CN1252724A - 预防和延缓早老性痴呆症发病的方法和组合物 - Google Patents

预防和延缓早老性痴呆症发病的方法和组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN1252724A
CN1252724A CN98804259A CN98804259A CN1252724A CN 1252724 A CN1252724 A CN 1252724A CN 98804259 A CN98804259 A CN 98804259A CN 98804259 A CN98804259 A CN 98804259A CN 1252724 A CN1252724 A CN 1252724A
Authority
CN
China
Prior art keywords
apo
mice
receptor
cupreol
stigmastanol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN98804259A
Other languages
English (en)
Inventor
E·诺瓦克
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Forbes Medi-Tech Inc
Original Assignee
Forbes Medi-Tech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Forbes Medi-Tech Inc filed Critical Forbes Medi-Tech Inc
Publication of CN1252724A publication Critical patent/CN1252724A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

预防和/或延缓动物早老性痴呆症发病的方法,包括给予动物植物甾醇组合物。用于预防和/或延缓动物早老性痴呆症发病的组合物包括植物甾醇组合物。

Description

预防和延缓早老性痴呆症发病的方法和组合物
发明的领域
本发明涉及早老性痴呆症领域，并涉及其预防和延缓发病的方法。
发明的背景
早老性痴呆症(“AD”)是持续进行性痴呆病。其主要病理特点是在一些易感性神经元中发生细胞骨架的变化。这些变化并非随年龄增长而必然出现，但一旦开始发病，则未见有自发性康复或缓解的病例。
如下面所述，皮层的初期变化发生于颞叶中部髓鞘贫乏的transentorhinal区。然后这种结构破坏过程以可预期的方式扩展到其它皮层区。按具有纤维缠绕的(tangle-bearing)神经元部位和变化的严重程度可将疾病的进程区分为6个阶段，从临床上无症状的第I-II期到标志AD完全形成的第V-VI期。相当少量的患者出现特别早的变化，表明年龄的增长不是病损演变的先决条件。因此，AD是与年龄有关但不是年龄依赖性的疾病。
关于AD的病因和发病机理有一些新的理论，很多与遗传缺损有关。百分率很小的AD患者在第21对染色体淀粉样前体蛋白(“APP”)产生相关基因上有缺损。APP是与细胞生长和修复有关的大分子蛋白质，当其裂解成小的不可消化蛋白β-淀粉样蛋白(＂B-A＂)时，可积聚在脑中的斑块中。
更有趣的研究集中于迟发性家族性AD和第19对染色体编码载脂蛋白-E(＂apo-E＂)的多形基因之间的关系上，载脂蛋白-E是与胆固醇和其它脂类移动出人全身细胞有关的、分子量为34,000的蛋白质。apo-E在脂类转运和代谢中的作用是关键性的，下面将作进一步讨论。从多年来的观察得知apo-E的神经生物学作用。首先，Apo-E mRNA在脑中含量丰富，它由星形细胞合成和分泌(Elshourbagy等，1985年)。第二，含apo-E的脂蛋白见于脑脊液，在中枢神经系统的脂类输运中起主要作用(Pitas等，1987年)。第三，apo-E加上胆固醇源促进了培养的背根神经节细胞明显的轴突延伸(Handelmann等，1992年)。第四，外周神经损伤后apo-E显著升高(Muller等，1985年)。因此，apo-E似乎既参与轴突变性后的脂类清除又参与脂类向新生轴突的再分布以利于轴突再生，并参与脂类向许旺氏细胞分布以形成新生轴突的髓鞘(Boyles等，1989年)。
apo-E以同种型的三种不同形式存在，这三种同种型由在单一基因座上以共显性方式遗传的三个等位基因(E-2、E-3、E-4)编码，apo-E在AD病因学上的作用起自于apo-E与以下两种特征性的神经病理学损伤，即AD细胞外轴突斑块(代表B-A的沉积物)和细胞内神经纤维缠绕(代表称为tau的微管相关蛋白质细丝的关连。其综述请参见Weisgraber et al.，1994。
特别是，发现了apo-E4同种型和AD之间的遗传关系。E4纯合子个体比E4杂合子个体显示更大的发生AD的危险性，而E4杂合子又比无E4等位基因的个体显示更大的危险性。虽然存在这种关系的精确机制尚待阐明，但研究者们已提供了一些回答。它可能涉及此等位基因产生的蛋白质的生物效应，类似于在E2杂合子中apo-E与LDL受体结合亲合力降低导致血浆胆固醇水平升高的方式。Strittmatter等(1993)证实了apo-E4比其它两种同种型更有效地结合于导致老年斑形成增加的B-A肽，从而提出，并不是apo-E4的存在而是其它apo-E的缺乏导致了AD倾向增加(Strittmatter等，1994a)。
同样，关于apo-E与tau蛋白质(其磷酸化形式是神经纤维缠绕的主要构成要素)的同种型特异性相互作用，已证明是apo-E3而不是E4与tau的结合具有高合和力(Strittmatter等，1994a)。这种有区别的效应产生了如下假说：在正常情况下apo-E使tau蛋白稳定微管，有一个或两个apo-E4等位基因的患者apo-E3降低或缺乏，导致tau从微管上解离和在病理损伤的螺旋丝中磷酸化和聚合(Strittmatter等，1994b)。
尽管在AD病程方面作了大量的研究，但治疗方面罕见有研究，预防和/或延缓这种衰退性疾病发生的方法则实际上还没有。
本发明的目的是消除或减轻上述缺陷。
发明的概述
本发明提供预防和/或延缓动物早老性痴呆症(“AD”)发生的方法，包括给予动物植物甾醇组合物。
本发明还提供能有效预防或延缓AD发生的组合物，包括β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾烷醇。
附图的简单说明
用以下非限制性图说明本发明。
图1显示Morris Water Maze结果，表示为每个象限的时间(％)，其中平台在第1象限；
图2显示Morris Water Maze结果，表示为每个象限的时间(％)，其中平台从第1象限移去；
图3显示Morris Water Maze结果，表示为每个象限的时间(％)，其中平台在第3象限；
图4显示Morris Water Maze结果，表示为每个象限的时间(％)，其中平台从第3象限移去。
本发明的优选实施方案
植物甾醇是植物合成的甾醇样化合物，对人无直接营养价值。在植物中，它们是细胞功能所需要的，其作用方式类似于人所需要的胆固醇的作用方式。西方饮食平均每天包含360mg植物甾醇。最近，这些食物的植物甾醇得到大量关注，因为它们给多种哺乳动物(包括人)食用时可能具有抗癌性能和降低胆固醇的能力。在此之前，从未提出或研究过用植物甾醇预防和延缓AD的发生(治疗)。
植物甾醇在化学结构上与胆固醇极相似。主要的植物甾醇是β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾烯醇。其它包括豆甾烷醇(二氢β-谷甾醇)、链甾醇、chalinasterol、多孔甾醇、穿贝海绵甾醇和菜子甾醇。本发明组合物包括全部天然和合成形式的植物甾醇、全部氢化的相应物，即二氢甾醇(stanols)及其全部衍生物，包括异构体。
