CN1304046C - 肝癌相关基因dlk1及其应用 - Google Patents
肝癌相关基因dlk1及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1304046C CN1304046C CNB2004100255613A CN200410025561A CN1304046C CN 1304046 C CN1304046 C CN 1304046C CN B2004100255613 A CNB2004100255613 A CN B2004100255613A CN 200410025561 A CN200410025561 A CN 200410025561A CN 1304046 C CN1304046 C CN 1304046C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cys
- gly
- leu
- dlk1
- gene
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了人类基因DLK1(Delta like 1 homolog)及其编码蛋白在诊治肝癌方面的应用。人类DLK1基因定位于染色体的14q32上,其编码了一个含有383个氨基酸的蛋白质。DLK1基因在肝癌中的表达较癌旁组织中明显增加。根据本发明公开的人类肝癌相关基因DLK1及其编码蛋白,对其进行深入的研究有可能发现肝癌发病的新机制,同时,它们也可能作为肝癌治疗的新的靶点,并且可为进一步开发针对肝癌的药物提供重要的参考价值。
Description
技术领域
本发明涉及分子生物学和基因工程领域,具体地,本发明涉及一种人类肝癌相关基因DLK1(Delta like 1 homolog)及其编码序列的应用。
背景技术
目前我国有慢性肝炎患者约1200万例,每年死于肝病约30万,其50%为原发性肝癌,约占全世界肝癌死亡人数的45%左右。绝大多数与HBV、HCV感染有关。肝癌发病率在我国居2-3位,主要在青壮年男性发病,在华东地区的发病率明显高于其他地区,近年来,有持续上升趋势。在上海,肝癌的发病率居第三位,仅次于肺癌和胃癌。最新资料显示这个比例还有继续上升的趋势。现在,肝癌,特别是肝炎病毒引起的肝癌已经严重危害了我国人民生命安全。因此,非常有必要对肝癌发生的分子机制作深入的研究。
随着人类基因组测序的完成,基因组学的研究重点已经转移到以解析基因功能为主的功能基因组学研究。功能基因组学的重点是以疾病为中心,全力解决人类疾病相关基因研究中的重大科学问题。肝癌在我国素有“国病”之称,经过半个世纪的探索,对于肝癌的早期诊断和治疗虽然有了一定的认识,但肝癌预后仍然很差,特别是对其发病机制的了解及治疗药物的新靶点方面,更是知之甚少。因此,寻找与肿瘤相关的基因,特别是寻找新的抑癌基因是近年来肿瘤研究的热点。
DLK1基因定位于染色体14q32上。DLK1是在胞外区域包含6个EGF样重复序列的糖基化Delta样跨膜蛋白。DLK1首先是在脂肪前体细胞中发现,与脂肪细胞的分化紧密相关。DLK1基因具有抑制脂肪前体细胞向脂肪细胞分化的功能。近年来,有研究发现DLK1在神经母细胞瘤细胞和小细胞肺癌细胞株等肿瘤细胞中存在表达,表明DLK1基因可能与肿瘤发生相关;同时在老鼠的胎肝细胞和胆汁淤积引起的肝纤维化细胞中均发现DLK1的表达。在我们的前期肝癌及癌旁表达谱分析的研究中,发现DLK1基因在肝癌中的表达较癌旁组织中明显增加,提示DLK1基因可能对肝癌的发生相关。
发明内容
本发明的目的在于提供一种肝癌相关基因DLK1、其编码的蛋白以及该基因和该蛋白的应用。
本发明的上述目的是通过如下技术方案来实现的:
本发明提供了一种蛋白多肽在制备治疗原发性肝癌的药物中的应用,所述蛋白多肽具有与SEQ ID NO.2所示氨基酸序列至少70%同源性的序列。优选的,所述的蛋白多肽是含有SEQ ID NO.2序列的多肽。
本发明还提供了一种多核苷酸序列在制备治疗原发性肝癌的药物中的应用,所述的多核苷酸是具有:
SEQ ID NO:1所示的编码序列;
或者与SEQ ID NO:1中154-1305位核苷酸序列具有至少70%同源性的序列;
或者在中度严紧条件下与SEQ ID NO:1所示序列杂交的序列。
优选的,所述的多核苷酸编码具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的多肽。
本发明还提供了一种用于诊断和治疗肝癌的试剂盒,所述试剂盒含有下列(I)-(V)中任一所示的序列或者它们的连续片段,
(I)SEQ ID NO:1所示的编码序列;
(II)与SEQ ID NO:1中154-1305位核苷酸序列具有至少70%同源性的序列;
(III)在中度严紧条件下与SEQ ID NO:1所示序列杂交的序列;
