酸、碱和/或盐调节混合蛋黄材料的pH。将调节过的混合蛋黄材料通过离心,重力分离成DYS组分和DYP组分。然后将DYS组分和DYP组分分开。加入增粘剂到DYS组分中,混合。然后将DYS组分重力分离成为乳状CMC P组分和含水组分。然后将乳状CMC P组分与含水组分分开,得到所需的磷脂分离。该方法中也可对产蛋母鸡采用挤压全大豆和亚麻籽的饲料方案,以增加起始蛋黄材料中ω－3脂肪酸(二十二碳六烯酸)的浓度。
Description
与相关申请的相互参照：
本申请是于1998年6月30日递交的待批美国临时申请60/091,322的继续。
发明背景
蛋白质和脂类是蛋黄的主要组成。这两种成分在食品加工、化妆品和制药工业上都有非常重要的作用。蛋黄固体中最丰富成分是脂类，其约占蛋黄的1/3。脂类大部分由各种主要含磷脂酰胆碱或卵磷脂的磷脂，其次由胆固醇(蛋黄中相对较少的成分)构成。蛋白质构成15％-17％蛋黄，包括卵黄粒中的卵黄高磷蛋白、α-和β-卵黄脂磷蛋白和低密度的脂蛋白以及卵黄浆中的α-、β-和γ-卵黄蛋白和脂蛋白。γ-卵黄蛋白已被视为IgG样抗体，而且通常称为蛋黄免疫球蛋白或IgY。
由于蛋黄易得，已作过许多尝试来分离磷脂(卵磷脂)、IgY和其它生物活性或功能性化合物。然而，很难回收得到脂类成分，而不使蛋黄蛋白质成分变性或失活。
本领域技术人员已知从蛋黄提取磷脂的几种方法：烧焦(scorching)法；溶剂提取液态蛋黄；和溶剂提取干燥蛋黄。
烧焦方法包括直接加热蛋黄，或液化或煮，直到蛋黄蛋白烧焦。该步骤后蛋黄蛋白就无其它利用价值了。这方法的提取效率低，因为大量的卵脂类依旧粘附在蛋白残留物上。另外，由于高温和暴露于大气，这种抽提法导致未饱和脂肪酸变质。由于这些原因，烧焦方法不能用于商业角度的卵磷脂提取中。
用极性和非极性溶剂的混合物作液态蛋黄的溶剂提取，已有效地运用于含有所需蛋黄卵磷脂的卵脂类提取中。由于这种提取方法使用溶剂混合物，所以回收程序复杂而且不经济。另外，所用溶剂的沸点要足够高而使卵脂类暴露于有价值成分易发生氧化的温度。在除去溶剂的加热步骤中，蛋黄提取物的颜色通常从黄色变为橙色再变为棕色。用这种方法得到的蛋黄卵磷脂的质量可能非常差。
过去，工业上以溶剂提取法从蛋黄提取卵磷脂是以干蛋黄为起始物的，而干蛋黄通常用热空气干燥粗蛋黄得到。将这种干蛋黄用一种非极性溶剂(如氯仿、二乙醚或三氯乙烯)配制的极性溶剂(如甲醇或丙酮)的溶剂混合液来提取。由于这种溶剂混合液含有两种不同类型的溶剂组分，提取过程中溶剂组分的回收过程是复杂而不经济的。另外，所用溶剂的沸点可能超过35℃。所以，为从提取物中除去溶剂，可能需要用蒸汽将提取物加热到高温或在减压下暴露于高温一段长时间。蛋黄卵磷脂特别容易氧化。可能需要将蛋黄卵磷脂在大气压力下60℃或以上热处理，以除去残留的溶剂。在热处理过程中，蛋黄卵磷脂的颜色通常从黄色变为橙色再变为棕色。用热处理除去溶剂而得到的蛋黄卵磷脂的质量可能非常差，这种用常规溶剂提取法制得的蛋黄卵磷脂可能气味难闻而且颜色为棕色。用有机溶剂提取卵磷脂和脂类的常规方法，不可避免地使蛋白质变性。通常用喷雾干燥法干燥蛋黄。用短链醇(如甲醇或乙醇)或其它适当溶剂提取这种粉末，得到粗蛋黄油。这种油含有所需的磷脂。这种提取方法得到无功能的、变性卵蛋白不能用于通常的功能性运用中。
另一种从蛋黄油中分离出卵磷脂和胆固醇的常规溶剂提取方法，是用超临界流体提取，然而在这些条件下，一些蛋白质也变性了。
由于蛋黄是脂类、脂蛋白和水溶性蛋白质的混合物，可在进一步分离水溶性组分之前，用水以非变性的形式提取水溶性组分(包括IgY)。这些方法采用水稀释步骤，并调节pH和盐。优化这些步骤将IgY分离到上清液部分，而脂类(包括磷脂)在沉淀部分。这些步骤通常用酸性pH。可通过重悬浮和其它提取从沉淀中进一步回收磷脂。但这种回收磷脂的附加工作，在产业规模生产中是不实用的。也已尝试用聚乙二醇或硫酸葡聚糖钠从蛋黄中分离γ-卵磷脂。
蛋黄脂类适合于食品、化妆品和制药用途。这些用途每种都需要卵磷脂成分的不同组合。为了得到这些变化，需要选择性得到含有所需蛋黄卵磷脂的卵。一种需要特殊蛋黄卵磷脂组合物的应用类型是用于婴儿乳粉。卵脂类是生产模拟人乳脂类成分脂肪酸组分产品的理想来源。人乳含有各种延长链的不饱和脂肪酸(从C18 2ω6和C18 2ω3)。在现有商品乳粉中未发现这些必需脂肪酸的聚不饱和类似物。因此需要从蛋黄油中制备出能提供用于婴儿乳粉这些组分的油。
一般而言，各种品种的鸡蛋黄为30％-36％脂类，含有65％甘油三酸酯、28.3％磷脂和5.2％胆固醇。饱和脂肪酸的总量约为脂肪酸的40％。主要的不饱和脂肪酸为油酸、亚油酸和带有少量C20ω6、C22ω6和C22ω3聚不饱和脂肪酸的亚油酸。近年，已尝试生产以牛乳为基础的婴儿乳粉，其类似于人乳。总之需要加入一种食品产品到商品牛乳中。预期的食品产品是使牛乳适于(人)哺乳的需要，使牛乳类似于人乳。这种食品产品的脂类成分较佳的是带有大豆卵磷脂和最终带有乳脂的植物油混合物。
过去存在的问题是，作为添加物所用的油不含有C20和C22ω-6和ω-3脂肪酸，而这在人乳中是存在的。因此，这些食品制剂不能提供与人乳中组合物类似的脂肪酸平衡。
研究表明充分摄入母亲的乳液，每天能产生90毫克-130毫克C20和C22ω-6脂肪酸，和55-75毫克C20和C22ω-3脂肪酸。从这些研究来看，用于早产儿(premature/and pre-term infant)的食品乳粉应含有C20和C22ω-6脂肪酸和C20和C22ω-3脂肪酸，以促进健康生长。脂肪酸对合成脑组织中的结构脂类有特别意义，然而这些研究没有提出婴儿乳粉中需要的这些脂肪酸量的测定方法。可取的是，在早产儿的乳粉中提供必需脂肪酸，以确保神经组织的正常合成。特别重要的是，乳粉中C20和C22ω-6和C20和ω-3脂肪酸的量应限定在适当的范围中，应避免过量喂食这些脂肪酸，以使前列腺素代谢并发症和其它对婴儿生理的不良副作用最小化。
ω-3高度不饱和脂肪酸有很大的商业价值，因为最近认识到其为预防动脉硬化症和冠心病、减轻炎症和延缓肿瘤细胞发展的重要膳食化合物。这些有益的作用是ω-3高度不饱和脂肪酸引起对ω-6脂肪酸产生的化合物的竞争性抑制，和直接由ω-3高度不饱和脂肪酸本身产生的有益化合物造成的。ω-6脂肪酸是植物和动物中发现的主要高度不饱和脂肪酸。现今，可获得ω-3高度不饱和脂肪酸的唯一商品可行的膳食来源是某种鱼油，其含有20％-30％这些脂肪酸。可通过一周内食用该鱼若干次或每天摄入浓缩的鱼油而获得这些脂肪酸的有益作用。结果，每年大量生产并胶囊化了大量的鱼油作为食物补充剂供应市场。
