CN1255637A - 抗凝血剂及血液检查方法 - Google Patents

抗凝血剂及血液检查方法 Download PDF

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CN1255637A CN99122385.3A CN99122385A CN1255637A CN 1255637 A CN1255637 A CN 1255637A CN 99122385 A CN99122385 A CN 99122385A CN 1255637 A CN1255637 A CN 1255637A
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Abstract

本发明提供了可以进行血细胞计数检查和血液凝固检查或者可以进行血细胞计数检查和生化检查两种检查的抗凝血剂以及使用该抗凝血剂的血液检查方法。血细胞计数检查用的抗凝血剂含有选自茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种抗血小板剂中的至少2种抗血小板剂以及柠檬酸或其碱金属盐或者它们的混合物。

Description

抗凝血剂及血液检查方法
本发明是关于抗凝血剂及血液检查方法，更具体地说，本发明是关于使用抗血小板剂合剂的抗凝血剂及血液检查方法。
目前，在血液检查中是根据检查的目的分别使用各种不同的抗凝血剂。例如，在血细胞计数检查中通常使用EDTA盐，在血液凝固检查中一般使用柠檬酸盐。另外，在生化检查中不使用抗凝血剂，或者使用肝素。
如上所述，抗凝血剂应区分使用，这是因为使用每一种抗疑血剂时都有一些检查项目会产生不利的影响。例如，使用EDTA盐进行血液凝固检查时，有时不能测定凝固时间，或者凝固时间延长。另外，使用柠檬酸盐进行血细胞计数检查时，血小板凝集，血小板数量减少，与此同时从表面上看白细胞数量增加。因此，如果不根据检查的种类选择适当的抗凝血剂，就不能得到正确的检查结果，进而可能导致误诊。
另外，即使在使用EDTA盐的场合，对于一部分特异的样品来说也可能发生血小板凝集，从表面上看血小板数量减少，导致假性血小板减少，在血细胞计数检查中并不是没有问题。
在进行血液检查时，为了一次采血可以检查多个项目，通常的作法是将血液采集到多个装有不同的抗凝血剂的采血管(每一根管约2-5ml)中。但是，这种作法采血量较多，费时费事，而且给被采血的患者带来很大负担。
另外，对于每一个检查目的来说需要准备不同抗凝血剂的采血管，致使检查费用增大。而且，由于采血管增多，检测样品可能会混淆。
因此，希望研制可以用一根采血管进行多项血液检查的抗凝血剂。
为了提供简便的检验方法并减轻患者的负担，换句话说，为了用1个样品进行血细胞计数检查和血液凝固检查两种检查或者进行血细胞计数检查和生化检查两种检查，本发明人对抗凝血剂进行了深入的研究，将以往在血小板活化的测定或肝素治疗的监测时作为抗凝血剂使用的、由茶碱、腺苷和双嘧达莫组成的抗血小板剂以及柠檬酸或其碱金属盐构成、被称为CTAD的抗凝血剂转而试用于白细胞或红细胞的计数测定等完全不同的目的，结果意外地发现，对于测定来说并没有产生通常预想的各种不利影响，可以进行白细胞和红细胞的计数测定，从而完成了本发明。
另外，本发明人还发现，将凝血酶抑制剂与上述抗血小板剂组合使用，也可以进行血细胞计数检查和生化检查的任一种检查，从而完成了本发明。
根据本发明，提供了一种血细胞计数检查用的抗凝血剂，它含有选自茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种抗血小板剂中的至少2种抗血小板剂以及柠檬酸或其碱金属盐或者它们的混合物。
另外，本发明提供了一种血液检查方法，该方法包括，将上述血细胞计数检查用的抗凝血剂添加到血液样品中，对选自白细胞、红细胞和血小板中的至少2种血细胞进行计数。