(IV)具有与SEQ ID NO.2所示氨基酸序列至少70%同源性的序列;
(V)含有SEQ ID NO.2序列的多肽。
在本发明的再一方面,还提供了一种用于诊断和治疗肝癌的生物芯片,所述生物芯片的载体上含有下列(i)-(v)的序列或者它们的连续片段,
(i)SEQ ID NO:1所示的编码序列;
(ii)与SEQ ID NO:1中154-1305位核苷酸序列具有至少70%同源性的序列;
(iii)在中度严紧条件下与SEQ ID NO:1所示序列杂交的序列;
(iv)具有与SEQ ID NO.2所示氨基酸序列至少70%同源性的序列;
(v)含有SEQ ID NO.2序列的多肽。
根据本发明公开的人类肝癌相关基因DLK1及其编码蛋白,对其进行深入的研究有可能发现肝癌发病的新机制,同时,它们也可能作为肝癌治疗的新的靶点,并且可为进一步开发针对肝癌的药物提供重要的参考价值。
附图说明
图1为通过RT-PCR验证DLK1基因在肝癌/癌旁组织中的表达差异的电泳结果图,N为癌旁组织,C为癌组织;
图2为通过Northern验证DLK1基因在肝癌/癌旁组织中的表达差异结果图,N为癌旁组织,C为癌组织;
图3为Northern检测DLK1基因在人的各组织中的分布的结果图;
图4为Northern检测DLK1基因在12种肝癌细胞株以及正常肝和胎肝中的表达丰度结果图;
图5为7402细胞株克隆的Western Blotting的鉴定结果图,Mock1为74023.1B-DLK,D4为7402 3.1B-DLK,V1为7402 3.1B,V2为7402 3.0,D5为74023.0-DLK,Mock2为7402 3.0-DLK;
图6为MHCC-H细胞株克隆的Western Blotting的鉴定结果图,V1为MHCC-H3.0-DLK,C2为MHCC-H 3.0-DLK,7C3为MHCC-H 3.0-DLK,7B4为MHCC-H 3.0-DLK,Mock为MHCC-H 3.0;
图7为DLK1再表达7402稳定细胞株的生长曲线图;
图8为DLK1再表达MHCC-H稳定细胞株的生长曲线图。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件如Sambrook等人,分子克隆:实验室手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1
肝组织RNA的抽提
抽提RNA试剂采用TRIzol reagent(GIBCO/BRL),该试剂是基于酸性酚一步抽提法生产的。用于抽提RNA所用的器皿和水均要进行无RNA酶处理,以保证实验中无RNA酶的环境。
将碾杵和匀浆器等器皿在200℃干烤4h,去除RNA酶,冷却;加入液氮中预冷,将组织从液氮中迅速取出,碾成粉末;用刮匙将组织放入预先加入TRIzol试剂的匀浆器中,匀浆数分钟;将匀浆后的液体转入无RNA酶的离心管中,加入氯仿后,4℃离心分层;将上层水相转入一无RNA酶的离心管中,加异丙醇,4℃离心沉淀RNA;用75%乙醇洗涤沉淀2次;用无RNA酶的去离子水溶解沉淀。抽提的RNA质量鉴定:紫外分光光度计测定260/280比值(比值均在1.7~2.0);并在MOPS甲醛变性胶中观察有无降解。
超低温保存。
实施例2
cDNA的合成
反转录(RT)
总RNA 1μg
oligo dT(10pmol/l) 1μl
H2O 补至12μl
70℃变性3分钟,置于冰上冷却;
再加入 5×Buffer 4μl
DTT 2μl
dNTP 1μl
SuperScript II 1μl
42℃反应1小时,70℃变性15分钟,置于冰上冷却。
实施例3
PCR扩增
以β-actin作内对照,反应混合物中各成分为:β-actin(F)引物、β-actin(R)引物、DLK1(F)引物、DLK1(R)引物、10×Buffer、MgCl2、dNTP、Taq DNA聚合酶、cDNA模板分别为0.2、0.2、0.4、0.4、1.0、1.0、0.2、0.1和5μLcDNA模板,最后补充ddH2O使反应体系为10μL。PCR的反应条件是94℃变性5min;然后每个循环94℃ 30s、53℃ 30s、72℃ 30s,共30个循环;最后72℃延伸7min。
实施例4
RT-PCR技术检测DLK1基因在肝癌及其癌旁组织中的表达
利用RT-PCR技术检测DLK1基因在27对肝癌/癌旁组织中的表达,27例肝癌及癌旁组织均为HBV阳性的原发性肝癌的手术病人。手术切除的肝脏一经离体,迅速切取病灶及周围正常组织,放入液氮中(-80℃)保存。发现肝癌组织DLK1的表达明显高于癌旁组织。结果见图1。
实施例5
Northern检测DLK1基因在肝癌及其癌旁组织中的表达
利用Northern技术检测DLK1基因在10对肝癌/癌旁组织中的表达,其中用28sRNA作为参照,发现部分病例中,癌旁组织的DLK1的表达量明显高于肝癌组织,结果见图2,该结果与RT-PCR的结果一致。