这些鱼油补充物存在一些显著的问题。首先，鱼油补充物含有大量仅天然存在于鱼油中的脂溶性维生素。当被摄入时，这些维生素在人体内储存和代谢而不是被排泄掉。大量的这些维生素可能是不安全的，将导致肾病或失明。其次，鱼油含有高达80％的饱和脂肪酸和ω-6脂肪酸，这两者都对健康有害。另外，鱼油有很强的鱼腥味和臭味，从而不能作为对食品味道无负影响的食品添加剂加入到加工的食品中。另外，由于分离纯的ω-3高度不饱和脂肪酸是一种相对昂贵的步骤，导致价格很高。
本发明涉及分离蛋黄得到所需组分的方法。蛋黄含有许多有益的分子，具有以下消费的功能性和生化特性价值。通常未加工和未煮过的蛋黄中含有水、卵蛋白和卵脂类。蛋黄脂类中含有中性脂类、卵磷脂、类固醇和胆固醇。常规建议从生蛋黄除去卵脂类的方法有两种，称为烧焦方法和溶剂提取法。
过去，将蛋黄分离成所需的具有不同功能和实用目的的各个组分，要通过采用溶剂的方法，或导致蛋黄中蛋白组分变性的条件。先前没有人知道用乳品级溶剂(不造成蛋白组分变性)加工可将蛋黄分离成所需的组分。
过去，通过烦琐的提取方法从蛋黄中分离出蛋黄磷脂。在这种提取步骤中首先要干燥蛋黄。然后用极性溶剂(如乙醇)来提取这种干燥的粉末，以取得磷脂。然后蒸发掉溶剂得到磷脂，而残留的蛋黄粉末不可再作为功能性食品成分。
发明概述
本发明的主要目的是通过采用不造成蛋白成分变性的乳品级溶剂的方法，将蛋黄分离到所需的成分以分离出磷脂。
本发明的另一基本目的是用相对简单、价廉的设计和操作方法将蛋黄分离成所需的成分，该方法是安全的而且能满足提供磷脂和不变性的蛋白成分的目的，所有这些成分都是食品级质量以保证进一步的有益健康。(结果，在这样的条件下可用这种方法分离的蛋黄是未煮过的蛋黄或已经巴斯德法处理的蛋黄。)
本发明的另一主要目的是采用湿法通过离子强度、pH和引力从蛋黄分离出的磷脂中分离主要的蛋白质。
本发明的另一目的是通过离心分离技术，从含有70-100％初磷脂起始物的蛋黄材料的大量蛋白质中分离出磷脂。
本发明的另一目的是提供一种含有改进的脂肪酸组分(具有合适的保质期)的稳定的液态婴儿乳制品。
本发明的另一目的是提供一种可食的脂肪产品，以加入到适合早产儿的配方中，其含有适当水平的C20和C22ω-3和ω-6脂肪酸以促进大脑的正常发育和健康成长。
本发明的另一主要目的是通过一种对产蛋母鸡的饲养制度，提高家禽蛋中ω-3脂肪酸(二十二碳六烯酸)(DHA)的浓度。
本发明的另一主要目的是通过一种对产蛋母鸡的饲养制度，提高家禽蛋中ω-6脂肪酸(花生四烯酸)(AA)的浓度。
本发明的另一主要目的是通过湿法提取从蛋黄中选择性取得磷脂和提高ω-6(AA)和ω-3(DHA)脂肪酸浓度的饲养制度的联合，改进获得所需卵组分的效率。
本发明的另一主要目的是得到比例为1比1.3-4的AA比DHA。
本发明的一个特征是打破家禽卵的壳以移出其内含物。
本发明的另一特征是将蛋白和蛋黄分离。
本发明的另一特征是用水稀释蛋黄。
本发明的另一特征是通过水和蛋黄材料的混合以稀释蛋黄(DY)。
本发明的另一特征是用酸/碱和/或盐调节水和蛋黄混合物质的pH。
本发明的另一特征是通过离心将调节好pH的水和蛋黄混合液暴露于离心力而分离。
本发明的另一特征是从稀释和离心过的DY组分中分离出上清液(DYS)组分。
本发明的另一特征是从稀释和离心过的DY组分中分离出沉淀(DYP)组分。
本发明的另一特征是在DYS组分中添加增粘剂(如藻胶)。
本发明的另一特征是在DYS组分中添加羧甲基纤维素。
本发明的另一特征是混合DYS组分和增粘剂和/或羧甲基纤维素。
本发明的另一特征是将与增粘剂和/或羧甲基纤维素混合的DYS离心分离。
本发明的另一特征是从混合和离心过的DYS组分和增粘剂和/或纤维素中分离出乳状CMCP组分。
本发明的另一特征是从混合和离心过的DYS组分和增粘剂和/或纤维素中分离出下层液CMC组分。
本发明的另一特征是喂养母鸡的基本方法，其中用每吨含有0-100lbs挤压全脂大豆(每吨添加有或无50lbs亚麻籽)的饲料喂养母鸡。
本发明的另一特征是通过离心产生的引力，将调整过pH的混合蛋黄和水溶液中主要的蛋白质分离成泥状物质。
本发明的另一特征是对pH调整和离心处理后的泥状物质的进一步处理，可用水重建该泥状物，或干燥以得到功能性蛋黄粉末。
本发明的另一特征是从泥状物分离的水溶液中分离上清液，此时该上清液含有卵脂类和磷脂及少量的蛋白质。
优选实施例详述
过去，采用一些方法从蛋黄中分离出免疫球蛋白(IgY)。这些方法着重于分离高活性的免疫球蛋白(IgY)。这些方法已被改进并用于从蛋黄中分开和分离出蛋黄磷脂。从蛋黄分离蛋黄磷脂是企图提供一种有效方法，以提取高品质的蛋黄磷脂(以及完全功能的卵蛋白质副产物)，这是本领域以往不知道的实现该目的的有效方法。
本发明的分离出高品质蛋黄磷脂(以及完全功能的卵蛋白质副产物)的方法，是通过获得农场包装的、未分级的、洗涤的、新鲜蛋，其中通过手工或机械方法分离蛋黄和蛋白。
分离出的蛋黄可作为湿法提取步骤的起始物，以从蛋黄中选择性取出磷脂。通常，用于湿法提取步骤起始物的蛋黄是未煮过或巴氏灭菌的。
首先，起始蛋黄材料较佳地与3.7倍体积的水混合，较佳的是蒸馏水，以形成稀释的蛋黄组分(本文称为DY)。用水稀释蛋黄材料并混合促使卵黄粒破坏，形成了脂类—蛋白质复合物。
然后离心该稀释的蛋黄混合物质。较佳的离心速率为10,000×g，然而较快或较慢的旋转参数可单独的优先选择。离心时间取决于离心的类型、旋转速率和待离心物的体积而不同。当离心速率为10,000×g时，离心时间约为15分钟。离心过程中稀释的、混合蛋黄物质的温度约为4℃。
离心后，稀释的蛋黄物质分开成上层水相(本文以后称为DYS)和粘性沉淀相(本文以后称为DYP)。较佳地，DYS组分呈鲜黄—橙色，DYP组分为稠密的白—黄色。离心后，可从DYP组分(高蛋白质含量)中移出DYS组分。丢弃DYP组分或单独用于别的目的。从DYP组分分离或倾出DYS组分的方法包括第一阶段的湿法提取，以从蛋黄中选择性取出磷脂。湿法提取步骤的第二阶段通常包括从DYS组分中分离出脂类。该第二阶段通过在DYS组分中加入增粘剂(如藻胶和高粘性的羧甲基纤维素)开始。较佳地，加入的增粘剂(如海藻酸钠)在DYS组分中的终浓度为0.1％海藻酸盐。可加入干的海藻酸盐或作为稀释液加入。另外，将稀释到0.15％的羧甲基纤维素(CMC)溶液与DYS和海藻酸钠溶液(1体积∶1体积)混合。
