CN1254681C - 一种夏枯草制剂的质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种夏枯草制剂的质量检测方法，包括下述步骤：供试品溶液的制备，精密称取样品，置锥形瓶中，加体积比为70∶10∶20的甲醇/盐酸/水的提取-水解溶液，于80℃水浴中回流提取2小时，取下，放冷，用20%氢氧化钠溶液/70%甲醇溶液中和PH至3～5，用70%甲醇定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得；对照品溶液的制备，精密称取槲皮素对照品适量，加甲醇，制成每1ml含槲皮素15.00～20.00ug的溶液；含量测定，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定。本发明的方法准确度高、技术先进、操作快速简便，能使产品质量得到更有效的控制。
Description
技术领域
本发明属中药质量检测领域，具体来说涉及一种夏枯草制剂的质量检测方法。
背景技术
夏枯草制剂的质量检测方法之一是采用分光光度法测定总黄酮含量，但黄酮类化合物种类很多，因此该方法专属性差，不能有效控制产品质量。因此夏枯草制剂的质量检测方法又增加了高效液相色谱法测定金丝桃苷含量，但夏枯草中金丝桃苷含量较低，在制剂中含量限度低于万分之一，还需要结合测定总黄酮含量来控制产品质量，方法繁琐，费时费力，因此，还需要进一步改进。
发明内容
本发明的目的在于克服上述缺点而提供一种能有效控制夏枯草制剂质量，准确度高、技术先进的使用高效液相色谱法测定夏枯草中槲皮素的含量的夏枯草制剂的质量检测方法。
发明人根据“中药新药研究的技术要求”，试验采用了专属性强、灵敏度高的高效液相色谱法测定夏枯草制剂中所含熊果酸、金丝桃苷和槲皮素的含量，但熊果酸、金丝桃苷的含量均低于万分之一，而槲皮素的含量高于万分之一，且槲皮素与其他组份分离度、重现性、精密度、回收率都较好，故确定本发明的夏枯草制剂的质量检测方法采用高效液相色谱法测定夏枯草制剂中槲皮素的含量。
本发明的一种夏枯草制剂的质量检测方法，取夏枯草2667份，分别加水12、10、8倍煎煮三次，每次2小时，滤过，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.08～1.15(60～70℃)的浸膏，取70％浸膏喷雾干燥，得喷雾粉，备用，剩余浸膏加甜菊素6份混匀后作为粘合剂与喷雾粉、糊精515份沸腾制粒，干燥，混合，整粒，制得本品1000份，其特征在于包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备：取本品研细，精密称取0.5～1.0g，置锥形瓶中，加体积比为70∶10∶20的甲醇/盐酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小时，取下，放冷，用20％氢氧化钠溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，转至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(2)对照品溶液的制备：精密称取槲皮素对照品适量，加甲醇，制成每1ml含槲皮素15.00～20.00ug的溶液；
(3)含量测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法(《中国药典》2000年版一部附录□D)测定；
(4)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，体积比为50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为360～372nm，理论塔板数按槲皮素峰计算应不低于3000。
本发明的夏枯草制剂的质量检测方法，其中(2)对照品溶液的制备：精密称取槲皮素对照品20.00mg置于200ml量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，精密吸取20ml置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，即制成每1ml含槲皮素20.00ug的溶液。
本发明的夏枯草制剂的质量检测方法，其中检测波长为372nm。
本发明的夏枯草制剂可以是常规的各种剂型。
本发明的方法与现有夏枯草制剂的质量检测方法相比主要优越性如下：经过反复实验，发现夏枯草中槲皮素含量较高，故确定采用高效液相色谱法测定夏枯草颗粒中槲皮素的含量。经试验表明，槲皮素与其他组份分离度好，线性关系、重现性、精密度、稳定性、回收率都较好。供试品溶液的制备采用回流2小时处理能够得到较好的检测结果，又可以节省时间，提高效率，因此，本发明的方法准确度高、技术先进、操作快速简便，能使产品质量得到更有效的控制。
具体实施方式
以下通过夏枯草颗粒的实施例和试验例来进一步说明本发明的有益效果。
夏枯草颗粒
(1)制备：取夏枯草2667g，分别加水12、10、8倍煎煮三次，每次2小时，滤过，合并煎液，滤液浓缩至相对密度为1.08～1.15(60～70℃)的浸膏，取70％浸膏喷雾干燥，得喷雾粉，备用。剩余浸膏加甜菊素6g混匀后作为粘合剂与喷雾粉、糊精515g沸腾制粒，干燥，混合，整粒，制得1000g本品，分装成每袋装3g。
(2)用法用量：口服，一次1袋，一日2次。
(3)性状：本品为棕褐色的颗粒；气香，味微甜、微苦。
(4)鉴别：
①取本品1.5g，加水20ml溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次20ml，合并提取液，置水浴上蒸干，残渣加水20ml，加热使溶解，水溶液加于已处理好的聚酰胺柱(内径1.8cm、高6cm)上，用水60ml洗脱，弃去水洗液，再用乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取夏枯草对照药材4g加水50ml，回流提取30分钟，过滤，滤液照供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；再取金丝桃苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G高效薄层板上使成条状，以醋酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，热风吹干后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
