CN102620950B - 血小板护维剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种血小板护维剂,其组分为(重量百分比):乙二胺四乙酸二钾:10~14%;枸橼酸钠:6~10%;普鲁卡因:0.45~0.55%;聚乙烯呲咯烷酮:0.46~0.50%;聚乙二醇6000:0.48~0.52%;三磷酸腺苷:0.03~0.07%;乙酰肝素:0.005~0.015%;前列环素:0.005~0.015%;尿激酶:0.01~0.03%;纤溶酶:0.005~0.015%;肾上腺髓质素:0.01~0.03%;羟乙基纤维素钠:0.15~0.25%;JNSO-2000长效抗菌剂:0.05~0.15%;水:余量。本发明所述的血小板护维剂制备方法依次为:配比主要原料并超声波作用、加入易失活的蛋白性物质并混合均匀、抽滤并制备。本发明所述的血小板护维剂,能使血小板离体后24小时内保持单个分布的稳定的状态,血小板24小时内无统计学的变化,确保血液细胞分析的准确性。本发明所述的血小板护维剂,经试验对比验证,实施效果显著。
Description
技术领域
本发明涉及一种采血管添加剂,用于医学临床检验中的全血标本采血时保护单个分布形态的血小板,进而提高临床血液细胞分析的准确性。
背景技术
现有的医学临床检验中,在对血液细胞分析时,对全血标本采集时所使用的采血管中所含抗凝添加剂,多数使用的是乙二胺四乙酸二钾(EDTA-2K)、乙二胺四乙酸三钾(EDTA-3K)或乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na),利用其与血液中Ca++络合而抗凝的特性。因此,乙二胺四乙酸钾(钠)盐为血液细胞分析中首选的抗凝剂。而根据国际血液学标准化委员会(ICSH)1993年资料(人民军医出版社2006版《临床基础检验学》,郑之文主编)中提示,血液细胞分析时最佳抗凝剂使用量为每毫升血液应用K2EDTA-2H2O(分子量404.4)3.7-5.4μmol(约合1.5-2.2mg),大于此浓度将使红细胞体积缩小,从而影响红细胞比积的测定。这种单一组份的添加剂,只考虑到血液抗凝和红细胞的形态变化与添加剂浓度的关系,而对血液细胞分析中最大难题——保护血小板计数的准确性和保持血小板原值形态的稳定相当的不理想。因为血小板的特性是:离开血管后易粘连、易聚集、易破裂。这种特性随着血液标本采集后到进行血细胞分析前保存时间的延长而逐步加剧。为保护血小板的形态稳定和提高计数的准确性,一直是临床血液细胞分析中一个重要难题,也是本发明所述血小板护维剂的价值所在。
发明内容
本发明正是针对现有技术存在的不足,提供一种血小板护维剂。
为解决上述问题,本发明所采取的技术方案如下:
一种血小板护维剂,用作提高临床血液细胞分析准确性的采血管添加剂,所述血小板护维剂的组分如下(重量百分比):
进一步地,所述血小板护维剂的优选组分如下(重量百分比):
所述血小板护维剂的制备方法包括以下步骤:
①步骤一:配比主要原料并超声波作用;
将下述重量份原料(重量百分比)放入全玻容器中,经工作频率不小于40KHz的超声波清洗机,在28℃~32℃温度下进行超声波作用20~25分钟:
②步骤二:加入易失活的蛋白性物质,并混合均匀;
将步骤一作用后的原料,加入以下重量份组分后再混合均匀(重量百分比):
③步骤三:抽滤并制备;
用0.1μ滤膜板块抽滤,所得溶剂即为本发明所述的血小板护维剂。
所述血小板护维剂的制备方法步骤一中,原料组分为(重量百分比):
所述血小板护维剂制备方法步骤二中,原料组分为(重量百分比):
本发明的有益效果是:
本发明所述的血小板护维剂,能使血小板离体后24小时内保持单个分布的稳定的状态,血小板24小时内无统计学的变化,确保血液细胞分析的准确性。本发明所述的血小板护维剂,经试验对比验证,实施效果显著。