实施例6
DLK1基因在人体正常组织中的表达
为了解DLK1基因在人体各组织中的表达。分别提取人的各组织的总RNA,包括脑、心、骨骼肌、结肠、胸腺、脾、肾、肝、小肠、胎盘、肺、外周淋巴组织。Northern检测DLK1基因在人各组织中的表达。由图可以看出在胎盘的表达量最高。结果见图3。
实施例7
不同肝癌细胞株中DLK1基因的表达
为了了解DLK1基因在肝癌细胞株中的表达,利用Northern技术检测DLK1基因在12种肝癌细胞株(7402、7405、7701、7703、7721、Hep3B、HepG2、MHCC-L、MHCC-H、Huh-7、L02、SK-HEP)以及正常肝(normal liver)和胎肝(fetal liver)中的表达,同时,也以28sRNA作为对照。结果见图4。
实施例8
MHCC-H和7402对G418敏感度的测定
我们所选用的肝癌细胞株7402和MHCC-H经RT-PCR和Northern-blot验证均不表达DLK1基因。因此,我们选用这两种细胞株建立DLK1稳定表达细胞株,以研究DLK1基因对肝癌细胞增殖的影响。由于我们利用pcDNA3.0、pcDNA3.1B、pcDNA3.0+DLK1和pcDNA3.1B+DLK1转染7402和MHCC-H以后,将通过载体中的G418抗性基因筛选克隆,因此我们分别测定了MHCC-H和7402对抗G418的最佳浓度,最佳浓度是在10-14天内杀死所有细胞的最低浓度。结果显示:7402的最佳G418浓度为600ug/ml,而MHCC-H为500ug/ml。
为了鉴定DLK1基因编码的蛋白在细胞内表达情况,待细胞在35mm培养皿中长至95%时,我们对细胞裂解产物中DLK1蛋白的含量进行了Western Blot鉴定。结果(见图5和图6)显示:阳性克隆中DLK1是大量表达的,而转染了DLK1基因但是在细胞中没有表达的mock(转了DLK1基因但是在细胞中没有表达)和以相应载体的空载为对照的细胞则没有表达。进一步说明我们在不表达DLK1的肝癌细胞株7402和MHCC-H中实现了表达了DLK1基因,建立了表达DLK1基因的稳定细胞株。其中,图5中Mock1为7402 3.1B-DLK,D4为7402 3.1B-DLK,V1为7402 3.1B,V2为7402 3.0,D5为7402 3.0-DLK,Mock2为7402 3.0-DLK;图6中V1为MHCC-H 3.0-DLK,C2为MHCC-H 3.0-DLK,7C3为MHCC-H 3.0-DLK,7B4为MHCC-H 3.0-DLK,Mock为MHCC-H 3.0。
实施例9
细胞生长的变化
将待测生长曲线的细胞接种于96孔板中,密度为7-8×103/孔。将待测孔的培养液换成每100ul中含10ul的cck8的培养液,置于37℃,5%CO2的培养箱中培养1小时。连续测定7天。在酶标仪上测量波长为450nm时的吸光率。连续7天的数据绘制成细胞生长曲线图。结果见图7和图8。
无论是阳性克隆或者mock或者以空载质粒为对照,它们的生长曲线的走向是相似的,无明显的变化。因此DLK1基因对7402细胞生长没有显著的影响(见图7)、DLK1基因对MHCC-H细胞生长没有显著的影响(见图8)。
实施例10
DLK1基因用于制备生物芯片
用获取的DLK1基因的核苷酸序列设计引物,扩增出全长的DLK1基因或该基因的部分片断,用作生物芯片点样的样品。
用英国的BioRobotics自动点膜仪将样品点在8×12cm尼龙膜上,每一标本点4个点,每点的DNA量约为10ng。阳性对照是重复4次点样的人β-actin基因,阴性对照是重复4次点样的λ噬菌体DNA。
含有DLK1基因的芯片可用于肝癌的诊断和药物筛选。
序列表
<110>上海人类基因组研究中心
<120>肝癌相关基因DLK1及其应用
<130>NP-1304
<160>2
<170>PatentIn version 3.2
<210>1
<211>1547
<212>DNA
<213>Homo sapiens
<220>
<221>CDS
<222>(154)..(1305)
<400>1
gagagcgcag cgcgcagccc ggtgcagccc tggctttccc ctcgctgcgc gcccgcgccc 60
cctttcgcgt ccgcaaccag aagcccagtg cggcgccagg agccggaccc gcgcccgcac 120
cgctcccggg accgcgaccc cggccgccca gag atg acc gcg acc gaa gcc ctc 174
Met Thr Ala Thr Glu Ala Leu
1 5
ctg cgc gtc ctc ttg ctc ctg ctg gct ttc ggc cac agc acc tat ggg 222
Leu Arg Val Leu Leu Leu Leu Leu Ala Phe Gly His Ser Thr Tyr Gly
10 15 20
gct gaa tgc ttc ccg gcc tgc aac ccc caa aat gga ttc tgc gag gat 270
Ala Glu Cys Phe Pro Ala Cys Asn Pro Gln Asn Gly Phe Cys Glu Asp
25 30 35
gac aat gtt tgc agg tgc cag cct ggc tgg cag ggt ccc ctt tgt gac 318
Asp Asn Val Cys Arg Cys Gln Pro Gly Trp Gln Gly Pro Leu Cys Asp
40 45 50 55
cag tgc gtg acc tct ccc ggc tgc ctt cac gga ctc tgt gga gaa ccc 366
Gln Cys Val Thr Ser Pro Gly Cys Leu His Gly Leu Cys Gly Glu Pro
60 65 70
ggg cag tgc att tgc acc gac ggc tgg gac ggg gag ctc tgt gat aga 414
Gly Gln Cys Ile Cys Thr Asp Gly Trp Asp Gly Glu Leu Cys Asp Arg
75 80 85
gat gtt cgg gcc tgc tcc tcg gcc ccc tgt gcc aac aac ggg acc tgc 462
Asp Val Arg Ala Cys Ser Ser Ala Pro Cys Ala Asn Asn Gly Thr Cys
90 95 100
gtg agc ctg gac gat ggc ctc tat gaa tgc tcc tgt gcc ccc ggg tac 510
Val Ser Leu Asp Asp Gly Leu Tyr Glu Cys Ser Cys Ala Pro Gly Tyr
105 110 115
tcg gga aag gac tgc cag aaa aag gac ggg ccc tgt gtg atc aac ggc 558
Ser Gly Lys Asp Cys Gln Lys Lys Asp Gly Pro Cys Val Ile Asn Gly
120 125 130 135
tcc ccc tgc cag cac gga ggc acc tgc gtg gat gat gag ggc cgg gcc 606
Ser Pro Cys Gln His Gly Gly Thr Cys Val Asp Asp Glu Gly Arg Ala
140 145 150
tcc cat gcc tcc tgc ctg tgc ccc cct ggc ttc tca ggc aat ttc tgc 654
Ser His Ala Ser Cys Leu Cys Pro Pro Gly Phe Ser Gly Asn Phe Cys
155 160 165
gag atc gtg gcc aac agc tgc acc ccc aac cca tgc gag aac gac ggc 702
Glu Ile Val Ala Asn Ser Cys Thr Pro Asn Pro Cys Glu Asn Asp Gly
170 175 180
gtc tgc act gac atc ggg ggc gac ttc cgc tgc cgg tgc cca gcc ggc 750
Val Cys Thr Asp Ile Gly Gly Asp Phe Arg Cys Arg Cys Pro Ala Gly
185 190 195
ttc atc gac aag acc tgc agc cgc ccg gtg acc aac tgc gcc agc agc 798
Phe Ile Asp Lys Thr Cys Ser Arg Pro Val Thr Asn Cys Ala Ser Ser
200 205 210 215
ccg tgc cag aac ggg ggc acc tgc ctg cag cac acc cag gtg agc tac 846
Pro Cys Gln Asn Gly Gly Thr Cys Leu Gln His Thr Gln Val Ser Tyr
220 225 230
gag tgt ctg tgc aag ccc gag ttc aca ggt ctc acc tgt gtc aag aag 894
Glu Cys Leu Cys Lys Pro Glu Phe Thr Gly Leu Thr Cys Val Lys Lys
235 240 245
cgc gcg ctg agc ccc cag cag gtc acc cgt ctg ccc aac ggc tat ggg 942
Arg Ala Leu Ser Pro Gln Gln Val Thr Arg Leu Pro Asn Gly Tyr Gly
250 255 260
ctg gcc tac cgc ctg acc cct ggg gtg cac gag ctg ccg gtg cag cag 990
Leu Ala Tyr Arg Leu Thr Pro Gly Val His Glu Leu Pro Val Gln Gln
265 270 275
ccg gag cac cgc atc ctg aag gtg tcc atg aaa gag ctc aac aag aaa 1038
Pro Glu His Arg Ile Leu Lys Val Ser Met Lys Glu Leu Asn Lys Lys
280 285 290 295
acc cct ctc ctc acc gag ggc cag gcc atc tgc ttc acc atc ctg ggc 1086
Thr Pro Leu Leu Thr Glu Gly Gln Ala Ile Cys Phe Thr Ile Leu Gly
300 305 310
gtg ctc acc agc ctg gtg gtg ctg ggc act gtg ggt atc gtc ttc ctc 1134
Val Leu Thr Ser Leu Val Val Leu Gly Thr Val Gly Ile Val Phe Leu
315 320 325
aac aag tgc gag acc tgg gtg tcc aac ctg cgc tac aac cac atg ctg 1182
Asn Lys Cys Glu Thr Trp Val Ser Asn Leu Arg Tyr Asn His Met Leu
330 335 340
cgg aag aag aag aac ctg ctg ctt cag tac aac agc ggg gag gac ctg 1230
Arg Lys Lys Lys Asn Leu Leu Leu Gln Tyr Asn Ser Gly Glu Asp Leu
345 350 355
gcc gtc aac atc atc ttc ccc gag aag atc gac atg acc acc ttc agc 1278
Ala Val Asn Ile Ile Phe Pro Glu Lys Ile Asp Met Thr Thr Phe Ser
360 365 370 375
aag gag gcc ggc gac gag gag atc taa gcagcgttcc cacagccccc 1325
Lys Glu Ala Gly Asp Glu Glu Ile
380
tctagattct tggagttcct cagagcttac tatacgcggt ctgtcctaat ctttgtggtg 1385
ttcgctatct cttgtgtcaa atctggtgaa cgctacgctt acatatattg tctttgtgct 1445
gctgtgtgac aaacgcaatg caaaaacaat cctctttctc tctcttaatg catgatacag 1505
aataataata agaatttcat ctttaaaaaa aaaaaaaaaa aa 1547
<210>2
<211>383
<212>PRT
<213>Homo sapiens
<400>2
Met Thr Ala Thr Glu Ala Leu Leu Arg Val Leu Leu Leu Leu Leu Ala
1 5 10 15
Phe Gly His Ser Thr Tyr Gly Ala Glu Cys Phe Pro Ala Cys Asn Pro
20 25 30
Gln Asn Gly Phe Cys Glu Asp Asp Asn Val Cys Arg Cys Gln Pro Gly
35 40 45
Trp Gln Gly Pro Leu Cys Asp Gln Cys Val Thr Ser Pro Gly Cys Leu
50 55 60
His Gly Leu Cys Gly Glu Pro Gly Gln Cys Ile Cys Thr Asp Gly Trp
65 70 75 80
Asp Gly Glu Leu Cys Asp Arg Asp Val Arg Ala Cys Ser Ser Ala Pro
85 90 95
Cys Ala Asn Asn Gly Thr Cys Val Ser Leu Asp Asp Gly Leu Tyr Glu
100 105 110
Cys Ser Cys Ala Pro Gly Tyr Ser Gly Lys Asp Cys Gln Lys Lys Asp
115 120 125
Gly Pro Cys Val Ile Asn Gly Ser Pro Cys Gln His Gly Gly Thr Cys
130 135 140
Val Asp Asp Glu Gly Arg Ala Ser His Ala Ser Cys Leu Cys Pro Pro
145 150 155 160
Gly Phe Ser Gly Asn Phe Cys Glu Ile Val Ala Asn Ser Cys Thr Pro
165 170 175
Asn Pro Cys Glu Asn Asp Gly Val Cys Thr Asp Ile Gly Gly Asp Phe
180 185 190
Arg Cys Arg Cys Pro Ala Gly Phe Ile Asp Lys Thr Cys Ser Arg Pro
195 200 205
Val Thr Asn Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gln Asn Gly Gly Thr Cys Leu
210 215 220
Gln His Thr Gln Val Ser Tyr Glu Cys Leu Cys Lys Pro Glu Phe Thr
225 230 235 240
Gly Leu Thr Cys Val Lys Lys Arg Ala Leu Ser Pro Gln Gln Val Thr
245 250 255
Arg Leu Pro Asn Gly Tyr Gly Leu Ala Tyr Arg Leu Thr Pro Gly Val
260 265 270
His Glu Leu Pro Val Gln Gln Pro Glu His Arg Ile Leu Lys Val Ser
275 280 285
Met Lys Glu Leu Asn Lys Lys Thr Pro Leu Leu Thr Glu Gly Gln Ala
290 295 300
Ile Cys Phe Thr Ile Leu Gly Val Leu Thr Ser Leu Val Val Leu Gly
305 310 315 320
Thr Val Gly Ile Val Phe Leu Asn Lys Cys Glu Thr Trp Val Ser Asn
325 330 335
Leu Arg Tyr Asn His Met Leu Arg Lys Lys Lys Asn Leu Leu Leu Gln
340 345 350
Tyr Asn Ser Gly Glu Asp Leu Ala Val Asn Ile Ile Phe Pro Glu Lys
355 360 365
Ile Asp Met Thr Thr Phe Ser Lys Glu Ala Gly Asp Glu Glu Ile
370 375 380
Claims (2)
1、一种用于诊断肝癌的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒含有下列序列:(I)SEQ ID NO:1所示的编码序列;(II)含有SEQ ID NO:2所示序列的多肽。
2、一种用于诊断肝癌的生物芯片,其特征在于,所述的生物芯片的载体上含有下列序列:(I)SEQ ID NO:1所示的编码序列;(II)含有SEQ ID NO:2所示序列的多肽。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNB2004100255613A CN1304046C (zh) | 2004-06-29 | 2004-06-29 | 肝癌相关基因dlk1及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNB2004100255613A CN1304046C (zh) | 2004-06-29 | 2004-06-29 | 肝癌相关基因dlk1及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1714862A CN1714862A (zh) | 2006-01-04 |
CN1304046C true CN1304046C (zh) | 2007-03-14 |
Family
ID=35821224
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNB2004100255613A Expired - Fee Related CN1304046C (zh) | 2004-06-29 | 2004-06-29 | 肝癌相关基因dlk1及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1304046C (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5904935B2 (ja) * | 2009-03-17 | 2016-04-20 | クルナ・インコーポレーテッド | デルタ様1ホモログ(dlk1)に対する天然アンチセンス転写物の抑制によるdlk1関連疾患の治療 |
CN102778566B (zh) * | 2011-05-07 | 2016-01-13 | 上海市肿瘤研究所 | Dlk1在肝癌诊断及预后判断中的应用 |
TW202104259A (zh) * | 2019-04-01 | 2021-02-01 | 日商凱依歐姆 生物科學股份有限公司 | 癌治療用醫藥 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003018779A1 (en) * | 2001-08-24 | 2003-03-06 | Nsgene A/S | Isolation of cells from neural cell populations using antibodies to fa1/dlk1 |
-
2004
- 2004-06-29 CN CNB2004100255613A patent/CN1304046C/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003018779A1 (en) * | 2001-08-24 | 2003-03-06 | Nsgene A/S | Isolation of cells from neural cell populations using antibodies to fa1/dlk1 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1714862A (zh) | 2006-01-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN1250744C (zh) | 确定二氢嘧啶脱氢酶基因表达的方法 | |
CN1304046C (zh) | 肝癌相关基因dlk1及其应用 | |
CN1840697A (zh) | 确定二氢嘧啶脱氢酶基因表达的方法 | |
CN1957091A (zh) | K-ras寡核苷酸微型阵列及用其检测K-ras突变的方法 | |
CN1292078C (zh) | 肝癌组织特异表达基因及其应用 | |
CN1478149A (zh) | 生理活性物质的筛选方法 | |
CN1869064A (zh) | 一种肿瘤抗原蛋白质和肿瘤抗原肽 | |
CN1279185C (zh) | 肝癌细胞表达下调基因及其应用 | |
CN1900279A (zh) | 诱导细胞凋亡的多核苷酸及其编码的多肽和用途 | |
CN1281621C (zh) | 利用nipa1基因突变热点诊断、治疗遗传性痉挛性截瘫的方法 | |
CN1209369C (zh) | 诱导细胞凋亡蛋白、其编码序列及用途 | |
CN101054583A (zh) | 斑节对虾细胞周期蛋白b的基因序列 | |
CN1199998C (zh) | 具有抑制癌细胞生长功能的新的人蛋白及其编码序列 | |
CN1252283C (zh) | 卵巢癌的检测方法和试剂盒 | |
CN1208462C (zh) | 一个人类锌指蛋白家族新基因znf325 | |
CN101063131A (zh) | 花鲈凝集素基因序列 | |
CN1861190A (zh) | 阴离子交换蛋白1及基因作为靶标在制备治疗消化道肿瘤药物中的应用 | |
CN1193093C (zh) | 癌诊断用引物 | |
CN1869066A (zh) | 一种肿瘤抗原蛋白质和肿瘤抗原肽 | |
CN1218954C (zh) | 人造血细胞相关基因-1 | |
CN1632119A (zh) | 人lsb基因序列、其编码的多肽、制备方法及应用 | |
CN1205225C (zh) | 具有抑癌功能的新的人蛋白及其编码序列 | |
CN1681835A (zh) | 胃癌相关的基因家族 | |
CN1683557A (zh) | 白血病急变主效基因之一aml-1突变基因及其应用 | |
CN1705745A (zh) | 与癌症相关的基因家族 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20070314 Termination date: 20150629 |
|
EXPY | Termination of patent right or utility model |