虽然植物甾醇可得自植物油和蔬菜，但其量未必达到体现本发明优点的足够浓度或正确的形式。本发明范围中提供的是通过给予动物(特别是人)植物甾醇组合物来预防和/或延缓AD发病的方法。需要时可将该组合物直接掺入食物补充剂、油类、维生素和治疗制剂中，下面作进一步描述。
为了广泛用于人群，不管其是否有AD遗传倾向，经仔细考虑可将本发明的植物甾醇组合物与一般易得到的食物类混合。或者，可将这些组合物按一种更强有力的方案选择性地给予处在将发生特殊形式AD(即家族性AD)危险中的个体。一种较佳的形式是将组合物与选自红花油、芝麻油、玉米油、米糠油、橄榄油和菜油的植物油混合。补充剂橄榄油是最佳的，因为此油应用广泛，植物甾醇和聚不饱和脂肪酸含量低。或者，本组合物可掺入饱和脂肪(猪油)为基础的产品或使糕饼松脆的油如奶油或人造黄油。
在另一个实施方案中，本组合物可与其它常规的或草本植物产品一起掺入制剂中，用于预防或治疗AD。这些产品包括(但不限于)胆碱酯酶抑制剂如AriceptTM、risperidone(精神分裂症药物，现发现有助于控制AD有关的侵袭行为)和可能的促进记忆的草药如银杏。
本发明的基础是通常在预防和/或延缓AD发病中使用植物甾醇。达到此目的的较佳组合物列于下面，它们并不解释为对本发明范围的限制，因为很多植物甾醇单独或以各种组合的形式都能得到同样好的结果。
本发明的优选植物甾醇组合物包含β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾烷醇(谷甾醇)，任意地可包含campestanol，以及它们的类似物/衍生物。在一个实施方案中，本发明的组合物包含至少10％菜油甾醇和75％以下β-谷甾醇。在另一个优选实施方案中，本发明的组合物包含10-25％菜油甾醇、10-40％豆甾烷醇和45-75％β-谷甾醇。任意地可有1-10％(更佳为3％)campestanol。
在另一个优选的实施方案中，本发明的组合物包含如下比例的植物甾醇：β-谷甾醇(1)；菜油甾醇(0.2-0.4)和豆甾烷醇(0.2-0.5)。更佳的是，菜油甾醇和豆甾烷醇一起为β-谷甾醇总浓度的至少50％。本发明的组合物包含如下比例的三种关键植物甾醇：
      β-谷甾醇    菜油甾醇    豆甾烷醇
         1          0.354       0.414
         1          0.330       0.203
         1          0.268       0.299
发现其它优选的组合物具有如下植物甾醇分布(％)：
      β-谷甾醇      菜油甾醇      豆甾烷醇
        62.7           16.6           23.2
        64.7           16.4           17.2
        60.0           13.6           16.3
        32.0           14             29
        25.5           7              42.5
        51             14             19
        61             17             23
但是，应理解，在这些优选组合物中的任何一种均可含有其它植物甾醇。同样，需要时佐剂或载体可构成组合物的一部分。剂量可有些变动，这取决于本发明组合物的给药方式。最好是每天给药1.0g至3.0g。
本发明的方法中，通过给予上面详述的植物甾醇组合物来预防AD或延缓其发病。通过饮食给予植物甾醇提高学习能力和记忆、降低年龄依赖性突触丧失和减缓神经变性过程的确切机制不明，尽管申请人在下面详细列出了几种理论。这些理论并不是为了限制本发明的范围，相反，是为了表明植物甾醇在动物脂类内环境稳定上的复杂性。
如上面本发明背景中所讨论的，apo-e4表型已被证明在人类代表AD的一个重要危险因子。还有一些证据表明AD和心血管疾病之间的关系(Kalaria，1997)。下面提供对apo-E作用的概述，以及本发明apo-E分型的信息目的是了解所提出的植物甾醇作用机制。
Apo-E
Apo-E只是一种称作载脂蛋白的脂类载体分子。这些蛋白质有三种主要的功能。第一，它们通过与磷脂的相互作用(复合物的核心是脂类，外壳是载脂蛋白)而帮助高度疏水性的胆固醇和甘油三酯溶解，使这些脂类能被转运。第二，载脂蛋白调节脂类与酶(如脂蛋白脂肪酶和卵磷脂-胆固醇酰基转移酶)的反应。第三，载脂蛋白与细胞表面受体结合，从而决定了其它脂蛋白成分(令人注意的是胆固醇)的摄取部位和降解速率。
在载脂蛋白中，Apo-E的独特之处在于它与神经组织有特殊关系。在发育过程中或在外周神经系统损伤后，apo-E在髓鞘质和神经细胞膜的修复、生长和维持上起着协调胆固醇代谢和再分布的作用(Boyles等，1989，同上)。在中枢神经系统，关于apo-E功能的了解少得多，这使发现apo-E4是AD的可能标志(在上面背景部分讨论的)变得更为神秘。
Apo-E小鼠
对人和动物的一些研究已显示植物甾醇具有降低胆固醇的作用，包括在Apo-E缺乏的小鼠中植物甾醇组合物的抗动脉硬化作用(PCT专利申请PCT/CA95/00555，1996年4月4日公开，在此引为参考；及Moghadasian等，1996)。最近证明，apo-E缺乏小鼠是研究AD病理生理的合适的动物模型。因为在apo-E缺乏小鼠中，植物甾醇阻止了非典型的胆固醇分布(皮肤、腱、主动脉和主要的动脉)，因此，植物甾醇在决定胆固醇的组织分布上，甚至在独立于apo-E表型的脑细胞中的分布上可能具有重要的作用(申请者正进行研究)。
乳糜微粒残余物
乳糜微粒是主要由甘油三酯和少量磷脂、游离胆固醇和酯类构成的最大的脂蛋白颗粒。在对饮食脂肪和胆固醇的反应中，它们在肠中或肠细胞中合成，并进入肠系膜和胸导管淋巴液中，在该处获得apo-E。脂蛋白脂肪酶(“LL”)催化乳糜微粒的甘油三酯水解，其中产生的游离脂肪酸主要被脂肪细胞摄取，剩下的小部分脂蛋白(富含胆固醇)称作乳糜微粒残余物(“CR”)。CR选择性被肝脏apo-E依赖性受体机制(低密度脂蛋白相关受体，“LRP受体”)从血浆中迅速清除，胆固醇用于膜或脂蛋白的生物合成或作为游离胆固醇分泌出来或代谢成胆酸。对于拟内化的颗粒来说，apo-E的存在被认为是关键性的。肝脏和脑细胞特别富含这种LRP受体。
极低密度脂蛋白
极低密度脂蛋白(“VLDL”)在结构上与乳糜微粒相似，但较小，含较少的甘油三酯，但相对较多的胆固醇、磷脂和蛋白质(apo-E、apo-C和apo-B100的混合)。VLDL主要在肝中合成，它的主要功能是运载甘油三酯。VLDL颗粒大小迥异，但被LL或肝脏脂肪酶(“HL”)脂解的结果产生均匀的较小颗粒：VLDL残余物(也称作中间密度脂蛋白)和低密度脂蛋白(“LDL”)。
脂蛋白脂肪酶
至少有两种不同的甘油三酯脂肪酶。肝外脂肪酶即脂蛋白脂肪酶(“LL”)主要见于脂肪组织和骨骼肌。肝脂肪酶(“HL”)位于肝细胞的内皮。LL和HL均参与CR和VLDL的分解代谢。
Apo-E受体
有四种已知的受体参与apo-E/脂蛋白(乳糜微粒、VLDL或LDL)从血浆转运到细胞中：低密度脂蛋白受体(“LDL受体”)、LRP受体(定义如上)、新近描述的极低密度脂蛋白受体(“VLDL受体”)和上皮糖蛋白330受体(“GP330受体”)。所有这四种受体均在脑中发现。活化型α2-巨球蛋白(＂α2/M＂)受体与LRP受体相同这一发现证明LRP受体是称作α2M/LRP受体的多因子受体蛋白。此受体在体内几乎所有细胞中表达，特别是肝脏和脑，靶向酶、蛋白质、CR和LDL胆固醇，似乎在蛋白分解、免疫、细胞增殖和细胞死亡中起着复杂的作用。