接下来，将含有增粘剂的DYS进行离心分离。较佳地，离心参数为10,000×g，约15分钟，4℃。需要指出的是，本文所给的离心参数仅作说明目的，可按离心的类型、待分离物的体积、离心的旋转速率和选定的温度参数进行变化。该步骤中的离心程序较佳地在水溶液上产生了乳状层。CMC分离的乳状层和下层分别含有约40.2％和0.13％的脂肪，其中乳状层约占总体积的22％。藻胶分离的乳状层和下层分别含有约35.5％和1.3％脂肪，其中乳状层约占总体积的13％。可按图2所示的方法验证用湿法提取对从蛋黄中选择性取出磷脂的性能。
在图2中，分别从DYS、DYP、乳状层(CMC P)和下层水溶液(CMC S)提取脂类，以Floch提取方法作分析。Floch提取方法采用氯仿和甲醇从样品中提取脂类。氯仿甲醇溶剂溶液中可含有0.1％的2.6二叔丁基对甲酚(BHT)(w∶v)作为抗氧化剂。然后以样品体积对氯仿甲醇体积为2∶1的比例，将待评估的样品与50ml氯仿甲醇混合1分钟。然后过滤混合的浆液。再用另一50ml混合的样品和氯仿甲醇再提取该滤饼。然后将滤液转移到一适合的容器中，加入20％体积的0.88％氯化钾溶液(aq)。然后在约4℃将得到的混合液静置过夜。
然后移去混合液的下相，用硫酸钠干燥。将溶剂滤过容器，用氯仿甲醇溶液漂洗。然后将第二次滤液转移到另一容器中，旋转蒸发(roto-vap)除去溶剂。然后以脂类体积对氯仿体积约20∶1的比例，将脂类溶解在约20ml的氯仿甲醇中。
然后用硅胶柱分离所得到的脂类提取物。使用硅柱包括使样品液体提取物吸附到SepPak柱体上(可从Millford，Maine的Waters购得)。在该步骤中，用10ml氯仿甲醇(样品液体提取物与氯仿甲醇比为20∶1)洗脱中性脂类。以1∶1的比例，用10ml氯仿甲醇然后用20ml甲醇洗脱极性脂类。随后将中性和极性脂类分别稀释到50ml和25ml的标准体积。
接下来，从中性和极性脂类形成脂肪酸甲酯(FAMES)。然后将中性和极性脂类样品分别加入到分开的反应容器中。在每个容器中加入三氟化硼和内标准物(C17∶1脂肪酸；0.456μg/μl)。然后将每个容器倒置并100℃加热30分钟。然后，在每个反应容器中加入26.4％饱和氯化钠溶液。然后用己烷提取FAMES。
然后用气相层析技术分离FAMES，该技术采用毛细管柱温度范围为110-230℃(每分钟5℃，最终保持1分钟)。鉴定气相层析的峰，以标准峰面积定量并与每个峰的因子相对应。
验证步骤显示初始蛋黄含有33.6％脂类。用湿法提取步骤(通常包括稀释，离心分离)从蛋黄选择性取出磷脂，对DYS和DYP组分收获相同浓度的脂类。DYS组分含有84％体积的初始DY稀释蛋黄，其随后表现为从DY组分回收82.8％脂类。用增粘剂进一步从DYS组分中提取脂类，得到乳状物。CMC回收步骤回收较多的脂类(82.5％初始脂类)，用CMC凝胶回收较少的脂类残留在下层(CMCS)。
验证步骤证明用湿法提取，通过两个阶段的分离步骤，从蛋黄选择性取出磷脂，有效地产生了脂类和蛋白质丰富的组分。
实施例1
一般而言，图1显示了从蛋黄中分离出磷脂的总方法。在1L的烧杯中将分出的蛋黄与等体积的蒸馏水混合，形成稀释的蛋黄组分(称为DY)。然后盖住该稀释的蛋黄组分，4℃静置过夜。用水稀释蛋黄并混合帮助破坏由脂类—蛋白质复合物组成的卵黄粒。保存该稀释的蛋黄组分(DY)并用于三天后的分离。
当将蒸馏水加入到分离的蛋黄材料时，可用各种不同的稀释率。通常，稀释率范围为1份蛋黄对1-7.4份蒸馏水。另外，可用各种pH范围来调节混合的蒸馏水和蛋黄材料的pH和盐含量。例如，可用1.0N NaOH将混合的蛋黄材料和蒸馏水的pH调节到5-9。较高的pH范围，能提高上清液中磷脂的分离。所以，在5-9范围间的pH能提高磷脂的分离(与pH4-7范围的分离相比)。
将稀释的蛋黄组分DY倒入250ml的离心瓶中。密封离心瓶，4℃以10,000×g离心15分钟。所用的离心技术产生两个分离相，上层水相(DYS)和粘性沉淀相(DYP)。上层水相(DYS)组分为鲜黄橙色，粘性沉淀相(DYP)为稠密白—黄色。从DYP组分倒出DYS组分以分离。然后丢弃蛋白质含量很高的DYP组分。
用增粘剂如藻胶(Kelgin XL/F，Nutrasweet Kelco Company，Chicago，Illinois)和高粘度的羧甲基纤维素(CMC)(Sigma Chemical Company，St.Louis，Missouri)，从上层水相(DYS)组分中分离出磷脂和/或脂类。在上层水相(DYS)中直接加入0.1％海藻酸钠，用Waring混匀器混合。以1∶1比例将0.15％羧甲基纤维素(CMC)溶液和DYS混合。用转移法足以充分将DYS和CMC溶液混合。以4℃10,000×g离心15分钟分离得到的浆液。这些方法藻胶以及CMC导致在水溶液上分离出乳状层。
然后以标准monjonier步骤，一式两份用5g样品定量测定每个组分的脂类和/或磷脂的含量。
通过称重每组分25ml确定比重。
图2显示了脂类提取和分离步骤的综述。用Folch提取方法提取脂类或磷脂。用硅柱分离得到的脂类/磷脂提取物，然后合成脂肪酸甲酯衍生物。将这些注射到毛细管气相层析上，用可靠的标准和相应系数定量。
Floch提取步骤用氯仿和甲醇从样品中提取脂类/磷脂。氯仿甲醇溶剂溶液中含有0.1％BHT作为抗氧剂。在Sorval混匀杯中，将50ml体积比为(2∶1 v∶v)的氯仿甲醇与一份DYS和增粘剂样品混合。用布氏漏斗将浆液滤过Whatman 42。另将50ml氯仿甲醇和滤液混合后再提取滤饼。将滤液转移到250ml分液漏斗中。加入20％体积的0.88％氯化钾溶液(aq)。4℃静置混合液过夜。除去下层，用硫酸钠干燥。将溶剂滤过Whatman 42，用氯仿甲醇溶液淋洗烧瓶。将滤液分析性地转移到200ml圆底烧瓶中。旋转蒸发除去溶剂。将脂类/磷脂溶解在20ml氯仿甲醇中(以体积比为20∶1的比例(20∶1 v∶v))。
然后将样品加到硅胶SepPak柱体上(Waters，Milford，Massachusetts)。以20∶1体积比(20∶1 v∶v)，用10ml氯仿甲醇使中性脂类脱吸附。然后以1∶1体积比(1∶1 v∶v)用10ml氯仿甲醇然后用20ml甲醇洗脱极性脂类/磷脂。然后将中性和极性脂类/磷脂分别稀释到标准体积50ml和25ml。
对于中性和极性脂类，形成脂肪酸甲酯(FAMES)。将FAMES样品(1ml)加入到反应管中。然后将2ml三氟化硼和内标准(C17∶1脂肪酸，0.456μg/μl)加入到管中。密封该管，倒置，在100℃加热30分钟。在每个管中加入4ml饱和氯化钠溶液(26.4％)。然后用2ml己烷提取FAMES。
用DB-23毛细管柱(J&W Scientific，Folsom，CA)作气相层析(Varian 5890)分离FAMES，温度程序为110-230℃(每分钟5℃，最终保持1分钟)。用可靠标准(New Chek Prep，Elysian，Minnesota)鉴定诸峰，并用标准峰面积和对应系数(相对C17∶1)定量鉴定每个峰。用估计的剩余物计算C18∶2、C20∶3和C22∶6的对应系数。
用离心力作不同比重的离心以分离材料。表1列出了每个测定组分的比重(sg)。两相比重的差异越大，理论上约容易分离这两相。
表1 蛋黄组分的比重
| 编号 | 组分名称 | 比重(g/cc) |
| A | 蛋黄 | 1.034 |
| B | 稀释的蛋黄(DY) | 1.017 |
| C | 稀释蛋黄的上清液(DYS) | |
| DHEA | 稀释蛋黄的沉淀(DYP) | 1.026 |
| EM-800 | CMC乳状层(CMCP) | 0.0996 |
| F | CMC下层(CMCS) | 1.014 |
表2列出了每个组分的脂类/磷脂含量。初始蛋黄中含有33.6％脂类/磷脂。用蒸馏水稀释后，离心分离得到的组分DYS和DYP的脂类浓度相同。由于DYS含有初始DY的84％体积，所以这代表可回收DY的82.8％脂类。用增粘剂从DYS中提取脂类/磷脂产生乳状物。CMC可较多地回收脂类(从CMC凝胶可回收82.5％初始脂类)，且在下层(CMCS)残留较少脂类。
表2 以1000毫升蛋黄开始的蛋黄分离程序中脂类的量
| 编号 | 组分名称 | 脂类含量 | 体积(ml) | 脂类回收 |
| A | 蛋黄 | 33.6％ | 1000 | 100％ |
| B | 稀释的蛋黄(DY) | 16.8％ | 2000 | 100％ |
| C | 稀释蛋黄的上清液(DYS) | 16.6％ | 1680 | 82.8％ |
| D | 稀释蛋黄的沉淀(DYP) | 18.2％ | 320 | 17.2％ |
| E | CMC乳状层(CMCP) | 40.2％ | 740 | 82.5％ |
| F | CMC下层(CMCS) | 0.13％ | 2620 | 0.3％ |
| G | 藻胶乳状物 | 35.5％ | 218 | 23.0％ |
| H | 藻胶下层 | 1.3％ | 1462 | 5.7％ |
表3 列出了每个组分的脂肪酸成分。不同组分间丢失的脂肪酸量类似。不同组分间脂肪酸数量减少相类似显示，没有溶解迹象并存在可能的物理或截留迹象。
以1∶3的比例在中性和极性脂类/磷脂中分布着ω-3脂肪酸。ω-3脂肪酸的总收率为80％-90％。
本文公开的方法显示了包括两个阶段分离步骤的提取方法，以得到脂类/磷脂和蛋白质丰富的组分。对回收而言第一分离步骤是关键的。脂类的主要流失是在第一分离步骤中。用CMC回收的第二步中捕获了DYS组分中99％的脂类/磷脂。也应考虑改换稀释方法以改变脂类组分。恒速搅拌DYS组分将有助于卵黄粒的溶解并增加脂类收率。另外，对规模的考虑将促进满足大规模生产需要的效率。
实施例2
以规模生产化，从M.G.Waldbaum，Wakefield，Nebraska获得1500磅巴氏灭菌的蛋黄。该产品是在可购得的巴氏灭菌器上巴氏灭菌的，该灭菌器用变容真空泵(positive displacement pump)进料，装料管高为432英尺直径为3英寸。将指示温度计定为146°F。温度范围为149-146°F。将流速调节到每分钟232磅。维持时间设为5.4分钟。将产品包装在30磅的塑料管中，用带橡胶圈的塑料衬管密封。
将产品巴氏灭菌，用冷藏车转移用于一天后的加工。收到的用于测试的产品温度在60°F以上。
然后将管中的蛋黄转移到储槽中。将产品与1500磅蒸馏水混合。然后将得到的混合物彻底混合，在5小时中冷却到34°F，并维持该温度过夜。
然后用离心泵将稀释的蛋黄材料从储槽转移到10加仑的奶桶中。在储水槽中将奶桶加热到140°F以巴氏法灭菌奶油。一旦材料被加热，就将其转移到50加仑的带夹套的储槽中。将稀释的蛋黄保持在140°F约60分钟。用变容真空泵将材料转移到Westfalia SE-7连续式离心机中(每分钟2.5升，每平方英寸50磅反压)。表4列出了离心的样品。
表4 操作中Westfalia SB-07中的样品
| PLC加工步骤编号 | 时间 | |||
| 0630 | 1015 | 1530 | ||
| 901 | 处理计时器—转筒离心(shoot) | 6 | 7 | 7 |
| 903 | 部分计数—装满前部分离心 | 5 | 5 | 5 |
| 905 | 打开转筒 | 3 | 3 | 3 |
| 906 | 部分进料—中断时间(秒) | 5 | 5 | 5 |
| 907 | 部分注满水(秒) | 2 | 1 | 1 |
| 912 | 完全中断进料(秒) | 20 | 20 | 20 |
| 913 | 完全注满水(秒) | 4 | 4 | 4 |
将浆状物质(蛋白质)收集到消过毒的10加仑奶桶中，在冰水浴中冷却。然后用Coulter Spray干燥机喷雾干燥该物质，名义蒸发率为每小时90lb水。用带有Spraying System喷嘴和插头的Gallan高压泵为该干燥机进料。喷雾条件为：进料温度为350°F；出料温度为160°F；进料压力为1000psi。喷雾干燥了大约60lbs的材料。六天后干燥另外33lbs。
表5 列出了进料材料固体、浆液(蛋白质)固体和浓缩固体(脂类富集相)。
表5收集组分的固体含量
| 组分 | 时间 | ||
| 0630 | 1050 | 1530 | |
| 固体—浆液(蛋白质)％ | 23.4 | 33.0 | 29.2 |
| 固体—浓缩(脂类)％ | 18.9 | ||
| 固体—进料％ | 22.1 | 22.1 | 22.1 |
蛋白质相的喷雾干燥得到约100lbs干燥物质。将50磅初始干燥的物质以12.5Lb量装填到带衬的塑料管中。每管取样，表6列出了组合物样品的分析结果。记录了每个样品的微生物数据，表7列出了平均值。
表6喷雾干燥的蛋黄蛋白质提取物的分析
| ％ | 方法 | |
| 蛋白质 | 56.54 | 凯氏法 |
| 脂肪 | 33.59 | 酸水解 |
| 湿度 | 4.01 | 真空烤箱 |