此外，本发明提供了一种抗凝血剂，它含有选自茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种抗血小板剂中的至少2种抗血小板剂以及凝血酶抑制剂。
再有，本发明还提供了一种血液检查方法，该方法包括，将上述血细胞计数检查用的抗凝血剂添加到血液样品中，对选自白细胞、红细胞和血小板中的至少2种血细胞进行计数。
发明的实施方式
本发明的抗凝血剂，主要含有选自茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种抗血小板剂中的至少2种抗血小板剂以及柠檬酸或其碱金属盐或者它们的混合物，或者含有上述的至少2种抗血小板剂和凝血酶抑制剂。
可以在本发明的抗凝血剂中使用的柠檬酸的碱金属盐可以举出钠盐、钾盐等，其中优先选用钠盐。
另外，所述的茶碱类可以举出下述化学式所示的化合物、其水合物、盐(钠盐、醋酸钠盐、与乙二胺、乙醇胺和异丙醇胺等的盐)以及酯等。
Figure A9912238500041
式中，R1表示低级烷基。
上述低级烷基例如可以举出甲基、乙基、丙基等1-3个碳原子的烷基，其中优先选用R1是甲基的茶碱。
所述的腺苷类可以举出由下述化学式表示的化合物、其水合物、盐(二磷酸盐、三磷酸盐、四磷酸盐等)以及酯等。
Figure A9912238500051
式中，R2表示低级亚烷基。
上述低级亚烷基例如可以举出亚甲基、亚乙基、亚丙基等1-3个碳原子的亚烷基，其中优先选用R2是亚甲基的腺苷。
所述的双嘧达莫类可以举出由下面的化学式表示的化合物、其水合物、盐(钠盐等)以及酯等。
Figure A9912238500052
式中，R3表示亚烷基。
上述亚烷基例如可以举出亚甲基、亚乙基、亚丙基、正亚丁基、叔亚丁基、正亚庚基、正亚已基等1-6个碳原子的亚烷基，其中优先选用R3是亚乙基的双嘧达莫。
凝血酶抑制剂可以是本技术领域中公知的任何一种，例如可以举出肝素(H)、硫酸软骨素(Cd)或其盐(钠盐、钾盐、与胺类的盐等)。
在本发明的抗凝血剂中，所述的抗血小板剂只要是含有选自茶碱类(T)、腺苷类(A)和双嘧达莫类(D)3种抗血小板剂中的至少2种抗血小板剂，即只要含有茶碱类和腺苷类、茶碱类和双嘧达莫类、或者腺苷类和双嘧达莫类即可，优选的是含有茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种抗血小板剂。另外，最好是含有茶碱、腺苷和潘生丁3种。茶碱类(T)、腺苷类(A)和双嘧达莫类(D)可以从每一类中只选择1种使用，也可以从每一类中选择2种以上组合使用。柠檬酸或其碱金属盐或者它们的混合物(C)可以只使用柠檬酸，或者只使用柠檬酸的碱金属盐，也可以使用二者的混合物。
在本发明的抗凝血剂中，抗血小板剂的用量必须能够充分防止血液样品中的血小板凝集、变形和粘结，柠檬酸或其碱金属盐或者它们的混合物的用量必须能够充分防止血液样品凝固。另外，凝血酶抑制剂的用量必须能够充分抑制血液样品中的凝血酶的活性。
例如，抗血小板剂与柠檬酸或其碱金属盐或者它们的混合物(C)的使用比例为0.9∶80-90∶80(重量比)，优选的是8∶80-40∶80(重量比)。另外，在下文中如果没有特别说明，所述的使用比例是指重量比。
更具体地说，对于T∶A∶C＝14∶5∶160的血液样品5ml是1.4mg∶0.5mg∶16mg。对于T∶D∶C＝28∶1∶320的血液样品5ml来说是1.4mg∶0.05mg∶16mg。对于A∶D∶C＝10∶1∶320的血液样品5ml来说是0.5mg∶0.05mg∶16mg。另外，对于5ml血液样品来说，T∶A∶D∶C＝0.3-15mg∶0.1-8mg∶0.01-0.7mg∶5-120mg，以摩尔比计T∶A∶D∶C＝15∶4∶0.2∶100。
抗血小板剂与凝血酶抑制剂的使用比例为0.05∶11-4000∶11，优选的是0.05∶11-2000∶11。
