CN102827302B - 一种木耳多糖的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种木耳多糖的制备方法。该方法以木耳为原料，通过高温蒸煮，采用聚乙二醇/硫酸铵双水相萃取和中空纤维膜分离相结合的方法，进行木耳多糖的提取；提取后的多糖通过喷雾干燥制得固体粉末状木耳多糖。采用此方法在得到高纯度可溶性木耳多糖的同时，由于将膜分离与双水相萃取结合，大大加快萃取传质速率，利用膜将双水相体系隔开，避免由于双水相体系界面张力小而产生的乳化作用，同时还大大减少了有机溶剂的用量。

Description

一种木耳多糖的制备方法
技术领域
本发明属于食品加工领域，具体涉及一种木耳多糖的制备方法。
背景技术
木耳含酸性粘多糖，由L-岩藻糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和葡萄糖醛酸等单糖组成，呈灰白色丝状。木耳多糖对高血糖有防治作用。能明显降低高血脂、高胆固醇引起的高胆固醇血症的形成；木耳多糖对机体免疫功能有促进作用，包括增加脾指数、半倍溶血值和E玫瑰花结形成率．促进巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞转化率，增强机体细胞免疫和体液免疫功能，具有显著的抗肿瘤活性；木耳多糖具有抗衰老活性、增强核酸和蛋白质代谢的作用。能增加肝微粒体含量，促进血清蛋白质的生物合成。增强机体抗病能力、对机体损伤有保护作用。
常用的提取多糖方法有以下几种：
（1）热水提取法：遵循相似相容原则，多糖是极性大分子化合物，应选择水醇等极性强的溶剂，多糖在热水中的提取效果较好。
（2）超声波提取法：
超声波提取技术是近年来在多糖提取方面较为成熟的手段，超声波是一种弹性机械振动波，能破坏细胞，使溶媒渗透到细胞中，从而加速多糖溶解，以提高其浸出率。
（3）微波提取法：在微波场中，不同物质的介电常数、比热、形状及含水量的不同，会导致各种物质吸收微波能的能力不同，其产生的热能及传递给周围环境的热能也不同，这种差异使得提取体系中的某些成分或基本物质的某些区域被选择性加热，从而使被提取物质从基体或体系中分离出来，进入到介电常数小、微波吸收能力差的溶剂中。
（4）酶辅助提取法：根据植物药材细胞壁的构成，利用酶反应所具有的极高催化活性和高度专一性等特点，选择相应的酶，将细胞壁的组成成分充分暴露出来，分解，混悬或胶溶于溶剂中，从而使植物细胞内有效成分更容易溶解、扩散。
本发明利用双水相体系进行木耳多糖的提取，该双水相体系是指某些高聚物之间或高聚物与无机盐之间在水中以适当的浓度溶解会形成互不相容的两水相或多水相系统。是利用物质在互不相容的两个水相之间分配系数的差异实现分离的分离方法。目前还没有发现这方面的报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种木耳多糖的制备方法。该方法采用高压蒸煮后，双水相萃取结合膜分离技术提取木耳多糖，提取的木耳多糖活性高，提取率高，具有较大应用价值。
为解决上述技术问题，本发明所采用技术方案是：
1.一种木耳多糖的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）原料预处理
将干木耳在清水中浸泡12-14h；
（2）高温蒸煮
将处理后的木耳加入水进行高温蒸煮，蒸煮温度为100-120℃，蒸煮时间为45-50min，制得木耳多糖粗提取液，其中木耳与水的重量比为1:10-1:12；
（3）双水相体系的配制
配制双水相体系，其中含有质量分数为15％-25％的相对分子质量为4000-6000的聚乙二醇溶液和质量分数为14％-17％的硫酸铵，将该双水相体系振荡混合，静置分相；
（4）将所述木耳多糖粗提取液过滤后加入到上述双水相体系中进行离心分离，静置分相；
（5）将富含木耳多糖的下相溶液进行超滤膜分离，分离后将截留物进行喷雾干燥，制成固体干燥粉末状成品。
进一步的，步骤（4）中，木耳多糖粗提取液与双水相总体积比为0.19-0.22。
进一步的，步骤（5）中，所用膜为70KD的中空纤维膜，超滤膜分离的条件为：压力为0.12-0.15MPa，超滤温度为25-30℃。
进一步的，步骤（5）中，所述喷雾干燥的条件为：进风温度为170-180℃，出风温度为70-80℃。
本发明具有以下优点：
1．随温度的增加木耳多糖的溶出率也会增加，采用高温蒸煮技术有利于木耳多糖的溶出。
2．在双水相体系中水分都占很大比例（85-95％），活性多糖在这种环境中不会失活，但可以不同比例分配于两相，且过程易于放大，对工业生产尤为有力。
3．双水相体系易产生乳化问题，将膜分离与双水相萃取结合，可以避免由于双水相体系易乳化问题及加快萃取速率。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。但这些实施例仅限于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。
本发明实施例中使用的木耳为产自福建地区的木耳，其他品种的木耳均适用于本发明。
实施例1
1.一种木耳多糖的制备方法，该方法包括以下步骤：
（1）原料预处理
将干木耳在清水中浸泡12h；
（2）高温蒸煮
将处理后的木耳加入水进行高温蒸煮，蒸煮温度为100℃，蒸煮时间为45min，制得木耳多糖粗提取液，其中木耳与水的重量比为1:10；
（3）双水相体系的配制
双水相体系总质量为10.0g，其中含有质量分数为15％的相对分子质量为4000的聚乙二醇溶液和质量分数为14％的硫酸铵，将该双水相体系振荡混合，静置分相；
（4）将所述木耳多糖粗提取液过滤后加入到上述双水相体系中进行离心分离，静置分相；木耳多糖粗提取液与双水相总体积比为0.19。
（5）将富含木耳多糖的下相溶液进行超滤膜分离，分离后将截留物进行喷雾干燥，制成固体干燥粉末状成品。所用膜为70KD的中空纤维膜，超滤膜分离的条件为：压力为0.12MPa,超滤温度为25℃。所述喷雾干燥的条件为：进风温度为170℃，出风温度为70℃。
实施例2
1.一种木耳多糖的制备方法，该方法包括以下步骤：
（1）原料预处理
将干木耳在清水中浸泡12.5h；
（2）高温蒸煮
将处理后的木耳加入水进行高温蒸煮，蒸煮温度为105℃，蒸煮时间为47min，制得木耳多糖粗提取液，其中木耳与水的重量比为1:11；
（3）双水相体系的配制
双水相体系总质量为10.0g，其中含有质量分数为16％的相对分子质量为5000的聚乙二醇溶液和质量分数为15％的硫酸铵，将该双水相体系振荡混合，静置分相；
（4）将所述木耳多糖粗提取液过滤后加入到上述双水相体系中进行离心分离，静置分相；木耳多糖粗提取液与双水相总体积比为0.20。
（5）将富含木耳多糖的下相溶液进行超滤膜分离，分离后将截留物进行喷雾干燥，制成固体干燥粉末状成品。所用膜为70KD的中空纤维膜，超滤膜分离的条件为：压力为0.13MPa，超滤温度为28℃。所述喷雾干燥的条件为：进风温度为172℃，出风温度为74℃。
实施例3
1.一种木耳多糖的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）原料预处理
将干木耳在清水中浸泡13h；
（2）高温蒸煮
将处理后的木耳加入水进行高温蒸煮，蒸煮温度为110℃，蒸煮时间为50min，制得木耳多糖粗提取液，其中木耳与水的重量比为1:12；
（3）双水相体系的配制
双水相体系总质量为10.0g，其中含有质量分数为25％的相对分子质量为6000的聚乙二醇溶液和质量分数为17％的硫酸铵，将该双水相体系振荡混合，静置分相；
（4）将所述木耳多糖粗提取液过滤后加入到上述双水相体系中进行离心分离，静置分相；木耳多糖粗提取液与双水相总体积比为0.21。