关于apo-E向神经细胞的转运，已发现不仅神经元富含表面LRP受体，AD斑中LRP受体免疫反应性增强(Rebeck等，1993)，而且apo-E/LRP复合物也位于人脑的老年斑中(Ikeda等，未发表资料)。LRP不仅与含apo-E的残余物结合，而且与重要的乳糜微粒代谢酶(例如LL)相互作用。这后一种结合不依赖于apo-E(Beisiegel等，1991)。值得注意的是植物甾醇在apo-E缺陷小鼠中具有防止动脉粥样硬化斑块形成的能力。
在肝内，由LL或apo-E依赖性受体机制，即LRP或α2M/LRP受体，对CR进行分解代谢。
植物甾醇对AD的可能作用机制
植物甾醇通过三种相互关联的基本机制对AD预防和发病显示有益的效应：
(1)植物甾醇通过涉及LL变构激活和LL与CR复合物形成的复杂(目前尚未完全清楚)机制经肝LRP增加肝中apo-E非依赖性CR的清除；和/或
(2)植物甾醇降低apo-E/脂蛋白复合物循环和/或降低apo-e依赖性受体介导的apo-E/脂蛋白复合物摄取到全身细胞中，特别是脑细胞中；和/或
(3)植物甾醇减少内皮细胞脱落和维护血脑屏障内皮功能。
植物甾醇结合于循环乳糜微粒和脂蛋白，并对血浆内的这些颗粒和对诸如LL和HL等酶的理化性质具有修饰作用。换言之，本申请人提出，植物甾醇起载脂蛋白功能，从而改变循环中乳糜微粒和脂蛋白的组成和功能，并且还通过LRP受体间接地影响许多其它关键的细胞功能。
关于第一种机制简单地说，植物甾醇与脂蛋白即乳糜微粒结合，阻止了这些颗粒与α2M/LRP受体的结合，继而阻止了这些颗粒通过细胞屏障进入脑内。因此，神经元细胞中apo-E的量会降低，这对apo-E4纯合子个体来说特别重要。
此外，植物甾醇通过变构修饰提高LL的活性，从而使富含植物甾醇的乳糜微粒被此酶迅速代谢。然后通过apo-E非依赖性肝细胞CR受体(与LRP受体相同)使CR从循环中迅速清除。如上所述，LL是甘油三酯(乳糜微粒和VLDL)代谢中所涉及的主要酶，它具有羧基(“C”)端和氮(“N”)端。学者们对其调节、结构和功能关系及C-末端脂蛋白脂肪酶功能域(经LRP受体诱导CR分解代谢)已有相当多的了解，本申请人关注的重点在于apo-E非依赖性脂蛋白分解代谢的可能性。
据信，本发明的植物甾醇组合物通过变构修饰改变了脂蛋白的理化性质。因而，受植物甾醇影响的LL活性可更有效地利用酶物质，通过“N”末端催化位点催化甘油三酯的分解代谢，而“C”末端功能域可起CR配基的作用。然后，具有低脂肪酸肝流量的“C”LL功能域-CR复合物被与清除剂受体(α2M/LRP)相同的受体内化，并被肝脂肪酶分解代谢，伴随着CR脂肪酸酯明显的进一步降解。
换言之，有可能是植物甾醇促进了LL“C”末端配基与CR结合，从而促进CR的分解代谢。这些过程不依赖于apo-E，因此不应引起LDL受体上调。
关于第三种然而是补充的机制，即植物甾醇减少细胞脱落(内皮效应)，申请人发现，正常和高胆固醇血症大鼠饮食中给予植物甾醇组合物，内皮细胞脱落分别减少50-70％。考虑到在血脑屏障中和在不良的致损伤颗粒进入脑(可导致AD)中时内皮所起的作用，这是一个关键性的发现。此外，整联蛋白，一类不同的糖蛋白受体，与细胞-细胞外基质(“ECM”)相互作用有关。脑中整联蛋白表达的分布可能与apo-E内皮下外显率的增高有关联。ECM指导了覆盖的内皮的生长、分化和功能(Getlenburg等，1990)。
本申请人还相信，植物甾醇类可修饰膜，包括血脑屏障。因此，潜在毒性物质如β-淀粉样蛋白前体穿过可能损伤的膜的跨膜转运，可导致迟发性AD。
另外，apo-E缺乏的小鼠脑中受到氧化应激(Mathews等，1996)。这可能与AD有关。本申请人目前进行的研究发现，植物甾醇类可能具有抗氧化剂活性。因此，这些甾醇可保护脑不受导致AD迟发性发病的氧化应激影响或甚至防止AD。
植物甾醇的可能作用方式概括于下：
(1)酶效应
LL的变构修饰和脂蛋白复合物中分子构型的改变
(2)乳糜微粒和CR
·LL的刺激→富含LL的CR
·抑制HL
·CR→VLDL或LRP受体的非apo-E依赖性摄取，这种摄取利用LL单体的C-末端作为受体结合和/或内化的配基，HL单体通过LDL受体抑制CR的摄取
·进入肝细胞光滑内质网
·刺激7-α-羟化酶→增加胆酸合成
·增加胆固醇的胆汁排出，降低肝脏胆固醇含量，以不依赖LDL代谢的方式(即VLDL或LDL受体可被CR抑制)提高HMG-CoA活性
·减少脱落的内皮细胞
·形成亲水性较高的膜
下面提供非限制性实施例以说明本发明的各方面。研究特别显示apo-E缺乏小鼠动脉粥样硬化发生的加速可因给予植物甾醇组合物而延缓，在AS损害发展上有所改善。“FCP-3P1”指本发明范围内较佳的组合物。
实施例1
用FCP-3PI改善apo E缺乏小鼠的学习能力和记忆
引言：
Apo E缺乏(apo E-KO)小鼠被称作动脉粥样硬化、黄瘤病和早老性痴呆症的模型(16-18)。Apo E缺乏小鼠是用于研究载脂蛋白E在脑功能上的重要性的有用系统。在这些研究中，一些着重于apo-E缺乏小鼠的学习能力、工作能力和参照记忆(19、20)。这些小鼠中，海马受损后的海马突触的密度和再生能力降低(21、22)。我们通过在食物中添加植物甾醇混合物FCP-3PI有效地延缓/预防了上述前两种疾病(11，23)。本研究的目的是评估食物中添加2％(w/w)用量的FCP-3PI33周对apo-e缺乏小鼠的学习能力和记忆的作用。
假设
食物中添加FCP-3PI，能改善apo-E缺乏小鼠的学习能力和记忆。
材料和方法
从Jackson实验室购得24只2周龄雄性apo-E缺乏小鼠和类似的24只野生型配对小鼠及其养母。4周龄时，将小鼠断奶，按体重和血浆总胆固醇水平配对分成4组。各组以如下饲料喂养33周。
第一组(N＝10)：喂以添加2％(w/w)FCR-3PI的含4.5％(w/w)脂肪的正常小鼠食料(NC)的apo-E缺乏小鼠。
第二组(N＝10)：喂以添加2％(w/w)FCR-3PI的NC的野生型小鼠。
第三组(N＝10)：喂以NC的apo-E缺乏小鼠。
第四组(N＝10)：喂以NC的野生型小鼠。
将动物单只圈养(每只小鼠给一个大口空瓶玩耍)，每天观察它们的身体活动和行为，每周记录体重。在研究的第0、4、17和29周从尾静脉取血，用酶学方法测定胆固醇水平。开始实验饮食后33周，如前所述用Morris Water Maze技术测试小鼠的行为。用摄像机记录试验过程，用计算机系统分析结果。研究结束后，将小鼠处死，其脑固定在10％福尔马林中，用于组织化学评估。将石蜡包埋的脑切片用如下试剂染色：a)苏木精-曙红(H&E)，为组织学检查的标准染色方法；b)刚果红，用于淀粉样蛋白斑块形成的评估；c)Bielchowsky染色，用于轴突的评估，d)Luxol坚牢蓝，用于检测髓鞘。此外，在与迈阿密大学合作中，将脑染色(免疫组织化学)，用于检测神经变性疾病的潜在标记物，包括胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFA)、淀粉样前体蛋白(APP)、神经丝(NF)和泛素。第1组的一个小鼠和第3组的一个小鼠因体重减轻和摄食减少而在实验的早期进行安乐处死。第2组的一个小鼠和第4组的一个小鼠撤出研究以与其它实验组配对。实验中，第1组的一个小鼠因皮损而与第17周处死，第3组的一个小鼠在第14周可能因心脏疾病突然死亡。在训练的第一天，一个apo E-KO小鼠(第3组#15)在Morris水迷路(Morris water maze)过程中有两次惊厥发作。
结果：
A：体重
每周记录小鼠体重。结果总结于表1。试验过程中所有小鼠显然都增重。这表明所有4组小鼠中生长和发育都相似。小鼠食料中添加FCR-3PI对体重无影响。
B：血浆胆固醇水平
在开始时和在实验过程中测定血浆总胆固醇水平。结果总结于表2。小鼠食料中添加FCR-3PI伴有Apo E-KO小鼠血浆总胆固醇浓度的显著降低，这与我们以前的发现相一致。另一方面，小鼠食料中添加充FCP-3PI对野生型小鼠血浆总胆固醇水平影响极小。
C：Morris水迷路试验分析
所有4组小鼠均用已建立的Morris水迷路技术进行行为测试。数据的计算机分析显示在学习能力和记忆方面小鼠组间无明显差异。图1-4总结了从各组小鼠得到的结果。图1表示每组小鼠在水池的每个象限中游到定位于平台所花费的时间百分数。图2表示每组小鼠在接受训练后为寻找平台在水池的每个象限中所花费的时间百分数。这表示小鼠的空间记忆。在这方面，喂饲FCR-3PI的野生型小鼠显示比其它组动物具有更好记忆的倾向。如图2所示，喂饲FCR-3PI的野生型小鼠在第1象限为寻找平台而花费较多的时间(在训练期此处放置平台)。图3也显示喂饲FCR-3PI的野生型小鼠在放置平台位置(第3象限)方面的学习能力略好。图4显示小鼠在试验取第3象限(相反探索试验)时组间无差异，表明在所有4组小鼠中记忆力均差。
D：组织化学
对各组小鼠的脑作组织学检查。苏木精-曙红染色显示4组动物脑中均有轻度退行性变化。刚果红染色4组动物脑中均未显示淀粉样斑块的形成。同样，在脑髓鞘和轴突的鉴别特征方面，Bielchowsky和Luxol坚牢蓝染色未揭示4组小鼠间有任何明显的差异。免疫组织学评估由圣保罗医院的一位独立神经病理学家进行。一旦评估结束即提交结果。
评论
本研究表明，添加FCR-3PI(2％w/w)明显地降低apo E-KO小鼠的血浆总胆固醇水平。FCR-3PI的这一剂量无明显副作用，各组动物均能很好耐受。与其它组相比，野生型小鼠的饮食中添加FCR-3PI后伴有学习能力和记忆的改善。
 表  1   开始时和实验过程中小鼠的体重(平均值±SD，g)组别      第0周        第4周        第8周      第12周       第16周      第20周      第24周       第33周Apo E-KO  18.2±1.9    21.8±1.1    23.6±1.0    25±0.8     25.3±1.8    27±0.9     27±1.1     28.8±1.8FCP处理Apo E-KO  18.2±2.4    22.3±2.2    24.2±2.2    25.4±2.1   25.2±3.3    27.1±1.4   28±1.3     29.5±1.4对照野生型    17.9±1.4    23±1.3      24.7±1.3    26±1.3     27.2±1.5    27.4±1.3   27.9±1.5   29.4±1.8FCP处理野生型    18.2±1.4    23.5±1.2    24.5±0.9    26.4±0.9   27.7±0.9    27.8±0.9   28.4±1.1   30.5±1.1对照
表  2    开始时和实验过程中血浆总胆固醇水平(平均值±SD，mmol/L)
组  别           第0周       第4周        第17周         第29周Apo E-KO FCP处理  12.6±2.2    11.5±2.6*   14.6±2.2*  15.1±2.8*Apo E-KO对照      13.2±2.5    16.4±2.4     19.7±3.5     20.3±2.2野生型FCP处理        2±0.2     1.6±0.2      1.5±0.2      1.6±0.2野生型对照           2±0.1     1.6±0.1      1.6±0.2      1.5±0.2
*P＜0.002(与对照组相比)
                          参考文献1.  ELSHOURBAGY等(1985)：在大鼠和戎体内载脂蛋白E mRNA富集于脑和
肾上腺及肝脏，也存在于其它外周组织，Proc.Natl.Acad.Sci.USA
82：203-207。2.  PITAS等(1987)：中枢神经系统中的脂蛋白及其受体：脑脊液中脂蛋白的特
征和脑中载脂蛋白B、E(LDL)的鉴定，J.Biol.Chem.262：14352-14360。3.  HANDELMANN等(1992)：体内试验中载脂蛋白E、β-极低密度脂蛋白和
胆固醇对象兔背根神经节神经元树突延伸的作用，J.Lipid Res.33：1677-
1688。4.  MULLER等(1985)：在再生而不是非再生哺乳动物神经中积聚的37,000道
尔顿特殊蛋白质，Science 228：499-501。5.  BOYLES等(1989)：载脂蛋白E、载脂蛋白A-1和低密度脂蛋白受体在大鼠
坐骨神经再生和髓鞘再形成中胆固醇转运上的作用，J.Clin.Invest.
83：1015-1031。6.  WEISGRABER等(1994)：脂蛋白、神经生物学和早老性痴呆症：载脂蛋白E
的结构和功能，Curr.Opin.Struct.Biol.4：507-515。7.  STRITTMATTER等(1993)：人载脂蛋白E与合成淀粉样β-肽的结合：同种
型特异效应和对迟发型早老性痴呆症的影响，Proc.Natl.Acad.Sci.USA
90：8098-8102。8.  STRITTMATTR等(1994a)：载脂蛋白E与微管相关蛋白tau的同种型特异性
相互作用，对早老性痴呆症的影响，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91：11183-
11186。9.  STRITTMATTER等(1994b)：假说：早老性痴呆症脑中微管不稳定性和成对
螺旋丝形成与载脂蛋白E基因型有关，Exp.Neurol.125：163-171。10. KALARIA等(1997)：Society Neurosci.23：2215。11. MOGHADASIAN等(1996)：Arteriosclero.Throm.Vasc.Biol.17：119-126.12. REBECK等(1993)：散发性早老性痴呆症中载脂蛋白E：等位基因变异和受
体相互作用，Neuron 11(4)：575-580。13. BEISIEGEL等(1991)：脂蛋白脂肪酶促进乳糜微粒与低密度脂蛋白受体相关
蛋白的结合Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88：8342-8346。14. GETLENBURG等(1990)：组织基质：细胞动力和激素作用，Endocrine
 Review 11：399。15.  MATHEWS等(1996)：脑研究718：181-184.16.  Nakashime等：Arterioscerol Throm.1994；14：133-140.17.  van Ree等：动脉粥样硬化1995；112：237-243.18.  Oitzl等：脑研究1997：752：189-196.19.  Gordon等：神经科学通讯2995；199：1-4.20.  Gordon等：分子化学和神经病理学1996：97-103.21.  Masliah等：神经生物学衰老1994；15S-46.22.  Poirier J.神经科学进展1994；17：525-530.23.  Moghadasian等：加拿大心脏学杂志1997；13：81B。24.  Morris R.J.神经科学方法1984；11：47-60.