更具体地说可以举出，对于T∶A∶H＝135∶50∶1的血液样品5ml来说是0.35mg∶0.5mg∶0.01mg。对于T∶D∶H＝135∶5∶1的血液样品5ml来说是0.35mg∶0.05mg∶0.01mg。对于A∶D∶H＝50∶5∶1的血液样品5ml来说是0.5mg∶0.05mg∶0.01mg。另外，对于5ml血液样品来说T∶A∶D∶H＝0.3-15mg∶0.1-8mg∶0.01-0.7mg∶0.01-0.5mg。
此外，对于T∶A∶Cd＝14∶5∶228的血液样品5ml来说是1.4mg∶0.5mg∶22.8mg。对于T∶D∶Cd＝27∶1∶455的血液样品5ml来说是1.35mg∶0.05mg∶22.72mg。对于A∶D∶Cd＝10∶1∶445的血液样品5ml来说是0.5mg∶0.05mg∶22.75mg。另外，对于5ml血液样品来说T∶A∶D∶Cd＝0.3-15mg∶0.1-8mg∶0.01-0.7mg∶0.1-100mg。
在本发明的血液检查方法中，首先，将上述抗血小板剂和抗凝血剂或凝血酶抑制剂添加到血液样品中。这里所说的血液样品指的是从哺乳动物特别是人的末梢血液、分离性输血等中采集的血样。另外，可以向血液样品中以任意的顺序添加各成分，也可以预先将抗血小板剂和抗凝血剂或凝血酶抑制剂的混合物添加到血液样品中。再有，也可以将它们的混合物溶解在适当的溶剂中，把所得到的混合溶液分注到采集血液样品的试管中使用，也可以在分注后干燥再添加血液样品，添加时的温度没有特别的限制，例如可以是室温。
所得到的血液样品可以用于血细胞计数检查，然后离心分离，采集血浆，用于血液凝固检查或生化检查，也可以将所得到的血液试样分成两份，一份用于血细胞计数检查，另一份用于血液凝固检查或生化检查。另外，如果血液凝固检查或生化检查所使用的样品量不会影响血细胞计数检查，也可以将所得到的血液试样离心分离，采集必要量的血浆，进行血液凝固检查或生化检查，然后将剩余的血液试样搅拌，用于血细胞计数检查。其中优选的是，在血细胞计数检查之后进行血液凝固检查或生化检查，或者分别进行血细胞计数检查和血液凝固检查或生化检查。另外，血细胞计数检查、血液凝固检查和生化检查都是在室温温度下进行较为适宜，但也可以根据所使用的仪器适当进行调整。
本发明的血液检查方法中所述的白细胞计数，不是仅指总白细胞数，还包括求出其中所含的淋巴细胞、单核细胞、粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性细胞)等各种白细胞的计数值及其比例。
另外，所述的红细胞计数，不仅仅指红细胞数，还包括求出血红蛋白浓度、红细胞压积值的测定以及由这些数值计算得到的红细胞常数(平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC))、网状细胞数及其比例。
此外，所述的血小板计数，不仅仅指血小板数，还包括求出平均血小板容积和大型血小板比率等。
血细胞计数的方法可以采用手工计数法，也可以采用使用血细胞计数装置的方法。另外，血细胞计数装置有电阻式和光学式等，可以采用任一种测定原理。
所述的血液凝固检查是指血液凝固检查项目，例如测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fbg)、外因系凝固因子(II、V、VII、X)量、内因系凝固因子(VIII、IX、XI、XII)量、血栓试验(TTO)、肝促凝血酶原激酶试验(HpT)、AT-HI、PLG、α2PI、PC、FDP、D-D二聚物等中的一种以上。这些测定可以从下列公知的方法中选择适当的方法进行，即自动化法、采用人缺乏血浆补正法的PT法或APTT法、Owren血浆法、血浆法、乳胶凝集反应法、SRID法等。
血液凝固检查可以采用手工法或自动测定法。自动测定法分为测定血纤维蛋白形成时血浆的光散射增大的光散射检测方式，以及测定血纤维蛋白块形成时的血浆粘稠度变化的物理检测方式等，可以采用其中的任一方式。
所述的生化检查是指例如含氮成分检查、金属检查、血浆蛋白相关检查、胶质反应·活体色素检查、酶相关检查、脂质检查、电解质检查、糖代谢检查等采用生化方法定性或定量地检查血液中各种成分。具体地说，是指一般的生化检查项目，即测定肌酸磷酸激酶(CPK)、血液尿素氮(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酯酶(ALP)、GOT、GPT、甘油三酯(TG)、尿酸(UA)、总胆固醇(TCHO)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、淀粉酶(AMYL)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、肌酸酐(CRE)、总胆红素(TBIL)、C-反应性蛋白(CRP)等中的一种以上。这些测定可以从下列公知的方法中选择适当的方法进行，即肌磷酸基质·心肌黄酶·甲色素法、尿素酶·BCG指示剂法、乳酸基质·心肌黄酶·甲色素法、对硝基苯基磷酸基质法、尿酸酶·POD法、滴定管法以及BCG指示剂法等。生化检查只要是能够测定这些一般的生化检查项目即可，可以采用手工法和自动测定法中的任一种。
实施例
下面通过实施例说明本发明的抗凝血剂及血液检查方法。
实施例1：CTAD
对于每一根5ml的采血管，配制含有2.89mg柠檬酸(ナカラィタスク公司制造、特级)、12.1mg柠檬酸钠(ナカラィタスク公司制造、特级)、1.4mg茶碱(无水物、Sigma-Aldrich公司制造)、0.49mg腺苷(Sigma-Aldrich公司制造)和0.05mg双嘧达莫(Sigma-Aldrich公司制造)的抗凝血剂。
A.血细胞计数检查和血液凝固检查的实施
采集5ml血液，放入装有上述制备的抗凝血剂(CTAD)的采血管中，进行血细胞计数检查(白细胞数(WBC)和各种白细胞比率(中性粒细胞比率(NEUT％)、淋巴细胞比率(LYMPH％)、单核细胞比率(MONO％)、嗜酸性粒细胞比率(EOSI％)、嗜碱性粒细胞比率(BASO％))、红细胞数(RBC)、血红蛋白浓度(Hgb)、红细胞压积(Hct)、MCV、MCH、MCHC和血小板数(PLT))(使用装置：SE-9000；シクメックス株式会社)和血液凝固检查(凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)、纤维蛋白原测定(Fbg))(使用装置：CA-1000；シクメックス株式会社)。
另外，作为血细胞计数检查用的对照物，用5mgEDTA-2K(テルモ公司制造，ベノジェクトII、EDTA-2K5ml用)代替上述抗凝血剂，作为血液凝固检查用的对照物，使用0.5ml 3.8％柠檬酸钠溶液(テルモ公司制造、3.8％柠檬酸钠5ml用)。
对4个健康人的血液样品分别进行测定，求出平均值。表1中示出血细胞计数检查结果，表2中示出血液凝固测定结果。
【表1】
CTAD 对照(EDTA-2K)
WBC (×102) 58.6 55.9
NEUT％ 61.6 62.9
LYMPH％ 28.8 27.8
MONO％ 4.9 5.0
EOSI％ 4.2 3.8
BASO％ 0.5 0.4
RBC  (×104) 488 482
Hgb  (g/dl) 14.9 14.7
Hct  (％) 44.0 43.3
MCV  (fl) 90.6 90.2
MCH  (pg) 30.7 30.6
MCHC (g/dl) 33.9 33.9
PLT  (×104) 22.9 22.9
【表2】
CTAD 对照(柠檬酸钠)
PT  (sec) 9.3 9.5
APTT(sec) 27.7 28.6
Fbg(sec) 9.3 9.8
由表1和表2可以看出，无论是血细胞计数还是血液凝固测定，使用本发明的抗凝血剂都得到了与对照物大体相同的数据。
B.随时间变化
使用装入上述制备的CTAD的采血管进行随时间变化的测定。表3中示出血细胞计数结果，表4中示出对照物的结果。
【表3】
0.5小时 1.5小时 3小时 4小时 8小时
WBC  (×102) 52.0 53.7 53.7 49.6 54.6
NEUT％ 60.1 60.2 62.1 62.2 62.7
LYMPH％ 30.4 31.0 31.0 30.5 29.6
MONO％ 4.7 3.1 1.9 2.6 2.0
EOSI％ 4.3 5.0 4.5 4.2 5.1
BASO％ 0.5 0.7 0.6 0.6 0.7
RBC(×104) 537 523 525 524 525
Hgb(g/dl) 15.8 15.4 15.4 15.3 15.3
Hct  (％) 46.9 45.7 45.7 46.1 46.6
MCV  (fl) 87.4 87.2 87.2 87.9 88.6
MCH  (pg) 29.4 29.4 29.4 29.2 29.2
MCHC (g/dl) 33.6 33.7 33.7 33.3 33.0
PLT  (×104) 20.8 21.6 21.0 20.6 20.7
【表4】
0.5小时 1.5小时 3小时 4小时 8小时
 WBC  (×102) 54.4 51.9 51.8 52.3 51.9
 NEUT％ 57.1 56.4 55.7 56.4 55.4
 LYMPH％ 32.1 32.6 32.7 32.1 33.5
 MONO％ 5.9 5.8 6.0 6.2 6.0
 EOSI％ 4.3 4.6 4.8 4.6 4.3
 BASO％ 0.7 0.7 0.9 0.8 0.9
 RBC  (×104) 526 525 522 524 529
 Hgb(g/dl) 15.5 15.4 15.4 15.5 15.6
 Hct  (％) 45.9 45.6 45.5 45.5 46.3
 MCV  (fl) 87.3 87.0 87.2 86.9 87.5
 MCH  (pg) 29.4 29.7 29.8 29.7 29.5
 MCHC (g/dl) 33.6 33.7 33.8 33.9 33.6
 PLT  (×104) 20.8 21.8 21.6 21.3 21.3
另外，表5中示出血液凝固测定结果，表6中示出对照物的测定结果。
【表5】
1小时 2小时 4小时
PT (sec) 9.9 9.9 9.8
APTT (sec) 31.1 31.0 30.9
Fbg(sec) 8.0 8.3 8.2
【表6】
1小时 2小时 4小时
PT(sec) 10.0 10.0 9.8
APTT(sec) 29.6 29.6 29.3
Fbg(sec) 8.8 8.8 8.5
由表3-表6可以看出，就随时间变化而言，本发明的抗凝血剂与对照物是相同的。
C.EDTA依赖性假性血小板减少的测定
对于添加了本发明的CTAD或EDTA-2K的各血液试样进行血小板数测定，对于EDTA依赖性假性血小板减少进行比较，结果示于图1中。
使用EDTA-2K的血液试样，随着时间延长血小板减少，相比之下，采用本发明的CTAD得到了稳定的计数结果。
D.寒冷凝集的测定
对于添加了本发明的CTAD或EDTA-2K的血液试样进行血小板数测定，对寒冷凝集(冷藏保存时假性血小板减少)进行比较。将检测样品在4℃下保存，采血8小时后进行测定，结果示于表7中。
【表7】
37℃，EDTA(对照) 4℃，EDTA 4℃，CTAD
PLT (×104) 17.6 9.0 18.2
采用EDTA-2K的试样，血小板减少，相比之下，采用本发明的CTAD可以抑制血小板减少。
E.血小板的大小(MPV)随时间的变化
对于添加了本发明的CTAD或EDTA-2K的血液试样，比较血小板的大小，结果示于图2中。
使用EDTA-2K的样品，随着时间延长血小板增大，相比之下，采用本发明的CTAD可以保持血小板原来的大小(无抗凝血剂)。
实施例2：HTAD
对于每一根5ml的采血管，制备含有0.05mg肝素钠(ナカラィタスク公司制造、特级)、14mg茶碱、0.49mg腺苷和0.05mg双嘧达莫的抗凝血剂。
·血细胞计数检查和生化检查的实施
采集血液样品，放入加有上述制备的肝素TAD(HTAD)的采血管中，0.5小时、1小时、3小时和6小时后进行血细胞计数检查(使用装置：SE-9000)。对3份检测样品进行测定，图8中示出测定结果的平均值。
另外，作为血细胞计数检查用的对照物，使用5mgEDTA-2K。测定结果示于表9中。
【表8】
0.5小时 1小时 3小时 6小时
WBC  (×102) 49.4 49.8 48.4 49.5
RBC  (×104) 541 542 544 547
Hgb  (g/dl) 15.8 15.9 16.0 16.0
Hct  (％) 47.5 47.5 47.5 47.7
MCV  (fl) 87.8 87.6 87.3 87.2
MCH  (pg) 29.3 29.2 29.3 29.2
MCHC (g/dl) 33.4 33.4 33.6 33.5
PLT  (×104) 22.9 23.1 23.0 23.5
【表9】
0.5小时 1小时 3小时 6小时
WBC  (×102) 47.7 48.2 49.5 50.3
RBC  (×104) 542 541 546 547
Hgb  (g/dl) 15.8 15.9 16.0 16.0
Hct  (％) 47.9 47.9 48.8 49.2
MCV  (fl) 87.9 87.9 88.7 89.3
MCH  (pg) 29.3 29.4 29.2 29.3
MCHC (g/dl) 33.3 33.4 32.9 32.8
PLT  (×104) 21.7 22.0 21.5 21.6
由表8和表9可以看出，本发明的HTAD得到了与对照物EDTA-2K大体相同的数据。
随后，将血细胞计数检查完毕的采血管进行离心分离，分离出血浆，使用FDC-3000系列(富士フィルム(株))对所得到的血浆进行GPT、CPK、BUN、TG、UA、TCHO、TP、ALB、AMYL等生化检查项目的测定。作为生化检查的对照物，使用血清和肝素处理血浆((株)ニブロ社制、使用采血管ネォチュ-ブ(注册商标))。结果示于图3-5中。
各检测样品之间显示出与血清或肝素处理血浆同样的行为，证实可以测定生化检查项目。
实施例3：CdTAD
对于每一根5ml的采血管，配制含有22.75mg硫酸软骨素(Sigma公司制造、硫酸软骨素盐B(钠盐))或2.275mg硫酸软骨素、1.4mg茶碱、0.49mg腺苷和0.05mg双嘧达莫的抗凝血剂。
·血细胞计数检查和生化检查的实施
采集血样，将其放入装有上述制备的硫酸软骨素TAD(CdTAD)的采血管中，然后与实施例2同样进行血细胞计数检查。表10中示出对5个检验样品测定结果的平均值。另外，使用5mgEDTA-2K作为对照物。
【表10】
CdTAD22.75mg CdTAD2.275mg EDTA-2K
WBC  (×102) 64.0 63.5 61.7
RBC  (×104) 504 504 503
Hgb  (g/dl) 15.1 15.1 15.1
Hct  (％) 44.7 44.6 44.8
MCV  (fl) 88.8 88.7 89.2
PLT  (×104) 18.1 18.0 24.3
无论硫酸软骨素的浓度如何，本发明的CdTAD都得到了与作为对照物的EDTA-2K大致相同的数据。
接着，将在抗凝血剂中含有22.75mg硫酸软骨素的血液试样离心分离，分离出血浆，除了实施例2中测定的项目之外，使用FDC-3000系列(富士フィルム(株))进行GGT、GOT、ALP、LDH、CRE、TBIL、CRP等生化检查。作为生化检查的对照物，使用血清和肝素处理血浆((株)ニブロ公司制造、使用采血管ネォチュ-ブ(注册商标))。结果示于图6-图11中。
各检验样品之间显示出与血清同样的行为，证实可以用于生化检查。
按照本发明，采用同一抗凝血剂，可以进行血细胞计数检查和血液凝固检查，或者可以进行血细胞计数检查和生化检查，从而可以减少采血管的数量。因此，可以减少采血所需要的时间和成本并且可以减轻患者的负担。
另外，用一根采血管就可以进行血细胞计数检查和血液凝固检查或者进行血细胞计数检查和生化检查，因此可以用检测样品传送装置将各个全自动装置连接起来形成检测系统。
由于本发明不使用EDTA盐，因此可以防止假性血小板减少，同时还可以防止随着时间的延长血小板膨化，可以保持血小板原来的大小。
另外，即使是发生寒冷凝集的样品，使用本发明的抗凝血剂时，也不会发生凝集，可以进行正确的血细胞计数。
附图的简要说明
图1是表示假性血小板减少样品的血小板数随时间变化的曲线图。
图2是表示血小板大小随时间变化的曲线图。
图3是表示使用肝素作为凝血酶抑制剂时的生化检查项目测定结果的曲线图。
图4是表示使用肝素作为凝血酶抑制剂时的生化检查项目测定结果的曲线图。
图5是表示使用肝素作为凝血酶抑制剂时的生化检查项目测定结果的曲线图。
图6是表示使用硫酸软骨素作为凝血酶抑制剂时的生化检查项目测定结果的曲线图。
图7是表示使用硫酸软骨素作为凝血酶抑制剂时的生化检查项目测定结果的曲线图。
图8是表示使用硫酸软骨素作为凝血酶抑制剂时的生化检查项目测定结果的曲线图。
图9是表示使用硫酸软骨素作为凝血酶抑制剂时的生化检查项目测定结果的曲线图。
图10是表示使用硫酸软骨素作为凝血酶抑制剂时的生化检查项目测定结果的曲线图。
图11是表示使用硫酸软骨素作为凝血酶抑制剂时的生化检查项目测定结果的曲线图。

Claims (10)

1.血细胞计数检查用的抗凝血剂，其特征是，含有选自茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种抗血小板剂中的至少2种抗血小板剂以及柠檬酸或其碱金属盐或它们的混合物。
2.权利要求1所述的抗凝血剂，其特征是，抗血小板剂与柠檬酸或其碱金属盐或它们的混合物的使用比例为0.9∶80-90∶80(重量比)。
3.权利要求1所述的抗凝血剂，其特征是，抗血小板剂含有茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种，茶碱类、腺苷类、双嘧达莫类和柠檬酸或其碱金属盐或它们的混合物的使用比例为0.3-15∶0.1-8∶0.01-0.7∶5-120(重量比)。
4.血液检查方法，其特征是，将含有选自茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种抗血小板剂中的至少2种抗血小板剂和柠檬酸或其碱金属盐或它们的混合物的抗凝血剂添加到血液试样中，对选自白细胞、红细胞和血小板中的至少2种血细胞进行计数。
5.权利要求4所述的血液检查方法，其特征是，还进行血液凝固检查。
6.抗凝血剂，其特征是，含有选自茶减类、腺苷类和双嘧达莫类3种抗血小板剂中的至少2种抗血小板剂和凝血酶抑制剂。
7.权利要求6所述的抗凝血剂，其特征是，抗血小板剂与凝血酶抑制剂的使用比例为0.05∶11-4000∶11(重量比)。
8.权利要求3所述的抗凝血剂，其特征是，抗血小板剂含有茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种，茶碱类、腺苷类、双嘧达莫类和凝血酶抑制剂的使用比例为0.3-15∶0.1-8∶0.01-0.7∶0.01-100(重量比)。
9.血液检查方法，其特征是，将含有选自茶碱类、腺苷类和双嘧达莫类3种抗血小板剂中的至少2种抗血小板剂和凝血酶抑制剂的抗凝血剂添加到血液试样中，对选自白细胞、红细胞和血小板中的至少2种血细胞进行计数。
10.权利要求9所述的血液检查方法，其特征是，还进行生化检查。
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