（5）将富含木耳多糖的下相溶液进行超滤膜分离，分离后将截留物进行喷雾干燥，制成固体干燥粉末状成品。所用膜为70KD的中空纤维膜，超滤膜分离的条件为：压力为0.14MPa,超滤温度为28℃。所述喷雾干燥的条件为：进风温度为175℃，出风温度为75℃。
实施例4
1.一种木耳多糖的制备方法，该方法包括以下步骤：
（1）原料预处理
将干木耳在清水中浸泡14h；
（2）高温蒸煮
将处理后的木耳加入水进行高温蒸煮，蒸煮温度为120℃，蒸煮时间为50min，制得木耳多糖粗提取液，其中木耳与水的重量比为1:12；
（3）双水相体系的配制
双水相体系总质量为10.0g，其中含有质量分数为20％的相对分子质量为6000的聚乙二醇溶液和质量分数为17％的硫酸铵，将该双水相体系振荡混合，静置分相；
（4）将所述木耳多糖粗提取液过滤后加入到上述双水相体系中进行离心分离，静置分相；木耳多糖粗提取液与双水相总体积比为0.22。
（5）将富含木耳多糖的下相溶液进行超滤膜分离，分离后将截留物进行喷雾干燥，制成固体干燥粉末状成品。所用膜为70KD的中空纤维膜，超滤膜分离的条件为：压力为0.15MPa,超滤温度为30℃。所述喷雾干燥的条件为：进风温度为180℃，出风温度为80℃。
按如下方法测定实施例制得的木耳多糖的得率
标准曲线的绘制
准确称取经105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品0.1g，置于100.0ml容量瓶中，用蒸馏水定容。用移液管分别吸取配制好葡萄糖标准溶液0.2、0.4、0.5、0.6、0.8、1.0ml，分别置于具塞比色管中，加入2.0ml蒸馏水，1.0ml苯酚溶液，立即滴加5.0ml浓H2S04，用蒸馏水稀释至10.0ml，室温下放置5min，于100℃恒温水浴中加热15min，置于冷水中冷却至室温，以空白为对照，于490nm处测定吸光度，得回归线线方程。
各取1.0ml木耳多糖稀释液于10.0ml比色管，按上述方法测定吸光度。结果如下：
 实施例1  实施例2  实施例3  实施例4
  多糖得率   35.4％   35.6％   36.2％   36.5％
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。

Claims (3)

1.一种木耳多糖的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）原料预处理
将干木耳在清水中浸泡12-14h；
（2）高温蒸煮
将处理后的木耳加入水进行高温蒸煮，蒸煮温度为100-120℃，蒸煮时间为45-50min，制得木耳多糖粗提取液，其中木耳与水的重量比为1:10-1:12；
（3）双水相体系的配制
配制双水相体系，其中含有质量分数为15%-25%的相对分子质量为4000-6000的聚乙二醇溶液和质量分数为14%-17%的硫酸铵，将该双水相体系振荡混合，静置分相；
（4）将所述木耳多糖粗提取液过滤后加入到上述双水相体系中进行离心分离，静置分相；
（5）将富含木耳多糖的下相溶液进行超滤膜分离，分离后将截留物进行喷雾干燥，制成固体干燥粉末状成品，其中，所述超滤膜为70KD的中空纤维膜，超滤膜分离的条件为：压力为0.12-0.15MPa，超滤温度为25-30℃。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，木耳多糖粗提取液与双水相总体积比为0.19-0.22。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（5）中，所述喷雾干燥的条件为：进风温度为170-180℃，出风温度为70-80℃。
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