具体实施方式
下面将结合具体的实施例来说明本发明的内容。
本发明所述的血小板护维剂,其组分及各组分的作用如下:
本发明所述的血小板护维剂,提供以下实施例:
【实施例1】本发明所述的血小板护维剂的原料如下(重量百分比):
【实施例2】本发明所述的血小板护维剂的原料如下(重量百分比):
【实施例3】本发明所述的血小板护维剂优选的原料配比如下(重量百分比):
由于乙酰肝素、前列环素、尿激酶、纤溶酶、肾上腺髓质素为易失活的蛋白性物质,因此,本发明所述的血小板护维剂制备时,将以上五种组分与其他原料组分分开,单独加入并混合均匀。以实施例3中原料配比为例,本发明所述的血小板护维剂制备方法如下:
①步骤一:配比主要原料并超声波作用;
将下述重量份原料放入全玻容器中,经工作频率不小于40KHz的超声波清洗机,在28℃~32℃温度下进行超声波作用20~25分钟(重量百分比):
②步骤二:加入易失活的蛋白性物质,并混合均匀;
将步骤一作用后的原料,加入以下重量份组分后再混合均匀(重量百分比):
③步骤三:抽滤并制备;
用0.1μ滤膜板块抽滤,所得溶剂即为本发明所述的血小板护维剂,将其密封于塑料软桶中备用即可。
本发明所述的血小板护维剂使用比例为:1∶100,即1毫升血小板护维剂能保护100毫升血液中,血小板24小时内无统计学的变化。
本发明所述的血小板护维剂作为一种采血管添加剂,是为医学临床检验中血小板计数和形态测定时让血小板在采血管中维持人体血管内的原值形态和分布,防止聚集、粘连、破裂使数量、形态发生变化。当使用本发明所述的血小板护维剂进行采血管采血时,血液接触的抗凝添加剂仍然使用国际血液学标准化委员会推荐的乙二胺四乙酸二钾或枸橼酸钠,保证血小板形态渗透压和血液等渗避免溶血:三磷酸腺苷(ATP)抑制血液中二磷酸腺苷(ADP)对血小板的诱聚作用;前列环素抑制血小板聚集;大分子的聚乙烯呲咯烷酮(PVP)和聚乙二醇6000为大分子非离子表面活性剂,防止血小板细胞内外离子交换变形破裂;羟乙基纤维素钠为助悬剂,防止血液分析前静置在采血管中的血小板沉淀聚集、粘连、破裂;尿激酶和纤溶酶阻止微小凝集;普鲁卡因降低细胞需氧代谢;肾上腺髓质素抑制血小板变形破裂。这样多种成分协同作用,使血液血小板在采血管中保存24小时内,只需在分析前略微混均,上下颠倒几次仍能保持在人体血管中的原值状态,确保进行血小板数量测定和形态观察的准确性。
本发明所述的血小板护维剂试验对照如下:
以200例健康体检的自然人群真空采血管采集血样两支,其中:普通EDTA-2K采血管一支,血小板护维剂采血管一支。经以下四个时间段依次进行对比:
(1)首先,在10分钟内用细胞分析仪测定一次,记录两支采血管中标本的血小板数,涂片瑞氏染色,显微镜观察血小板形态、聚集变化;
(2)第二次,在4℃冰箱中保存2小时后测定一次,记录两支采血管中标本的血小板数,涂片瑞氏染色,显微镜观察血小板形态、聚集变化;
(3)第三次,在4℃冰箱中保存10小时后测定一次,记录两支采血管中标本的血小板数,涂片瑞氏染色,显微镜观察血小板形态、聚集变化;
(4)第四次,在4℃冰箱中保存24小时后再测定一次,记录两支采血管中标本的血小板数,涂片瑞氏染色,显微镜观察血小板形态、聚集变化。
其试验结果对照如下表所示:
从上述试验结果对照表中可以看出:相同的人群例数、相同的样本、相同的试验条件下(分析仪、试剂、样本贮存时间、温度),只有采血管中添加剂不同(对照管中EDTA-2K,试验管中血小板护维剂),结果却是:两组均值之差183.3×109/L,差异非常显著。
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