Claims (10)

1.预防和/或延缓动物早老性痴呆症发病的方法，其特征包括给予动物植物甾醇组合物。
2.如权利要求1所述的方法，其中动物是人。
3.如权利要求1所述的方法，其中组合物包含β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾烷醇。
4.如权利要求1所述的方法，其中组合物包含β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾烷醇，且其中菜油甾醇和豆甾烷醇共包含至少50％浓度的β-谷甾醇。
5.如权利要求1所述的方法，其中组合物包含β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾烷醇，且其中组合物包含10-25％菜油甾醇、10-40％豆甾烷醇和45-75％β-谷甾醇。
6.如权利要求1所述的方法，其中组合物包含β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾烷醇和campestanol。
7.治疗上有效的预防早老性痴呆症的产品，包含β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾烷醇。
8.如权利要求7所述的产品，其中菜油甾醇和豆甾烷醇共包含至少50％浓度的β-谷甾醇。
9.如权利要求7所述的产品，其中包含10-25％菜油甾醇、10-25％豆甾烷醇和45-75％β-谷甾醇。
10.如权利要求7所述的产品，其中还包含campestanol。
CN98804259A 1997-12-18 1998-12-18 预防和延缓早老性痴呆症发病的方法和组合物 Pending CN1252724A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/993,901 US5985936A (en) 1997-12-18 1997-12-18 Method of preventing and delaying onset of Alzheimer's disease and composition therefor
US08/993,901 1997-12-18

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1252724A true CN1252724A (zh) 2000-05-10

Family

ID=25540052

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN98804259A Pending CN1252724A (zh) 1997-12-18 1998-12-18 预防和延缓早老性痴呆症发病的方法和组合物

Country Status (18)

Country Link
US (1) US5985936A (zh)
EP (1) EP0967982A2 (zh)
CN (1) CN1252724A (zh)
AU (1) AU1656099A (zh)
BG (1) BG103740A (zh)
BR (1) BR9807577A (zh)
CA (1) CA2281710A1 (zh)
EE (1) EE9900354A (zh)
GE (1) GEP20022783B (zh)
HU (1) HUP0100737A3 (zh)
LT (1) LT4801B (zh)
LV (1) LV12438B (zh)
MD (1) MD1920F2 (zh)
NO (1) NO993979L (zh)
PL (1) PL335421A1 (zh)
RU (1) RU2173151C2 (zh)
SK (1) SK112999A3 (zh)
WO (1) WO1999032097A2 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102421304A (zh) * 2009-03-12 2012-04-18 N.V.努特里西阿公司 用于治疗阿尔茨海默病的豆甾醇
CN102813659A (zh) * 2012-08-21 2012-12-12 贵阳中医学院 20α-二甲胺基- 2α-羟基-3β-惕洛酰胺基-5α-孕甾烷的用途

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060141036A1 (en) * 1997-12-12 2006-06-29 Andrx Labs Llc HMG-CoA reductase inhibitor extended release formulation
US20020107173A1 (en) * 1999-11-04 2002-08-08 Lawrence Friedhoff Method of treating amyloid beta precursor disorders
AU780624B2 (en) * 1999-11-04 2005-04-07 Andrx Corporation Method of treating amyloid beta precursor disorders
CN1436047A (zh) 2000-04-14 2003-08-13 马尔斯公司 促进血管健康的组合物和方法
US6982251B2 (en) * 2000-12-20 2006-01-03 Schering Corporation Substituted 2-azetidinones useful as hypocholesterolemic agents
US20030013692A1 (en) * 2001-01-19 2003-01-16 Gullans Steven R. Methods of treating neurological disorders
WO2002064735A2 (en) * 2001-02-12 2002-08-22 Akzo Nobel N.V. Methods for improving the treatment of major depression by genotyping for the gene for apolipoproteine e4
US6399310B1 (en) 2001-02-12 2002-06-04 Akzo Nobel N.V. Methods for improving the therapeutic response of humans having major depression and carrying the gene for apolipoprotein E4
US20030105082A1 (en) * 2001-12-03 2003-06-05 Murphy Greer Marechal Methods for improving the therapeutic response of humans having major depression and carrying the gene for apolipoprotein E4
DE10154221A1 (de) * 2001-11-07 2003-05-15 Max Delbrueck Centrum Mittel zur Behandlung von Läsionen des Nervensystems
FR2848452B1 (fr) * 2002-12-12 2007-04-06 Aventis Pharma Sa Application des inhibiteurs de recapture intestinale des acides biliaires pour la prevention et le traitement de la maladie d'alzheimer
WO2004081002A1 (en) 2003-03-07 2004-09-23 Schering Corporation Substituted azetidinone compounds, formulations and uses thereof for the treatment of hypercholesterolemia
US7208486B2 (en) 2003-03-07 2007-04-24 Schering Corporation Substituted azetidinone compounds, processes for preparing the same, formulations and uses thereof
JP2006519869A (ja) * 2003-03-07 2006-08-31 シェーリング　コーポレイション 置換アゼチジノン化合物、置換アゼチジノン化合物を調製するためのプロセス、それらの処方物および使用
US20080182801A1 (en) 2003-12-22 2008-07-31 Btg International Limited Core 2 glcnac-t inhibitors
GB0329667D0 (en) * 2003-12-22 2004-01-28 King S College London Core 2 GlcNAc-T inhibitor
GB0513881D0 (en) * 2005-07-06 2005-08-10 Btg Int Ltd Core 2 GLCNAC-T Inhibitors III
JP2007526764A (ja) * 2004-01-22 2007-09-20 ジェネッサンス ファーマシューティカルズ，インコーポレイティド アルツハイマー病の発症年齢に関連するａｐｏｅ遺伝子マーカー
EP1814575A4 (en) * 2004-11-24 2010-07-07 Neopro Labs Llc METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING DISORDERS
GB0512726D0 (en) * 2005-06-22 2005-07-27 Btg Int Ltd Multiple sclerosis therapy and diagnosis
GB0513883D0 (en) * 2005-07-06 2005-08-10 Btg Int Ltd Diagnosis of Atherosclerosis
GB0513888D0 (en) * 2005-07-06 2005-08-10 Btg Int Ltd Core 2 GLCNAC-T Inhibitors II
MX2010009649A (es) * 2008-03-27 2010-12-17 Evotecv Neurosciences Gmbh Metodos para tratar trastornos utilizando un antagonista selectivo del subtipo nr2b de nmda.
US10383886B2 (en) 2010-01-11 2019-08-20 Phoenix Biotechnology, Inc. Method of treating neurological conditions with oleandrin
US9011937B2 (en) 2010-11-22 2015-04-21 Phoenix Biotechnology, Inc. Method of treating neurological conditions with extract of Nerium species or Thevetia species
US10307450B2 (en) 2010-01-11 2019-06-04 Phoenix Biotechnology, Inc. Method of treating neurological conditions with extract of Nerium species or Thevetia species
WO2012149111A1 (en) 2011-04-26 2012-11-01 The Regents Of The University Of California Methods of promoting cns neuronal repair by inhibiting lrp-1
WO2015123617A1 (en) * 2014-02-14 2015-08-20 Arizona Board Of Regents For The University Of Arizona Method for reducing bcl2 gene expression
US10702567B2 (en) 2016-09-14 2020-07-07 Phoenix Biotechnology, Inc. Method and compositions for treating viral infection
US10596186B2 (en) 2016-09-14 2020-03-24 Phoenix Biotechnology, Inc. Method and compositions for treating viral infections
RU2758376C2 (ru) 2017-09-14 2021-10-28 Феникс Байотекнолоджи, Инк. Способ и улучшенная нейропротекторная композиция для лечения неврологических патологических состояний
US11331291B2 (en) 2017-09-14 2022-05-17 Phoenix Biotechnology, Inc. Method of and improved composition for treating triterpene-responsive conditions, diseases or disorders
EP3842039A1 (en) * 2019-12-24 2021-06-30 Folium Biosciences Europe B.V. Food supplement comprising cannbinoids and phytosterols for alzheimer
US20230263809A1 (en) 2019-12-24 2023-08-24 Folium Biosciences Europe B.V. Food supplement for alzheimer
US11806359B2 (en) 2020-03-31 2023-11-07 Phoenix Biotechnology, Inc. Method and compositions for treating Coronavirus infection

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1203515B (it) * 1987-02-26 1989-02-15 Indena Spa Complessi di saponine con fosfolipidi e composizioni farmaceutiche e cosmetiche che li contengono
WO1994018994A1 (en) * 1993-02-23 1994-09-01 Pharmakon Usa, Inc. Therapeutic herbal composition
US5589182A (en) * 1993-12-06 1996-12-31 Tashiro; Renki Compositions and method of treating cardio-, cerebro-vascular and alzheimer's diseases and depression
BR9509119A (pt) * 1994-09-29 1997-10-28 Univ British Columbia Processo para o isolamento de uma composição de fitoesteróis a partir de um sabão de polpa composição diminuidora de colesterol e produto terapeuticamente eficaz para prevenir ou tratar aterosclerose ou dislipidemias primárias ou secundárias
CN1179903A (zh) * 1996-10-09 1998-04-29 李辉 营养丝米粉
ES2285772T3 (es) * 1997-05-15 2007-11-16 University Of Washington Composicion y metodos para tratar la enfermedad de alzheimer y otras amiloidosis.

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102421304A (zh) * 2009-03-12 2012-04-18 N.V.努特里西阿公司 用于治疗阿尔茨海默病的豆甾醇
CN102813659A (zh) * 2012-08-21 2012-12-12 贵阳中医学院 20α-二甲胺基- 2α-羟基-3β-惕洛酰胺基-5α-孕甾烷的用途

Also Published As

Publication number Publication date
PL335421A1 (en) 2000-04-25
MD1920F2 (ro) 2002-05-31
GEP20022783B (en) 2002-09-25
CA2281710A1 (en) 1999-07-01
LV12438A (en) 2000-03-20
US5985936A (en) 1999-11-16
WO1999032097A2 (en) 1999-07-01
LV12438B (en) 2000-09-20
RU2173151C2 (ru) 2001-09-10
EP0967982A2 (en) 2000-01-05
HUP0100737A3 (en) 2002-07-29
BG103740A (en) 2000-05-31
WO1999032097A3 (en) 1999-09-02
AU1656099A (en) 1999-07-12
MD990262A (en) 2000-06-30
NO993979L (no) 1999-10-13
SK112999A3 (en) 2001-11-06
BR9807577A (pt) 2001-08-07
EE9900354A (et) 2000-02-15
NO993979D0 (no) 1999-08-18
LT4801B (lt) 2001-06-25
HUP0100737A2 (hu) 2001-09-28
LT99114A (lt) 2001-01-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1252724A (zh) 预防和延缓早老性痴呆症发病的方法和组合物
Lecerf et al. Dietary cholesterol: from physiology to cardiovascular risk
Stein et al. Lipid transfer proteins (LTP) and atherosclerosis
Green et al. Developmental changes in rat brain membrane lipids and fatty acids: the preferential prenatal accumulation of docosahexaenoic acid
Choi et al. Sphingosine phosphate lyase insufficiency syndrome (SPLIS): a novel inborn error of sphingolipid metabolism
Chen et al. Loss of modifier of cell adhesion reveals a pathway leading to axonal degeneration
CN1921846A (zh) 采用乙酰胆碱酯酶抑制剂和( 3ar)－1,3a,8－三甲基－1, 2, 3, 3a, 8,8a－六氢吡咯[2,3－b]吲哚－5－yl－苯基氨基甲酸酯的组合治疗
US20170135391A1 (en) Agents and Mechanisms for Treating Hypercholesterolemia
Ghorbanihaghjo et al. Effect of fish oil supplements on serum paraoxonase activity in female patients with rheumatoid arthritis: a double-blind randomized controlled trial
Levy et al. Intraluminal and intracellular phases of fat absorption are impaired in essential fatty acid deficiency
Saris et al. Ketogenic diets and Ketone suplementation: A strategy for therapeutic intervention
Deng et al. HDL and cholesterol ester transfer protein (CETP)
Maity-Kumar et al. Validation of Mct8/Oatp1c1 dKO mice as a model organism for the Allan-Herndon-Dudley Syndrome
Galloway et al. Synergistic effects of high fat feeding and apolipoprotein E deletion on enterocytic amyloid-beta abundance
Naithani et al. The role of ketone bodies in improving neurological function and efficiency
Abdelhafez Histological, histochemical and ultrastructural studies on the effect of Deca-Durabolin and whey protein isolate on cardiac muscle in adult male albino rats
MXPA99007622A (en) Method of preventing and delaying the onset of alzheimer's disease and composition therefor
RU2192048C2 (ru) Способ моделирования инфарктоидной кардиовазопатии у крыс
CZ9902921A3 (cs) Léčivo pro profylaxi nebo zpomalení rozvoje Alzheimerovy choroby a terapeuticky účinný produkt k prevenci Alzheimerovy choroby
Welty Familial hypobetalipoproteinemia and abetalipoproteinemia
JP2001512494A (ja) アルツハイマー病を予防するまたはその発病を遅延させる方法およびそのための組成物
Fungwe et al. Stimulation of Adipose Tissue Lipoprotein Lipase Activity Improves Glucose Metabolism and Increases High Density Lipoprotein Cholesterol in the Spontaneously Hypertensive Stroke-Prone Rat
US9757393B2 (en) Derivatives of ergostatrien-3-β-ol from antrodia camphorata and antiglycemic, antihyperlipidemic and decreasing hepatic fat use thereof
Martinez The fundamentals and practice of docosahexaenoic acid therapy in peroxisomal disorders
Nanda et al. Ketogenic Diets: Answer to Life-Threatening Neurological Diseases

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication