CN1281628C - 一种木耳多糖的提取方法 - Google Patents

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Abstract

一种木耳多糖的提取方法,它是以木耳为原料,采用醇提、微波或超声波处理,并结合复合酶法酶解,将木耳中的多糖物质充分溶解出来,提高了木耳多糖的得率,保持了多糖物质的生物活性,有利于人体的吸收。同时,利用木耳多糖加工过程中剩余的残渣提取碱性木耳多糖,最大限度地利用了原料、节约了资源,从而降低了成本。传统的提取方法多采用单纯酸法或碱法,容易破坏多糖的结构,影响多糖的吸收和利用。本发明的方法对多糖结构破坏小,多糖得率高,能最大程度地发挥出抗肿瘤、降血压、降血脂、降血糖等功效。

Description

一种木耳多糖的提取方法
技术领域  本发明涉及一种木耳多糖的提取方法。
背景技术  木耳营养丰富,食味鲜美,不但是营养价值很高的食用菌,而且是药用价值较高的药用菌,是世界公认的保健品。随着木耳栽培业的迅速发展及应用范围的拓宽,对木耳的营养成分以及在医疗保健作用方面的研究也在逐步深入。
木耳提取生物活性多糖可作为口服液和其它功能性食品的有效成分。传统木耳多糖提取采用水体系,木耳细胞粗大,壁厚,多糖难以从胞内扩散出来。而酸、碱法容易破坏多糖的结构,降低其生物利用率。本文采用多种酶协同作用于木耳真菌细胞壁构成物质,使得木耳真菌细胞壁破裂,促进多糖的溶出,提高了多糖的提取率。为木耳保健食品的开发提供一条新的工艺路线和方法。本方法采用酶法提取,使提取率大为提高,这对于木耳的综合开发利用及提高其经济价值具有实际意义。
发明内容  本发明的目的旨在提供一种以木耳为原料,利用酶法分别采用不同的工艺条件,提取活性多糖的新方法。
一、原料及处理
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳进行粉碎,粒度控制在20目以下。
用2~10倍乙醇于60~100℃对粉碎后的原料处理1~4小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作1~3次。
二、木耳多糖的提取工艺
1.预处理:
①将20~50倍的水与经过处理后的木耳混匀,静置4小时,让其充分复水。
或②微波处理
将20~50倍的水与经过处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理1~15分钟。取出后加入原料干重10~40倍的水,再次用微波2450MHz下处理1~15分钟。重复此操作2~6次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。
或③超声波处理
将20~50倍的水与经过处理后的木耳混匀,经超声波27KHz下处理1~15分钟。取出后加入原料干重10~40倍的水,再次用超声波27KHz下处理1~15分钟。重复此操作2~6次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。
2.酶解、提取:
将上述合并后的滤液加入适量的水(不经物理波处理的则直接加入水),使混合液的重量达到原料干重的50倍,调节其pH值至3~7.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至40~60℃,加入果胶酶(100万u/ml)0~2.0%、纤维素酶(45万u/g)0~2.0%和木瓜蛋白酶(100万u/g)0~2.0%,酶用量按原料干重计算,开动搅拌器混匀后保持酶解0.5~3小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至70~100℃,保持1~4小时。
3.粗滤及精滤:
将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。
4.后处理:
将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。
5.精制:
将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/8~1/2,得木耳多糖粗品。然后加入浓缩液体积1~5倍75%~100%的乙醇,于2~5℃醇沉2~20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
三、下脚料的利用
将上述提取过程中产生出来的木耳残渣收集起来,用碱法提取出其中的水不溶性木耳多糖。方法如下:
1.原料:
收集上述提取过程中产生的木耳滤渣,称重备用。
2.碱解:
取滤渣重10~50倍的水,用20%NaOH溶液调节酸碱度,使其初始pH值为7~12,再加入木耳滤渣,于50~95℃下碱解1~5小时。然后离心,分离出滤渣,收集上清液。重复此操作2~5次。
3.提纯:
将收集后得到的上清液合并,用1mol/LHCl调节其pH值至5~8,再将其减压浓缩至原体积的1/8~1/2,得碱性木耳多糖粗品。
4.纯化:
将上述多糖粗品加入浓缩液体积1~5倍75%~100%的乙醇,于2~5℃醇沉2~20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得碱性木耳多糖纯品。
本发明具有如下优点:
1.将木耳中不同种类的多糖提取、浓缩、富集起来,使制品最大程度地发挥出抗肿瘤、降血压、降血脂、降血糖等功效。
2.将传统水提法与现代生物技术相结合,运用复合酶使细胞壁破碎,从而使细胞内的多糖能够充分溶出,既提高了对原料的利用程度,降低了生产成本。
3.在提取过程中引入了微波萃取工艺和超声波萃取方法,简化了提取工艺,提高了多糖得率,缩短了提取时间,减小了由于长时间加热而引起的对其活性成分的破坏。
4.在酶法提取木耳多糖之后,用碱法提取废渣中的碱溶性木耳多糖,充分利用了原料,节约了生产成本。
具体实施方式
例1
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用20公斤乙醇于60℃对粉碎后的原料处理4小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作3次。将500公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理15分钟。取出后加入400公斤的水,再次用微波2450MHz下处理15分钟。重复此操作2次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的的量达到500公斤,调节其pH值至3.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至40℃,加入果胶酶(100万u/ml)200克(酶用量按原料干重计算),开动搅拌器混匀后保持酶解3小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至100℃,保持1小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/5,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积5倍75%的乙醇,于2℃醇沉20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例2
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用50公斤乙醇于100℃对粉碎后的原料处理1小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作2次。将200公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理5分钟。取出后加入300公斤的水,再次用微波2450MHz下处理5分钟。重复此操作2次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的的量达到500公斤,调节其pH值至4.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至60℃,加入纤维素酶(45万u/g)200克,开动搅拌器混匀后酶解0.5小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至90℃,保持2小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/2,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积1倍100%的乙醇,于3℃醇沉15小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例3
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用100公斤乙醇于100℃对粉碎后的原料处理2小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作1次。将500公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理10分钟。取出后加入400公斤的水,再次用微波2450MHz下处理10分钟。重复此操作2次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至7.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至60℃,加入木瓜蛋白酶(100万u/g)200克,酶用量按原料干重计算,开动搅拌器混匀后保持酶解3小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至100℃,保持4小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/2,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积5倍75%的乙醇,于5℃醇沉20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例4
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用100公斤乙醇于100℃对粉碎后的原料处理1小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作1次。将500公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理1分钟。取出后加入400公斤的水,再次用微波2450MHz下处理1分钟。重复此操作6次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至4.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至40℃,加入果胶酶(100万u/ml)200克和纤维素酶(45万u/g)100克,开动搅拌器混匀后保持酶解3小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至100℃,保持1小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/8,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积5倍75%的乙醇,于2℃醇沉20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例5
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用500公斤乙醇于80℃对粉碎后的原料处理3小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作2次。将400公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理10分钟。取出后加入200公斤的水,再次用微波2450MHz下处理10分钟。重复此操作4次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至5.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至55℃,加入果胶酶(100万u/ml)100克和木瓜蛋白酶(100万u/g)200克,开动搅拌器混匀后保持酶解2小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至80℃,保持3小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/5,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积4倍95%的乙醇,于4℃醇沉10小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例6
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用20公斤乙醇于100℃对粉碎后的原料处理4小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作3次。将200公斤水与经过处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理15分钟。取出后加入100公斤的水,再次用微波2450MHz下处理15分钟。重复此操作6次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至7.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至60℃,加入纤维素酶(45万u/g)200克和木瓜蛋白酶(100万u/g)200克,开动搅拌器混匀后保持酶解0.5小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至70℃,保持4小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/8,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积5倍80%的乙醇,于2℃醇沉20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例7
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用50公斤乙醇于70℃对粉碎后的原料处理4小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作3次。将200公斤水与经过处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理5分钟。取出后加入100公斤的水,再次用微波2450MHz下处理5分钟。重复此操作3次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至5.0,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至50℃,加入果胶酶(100万u/ml)150克、纤维素酶(45万u/g)90克和木瓜蛋白酶(100万u/g)200克,开动搅拌器混匀后保持酶解1.5小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至90℃,保持1小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/8,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积4倍90%的乙醇,于4℃醇沉15小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例8
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用20公斤乙醇于60℃对粉碎后的原料处理4小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作3次。将500公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经超声波27KHz下处理15分钟。取出后加入400公斤的水,再次用超声波27KHz下处理15分钟。重复此操作2次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至3.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至40℃,加入果胶酶(100万u/ml)200克,开动搅拌器混匀后保持酶解3小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至100℃,保持1小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/5,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积5倍75%的乙醇,于2℃醇沉20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例9
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用50公斤乙醇于100℃对粉碎后的原料处理1小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作2次。将200公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理5分钟。取出后加入300公斤的水,再次用微波2450MHz下处理5分钟。重复此操作2次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至4.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至60℃,加入纤维素酶(45万u/g)200克,开动搅拌器混匀后保持酶解0.5小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至90℃,保持2小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/2,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积1倍100%的乙醇,于3℃醇沉15小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例10
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用100公斤乙醇于100℃对粉碎后的原料处理2小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作1次。将500公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经超声波27KHz下处理10分钟。取出后加入400公斤的水,再次用超声波27KHz下处理10分钟。重复此操作2次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至7.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至60℃,加入木瓜蛋白酶(100万u/g)200克,开动搅拌器混匀后保持酶解3小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至100℃,保持4小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后得到的清液通过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/2,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积5倍75%的乙醇,于5℃醇沉20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例11
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用100公斤乙醇于100℃对粉碎后的原料处理1小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作1次。将500公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经超声波27KHz下处理1分钟。取出后加入400公斤的水,再次用超声波27KHz下处理1分钟。重复此操作6次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至4.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至40℃,加入果胶酶(100万u/ml)200克和纤维素酶(45万u/g)100克,开动搅拌器混匀后保持酶解3小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至100℃,保持1小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/8,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积5倍75%的乙醇,于2℃醇沉20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例12
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用50公斤乙醇于80℃对粉碎后的原料处理3小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作2次。将400公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经超声波27KHz下处理10分钟。取出后加入200公斤的水,再次用超声波27KHz下处理10分钟。重复此操作4次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至5.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至55℃,加入果胶酶(100万u/ml)100克和木瓜蛋白酶(100万u/g)200克,开动搅拌器混匀后保持酶解2小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至80℃,保持3小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/5,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积4倍95%的乙醇,于4℃醇沉10小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例13
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用20公斤乙醇于100℃对粉碎后的原料处理4小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作3次。将200公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经超声波27KHz下处理15分钟。取出后加入100公斤的水,再次用超声波27KHz下处理15分钟。重复此操作6次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至7.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至60℃,加入纤维素酶(45万u/g)200克和木瓜蛋白酶(100万u/g)200克,开动搅拌器混匀后保持酶解0.5小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至70℃,保持4小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/8,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积5倍80%的乙醇,于2℃醇沉20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例14
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质。将挑选后的干燥木耳10公斤进行粉碎,粒度控制在20目以下。然后用50公斤乙醇于70℃对粉碎后的原料处理4小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失。将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇。重复操作3次。将200公斤的水与经过处理后的木耳混匀,经超声波27KHz下处理5分钟。取出后加入100公斤的水,再次用超声波27KHz下处理5分钟。重复此操作3次。然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液。将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到500公斤,调节其pH值至5.0,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至50℃,加入果胶酶(100万u/ml)150克、纤维素酶(45万u/g)90克和木瓜蛋白酶(100万u/g)200克,开动搅拌器混匀后保持酶解1.5小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至90℃,保持1小时,然后将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提。提取液打入贮罐贮存待用。将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用。将酶解后的混合物抽滤,除去其中的不溶物质,收集废渣待进一步利用。将抽滤之后的滤液通过硅藻土过滤,然后将过滤后的清液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素。将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/8,得木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积4倍90%的乙醇,于4℃醇沉15小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
例15
收集上述提取过程中产生的木耳滤渣10公斤,加入100公斤的水,用20%NaOH溶液调节酸碱度,使其初始pH值为7,再加入木耳滤渣,于70℃下碱解1小时。然后离心,分离出滤渣,收集上清液。重复此操作3次。将收集后得到的上清液合并,用1mol/LHCl调节其pH值至7,再将其减压浓缩至原体积的1/5,得碱性木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积3倍90%的乙醇,于3℃醇沉10小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得碱性木耳多糖纯品。
例16
收集上述提取过程中产生的木耳滤渣10公斤,加入300公斤的水,用20%NaOH溶液调节酸碱度,使其初始pH值为12,再加入木耳滤渣,于95℃下碱解3小时。然后离心,分离出滤渣,收集上清液。重复此操作5次。将收集后得到的上清液合并,用1mol/LHCl调节其pH值至8,再将其减压浓缩至原体积的1/2,得碱性木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积5倍100%的乙醇,于5℃醇沉20小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得碱性木耳多糖纯品。
例17
收集上述提取过程中产生的木耳滤渣10公斤,加入500公斤的水,用20%NaOH溶液调节酸碱度,使其初始pH值为7,再加入木耳滤渣,于50℃下碱解5小时。然后离心,分离出滤渣,收集上清液。重复此操作2次。将收集后得到的上清液合并,用1mol/LHCl调节其pH值至5,再将其减压浓缩至原体积的1/8,得碱性木耳多糖粗品。再将上述多糖粗品加入浓缩液体积1倍75%的乙醇,于2℃醇沉2小时。将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性。粉碎干燥后多糖至200目以下,得碱性木耳多糖纯品。

Claims (3)

1.一种木耳多糖的提取方法,其特征在于:
①原料及处理
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质,将挑选后的干燥木耳进行粉碎,粒度控制在20目以下,
用2~10倍乙醇于60~100℃对粉碎后的原料处理1~4小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失,将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇,重复操作1~3次,得到除醇后的原料,
②提取木耳多糖
a.预处理:
将20~50倍的水与处理后的木耳混匀,经微波2450MHz下处理1~15分钟,取出后加入原料干重10~40倍的水,再次用微波2450MHz下处理1~15分钟,重复此操作2~6次,然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液,
b.酶解、提取:
将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到原料干重的50倍,调节其pH值至3~7.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至40~60℃,按原料干重计算,加入酶活100万u/ml的果胶酶0~2.0%、酶活45万u/g的纤维素酶0~2.0%和酶活100万u/g的木瓜蛋白酶0~2.0%,开动搅拌器混匀后保持酶解0.5~3小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至70~100℃,保持1~4小时,
c.粗滤及精滤:
将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提,提取液打入贮罐贮存待用,将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用,
d.后处理:
将经硅藻土过滤后的提取液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素,
e.提纯:
将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/8~1/2,得木耳多糖粗品,
③纯化
将上述多糖粗品加入浓缩液体积1~5倍75%~100%的乙醇,于2~5℃醇沉2~20小时,将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性,粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
2.一种木耳多糖的提取方法,其特征在于:
①原料及处理
取干燥木耳,剔除发霉、变质等不合格木耳及木屑、砂石、头发等杂质,将挑选后的干燥木耳进行粉碎,粒度控制在20目以下,
用2~10倍乙醇于60~100℃对粉碎后的原料处理1~4小时,保持过程中乙醇浓度,防止多糖损失,将乙醇处理后的原料抽滤晾干,除去残留乙醇,重复操作1~3次,得到除醇后的原料
②提取木耳多糖
a.预处理:
将20~50倍的水与经过处理后的木耳混匀,经超声波27KHz下处理1~15分钟,取出后加入原料干重10~40倍的水,再次用超声波27KHz下处理1~15分钟,重复此操作2~6次,然后离心分离,分别收集上清液和滤渣,并合并滤液,
b.酶解、提取:
将上述合并后的滤液加入适量的水,使混合液的重量达到原料干重的50倍,调节其pH值至3~7.5,然后将上述的滤渣或除醇后的原料加入混合液中,加热至40~60℃,按原料干重计算,加入酶活100万u/ml的果胶酶0~2.0%、酶活45万u/g的纤维素酶0~2.0%和酶活100万u/g的木瓜蛋白酶0~2.0%,开动搅拌器混匀后保持酶解0.5~3小时,然后将原料渣及酶解液直接升温至70~100℃,保持1~4小时,
c.粗滤及精滤:
将原料渣及提取液冷却至室温后,经筛网过滤,分离出的木耳渣用于二次酶解和水提,提取液打入贮罐贮存待用,将粗滤后的提取液经硅藻土过滤后打入贮罐贮存待用,
d.后处理:
将经硅藻土过滤后的提取液过AB-8大孔吸附树脂柱,以进一步去除溶液中的色素,
e.提纯:
将AB-8大孔吸附树脂柱处理后的提取液减压蒸馏、浓缩至原体积的1/8~1/2,得木耳多糖粗品,
③纯化
将上述多糖粗品加入浓缩液体积1~5倍75%~100%的乙醇,于2~5℃醇沉2~20小时,将醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性,粉碎干燥后多糖至200目以下,得木耳多糖纯品。
3.根据权利要求1或2所述一种木耳下脚料中多糖的提取方法,其特征在于:
①原料:收集上述提取过程中产生的木耳滤渣,称重备用,
②碱解:取滤渣重10~50倍的水,用20%NaOH溶液调节酸碱度,使其初始pH值为7~12,再加入木耳滤渣,于50~95℃下碱解1~5小时,然后离心,分离出滤渣,收集上清液,重复此操作2~5次,
③提纯:将收集后得到的上清液合并,用1mol/LHCl调节其pH值至5~8,再将其减压浓缩至原体积的1/8~1/2,得碱性木耳多糖粗品,
④纯化:将上述多糖粗品加入浓缩液体积1~5倍75%~100%的乙醇,于2~5℃醇沉2~20小时,醇沉后溶液进行过滤、干燥,温度低于60℃,防止多糖变性,粉碎干燥后多糖至200目以下,得碱性木耳多糖纯品。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100543039C (zh) * 2006-04-14 2009-09-23 中国科学院过程工程研究所 一种龙眼、荔枝多糖超声强化提取及其纯化方法
CN1970578B (zh) * 2006-11-30 2010-05-12 华南理工大学 豆渣中水溶性大豆多糖的微波提取方法
CN101092435B (zh) * 2007-07-16 2010-06-09 北京梦狐宇通竹纤维研究开发中心 生物质有机组分的分离工艺方法
CN101134783B (zh) * 2007-10-19 2010-06-16 大连工业大学 一种海带多糖的制备方法
CN101731749B (zh) * 2008-11-05 2012-06-13 湖北中烟工业有限责任公司 从菊料天然植物花中提取烟用香料的超声酶解提取法
CN101812137B (zh) * 2009-12-28 2014-02-19 大兴安岭科丽尔生物工程有限责任公司 一种富集纯化黑木耳中木耳多糖的方法
CN102100354A (zh) * 2010-12-18 2011-06-22 胡保军 食用菌木耳凝胶的提炼工艺
CN102225970B (zh) * 2011-06-07 2012-12-19 韩金光 翻白草多糖提取方法
CN102321189B (zh) * 2011-10-24 2012-11-14 周伯扬 一种木耳多糖的综合提取工艺
CN102391387B (zh) * 2011-11-07 2013-02-27 沈阳科思高科技有限公司 高等植物或食药用真菌类中活性多糖的微波化学提取方法
TWI496586B (zh) * 2012-03-14 2015-08-21 Univ Asia 改質複合微粒、其製造方法及其防曬配方
CN102827302B (zh) * 2012-09-07 2014-12-10 龙海市颖欣农业科技有限公司 一种木耳多糖的制备方法
CN102936294A (zh) * 2012-12-10 2013-02-20 青岛海尔软件有限公司 一种金柑多糖的提取方法
CN103130910B (zh) * 2013-03-21 2015-05-27 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种木耳多糖烟用添加剂的制备及其在卷烟中的应用
CN103709262B (zh) * 2013-12-02 2016-02-10 沃太能源南通有限公司 一种高纯度的木耳多糖的提取方法
CN104072627B (zh) * 2014-06-04 2016-07-06 沈阳化工大学 一种独角莲多糖提取物的制备方法
CN104072628B (zh) * 2014-06-10 2016-08-24 西北师范大学 复合酶法提取黄参多糖的方法
CN104293857A (zh) * 2014-09-22 2015-01-21 山东效峰生物科技股份有限公司 一种制备杏鲍菇低分子量多糖的方法
CN104497163A (zh) * 2015-01-13 2015-04-08 湖南中烟工业有限责任公司 一种库尔勒香梨多糖的提取方法及其在卷烟中的应用方法
CN105669295A (zh) * 2015-12-31 2016-06-15 广西扬桂生物科技有限公司 一种木耳液体培养基添加剂
CN105524186B (zh) * 2016-02-21 2018-01-30 张桂娟 一种龙牙楤木芽多糖的制备方法
CN106478838B (zh) * 2016-12-02 2019-04-23 湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所 一种高纯度食用菌多糖的提取方法
CN106832032A (zh) * 2017-01-23 2017-06-13 嵊州市派特普科技开发有限公司 一种提取银耳多糖和银耳蛋白的方法
CN108084292B (zh) * 2018-02-06 2020-06-16 重庆医科大学附属永川医院 一种从黑木耳中提取治疗老年性高血脂多糖的方法
CN109336991A (zh) * 2018-11-05 2019-02-15 福建拓天生物科技有限公司 一种猴头菇多糖的提取方法
CN110156908A (zh) * 2019-06-14 2019-08-23 大连卓兴科技发展有限公司 一种黑木耳多糖的提取方法

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