CN1291721C - 蒜糖醇在制备糖尿病药物中的应用 - Google Patents

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CN1291721C CN 02133562 CN02133562A CN1291721C CN 1291721 C CN1291721 C CN 1291721C CN 02133562 CN02133562 CN 02133562 CN 02133562 A CN02133562 A CN 02133562A CN 1291721 C CN1291721 C CN 1291721C
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Abstract

本发明涉及一种蒜糖醇作为制备糖尿病药的应用。蒜糖醇(allitol)不同于一般降血糖药物,降糖过程缓慢平稳,即使大量服用也不会发生低血糖危险,服用安全;服用蒜糖醇(allitol)的糖尿病小鼠精神饱满,活跃、体重正常增加,生长良好,与对照组相比,生活质量显著提高。不服药的糖尿病小鼠,精神萎靡,生长期的小鼠体重增加缓慢,生长受到显著抑制,生活质量明显降低;长期喂养,小鼠无中毒现象和不良反应;蒜糖醇(allitol)不同于目前普通的控制血糖和降低血糖的药物,其对患糖尿病且长期处于高血糖状态中的小鼠生长和生活质量的提高有明显作用,对糖尿病引起的并发症有明显防治作用。

Description

蒜糖醇在制备糖尿病药物中的应用
技术领域:本发明涉及一种蒜糖醇,又称阿洛糖醇作为制备糖尿病药的应用。
背景技术:目前,糖尿病被称为终身疾病,还没有一个国家能根治。现在普遍认为糖尿病的主要危害来源于高血糖,药物治疗主要以控制血糖为主,通过对血糖的控制使生命得到延长。冬虫夏草是我国传统的食、药两用珍品,祖国传统医学和现代医学研究表明,冬虫夏草对多种慢性疾病有较好的治疗作用。近年来,利用生物发酵技术培养虫草菌作为保健食品和治疗药品的产品已为数不少。我们对虫草菌的研究已有十年,先后完成了《虫草菌开发应用研究》和《虫草菌多糖应用研究》,并开发了虫草菌系列产品多个。多年来在不同使用人群中,常有该产品对多种慢性病有明显治疗效果的信息反馈,特别是来自糖尿病患者的反映,认为有较好疗效,为进一步深入研究虫草菌中的有效成分,我们用虫草菌发酵物进行分离纯化等工作,在分离出的物质中得到一种单一化合物蒜糖醇(allitol),又称阿洛糖醇。蒜糖醇(allitol)是自然界中存在极少的一类化合物,有关蒜糖醇(allitol)的生物活性和在医疗等方面的应用均未见报道。
发明内容:本发明的目的在于提供一种蒜糖醇作为制备冶疗糖尿病药的用途,用于冶疗糖尿病。
本发明是这样实现:蒜糖醇作为制备冶疗糖尿病药的用途。
附图说明:表1为蒜糖醇(allitol)3mg/kg组给药前和给药后血糖值对比。
表2为蒜糖醇(allitol)含量3mg/kg状态下给药期间小鼠死亡情况对照。
表3为蒜糖醇(allitol)4mg/kg组给药前和给药后血糖值对比。
表4为蒜糖醇(allitol)含量4mg/kg状态下给药期间小鼠死亡情况对照。
表5:蒜糖醇(allitol)(3mg/kg)对小鼠生长及生存质量影响的观察记录。
表6:蒜糖醇(allitol)(3mg/kg)对小鼠血糖的影响。
表7:蒜糖醇(allitol)(4mg/kg)对小鼠生长及生存质量影响的观察记录。
表8:蒜糖醇(allitol)(4mg/kg)对小鼠血糖的影响。
表9:对给药期两组蒜糖醇(allitol)(含量为3mg/kg和4mg/kg)平均血糖值变化图。
表10:蒜糖醇(allitol)对动物小白鼠毒理实验。
具体实施方案:下面就本发明蒜糖醇(allitol)作为制备冶疗糖尿病药的用途,提供蒜糖醇(allitol)动物毒理实验、蒜糖醇(allitol)含量变化对动物血糖和生长及生存质量的影响和蒜糖醇(allitol)对糖尿病小鼠的降糖和疗效的作用。
通过四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠实验,实验蒜糖醇(allitol)对糖尿病小鼠的降糖和疗效的作用。
1.1供试药品:蒜糖醇(allitol)由虫草发酵物中提取,纯度为90%以上,用蒸溜水配制(0.1mg/ml)
1.2试验动物:ICR小鼠,雄性,由昆明医学院省天然药物重点实验室提供(滇实动证字号第9804,9806号环境,质量合格证)
1.3糖尿病小鼠模型的制备:正常健康小鼠禁食8小时,自由饮水,由尾静脉一次性快速注入(30s内)四氧嘧啶60mg/kg。于静脉注射后第四天自小鼠尾静脉取血测血糖。血糖值>12mmo/L的小鼠定为糖尿病小鼠。
1.4小鼠的分组和给药方法:糖尿病小鼠按血糖值随机分为对照组和给药组,另设一组正常组,对照观察小鼠生长状态与生活质量。对照组和给药组采用灌胃给药,每日一次。给药组按3mg/kg组、4mg/kg体重剂量给以ST,对照组给以等量的蒸溜水。给药一段时间后,测小鼠餐后血糖值,每次测定在给药1hr后自尾静脉取血。
2.结果见表1:对照组因死亡率高,仅剩2只,其中1只自然恢复,无法比较组间显著性差异。
蒜糖醇(allitol)组内药前、药后P<0.01,有极显著性差异。
“*”为小鼠已死亡。
表1:蒜糖醇(allitol)3mg/kg组给药前和给药后血糖值对比:
         对照组血糖值(14例)     蒜糖醇(allitol)组血糖值(11例)
  编号     药前    药后4个月 药后6个月     药前 药后4个月     药后6个月
    1     25.8     *     *     25.4     9.2     5.8
    2     23.2     27.1     23.3     25.3     15.1     7.1
    3     20.8     26.9     *     15.9     7.6     6.8
    4     16.9     *     *     13.9     8.7     7.1
    5     16     23.4     *     22.7     22.7     28
6 27.6 19 * 27.3 15.2 8.8
    7     13.2     *     *     18.8     23.2     26.5
    8     12.1     *     *     15.9     7.1     5.3
    9     21.8     *     *     26.5     18     13.7
    10     27.3     *     *     24.5     14.9     7.8
    11     26.6     *     *     17.7     *     *
    12     24.7     5.8     6.4
    13     27.6     *     *
    14     12.8     *     *
    平均值     21.17     20.44     14.85     21.26     14.17     11.69
表3:蒜糖醇(allitol)4mg/kg给药前和给药后血糖值对比:
        对照组血糖值(13例)         蒜糖醇(allitol)组血糖值(12例)
  编号     药前    药后4个月    药后6个月     药前    药后4个月     药后6个月
    1     23.6    *    *     26.4    7.9     5.9
    2     25.2    27.6    24.3     26.2    8.8     8.0
    3     21.8    *    *     21.7    7.6     6.7
    4     18.3    18.5    23.2     12.8    7.4     6.1
    5     15.2    21.2    *     15.7    9.2     6.2
    6     21.4    *    *     19.3    *     *
    7     15.1    23.4    *     18.6    8.7     7.9
    8     27.6    *    *     26.8    6.2     7.8
    9     23.4    5.6    *     14.9    6.4     7.4
    10     27.3    *    *     26.5    26     15.9
    11     21.7    27.9    26.8     23.7    *     *
    12     17.1    *    *     27.3    27.2     28
    13     21.39    *    *
    平均值     21.47    20.70    24.76     21.65    11.54     9.99
对照组因死亡率高,仅剩3只,无法比较组间显著性差异。蒜糖醇(allitol)组内药前、药后P<0.01,有极显著性差异。“*”为小鼠已死亡。
表2:给药期间小鼠死亡情况对照:
表2:给药期间小鼠死亡情况对照:
   对照组死亡情况(14例)     蒜糖醇(allitol)组死亡情况(11例
   1个月   3个月   6个月   1个月   3个月     6个月
  累积死亡数(只)    4   7   12     1
  死亡率             85%                  9%
表4给药期间小鼠死亡情况对照:
  对照组死亡情况(13例)    蒜糖醇(allitol)组死亡情况(12例)
   1个月   3个月   6个月    1个月   3个月     6个月
  累积死亡数(只)    3   6   10     1
  死亡率             77%                  8.4%
蒜糖醇(allitol)不同于一般降血糖药物,降糖过程缓慢平稳,即使大量服用也不会发生低血糖危险,服用安全。糖尿病小鼠经连续服用蒜糖醇(allitol)六个月后,餐后血糖值逐渐趋于正常,糖尿病症状逐渐消除;3mg/kg组无效3例(含死亡小鼠),有效率为72%。对照组一只小鼠血糖值自然恢复正常,占7%;4mg/kg组无效3例(含死亡小鼠),有效率为75%。对照组小鼠血糖值无明显恢复。
对照组小鼠在患糖尿病后,前、后期都有较多小鼠死于糖尿病引起的急性和慢性并发症(两组平均死亡率为80%以上)。服用蒜糖醇(allitol)小鼠虽前期仍处于高血糖状态,在不服用其它降糖药的情况下,蒜糖醇(allitol)有效地控制了高血糖状态下小鼠糖尿病并发症的发生。死亡率比对照组显著降低(平均死亡率为10%以下)。
根据与正常组小鼠的对比观察,服用蒜糖醇(allitol)的糖尿病小鼠除前期精神稍差,后期与正常组基本无异。精神饱满,活跃、生长期小鼠体重正常增加,生长良好。不服用蒜糖醇(allitol)的糖尿病小鼠,精神萎靡,生长期的小鼠体重增加缓慢,生长受到显著抑制。长期喂养,服用蒜糖醇(allitol)的小鼠无中毒现象和不良反应。
表5:蒜糖醇(allitol)(3mg/kg)对小鼠生长及生存质量影响的观察记录  日期:2001年9月30日-2002年4月20日
 组别     正常组     对照组   蒜糖醇(allitol)组
 例数(只)     12     14   11
 给药前平均体重     21.78     22.34   22.13
药后1个月   平均体重     生存状态     平均体重 生存状态   平均体重 生存状态
30.2g 28.4 和正常组相比,精神差。喝水和尿明显多。80%的小鼠消瘦。精神差。本月四只死亡, 30.1 和正常组相比,30%小鼠无明显差别,70%精神较差。喝水和尿明显多。
2个月 36.1 30.8 和正常组相比,精神差。喝水和尿明显多。部分小鼠肛门红肿或溃烂。本月一只死亡, 34.5 小鼠精神明显好转,80%小鼠和正常组无明显差别,20%精神较差。喝水和尿明显多。
3个月 39.7 34.6 和正常组相比,精神差。喝水和尿明显多。部分小鼠肛门或后腿红肿和溃烂。本月二只死亡, 37.42 除喝水和尿比正常组多外。小鼠精神和正常组无明显区别。血糖值显著降低。本月一只死亡。
4个月 41.5 好本月一只死亡 34.1 所剩五只小鼠中,喝水和尿明显多。多数精神差。本月二只死亡, 39.4 精神好,喝水和尿较前月明显减少。
5个月 41.8 35.6 所剩三只小鼠,二只精神较好,一只差。本月二只死亡, 40 精神好,喝水和尿较前月明显减少。基本正常。
 6个月     好 死亡一只。
死亡率             10%                      85%                      9%
表6:蒜糖醇(allitol)(3mg/kg)对小鼠血糖的影响日期:2001年9月30日-2002年4月20日
                                      对照组                                蒜糖醇(allitol)组
编号     药前血糖     药后1周     药后2周     药后1月     药后3月     药后4月     药后6月 编号     药前血糖     药后1周     药后2周     药后1月     药后3月     药后4月     药后6月
  1     25.8     22.8     24.1     21.4     9.1     *     *     1     25.4     19.1     16.3     23.1     16.2     9.2     5.8
  2     23.2     27.6     23.3     25.6     27.1     27.1     23.3     2     25.3     26.3     23.1     23.8     15.3     15.1     7.1
  3     20.8     28.1     27.6     27     26.9     26.9     *     3     15.9     24.4     27.4     23.4     12.1     7.6     6.8
  4     16.9     6.6     9.7     7.4     *     *     *     4     13.9     10.5     23.4     6.7     9.7     8.7     7.1
  5     16     10.3     21.9     25.9     23.4     23.4     *     5     22.7     18.9     6.7     27.1     24.8     22.7     28
  6     27.6     25.1     22.2     19.5     19     19     *     6     27.3     5.1     17.1     18.4     17.2     15.2     8.8
  7     13.2     9.2     11.7     *     *     *     *     7     18.8     17.6     18.4     24.2     27.3     23.2     26.5
  8     12.1     6.8     6.8     *     *     *     *     8     15.9     25.1     24.2     27.3     9.8     7.1     5.3
  9     21.8     12.4     12.9     26.8     *     *     *     9     26.5     12.1     12.1     12.1     10.4     18     13.7
  10     27.3     27.5     27.6     27.4     12.7     *     *     10     24.5     27.1     25.1     25.1     16.2     14.9     7.8
  11     26.6     28     6.4     *     *     *     *     11     17.7     4.6     22.5     22.5     25.9     *     *
  12     24.7     25.2     24.9     9.7     5.8     5.8     6.4
  13     27.6     27.9     28     28.3     *     *     *
  14     12.8     14.8     7.4     *     *     *     *
  平均值     21.17     19.45     18.17     21.9     17.71     20.44   14.85     21.26     17.34     21.89     23.86     16.64     15.17     11.69
表中“*”为小鼠已死亡
表7:蒜糖醇(allitol)4mg/kg对小鼠生长及生存质量影响的观察记录  日期:2001年10月8日-2002年4月20日
    组别           正常组     对照组          蒜糖醇(allitol)组
    例数(只)            12     13             12
    给药前平均体重            21.78     21.25             2137
药后1个月     平均体重     生存状态     平均体重 生存状态     平均体重 生存状态
30.2g 27.9 和正常组相比,精神差。喝水和尿明显多。80%的小鼠消瘦。本月二只死亡, 28.9 和正常组相比,20%小鼠无明显差别,80%精神较差。喝水和尿明显多。本月2只死亡。
2个月 36.1 30.4 和正常组相比,精神差。喝水和尿明显多。部分小鼠肛门红肿或溃烂。一只眼瞎。本月一只死亡, 32.4 小鼠精神明显好转,60%小鼠和正常组无明显差别,40%精神较差。喝水和尿明显多。
3个月 39.7 32.5 和正常组相比,精神差。喝水和尿明显多。本月三只死亡, 35.2 除喝水和尿比正常组多外。小鼠精神和正常组无明显区别。血糖值显著降低。
4个月 41.5 好本月一只死亡 33.2 所剩五只小鼠中,喝水和尿明显多。三只小鼠精神较好,二只明显差。本月二只死亡, 38.5 精神好,喝水和尿较前月明显减少。
5个月 41.8 34.8 所剩三只小鼠,二只精神较好,一只差。本月一只死亡,对照组死亡前多数为肛门溃烂。 39.1 精神好,喝水和尿基本和正常组一致。
    6个月     好 死亡一只。 同上
    死亡率             10%     77%                        8.4%
表8:蒜糖醇(allitol)(4mg/kg)对小鼠血糖的影响日期:2001年10月8日-2002年4月20日
                                  对照组                                              蒜糖醇(allitol)组
编号   药前血糖     药后1周     药后2周     药后1月    药后3月     药后4月     药后6月 编号     药前血糖     药后1周     药后2周     药后1月     药后3月     药后4月     药后6月
  1   23.6     21.7     25.2     26.1     *     27.6     27.6     1     26.4     11.7     8.6     19.6     7.7     7.9     5.9
  2   25.2     27.5     26.5     22.4     20.1     *     *     2     26.2     5.8     22.7     28     15.7     8.8     8
  3   21.8     28.2     24.3     25.1     *     18.5     23.2     3     21.7     20.7     24.3     10.9     10.3     7.6     6.7
  4   18.3     12.9     14.8     13.2     17.6     21.2     *     4     12.8     19.1     22     25.7     13.9     7.4     6.1
  5   15.2     25.2     15.1     23.5     18.9     23.4     *     5     15.7     4.5     19.1     20.5     9.1     9.2     6.2
  6   21.4     23.1     24.5     21.3     21.5     *     *     6     19.3     26.9     5.9     *     *     *     *
  7   15.1     8.9     6.3     *     *     *     *     7     18.6     19.8     18.3     20.2     11     8.7     7.9
  8   27.6     19.8     22.6     25.6     24.3     5.6     *     8     26.8     28     16.1     20.3     8.8     6.2     7.8
  9   23.4     27.5     26.4     *     *     *     *     9     14.9     13.9     8.7     16.9     10.9     6.4     7.4
  10   27.3     22.5     22.3     19.9     *     *     *     10     26.5     24     23     27.8     21.5     26     15.9
  11   21.7     25.3     27.6     26.9     24.1     27.9     26.8     11     23.7     27.8     12.5     *     *     *     *
  12   17.1     12.1     8.9     7.4     *     *     *     12     27.3     28     27.9     26.9     27.4     27.2     28
  13   21.39     *     *     *     *     *     *
  平均值   21.47     21.22     20.37     21.14     21.08     20.7   24.76     21.65     19.18     17.42     21.68     13.63     11.54     9.99
表中“*”为小鼠已死亡。
从试验研究结果看,蒜糖醇(allitol)对糖尿病小鼠的治疗作用是一个缓慢渐进过程。在服药治疗过程中,蒜糖醇(allitol)明显提高了糖尿病小鼠的生活质量,降低了并发症的发生,使糖尿病小鼠的死亡率显著降低。糖尿病小鼠的血糖值随服药治疗时间的延长而逐渐趋于正常,且停药后未见小鼠血糖值反弹。从以上情况看,蒜糖醇(allitol)的作用机制可能有别于现有的糖尿病治疗药物。
表9为给药期各组蒜糖醇(allitol)(3mg/kg、4mg/kg)平均血糖值变化图。
毒理试验目的:小鼠经口急性毒性实验(LD50),了解受试物蒜糖醇(allitol)的毒性强度、性质和可能靶器官。检验日期:2002年4月5日
检品名称:蒜糖醇(allitol)(由虫草菌发酵物提取,纯度90%以上。)
样品浓度:针形晶体溶剂:蒸馏水。
样品处理:将蒜糖醇(allitol)用蒸馏水配制为饱和液。
选用昆明医学院省天然药物重点实验室清洁级ICR小鼠20只(滇实动证字号第9804、9806号环境,质量合格证)。雌雄各半,体重18-22g。
因无法测出LD50,故参考最大耐受量(MTD)的测定方法测定。小鼠禁食12hr,自由饮水。按小鼠最大容量0.4ml/10g给药,一天内灌胃二次(间隔6hr),给药途径与临床应用相同,日剂量2.1g/kg,相当于临床用量小鼠等效剂量的700倍(以体表面积计算),观察15天,记录中毒症状和动物死亡情况。
表10:对动物小白鼠毒理实验
剂量(g/kg.day) 给药(2次/天) 动物数量(只) 死亡数                  动物体重(g)
试验前 试验后
2.1 2 20 0 19.03±0.81  24.69±1.44
19.86±1.02  26.87±1.44
从表11可以看出:小鼠灌胃给药,累积剂量为2.1g/kg,相当于临床用药的等效剂量700倍,观察半月,小鼠精神状态、活动、食欲正常,未发现小鼠任何不良反应、腹泻及死亡现象。尸检心、肺、肝颜色正常,无急性病理改变,该受试物毒性甚小。
表11:停药后小鼠血糖值实验观察
    蒜糖醇(allitol)组(4mg/kg)血糖值     蒜糖醇(allitol)组(3mg/kg)血糖值
  编号     停药时   停药35天 停药90天     停药时 停药35天     停药90天
    1     5.9     6.7     5.8     5.8     6.6     6.2
    2     8.0     6.5     6.8     7.1     5.6     5.4
    3     6.7     5.6     6.3     6.8     6.4     8.9
    4     6.1     6.3     6.0     7.1     7.1     6.8
    5     6.2     6.3     6.7     28     *
    6     7.9     7.3     6.4     8.8     8.6     5.6
    7     7.8     6.6     5.6     26.5     *
    8     7.4     7.7     6.5     5.3     5.7     6.8
    9     15.9     8.3     6.3     13.7     7.1     6.2
    10     28     11.8     7.6     7.8     9.5     5.6
“*”为停药期间小鼠死亡
本发明对蒜糖醇(allitol)治疗糖尿病作用进行了动物实验,实验结果蒜糖醇(allitol)具有以下特点:
1、蒜糖醇(allitol)不同于一般降血糖药物,降糖过程缓慢平稳,即使大量服用也不会发生低血糖危险,服用安全。糖尿病小鼠经连续服用六个月后,餐后血糖值逐渐趋于正常,糖尿病症状逐渐消除,有效率为70%以上。且停药后未见小鼠血糖值反弹。
2、服用蒜糖醇(allitol)的糖尿病小鼠精神饱满,活跃、体重正常增加,生长良好,与对照组相比,生活质量显著提高。不服药的糖尿病小鼠,精神萎靡,生长期的小鼠体重增加缓慢,生长受到显著抑制,生活质量明显降低。
3、对照小鼠在患糖尿病后,前、后期都有较多小鼠死于糖尿病引起的急性和慢性并发症(死亡率为80%以上),而服用蒜糖醇(allitol)小鼠死亡率大大降低(死亡率为10%以下),表明蒜糖醇(allitol)能防治由糖尿病引起的并发症发生。
4、长期喂养,小鼠无中毒现象和不良反应。
5、蒜糖醇(allitol)不同于目前普通的控制血糖和降低血糖的药物,其对患糖尿病且长期处于高血糖状态中的小鼠生长和生活质量的提高有明显作用,对糖尿病引起的并发症有明显防治作用。

Claims (1)

1、蒜糖醇作为制备治疗糖尿病药物中的用途。
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