| CHO&Ash | 5.86 | 不同的方法 |
表7微生物结果
| 测试 | |
| SPC | 1300CFU/gm |
| 酵母&霉菌 | a10CFU/gm |
| 沙门氏菌 | 阴性 |
干燥产品的脂肪含量比批规模提取高。这部分是因为除滤渣过程中浆液被上层部分污染了。另外，由于蛋黄老化，难于分离。批分离技术中使用的蛋黄是5日龄的(最少)，而且试验温度波动。更新鲜的蛋黄和更好的控制加工将得到更好的蛋白质—脂肪比例。
实施例3
在另一实施例中，用温和的批次巴氏灭菌法来进行随后的蛋黄分离(两个不同温度)。
起先，以体积比1∶1用蒸馏水稀释蛋黄。用稀释和混合的物质装满两个1加仑的水壶(jug)。将这两个水壶置于60℃(140°F)的水浴中。也可按个人判断，采用50℃或更高温度的水浴。保持1小时后，可以再维持30分钟。然后将两个样品从水浴中移出。一个立即分离，而另一个则置于冰水浴中冷却。被冷却的样品温度降至40°F。将这两个样品10,000×g离心15分钟(包括起转时间)。收集上清液和浆液，并分析蛋白质、脂肪和总固体。
在离心过程中两个样品都被分离了。热离心的样品产生较多的压实沉淀，而冷却的样品则较少而且更难以清晰地分成两相。
热分离的样品比对应的冷组分样品得到更多的固体。热分离导致较好的分离，上清液中蛋白质较少而浆液中较多，可见表8列出的蛋白质/脂肪和脂肪/蛋白质比例。
表8分离组分的解析分析
| 分离温度 | |||||
| 热(140°F) | 冷(40°F) | ||||
| 上清液 | 浆液 | 上清液 | 浆液 | 蛋黄 | |
| 蛋白质 | 5.39 | 27.85 | 5.21 | 25.55 | 14.9 |
| 脂肪 | 13.79 | 12.23 | 13.06 | 12.21 | 27.5 |
| 固体 | 20.33 | 42.52 | 19.31 | 39.98 | 44.0 |
| 干燥的蛋白质 | 26.5 | 65.5 | 27.0 | 64.1 | 33.9 |
| 脂肪 | 67.8 | 28.8 | 67.6 | 30.6 | 62.5 |
| 蛋白质/脂肪比例 | 2.27 | 2.09 | 0.54 | ||
| 脂肪/蛋白质比例 | 2.56 | 2.50 | 1.84 | ||
用批次巴氏灭菌方法得到的物质可用离心分离。热分离导致的样品相分离比冷分离好。蛋白质/脂肪和脂肪/蛋白质的比例表明热分离导致较好的分离。该数据显示优选热分离，以从蛋黄材料得到脂肪和蛋白质的较好分离。
表9显示了各种组分的胆固醇∶DHA比例，其对干燥的商品蛋黄和胆固醇含量提供参考值(对粗制脂类提取物的测定)。
表9各种蛋组分的胆固醇∶DHA比例比较
| 胆固醇 | DHA | 胆固醇/DHA比例 | |
| 磷脂85％ | 5.5 | 3.1 | 1.77 |
| Std.蛋黄粉末 | 2.72* | 0.53 | 5.13 |
| 粗制脂类提取物1 | 2.72** | 0.72 | 3.78 |
| 粗制脂类提取物2 | 2.72** | 1.40 | 1.94 |
*对干燥的商品蛋黄的参考值
**没有测试粗制脂类提取物中的胆固醇含量
可通过控制喂养产蛋母鸡的特殊配方(以提高得到的蛋的质量)，来提高从蛋黄中选择性取得磷脂的湿法提取(的效率)。
喂食方案可以对产蛋家禽提供适当的或优选的饲料开始，产出的蛋用于湿法提取从蛋黄中取得磷脂。该喂食方案可能对控制家禽蛋中磷脂的质量和数量相当重要。通过控制喂食过程，可提高蛋以及本文所述的副产物的质量和产量。
通常，喂食方案将有利于含有特定脂肪酸成分蛋黄的蛋产生，可增加ω-6脂肪酸(花生四烯酸)(AA)的水平并增加ω-3脂肪酸(二十二碳六烯酸)(DHA)的水平，而且最终达到理想的AA对DHA比例(1∶1.3～4)。
通过用每吨饲料含有0-100lbs挤压全脂大豆(每吨添加有或无50lbs亚麻籽)喂养母鸡，该喂养方案有利于生产具有改良的卵脂肪酸的蛋。
将含有上述确定量的挤压全脂大豆和/或亚麻籽饲料以常规方式喂食母鸡，这些母鸡接受常规的适当调整过比例的产蛋日粮(维持产蛋和母鸡体重所需的基本营养和能量水平)。较佳地，在对产蛋母鸡喂养改良食物方案开始后的三周内，蛋脂肪中脂肪酸组分有所改进。
上述改进的喂养方案是经济的，而且通常每吨饲料仅增加约$2.00的费用。购得的挤压全脂大豆和亚麻籽均是可混入标准饲料的。
本文上述的喂食方案不需要特别的加工、储存或冷却，而鱼油或其它补充物则需要。另外，用挤压全脂大豆和/或亚麻籽的喂食方案不会破坏得到的蛋或蛋黄的风味或颜色。
事实上，营养研究表明当用AA时，可使采用DHA补充婴儿乳粉配方的益处达到最大。蛋是AA最好的天然来源之一。
实施例4
用6种饲料方案，喂养五只Dekalb Delta Hens的五只复制鸡(36周龄)共15周(达到51周龄)。饲料方案如下：
1.对照
2.50lbs挤压大豆；
3.100lbs挤压大豆；
4.200lbs挤压大豆；
5.50lbs挤压大豆和50lbs亚麻籽；和
6.100lbs挤压大豆和50lbs亚麻籽(分别为每吨的含量)。表10列出了饲料组分和计算的营养分析。饲料中脂肪以补充动物—植物油(A-V)混合脂肪得到平衡。
记录每天的饲料组分和产蛋情况。每周的蛋样品取自一天的产蛋，并测定蛋的重量和内含物(白蛋白、蛋黄和蛋壳)。分三次(八月、九月和十月)将饲料、脂肪、亚麻籽和挤压大豆样品送到分析实验室作脂肪酸分析。从十月中旬开始收集所有的蛋，以获得足够的量在IANR食品加工中心，University ofNebraska喷雾干燥蛋黄。十二月初在食品加工中心喷雾干燥了每种处理的将近20lbs的蛋黄，并测定了处理2、3、4、5和6的产量。饲料1作为喷雾干燥机的预热样品，不测定其产量。
表11和图3、4和5分别显示了饲料方案对生产参数：产蛋情况、饲料的摄入和蛋重的作用。在15周中，饲料方案对平均产蛋的作用显示：用50和100lbs水平挤压大豆喂养的母鸡产蛋(与对照相比)全面提高。在用挤压大豆和亚麻籽联合处理中以最高挤压大豆水平(200lbs)喂养的母鸡中观察到产蛋下跌(与对照相比)。没预计到高水平饲料挤压大豆的这种作用；然而，挤压大豆胰蛋白酶抑制剂分析得到了不能接受的结果(22,200TIU/g对标准值8-10,000TIU/g)，表明挤压过程中大豆不完全加热。显示200Lb含量是母鸡受到降低产蛋和蛋重的高胰蛋白酶抑制剂水平作用的一个点。产蛋水平可与该禽类的同级禽类(该时间段为83％)相比。除了用100lb挤压大豆喂养的(该组与对照组相比平均减少2克)以外，喂养方案对饲料的摄入没有明显影响(图4和表11)。13周中对照和低挤压大豆(50lbs)饲料处理得到的增重是正常的(表11)。方案3、5和6中的较高挤压大豆(100和200lbs)饲料导致增重差，而在饲料6方案中体重减轻，可能是因为挤压大豆未熟的结果。
显示对照处理和几种饲料方案中饲料对蛋重的作用(图5和表11)随时间而波动。令人感兴趣的发现，除了饲料摄入略为减少，用饲料3方案(100lbs挤压大豆)喂养的鸡产出的蛋的蛋重比对照或高水平挤压大豆(200lbs)重。挤压大豆加上亚麻籽喂养(方案5和6)与对照相比显示了良好的蛋大小。唯一没有显示出蛋大小增加(与对照相比)的处理是挤压大豆含量最高的饲料(每吨200lbs)。这可能是由于胰蛋白酶对蛋白质和氨基酸消化性的不良作用。在过去用亚麻籽的试验中，观察到蛋重的轻微下降。用挤压大豆和亚麻籽组合似乎可弥补这种减少。
表11列出了饲料方案对蛋组分(蛋壳、蛋白和蛋黄)的作用和喷雾干燥蛋黄产量的百分比。有趣的是，用挤压大豆和亚麻饲料增加了蛋白∶蛋黄的比例。其表现为该饲料方案增加了蛋的大小，也增加了白蛋白∶蛋黄的比例。先前用Delta母鸡作的观察表明蛋的大小随着年龄增加，白蛋白∶蛋黄的比例也增加。看来对饲料的控制在Delta母鸡中可产生与年龄递增相同的作用。最令人感兴趣的是，喷雾干燥的蛋黄产量的结果。喷雾干燥的蛋黄产量结果显示饲料脂肪源和蛋黄脂肪酸组分对产量百分比有显著影响。随着挤压大豆和亚麻的增加，喷雾干燥蛋黄的产量也增加。
表12显示十月初鸡蛋样品蛋黄脂肪酸组分受饲料的影响。加入挤压大豆维持C20∶4水平的同时，明显增加了蛋黄中C18∶2和C22∶6的含量。亚麻籽增加了蛋黄中C18∶3和C22∶6的含量。对于饲料2、3和4方案完成的C20∶4与C22∶6比例为2.0-3.0。饲料中加入亚麻籽的饲料将该比例下降到2.0以下，因为在亚麻喂养的母鸡蛋黄中C22∶6的较高水平。
本发明可以其它特定形式实施，但都在本发明基本特征的精神中；本文中的所有实施例都起说明作用，不起任何限制作用，参考文献起进一步描述作用。
表10 Waldbaum研究3-脂肪来源对蛋脂肪酸组分和产蛋效率—饲料组分的作用
| 饲料(％) | ||||||
| 组分 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 玉米 | 54.6 | 54.6 | 54.6 | 54.6 | 54.0 | 54.0 |
| 大豆粉(47％) | 26.9 | 25.3 | 23.7 | 20.4 | 23.8 | 22.2 |
| 挤压大豆 | - | 2.5 | 5.0 | 10.0 | 2.5 | 5.0 |
| 亚麻 | - | - | - | - | 2.5 | 2.5 |
| 燕麦 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
| 玉米面筋粉 | 0.80 | 0.61 | 0.41 | 0.02 | 0.75 | 0.56 |
| A-V混合脂肪 | 4.16 | 3.48 | 2.80 | 1.44 | 2.86 | 2.18 |
| 石灰石 | 6.9 | 6.9 | 6.9 | 6.9 | 6.9 | 6.9 |
| 贝壳 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
| 磷酸氢钙 | 1.62 | 1.61 | 1.61 | 1.59 | 1.61 | 1.60 |
| 盐 | 0.34 | 0.34 | 0.34 | 0.24 | 0.34 | 0.34 |
| 混合维生素 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
| 蛋氨酸 | 0.09 | 0.08 | 0.08 | 0.08 | 0.08 | 0.08 |
| 总量 | 100.01 | 100.02 | 100.04 | 99.975 | 99.94 | 99.96 |
| 计算后分析 | ||||||
| 蛋白质％ | 17.0 | 17.0 | 17.0 | 17.0 | 17.0 | 17.0 |
| ME，keal/kg | 2,865 | 2,865 | 2,865 | 2,865 | 2,865 | 2,865 |
| 乙醚提取物％ | 6.80 | 6.62 | 6.44 | 6.08 | 6.86 | 6.68 |
| 钙％ | 3.85 | 3.85 | 3.85 | 3.85 | 3.85 | 3.85 |
| 可利用磷酸％ | 0.41 | 0.41 | 0.41 | 0.41 | 0.41 | 0.41 |
| 赖氨酸％ | 0.90 | 0.91 | 0.92 | 0.95 | 0.90 | 0.92 |
| 蛋氨酸％ | 0.37 | 0.37 | 0.37 | 0.37 | 0.37 | 0.37 |
| TSAA％ | 0.70 | 0.70 | 0.70 | 0.70 | 0.70 | 0.70 |
| 色氨酸％ | 0.21 | 0.21 | 0.21 | 0.21 | 0.21 | 0.21 |
| 苏氨酸 | 0.69 | 0.70 | 0.70 | 0.70 | 0.70 | 0.70 |
表11 Waldbaum研究3-脂肪来源对蛋脂肪酸组分和产蛋效率
—饲料消耗、产蛋、体重和蛋收率的影响
| 饲料方案 | 饲料摄入 | 产蛋 | 体重wt.增加/减少1 | 蛋wt. | ％蛋壳 | ％白蛋白 | ％蛋黄 | ％干燥蛋黄收率2 |
| g/母鸡/天 | ％ | g | g | |||||
| 1. 对照 | 107.2 | 81.9 | 43 | 59.7 | 12.79 | 60.84 | 26.26 | - |
| 2. 50挤压大豆 | 108.3 | 84.3 | 48.2 | 61.3 | 13.28 | 60.39 | 25.89 | 40.3 |
| 3. 100挤压大豆 | 105.2 | 83.3 | 3.0 | 63.0 | 12.49 | 61.24 | 25.67 | 42.5 |
| 4. 200挤压大豆 | 108.8 | 76.8 | 7.0 | 60.5 | 12.53 | 61.45 | 25.82 | 43.7 |
| 5. 50挤压大豆/50亚麻 | 107.6 | 77.8 | 24.4 | 63.1 | 12.57 | 61.55 | 25.46 | 53.7 |
| 6. 100挤压大豆/50亚麻 | 108.4 | 77.9 | -23.0 | 61.7 | 12.54 | 61.44 | 25.61 | 44.3 |
1从实验开始到第13周体重的改变。
2在IANR食物加工中心喷雾干燥得到的蛋黄收率(12/5/95)。
表12 Waldbaum研究3-脂肪来源对蛋脂肪酸组分和产蛋效率
—蛋黄脂肪酸组分的影响
| 饲料方案 | C14∶0 | C10∶0 | C16∶1 | C18∶1 | C18∶0 | C18∶1 | C18∶2 | C18∶3 | C20∶1 | C20∶4 | C22∶0 | C22∶6 |
| ％ | ||||||||||||
| 1. 对照 | 0.43 | 26.9 | 2.19 | 36.1 | 11.0 | 1.65 | 17.1 | 0.50 | 0.17 | 2.88 | 0.00 | 0.88 |
| 2. 50挤压大豆 | 0.39 | 27.8 | 2.37 | 35.2 | 10.7 | 1.60 | 17.2 | 0.42 | 0.18 | 2.93 | 0.00 | 1.03 |
| 3. 100挤压大豆 | 0.36 | 27.3 | 1.99 | 34.5 | 10.6 | 1.53 | 19.1 | 0.50 | 0.16 | 2.79 | 0.00 | 1.09 |
| 4. 200挤压大豆 | 0.36 | 26.6 | 1.88 | 33.1 | 11.1 | 1.37 | 20.8 | 0.67 | 0.16 | 2.71 | 0.00 | 1.10 |
| 5. 50挤压大豆/50亚麻 | 0.38 | 27.2 | 2.41 | 33.8 | 10.7 | 1.52 | 17.6 | 1.62 | 0.13 | 2.27 | 0.13 | 1.96 |
| 6. 100挤压大豆/50亚麻 | 0.33 | 26.6 | 2.01 | 33.7 | 11.4 | 1.38 | 18.1 | 1.40 | 0.13 | 2.60 | 0.16 | 2.14 |
表12续
| ％ | w-3LCP | w-6LCP | SAFA | MUFA | PUFA | C18∶2w-/C18∶3w-3 | C20∶4w-6/22∶6w-3 |
| 1. 对照 | 1.37 | 19.94 | 38.5 | 40.2 | 21.3 | 34.4 | 3.28 |
| 2. 50挤压大豆 | 1.45 | 20.13 | 38.9 | 39.5 | 21.6 | 41.41 | 2.83 |
| 3. 100挤压大豆 | 1.60 | 21.86 | 38.3 | 38.3 | 23.5 | 37.76 | 2.56 |
| 4. 200挤压大豆 | 1.76 | 23.55 | 38.1 | 36.6 | 25.3 | 31.30 | 2.47 |
| 5. 50挤压大豆/50亚麻 | 3.58 | 19.86 | 38.4 | 38.2 | 23.6 | 10.88 | 1.16 |
| 6. 100挤压大豆/50亚麻 | 3.54 | 20.7 | 38.4 | 37.4 | 24.4 | 12.94 | 1.22 |
表3 每个组分的脂肪酸成分和CMC沉淀的％回收率
| ID | 14∶0 | 14∶1 | 16∶0 | 16∶1 | 18∶0 | 18∶1 | 18∶2 | 18∶3 | 20∶1 | 20∶2 | 20∶4 | 22∶4 | 22∶3 | 22∶6 |
| 保留时间(分钟) | 9.44 | 10.06 | 12.65 | 13.11 | 15.75 | 16.11 | 16.86 | 17.77 | 19.03 | 19.76 | 20.46 | 23.19 | 23.29 | 24.26 |
| 应答系数 | 0.76 | 0.8 | 0.92 | 0.96 | 1.02 | 1.05 | 1.08 | 1.2 | 1.5 | 1.6 | 1.8 | 1.85 | 1.86 | 1.88 |
| 注1,000g起始材料中的量(g) | ||||||||||||||
| 起始蛋黄 | 0.93 | 0.14 | 93.45 | 7.95 | 33.66 | 123.72 | 51.83 | 0.81 | 0.88 | 1.06 | 15.44 | 0.39 | 1.34 | 4.90 |
| DY上清液N | 0.51 | 0.12 | 35.64 | 4.76 | 10.78 | 63.41 | 20.91 | 0.54 | 0.53 | 0.38 | 0.00 | 0.27 | 0.76 | 0.84 |
| DY上清液P | 0.27 | 0.00 | 44.47 | 1.84 | 16.98 | 36.60 | 21.66 | 0.12 | 0.19 | 0.53 | 12.79 | 0.00 | 0.00 | 3.49 |
| 总量 | 0.78 | 0.12 | 80.11 | 6.60 | 27.77 | 100.01 | 42.56 | 0.66 | 0.72 | 0.91 | 12.79 | 0.27 | 0.76 | 4.33 |
| DY沉淀N | 0.10 | 0.01 | 4.08 | 0.93 | 2.96 | -13.63 | 4.90 | 0.10 | 0.11 | 0.11 | 1.26 | 0.09 | 0.41 | 0.40 |
| DY沉淀P | 0.05 | 0.01 | 9.25 | 0.42 | 2.94 | 10.08 | 4.37 | 0.05 | 0.05 | 0.05 | 1.39 | 0.03 | 0.17 | 0.17 |
| 总量 | 0.15 | 0.01 | 13.33 | 1.35 | 5.90 | 23.71 | 9.26 | 0.15 | 0.16 | 0.15 | 2.64 | 0.12 | 0.58 | 0.57 |
| CMC脂类N | 0.00 | 0.00 | 0.37 | 0.00 | 0.00 | 0.50 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 |
| CMC脂类P | 0.00 | 0.00 | 0.25 | 0.00 | 0.13 | 0.75 | 0.13 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 |
| 总CMC脂类 | 0.00 | 0.00 | 0.62 | 0.00 | 0.13 | 1.25 | 0.13 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 |
| CMC沉淀N | 0.58 | 0.00 | 38.30 | 4.82 | 11.97 | 63.83 | 21.74 | 0.48 | 0.44 | 0.18 | 3.84 | 0.00 | 1.18 | 1.07 |
| CMC沉淀P | 0.00 | 0.00 | 45.15 | 2.36 | 17.02 | 45.64 | 22.47 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 9.56 | 0.00 | 2.89 | 2.55 |
| 总CMC沉淀 | 1.20 | 0.00 | 83.86 | 7.79 | 29.34 | 109.98 | 44.63 | 1.06 | 0.95 | 0.35 | 13.64 | 0.00 | 4.95 | 3.85 |
| 收率％ | 128.77 | 0.00 | 89.74 | 97.98 | 87.16 | 88.90 | 86.11 | 131.29 | 107.76 | 32.94 | 88.38 | 0.00 | 369.26 | 78.48 |
Claims (22)
1.一种从蛋黄中选择性取得磷脂的方法，其特征在于，包括：
将蛋黄材料与蛋的其它部分分开；
用水稀释蛋黄材料；
混合稀释的蛋黄材料和水；
调节混合的蛋黄材料和水的pH和盐含量；
用重力将调节过pH的混合蛋黄材料和水分成不同的DYS组分和DYP组分；和
将DYS组分和DYP组分分开。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括将脂类和DYS组分分开。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的将脂类和DYS组分分开包括将增粘剂加入到DYS组分中。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括将DYS组分和增粘剂混合。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括离心混合的DYS组分和增粘剂，分离成乳状层和水溶液。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括将乳状层和水溶液分开。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的水是蒸馏水。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的稀释步骤包括以1∶7.4的体积比将水加入到蛋黄材料中。
9.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的调节pH和盐的含量使pH的水平在5和9之间。
10.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的增粘剂包括藻胶。
11.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的增粘剂包括羧甲基纤维素。
12.如权利要求6所述的方法，其特征在于，至少在50℃将调节过pH的混合蛋黄材料和水组分分开。
13.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的蛋黄获自按改进饲料方案喂养的母鸡产的蛋。
14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述的改进饲料方案含有标准饲料；以及每吨标准饲料含有0-100lbs挤压的全脂大豆。
15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述的改进饲料方案还包括每吨标准饲料含有50lbs亚麻籽。
16.如权利要求14所述的方法，其特征在于，用改进饲料方案喂养的母鸡产的蛋维持了ω-6脂肪酸，即花生四烯酸的水平。
17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述的改进饲料方案提高了用改进饲料方案喂养的母鸡产的蛋中的ω-3脂肪酸，即二十二碳六烯酸的水平。
18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，将所述的水溶液添加到用于婴儿制品的配方中。
19.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述的改进饲料方案在维持用改进饲料方案喂养的母鸡产的蛋中ω-6脂肪酸，即花生四烯酸的水平的同时，提高了ω-3脂肪酸，即二十二碳六烯酸的水平。
20.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述的改进饲料方案提高了用改进饲料方案喂养的母鸡产的蛋中ω-3脂肪酸，即二十二碳六烯酸的水平，使花生四烯酸∶二十二碳六烯酸的比例为4-2.4。
21.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述的改进饲料方案提高了用改进饲料方案喂养的母鸡产的蛋中ω-3脂肪酸，即二十二碳六烯酸的水平。
22.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述的改进饲料方案提高了用改进饲料方案喂养的母鸡产的蛋中ω-3脂肪酸，即二十二碳六烯酸的水平，使花生四烯酸∶二十二碳六烯酸的比例为2.1-1.9。
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| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
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