②取本品6g，加乙醇50ml，加热回流3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl及对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸(20∶5∶8∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100℃加热至斑点清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(5)检查：应符合颗粒剂项下有关各项规定(《中国药典》2000年版一部附录IC)。
实施例1
夏枯草颗粒的质量检测方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备：取本品研细，精密称取0.5g，置锥形瓶中，加体积比为70∶10∶20的甲醇/盐酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小时，取下，放冷，用20％氢氧化钠溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，转至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
分别称取两个平行样S1、S2：
S1 S2
空瓶： 51.7802 52.7992
空瓶+样： 51.3172 52.3322
样： 0.4630 0.4670
(2)对照品溶液的制备：精密称取槲皮素对照品20.00mg置于200ml量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，精密吸取20ml置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，即制成每1ml含槲皮素20.00ug的溶液；
同样制备方法分别制成对照品溶液1、对照品溶液2：
对照品溶液1 对照品溶液2
空瓶： 71.00182 70.09875
空瓶+样： 71.02182 70.11875
样： 0.02000 0.02000
(3)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，体积比为50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为360～372nm，理论塔板数按槲皮素峰计算不低于3000。
含量测定方法：分别精密吸取二种对照品溶液和二份供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，连续进样各2次，照高效液相色谱法(《中国药典》2000年版一部附录□D)测定，记录色谱图，测定峰面积，以下式计算样品中槲皮素的含量：
As：供试品溶液的峰面积； 照品溶液的峰面积；
Cs：对照品浓度(mg/ml)；
Ms：供试品取样量(g)；V：定容体积(ml)
□测定结果：
| 进样序号 | 保留时间 | 峰面积 | 对称性 | 理论板数 | 分离度 | 标准溶液(20mg/ml)峰面积 | |
| 对照品溶液1 | 1 | 12.188 | 696.8 | 0.86 | 6931 | - | 696.8 |
| 2 | 11.842 | 699.3 | 0.86 | 6629 | - | 699.3 | |
| 对照品溶液2 | 1 | 12.188 | 701.6 | 0.85 | 6931 | - | 701.6 |
| 2 | 11.842 | 703.8 | 0.87 | 6829 | - | 703.8 | |
| 平均峰面积：700.4RSD：0.4％ | |||||||
| 进样序号 | 保留时间 | 峰面积 | 对称性 | 理论板数 | 分离度 | |
| 供试品溶液1 | 1 | 15.289 | 302.1 | 0.84 | 7240 | - |
| 2 | 15.205 | 308.2 | 0.85 | 7352 | - | |
| 供试品溶液2 | 1 | 15.191 | 306.7 | 0.83 | 7338 | - |
| 2 | 15.196 | 304.5 | 0.82 | 7691 | - | |
□计算：(平均含量3.0270g/袋)
S＝1.4mg/袋
RSD＝1.0％
实施例2
夏枯草颗粒的质量检测方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备：取本品研细，精密称取0.5g，置锥形瓶中，加体积比为70∶10∶20的甲醇/盐酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小时，取下，放冷，用20％氢氧化钠溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，转至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
分别称取两个平行样S1、S2：
S1 S2
空瓶： 52.5332 51.2136
空瓶+样： 52.0322 50.7233
样： 0.5010 0.4903
(2)对照品溶液的制备：精密称取槲皮素对照品20.00mg置于200ml量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，精密吸取20ml置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，即制成每1ml含槲皮素20.00ug的溶液；
同样制备方法分别制成对照品溶液1、对照品溶液2：
对照品溶液1 对照品溶液2
空瓶： 71.00182 70.09875
空瓶+样： 71.02182 70.11875
样： 0.02000 0.02000
(3)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，体积比为50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为360～372nm，理论塔板数按槲皮素峰计算不低于3000。
含量测定方法：分别精密吸取二种对照品溶液和二份供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，连续进样各2次，照高效液相色谱法(《中国药典》2000年版一部附录□D)测定，记录色谱图，测定峰面积，以实施例同样的方式计算样品中槲皮素的含量：
□测定结果：
| 进样序号 | 保留时间 | 峰面积 | 对称性 | 理论板数 | 分离度 | 标准溶液(20mg/ml)峰面积 | |
| 对照品溶液1 | 1 | 12.188 | 696.8 | 0.86 | 6931 | - | 696.8 |
| 2 | 11.842 | 699.3 | 0.86 | 6629 | - | 699.3 | |
| 对照品溶液2 | 1 | 12.188 | 701.6 | 0.85 | 6931 | - | 701.6 |
| 2 | 11.842 | 703.8 | 0.87 | 6829 | - | 703.8 | |
| 平均峰面积：700.4RSD：0.4％ | |||||||
| 进样序号 | 保留时间 | 峰面积 | 对称性 | 理论板数 | 分离度 | |
| 供试品溶液1 | 1 | 15.210 | 306.8 | 0.86 | 7189 | - |
| 2 | 15.239 | 311.8 | 0.81 | 7217 | - | |
| 供试品溶液2 | 1 | 15.215 | 291.1 | 0.86 | 7362 | - |
| 2 | 15.220 | 293.5 | 0.84 | 7541 | - | |
□计算：(平均含量3.0023g/袋)
S＝1.3mg/袋
RSD＝2.1％
实施例3～12
夏枯草颗粒的质量检测方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备：取本品研细，精密称取1.0g，置锥形瓶中，加体积比为70∶10∶20的甲醇/盐酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小时，取下，放冷，用20％氢氧化钠溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，转至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
其余步骤同实施例1
实施例3～12十批供试品测定结果见下表：
| 实施例 | 批号 | 槲皮素的含量(mg·袋-1) | ||
| 第一次 | 第二次 | 平均值 | ||
| 3 | 20021001 | 1.32 | 1.28 | 1.3 |
| 4 | 20021002 | 1.38 | 1.40 | 1.4 |
| 5 | 20021003 | 1.14 | 1.13 | 1.1 |
| 6 | 20021004 | 1.49 | 1.51 | 1.5 |
| 7 | 20021005 | 1.24 | 1.20 | 1.2 |
| 8 | 20021101 | 1.32 | 1.34 | 1.3 |
| 9 | 20021102 | 1.41 | 1.39 | 1.4 |
| 10 | 20030601 | 1.43 | 1.40 | 1.4 |
| 11 | 20030602 | 1.32 | 1.28 | 1.3 |
| 12 | 20030603 | 1.23 | 1.22 | 1.2 |
根据以上实施例1～12共12批样品的含量测定结果，并考虑药材含量的波动，确定本品每袋含夏枯草以槲皮素(C15H10O7·2H2O)计，不得少于1.0mg。
试验例
1、样品前处理
(1)性状：见上述夏枯草颗粒质量标准，十批样品均与此描述一致。
(2)鉴别：夏枯草制剂所含金丝桃苷及夏枯草对照药材的薄层定性鉴别。因现有技术夏枯草口服液中仅有金丝桃苷的薄层定性鉴别，为了更准确地体现该产品的质量可靠性，增加夏枯草对照药材的薄层定性鉴别。经试验供试品色谱中在与对照品及对照药材色谱相应位置上显相同颜色的斑点，故选择本发明的方法。
(3)含量测定：为夏枯草颗粒所含槲皮素成分的含量测定，现有技术夏枯草口服液采用分光光度法测总黄酮，该方法专属性差，根据“中药新药研究的技术要求”，试验采用了专属性强、灵敏度高的高效液相色谱法测定夏枯草颗粒中所含熊果酸、金丝桃苷和槲皮素的含量，但熊果酸、金丝桃苷的含量均低于万分之一，而槲皮素的含量高于万分之一，故确定采用高效液相色谱法测定本品中槲皮素的含量。色谱条件如下所述，槲皮素与其他组份分离度、重现性、精密度、回收率都较好。
(4)药品与药剂：甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，样品由贵阳新天药业股份有限公司提供。
(5)仪器分析条件：仪器为Agilent 1100高效液相色谱仪，VWD检测器，Agilent 1100化学工作站。
(6)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱EliteHypersil C18，5μm，4.6×250mm，流动相采用甲醇-0.4％磷酸溶液(50∶50)，检测波长372nm，柱温为25℃，流速为1.0ml/min，理论塔板数以槲皮素峰计应不低于3000。
(7)检测波长的选择：取槲皮素对照品溶液进行UV光谱扫描，在372nm处有最大吸收，故选372nm作为检测波长。
(8)供试品溶液处理的选择：按实施例含量测定方法中供试品溶液制备方法，通过超声1小时、超声2小时、超声3小时、回流1小时、2小时、3小时的比较证明，回流2小时能够得到满意的实验结果，又可以节省时间，提高效率，具体数据见表一。
表一供试品溶液处理试验
| 提取方法 | 超声1小时 | 超声2小时 | 超声3小时 | 回流1小时 | 回流2小时 | 回流3小时 |
| 含量(mg/g) | 0.416 | 0.419 | 0.423 | 0.425 | 0.435 | 0.435 |
2、方法学考察
(1)线性关系的考察：精密称取槲皮素对照品10.5mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取20ml至50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即制成每1ml含42.0μg的对照品溶液，分别精密吸取上述对照品溶液2ml、5ml、10ml、15ml和20ml置于20ml量瓶中，加甲醇至刻度。分别吸取上述对照品溶液10μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定。以槲皮素进样量(μg)为横坐标，相应的峰面积(A)为纵坐标，计算回归方程为：
A＝3851.4C-45.446 r＝0.9999
具体数据见表二
表二线性关系考察试验
| 进样量(μg) | 0.042 | 0.105 | 0.21 | 0.315 | 0.42 |
| 峰面积 | 122.7 | 357.7 | 757.4 | 1160.4 | 1580.3 |
表明槲皮素进样量在0.042～0.42μg范围内线性关系良好。
(2)精密度试验：精密称取槲皮素对照品10.5mg置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取20ml至100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即制成每1ml含21.0μg的对照品溶液。取此对照品溶液，重复进样五次，每次10μl，测定槲皮素峰面积，结果RSD为0.9％，表明仪器的精密度良好。见表三。
表三精密度试验
| 进样次数 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | RSD(％) |
| 峰面积 | 771.8 | 781.9 | 787.4 | 779.9 | 771.8 | 0.87 |
(3)重复性试验：取同批(批号：20021001)供试品，按正文含量测定方法制备供试品溶液5份并测定含量，有良好的重重复性，结果见表四。
表四重复性试验
| 供试品 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | RSD(％) |
| 含量(mg·g-1) | 0.434 | 0.434 | 0.434 | 0.432 | 0.433 | 0.21 |
(4)稳定性试验：
样品稳定性试验：取同一份供试品溶液(批号：20021001)按正文含量测定方法在不同时间分别测定峰面积，共测定6次。结果RSD为1.6％，表明供试品溶液在24h内稳定，见表五。
表五样品稳定性试验
| 测定时间(小时) | 1 | 2 | 4 | 8 | 12 | 24 | 平均值 | RSD(％) |
| 峰面积 | 493.5 | 495.2 | 497.2 | 507.2 | 484.7 | 503.1 | 496.8 | 1.6 |
对照品稳定性试验：取同一份对照品溶液(21.0μg/ml)按正文含量测定方法在不同时间分别测定峰面积，共测定7次。结果RSD为1.4％，表明对照品溶液在24h内稳定，见表六。
表六对照品稳定性试验
| 测定时间(小时) | 0 | 1 | 3 | 5 | 8 | 12 | 24 | 平均值 | RSD(％) |
| 峰面积 | 771.8 | 788.9 | 754.6 | 771.1 | 761.8 | 776.7 | 771.4 | 770.9 | 1.4 |
(5)加样回收率试验：精密称取已知含量(0.43mg·g-1)的同一供试品(批号20021001)5份，精密加入槲皮素对照溶液(0.02mg·ml-1)5ml，按正文所述方法提取并按色谱条件进行测定，以下式计算回收率，结果见表七，说明本方法有良好的回收率。
表七回收率实验结果
| 取样量(g) | 取样相当槲皮素含量(mg) | 添加槲皮素的量(mg) | 测出槲皮素的总量(mg) | 回收率(％) | 平均回收率(％) | RSD％ |
| 0.4868 | 0.2088 | 0.23 | 0.4407 | 100.8 | 102.8 | 2.9 |
| 0.5055 | 0.2174 | 0.23 | 0.4503 | 101.3 | ||
| 0.4837 | 0.2079 | 0.23 | 0.4379 | 100.0 | ||
| 0.5058 | 0.2176 | 0.23 | 0.4600 | 105.4 | ||
| 0.5058 | 0.2176 | 0.23 | 0.4625 | 106.6 |
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，任何未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改，等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。
Claims (5)
1、一种夏枯草制剂的质量检测方法，取夏枯草2667份，分别加水12、10、8倍煎煮三次，每次2小时，滤过，合并煎液，滤液浓缩至温度为60～70℃、相对密度为1.08～1.15的浸膏，取70％浸膏喷雾干燥，得喷雾粉，备用，剩余浸膏加甜菊素6份混匀后作为粘合剂与喷雾粉、糊精515份沸腾制粒，干燥，混合，整粒，制得本品1000份，其特征在于包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备：取本品研细，精密称取0.5～1.0g，置锥形瓶中，加体积比为70∶10∶20的甲醇/盐酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小时，取下，放冷，用20％氢氧化钠溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，转至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(2)对照品溶液的制备：精密称取槲皮素对照品适量，加甲醇，制成每1ml含槲皮素15.00～20.00ug的溶液；
(3)含量测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定；
(4)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，体积比为50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为360～372nm，理论塔板数按槲皮素峰计算应不低于3000。
2、如权利要求1所述的夏枯草制剂的质量检测方法，其中(2)对照品溶液的制备：精密称取槲皮素对照品20.00mg置于200ml量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，精密吸取20ml置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，即制成每1ml含槲皮素20.00ug的溶液。
3、如权利要求1或2所述的夏枯草制剂的质量检测方法，其中，检测波长为372nm。
4、如权利要求3所述的夏枯草制剂的质量检测方法，其中每袋3g含夏枯草以槲皮素计，不得少于1.0mg。
5、如权利要求4所述的夏枯草制剂的质量检测方法，其中夏枯草制剂是常规的各种剂型。
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| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Quality detection method of selfheal preparation Effective date of registration: 20131203 Granted publication date: 20060503 Pledgee: Guiyang industrial investment Company limited by guarantee Pledgor: Guiyang Xintian Pharmaceutical Industry Co., Ltd. Registration number: 2013990000922 |
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| PLDC | Enforcement, change and cancellation of contracts on pledge of patent right or utility model | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20141010 Granted publication date: 20060503 Pledgee: Guiyang industrial investment Company limited by guarantee Pledgor: Guiyang Xintian Pharmaceutical Industry Co., Ltd. Registration number: 2013990000922 |
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| PLDC | Enforcement, change and cancellation of contracts on pledge of patent right or utility model | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Quality detection method of selfheal preparation Effective date of registration: 20141118 Granted publication date: 20060503 Pledgee: Guiyang industrial investment Company limited by guarantee Pledgor: Guiyang Xintian Pharmaceutical Industry Co., Ltd. Registration number: 2014520000003 |
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| PLDC | Enforcement, change and cancellation of contracts on pledge of patent right or utility model | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20150917 Granted publication date: 20060503 Pledgee: Guiyang industrial investment Company limited by guarantee Pledgor: Guiyang Xintian Pharmaceutical Industry Co., Ltd. Registration number: 2014520000003 |
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| PLDC | Enforcement, change and cancellation of contracts on pledge of patent right or utility model | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Quality detection method of selfheal preparation Effective date of registration: 20151202 Granted publication date: 20060503 Pledgee: Agricultural Bank of China, Limited by Share Ltd, Guiyang, Wudang branch Pledgor: Guiyang Xintian Pharmaceutical Industry Co., Ltd. Registration number: 2015520000008 |
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| PLDC | Enforcement, change and cancellation of contracts on pledge of patent right or utility model | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20180606 Granted publication date: 20060503 Pledgee: Agricultural Bank of China, Limited by Share Ltd, Guiyang, Wudang branch Pledgor: Guiyang Xintian Pharmaceutical Industry Co., Ltd. Registration number: 2015520000008 |
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| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Quality detection method of selfheal preparation Effective date of registration: 20190819 Granted publication date: 20060503 Pledgee: Guiyang Branch of Shanghai Pudong Development Bank Co., Ltd. Pledgor: Guiyang Xintian Pharmaceutical Industry Co., Ltd. Registration number: Y2019520000001 |
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| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |