CN118084868A - 稠环化合物 - Google Patents

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CN118084868A CN202410281112.2A CN202410281112A CN118084868A CN 118084868 A CN118084868 A CN 118084868A CN 202410281112 A CN202410281112 A CN 202410281112A CN 118084868 A CN118084868 A CN 118084868A
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S·马尔霍特拉
S·多
J·特雷特
信建峰
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F Hoffmann La Roche AG
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Abstract

本发明涉及如本文所详述的具有式(I)的稠环化合物，其用于抑制Ras蛋白，以及包含这些化合物的组合物及通过其给药进行治疗的方法。

Description

稠环化合物
本申请是申请日为2019年11月8日、申请号为201980026181.6、发明名称为“稠环化合物”的中国发明专利申请的分案申请。
相关专利申请的交叉引用
本专利申请要求提交于2018年11月9日的国际专利申请序列号PCT/CN2018/114788的优先权，该国际专利申请全文以引用方式并入本文。
技术领域
本发明涉及如本文所详述的具有式(I)的稠环化合物，其用于抑制Ras蛋白，诸如K-Ras、H-Ras和N-Ras，以及包含这些化合物的组合物及通过其给药进行治疗的方法。
背景技术
Ras是一种小分子GTP结合蛋白，在中枢生长信号转导通路中用作核苷酸依赖性开关。响应于细胞外信号，Ras在鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)尤其是SOS1蛋白催化下由GDP结合状态(RasGDP)转换为GTP结合(RasGTP)状态。活性RasGTP通过与效应物(包括Raf、PI3K和Ral解离刺激因子)的直接相互作用来介导其多种生长刺激作用。然后，Ras固有的GTPase活性将GTP水解为GDP，从而终止Ras信号转导。Ras GTPase活性可通过与GTPase活化蛋白(GAP)的相互作用而得到进一步提高，该GAP包括神经纤维蛋白1肿瘤抑制因子。
突变Ras的GTPase活性下降，导致其处于活性构象的时间延长，从而促进了Ras依赖性信号转导以及癌细胞存活或生长。影响其与GAP发生相互作用或将GTP转换回GDP的能力的Ras突变将导致该蛋白的活化时间延长，从而导致令细胞继续生长和分裂的信号延长。由于这些信号导致细胞生长和分裂，因此过度活跃的Ras信号转导可能最终导致癌症。Ras的三种主要亚型基因(H-Ras、N-Ras或K-Ras)中任何一种的突变都是人类肿瘤发生中的常见事件。在三种Ras亚型(K、N和H)中，K-Ras最常突变。
最常见的K-Ras突变存在于P环的G12和G13残基以及Q61残基上。G12C是K-Ras基因的常见突变(甘氨酸-12突变为半胱氨酸)。G12D和G13D是另外的常见突变。癌症中的Ras突变与预后不良相关。小鼠致癌性Ras的失活导致肿瘤缩小。因此，Ras被普遍视为极其重要的肿瘤靶点。
发明内容
在一个方面，本发明涉及一种具有式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R1、R2、R3、R4、R5、X、Y、U、V、W和n如本文所定义。
本发明的另一方面包括一种具有式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，R2、R3、R4、R5、R7、R8、R9、X、Y、U、V、W和n如本文所定义。
另外，本发明公开了一种具有(III)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，R2、R3、R4、R5、R10、X、Y、U、V、W和n如本文所定义。
在另一方面，本发明涉及一种具有式(IV)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，R1、R11、X、Y、U、V、W和n如本文所定义。
本发明还提供了一种药物组合物，该药物组合物包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。
另一方面包括一种治疗癌症的方法，该方法包括向有此需要的个体施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
另一方面包括一种调节突变K-Ras G12C蛋白活性的方法，该方法包括使突变蛋白与本发明的化合物或其药学上可接受的盐反应。
另一方面包括一种在有此需要的个体中治疗由K-Ras G12C突变介导的疾病的方法，该方法包括：确定个体是否具有该突变；以及如果确定该个体具有该突变，则对该个体施用治疗有效量的本发明的药物组合物。
另一方面包括一种抑制肿瘤转移的方法，该方法包括向有此需要的个体施用治疗有效量的本发明的药物组合物。
本发明还涉及以下项目：
1.一种式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R1是能够与K-Ras G12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分；
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或者
R2和R3、R3和R4、或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被任选地由1-4个Y1a取代基所取代的4至10元杂环基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
2.根据项目1所述的化合物，其具有式(II)：
或其药学上可接受的盐；
其特征在于，
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或者
R2和R3、R3和R4、或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
R7选自由以下项组成的组：H、氰基和卤素；并且R8和R9各自独立地选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：甲磺酰基(甲磺酰)、对甲苯磺酰基(甲苯磺酰基)、烷基或芳基磺酸盐离去基团、C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基；
或者
R7和R8一起在它们所连接的碳之间形成三键，或者R7和R8与它们各自所键合的碳一起形成C3-7环烯基，所述环烯基任选地被一个或两个卤代取代基取代；并且R9选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被任选地由1-4个Y1a-取代基所取代的4至10元杂环基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
3.根据项目1所述的化合物，其具有式(III)：
或其药学上可接受的盐；
其特征在于，
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或者
R2和R3、R3和R4、或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
R10选自由以下项组成的组：R10a和-C(O)-R10a；
R10a选自由以下项组成的组：环氧乙烷基和氮丙啶基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被任选地由1-4个Y1a取代基所取代的4至10元杂环基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
4.根据项目1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R2选自由以下项组成的组：NH2和-NHR；并且R为C1-6烷基。
5.根据项目1-4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R2为NH2。
6.根据项目1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R3和R4独立地选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基和环丙基。。
7.根据项目1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R5选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基。
8.根据项目1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R5为C1-3卤代烷基。
9.根据项目1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R5为CF3并且R2为NH2。
10.根据项目1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R5为环丙基。
11.根据项目1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基。
12.根据项目11所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R4和R5与其各自键合的原子一起形成C6-14芳基，其任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基。
13.根据项目12所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R4和R5与其各自键合的原子一起形成C6芳基，其任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基。
14.根据项目13所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，C6芳基未被取代。
15.根据项目13所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，C6芳基被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地为卤素。
16.根据项目1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于：
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：直链C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基和C1-6烷基氨基；
R5选自由以下项组成的组：H、Cl、Br、I、NH2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少两个并非H；或者
R2和R3、R3和R4、或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基或C6-14芳基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基和C1-3卤代烷氧基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；
其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被任选地由1-4个Y1a取代基所取代的4至10元杂环基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
17.一种式(I)的化合物，其具有式(IV)：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R1是能够与K-Ras G12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被任选地由1-4个Y1a取代基所取代的4至10元杂环基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；
n选自由以下项组成的组：0、1和2；并且
R11选自由以下项组成的组：
18.根据项目1-17中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Y为Y1，并且Y1选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基和C1-6卤代烷基。。
19.根据项目1-17中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于：
Y为-L-Y1；
L选自由以下项组成的组：O和N(La)；
La为H；并且
Y1选自由以下项组成的组：C1-6烷基、被任选地由1-4个Y1a取代基所取代的4至10元杂环基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基和被甲基取代的4至10元杂环基；并且
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基。
20.根据项目19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，L为N(La)，La为H，并且Y1为C1-6烷基或被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基。
21.根据项目19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于：
L为O；
Y1选自由以下项组成的组：被任选地由1-4个Y1a取代基所取代的4至10元杂环基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基和被甲基取代的4至10元杂环基；并且
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基。
22.根据项目19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Y1为被4至10元甲基杂环基取代基取代的C1-6烷基。
23.根据项目19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Y选自由以下项组成的组：
24.根据项目23所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Y为
25.根据项目17-24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R11为
26.根据项目17-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R11为
27.根据项目17-26中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R11为
28.根据项目1-27中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R6a为H。
29.根据项目1-28中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R6b选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-6烷氧基、C1-6烷基磺酰基、C1-6卤代烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷硫基和4至10元杂环基。
30.根据项目1-28中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R6b为氢、卤素或C1-3卤代烷基。
31.根据项目1-30中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，W为C(R6c)，并且R6c为氢或卤素。
32.根据项目1-31中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，W为C(R6c)，并且R6c为卤素。
33.根据项目1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，X为4至7元杂环基。
34.根据项目1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，X为被1至4个取代基取代的4至7元杂环基，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：氰基、C1-6烷基、C1-6氰基烷基和C1-6卤代烷基。
35.根据项目1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，X选自由以下项组成的组：
36.根据项目1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，X选自由以下项组成的组：
37.根据项目1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，X选自由以下项组成的组：
38.根据项目1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，X为
39.根据项目1-38中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，n为0。
40.根据项目1或17所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R1选自由以下项组成的组：
其中：
R12选自由以下项组成的组：C1-6烷酰基、C1-6烷基和C1-6烷基磺酰基；
R13选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基和C1-6卤代烷基；
R13a为卤素；并且
R14为卤素。
41.根据项目40所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R1选自由以下项组成的组：
42.根据项目41所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R1为
43.根据项目2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R7选自由以下项组成的组：H、氰基和卤素；并且R8和R9各自独立地选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：甲磺酰基(甲磺酰)、对甲苯磺酰基(甲苯磺酰基)、烷基或芳基磺酸盐离去基团、C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基。
44.根据项目1或17所述的化合物或其药学上可接受的盐，其具有选自由以下项组成的组中的式：
或其药学上可接受的盐。
45.根据项目44所述的化合物或其药学上可接受的盐，其具有选自由以下项组成的组中的式：式(Ib)或式(Il)。
46.根据项目17-41中任一项所述的化合物，其特征在于，所述式(IV)的化合物包含选自由以下项组成的组中的式：
或其药学上可接受的盐。
47.根据项目46所述的化合物，其特征在于，所述式(IV)的化合物包含式(IVa)、式(IVb)、式(IVd)或式(IVg)的化合物，或其药学上可接受的盐。
48.根据项目46所述的化合物，其特征在于，所述式(IV)的化合物包含式(IVa)或式(IVb)的化合物，或其药学上可接受的盐。
49.根据项目46所述的化合物，其特征在于，所述式(IV)的化合物包含式(IVd)或式(IVg)的化合物，或其药学上可接受的盐。
50.根据项目2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R7和R8一起在它们所连接的碳之间形成三键，或者R7和R8与它们各自所键合的碳一起形成C3-7环烯基，所述环烯基任选地被一个或两个卤代取代基取代；并且R9选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基。
51.根据项目2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R7、R8和R9各自为H。
52.一种化合物或其药学上可接受的盐，如表1所提供。
53.一种药物组合物，其包含项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。
54.根据项目53所述的药物组合物，其特征在于，将所述药物组合物配制用于口服施用。
55.根据项目53所述的药物组合物，其特征在于，将所述药物组合物配制用于注射。
56.一种治疗癌症的方法，其包括向有此需要的个体施用治疗有效量的项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者项目53-55中任一项所述的药物组合物。
57.根据项目56所述的方法，其特征在于，所述个体为人。
58.根据项目55或56所述的方法，其特征在于，所述施用为通过口服途径进行。
59.根据项目55或56所述的方法，其特征在于，所述施用为通过注射进行。
60.根据项目56-59中任一项所述的方法，其特征在于，所述癌症由K-Ras G12C突变介导。
61.根据项目56-60中任一项所述的方法，其特征在于，所述癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。
62.根据项目56-61中任一项所述的方法，其特征在于，所述癌症为肺腺癌。
63.一种用于调节K-Ras G12C突变蛋白活性的方法，所述方法包括使所述突变蛋白与项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐反应。
64.一种用于抑制细胞群增殖的方法，所述方法包括使所述细胞群与项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐接触。
65.根据项目64所述的方法，其特征在于，所述对增殖的抑制以所述细胞群的细胞活性的下降来衡量。
66.一种用于治疗有此需要的个体的由K-Ras G12C突变介导的疾患的方法，所述方法包括：
确定所述个体是否具有所述突变；以及
如果确定所述个体具有所述突变，则向所述个体施用治疗有效量的项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者项目53-55中任一项所述的药物组合物。
67.根据项目66所述的方法，其特征在于，所述疾患为癌症。
68.根据项目67所述的方法，其特征在于，所述癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。
69.根据项目66所述的方法，其特征在于，所述癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。
70.根据项目66-69中任一项所述的方法，其特征在于，所述癌症为肺腺癌。
71.一种用于制备带标记的K-Ras G12C突变蛋白的方法，所述方法包括使K-RasG12C突变蛋白与项目1-52中任一项所述的带标记的化合物或其药学上可接受的盐反应，以得到所述带标记的K-Ras G12C突变蛋白。
72.一种用于抑制肿瘤转移的方法，其包括向有此需要的个体施用治疗有效量的项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者向有此需要的个体施用治疗有效量的项目53-55中任一项所述的药物组合物。
73.项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在生产用于治疗癌症的药物中的用途。
74.根据项目73所述的用途，其特征在于，将所述药物配制用于口服施用。
75.根据项目73所述的用途，其特征在于，将所述药物配制用于注射。
76.根据项目73-75中任一项所述的用途，其特征在于，所述癌症由K-Ras G12C突变介导。
77.根据项目73-76中任一项所述的用途，其特征在于，所述癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。
78.根据项目73-76中任一项所述的用途，其特征在于，所述癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。
79.根据项目73-78中任一项所述的用途，其特征在于，所述癌症为肺腺癌。
80.项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在生产用于抑制肿瘤转移的药物中的用途。
81.根据项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者根据项目53-55中任一项所述的药物组合物，其在通过疗法治疗人或动物体的方法中的用途。
82.根据项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者根据项目53-55中任一项所述的药物组合物，其在治疗癌症的方法中的用途。
83.根据项目82所述的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物，其特征在于，所述癌症由K-Ras G12C突变介导。
84.根据项目82或83所述的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物，其特征在于，所述癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。
85.根据项目82或83所述的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物，其特征在于，所述癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。
86.根据项目82-85中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物，其特征在于，所述癌症为肺腺癌。
87.根据项目1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者根据项目53-55中任一项所述的药物组合物，其在抑制肿瘤转移的方法中的用途。
具体实施方式
定义
术语“卤素”或“卤”是指F、Cl、Br或I。另外，术语诸如“卤代烷基”意在包括单卤代烷基和多卤代烷基。
术语“烷基”是指饱和的直链或支链单价烃基。在一个实例中，烷基含有1至18个碳原子(C1-18)。在其他实例中，烷基为C1-12、C1-10、C1-8、C1-6、C1-5、C1-4或C1-3。烷基基团的实例包括甲基(Me、-CH3)、乙基(Et、-CH2CH3)、1-丙基(n-Pr、正丙基、-CH2CH2CH3)、2-丙基(i-Pr、异丙基、-CH(CH3)2)、1-丁基(n-Bu、正丁基、-CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基(i-Bu、异丁基、-CH2CH(CH3)2)、2-丁基(s-Bu、仲丁基、-CH(CH3)CH2CH3)、2-甲基-2-丙基(t-Bu、叔丁基、-C(CH3)3)、1-戊基(正戊基、-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、1-己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3)、1-庚基和1-辛基。
术语“氨基”是指-NH2。
术语“烷基氨基”是指-NH-烷基。
术语“二烷基氨基”是指-N(烷基)2。
术语“氧代”是指＝O。
术语“羧基”是指-C(＝O)OH。
术语“氨基甲酰基”是指-C(＝O)NH2。
术语“烷酰基”是指-C(＝O)-烷基。
术语“羟基烷酰基”是指-C(＝O)-羟烷基。
术语“烷酰基氨基”是指-NH-C(＝O)-烷基。
术语“烷氧基”是指-O-烷基。
术语“烷氧基烷基”是指被一个烷氧基取代基取代的烷基。
术语“二烷基氨基环丙基”是指被一个二烷基氨基取代基取代的环丙基。
术语“烷基硫烷基”是指-S(＝O)-烷基。
术语“烷基磺酰基”是指-S(＝O)2-烷基。
术语“烷基磺酰基氨基”是指-NH-S(＝O)2-烷基。
术语“烷硫基”是指-S-烷基。
术语“卤代烷硫基”是指-S-卤代烷基。
术语“氨基烷基”是指被一个氨基取代基取代的烷基。
术语“氨基甲酰基烷基”是指被一个氨基甲酰基取代基取代的烷基。
术语“羧基烷基”是指被一个羧基取代基取代的烷基。
术语“氰基”或“腈基”是指-C≡N或-CN。
术语“氰基烷基”是指被一个氰基取代基取代的烷基。
术语“卤代烷氧基”是指-O-卤代烷基。
术语“杂环基氨基”是指-NH-杂环基。
术语“羟基”是指-OH。
术语“羟烷基”是指被一个羟基取代基取代的烷基。
术语“烯基”是指具有至少一个碳-碳双键的直链或支链一价烃基，并且包括具有“顺式”和“反式”取向或“E”和“Z”取向的基团。在一个实例中，烯基含有2至18个碳原子(C2-18)。在其他实例中，烯基为C2-12、C2-10、C2-8、C2-6或C2-3。实例包括但不限于次乙基或乙烯基(-CH＝CH2)、丙-1-烯基(-CH＝CHCH3)、丙-2-烯基(-CH2CH＝CH2)、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁烯-1,3-二烯基、2-甲基丁烯-1,3-二烯基、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基和己-1,3-二烯基。
术语“炔基”是指具有至少一个碳-碳三键的直链或支链一价烃基。在一个实例中，炔基含有2至18个碳原子(C2-18)。在其他实例中，炔基为C2-12、C2-10、C2-8、C2-6或C2-3。实例包括但不限于乙炔基(-C≡CH)、丙-1-炔基(-C≡CCH3)、丙-2-炔基(炔丙基、-CH2C≡CH)、丁-1-炔基、丁-2-炔基和丁-3-炔基。
术语“亚烷基”是指具有两个单价自由基中心的饱和、支链或直链烃基，这两个自由基中心通过从母体烷烃的相同或两个不同碳原子上除去两个氢原子而获得。在一个实例中，二价亚烷基基团含有1至18个碳原子(C1-18)。在其他实例中，二价亚烷基基团为C1-12、C1-10、C1-8、C1-6、C1-5、C1-4或C1-3。亚烷基基团实例包括亚甲基(-CH2-)、1,1-乙基(-CH(CH3)-)、(1,2-乙基(-CH2CH2-)、1,1-丙基(-CH(CH2CH3)-)、2,2-丙基(-C(CH3)2-)、1,2-丙基(-CH(CH3)CH2-)、1,3-丙基(-CH2CH2CH2-)、1,1-二甲基乙-1,2-基(-C(CH3)2CH2-)、1,4-丁基(-CH2CH2CH2CH2-)等。
术语“芳基”是指碳环芳族基团，其与一个或多个基团稠合，具有指定的碳原子数，或者如果未指定碳原子数，则含有最多14个碳原子。一个实例包括具有6-14个碳原子的芳基基团。另一个实例包括具有6-10个碳原子的芳基基团。芳基基团的实例包括苯基、萘基、联苯基、菲基、并四苯基、1,2,3,4-四氢萘基、1H-茚基、2,3-二氢-1H-茚基等(参见例如《兰氏化学手册》(Dean,J.A.主编)第13版表7-2[1985])。一种特定的芳基为苯基。
术语“环烷基”是指饱和烃环基团。环烷基包括单环、双环、三环、螺环和桥环的饱和环系。在一个实例中，环烷基基团含有3至12个碳原子(C3-12)。在其他实例中，环烷基为C3-7、C3-8、C3-10或C5-10。在其他实例中，作为单环的环烷基基团为C3-8、C3-6或C5-6。在另一个实例中，作为双环的环烷基基团为C7-C12。在另一个实例中，作为螺环体系的环烷基基团为C5-12。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基和环十二烷基。具有7至12个环原子的双环环烷基的示例性排列包括但不限于[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]环系。示例性桥联双环环烷基包括但不限于双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷和双环[3.2.2]壬烷。螺环烷基的实例包括螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[2.4]庚烷、螺[2.5]辛烷和螺[4.5]癸烷。
术语“环烯基”是指具有至少一个碳-碳双键的非芳族烃环基。环烯基包括单环、双环、三环、螺环或桥联的饱和环系。单环环烯基的实例包括1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、1-环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基和环己二烯基。具有7至12个环原子的双环环烯基的示例性排列包括但不限于[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]环系。示例性桥联双环环烯基包括但不限于双环[2.2.1]庚烯、双环[2.2.2]辛烯和双环[3.2.2]壬烯。螺环烯基的实例包括螺[2.2]戊烯、螺[2.3]己烯、螺[2.4]庚烯、螺[2.5]辛烯和螺[4.5]癸烯。
术语“杂环基团”、“杂环的”、“杂环”、“杂环基”或“杂环取代”可互换使用，是指任何单环、双环、三环、螺环或桥联的饱和、部分饱和或不饱和非芳族环系，其具有3至20个环原子，其中环原子为碳，并且环或环系中的至少一个原子为选自氮、硫或氧的杂原子。如果环系统中的任何环原子为杂原子，则无论该环系统与分子其余部分的连接点如何，该系统均为杂环。在一个实例中，杂环基包含3-11个环原子(“成员”)，并且包括单环、双环、三环、螺环和桥联环系，其中环原子为碳，其中环或环系中的至少一个原子为选自氮、硫或氧的杂原子。在其他实例中，杂环基包含4-10或5-10个环原子。在一个实例中，杂环基包含1至4个杂原子。在一个实例中，杂环基包含1至3个杂原子。在另一个实例中，杂环基包含具有1-2、1-3或1-4个选自氮、硫或氧的杂原子的3至7元单环。在另一个实例中，杂环基包含具有1-2、1-3或1-4个选自氮、硫或氧的杂原子的4至6元单环。在另一个实例中，杂环基包含3元单环。在另一个实例中，杂环基包含4元单环。在另一个实例中，杂环基包含5-6元单环。在一些实施例中，杂环烷基包括至少一个氮。在一个实例中，杂环基基团包含0至3个双键。任何氮或硫杂原子可任选地被氧化(例如，NO、SO、SO2)，并且任何氮杂原子可任选地被季铵化(例如，[NR4]+Cl-、[NR4]+OH-)。杂环实例为环氧乙烷基、氮杂环丁烷基、噻喃基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、1,2-二硫杂环丁烷基、1,3-二硫杂环丁烷基、吡咯烷基、二氢-1H-吡咯基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、二氢噻吩基、四氢噻吩基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代硫代吗啉基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、六氢硫代吡喃基、六氢嘧啶基、噁嗪基、噻嗪基、噻噁烷基、高哌嗪基、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂基、氧氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、1,4-二氮杂环庚烷基、二氮杂基、硫氮杂基、硫氮杂环庚烷基、四氢硫吡喃基、噁唑烷基、噻唑啉基、异噻唑烷基、1,1-异噻唑烷酮基、1,1-二氧杂异噻唑基、噁唑烷酮基、咪唑啉酮基、4,5,6,7-四氢[2H]吲唑基、四氢苯并咪唑基、4,5,6,7-四氢苯并[d]咪唑基、噻嗪基、噁嗪基、噻二嗪基、噁二嗪基、二噻嗪基、二噁嗪基、噁硫嗪基、噻三嗪基、氧杂三嗪基、二噻二嗪基、咪唑啉基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、噻喃基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1,3-二氧戊环基、吡唑啉基、吡唑烷基、二噻吩基、二硫杂环戊基、嘧啶酮基、嘧啶二酮基、嘧啶-2,4-二酰基、哌嗪酮基、哌嗪二酰基、吡唑啉基咪唑啉基、3-氮杂双[3.1.0]己基、3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚基、6-氮杂双环[3.1.1]庚基、3-氮杂双环[3.1.1]庚基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、氮杂双环[2.2.2]己基、2-氮杂双环[3.2.1]辛基、8-氮杂双环[3.2.1]辛基、2-氮杂双[2.2.2]辛基、8-氮杂双环[2.2.2]辛基、7-氧杂双环[2.2.1]庚基、氮杂螺[3.5]壬基、氮杂螺[2.5]辛基、氮杂螺[4.5]癸基、1-氮杂螺[4.5]癸-2-基、氮杂螺并[5.5]十一碳烷基、四氢吲哚基、八氢吲哚基、四氢异吲哚基、四氢吲哚基、1,1-二氧六氢硫代吡喃基。
术语“甲基杂环基”是指被甲基取代的杂环基。
术语“杂芳基”是指包含1至4个选自氮、氧和硫的杂原子的任何单环、双环或三环芳环体系，并且在一个示例性实施例中，至少一个杂原子为氮。参见例如《兰氏化学手册》(Dean,J.A.主编)第13版表7-2[1985]。该定义包括任何双环基团，其中任何上述杂芳环与芳环稠合，其中芳环或杂芳环与分子的其余部分连接。在一个实施例中，杂芳基包括5-6元单环芳族基团，其中一个或多个环原子为氮、硫或氧。杂芳基基团实例包括噻吩基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基、四唑基、噻三唑基、噁三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑并[1,5-b]吡啶嗪基、咪唑[1,2-a]嘧啶基和嘌呤基以及苯并稠合衍生物(例如苯并恶唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、苯并咪唑基、吲唑基和吲哚基)。
在特定实施例中，杂环基基团或杂芳基基团连接在杂环基基团或杂芳基基团的碳原子上。举例来说，碳键合的羰基基团包括以下位置的键排列：吡啶环的2、3、4、5或6位，哒嗪环的3、4、5或6位，嘧啶环的2、4、5或6位，吡嗪环的2、3、5或6位，呋喃、四氢呋喃、噻呋喃、噻吩、吡咯或四氢吡咯环的2、3、4或5位，噁唑、咪唑或噻唑环的2、4或5位，异噁唑、吡唑或异噻唑环的3、4或5位，氮丙啶环的2或3位，氮杂环丁烷环的2、3或4位，喹啉环的2、3、4、5、6、7或8位，或异喹啉环的1、3、4、5、6、7或8位。
在某些实施例中，杂环基基团或杂芳基基团与N连接。举例来说，氮键合的杂环基或杂芳基基团包括以下位置的键排列：氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氢吲哚、1H-吲唑的1位、异吲哚或异吲哚啉的2位、吗啉的4位，以及咔唑或β-咔啉的9位。
“稠合”是指本文所述的与本发明的化合物中的现有环结构共享一个或多个原子(例如，碳或氮原子)的任何环结构。
术语“酰基”是指由式-C(＝O)-R表示的含羰基的取代基，其中R为取代基诸如氢、烷基、环烷基、芳基或杂环基，其中烷基、环烷基、芳基和杂环基如本文所定义。酰基包括烷酰基(例如，乙酰基)、芳酰基(例如，苯甲酰基)和杂芳酰基(例如，吡啶甲酰基)。
术语“卤代烷基”是指其中一个或多个氢被卤素取代的烷基链。卤代烷基的实例是三氟甲基、二氟甲基和氟甲基。
除非另有说明，否则术语“本发明所述的化合物”和“本发明的化合物”等包括具有式(I)、式(II)、式(III)、式(IV)、式(Ia)-(Ik)以及本文的表中所列的化合物，包括立体异构体(包括阻转异构体)、几何异构体、互变异构体、同位素及其盐(例如，药学上可接受的盐)。
除非另有说明，否则术语“任选取代的”是指基团可以未被取代或被针对该基团列出的一个或多个(例如，0、1、2、3、4或5或更多个或者可衍生自其中的任何范围)取代基取代，其中所述取代基可以相同或不同。在一个实施例中，任选取代的基团具有1个取代基。在另一个实施例中，任选取代的基团具有2个取代基。在另一个实施例中，任选取代的基团具有3个取代基。在另一个实施例中，任选取代的基团具有4个取代基。在另一个实施例中，任选取代的基团具有5个取代基。
如本文所用，与化学结构中的键相交的波浪线表示在化学结构中与该波浪形键连接的原子与分子的其余部分或与分子片段的其余部分的连接点。
在某些实施例中，二价基团通常被描述为不含特定的键合构型。应当理解，除非另有说明，否则一般描述旨在包括两种键合构型。例如，在基团R1-R2-R3中，如果基团R2被描述为-CH2C(O)-，则应当理解，该基团可键合为R1-CH2C(O)-R3和R1-C(O)CH2-R3(除非另有说明)。
术语“药学上可接受的”是指在适当的情况下施用于动物(例如人)时不产生不利、过敏或其他不良反应的分子实体和组合物。
本发明的化合物可呈盐的形式，例如药学上可接受的盐。“药学上可接受的盐”包括酸加成盐或碱加成盐。“药学上可接受的酸加成盐”是指那些保留游离碱的生物有效性和特性并且在生物学上或其他方面可取的盐，与无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等以及有机酸形成，所述有机酸可选自脂肪族、脂环族、芳族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类有机酸，诸如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、栓子酸、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。
术语“药学上可接受的碱加成盐”包括衍生自无机碱的那些盐，诸如钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。特定的碱加成盐为铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。衍生自药学上可接受的有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺、取代胺(包括天然存在的取代胺)环胺和碱性离子交换树脂诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、氨丁三醇、二环己基胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡萄糖胺、甲基葡萄糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、多胺树脂等的盐。特定的有机无毒碱包括异丙胺、二乙胺、乙醇胺、氨丁三醇、二环己基胺、胆碱和咖啡因。
在一些实施例中，盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、三氟乙酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、二硫酸盐、苯磺酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、昔萘酸盐、抗坏血酸盐、油酸盐、烟酸盐、糖精盐、己二酸盐、甲酸盐、乙醇酸盐、棕榈酸盐、L-乳酸盐、D-乳酸盐、天冬氨酸盐、苹果酸盐、L-酒石酸盐、D-酒石酸盐、硬脂酸盐、糠酸盐(例如，2-糠酸盐或3-糠酸酯)、萘啶基磺酸盐(萘-1,5-二磺酸钠或萘-1-(磺酸)-5-磺酸盐)、乙二磺酸盐(乙烷-1,2-二磺酸盐或乙烷-1-(磺酸)-2-磺酸盐)、异硫氰酸盐(2-羟基乙基磺酸盐)、2-均三甲苯磺酸盐、2-萘磺酸盐、2,5-二氯苯磺酸盐、D-扁桃酸盐、L-扁桃酸盐、肉桂酸盐、苯甲酸盐、己二酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、三甲苯磺酸盐(2-均三甲苯磺酸盐)、萘磺酸盐(2-萘磺酸盐)、樟脑磺酸盐(樟脑-10-磺酸盐，例如(1S)-(+)-10-樟脑磺酸盐)、谷氨酸盐、戊二酸盐、马尿酸盐(2-(苯甲酰氨基)乙酸盐)、乳清酸盐、木酸盐(对二甲苯-2-磺酸盐)和扑酸盐(2,2'-二羟基-1,1'-二萘甲烷-3,3'-二羧酸盐)。
“无菌”制剂是指无菌或不含任何活微生物及其孢子。
术语“立体异构体”是指具有相同的化学组成，但原子或基团在空间中的排列不同的化合物。立体异构体包括非对映异构体、对映异构体、构象异构体等。
术语“手性”是指镜像伴侣具有不可重叠特性的分子，而术语“非手性”是指镜像伴侣能够重叠的分子。
术语“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心并且其分子并非彼此镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱性质或生物活性。非对映异构体的混合物可通过高分辨率分析程序诸如电泳和色谱法(例如HPLC)进行分离。
术语“对映异构体”是指化合物的两种立体异构体，它们是彼此不可重叠的镜像。
本文中所用的立体化学定义和约定大致遵循：S.P.Parker,Ed.,McGraw-HillDictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；以及Eliel,E.和Wilen,S.,“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994。许多有机化合物以光学活性体存在，即它们能够旋转平面偏振光平面。在描述光学活性化合物时，前缀D和L或R和S用于表示分子围绕其手性中心的绝对构型。采用前缀d和l或(+)和(-)表示化合物对平面偏振光的旋转符号，其中(-)或l表示化合物为左旋化合物。具有前缀(+)或d的化合物为右旋化合物。对于给定的化学结构，这些立体异构体是相同的，不同之处仅在于它们是彼此的镜像。特定的立体异构体也可称为对映异构体，并且此类异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。对映异构体50:50的混合物称为外消旋混合物或外消旋体，其可能发生在化学反应或过程中无立体选择性或立体特异性的情况下。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指两种对映异构体的等摩尔混合物，无光学活性。
术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指通过低能垒可相互转化的不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子移变异构体)包括通过质子迁移实现的相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过重组某些键合电子实现的相互转化。
“阻转异构体”是由于围绕单键旋转受阻而产生的立体异构体，其中由于空间应变或其他作用因素引起的能量差而形成转动势垒，该转动势垒足以分离各种构象异构体。
本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式(包括水合形式)存在。“溶剂化物”是指一种或多种溶剂分子与本发明的化合物的缔合物或络合物。形成溶剂化物的实例包括水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。本发明的某些化合物可以以多种结晶或无定形形式存在。通常，所有物理形式均旨在包含在本发明的范围内。术语“水合物”是指溶剂分子为水的络合物。
“代谢物”是指通过指定化合物或其盐在体内代谢而得到的产物。此类产物可由所施用的化合物的例如氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶促裂解等产生。
通常，代谢物通过以下方法进行鉴定：制备放射性标记(例如14C或3H)的本发明的化合物的同位素，以可检测的剂量(例如，大于约0.5mg/kg)给予动物(例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴或人)，使其有足够长的时间发生代谢(通常约30秒至30小时)，并且从尿液、血液或其他生物样品中分离出其转化产物。这些产物带有标记，因此很容易分离(使用能够结合代谢物中保留的表位的抗体来分离其他产物)。代谢物的结构通过常规方法进行确定，例如通过MS、LC/MS或NMR分析来确定。通常，分析代谢物与本领域的技术人员所熟知的常规药物代谢研究的方式相同。代谢物只要未在体内发现，便可用于对本发明的化合物的治疗剂量进行诊断测定。
本文所述的发明也包括与本文所述的那些相同的同位素标记的本发明的化合物，但是其中一个或多个原子被原子质量或质量数不同于自然界中通常发现的原子质量或质量数的原子所取代。指定的任何特定原子或元素的所有同位素均涵盖在本发明的化合物及其用途的范围内。可掺入本发明的化合物中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，诸如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、123I和125I。本发明的某些同位素标记的化合物(例如，用3H和14C标记的化合物)可用于化合物和/或底物组织分布测定中。可使用氚化(3H)和碳-14(14C)同位素，因为它们易于制备和检测。此外，用较重的同位素诸如氘(即2H)取代可能由于其更高的代谢稳定性(例如，延长体内半衰期或降低剂量要求)而提供某些治疗优势，因此可优选地用于某些情况。正电子发射同位素诸如15O、13N、11C和18F可用于正电子发射断层扫描(PET)研究，以检查底物受体占有率。本发明的同位素标记的化合物通常可按照类似于下文实例中所公开的那些程序进行制备，其中用同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂。
如本文所用，术语“氨基保护基团”是指在化合物的其他官能团上发生反应时通常用于封闭或保护氨基基团的基团的衍生物。此类保护基团的实例包括氨基甲酸酯基、酰胺基、烷基和芳基基团、亚胺基以及可去除其以再生所需的胺基的许多N-杂原子衍生物。特定的氨基保护基团为Pmb(对甲氧基苄基)、Boc(叔丁基氧羰基)、Fmoc(9-芴基甲氧基羰基)和Cbz(羰基苄氧基)。这些基团的更多实例可参见：T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“ProtectingGroups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley&Sons,Inc.,1999。术语“受保护氨基”是指被上述氨基保护基团之一取代的氨基基团。
如本文所用，术语“羧基保护基团”是指在分子的其他位置对后续反应条件保持稳定的那些基团，其在适当的时间点可被去除而不破坏分子的其余部分，以得到未受保护的羧基基团。羧基保护基团的实例包括酯基和杂环基基团。当与化合物上的其他官能团反应时，羧酸基团的酯衍生物可用于封闭或保护羧酸基团。此类酯基的实例包括取代的芳烷基，包括取代的苄基，诸如4-硝基苄基、4-甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、2,4-二甲氧基苄基、2,4,6-三甲氧基苄基、2,4,6-三甲基苄基、五甲基苄基、3,4-亚甲基二氧基苄基、苯甲基、4,4'-二甲氧基二苯甲基、2,2',4,4'-四甲氧基二苯甲基、烷基或取代的烷基酯诸如甲基、乙基、叔丁基烯丙基或叔戊基、三苯基甲基(三苯甲基)、4-甲氧基三苯甲基、4,4'-二甲氧基三苯甲基、4,4',4”-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基、硫代酸酯诸如叔丁基硫代酯、甲硅烷基酯诸如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基酯、苯甲酰基、2,2,2-三氯乙基、β-(三甲基甲硅烷基)乙基、β-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对甲苯磺酰乙基、4-硝基苄基磺酰乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基等部分。羧基保护基团的另一个实例为杂烷基基团，诸如1,3-噁唑啉基。这些基团的更多实例可参见：T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“Protecting Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley&Sons,Inc.,1999。术语“受保护的羧基”是指被上述羧基保护基团之一取代的羧基基团。
本发明的化合物可含有一个或多个不对称的碳原子。因此，化合物可以以非对映异构体、对映异构体或其混合物的形式存在。化合物的合成可采用外消旋体、非对映异构体或对映异构体作为起始物质或中间体。特定的非对映异构化合物的混合物可通过色谱法或结晶法分离或富集为一种或多种特定的非对映异构体。类似地，对映异构体混合物可使用相同的技术或本领域已知的其他方法实现分离或对映体富集。每个不对称的碳或氮原子可以为R或S构型，并且这两种构型均在本发明的范围内。
在本文所示的结构中，在不指定任何特定手性原子的立体化学的情况下，可设想并且包括所有立体异构体作为本发明的化合物。在通过表示特定构型的实心楔形或虚线指定立体化学的情况下，则应指定并且定义该立体异构体。除非另有说明，否则如果使用实心楔形或虚线，则表示相对立体化学。
另一方面包括本发明的化合物的前药，其包含已知的氨基保护基团和羧基保护基团在生理条件下释放(例如水解)以得到本发明的化合物。
术语“前药”是指药物活性物质的前体或衍生形式，与母体药物相比对患者较低效，并且能够被酶解或水解活化或转化为活性更高的母体形式。参见例如Wilman的“Prodrugs in Cancer Chemotherapy”(Biochemical Society Transactions，14，第375-382页，615th Meeting Belfast(1986))和Stella等人的“Prodrugs:A Chemical Approachto Targeted Drug Delivery”(Directed Drug Delivery，Borchardt等人主编，第247-267页，Humana Press(1985))。前药包括但不限于含磷酸盐的前药、含硫代磷酸盐的前药、含硫酸盐的前药、含肽的前药、经D-氨基酸改性的前药、糖基化前药、含β-内酰胺的前药、含任选取代的苯氧基乙酰胺的前药或含任选取代的苯基乙酰胺的前药以及5-氟胞嘧啶和5-氟尿苷前药。
特定类别的前药是其中氨基、脒基、氨基亚烷基氨基、亚氨基亚烷基氨基或胍基中的氮原子被羟基基团、-CO-R、-CO-OR或-CO-O-R-O-CO-R取代的化合物，其中R为一价或二价基团，例如烷基、亚烷基或芳基，或具有式-C(O)-O-CP1P2-卤代烷基的基团，其中P1和P2相同或不同，并且为氢、烷基、烷氧基、氰基、卤素、烷基或芳基。在一个特定的实施例中，氮原子是本发明的化合物的脒基基团的氮原子之一。前药可通过使本发明的化合物与活化基团诸如酰基反应以使例如化合物中的氮原子与活化酰基基团的示例性羰基键合来制备。活化羰基化合物的实例是包含与羰基基团键合的离去基团的那些，并且包括例如酰卤、酰胺、酰基吡啶鎓盐、酰基醇盐、酰基酚盐诸如对硝基苯氧基酰基、二硝基苯氧基酰基、氟苯氧基酰基和二氟苯氧基酰基。这些反应通常在惰性溶剂中在例如约-78℃至约50℃的温度下进行。这些反应也可在无机碱(例如碳酸钾或碳酸氢钠)或有机碱(诸如胺，包括吡啶、三甲基胺、三乙胺、三乙醇胺等)的存在下进行。
还包括其他类型的前药。例如，本发明化合物的游离羧基基团可衍生为酰胺或烷基酯。作为另一个实例，包含游离羟基基团的本发明的化合物可通过使羟基基团转化为诸如但不限于磷酸酯基、半琥珀酸酯基、二甲基氨基乙酸酯基或磷酰氧基甲氧基羰基等基团而衍生为前药，如Fleisher,D.等人(Improved oral drug delivery:solubilitylimitations overcome by the use of prodrugs.Advanced Drug Delivery Reviews,1996,19:115)所概述。还包括羟基和氨基基团的氨基甲酸酯前药以及羟基基团的碳酸酯前药、磺酸酯和硫酸酯。还包括将羟基基团衍生为(酰氧基)甲基和(酰氧基)乙基醚，其中酰基基团可为任选地被包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代的烷基酯，或者其中酰基基团为如上所述的氨基酸酯。此类前药如以下文献所述：J.Med.Chem.,(1996),39:10。更具体的实例包括用基团诸如(C1-6)烷酰氧基甲基、1-((C1-6)烷酰氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-6)烷酰氧基)乙基、(C1-6)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C1-6)烷酰基、α-氨基(C1-4)烷酰基、芳酰基和α-氨基酰基或α-氨基酰基-α-氨基酰基取代醇基的氢原子，其中每个α-氨基酰基基团独立地选自天然存在的L-氨基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-6)烷基)2或糖基(去除半缩醛形式的碳水化合物的羟基基团所得到的自由基)。
术语“离去基团”是指化学反应中第一反应物的一部分，该部分移离化学反应中的第一反应物。离去基团的实例包括但不限于卤素原子、烷氧基和磺酰氧基。磺酰氧基基团的实例包括但不限于：烷基磺酰氧基基团(例如，甲基磺基氧基(甲磺酸酯基)和三氟甲基磺酰氧基(三氟甲酸酯基))和芳基磺酰氧基基团(例如，对甲苯磺酰氧基(甲苯磺酸酯基)和对硝基磺酰氧基(硝基苯磺酸基))。
“受试者”、“个体”或“患者”是脊椎动物。在某些实施例中，脊椎动物是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于农场动物(诸如牛)、运动动物、宠物(诸如豚鼠、猫、犬、兔和马)、灵长目动物、小鼠和大鼠。在某些实施例中，哺乳动物是人。在包括向患者施用化合物的实施例中，患者通常需要该化合物。
术语“抑制”和“减少”或这些术语的任何变型，包括任何可测量的降低或完全抑制以实现期望的结果。例如，与正常水平相比，活性可减少约、至多约或至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更高或者可衍生自其中的任何范围。
“治疗有效量”意指一定量的本发明的化合物，诸如具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐，用于(i)治疗或预防特定疾病、病症或疾患，或(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病症或疾患的一种或多种症状，以及任选地(iii)预防或延缓本文所述的特定疾病、病症或疾患的一种或多种症状的发作。就癌症而言，药物的治疗有效量可减少癌细胞的数量；减少肿瘤大小；抑制(即，在一定程度上减慢并且优选地停止)癌细胞浸润到周围器官；抑制(即，在一定程度上减慢并且优选地停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；或在一定程度上减轻与癌症相关的症状中的一种或多种。在药物可阻止现有癌细胞的生长或杀死现有癌细胞的程度上，其可能抑制细胞生长或具有细胞毒性。对于癌症治疗，可例如通过评估疾病进展时间(TTP)或测定缓解率(RR)来衡量疗效。
“治疗(treatment)”(及其变型诸如“治疗(treat)”或“治疗(treating)”)是指试图改变所治疗个体或细胞的自然进程的临床干预，并且可以是为了预防或在临床病理学的进程中进行。理想的治疗效果包括预防疾病发生或复发、缓解症状、减轻疾病的任何直接或间接病理学结果、稳定(即，不恶化)病情、降低疾病进展速度、改善或减轻病情、相比于不接受治疗的情况延长预期生存期以及缓解或改善预后。在一些实施例中，本发明的化合物用于延缓疾病或疾患的发展或者减慢疾病或疾患的进展。需要治疗的个体包括已经患有疾病或病患的个体以及那些容易患有疾病或病患的个体(例如，通过基因突变)或那些要预防该疾病或病患的个体。
如本文所用，“治疗效果”包括如上所述的治疗益处和/或预防益处。预防效果包括延迟或消除疾病或病症的出现、延迟或消除疾病或病症的症状发作、减慢、停止或者逆转疾病或病症的进展或它们的任意组合。
如本文所用，术语“共同给药”、“与……联合给药”及其语法等同形式包括向动物(包括人类)施用两种或更多种药剂，使得药剂和/或其代谢物同时存在于动物体内。共同给药包括同时给予单独的组合物，在不同时间给予单独的组合物，或以包含两种药剂的组合物给药。
术语“拮抗剂”和“抑制剂”可互换使用，并且它们是指具有通过抑制蛋白诸如K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C的活性或表达而抑制靶蛋白的生物学功能的化合物。因此，术语“拮抗剂”和“抑制剂”在靶蛋白的生物学作用的语境下定义。尽管本文优选的拮抗剂与靶点发生特异性相互作用(例如，结合)，但是通过与靶蛋白作为其成员的信号转导途径的其他成员发生相互作用而抑制靶蛋白的生物学活性的化合物也特别地包含在该定义中。拮抗剂抑制的优选生物活性与肿瘤的发生、生长或扩散相关联。
如本文所用，术语“激动剂”是指能够通过抑制靶蛋白的活性或表达而引发或增强靶蛋白的生物学功能的化合物。因此，术语“激动剂”在靶多肽的生物学作用的语境下定义。尽管本文优选的激动剂与靶点发生特异性相互作用(例如，结合)，但是通过与靶多肽作为其成员的信号转导途径的其他成员发生相互作用而引发或增强靶多肽的生物学活性的化合物也特别地包含在该定义中。
术语“癌症”和“癌的”、“瘤”和“肿瘤”及相关术语是指或描述哺乳动物中通常以细胞生长失控为特征的生理状况。“肿瘤”包括一种或多种癌细胞。癌症的实例包括恶性肿瘤、胚细胞瘤、肉瘤、精原细胞瘤、胶质母细胞瘤、黑素瘤、白血病和骨髓或淋巴恶性肿瘤。此类癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌(例如，上皮鳞状细胞癌)和肺癌(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(“NSCLC”)、肺腺癌和肺鳞癌)。其他癌症包括皮肤癌、角膜棘皮瘤、滤泡癌、毛细胞白血病、口腔癌、咽(口)癌、唇癌、舌癌、口癌、唾液腺癌、食道癌、喉癌、肝细胞癌、胃癌、胃肿瘤、胃肠道癌、小肠癌、大肠癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、泌尿系统肿瘤、胆道癌、甲状腺癌、乳突癌、肝脏肿瘤、子宫内膜癌、子宫癌、唾液腺癌、肾癌、前列腺癌、睾丸癌、外阴癌、腹膜癌、肛门癌、阴茎癌、骨癌、多发性骨髓瘤、B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、中枢神经系统肿瘤、脑癌、头颈癌、霍奇金氏病及相关转移瘤。肿瘤性疾患的实例包括骨髓增生性疾病，诸如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化(诸如原发性骨髓纤维化)和慢性粒细胞性白血病(CML)。
“化学治疗剂”是用于治疗给定疾患例如癌症或炎性疾病的药剂。化学治疗剂的实例是本领域中熟知的，并且包括例如美国专利申请号2010/0048557中公开的那些实例，该专利申请以引用方式并入本文。此外，化学治疗剂包括任何化学治疗剂的药学上可接受的盐、酸或衍生物及其中两种或更多种的组合。
除非另有说明，否则本文所示的结构还意在包括仅在存在一个或多个同位素富集的原子方面有所不同的化合物。可掺入本发明的化合物中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，分别如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、123I和125I。同位素标记的化合物(例如，用3H和14C标记的化合物)可用于化合物和/或底物组织分布测定中。可使用氚化(即3H)和碳-14(即14C)，因为它们易于制备和检测。此外，用较重的同位素诸如氘(即2H)取代可能以其更高的代谢稳定性(例如，延长体内半衰期或降低剂量要求)而提供某些治疗优势。在一些实施例中，在本发明的化合物中，一个或多个碳原子被富含13C-或14C-的碳取代。正电子发射同位素诸如15O、13N、11C和18F可用于正电子发射断层扫描(PET)研究，以检查底物受体占有率。同位素标记的化合物通常可按照类似于方案或本文实例中所公开的那些程序进行制备，其中用同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂。
具体地设想了关于本发明的一个实施例讨论的任何限制可适用于本发明的任何其他实施例。此外，本发明的任何化合物或组合物可用于本发明的任何方法，并且本发明的任何方法均可用于生产或利用本发明的任何化合物或组合物。
除非明确指出仅指代替代方案或替代方案互斥，否则术语“或”的使用意指“和/或”，尽管本发明支持仅指替代方案和“和/或”的定义。
贯穿本申请全文的术语“约”用于表示一个值包括用于测定该值的设备或方法的误差的标准偏差。
如本文所用，“一”或“一种”意指一种或多种，除非另有明确说明。如本文所用，“另一”意指至少第二或更多。
本文所用的标题仅用于组织目的。
Ras抑制剂
在一个方面，本发明提供了能够选择性结合和/或调节G12C、G12D或G13D突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的化合物。
如上所述，本发明的一个方面包括具有式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R1是能够与K-Ras G12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分；
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或
R2和R3、R3和R4或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；以及
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
根据具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R1是能够与K-RasG12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分。
根据具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R1是能够与H-RasG12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分。
根据具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R1是能够与N-RasG12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分。
在上述R1的定义中，通过K-Ras G12C烷基化研究和均相时间分辨荧光(HTRF)分析确定能够与半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分。K-Ras基因的G12C突变是指第12个氨基酸处的氨基酸从甘氨酸变成半胱氨酸。使用HTRF分析和K-Ras G12C烷基化测定法分析发现根据本发明的化合物，如下文中其他地方所详述，然后使用NMR波谱法验证分子与G12C连接的特异性。
在另一方面，本发明包括具有式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、
C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或
R2和R3、R3和R4或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
R7选自由以下项组成的组：H、氰基和卤素；并且R8和R9各自独立地选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：甲磺酰基(甲磺酰)、对甲苯磺酰基(甲苯磺酰基)、烷基或芳基磺酸盐离去基团、C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基；
或
R7和R8一起在它们所连接的碳之间形成三键，或者R7和R8与它们各自所键合的碳一起形成C3-7环烯基，该环烯基任选地被一个或两个卤代取代基取代；并且R9选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
在另一方面，本发明包括具有式(III)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或
R2和R3、R3和R4或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
R10选自由以下项组成的组：R10a和-C(O)-R10a；
R10a选自由以下项组成的组：环氧乙烷基和氮杂环丁烷基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R2选自由以下项组成的组：NH2和-NHR；并且R为C1-6烷基。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R2为NH2。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，R2为-NHR，其中R为C1-6烷基或C1-6烷氧基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R2为-NHR，其中R为C(O)CH3、C(O)CH2OH、CH(CH3)2、CH2CN或CH3。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R3和R4独立地选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基和环丙基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，R3为C1-3烷基(例如，甲基或乙基)或C1-3卤代烷基(例如，-CF3或-CH2CF3)。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R3为氢。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，R4为氢、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基或环丙基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R4为氢或卤素。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R4为C1-3烷基(例如，甲基或乙基)。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R4为甲基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，R4为-CF3。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R4为氢。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R5选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，R5为C1-6卤代烷基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R5为C1-3卤代烷基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R5为C1-3烷基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R5为C1-3卤代烷氧基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，R5为H、CH3、CHF2、CF3、OCF3、CH2CF3、卤素或环丙基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，R5为CF3。
在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R5为CF3，并且R2为NH2。
在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R2为NH2,R4为C1-3烷基，并且R5为CF3。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R5为环丙基。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R2、R3、R4和R5中的至少两个并非H。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R2、R3、R4和R5中的至少三个并非H。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其中每个基团任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R4和R5与其各自键合的原子一起形成C6-14芳基，其任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R4和R5与其各自键合的原子一起形成C6芳基，其任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基。根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，C6芳基未被取代。根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，C6芳基被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地为卤素。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y为-L-Y1。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，L为O或N(La)。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，L为O。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，Y1为C2-6烯基、C1-6烷基或被4至10元杂环基或甲基杂环基取代基取代的C1-6烷基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，Y1为C1-6烷基或被4至10元杂环基或甲基杂环基取代基取代的C1-6烷基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，Y1为被4至10元杂环基或甲基杂环基取代基取代的C1-6烷基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，Y1为被4至10元杂环基或甲基杂环基取代基取代的C1-6烷基，其中杂环基或甲基杂环基取代基包含至少1个氮杂原子。在一个实施例中，杂环基或甲基杂环基取代基为吡咯烷基部分。在一个实施例中，吡咯烷基被F取代。在一个实施例中，杂环基和甲基杂环基部分各自独立地任选地被选自由以下项组成的组中的1-3个取代基取代：OH、NH2、卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基或C1-6羟烷基。
在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，Y为在一个实施例中，Y为在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，Y为在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，Y为在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，Y为
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R6a为氢、卤素或C1-3烷基。根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R6b为氢、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或环丙基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，R6b为氢、卤素或C1-3卤代烷基。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，R6b为卤素或C1-3卤代烷基。在另一个实施例中，R6b为卤素(例如，Cl或F)。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，R6b为Cl。在另一个实施例中，R6b为CF3或CHF2。根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R6c为氢或卤素。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，R6c为氢。在一个实施例中，R6c为卤素。在具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，R6b和R6c独立地为卤素。在另一个实施例中，R6b为卤素，并且R6c为氢。
本文进一步提供了具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
Y为X为R2为NH2；R3为氢；R4为氢或C1-3甲基；并且R5为CF3。
根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，该化合物选自由以下项组成的组：下文所示的表1中的化合物或其药学上可接受的盐。
表1.本发明的示例性化合物。还可设想此类化合物的盐。有关此类化合物的制备，请参见实例部分。对于不具有在实例中明确描述的制备细节的化合物，可使用本领域中众所周知的方法，通过修改本文所提供的其他化合物的制备细节来制备。
n/a＝不适用
在另一个实施例中，根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例：
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：直链C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基和C1-6烷基氨基；
R5选自由以下项组成的组：H、Cl、Br、I、NH2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少两个并非H；或
R2和R3、R3和R4或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基或C6-14芳基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基和C1-3卤代烷氧基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
应当理解，根据具有式(I)、式(II)或式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的实施例，当R2和R3、R3和R4或R4和R5中的一个与其各自键合的原子一起形成环时，不形成环的取代基的定义如上文关于式(I)所述。
在另一方面，本发明包括具有式(IV)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R1是能够与K-Ras G12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；
n选自由以下项组成的组：0、1和2；并且
R11选自由以下项组成的组：
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y为Y1，并且Y1选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基和C1-6卤代烷基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y1为H。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y为-L-Y1；L选自由以下项组成的组：O和N(La)；La为H；并且Y1选自由以下项组成的组：C1-6烷基、被甲基杂环基取代基取代的C1-6烷基以及被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y1为单环芳基或单环杂芳基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y为-L-Y1；L选自由以下项组成的组：O和N(La)；La为H；Y1选自由以下项组成的组：C1-6烷基，被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基以及被甲基取代的4至10元杂环基；并且每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y为-L-Y1；L为N(La)；La为H；并且Y1为C1-6烷基或被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y为-L-Y1；L为O；Y1选自由以下项组成的组：被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基以及被甲基取代的4至10元杂环基；并且每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y为-L-Y1；L选自由以下项组成的组：O和N(La)；La为H；Y1为被4至10元甲基杂环基取代基取代的C1-6烷基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y选自由以下项组成的组：
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，Y为：
在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，Y为在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，Y为在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，Y为在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，Y为
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，其中R6a为H。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R6b选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-6烷氧基、C1-6烷基磺酰基、C1-6卤代烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷硫基和4至10元杂环基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R6b选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-3卤代烷基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，W为C(R6c)，并且R6c选自由以下项组成的组：H和卤素。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，W为C(R6c)，并且R6c是卤素。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R6a、R6b和R6c-独立地选自由以下项组成的组：单环芳基和单环杂芳基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，X为C3-7环烷基、4至7元杂环基或4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基和4至7元杂环基。在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，X为C3-7环烷基或4至7元杂环基，其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、C1-6烷基和C1-6卤代烷基。在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，X为哌嗪基或氮杂环丁烷基部分，其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、C1-6烷基和C1-6卤代烷基。在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，X为任选地被1至4个取代基取代的哌嗪基部分，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：卤素、氰基、C1-3烷基和C1-3卤代烷基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，X为4至7元杂环基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，X为被1至4个取代基取代的4至7元杂环基，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：氰基、C1-6烷基、C1-6氰基烷基和C1-6卤代烷基。
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，X选自由以下项组成的组：
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，X选自由以下项组成的组：
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，X选自由以下项组成的组：
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，X为
在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，X为
在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的另一个实施例中，X为
根据具有式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R11为
根据具有式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R11为：
根据具有式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R11为
根据具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，n为0。
根据具有式(I)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R1选自由以下项组成的组：
其中：
R12选自由以下项组成的组：C1-6烷酰基、C1-6烷基和C1-6烷基磺酰基；
R13选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基和C1-6卤代烷基；
R13a为卤素；并且
R14为卤素。
根据具有式(I)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R1选自由以下项组成的组：
根据具有式(I)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R1为
根据具有式(I)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R1为
根据具有式(I)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R1为
根据具有式(I)或式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R1为
根据具有式(II)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R7选自由以下项组成的组：H、氰基和卤素；并且R8和R9各自独立地选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：甲磺酰基(甲磺酰)、对甲苯磺酰基(甲苯磺酰基)、烷基或芳基磺酸盐离去基团、C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基。
根据具有式(II)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R7和R8一起在它们所连接的碳之间形成三键，或者R7和R8与它们各自所键合的碳一起形成C3-7环烯基，该环烯基任选地被一个或两个卤代取代基取代；并且R9选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基。
根据具有式(II)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R7、R8和R9各自为H。
根据具有式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R10为-C(O)-R10a，并且R10a为环氧乙烷基。
根据具有式(III)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，R10为-C(O)-R10a，并且R10a为氮杂环丁烷基。
根据具有式(I)的化合物的一些实施例，该化合物具有选自由以下项组成的组中的式：
以及或其药学上可接受的盐。
在具有式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ij)、(Ik)或(Il)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，Y为 在具有式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ij)、(Ik)或(Il)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，Y为在具有式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ij)、(Ik)或(Il)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，Y为在具有式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ij)、(Ik)或(Il)的化合物或其药学上可接受的盐的一个实施例中，Y为在具有式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ij)、(Ik)或(Il)的化合物或其药学上可接受的盐的再一个实施例中，Y为
根据具有式(I)的化合物的一些实施例，该化合物具有式(Ia)或(Ic)或其药学上可接受的盐。
根据具有式(I)的化合物的一些实施例，该化合物具有式(Ib)或(Il)或其药学上可接受的盐。
根据具有式(I)的化合物的一些实施例，该化合物具有式(Ia)或其药学上可接受的盐。
根据具有式(I)的化合物的一些实施例，该化合物具有式(Ib)或其药学上可接受的盐。
根据具有式(I)的化合物的一些实施例，该化合物具有式(Ic)或其药学上可接受的盐。
根据具有式(I)的化合物的一些实施例，该化合物具有式(Il)或其药学上可接受的盐。
根据具有式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，该化合物具有选自由以下项组成的组中的式：
以及或其药学上可接受的盐。
根据具有式(IV)的化合物的一些实施例，该化合物包含具有式(IVa)、(IVb)、(IVd)或(IVg)的化合物或其药学上可接受的盐。根据具有式(IV)的化合物的一些实施例，该化合物包含具有式(IVa)或(IVb)的化合物或其药学上可接受的盐。根据具有式(IV)的化合物的一些实施例，该化合物包含具有式(IVd)或(IVg)的化合物或其药学上可接受的盐。
在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物的一个实施例中，该化合物为本文表1所示的化合物或其药学上可接受的盐。
在具有式(I)、式(II)、式(III)或式(IV)的化合物的另一个实施例中，该化合物对应于化合物9、化合物17a、化合物17b、化合物18a、化合物18b、化合物19、化合物44、化合物83a、化合物83b、化合物83c、化合物83d或化合物69或药学上可接受的盐。
在一个实施例中，该化合物为化合物9。在一个实施例中，该化合物为化合物17a。在一个实施例中，该化合物为化合物17b。在一个实施例中，该化合物为化合物18a。在一个实施例中，该化合物为化合物18b。在一个实施例中，该化合物为化合物19。在一个实施例中，该化合物为化合物83a。在一个实施例中，该化合物为化合物83b。在一个实施例中，该化合物为化合物83c。在一个实施例中，该化合物为化合物83d。在一个实施例中，该化合物为化合物69。
根据式(I)的一些实施例，该化合物选自由以下项组成的组：表1的化合物1、5、7-10、13-15、17a、17b、18a、18b、19-33、35、40-41、43-45、46a、46b、47-58、59a、59b、60-61、62a、62b、63a、63b、64a、64b、65、66、67a、67b、68a、68b、69-74、75a、75b、76、77、78a、78b、79a、79b、80、81a、81b、82a、82b、83a、83b、83c、83d、84a、84b和85-97或其药学上可接受的盐。根据式(I)的其他实施例，该化合物选自由以下项组成的组：表1的化合物1、5、7-10、13-15、17a、17b、18a、18b、19-33、35、40-41、43-45、46a、46b和47-54或其药学上可接受的盐。根据式(I)的另一个实施例，该化合物选自由以下项组成的组：表1的化合物55-58、59a、59b、60-61、62a、62b、63a、63b、64a、64b、65、66、67a、67b、68a、68b、69-74、75a、75b、76、77、78a、78b、79a、79b、80、81a、81b、82a、82b、83a、83b、83c、83d、84a、84b和85-97或其药学上可接受的盐。
本发明的化合物(例如，具有式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物)或其药学上可接受的盐可含有一个或多个不对称中心，因此可产生对映异构体、非对映异构体和其他立体异构体形式，这些立体异构体形式就绝对立体化学结构而言定义为氨基酸的(R)-或(S)-形式或定义为(D)-或(L)-形式。因此，实施例包含所有此类可能的异构体以及它们的外消旋体和光学纯形式。光学活性(+)和(-)、(R)-和(S)-或(D)-和(L)-异构体可使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术例如色谱和分步结晶分离。用于制备/分离单个对映异构体的常规技术包括由合适的光学纯前体进行手性合成，或使用例如手性高效液相色谱法(HPLC)拆分外消旋体(或者盐或衍生物的外消旋体)。当本文所述的化合物含有烯键式双键或其他几何不对称中心时，除非另有说明，否则旨在表示这些化合物同时包含E和Z几何异构体。同样，也旨在包含所有互变异构形式。
本发明的实施例包括本发明的化合物的所有形式的旋转异构体和构象上受限的状态。还包括阻转异构体，它们是由于围绕单键旋转受阻而产生的立体异构体，其中由于空间应变或其他作用因素引起的能量差而形成转动势垒，该转动势垒足以分离各种构象异构体。例如，本发明的某些化合物可能以阻转异构体的混合物形式存在，或者由于一种阻转异构体的存在而得到纯化或富集。
在一些实施例中，具有式(I)的化合物为阻转异构体的混合物。在其他实施例中，具有式(I)的化合物为基本上纯化的阻转异构体。在一些实施例中，具有式(I)的化合物为基本上纯化的R-阻转异构体。在一些其他实施例中，具有式(I)的化合物为基本上纯化的R-阻转异构体。
Ras抑制剂的合成
本发明的化合物可通过下文示出和描述的示例性合成反应方案中描述的各种方法进行制备。用于制备这些化合物的原料和试剂通常可得自商业供应商，例如AldrichChemical Co.，或通过本领域的技术人员已知的方法按照以下参考文献中所述的方法制备，诸如：Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis；Wiley&Sons：NewYork,vol.1-21；R.C.LaRock,Comprehensive Organic Transformations,2nd editionWiley-VCH,New York 1999；Comprehensive Organic Synthesis,B.Trost and I.Fleming(Eds.)vol.1-9Pergamon,Oxford,1991；Comprehensive Heterocyclic Chemistry,A.R.Katritzky and C.W.Rees(Eds.)Pergamon,Oxford 1984,vol.1-9；ComprehensiveHeterocyclic Chemistry II,A.R.Katritzky and C.W.Rees(Eds)Pergamon,Oxford1996,vol.1-11；以及Organic Reactions,Wiley&Sons：New York,1991,vol.1-40。以下合成反应方案仅示出可合成本发明的化合物的一些方法，并且可对这些合成反应方案进行各种修改，并且将参考本文所包含的公开内容向本领域的技术人员提供建议。
出于示例性目的，下面的反应方案提供了用于合成本发明的化合物以及关键中间体的路线。有关各个反应步骤的详细说明，请参见下面的实例部分。本领域的技术人员将理解，可使用其他合成路线。尽管方案中示出并且在下文描述了一些具体的原料和试剂，但是可替换为其他原料和试剂以提供各种衍生物或反应条件。此外，根据本发明内容，可使用本领域的技术人员熟知的常规化学方法进一步修饰通过下文所述的方法制得的许多化合物。
如果需要，可使用常规技术分离和纯化合成反应方案的原料和中间体，这些技术包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱等。可使用常规方法对此类材料进行表征，包括物理常数和光谱数据。
除非另有相反的说明，否则本文所述的反应优选在惰性气氛下、在大气压下并且在约-78℃至约150℃、更优选地在约0℃至约125℃的温度范围内并且最优选且方便地在室温(或环境温度)或约20℃下进行。
以下方案中的某些化合物示出为含有通用取代基；但是，本领域的技术人员将立即认识到，可改变取代基的性质以提供本发明中设想的各种化合物。此外，反应条件为示例性的，并且替代条件是熟知的。以下实例中的反应顺序并不意在限制权利要求书中所述的本发明的范围。
本领域的技术人员将认识到，所述化学反应可容易适用于制备本发明的其他化合物。例如，通过对本领域的技术人员显而易见的修改，例如，通过适当地保护干扰基团、利用本领域中已知的其他合适的试剂或通过对反应条件进行常规修改，可成功地实现根据本发明所述的非示例性化合物的合成。另选地，本文所公开的或本领域已知的其他反应将被视为适用于制备本发明的其他化合物。利用Ras抑制剂进行治疗的方法及Ras抑制剂的用途
本发明的化合物可用作Ras抑制剂。在一个方面，本发明的化合物可用作K-Ras抑制剂。在另一方面，本发明的化合物可用作N-Ras抑制剂。在另一方面，本发明的化合物可用作H-Ras抑制剂。因此，在一个实施例中，提供了一种使细胞诸如离体细胞与本发明的化合物或其药学上可接受的盐接触以抑制细胞中的Ras活性(例如，K-Ras、H-Ras和/或N-Ras活性)。应当理解，在某些实施例中，本文所述的治疗方法可进一步包括在施用本文所述的化合物或其药学上可接受的盐之前，确定是否存在G12 Ras突变。
本发明进一步提供了一种预防、治疗或减轻患者对Ras(例如，K-Ras、H-Ras和/或N-Ras)抑制进行应答的疾病或病症的严重程度的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
在一个方面，本发明涉及一种预防、治疗或减轻患者对K-Ras抑制进行应答的疾病或病症的严重程度的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
在一个方面，本发明涉及一种预防、治疗或减轻患者对H-Ras抑制进行应答的疾病或病症的严重程度的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
在一个方面，本发明涉及一种预防、治疗或减轻患者对N-Ras抑制进行应答的疾病或病症的严重程度的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
还提供了一种用于治疗患者的癌症的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
还提供了一种在需要治疗的患者中抑制Ras(例如，K-Ras、H-Ras和/或N-Ras)的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐。
在一个方面，本发明涉及为需要治疗的患者抑制K-Ras的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐。
在一个方面，本发明涉及为需要治疗的患者抑制H-Ras的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐。
在一个方面，本发明涉及为需要治疗的患者抑制N-Ras的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐。
还提供了一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的赋形剂。本发明的化合物，包括包含此类化合物的药物组合物，可用于本文所述的方法中。
本发明的实施例提供了一种抑制Ras介导的细胞信号转导的方法，该方法包括使细胞与治疗有效量的本文所公开的一种或多种化合物或其药学上可接受的盐接触。Ras介导的信号转导的抑制可通过本领域中已知的多种方法进行评估和证明。非限制性实例包括表现出：(a)Ras的GTPase活性下降；(b)GTP结合亲和力下降或GDP结合亲和力提高；(c)GTP的K off升高或GTP的Koff下降；(d)Ras通路下游的信号转导分子水平下降，诸如pMEK水平下降；和/或(e)Ras复合物与下游信号转导分子(包括但不限于Raf)的结合降低。试剂盒和可商购获得的测定法可用于确定上述表现中的一者或多者。
实施例还提供了使用本发明的化合物或药物组合物治疗疾病的方法，这些疾病包括但不限于与G12C K-Ras突变、G12C H-Ras突变和/或G12C N-Ras突变有关的疾病(例如，癌症)。
在一些实施例中，本发明提供了一种治疗有此需要的受试者的疾患的方法，其中所述方法包括确定受试者是否具有K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变，以及在确定受试者具有K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变的情况下，向受试者施用治疗有效量的本发明的至少一种化合物或其药学上可接受的盐。
在血液学恶性肿瘤(例如，影响血液、骨髓和/或淋巴结的癌症)中也鉴定出K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变。因此，某些实施例涉及向需要治疗血液学恶性肿瘤的患者施用本发明所公开的化合物或其药学上可接受的盐(例如，以药物组合物的形式)。此类恶性肿瘤包括但不限于白血病和淋巴瘤。例如，本发明所公开的化合物可用于治疗疾病，诸如急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)，小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性单核细胞性白血病(AMoL)和/或其他白血病。在其他实施例中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐可用于治疗淋巴瘤诸如霍奇金淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤的所有亚型。
可通过评估编码K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的核苷酸序列、通过评估K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的氨基酸序列或通过评估假定的K-Ras、H-Ras或N-Ras突变蛋白的特征来确定肿瘤或癌症是否包含G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras突变。野生型人K-Ras(例如，登记号NP203524)、H-Ras(例如，登记号NP001123914)和N-Ras(例如，登记号NP002515)的序列是本领域中已知的。
用于检测K-Ras、H-Ras或N-Ras核苷酸序列突变的方法是本领域的技术人员已知的。这些方法包括但不限于聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析、聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析、实时PCR分析、PCR测序、突变等位基因特异性PCR扩增(MASA)分析、直接测序、引物延伸反应、电泳、寡核苷酸连接分析、杂交测定、TaqMan测定、SNP基因分型测定、高分辨率熔解曲线分析和微阵列分析。在一些实施例中，利用实时PCR对样本的G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras突变进行评估。在实时PCR中，使用针对特定K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变的荧光探针。存在突变时，探针与其结合并且检测到荧光。在一些实施例中，使用特定区域(例如外显子2和/或外显子3)的直接测序方法在K-Ras、H-Ras或N-Ras基因中鉴定出K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变。该技术将鉴定出测序区域中所有可能的突变。
用于检测K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白突变的方法是本领域的技术人员已知的。这些方法包括但不限于使用对突变蛋白具有特异性的结合剂(例如抗体)、蛋白质电泳和蛋白质印迹和直接肽测序法检测K-Ras、H-Ras或N-Ras突变体。确定肿瘤或癌症是否包含G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras突变的方法可使用各种样本。在一些实施例中，样本取自患有肿瘤或癌症的受试者。在一些实施例中，样本为新鲜肿瘤/癌症样本。在一些实施例中，样本为冷冻肿瘤/癌症样本。在一些实施例中，样本为福尔马林固定石蜡包埋的样本。在一些实施例中，样本被处理成细胞裂解物。在一些实施例中，样本被处理成DNA或RNA。
实施例还涉及治疗哺乳动物的过度增生性疾患的方法，该方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，所述方法涉及治疗以下癌症，诸如：急性髓细胞性白血病、青少年癌症、儿童肾上腺皮质癌、艾滋病相关的癌症(例如，淋巴瘤和卡波济氏肉瘤)、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸胎瘤样/横纹肌样瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑干胶质细胞瘤、脑肿瘤、乳腺癌、支气管肿瘤、伯基特淋巴瘤、类癌瘤、胚胎性肿瘤、生殖细胞肿瘤、原发性淋巴瘤、宫颈癌、儿童期癌症、脊索瘤、心脏肿瘤、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓增生性疾病、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、肝外导管原位癌(DCIS)、胚胎性肿瘤、中枢神经系统癌、子宫内膜癌、室管膜瘤、食道癌、嗅神经母细胞瘤、尤文肉瘤、颅外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞瘤、眼癌、骨纤维组织细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞肿瘤、妊娠滋养细胞肿瘤、毛细胞白血病、头颈癌、心脏病、肝癌、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、眼内黑色素瘤、胰岛细胞瘤、胰腺神经内分泌肿瘤、肾癌、喉癌、嘴唇和口腔癌、小叶原位癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、原发隐匿性转移性鳞状颈部癌、呼吸道中线癌、口腔癌、多发性内分泌肿瘤综合征、多发性骨髓瘤/浆细胞瘤、蕈样肉芽肿、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤、多发性骨髓瘤、Merkel细胞癌、恶性间皮瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤和骨肉瘤、鼻腔和副鼻窦癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、口腔癌、口咽癌、卵巢癌、胰腺癌、乳头瘤病、副神经节瘤、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽喉癌、胸膜肺母细胞瘤、原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直肠癌、移行细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、皮肤癌、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、T细胞淋巴瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管移行细胞癌、滋养细胞肿瘤、儿童期罕见癌症、尿道癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌或病毒引起的癌症。在一些实施例中，所述方法涉及治疗非癌性增生性疾患，诸如皮肤良性增生(例如，牛皮癣)、再狭窄或良性前列腺增生(BPH)。
在某些特定实施例中，本发明涉及用于治疗肺癌的方法，该方法包括向有此需要的受试者使用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐(或包含相同化合物的药物组合物)。在某些实施例中，肺癌为非小细胞肺癌(NSCLC)，例如腺癌、鳞状细胞肺癌或大细胞肺癌。在其他实施例中，肺癌为小细胞肺癌。本发明所公开的化合物可治疗的其他肺癌包括但不限于腺瘤、类癌瘤和未分化癌。
在一些实施例中，本发明提供了抑制细胞中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法，该方法通过使所述细胞与足以抑制所述细胞中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐接触来实施。在一些实施例中，本发明提供了抑制组织中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法，该方法通过使所述组织与足以抑制所述组织中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐接触来实施。在一些实施例中，本发明提供了抑制生物体中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法，该方法通过使所述生物体与足以抑制所述生物体中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐接触来实施。在一些实施例中，本发明提供了抑制动物中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法，该方法通过使所述动物与足以抑制所述动物中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐接触来实施。在一些实施例中，本发明提供了抑制哺乳动物中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法，该方法通过使所述哺乳动物与足以抑制所述哺乳动物中K-Ras、H-Ras或N-RasG12C活性的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐接触来实施。在一些实施例中，本发明提供了抑制人体中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法，该方法通过使所述人体与足以抑制所述人体中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐接触来实施。在其他实施例中，本发明提供了治疗需要此类治疗的受试者的由K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性介导的疾病的方法。
在一些实施例中，本发明提供了治疗癌症的方法，该方法包括向有此需要的个体施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或本发明的药物组合物。在一些实施例中，个体是人。在一些实施例中，通过口服途径给药。在一些实施例中，通过注射给药。在一些实施例中，癌症由K-Ras G12C、H-Ras G12C或N-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症由K-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。在一个实施例中，癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。在一个实施例中，癌症为大肠癌。在另一个实施例中，癌症为胰腺癌。在一些实施例中，癌症为肺腺癌。
在一些实施例中，本发明提供了调节选自由K-Ras G12C、H-Ras G12C和N-RasG12C组成的组中的突变蛋白的活性的方法，该方法包括使突变蛋白与本发明的化合物或其药学上可接受的盐反应。
在一些实施例中，本发明提供了抑制细胞群增殖的方法，该方法包括使细胞群与本发明的化合物或其药学上可接受的盐接触。在一些实施例中，对增殖的抑制以细胞群的细胞活性的下降来衡量。
在一些实施例中，本发明提供了治疗有此需要的个体的由选自由K-Ras G12C、H-Ras G12C和N-Ras G12C组成的组中的突变所介导的疾患的方法，该方法包括：确定该个体是否具有突变；以及如果确定个体具有突变，则向该个体施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或本发明的药物组合物。在一些实施例中，疾患由K-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，疾患为癌症。在一些实施例中，癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。在一个实施例中，癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。在一个实施例中，癌症为大肠癌。在另一个实施例中，癌症为胰腺癌。在一些实施例中，癌症为肺腺癌。
在一些实施例中，本发明提供了制备带标记的K-Ras G12C、H-Ras G12C或N-RasG12C突变蛋白的方法，该方法包括使K-Ras G12C、H-Ras G12C或N-Ras G12C突变蛋白与本发明的化合物或其药学上可接受的盐反应，得到带标记的K-Ras G12C、H-Ras G12C或N-RasG12C突变蛋白。
在一些实施例中，本发明提供了抑制肿瘤转移的方法，该方法包括向有此需要的个体施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或向有此需要的个体施用本发明的药物组合物。
在一些实施例中，本发明提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐在生产治疗癌症的药物中的用途。在一些实施例中，药物配制为用于口服给药。在一些实施例中，药物配制为用于注射。在一些实施例中，癌症由K-Ras G12C、H-Ras G12C或N-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症由K-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症由H-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症由N-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。在一个实施例中，癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。在一个实施例中，癌症为大肠癌。在另一个实施例中，癌症为胰腺癌。在一些实施例中，癌症为肺腺癌。在一些实施例中，本发明提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐在生产抑制肿瘤转移的药物中的用途。
在一些实施例中，本发明提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或本发明的药物组合物在通过以下方式治疗人或动物的方法中的用途。在一些实施例中，本发明提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或本发明的药物组合物在治疗癌症的方法中的用途。在一些实施例中，癌症由K-Ras G12C、H-Ras G12C或N-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症由K-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症由H-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症由N-Ras G12C突变介导。在一些实施例中，癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。在一个实施例中，癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。在一个实施例中，癌症为大肠癌。在另一个实施例中，癌症为胰腺癌。在一些实施例中，癌症为肺腺癌。在一些实施例中，本发明提供了本发明的化合物或其药学上可接受的盐或本发明的药物组合物在抑制肿瘤转移的方法中的用途。
本文进一步提供了为肺癌患者治疗肺癌的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐(或包含该化合物的药物组合物)。在一个实施例中，肺癌为非小细胞肺癌(NSCLC)。NSCLC可为例如腺癌、鳞状细胞肺癌或大细胞肺癌。在另一个实施例中，肺癌为小细胞肺癌。在再一个实施例中，肺癌为腺瘤、类癌瘤或未分化癌。肺癌可为I期或II期肺癌。在一个实施例中，肺癌为III期或IV期肺癌。本文所提供的方法包括将化合物作为1L疗法给药。在一个实施例中，肺癌包含G12C KRas突变。
本文还进一步提供了为胰腺癌患者治疗胰腺癌的方法，该方法包含向患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施例中，患者既往接受过放射治疗和一种或多种化学治疗剂的治疗。在一个实施例中，胰腺癌处于0期、I期或II期。在另一个实施例中，胰腺癌处于III期或IV期。在一个实施例中，胰腺癌包含G12C KRas突变。
本文进一步提供了为结肠癌患者治疗结肠癌的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施例中，结肠癌处于I期或II期。在另一个实施例中，结肠癌处于III期或IV期。在一个实施例中，结肠癌包含G12C KRas突变。
本文进一步提供了为结肠癌患者治疗结肠癌的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施例中，结肠癌处于I期或II期。在另一个实施例中，结肠癌处于III期或IV期。在一个实施例中，结肠癌包含G12C KRas突变。
本文进一步提供了治疗与肿瘤类型无关的G12C突变体KRas介导的癌症的方法。在此类方法的一个实施例中，该方法包括：
a.确定取自疑似诊断为癌症的患者的样本中是否存在KRas G12C突变；以及
b.向患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。
在此类方法的一个实施例中，患者被诊断为患有本文所述的癌症。在此类方法的另一个实施例中，样本为取自受试者的肿瘤样本。在一个此类实施例中，在施用任何疗法之前采集样本。在另一个此类实施例中，在施用本文所述的化合物或其药学上可接受的盐之前以及在施用另一种化学治疗剂之后采集样本。在此类方法的另一个实施例中，本文所述的化合物或其药学上可接受的盐按本文提供的方式给药(例如，口服)。
剂量和给药方式
本发明提供了包含治疗有效量的本发明的化合物或其化学上可接受的盐和至少一种治疗上惰性赋形剂的药物组合物或药物，以及使用本发明的化合物制备此类组合物和药物的方法。
因此，一个实施例包括一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。另一个实施例包括一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。
在一个实例中，具有期望的纯度的治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐可通过与生理学上可接受的赋形剂混合来配制，该赋形剂在环境温度和合适的pH值下在剂型中所用的剂量和浓度下对接受者无毒。制剂的pH值主要取决于化合物的具体用途和浓度，但通常在约3至约8的范围内。在一个实例中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐配制于pH为5的乙酸盐缓冲液中。在另一个实施例中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐无菌。本发明的化合物或其药学上可接受的盐可例如作为固体或无定形组合物、作为冻干制剂或水溶液储存。
组合物的配制、剂量和给药均应遵循良好的医疗实践。在这种情况下需要考虑的因素包括所治疗的特定疾患、疾患的严重程度、所治疗的特定患者、个体患者的临床病症、疾患的原因、药剂的递送部位、施用方法、施用的时间安排，以及执业医师已知的其他因素。“治疗有效量”的本发明的化合物或其药学上可接受的盐的给药将受此类考虑因素的控制，并且是抑制K-Ras、H-Ras和/或N-Ras活性所需的最小量。通常，此类量可低于对正常细胞或患者整体有毒的量。
根据所用的给药方法，可通过各种方式包装要施用的药物组合物(或制剂)。一般来讲，用于分配的制品包括以适当形式沉积药物制剂的容器。合适的容器是本领域的技术人员所熟知的，并且包括瓶(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金属筒等材料。容器还可包括防篡改组件，以免随意触及包装的内容物。此外，容器上可设置有描述容器的内容物的标签。标签还可包括适当的警告。
可以制备缓释制备物。缓释制剂的合适的实例包括固体疏水性聚合物的半透性基质，该制剂含有治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐，其基质为成形制品例如膜或微胶囊的形式。缓释基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如，聚(2-羟基甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚乳酸、L-谷氨酸与γ-乙基-L-谷氨酸盐的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物诸如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球)和聚-D-(-)-3-羟丁酸。
用于治疗人类患者的剂量可为约0.01mg至约1000mg范围内的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。例如，在成人的治疗中，在一些实施例中使用的剂量的实例为每天0.01mg至1000mg、每天0.5mg至100mg、每天1mg至50mg或每天5mg至40mg。示例性剂量为每天10mg至30mg。确切剂量取决于给药途径、化合物的给药形式、待治疗的受试者、待治疗的受试者的体重以及主治医师的偏好和经验。剂量可为每天给药一次(QD)、每天两次(BID)或更频繁地给药，具体取决于药代动力学和药效学特性，包括特定化合物的吸收、分布、代谢和排泄。此外，毒性因素可能影响剂量和给药方案。口服给药时，药丸、胶囊或片剂可在指定的时间段内以每天一次或更低的频率摄入。给药方案可重复多个疗程。
治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐可通过任何合适的方式给药，其中包括口服、局部(包括颊和舌下)、直肠、阴道、经皮、肠胃外、皮下、腹膜内、肺内，皮内、鞘内、硬膜外和鼻内以及(在需要局部治疗的情况下)病灶内给药。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。
治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐可通过任何方便的给药形式给药，例如片剂、粉末、胶囊、溶液、分散体、混悬剂、糖浆、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳剂、贴剂等。此类组合物可包含药物制剂中常规的组分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、甜味剂、填充剂及其他活性剂。
典型制剂通过将治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐和赋形剂混合来制得。合适的赋形剂包括载体(例如微晶纤维素、乳糖、甘露醇)、溶剂(例如液体聚乙二醇)、乳化剂和分散剂或湿润剂(例如十二烷基硫酸钠、聚氧山梨糖醇油酸酯)、粘结剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成聚合物和天然聚合物(例如白蛋白)、稳定剂(例如抗氧化剂，例如抗坏血酸)、着色剂(例如无机颜料，例如氧化铁)以及味道和/或气味矫正剂，并且是本领域的技术人员所熟知的，详述于以下文献中，例如：Ansel,H.C.,et al.,Ansel’sPharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems。Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.,et al.Remington:TheScience and Practice of Pharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；和Rowe,R.C.,Handbook of Pharmaceutical Excipients,Chicago,PharmaceuticalPress,2005。制剂还可包括一种或多种缓冲剂、表面活性剂、润滑剂、悬浮剂、防腐剂、避光剂、助流剂、加工助剂、甜味剂、加香剂、矫味剂、稀释剂及其他已知的添加剂以提供美观的药物(即，本发明的化合物或其药物组合物)外观或有助于药品(即，药物)的生产。
在某些实施例中，用于口服的药物制剂通过将一种或多种固体赋形剂与一种或多种本文所述的化合物混合获得，任选地研磨所得混合物并且在向其中加入合适的助剂后(如果需要)加工颗粒混合物，以获得片剂或糖丸核。合适的赋形剂具体地为填料，诸如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；纤维素制剂，诸如玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠；或其他，诸如聚乙烯吡咯烷酮(PVP或聚维酮)或磷酸钙。在具体实施例中，任选地加入崩解剂。崩解剂包括(仅以举例的方式)交联羧甲纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐诸如海藻酸钠。
在一个实施例中，提供的剂型诸如糖丸核和片剂带有一种或多种合适的包衣。在具体实施例中，利用浓缩糖溶液形成剂型的包衣。糖溶液任选地含有其他组分，诸如(仅以举例的方式)阿拉伯胶、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆凝胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。染料和/或颜料也可任选地添加到包衣中以供标识。此外，任选地利用染料和/或颜料以表征活性化合物剂量的不同组合。
在某些实施例中，将治疗有效量的本文所述的至少一种化合物配制为其他口服剂型。口服剂型包括由明胶制成的推入配合胶囊以及由明胶和增塑剂诸如甘油或山梨糖醇制成的密封软胶囊。在具体实施例中，推入配合胶囊含有与一种或多种填料混合的活性成分。填料包括(仅以举例的方式)乳糖、粘结剂(诸如淀粉)和/或润滑剂(诸如滑石粉或硬脂酸镁)以及任选的稳定剂。在其他实施例中，软胶囊含有一种或多种溶解或悬浮在合适液体中的活性化合物。合适的液体包括(仅以举例的方式)一种或多种脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇。此外，任选地加入稳定剂。
在其他实施例中，将治疗有效量的本文所述的至少一种化合物配制为用于经颊或舌下给药。适于经颊或舌下给药的制剂包括(仅以举例的方式)片剂、锭剂或凝胶。在其他实施例中，本文所述的化合物被配制用于肠胃外注射，包括适合于团注或连续输注的制剂。在具体实施例中，注射用制剂存在于单位剂型(例如，在安瓿中)或多剂量容器中。任选地，将防腐剂添加到注射制剂中。在其他实施例中，将药物组合物以适于肠胃外注射的形式配制为油性或水性载体中的无菌混悬剂、溶液或乳剂。肠胃外注射制剂任选地含有配制剂，例如混悬剂、稳定剂和/或分散剂。在具体实施例中，用于肠胃外给药的药物制剂包括水溶性形式的活性化合物的水溶液。在其他实施例中，将本发明的化合物或其药学上可接受的盐的混悬剂制备为合适的油性注射混悬剂。用于本文所述的药物组合物中的合适的亲脂性溶剂或载体包括(仅以举例的方式)脂肪油(诸如芝麻油)、合成脂肪酸酯(诸如油酸乙酯或甘油三酸酯)或脂质体。在某些具体实施例中，水性注射混悬剂含有增加混悬剂粘度的物质，诸如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或葡聚糖。任选地，混悬剂含有合适的稳定剂或提高化合物溶解度的试剂，以允许制备高浓度溶液。另选地，在其他实施例中，活性成分为粉末形式，以便在使用前与合适的载体(例如无菌无热原水)进行配制。
在某些实施例中，药物组合物以任何常规方式使用一种或多种生理学上可接受的赋形剂和助剂，这些赋形剂和助剂有助于将活性化合物加工成可药用的制剂。合适的制剂取决于所选择的给药途径。根据需要，可任选地使用任何药学上可接受的技术和赋形剂。包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物以常规方式制造，诸如(仅以举例的方式)通过常规的混合、溶解、造粒、糖衣丸制备、漂浆、乳化、包囊、包埋或压制过程进行制造。
药物组合物包含至少一种药学上可接受的赋形剂以及在本文中描述为活性成分的治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。活性成分为游离酸或游离碱形式，或为药学上可接受的盐的形式。此外，本文所述的方法和药物组合物还包括使用N-氧化物、晶体形式(也称为多晶型)以及具有相同活性类型的这些化合物的活性代谢物。本文所述的化合物的所有互变异构体均包括在本文所提出的化合物的范围内。另外，本文所述的化合物涵盖药学上可接受的溶剂(诸如水、乙醇等)的非溶剂化形式和溶剂化形式。本文所提出的化合物的溶剂化形式也被视为本文所公开的内容。此外，药物组合物可任选地包括其他药物或药剂、赋形剂(诸如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶液促进剂、用于调节渗透压的盐、缓冲液和/或其他具有治疗价值的物质)。
本文所述的用于制备包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐的组合物的方法包括将本发明的化合物或其药学上可接受的盐与一种或更惰性的药学上可接受的赋形剂一起配制，以形成固体、半固体或液体。固体组合物包括但不限于粉末、片剂、可分散颗粒剂、胶囊、药囊和栓剂。液体组合物包括其中溶解有化合物的溶液、包含该化合物的乳剂或含有本文所公开的化合物的脂质体、胶束或纳米颗粒的溶液。半固体组合物包括但不限于凝胶、混悬剂和膏剂。本文所述的药物组合物的形式包括液体溶液或混悬剂、适合在使用前溶于或悬浮于液体的固体形式或作为乳剂。这些组合物还任选地含有少量无毒的辅料，诸如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂等。
在一些实施例中，包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物示例性地为液体形式，其中药剂以溶液、混悬剂或两者形式存在。通常，当组合物以溶液或混悬剂形式给药时，药剂的第一部分以溶液形式存在，并且药剂的第二部分以颗粒形式存在于液体基质的混悬剂中。在一些实施例中，液体组合物包括凝胶制剂。在其他实施例中，液体组合物为水性组合物。
在某些实施例中，可用的水性混悬剂含有作为悬浮剂的一种或多种聚合物。可用的聚合物包括水溶性聚合物，诸如纤维素聚合物(例如羟丙基甲基纤维素)，以及非水溶性聚合物，诸如交联的含羧基的聚合物。本文所述的某些药物组合物包含粘膜粘附聚合物，其选自例如羧甲基纤维素、卡波姆(丙烯酸聚合物)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚丙烯酰胺、聚卡波非、丙烯酸/丁酯丙烯酸酯共聚物、海藻酸钠和葡聚糖。
可用的药物组合物还任选地包括增溶剂，以有助于提高本发明的化合物或其药学上可接受的盐的溶解度。术语“增溶剂”通常包括导致形成胶束溶液或真正溶剂溶液的试剂。某些可接受的非离子表面活性剂，例如聚山梨醇酯80，可用作增溶剂，如眼科上可接受的二醇、聚乙二醇，例如聚乙二醇400和乙二醇醚。
此外，可用的药物组合物任选地包括一种或多种pH调节剂或缓冲剂，包括酸，诸如乙酸、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸和盐酸；碱，诸如氢氧化钠、磷酸钠、硼酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠、乳酸钠和三羟甲基氨基甲烷；以及缓冲液，诸如柠檬酸盐/葡萄糖、碳酸氢钠和氯化铵。此类酸、碱和缓冲液的含量需要使组合物的pH值保持在可接受的范围内。
此外，可用的组合物还任选地包括一种或多种盐，其含量需要使组合物的渗透压处于可接受的范围内。此类盐包括具有钠、钾或铵阳离子和氯离子、柠檬酸根、抗坏血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氢根、硫酸根、硫代硫酸根或亚硫酸氢根阴离子的盐；合适的盐包括氯化钠、氯化钾、硫代硫酸钠、亚硫酸氢钠和硫酸铵。
其他可用的药物组合物任选地包括一种或多种抑制微生物活性的防腐剂。合适的防腐剂包括：含汞物质，诸如硼酸苯汞(merfen)和硫柳汞(thiomersal)；稳定化二氧化氯；以及季铵化合物，诸如苯扎氯铵、十六烷基三甲基溴化铵和西吡氯铵。
其他可用的组合物包括一种或多种表面活性剂，以增强物理稳定性或用于其他目的。合适的非离子表面活性剂包括：聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和植物油，例如聚氧乙烯(60)氢化蓖麻油；以及聚氧乙烯烷基醚和烷基苯基醚，例如辛基酚聚醚10、辛基酚聚醚40。
在需要的情况下，其他可用的组合物还包括一种或多种抗氧化剂以增强化学稳定性。合适的抗氧化剂包括(仅以举例的方式)抗坏血酸和焦亚硫酸钠。
在某些实施例中，水性混悬剂组合物包装在无法重新盖紧的单剂量容器中。另选地，可使用可重新盖紧的多剂量容器，在这种情况下，通常在组合物中加入防腐剂。
在替代实施例中，采用其他用于疏水性药物化合物的递送系统。本文所用的递送载体或赋形剂的实例包括脂质体和乳剂。在某些实施例中，还可采用有机溶剂诸如N-甲基吡咯烷酮。在附加实施例中，本文所述的化合物使用缓释系统诸如含有治疗剂的固体疏水性聚合物的半透性基质进行递送。各种缓释材料可用于本文中。在一些实施例中，缓释胶囊可在几周直至超过100天的时间里释放化合物。
本发明进一步提供了兽用组合物，其包含至少一种如上文所定义的活性成分以及兽用赋形剂。兽用赋形剂是可用于施用组合物的材料，可以为固态、液态或气态材料，这些材料在兽医领域是惰性的或可接受的，并且与活性成分相容。这些兽用组合物可经由肠胃外、口服或任何其他所需的途径给药。
联合疗法
本发明的化合物或其药学上可接受的盐可单独使用或与其他治疗剂联合使用，以治疗本文所述的疾病或疾患。药物组合制剂或给药方案中的第二种化合物优选具有与本发明的化合物或其药学上可接受的盐互补的活性，以使它们彼此之间不产生不利影响。联合疗法可提供“协同作用”并且证明“协同”，即，活性成分一起使用时所实现的效果优于单独使用化合物时产生的效果之和。
联合疗法可同时或顺序施用。当顺序施用时，可两次或更多次联合给药。联合给药包括同时施用，其使用单独的制剂或单一药物制剂，并且以任意顺序连续施用，其中优选地，两种(或所有)活性剂在一定时间段内同时发挥其生物学活性。
因此，根据本发明的联合疗法包含施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐，以及使用至少一种其他治疗方法。将选择本发明的化合物或其药学上可接受的盐和其他药物活性剂的量，以及相对给药时间，以便实现所需的联合治疗效果。
在该方法的各种实施例中，附加治疗剂为表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)抑制剂、胰岛素样生长因子受体(IGF1R)抑制剂，Janus激酶(JAK)抑制剂、Met激酶抑制剂、SRC家族激酶抑制剂、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂、拓扑异构酶抑制剂(诸如伊立替康，或诸如依托泊苷，或诸如阿霉素)、紫杉烷类药物(诸如抗微管剂，包括紫杉醇和多西他赛)、抗代谢药物(诸如5-FU，或诸如吉西他滨等)或烷基化剂(诸如顺铂，或诸如环磷酰胺)或紫杉烷。
在一些实施例中，附加治疗剂为表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂，诸如埃罗替尼或阿法替尼。在一些实施例中，附加治疗剂为易瑞沙。在一些实施例中，附加治疗剂为单克隆抗体，诸如西妥昔单抗(Erbitux)或帕尼单抗(Vectibix)。在一些实施例中，GFR抑制剂为双重或全HER抑制剂。在其他实施例中，附加治疗剂为磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂，诸如GDC-0941、MLN1117、BYL719(Alpelisib)或BKM120(Buparlisib)。GDC-0941是指2-(1H-吲唑-4-基)-6-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-甲基)-4-吗啉-4-基噻吩并[3,2-d]嘧啶或其盐(例如，二甲磺酸盐)。
在其他实施例中，附加治疗剂为胰岛素样生长因子受体(IGF1R)抑制剂。例如，在一些实施例中，胰岛素样生长因子受体(IGF1R)抑制剂为NVP-AEW541。在其他实施例中，附加治疗剂为IGOSI-906(Linsitinib)、BMS-754807；或在其他实施例中，附加治疗剂是IGF1R特异性中和性单克隆抗体，诸如AMG-479(ganitumab)、CP-751,871(figitumumab)、IMC-A12(cixutumumab)、MK-0646(dalotuzumab)或R-1507(robatumumab)。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为Janus激酶(JAK)抑制剂。在一些实施例中，附加治疗剂为CYT387、GLPG0634、巴瑞克替尼、来他替尼、莫美罗替尼、帕瑞替尼、鲁索替尼或TG101348。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为抗Glypican-3抗体。在一些实施例中，抗Glypican-3抗体为codrituzumab。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为抗体药物偶联物(ADC)。在一些实施例中，ADC为polatuzumab vedotin、RG7986、RG7882、RG6109或RO7172369。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为MDM2拮抗剂。在一些实施例中，MDM2拮抗剂为idasanutlin。
在一些其他实施例中，附加治疗剂是抗CD40的激动性抗体。在一些实施例中，抗CD40的激动性抗体为selicrelumab(RG7876)。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为双特异性抗体。在一些实施例中，双特异性抗体RG7828(BTCT4465A)、RG7802、RG7386(FAP-DR5)、RG6160、RG6026、ERY974或抗HER2/CD3。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为靶向免疫细胞因子。在一些实施例中，靶向免疫细胞因子为RG7813或RG7461。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为靶向集落刺激因子-1受体(CSF-1R)的抗体。在一些实施例中，CSF-1R抗体为emactuzumab。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为个性化癌症疫苗。在一些实施例中，个性化癌症疫苗为RG6180。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为BET(溴结构域和额外终端域家族)蛋白(BRD2/3/4/T)抑制剂。在一些实施例中，BET抑制剂为RG6146。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为设计成与TIGIT结合的抗体。在一些实施例中，抗TIGIT抗体为RG6058(MTIG7192A)。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为选择性雌激素受体下调剂(SERD)。在一些其他实施例中，SERD为RG6047(GDC-0927)或RG6171(GDC-9545)。
在一些其他实施例中，附加治疗剂为MET激酶抑制剂，诸如克唑替尼、替凡尼替、AMG337、卡博替尼或foretinib。在其他实施例中，附加治疗剂为MET的中和单克隆抗体，诸如onartuzumab。
在更多实施例中，附加治疗剂为SRC家族非受体酪氨酸激酶抑制剂。例如，在一些实施例中，附加治疗剂为SRC家族非受体酪氨酸激酶亚族的抑制剂。在这个方面，示例性抑制剂包括达沙替尼。在这方面的其他实例包括帕纳替尼、塞卡替尼和博舒替尼。
在另外一些实施例中，附加治疗剂为丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂。在其中一些实施例中，丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂为曲美替尼、司美替尼、(考比替尼)、PD0325901或RO5126766。在其他实施例中，MEK抑制剂为GSK-1120212，也称为曲美替尼。
在另外一些实施例中，附加治疗剂为细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂。在其中一些实施例中，丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂为SCH722984或GDC-0994。
在其他实施例中，蛋白激酶抑制剂为taselisib、ipatasertib、GDC-0575、GDC-5573(HM95573)、RG6114(GDC-0077)、CKI27、阿法替尼、阿昔替尼、阿特朱单抗、贝伐单抗、博舒替尼(Bosutinib)、西妥昔单抗、克唑替尼、达沙替尼、埃罗替尼、福坦替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、依鲁替尼、尼罗替尼、帕尼单抗、帕唑帕尼、哌加他尼钠、兰尼单抗、鲁索替尼、索拉非尼、舒尼替尼、SU6656、曲妥珠单抗、托法替尼、凡德他尼或维罗非尼。在更多实施例中，附加治疗剂为拓扑异构酶抑制剂。在其中一些实施例中，拓扑异构酶抑制剂为伊立替康。在一些更多实施例中，附加治疗剂为紫杉烷。示例性紫杉烷包括紫杉醇和多西他赛。
除上述附加治疗剂以外，其他化学治疗剂是本领域中目前已知的，并且可与本发明的化合物联合使用。在一些实施例中，化学治疗剂选自由以下项组成的组：有丝分裂抑制剂、烷基化剂、抗代谢药、嵌入抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物反应调节剂、抗激素、血管生成抑制剂和抗雄激素。
非限制性实例为化学治疗剂、细胞毒性剂和非肽小分子，诸如(甲磺酸伊马替尼)、(硼替佐米)、Casodex(比卡鲁胺)、(吉非替尼)和阿霉素以及众多化疗剂。化学治疗剂的非限制性实例包括：烷基化剂，诸如噻替派和环磷酰胺(CYTOXANTM)；烷基磺酸盐，诸如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶，诸如benzodopa、卡波醌、meturedopa和uredopa；乙亚胺和甲基三聚氰胺，包括六甲蜜胺、三亚乙基三聚氰胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫基磷酰胺和三羟甲基三聚氰胺；氮芥类，诸如苯丁酸氮芥、氯苯那嗪、环磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、氮芥、盐酸甲氧氮芥、美法仑、新恩比兴、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲洛磷胺、乌拉莫司汀；亚硝基脲，诸如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀；抗生素，诸如阿克那霉素、放线菌素，authramycin、重氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素、加利车霉素、carabicin、洋红霉素、嗜癌素、CasodexTM、色霉素、更生霉素、道诺霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代-正亮氨酸、阿霉素、表柔比星、埃索比星、伊达比星、马赛霉素、丝裂霉素、霉酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素、potfiromycin、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑菌素、链脲菌素、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢物，诸如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如denopterin、氨甲蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫基鸟嘌呤；嘧啶类似物，诸如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮杂呋喃啶、卡莫氟、阿糖胞苷、二脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷、雄激素诸如卡普睾酮、屈他雄酮丙酸酯、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺素，诸如氨基谷氨酰胺、米托坦、三氯杀螨醇；叶酸补充剂，诸如亚叶酸；乙酰丙酮；aldophosphamide glycoside；氨基乙酰丙酸；安吖啶；bestrabucil；比生群；edatraxate；defofamine；地美可辛；亚丝醌；elfomithine；elliptinium acetate；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；洛尼达宁；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；nitracrine；喷司他丁；phenamet；吡柔比星；鬼臼酸；2-乙酰肼；丙卡巴肼；多糖K；丙亚胺；西佐喃；锗螺胺；细交链格孢酮酸；三亚胺醌；2,2',2”-三氯三乙胺；尿烷；长春地辛；达卡巴嗪；甘露醇氮芥；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；gacytosine；阿糖胞苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替哌；紫杉烷，例如紫杉醇(TAXOLTM，Bristol-Myers Squibb Oncology，Princeton，N.J.)和多西他赛(TAXOTERETM，Rhone-Poulenc Rorer，Antony，France)；视黄酸；埃斯佩拉霉素；卡培他滨；以及上述化合物的药学上可接受的盐、酸或衍生物。还包括作为合适的化疗细胞调节剂的抗激素剂，其用于调节或抑制激素对肿瘤的作用，诸如抗雌激素，包括例如他莫昔芬(NolvadexTM)、雷洛昔芬、芳香酶抑制4(5)-咪唑、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬、雷洛西芬、LY117018、奥那司酮和托瑞米芬(Fareston)；抗雄激素，诸如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-硫基鸟嘌呤；巯基嘌呤；氨甲蝶呤；铂类似物，诸如顺铂和卡铂；长春碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；丝裂霉素C；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；米托蒽醌；替尼泊苷；道诺霉素；氨基蝶呤；伊班膦酸盐；喜树碱11(CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；和二氟甲基鸟氨酸(DMFO)。在需要的情况下，本发明的化合物或药物组合物可与通常开具的抗癌药联合使用，诸如 VenclextaTM、 ABVD、AVICINE、阿巴伏单抗、吖啶甲酰胺、Adecatumumab、17-N-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素、Alpharadin、Alvocidib、3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲、氨萘非特、蒽二酮、抗CD22免疫毒素、抗肿瘤药、抗癌草、阿哌喹酮、阿替莫德、硫唑嘌呤、贝洛替康、苯达莫司汀、BIBW 2992、比立考达、Brostallicin、Bryostatin、丁硫氨酸亚砜胺、CBV(化学疗法)、花萼海绵诱癌素、细胞周期非特异性抗肿瘤药、二氯乙酸、圆皮海绵内酯、依沙芦星、依诺他滨、埃博霉素、艾日布林、依维莫司、依喜替康、依昔舒林、弥罗松酚、呋咯地辛、磷雌酚、ICE化疗方案，IT-101、伊美克、咪喹莫特、吲哚并咔唑、伊洛福芬、Laniquidar、拉洛他赛、来那度胺、甲硫恩酮、勒托替康、马磷酰胺、米托唑胺、萘福昔定、奈达铂、奥拉帕尼、奥他赛、PAC-1、木瓜、匹杉琼、蛋白酶体抑制剂、蝴蝶霉素、雷西莫特、鲁比替康、SN-38、Salinosporamide A、Sapacitabine、Stanford V、苦马豆素、他拉泊芬、Tariquidar、Tegafur-uracil、替莫唑胺、Tesetaxel、三铂四硝酸酯、三(2-氯乙基)胺、曲沙他滨、乌拉莫司汀、Vadimezan、长春氟宁、ZD6126或Zosuquidar。
化合物及附加治疗剂的确切给药方法对本领域的普通技术人员显而易见。在一些示例性实施例中，同时施用化合物和附加治疗剂。在其他实施例中，分开施用化合物和附加治疗剂。
在一些实施例中，将化合物和附加治疗剂与第二种药物同时或分开施用。该联合给药可包括同时施用相同剂型的两种药剂、同时施用单独的剂型以及分开施用。即，本文所述的化合物及任何附加治疗剂可以相同的剂型配制在一起并且同时施用。另选地，本文所述的化合物和任何附加治疗剂可同时施用，其中两种药剂存在于单独的制剂中。在另一个替代方案中，可在施用本文所述的任何附加治疗剂之后紧接着施用该化合物，反之亦然。在单独给药方案的一些实施例中，本文所述的化合物和任何附加治疗剂间隔开数分钟、或数小时或数天施用。
制品
在本发明的另一个实施例中，提供了一种含有用于治疗上述疾病和疾患的材料的制品或“套件”。在一个实施例中，套件包含装有本发明的化合物或其药学上可接受的盐的容器。套件可进一步包含在容器上或与容器相关的标签或包装插页。术语“包装插页”用于指治疗产品的商业包装中通常包括的说明书，其含有涉及使用此类治疗产品的有关适应症、用法、剂量、施用、禁忌症和/或警告的信息。合适的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器、泡罩包装等。该容器可由诸如玻璃或塑料等多种材料形成。容器可容纳本发明的化合物或其药学上可接受的盐或其有效治疗疾病的制剂，并且具有无菌入口(例如，容器可为静脉内输液袋或具有可通过皮下注射针刺穿的瓶塞的小瓶)。组合物中的至少一种活性剂为本发明的化合物或其药学上可接受的盐。另选地或另外地，制品还可包括第二容器，该第二容器包括药学上可接受的稀释剂，诸如抑菌性注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液或葡萄糖溶液。所述制品还可包括从商业和用户角度所需的其他物质，包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头和注射器。
在另一个实施例中，该套件适合于递送固体口服形式的本发明的化合物或其药学上可接受的盐，诸如片剂或胶囊。此类套件可包括许多单位剂量。此类套件的一个实例为“泡罩包装”。泡罩包装是在包装行业中所熟知的，并且广泛用于包装药物单位剂型。
附加实施例
本文提供了以下附加实施例。
实施例1：一种具有式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R1是能够与K-Ras G12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分；
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或
R2和R3、R3和R4或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
实施例2：根据实施例1所述的化合物，具有式(II)：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或
R2和R3、R3和R4或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
R7选自由以下项组成的组：H、氰基和卤素；并且R8和R9各自独立地选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：甲磺酰基(甲磺酰)、对甲苯磺酰基(甲苯磺酰基)、烷基或芳基磺酸盐离去基团、C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基；
或
R7和R8一起在它们所连接的碳之间形成三键，或者R7和R8与它们各自所键合的碳一起形成C3-7环烯基，该环烯基任选地被一个或两个卤代取代基取代；并且R9选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
实施例3：根据实施例1所述的化合物，具有式(III)：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或
R2和R3、R3和R4或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
R10选自由以下项组成的组：R10a和-C(O)-R10a；
R10a选自由以下项组成的组：环氧乙烷基和氮杂环丁烷基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
实施例4：根据实施例1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R2选自由以下项组成的组：NH2和-NHR；并且R为C1-6烷基。
实施例5：根据实施例1-4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R2为NH2。
实施例6：根据实施例1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3和R4独立地选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基和环丙基。
实施例7：根据实施例1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R5选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基。
实施例8：根据实施例1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R5为C1-3卤代烷基。
实施例9：根据实施例1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R5为CF3并且R2为NH2。
实施例10：根据实施例1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R5为环丙基。
实施例11：根据实施例1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其中每个基团任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基。
实施例12：根据实施例11中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R4和R5与其各自键合的原子一起形成C6-14芳基，其任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基。
实施例13：根据实施例12所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R4和R5与其各自键合的原子一起形成C6芳基，其任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基。
实施例14：根据实施例13所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中C6芳基未被取代。
实施例15：根据实施例13所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中C6芳基被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地为卤素。
实施例16：根据实施例1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：直链C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基和C1-6烷基氨基；
R5选自由以下项组成的组：H、Cl、Br、I、NH2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少两个并非H；或
R2和R3、R3和R4或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基或C6-14芳基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基和C1-3卤代烷氧基；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；以及
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
实施例17：一种具有(I)的化合物，其具有式(IV)：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R1是能够与K-Ras G12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其各自任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S、和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；
n选自由以下项组成的组：0、1和2；并且
R11选自由以下项组成的组：
实施例18：根据实施例1-17中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Y为Y1，并且Y1选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基和C1-6卤代烷基。
实施例19：根据实施例1-17中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
Y为-L-Y1；
L选自由以下项组成的组：O和N(La)；
La为H；并且
Y1选自由以下项组成的组：C1-6烷基、被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基以及被甲基取代的4至10元杂环基；并且
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基。
实施例20：根据实施例19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中L为N(La)，La为H，并且Y1为C1-6烷基或被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基。
实施例21：根据实施例19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
L为O；
Y1选自由以下项组成的组：被4至10元杂环基取代的C1-6烷基(其任选地被1-4个Y1a取代基取代)、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基以及被甲基取代的4至10元杂环基；并且
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基。
实施例22：根据实施例19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Y1为被4至10元甲基杂环基取代基取代的C1-6烷基。
实施例23：根据实施例19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Y选自由以下项组成的组：
实施例24：根据实施例23所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Y为
实施例25：根据实施例17-24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R11为
实施例26：根据实施例17-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R11为
实施例27：根据实施例17-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R11为
实施例28：根据实施例1-27中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R6a为H。
实施例29：根据实施例1-28中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R6b选自由以下项组成的组：H、卤素、C1-6烷氧基、C1-6烷基磺酰基、C1-6卤代烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷硫基和4至10元杂环基。
实施例30：根据实施例1-28中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R6b是氢、卤素或C1-3卤代烷基。
实施例31：根据实施例1-30中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中W为C(R6c)，并且R6c是氢为卤素。
实施例32：根据实施例1-31中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中W为C(R6c)，并且R6c为卤素。
实施例33：根据实施例1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X为4至7元杂环基。
实施例34：根据实施例1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X为被1至4个取代基取代的4至7元杂环基，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：氰基、C1-6烷基、C1-6氰基烷基和C1-6卤代烷基。
实施例35：根据实施例1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X选自由以下项组成的组：
实施例36：根据实施例1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X选自由以下项组成的组：
实施例37：根据实施例1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X选自由以下项组成的组：
实施例38：根据实施例1-32中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X为
实施例39：根据实施例1-38中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中n为0。
实施例40：根据实施例1或17所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1选自由以下项组成的组：
其中：
R12选自由以下项组成的组：C1-6烷酰基、C1-6烷基和C1-6烷基磺酰基；
R13选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基和C1-6卤代烷基；
R13a为卤素；并且
R14为卤素。
实施例41：根据实施例40所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1选自由以下项组成的组：
实施例42：根据实施例41所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为
实施例43：根据实施例2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R7选自由以下项组成的组：H、氰基和卤素；并且R8和R9各自独立地选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：甲磺酰基(甲磺酰)、对甲苯磺酰基(甲苯磺酰基)、烷基或芳基磺酸盐离去基团、C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基。
实施例44：根据实施例1或17所述的化合物或其药学上可接受的盐，其具有选自由以下项组成的组中的式：
以及
或其药学上可接受的盐。
实施例45：根据实施例44所述的化合物或其药学上可接受的盐，其具有选自由以下项组成的组中的式：式(Ib)或(Il)。
实施例46：根据实施例17-41中任一项所述的化合物，其中具有式(IV)的化合物包含选自由以下项组成的组中的式：
以及
或其药学上可接受的盐。
实施例47：根据实施例46所述的化合物，其中具有式(IV)的化合物包含具有式(IVa)、(IVb)、(IVd)或(IVg)的化合物或其药学上可接受的盐。
实施例48：根据实施例46所述的化合物，其中具有式(IV)的化合物包含具有式(IVa)或(IVb)的化合物或其药学上可接受的盐。
实施例49：根据实施例46所述的化合物，其中具有式(IV)的化合物包含具有式(IVd)或(IVg)的化合物或其药学上可接受的盐。
实施例50：根据实施例2所述的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，其中R7和R8一起在它们所连接的碳之间形成三键，或者R7和R8与它们各自所键合的碳一起形成C3-7环烯基，该环烯基任选地被一个或两个卤代取代基取代；并且R9选自由以下项组成的组：H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氰基和卤素；其中C1-6烷基任选地被选自由以下项组成的组中的一个取代基取代：C1-6烷酰基氨基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基氨基、C6-12二烷基氨基和C1-6卤代烷氧基。
实施例51：根据实施例2所述的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施例，其中R7、R8和R9各自为H。
实施例52：一种化合物或其药学上可接受的盐，如表1所提供。
实施例53：一种药物组合物，其包含实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。
实施例54：根据实施例53所述的药物组合物，其中将药物组合物配制用于口服给药。
实施例55：根据实施例53所述的药物组合物，其中将药物组合物配制用于注射。
实施例56：一种治疗癌症的方法，该方法包括向有此需要的个体施用治疗有效量的实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或者实施例53-55中任一项所述的药物组合物。
实施例57：根据实施例56所述的方法，其中个体是人。
实施例58：根据实施例55或56所述的方法，其中通过口服途径给药。
实施例59：根据实施例55或56所述的方法，其中通过注射给药。
实施例60：根据实施例56-59中任一项所述的方法，其中癌症由K-Ras G12C突变介导。
实施例61：根据实施例56-60中任一项所述的方法，其中癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。
实施例62：根据实施例56-61中任一项所述的方法，其中癌症为肺腺癌。
实施例63：一种调节K-Ras G12C突变蛋白活性的方法，该方法包括使突变蛋白与实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐反应。
实施例64：一种抑制细胞群增殖的方法，该方法包括使细胞群与实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐接触。
实施例65：根据实施例64所述的方法，其中对增殖的抑制以细胞群的细胞活性的下降来衡量。
实施例66：一种治疗有此需要的个体的由K-Ras G12C突变介导的疾患的方法，该方法包括：
确定个体是否具有突变；以及
如果确定该个体具有突变，则向该个体施用治疗有效量的实施例1-52中任一项所述的化合物其药学上可接受的盐或实施例53-55中任一项所述的药物组合物。
实施例67：根据实施例66所述的方法，其中疾患为癌症。
实施例68：根据实施例67所述的方法，其中癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。
实施例69：根据实施例66所述的方法，其中癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。
实施例70：根据实施例66-69中任一项所述的方法，其中癌症为肺腺癌。
实施例71：一种制备带标记的K-Ras G12C突变蛋白的方法，该方法包含使K-RasG12C突变蛋白与实施例1-52中任一项所述的带标记的化合物或其药学上可接受的盐反应，得到带标记的K-Ras G12C突变蛋白。
实施例72：一种抑制肿瘤转移的方法，该方法包括向有此需要的个体施用治疗有效量的实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或者实施例53-55中任一项所述的药物组合物。
实施例73：实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在生产用于治疗癌症的药物中的用途。
实施例74：根据实施例73所述的用途，其中药物被配制用于口服给药。
实施例75：根据实施例73所述的用途，其中药物被配制用于注射。
实施例76：根据实施例73-75中任一项所述的用途，其中癌症由K-Ras G12C突变介导。
实施例77：根据实施例73-76中任一项所述的用途，其中癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。
实施例78：根据实施例73-76中任一项所述的用途，其中癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。
实施例79：根据实施例73-78中任一项所述的用途，其中癌症为肺腺癌。
实施例80：实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在生产用于抑制肿瘤转移的药物中的用途。
实施例81：根据实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或实施例53-55中任一项所述的药物组合物在通过疗法治疗人或动物体的方法中的用途。
实施例82：根据实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或实施例53-55中任一项所述的药物组合物在治疗癌症的方法中的用途。
实施例83：根据实施例82所述的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物，其中癌症由K-Ras G12C突变介导。
实施例84：根据实施例82或83所述的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物，其中癌症为血液癌、胰腺癌、MYH相关的息肉病、大肠癌或肺癌。
实施例85：根据实施例82或83所述的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物，其中癌症为肺癌、大肠癌、阑尾癌或胰腺癌。
实施例86：根据实施例82-85中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或药物组合物，其中癌症为肺腺癌。
实施例87：根据实施例1-52中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或实施例53-55中任一项所述的药物组合物在抑制肿瘤转移的方法中的用途。
实例
下列实例示出本发明范围内的化合物的制备和生物学评估。提供以下这些实例和制剂，以使本领域的技术人员更清晰地理解并且实践本发明。它们不应被认为是对本发明的范围的限制，而仅仅用于说明和代表本发明的范围。
在实例中使用以下缩写：
ACN-乙腈
Ac2O-乙酸乙酯
BINAP-(+/-)-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘
Boc2O-二碳酸二叔丁酯
BOP-(苯并三唑-1-氧基)三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐
CH3Ti(Oi-Pr)3-三异丙醇甲基钛(IV)
DBU-1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯
DCE-1,2-二氯乙烷
DCM-二氯甲烷
DIEA或DIPEA-N,N-二异丙基乙胺
DMA-N,N-二甲基乙酰胺
DMAc-N,N-二甲基乙酰胺
DMAP-4-二甲基氨基吡啶
DMF-N,N-二甲基甲酰胺
DMSO-二甲基亚砜
EA-乙酸乙酯
EtOAc-乙酸乙酯
EtOH-乙醇
HATU-2-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
HFIP-六氟异丙醇
HOAc-乙酸
iPrOAc-乙酸异丙酯
KF-氟化钾
KOAc-乙酸钾
LDA-二异丙基氨基锂
LiHMDS-双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂
LCMS-a
mCPBA-3-氯过氧苯甲酸
MeCN-乙腈
MeI-碘甲烷
MeOH-甲醇
MeONa-甲氧基钠或甲醇钠
MTBE-甲基叔丁基醚
MW-微波
NaBH(OAc)3-三乙酰氧基硼氢化钠
NIS-N-碘代丁二酰亚胺
P(Cy)3或PCy3-三环己基膦
P(t-Bu)3HBF4-三叔丁基磷鎓四氟硼酸盐
Pd/C-碳载钯
Pd2(dba)3-三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
Pd2(dba)3CHCl3-三(二亚苄基丙酮)二钯(0)氯仿
Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2-[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]氯化钯(II)或二氯[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)与二氯甲烷的络合物
Pd(PPh3)4-四(三苯基膦)钯(0)
Pd(PPh3)2Cl2-双(三苯基膦)二氯化钯(II)
PE-石油醚
PMBCl-4-甲氧基氯苄
pTsA-对甲苯磺酸
r.t.-室温
Sn2(n-Bu)6-六丁基二锡
TBSCl-叔丁基二甲基甲硅烷基氯或叔丁基二甲基氯硅烷
[Rh(COD)Cl]2-氯(1,5-环辛二烯)铑(I)二聚体
TEA-三乙胺
TFA-三氟乙酸或2,2,2-三氟乙酸
THF-四氢呋喃
THP-四氢吡喃
TsOH-对甲苯磺酸
化合物实例
中间体1：4-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
根据以下方案制备中间体4-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：
第1步：7-溴-4,6-二氯喹唑啉
向7-溴-6-氯-3,4-二氢喹唑啉-4-酮(330g，1.28mol)的亚硫酰氯溶液(4.0L)中，加入N,N-二甲基甲酰胺(4mL)。在80℃下，将该混合物搅拌12h。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩，得到7-溴-4,6-二氯喹唑啉(350g，粗产物)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：277.1[M+H]+。
第2步：4-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在110℃下，将7-溴-4,6-二氯喹唑啉(330g，1.20mol)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(340g，1.80mol，1.50当量)和DIPEA(586mL，3.60mol)的1,4-二噁烷溶液(3.0L)搅拌60min。完成后，通过过滤收集固体，用PE(500mL)和水(500mL)进行洗涤，然后干燥得到4-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(446g，87.4％)，其为淡黄色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.71(s，1H)，8.22(s，1H)，7.95(s，1H)，3.76(dd，J＝6.2，3.7Hz，4H)，3.65(dd，J＝6.4，3.8Hz，4H)，1.50(s，9H)。LCMS(ESI，m/z)：429.2[M+H]+。
中间体2：2((2R)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈
根据以下反应方案制备中间体化合物2((2R)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈：
第1步：叔丁基(2-((4-甲氧苄基)氨基)丙基)氨基甲酸酯
向N-(2-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(8.3g，47.6mmol)和对甲氧基苯甲醛(5.8mL，47.6mmol)的1,2-二氯乙烷溶液(175mL)中，加入三乙酰氧基硼氢化钠(15g，71.5mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌18小时。用DCM稀释反应产物，然后用饱和Na2CO3进行洗涤。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用iPrOAc/Hep进行洗脱)，得到(2-((4-甲氧苄基)氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(10.2g，71％)。LCMS(ESI，m/z)：295.5[M+H]+。
第2步：叔丁基(E)-(2-((3-氰基烯丙基)(4-甲氧苄基)氨基)丙基)氨基甲酸酯
在50℃下，将(2-((4-甲氧苄基)氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.9g，9.8mmol)、(E)-4-溴丁-2-烯腈(1.2mg，8.22mmol)和碳酸钠(2.8g，26.3mmol)的乙醇溶液(30mL)搅拌18小时。浓缩反应产物，然后用EtOAc进行稀释。用水洗涤有机层。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用iPrOAc/Hep进行洗脱)，然后用MeOH/DCM洗脱，得到(E)-(2-((3-氰基烯丙基)(4-甲氧苄基)氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯。LCMS(ESI，m/z)：360.6[M+H]+。
第3步：2-((2R)-4-(4-甲氧苄基)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈和2-((2S)-4-(4-甲氧苄基)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈
在室温下，将(E)-(2-((3-氰基烯丙基)(4-甲氧苄基)氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.3g，6.4mmol)加入5％三氟乙酸的六氟-2-丙醇溶液(75mL，49.3mmol)中搅拌18小时。浓缩反应产物，然后加入1,4-二噁烷(80mL)和三乙胺(5.75mL，41.1mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌60分钟。浓缩粗产物，然后用HPLC进行纯化(NH4OH 5-50％)，得到2-((2R)-4-(4-甲氧苄基)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈(HPLC峰1，1.05g，49％)和2-((2S)-4-(4-甲氧苄基)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈(HPLC峰2，0.76g，35％)。任意分配立体化学结构。LCMS(ESI，m/z)：260.1[M+H]+。
第4步：2-((2R)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈和2-((2S)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈
向2-((2R)-4-(4-甲氧苄基)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈(600mg，2.313mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)中，加入三氟乙酸(17.5mL，231.3mmol)。在50℃下，将该反应混合物搅拌48小时。浓缩反应产物，并且将粗产物用于下一步。LCMS(ESI，m/z)：140.1[M+H]+。
中间体3：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
根据以下合成方案制备化合物4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：
第1步：2-氨基-4-溴-5-氯-苯甲酰胺
在室温下，将2-氨基-4-溴-5-氯苯甲酸(10.0g，39.92mmol)、N,N-二异丙基乙胺(15.45g，119.77mmol)和氯化铵(6.41g，119.77mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(50mL)搅拌5分钟。然后加入HATU(18.22g，47.91mmol)，并且在室温下搅拌2小时。完成后，用水使反应淬灭。对反应混合物进行过滤，收集滤饼，并且在真空下进行干燥，得到2-氨基-4-溴-5-氯-苯甲酰胺(8g，32.0mmol，收率80.3％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：248.9[M+H]+。
第2步：7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-醇
在搅拌下，向2-氨基-4-溴-5-氯-苯甲酰胺(20.0g，80.16mmol)的1,4-二噁烷溶液(100mL)中逐滴加入硫光气(20.3g，176.52mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时，然后在105℃下继续搅拌1小时。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。用乙醚洗涤有机层，得到7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-醇(20g，68.043mmol，收率84.9％)，其为棕色固体。LCMS(ESI，m/z)：292.9[M+H]+。
第3步：4-(7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-醇(15.0g，51.03mmol)、甲基磺酸酐(35.6g，204.11mmol)和N,N-二异丙基乙胺(26.3g，203.88mmol)的二氯甲烷溶液(200mL)搅拌0.5小时。然后加入1-哌嗪羧酸叔丁酯(14.2g，76.24mmol)和N,N-二异丙基乙胺(13.2g，102.33mmol)，并在25℃下搅拌2小时。完成后，用乙酸乙酯稀释所得溶液，并且用水进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/6)进行洗脱，得到4-(7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(13g，28.13mmol，收率55.1％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：461.0[M+H]+。
第4步：4-(7-溴-6-氯-2-氟-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在140℃下，将4-(7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(15.6g，33.75mmol)和KF(40.0g，688.47mmol)的二甲基亚砜溶液(100mL)搅拌4小时。完成后，使反应体系冷却至室温，然后用水稀释，并且用乙酸乙酯进行萃取。然后将有机层混合，用盐水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(3/1)进行洗脱，得到4-(7-溴-6-氯-2-氟-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10g，22.44mmol，收率66.5％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：445.0[M+H]+。
第5步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，在65℃下将4-(7-溴-6-氯-2-氟-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(50.0g，104.66mmol)、(6-(双(4-甲氧基苯基)氨基)吡啶-2-基)硼酸(90.0g，229.44mmol)、磷酸钾(45.0g，212.26mmol)和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)二氯化钯(II)(11.5g，15.73mmol)加入四氢呋喃(1.5L)和水(300mL)溶液中搅拌3小时。完成后，用乙酸乙酯稀释所得溶液，并且用水进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/6)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯。(52g，69.77mmol，收率66.7％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：713.3[M+H]+。
第6步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(9.61g，12.9mmol)、N-碘代丁二酰亚胺(14.45g，64.49mmol)和对甲苯磺酸(0.09g，0.52mmol)的乙腈溶液(180mL)搅拌24小时。完成后，用乙酸乙酯稀释所得溶液，并且用盐水进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/7)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(7.71g，8.85mmol，收率68.6％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：839.2[M+H]+。
第7步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(15.35g，17.62mmol)和碘化铜(I)(40.17g，211.44mmol)的N,N-二甲基乙酰胺溶液(380mL)中，加入2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(84.63g，440.51mmol)，并且在90℃下搅拌6小时。完成后，用乙酸乙酯稀释所得溶液，并且用盐水进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/5)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(11.8g，14.51mmol，收率82.3％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：781.3[M+H]+。
中间体4：4-(7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
根据以下方案合成化合物4-(7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：
第1步：7-溴-6-氯-1,2,3,4-四氢喹唑啉-2,4-二酮
向3000mL圆底烧瓶中，加入2-氨基-4-溴-5-氯苯甲酸(200g，0.8mol)和尿素(720g，12mol)。在160℃下，将所得溶液搅拌12小时。待该混合物冷却至80℃后，用水使其淬灭，然后回流5-10分钟。使该混合物冷却至室温以形成沉淀。通过过滤收集固体，并且用H2O进行洗涤，然后置于烘箱中使其干燥，得到200g(90％)7-溴-6-氯-1,2,3,4-四氢喹唑啉-2,4-二酮粗产物，其为黄色固体。该粗产物不经进一步纯化，直接用于下一步。
第2步：7-溴-2,4,6-三氯喹唑啉
在120℃下，将7-溴-6-氯-1,2,3,4-四氢喹唑啉-2,4-二酮(200g，0.72mol)和N,N-二甲基苯胺(264g，2.16mol)的POCl3溶液(750mL)搅拌8小时，在真空下进行浓缩，然后将其直接用于下一步而不经进一步纯化。
第3步：4-(7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体4)
在25℃下，将7-溴-2,4,6-三氯喹唑啉(200g，0.64mol)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(178g，0.92mol)和DIEA(3当量)的1,4-二噁烷溶液(2000mL)搅拌8小时。用2000mL水稀释所得溶液，然后用3×3000mL乙酸乙酯进行萃取。用盐水(1×100mL)洗涤混合有机层，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1:10)进行洗脱，得到126g(43％)4-(7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.20-8.14(m，1H)，8.16-8.10(m，1H)，3.95-3.87(m，4H)，3.60-3.52(m，4H)，1.44(s，9H)。LCMS(ESI，m/z)：461.1[M+H]+。
中间体5：(S)-4-(7-溴-2,6-二氯喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
化合物(S)-4-(7-溴-2,6-二氯喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体5)根据关于中间体4所述的方案进行制备，不同之处在于，第3步使用(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯代替哌嗪-1-羧酸叔丁酯。
实例1：1-[4-[7-(3-氨基-1-异喹啉基)-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
根据以下合成方案制备化合物1-[4-[7-(3-氨基-1-异喹啉基)-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：
第1步：4-(6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向4-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(550mg，1.29mmol)和双(频哪醇合)二硼(733mg，2.83mmol)的1,4-二噁烷溶液(25.0mL)中，加入乙酸钾(189.3mg，0.121mL，1.929mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(95.0mg，0.129mmol)。将反应混合物脱气，然后在85℃下加热18小时。通过硅藻土(celite)对反应混合物进行过滤，将滤液浓缩，并利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到4-(6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(514mg，84％)。LCMS示出硼酸的质谱图。LCMS(ESI，m/z)：393.1[M+H]+。
第2步：4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将1-溴异喹啉-3-胺(196mg，0.85mmol)、4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(270mg，0.57mmol)、碳酸铯(371mg，1.14mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加合物(47mg，0.057mmol)的乙腈(6mL)和水(3mL，157.8mmol)溶液脱气。在90℃下将反应混合物加热5h。通过硅藻土对反应混合物进行过滤，然后利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到235mg 4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：491.2[M+H]+。
第3步：1-(6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)异喹啉-3-胺
向4-[7-(3-氨基-1-异喹啉基)-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(235mg，0.48mmol)的1,4-二噁烷溶液(2.0mL)中，加入盐酸(4mol/L)的1,4-二噁烷溶液(1.2mL，4.8mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌18h。浓缩反应产物，得到136mg 1-(6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)异喹啉-3-胺粗产物。将该粗产物直接用于下一步，而不经进一步纯化。LCMS(ESI，m/z)：391.1[M+H]+。
第4步：1-[4-[7-(3-氨基-1-异喹啉基)-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向1-(6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)异喹啉-3-胺(136mg，0.35mmol)和丙烯酸(0.026mL，0.383mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(3.5mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(0.30mL，1.74mmol)和HATU(203mg，0.52mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌15min。用水使反应淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，然后通过反相HPLC进行分离，得到8mg 1-(4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。
实例1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.70(s，1H)，8.21(s，1H)，7.84(s，1H)，7.63(dd，J＝8.5，1.0Hz，1H)，7.47(ddd，J＝8.3，6.6，1.2Hz，1H)，7.25(dq，J＝8.5，0.9Hz，1H)，7.07(ddd，J＝8.5，6.7，1.2Hz，1H)，6.85(dd，J＝16.7，10.4Hz，1H)，6.75(d，J＝0.9Hz，1H)，6.18(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，6.10(s，2H)，5.75(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，4.01-3.73(m，8H)。LCMS(ESI，m/z)：445.1[M+H]+。
实例2：1-[4-[6-氯-7-(3-甲基-2-吡啶基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
制备程序与实例1相同，不同之处在于，在实例2的第2步，使用可商购获得的2-溴-3-甲基吡啶作为替代试剂代替1-溴异喹啉-3-胺。
实例2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.69(s，1H)，8.51(ddd，J＝4.8，1.6，0.7Hz，1H)，8.19(s，1H)，7.81(ddd，J＝7.8，1.7，0.8Hz，1H)，7.76(s，1H)，7.42(dd，J＝7.7，4.7Hz，1H)，6.84(dd，J＝16.7，10.4Hz，1H)，6.18(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.74(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.95-3.75(m，8H)，2.14(d，J＝0.8Hz，3H)。LCMS(ESI，m/z)：394.1[M+H]+。
实例3：1-[4-[7-(6-氨基-1,7-萘啶-8-基)-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
制备程序与实例1相同，不同之处在于，在实例3的第2步，使用可商购获得的8-溴-1,7-萘啶-6-胺作为替代试剂代替1-溴异喹啉-3-胺。
实例3：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.69(s，1H)，8.44(dd，J＝4.0，1.6Hz，1H)，8.14(s，1H)，8.07(dd，J＝8.6，1.6Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.44(dd，J＝8.5，4.0Hz，1H)，6.84(dd，J＝16.7，10.5Hz，1H)，6.75(s，1H)，6.32(s，2H)，6.18(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.5，2.3Hz，1H)，3.85(d，J＝43.6Hz，8H)。LCMS(ESI，m/z)：446.1[M+H]+。
实例4：1-[4-[7-(3-氨基-2,6-萘啶-1-基)-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
制备程序与实例1相同，不同之处在于，在实例4的第2步，使用可商购获得的1-溴-2,6-萘啶-3-胺作为替代试剂代替1-溴异喹啉-3-胺。
实例4：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.13(d，J＝1.1Hz，1H)，8.71(s，1H)，8.23(s，1H)，8.09(d，J＝5.9Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.09(dt，J＝5.9，1.1Hz，1H)，6.88(t，J＝1.1Hz，1H)，6.87-6.79(m，1H)，6.49(s，2H)，6.18(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.99-3.74(m，8H)。LCMS(ESI，m/z)：446.1[M+H]+。
实例5：1-[4-[7-(3-氨基-5-氯-1-异喹啉基)-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
制备程序与实例1相同，不同之处在于，在实例5的第2步，使用可商购获得的1-溴-5-氯-异喹啉-3-胺作为替代试剂代替1-溴异喹啉-3-胺。
实例5：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.70(s，1H)，8.22(s，1H)，7.88(s，1H)，7.67(dd，J＝7.4，1.1Hz，1H)，7.25(dt，J＝8.5，1.0Hz，1H)，7.03(dd，J＝8.5，7.3Hz，1H)，6.98(d，J＝1.0Hz，1H)，6.85(dd，J＝16.7，10.5Hz，1H)，6.49(s，2H)，6.18(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.5，2.4Hz，1H)，3.99-3.75(m，8H)。LCMS(ESI，m/z)：479.1[M+H]+。
实例6：1-[4-[7-(3-氨基-6-甲氧基-1-异喹啉基)-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
制备程序与实例1相同，不同之处在于，在实例6的第2步，使用可商购获得的1-溴-6-甲氧基异喹啉-3-胺作为替代试剂代替1-溴异喹啉-3-胺。
实例6：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.69(s，1H)，8.19(s，1H)，7.80(s，1H)，7.14(d，J＝9.2Hz，1H)，6.98(d，J＝2.4Hz，1H)，6.84(dd，J＝16.7，10.5Hz，1H)，6.74-6.63(m，2H)，6.18(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，6.03(s，2H)，5.75(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.78-3.99(m，11H)。LCMS(ESI，m/z)：475.1[M+H]+。
实例7：(S)-1-(4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
根据以下合成方案制备化合物(S)-1-(4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮。
第1步：1-(三丁基甲锡烷基)异喹啉-3-胺
将1-溴异喹啉-3-胺(500mg，2.17mmol)、双(三丁基锡)(1.21mL，2.39mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(205mg，0.217mmol)、三环己基膦(122mg，0.435mmol)和氯化锂(460mg，10.9mmol)的1,4-二噁烷(10mL)溶液脱气。在115℃下，将该反应混合物搅拌18h。通过硅藻土对反应混合物进行过滤。将该粗产物用于下一步。LCMS(ESI，m/z)：434.1[M+H]+。
第2步：4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将1-三丁基甲锡烷基异喹啉-3-胺(300mg，0.693mmol)、4-(7-溴-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(617mg，1.39mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(80.0mg，0.069mmol)、碘化亚铜(39.6mg，0.21mmol)和氯化锂(124mg，2.77mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(14mL)溶液脱气。利用微波，将反应混合物在150℃下加热15min。通过硅藻土对反应混合物进行过滤，并且将滤液浓缩。将粗产物浓缩，并利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(94mg，27％)。LCMS(ESI，m/z)：444.9[M+H]+。
第3步：1-(6-氯-8-氟-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)异喹啉-3-胺
向4-[7-(3-氨基-1-异喹啉基)-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(410mg，0.806mmol)的1,4-二噁烷溶液(3.0mL)中，加入盐酸(4mol/L)的1,4-二噁烷溶液(2.0mL，8.1mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌18h。浓缩反应产物，得到329mg 1-(6-氯-8-氟-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)异喹啉-3-胺粗产物。将该粗产物直接用于下一步，而不经进一步纯化。LCMS(ESI，m/z)：409.1[M+H]+。
第4步：(S)-1-(4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
向1-(6-氯-8-氟-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)异喹啉-3-胺(329mg，0.805mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.70mL，4.02mmol)的二氯甲烷溶液(8.0mL)中，加入0℃的丙烯酸(0.061mL，0.885mmol)和HATU(468.3mg，1.21mmol)。在0℃下，将该反应混合物搅拌10min。用水使反应淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到1-(4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，然后进行手性SFC纯化，得到30.6mg(S)-1-(4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体(收率8.2％)。
实例7：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.73(s，1H)，8.08(d，J＝1.5Hz，1H)，7.65(dt，J＝8.7，0.9Hz，1H)，7.49(ddd，J＝8.3，6.7，1.2Hz，1H)，7.25(dt，J＝8.6，1.0Hz，1H)，7.09(ddd，J＝8.5，6.7，1.1Hz，1H)，6.84(dd，J＝16.7，10.4Hz，1H)，6.79(d，J＝0.9Hz，1H)，6.24-6.08(m，3H)，5.75(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，4.04-3.90(m，4H)，3.90-3.74(m，4H)。LCMS(ESI，m/z)：463.1[M+H]+。
实例8：(R)-1-(4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
对1-(4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮进行手性分离，得到实例8。
实例8：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.73(s，1H)，8.08(d，J＝1.5Hz，1H)，7.65(dt，J＝8.5，0.9Hz，1H)，7.49(ddd，J＝8.3，6.7，1.2Hz，1H)，7.25(dt，J＝8.6，1.0Hz，1H)，7.09(ddd，J＝8.5，6.7，1.2Hz，1H)，6.84(dd，J＝16.7，10.5Hz，1H)，6.80-6.76(m，1H)，6.23-6.10(m，3H)，5.75(dd，J＝10.5，2.4Hz，1H)，4.05-3.90(m，4H)，3.82(d，J＝29.0Hz，4H)。LCMS(ESI，m/z)：463.1[M+H]+。
实例9：(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
制备程序与实例7相同，不同之处在于，在实例9的第1步，使用可商购获得的6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺作为替代试剂代替1-溴异喹啉-3-胺。
实例9：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.70(s，1H)，8.01(d，J＝1.5Hz，1H)，7.84(d，J＝8.9Hz，1H)，7.00(s，2H)，6.82(dd，J＝16.7，10.4Hz，1H)，6.69-6.61(m，1H)，6.17(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.74(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.92(t，J＝5.2Hz，4H)，3.84(s，2H)，3.77(s，2H)。LCMS(ESI，m/z)：481.1[M+H]+。
实例10：(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
制备程序与实例7相同，不同之处在于，在实例10的第1步，使用可商购获得的6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺作为替代试剂代替1-溴异喹啉-3-胺。
实例10：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.70(s，1H)，8.01(d，J＝1.6Hz，1H)，7.84(d，J＝8.9Hz，1H)，7.00(s，2H)，6.82(dd，J＝16.7，10.4Hz，1H)，6.69-6.61(m，1H)，6.17(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.74(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.91(dd，J＝6.5，4.0Hz，4H)，3.84(s，2H)，3.77(s，2H)。LCMS(ESI，m/z)：481.1[M+H]+。
实例11：1-(4-(7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
根据以下合成方案制备化合物1-(4-(7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：
第1步：2-(5-氟-4-甲基吡啶-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮
将2-氨基-5-氟-4-甲基吡啶(500mg，3.77mmol)和苯酐(836mg，5.65mmol)的乙酸溶液(9.5mL)在90℃下加热18h。用饱和碳酸氢钠使反应淬灭，然后用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用iPrOAc/Hep进行洗脱)，得到2-(5-氟-4-甲基吡啶-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(834mg，86.5％)。LCMS(ESI，m/z)：257.1[M+H]+。
第2步：2-(6-氯-5-氟-4-甲基吡啶-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮
向2-(5-氟-4-甲基吡啶-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(964mg，3.76mmol)的二氯甲烷溶液(37mL)中，加入3-氯过氧苯甲酸(1.30g，7.53mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌18h。用Na2S2O3饱和水溶液使反应淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩，得到2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-5-氟-4-甲基吡啶-1-氧化物(945mg，92.3％)。
将2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-5-氟-4-甲基吡啶-1-氧化物(550mg，2.02mmol)的三氯氧磷溶液(5.0mL，50.51mmol)在80℃下加热2h。用冰水和饱和。NaHCO3使反应淬灭，然后用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用iPrOAc/Hep进行洗脱)，得到2-(6-氯-5-氟-4-甲基吡啶-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(234mg，39.8％)。LCMS(ESI，m/z)：290.9[M+H]+。
第3步：6-氯-5-氟-N,N-双(4-甲氧苄基)-4-甲基吡啶-2-胺
在45℃下，将2-(6-氯-5-氟-4-甲基吡啶-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(633mg，2.18mmol)加入氨水(7mol/L)的甲醇溶液(3.1mL)中搅拌5h。过滤固体，得到136mg 6-氯-5-氟-4-甲基吡啶-2-胺粗产物。将该粗产物直接用于下一步，而不经进一步纯化。LCMS(ESI，m/z)：161.1[M+H]+。
向0℃的6-氯-5-氟-4-甲基-吡啶-2-胺(250mg，1.56mmol)的N,N-二甲基乙酰胺溶液(6.0mL)中，加入悬浮于油(75.0mg，1.87mmol)中的氢化钠(60质量％)。在0℃下，将该反应混合物搅拌30min，然后逐滴加入4-甲氧基氯化苄(0.24mL，1.71mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌18h。用水使反应淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用iPrOAc/Hep进行洗脱)，得到6-氯-5-氟-N,N-双(4-甲氧苄基)-4-甲基吡啶-2-胺(521mg，83.4％)。LCMS(ESI，m/z)：401.9[M+H]+。
第4步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250mg，0.527mmol)、6-氯-5-氟-N,N-双(4-甲氧苄基)-4-甲基吡啶-2-胺(190.0mg，0.474mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(ii)(37.3mg，0.053mmol)和氟化钾(92mg，1.58mmol)的乙腈(5.0mL)和水(1.0mL)混悬剂脱气。利用微波将反应混合物在125℃下加热30min。通过硅藻土对反应混合物进行过滤。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(145mg，38.6％)。LCMS(ESI，m/z)：657.1[M+H]+。
第5步：6-(6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-氟-4-甲基吡啶-2-胺
向4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，0.280mmol)的二氯甲烷(3.0mL)溶液中，加入三氟乙酸(0.106mL，1.40mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌18h。浓缩反应产物，并且用EtOAc进行洗脱。用饱和NaHCO3洗涤溶液。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩，得到105mg 6-(6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-氟-4-甲基吡啶-2-胺粗产物。将该粗产物直接用于下一步，而不经进一步纯化。LCMS(ESI，m/z)：373.1[M+H]+。
第6步：1-(4-(7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
向6-(6-氯-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-5-氟-4-甲基-吡啶-2-胺(210mg，0.563mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.50mL，2.82mmol)的二氯甲烷(5.5mL)溶液中，加入0℃的丙烯酸(0.042mL，0.620mmol)和HATU(328mg，0.845mmol)。在0℃下，将该反应混合物搅拌10min。用水使反应淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，然后通过反相HPLC进行分离，得到1-(4-(7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(54.1mg，20.7％)。
实例11：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.67(s，1H)，8.14(s，1H)，7.81(s，1H)，6.83(dd，J＝16.7，10.4Hz，1H)，6.45(dd，J＝4.7，1.0Hz，1H)，6.17(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.93(s，2H)，5.74(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.91-3.73(m，8H)，2.21(dd，J＝1.7，0.9Hz，3H)。LCMS(ESI，m/z)：427.1[M+H]+。
实例12：(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
根据以下合成方案制备化合物(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：
第1步：(R)-4-(7-溴-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向4-(7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体4)(500mg，1.08mmol)和(3R)-4-氨基-3-氟-2-甲基-丁-2-醇盐酸盐(375mg，2.38mmol)的2-丙醇溶液(10.0mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(1.90mL，10.8mmol)。在65℃下，将该反应混合物搅拌18h。浓缩反应产物，并利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到(R)-4-(7-溴-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(558mg，94.3％)。LCMS(ESI，m/z)：548.1[M+H]+。
第2步：(R)-4-(6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向(R)-4-(7-溴-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，0.183mmol)和双(频哪醇合)二硼(142mg，0.549mmol)的1,4-二噁烷溶液(3.5mL)中，加入乙酸钾(54mg，0.548mmol)和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(9.0mg，0.0091mmol)。将反应混合物脱气，然后在125℃下搅拌1h。通过硅藻土对反应混合物进行过滤，然后浓缩，得到108mg(R)-4-(6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯粗产物。将该粗产物直接用于下一步，而不经进一步纯化。LCMS(ESI，m/z)：595.1[M+H]+。
第3步：(R)-2-((6-(4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-7-基)-5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯甲酸
将(R)-4-(6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(108mg，0.182mmol)、2-(6-氯-5-氟-4-甲基-2-吡啶基)异吲哚啉-1,3-二酮(74.0mg，0.255mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(13.0mg，0.0182mmol)和氟化钾(42.0mg，0.727mmol)的乙腈(2.0mL)和水(0.5mL)溶液脱气。利用微波将反应混合物在125℃下加热30min。通过硅藻土对反应混合物进行过滤。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到(R)-2-((6-(4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-7-基)-5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯甲酸(38mg，28.2％)。LCMS(ESI，m/z)：741.1[M+H]+。
第4步：(R)-4-((7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-2-基)氨基)-3-氟-2-甲基丁-2-醇
向(R)-2-((6-(4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-7-基)-5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯甲酸(270mg，0.365mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.32mL，1.80mmol)的二氯甲烷溶液(3.5mL)中，加入HATU(212.0mg，0.547mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌18h。用水使反应淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到4-[6-氯-7-[6-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-氟-4-甲基-2-吡啶基]-2-[[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]氨基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(151mg，57.3％)。LCMS(ESI，m/z)：723.1[M+H]+。
在45℃下，将4-[6-氯-7-[6-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-氟-4-甲基-2-吡啶基]-2-[[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]氨基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(190mg，0.263mmol)加入氨(7mol/L)的甲醇溶液(1.90mL，13.2mmol)中搅拌2h。浓缩反应产物，并且将粗产物用于下一步，而不经进一步纯化。
向4-[7-(6-氨基-3-氟-4-甲基-2-吡啶基)-6-氯-2-[[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]氨基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(156mg，0.263mmol)的1,4-二噁烷溶液(1.0mL)中，加入盐酸(4mol/L)的1,4-二噁烷溶液(0.65mL，2.63mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌18h。浓缩反应产物，得到129mg(R)-4-((7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-2-基)氨基)-3-氟-2-甲基丁-2-醇粗产物。将该粗产物直接用于下一步，而不经进一步纯化。LCMS(ESI，m/z)：493.1[M+H]+。
第5步：(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
向(R)-4-((7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-2-基)氨基)-3-氟-2-甲基丁-2-醇(129mg，0.262mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.23mL，1.31mmol)的二氯甲烷(2.5mL)溶液中，加入0℃的丙烯酸(0.020mL，0.290mmol)和HATU(153mg，0.393mmol)。在0℃下，将该反应混合物搅拌10min。用水使反应淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，然后通过反相HPLC进行分离，得到(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(25mg，17.3％)。
实例12：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.84(s，1H)，7.25(d，J＝58.3Hz，2H)，6.84(dd，J＝16.7，10.5Hz，1H)，6.41(dd，J＝4.7，1.0Hz，1H)，6.16(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.88(s，2H)，5.73(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，4.77(s，1H)，4.36(s，1H)，3.90-3.59(m，10H)，2.19(dd，J＝1.7，0.8Hz，3H)，1.20-1.09(m，6H)。LCMS(ESI，m/z)：526.2[M+H]+。
实例13：1-(4-(7-(6-氨基-3,4-二甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
制备程序与实例11相同，不同之处在于，在实例12的第1步中，使用可商购获得的4,5-二甲基吡啶-2-胺作为替代试剂代替2-氨基-5-氟-4-甲基吡啶。
实例13：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.66(s，1H)，8.12(s，1H)，7.64(s，1H)，6.83(dd，J＝16.7，10.5Hz，1H)，6.40-6.36(m，1H)，6.17(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.79-5.69(m，3H)，3.90-3.74(m，8H)，2.18(d，J＝0.8Hz，3H)，1.83(s，3H)。LCMS(ESI，m/z)：423.1[M+H]+。
实例14：1-(4-(7-(6-氨基-3-氯-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
制备程序与实例11相同，不同之处在于，在实例13的第1步中，使用可商购获得的2-氨基-5-氯-4-甲基吡啶作为替代试剂代替2-氨基-5-氟-4-甲基吡啶。
实例14：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.67(s，1H)，8.14(s，1H)，7.72(s，1H)，6.83(dd，J＝16.7，10.5Hz，1H)，6.51(d，J＝0.9Hz，1H)，6.23-6.14(m，3H)，5.74(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.83(dd，J＝39.2，5.3Hz，8H)，2.28(d，J＝0.7Hz，3H)。LCMS(ESI，m/z)：443.1[M+H]+。
实例15：1-(4-(7-(6-氨基-3-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-(7-(6-氨基-3-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，在100℃下，将4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.5g，5.2mmol)、6-溴-5-甲基吡啶-2-胺(1g，5.3mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(432mg，0.52mmol)、氢氧化钠(430mg，10.75mmol)加入1,4-二噁烷(15mL)和水(2mL)溶液中搅拌2h。完成后，用水(30mL)稀释溶液，并且用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取，然后将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，然后在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到1.6g(67％)4-[7-(6-氨基-3-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.6g，3.5mmol，收率67％)，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：455.2[M+H]+。
第2步：6-(6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-甲基吡啶-2-胺
在25℃下，将4-[7-(6-氨基-3-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.5g，3.29mmol)和三氟乙酸(1.12g，9.82mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)搅拌3h。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩，得到1.8g(粗产物)6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-甲基吡啶-2-胺，其为棕色油状物，且不经纯化而直接用于下一步。LC-MS(ESI，m/z)：355.1[M+H]+。
第3步：1-[4-[7-(6-氨基-3-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在25℃下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-甲基吡啶-2-胺(600mg，1.69mmol)、丙-2-烯酸(140mg，1.94mmol)、HATU(1.3g，3.41mmol)、N,N-二异丙基乙胺(877mg，6.78mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)搅拌2h。完成后，用水(5mL)使该溶液淬灭，用二氯甲烷(50mL)进行稀释，并用盐水(3×10mL)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用制备型HPLC进一步分离粗产物(所用条件如下：色谱柱：CHIRALPAKIE，2×25cm，5μm；流动相A：MTBE(10mM NH3-甲醇)，HPLC级，流动相B：甲醇，HPLC级；流速：20mL/min；梯度：在27min内，15B至15B；220/254nm；RT1：17.672；RT2：23.294)，得到1-[4-[7-(6-氨基-3-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(20.2mg，0.048mmol，收率3％)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：409.1[M+H]+。
实例15：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.68(s，1H)，8.23(s，1H)，7.76(s，1H)，7.48(dd，J＝8.4，0.4Hz，1H)，6.88-6.81(m，1H)，6.66(d，J＝8.4Hz，1H)，6.29(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.83(dd，J＝10.8，2.0Hz，1H)，4.02(s，4H)，3.94(s，4H)，2.00(s，3H)。
实例16：N-(6-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-5-甲基吡啶-2-基)乙酰胺
合成路线
第1步：N-(6-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-5-甲基吡啶-2-基)乙酰胺
在25℃下，将1-[4-[7-(6-氨基-3-甲基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(300mg，0.73mmol)、乙酸乙酯(112mg，1.09mmol)、三乙胺(221mg，2.18mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)搅拌9h。完成后，用水(5mL)使溶液淬灭，然后用二氯甲烷(50mL)稀释并且用盐水(3×10mL)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用制备型HPLC进一步分离粗产物(所用条件如下：色谱柱：CHIRALPAK IE，2×25cm，5μm；流动相A：MTBE(10mM NH3-甲醇)，HPLC级，流动相B：甲醇，HPLC级；流速：20mL/min；梯度：在27min内，15B至15B；220/254nm；RT1：17.672；RT2：23.294)，得到N-(6-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-5-甲基吡啶-2-基)乙酰胺(10.2mg，0.023mmol，收率3％)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：451.2[M+H]+。
实例16：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.68(s，1H)，8.22(s，1H)，8.13-8.08(m，1H)，7.76-7.74(m，2H)，6.86-6.79(m，1H)，6.27(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.80(dd，J＝14.4，2.0Hz，1H)，4.00(s，4H)，3.92(s，4H)，2.16(s，3H)，2.13(s，3H)。实例17a和17b：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例17a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例17b)
合成路线
第1步：6-溴-N,N-双(4-甲氧苄基)-4-甲基吡啶-2-胺
向6-溴-4-甲基吡啶-2-胺(30.0g，160mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(500mL)中，缓慢加入0℃下的氢化钠(19.0g，792mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。然后将4-甲氧基氯苄(56.0g，359mmol)加入反应体系中，并且在25℃下搅拌2小时。完成后，用饱和氯化铵溶液(500mL)使反应体系淬灭，并且用乙酸乙酯(2.5L)进行稀释。用盐水(5×500mL)洗涤混合物，并且将有机层混合，用Na2SO4使有机层干燥，并且在真空下进行蒸发。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(15％)进行洗脱，得到6-溴-N,N-双(4-甲氧苄基)-4-甲基吡啶-2-胺(60g，140mmol，收率87.5％)，其为灰白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：427.1[M+H]+。
第2步：N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-6-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-胺
在氮气气氛下，在110℃下，将6-溴-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-吡啶-2-胺(35.0g，82mmol)、六丁基二锡(143.0g，247mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(7.53g，8.2mmol)、三环己基膦(4.6g，16.4mmol)和氯化锂(17.3g，412mmol)的1,4-二噁烷(220mL)溶液搅拌5小时。完成后，在真空下对该反应体系进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)进行洗脱，得到N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-6-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-胺(45g，71mmol，收率86.2％)，其为红色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：639.3[M+H]+。
第3步：2-氨基-4-溴-5-氯-3-氟-苯甲酸
在80℃下，将2-氨基-4-溴-3-氟-苯甲酸(100.0g，427mmol)和N-氯代琥珀酰亚胺(66.0g，494mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(1L)搅拌2小时。完成后，将反应混合物倒入水(2.0L)中，沉淀出大量固体。然后在过滤后收集固体。用热水(1L)对固体进行洗涤。然后，在红外灯下使固体干燥，得到2-氨基-4-溴-5-氯-3-氟-苯甲酸(100g，373mmol，收率87.2％)，其为灰白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：265.9[M-H]+。
第4步：7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
在200℃下，将2-氨基-4-溴-5-氯-3-氟-苯甲酸(120.0g，447mmol)的尿素溶液(806.0g，13.4mol)搅拌1.5小时。完成后，使反应体系冷却至80℃，然后将水(1.5L)加入该反应体系中，并搅拌20min。过滤后，收集固体，并且用热水(1L)进行洗涤。然后，在红外灯下使固体干燥，得到7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(120g，409mmol，收率91.5％)，其为浅棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：290.9[M-H]+。
第5步：(3S)-4-(7-溴-2,6-二氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在110℃下，将7-溴-6-氯-8-氟-喹唑啉-2,4-二醇(65.0g，222mmol)和DMF(500.0mg，6.85mmol)的POCl3溶液(1.0L)搅拌60小时。待原料反应完全后，在真空下对所得混合物进行浓缩。然后将1,4-二噁烷(1.0L)、N,N-二异丙基乙胺(286.0g，2217mmol)和(3S)-3-甲基-1-哌嗪羧酸叔丁酯(90.0g，449mmol)加入反应体系中，并且在25℃下搅拌1小时。完成后，在真空下对溶剂进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(20％)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-溴-2,6-二氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(65g，132mmol，收率59.4％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：493.0[M+H]+。
第6步：(3S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在120℃下，将(3S)-4-(7-溴-2,6-二氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(30.0g，61mmol)与氟化钾(71.0g，1224mmol)的混合物加入N,N-二甲基乙酰胺(300mL)中搅拌18小时。完成后，使反应体系冷却至室温。然后将乙酸乙酯(1.5L)加入反应体系中，并且用水(3×500mL)洗涤混合物。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(20％)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(23g，48mmol，收率79.3％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：477.0[M+H]+。
第7步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，在120℃下，将(3S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(23.0g，48mmol)、N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-6-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-胺(62.0g，97mmol)、四(三苯基膦)钯(11.2g，9.7mmol)、碘化亚铜(2.8g，15mmol)和氯化锂(5.0g，119mmol)的1,4-二噁烷溶液(320mL)搅拌16小时。完成后，用水(100mL)稀释反应产物，并且用乙酸乙酯(100mL)进行萃取。然后将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(30％)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(18.5g，25mmol，收率51.6％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：745.3[M+H]+。
第8步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(18.5g，25mmol)、对甲苯磺酸(171.0mg，0.99mmol)和N-碘代丁二酰亚胺(28.0g，125mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(350mL)搅拌5小时。完成后，用乙酸乙酯(1.5L)稀释反应产物，然后用饱和硫代硫酸钠溶液(4×350mL)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(25％)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(16g，18.4mmol，收率74％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：871.2[M+H]+。
第9步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，在90℃下，将(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(16.0g，18.4mmol)、2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(88.3g，460mmol)和碘化亚铜(42.0g，221mmol)的N,N-二甲基乙酰胺溶液(400mL)搅拌18小时。完成后，用乙酸乙酯(2.0L)稀释反应体系，并且用盐水(4×350mL)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(30％)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(12.2g，15mmol，收率81.7％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：813.3[M+H]+。
第10步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇(4.32g，37.5mmol)的四氢呋喃溶液(300mL)中，缓慢加入0℃的氢化钠(2.1g，87.5mmol)，并且在25℃下搅拌1h。然后将(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(12.2g，15mmol)加入反应体系中，并且在25℃下搅拌1小时。完成后，用甲醇(50mL)使反应体系淬灭。然后在真空下对混合物进行浓缩，并利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(6/94)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(8.6g，9.5mmol，收率63.1％)，其为棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：908.4[M+H]+。
第11步：6-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(8.6g，9.5mmol)的三氟乙酸溶液(100mL)搅拌4小时。完成后，在真空下对该反应体系进行浓缩。将残余物溶于二氯甲烷(50mL)中，然后用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至pH＝9。在真空下进行浓缩后，直接利用反相色谱对残余物进行纯化(色谱条件如下：色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：ACN，B％(在30min内，由5％增加至40％)；检测器，UV 254nm，得到6-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(3.5g，6.17mmol，收率65.1％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：568.2[M+H]+。
第12步：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例17a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例17b)
向6-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(2.5g，4.4mmol)和N,N-二异丙基乙胺(2.9g，22.5mmol)的二氯甲烷溶液(120mL)中，加入-78℃的丙烯酰氯(359.0mg，3.97mmol)，并且在-78℃下搅拌25min。用水使反应淬灭，然后用二氯甲烷进行萃取。将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。直接利用反相色谱对残余物进行纯化(色谱条件如下：色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：ACN，B％(在30min内由5％增加至60％)；检测器，UV 254nm；得到1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(1.3g，2.09mmol，收率47.5％)，其为棕色固体。利用制备型手性HPLC分离非对映异构体混合物(色谱条件如下：色谱柱，CHIRALPAK IC-3 0.46×5cm，3μm；流动相，(己烷:二氯甲烷＝3:1)(含0.1％ DEA):EtOH＝50:50；检测器，254nm；流速，1.0ml/min；柱温：25℃，得到657.7mg 1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例17a)和352.1mg 1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例17b)，两种化合物均为白色固体。
实例17a：LC-MS：(ESI，m/z)：622.2[M+H]+，1H NMR：(400MHz，CDCl3，ppm)δ7.64(s，1H)，6.70-6.55(m，1H)，6.48(s，1H)，6.42-6.35(m，1H)，5.82-5.75(m，1H)，4.90-4.79(m，2H)，4.78-4.40(m，3H)，4.35-4.28(m，1H)，4.18-4.00(m，1H)，3.99-3.76(m，1H)，3.72-3.45(m，2H)，3.31-2.98(m，2H)，2.81-2.70(m，1H)，2.55-2.45(m，6H)，2.35-2.25(m，1H)，2.11-2.01(m，1H)，1.95-1.72(m，3H)，1.36-1.34(m，3H)。
实例17b：LC-MS：(ESI，m/z)：622.2[M+H]+，1H NMR：(400MHz，CDCl3，ppm)δ7.63(s，1H)，6.70-6.55(m，1H)，6.50(s，1H)，6.42-6.35(m，1H)，5.82-5.75(m，1H)，4.85-4.70(m，2H)，4.78-4.68(m，2H)，4.65-4.55(m，1H)，4.50-4.40(m，1H)，4.30-4.10(m，1H)，4.05-3.75(m，1H)，3.80-3.76(m，2H)，3.25-3.08(m，2H)，2.85-2.75(m，1H)，2.60-2.45(m，6H)，2.40-2.25(m，1H)，2.15-2.05(m，1H)，1.95-1.72(m，3H)，1.45-1.32(m，3H)。
实例18a和18b：(E)-1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-氟丁-2-烯-1-酮和(E)-1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-氟丁-2-烯-1-酮
合成路线
向6-[6-氯-8-氟-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(500mg，0.88mmol)、HATU(401mg，1.06mmol)和N,N-二异丙基乙胺(228mg，0.96mmol)的二氯甲烷溶液(25mL)中，加入25℃的(E)-4-氟丁-2-烯酸(100mg，3.97mmol)，并且将混合物溶液搅拌0.5h。完成后，用水使反应淬灭，然后用二氯甲烷进行萃取。将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。直接利用反相色谱对残余物进行纯化(色谱条件如下：色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：ACN，B％(在30min内，由5％增加至60％)；检测器，UV 254nm，得到(E)-1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-氟丁-2-烯-1-酮与(E)-1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-氟丁-2-烯-1-酮的混合物(130mg，0.20mmol，收率23％)，其为白色固体。利用制备型手性HPLC分离非对映异构体混合物(色谱条件如下：色谱柱：CHIRAL Cellulose-SB，色谱柱尺寸：0.46×10cm；3μm，流动相Hex:EtOH＝50:50，流速：1.0mL/min，柱温：25℃)，得到32mg(E)-1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-氟丁-2-烯-1-酮和29.9mg(E)-1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-氟丁-2-烯-1-酮，它们均为白色固体。
实例18a：LC-MS：(ESI,m/z)：654.2[M+H]+,1HNMR:(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.82(s，1H)，6.85(s，2H)，6.83-6.68(m，2H)，6.50(s，1H)，5.20(d，J＝2.8Hz，1H)，5.08(d，J＝2.8Hz，1H)，4.75(s，1H)，4.41-4.23(m，2H)，4.19-3.94(m，3H)，3.73-3.65(m，1H)，3.43-3.07(m，2H)，2.96-2.93(m，1H)，2.60-2.50(m，1H)，2.37-2.36(m，6H)，2.18(dd，J＝16.4，8.0Hz，1H)，1.99-1.90(m，1H)，1.72-1.59(m，3H)，1.27(t，J＝6.8Hz，3H)。
实例18b：LC-MS：(ESI,m/z)：654.2[M+H]+,1HNMR:(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.80(s，1H)，6.85(s，2H)，6.83-6.68(m，2H)，6.50(s，1H)，5.20(d，J＝2.8Hz，1H)，5.08(d，J＝2.8Hz，1H)，4.71(s，1H)，4.39-4.23(m，2H)，4.20-3.93(m，3H)，3.70-3.60(m，1H)，3.51-3.09(m，2H)，2.96-2.93(m，1H)，2.60-2.52(m，1H)，2.37-2.36(m，6H)，2.18(dd，J＝16.4，8.0Hz，1H)，1.99-1.90(m，1H)，1.72-1.59(m，3H)，1.30(t，J＝8.0Hz，3H)。
实例19：1-((3S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-6-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-胺(4.0g，6.27mmol)和4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸酯叔丁酯(2.31g，5.02mmol)、四(三苯基膦)钯(0.72g，0.63mmol)、氯化锂(0.66g，15.69mmol)和碘化亚铜(0.12g，0.63mmol)的1,4-二噁烷溶液(100mL)在120℃下搅拌3小时。完成后，用水(200mL)稀释溶液，并且用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取。然后将有机层混合，并且用无水硫酸钠使其干燥。在真空下浓缩有机层，并利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/20)进行洗脱，得到4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.1g，1.54mmol，收率24.6％)，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：713.3[M+H]+。
第2步：(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-碘-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在50℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2g，3mmol)和N-碘代丁二酰亚胺(1g，3.00mmol)的乙腈溶液(200mL)搅拌4小时。完成后，用水(30mL)稀释该溶液，用乙酸乙酯(4×50mL)进行萃取，并且将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/20)进行洗脱，得到(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-碘-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.3g，1.55mmol，收率656.5％)，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：839.2[M+H]+。
第3步：(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.1g，0.12mmol)、三氟甲基(1,10-二氮杂菲)铜(I)(0.73g，2.34mmol)和碘化亚铜(0.45g，2.34mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(5mL)在50℃下搅拌5小时。完成后，用水(30mL)稀释该溶液，用乙酸乙酯(4×350mL)进行萃取，并且将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/5)进行洗脱，得到(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(60mg，0.075mmol，收率64.4％)，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：781.3[M+H]+。
第4步：6-[6-氯-8-氟-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.1g，0.13mmol)的三氟乙酸溶液(5.0mL)搅拌3小时。完成后，用水(30mL)稀释该溶液，用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取，并将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(1/9)进行洗脱，得到6-[6-氯-8-氟-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(40mg，0.08mmol，收率69.9％)，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：441.1[M+H]+。
第5步：1-((3S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[6-氯-8-氟-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(0.04g，0.09mmol)和HATU(0.07g，0.18mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.03g，0.26mmol)的二氯甲烷溶液(3mL)搅拌0.5小时。然后加入丙烯酸(0.01g，0.13mmol)，并在-78℃下搅拌4小时。完成后，用水(30mL)稀释该溶液，用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取，并将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用制备型HPLC进一步分离粗产物(所用条件如下：色谱柱：CHIRALPAK IE，2×25cm，5μm；流动相A：MTBE(10mM NH3-甲醇)，HPLC级，流动相B：甲醇，HPLC级；流速：20mL/min；梯度：在27min内，15B至15B；220/254nm；RT1：17.672；RT2：23.294)，得到1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(10mg，0.019mmol，收率22.3％)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：509.1[M+H]+。
实例19：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.67(s，1H)，7.92(s，1H)，6.89-6.82(m，1H)，6.62(s，1H)，6.32-6.26(m，1H)，5.83-5.80(m,1H)，4.56-4.39(m，1H)，4.38-4.30(m，1H)，4.20-4.02(m，1H)，3.80-3.52(m，2H)，3.33-3.30(m，1H)，3.22-3.13(m，1H)，2.45(s，3H)，1.42(d，J＝1.6Hz，3H)。
实例20：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(氮杂环丁烷-1-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-[6-(氮杂环丁烷-1-基)-7-溴-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(7-溴-6-碘-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.5g，10.59mmol)、氮杂环丁烷(1.2g，21.19mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(609.15mg，1.06mmol)、XantPhos(1.22g，2.12mmol)和碳酸铯(6.9g，21.19mmol)的1,4-二噁烷溶液(20mL)在80℃下搅拌2小时。完成后，用乙酸乙酯(200mL)稀释溶液，并且用盐水(50mL)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，然后在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(45/55)进行洗脱，得到4-[6-(氮杂环丁烷-1-基)-7-溴-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g，2.24mmol，收率21.1％)，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：448.1[M+H]+。
第2步：4-[6-(氮杂环丁烷-1-基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-(氮杂环丁烷-1-基)-7-溴-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g，2.23mmol)、双(频哪醇合)二硼(5.66g，22.3mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(182.0mg，0.22mmol)和乙酸钾(437.15mg，4.46mmol)的1,4-二噁烷溶液(15mL)在80℃下搅拌3小时。完成后，用二氯甲烷(100mL)稀释该溶液。过滤后，在减压条件下浓缩滤液。将残余物溶于石油醚(100mL)中。过滤后，利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化滤饼，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)进行洗脱，得到4-[6-(氮杂环丁烷-1-基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.01mmol，收率45.3％)，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：496.3[M+H]+。
第3步：4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(氮杂环丁烷-1-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-(氮杂环丁烷-1-基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500.0mg，1.01mmol)、6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(243.24mg，1.01mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(70.85mg，0.10mmol)和氟化钾(117.07mg，2.02mmol)加入乙腈(10mL)和水(2mL)溶液中并且在80℃下搅拌2小时。完成后，在真空下对该溶液进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(3/97)进行洗脱，得到4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(氮杂环丁烷-1-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(280mg，0.53mmol，收率52.4％)，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：530.2[M+H]+。
第4步：6-[6-(氮杂环丁烷-1-基)-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在110℃下，将4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(氮杂环丁烷-1-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200.0mg，0.38mmol)和硅胶(1.0g)的甲苯溶液(20mL)搅拌12小时。完成后，在真空下对该溶液进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(1/9)进行洗脱，得到6-[6-(氮杂环丁烷-1-基)-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(150mg，0.35mmol，收率92.5％)，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：430.2[M+H]+。
第5步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(氮杂环丁烷-1-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在25℃下，将6-[6-(氮杂环丁烷-1-基)-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(150.0mg，0.35mmol)、丙烯酸(25.17mg，0.35mmol)、HATU(159.37mg，0.42mmol)和N,N-二异丙基乙胺(45mg，0.35mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌1h。完成后，用二氯甲烷稀释该溶液，并用盐水进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用反相色谱柱纯化残余物，用乙腈/水(1/1)进行洗脱，得到1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(氮杂环丁烷-1-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(5.9mg，收率3.5％)，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：484.2[M+H]+。
实例20：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.50(s，1H)，7.83(d，J＝9.0Hz，1H)，7.54(s，1H)，6.91-6.82(m，1H)，6.75-6.70(m，2H)，6.30(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.83(dd，J＝10.6，2.0Hz，1H)，3.99-3.81(m，8H)，3.78-3.61(m，4H)，2.29-2.19(m，2H)。
实例21：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-(1,1-二氟乙基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-(6-乙酰基-7-溴喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(7-溴-6-碘-喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.8g，3.47mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯)锡(2.5g，6.93mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(243.4mg，0.35mmol)的1,4-二噁烷溶液(40mL)在65℃下搅拌30小时。完成后，向该溶液中加入盐酸(40mL，2M)，然后在25℃下搅拌0.5小时。然后在真空下对溶剂进行浓缩。将残余物溶于水(40mL)中，并且用碳酸钾将pH调节至pH＝9。然后加入二碳酸二叔丁酯(1.67g，7.61mmol)，并且将该溶液在25℃下搅拌2小时。完成后，用乙酸乙酯(100mL)对溶液进行萃取，然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物，用乙腈/水(1:1)进行洗脱，得到4-(6-乙酰基-7-溴喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g，2.30mmol，收率66.3％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：435.1，437.1[M+H]+。
第2步：4-[7-溴-6-(1,1-二氟乙基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将4-(6-乙酰基-7-溴喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.2g，2.8mmol)、二乙胺基三氟化硫(3.6mL，27.6mmol)的氯仿溶液(30mL)搅拌36小时。完成后，用水(5mL)使溶液淬灭，并在真空下进行浓缩。利用反相色谱柱纯化残余物，用乙腈/水(5/1)进行洗脱，得到4-[7-溴-6-(1,1-二氟乙基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(570mg，1.2mmol，收率45.2％)，其为浅棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：457.1，459.1[M+H]+。
第3步：4-[6-(1,1-二氟乙基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[7-溴-6-(1,1-二氟乙基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(550.0mg，1.2mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.5g，6.0mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(88.0mg，0.1mmol)、乙酸钾(353.6mg，3.6mmol)的甲苯溶液(20.0mL)在95℃下搅拌4小时。完成后，在真空下对该溶液进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物，用乙腈/水(4/1)进行洗脱，得到4-[6-(1,1-二氟乙基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(350.0mg，0.7mmol，收率57.7％)，其为淡黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：505.3[M+H]+。
第4步：4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(1,1-二氟乙基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-(1,1-二氟乙基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(350.0mg，0.7mmol)、6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(167.2mg，0.7mmol)、碳酸钾(287.3mg，2.1mmol)和双(三苯基膦)氯化钯(II)(48.7mg，0.1mmol)加入乙腈(20mL)和水(2mL)溶液中并且在95℃下搅拌4h。完成后，在真空下对溶液进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物，用乙腈/水(6:1)进行洗脱，得到4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(1,1-二氟乙基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(170mg，0.3mmol，收率45.5％)，其为浅棕色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：539.2[M+H]+。
第5步：6-[6-(1,1-二氟乙基)-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在25℃下，将4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(1,1-二氟乙基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(160.0mg，0.3mmol)在二氯甲烷(10mL)和三氟乙酸(2mL)溶液中搅拌3小时。完成后，在真空下对溶液进行浓缩，得到6-[6-(1,1-二氟乙基)-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(170mg粗产物)，其为浅棕色油状物，并且不经纯化而用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：439.2[M+H]+
第6步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-(1,1-二氟乙基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将(6-[6-(1,1-二氟乙基)-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(160.0mg，0.4mmol)、HATU(346.9mg，0.9mmol)、丙烯酸(52.6mg，0.7mmol)和N,N-二异丙基乙胺(235.4mg，1.8mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌1.0h。完成后，用水(5mL)使溶液淬灭。用二氯甲烷(3×20mL)对所得溶液进行萃取，并将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物，用乙腈/水(6/1)进行洗脱，得到100mg粗产物。然后利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，得到1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-(1,1-二氟乙基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(22.1mg，0.04mmol，收率12.3％)，其为灰白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：493.2[M+H]+。
实例21：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.69(s，1H)，8.26(s，1H)，7.78(d，J＝7.2Hz，1H)，7.67(s，1H)，6.84(dd，J＝16.8，10.4Hz，1H)，6.67(d，J＝8.8Hz，1H)，6.29(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.4，2.0Hz，1H)，4.15-4.00(m，4H)，3.99-3.86(m，4H)，2.02(dd，J＝19.2，18.4Hz，3H)。
实例22：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-1-丙-2-烯酰基-哌啶-4-腈
合成路线
第1步：7-溴-4,6-二氯喹唑啉
在80℃下，将7-溴-6-氯-3H-喹唑啉-4-酮(50g，38.5mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)的亚硫酰氯溶液(500mL，192.7mmol)搅拌3小时。完成后，在真空下对该溶液进行浓缩。然后利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/10)进行洗脱，得到7-溴-4,6-二氯-喹唑啉(26g，收率98％)，其为白色固体。
第2步：7 4-(7-溴-6-氯-喹唑啉-4-基)-4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，向1-叔丁基氧羰基-4-氰基哌啶(18.9g，90.0mmol)和7-溴-4,6-二氯-喹唑啉(5.0g，18.0mmol)的无水甲苯溶液(100mL)中，加入-78℃的TMPMgCl·LiCl(54.0mL，54.0mmol，1.0M的THF溶液)并且搅拌0.5h。完成后，用水使溶液淬灭(50mL)，然后用乙酸乙酯(3×100mL)进行萃取，并且将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)进行洗脱，得到粗产物。然后利用反相色谱法再次纯化粗产物，用乙腈/水(7/3)进行洗脱，得到4-(7-溴-6-氯-喹唑啉-4-基)-4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.6g，3.5mmol，收率19.7％)。LC-MS：(ESI，m/z)：451.0[M+H]+
第3步：4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]-4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(7-溴-6-氯-喹唑啉-4-基)-4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，2.2mmol)、双(频哪醇合)二硼(2.8g，11.1mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(310.4mg，0.4mmol)和乙酸钾(650.8mg，6.6mmol)的1,4-二噁烷溶液(30mL)在110℃下搅拌2小时。完成后，用水(30mL)稀释该溶液，用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取，并将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物，用乙腈/水(7/3)进行洗脱，得到4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]-4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(300mg，0.6mmol，收率27.2％)，其为灰白色固体，LC-MS：(ESI，m/z)：499.2[M+H]+。
第4步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]-4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(200.0mg，0.48mmol)、6-溴-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(134.7mg，0.5mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(33.7mg，0.05mmol)、氟化钾(83.5mg，1.4mmol)加入乙腈(10mL)和水(1mL)溶液中并且在80℃下搅拌1小时。完成后，用水(20mL)稀释该溶液，用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取，并将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(2/1)进行洗脱，得到4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(140mg，0.26mmol，收率53.3％)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：547.2[M+H]+。
第5步：4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌啶-4-腈2,2,2-三氟乙酸酯
在25℃下，将4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(140.0mg，0.26mmol)在二氯甲烷(5mL)和三氟乙酸(0.5mL)溶液中搅拌3小时。完成后，在真空下对溶液进行浓缩，得到150mg粗产物，其不经纯化而直接用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：447.1[M+H]+。
第6步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-1-丙-2-烯酰基-哌啶-4-腈
在25℃下，将丙烯酸(32.3mg，0.5mmol)、HATU(85.1mg，0.2mmol)、N,N-二异丙基乙胺(86.6mg，0.7mmol)和4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌啶-4-腈2,2,2-三氟乙酸酯的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌20min。完成后，用水(30mL)使溶液淬灭，用二氯甲烷(3×30mL)进行萃取，并将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(1/49)进行洗脱，得到粗产物。然后利用反相色谱法纯化粗产物，用乙腈/水(6/1)进行洗脱，得到4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-1-丙-2-烯酰基-哌啶-4-腈(2.1mg，0.0042mmol，收率1.9％)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：501.1[M+H]+。
实例22 1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ9.34(s，1H)，8.87(s，1H)，8.02(s，1H)，6.91-6.87(m，1H)，6.63(s，1H)，6.27(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.8，2.0Hz，1H)，4.82-4.78(m，1H)，4.65(m，1H)，4.44-4.35(m，1H)，3.81-3.72(m，1H)，3.40-3.35(m，1H)，2.69-2.60(m，2H)，2.48(s，3H)，2.45-2.35(m，1H)。
实例23：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-1-(环丁烯-1-羰基)哌嗪-2-腈
合成路线
第1步：环丁烯-1-甲酰氯
在0℃下，将环丁烯-1-羧酸(300.0mg，3.1mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(22.3mg，0.3mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)搅拌0.5小时。然后加入草酰氯(582.3mg，4.6mmol)，并且在0℃下搅拌3h。完成后，在真空下对溶液进行浓缩得到350mg粗产物，将其直接用于下一步。
第2步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-1-(环丁烯-1-羰基)哌嗪-2-腈
在25℃下，将4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-2-腈(150.0mg，0.3mmol)和三乙胺(507.4mg，5.0mmol)的二氯甲烷溶液(25mL)搅拌0.5小时。然后加入环丁烯-1-甲酰氯(195.2mg，粗产物)，并且在25℃下搅拌16小时。用甲醇使反应淬灭。完成后，在真空下对溶液进行浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物(色谱条件如下：色谱柱，XBridge Shield RP18 OBD色谱柱30×150mm，5μm；相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN。流速：60ml/min，室温：6.15min)，得到4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-1-(环丁烯-1-羰基)哌嗪-2-腈(50.6mg，0.0958mmol，收率28.6％)，其为淡黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：528.1[M+H]+。
实例23 1H NMR(300MHz，CDCl3，ppm)δ8.88(s，1H)，8.15(d，J＝12.3Hz，1H)，7.91(s，1H)，6.69(d，J＝0.9Hz，1H)，6.51(s，1H)，5.82(s，1H)，4.85(s，2H)，4.47(dd，J＝13.8，7.8Hz，2H)，4.28(d，J＝12.9Hz，1H)，3.88(s，1H)，3.40(t，J＝15.8Hz，1H)，3.32-3.14(m，1H)，2.94(s，2H)，2.66-2.57(m，2H)，2.51(s，3H)。
实例24：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-1-(环氧乙烷-2-羰基)哌嗪-2-腈
合成路线
第1步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.3g，9.0mmol)、6-氯-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.5g，7.2mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(504.1mg，0.7mmol)、氟化钾(1.6g，26.9mmol)加入乙腈(15mL)和水(1.5mL)溶液中并且在100℃下搅拌18小时。完成后，在真空下对该溶液进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(10/1)进行洗脱，得到4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.8g，5.4mmol，收率59.8％)，其为浅棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：523.2[M+H]+。
第2步：7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-醇
将4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.5g，4.8mmol)、氢氧化钠(573.7mg，14.3mmol)加入乙醇(30mL)和水(10mL)溶液中并且在40℃下搅拌16小时。完成后，在真空下对该溶液进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)进行洗脱，得到7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-醇(1.5g，4.2mmol，收率88.5％)，其为淡黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：355.0[M+H]+。
第3步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-2-腈
在25℃下，将哌嗪-2-腈二盐酸盐(3.6mg，19.7mmol)、7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-醇(1.4g，4.0mmol)、BOP(1.0g，23.7mmol)、N,N-二异丙基乙胺(5.1g，39.5mmol)的二氯甲烷溶液(50mL)搅拌18小时。完成后，在真空下对该溶液进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-2-腈(950mg，2.1mmol，收率53.7％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：448.1[M+H]+。
第4步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-1-(环氧乙烷-2-羰基)哌嗪-2-腈
在25℃下，将4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-2-腈(300.0mg，0.7mmol)、环氧乙烷-2-羧酸(88.5mg，1.0mmol)、BOP(592.6mg，1.3mmol)、N,N-二异丙基乙胺(432.1mg，3.4mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(20mL)搅拌24小时。完成后，用水(40mL)使溶液淬灭，并用二氯甲烷(3×100mL)进行萃取。用盐水(50mL)洗涤混合有机层，用无水硫酸钠使其干燥，然后过滤，并且在真空下对滤液进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到220mg粗产物。利用制备型HPLC纯化粗产物，所用条件如下：色谱柱：XBridge C18，19×150mm，5μm；流动相A：水/0.05％NH4HCO3，流动相B：ACN；(条件)；检测器，UV 254nm。4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-1-(环氧乙烷-2-羰基)哌嗪-2-腈(10.6mg，0.02mmol，收率3.1％)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：518.1[M+H]+。
实例24：1H NMR(300MHz，CDCl3，ppm)δ8.90(s，1H)，8.21-8.09(m，1H)，7.91(s，1H)，6.50(s，1H)，5.85-5.75(m，1H)，4.82(s，2H)，4.47-4.21(m，3H)，4.05-3.95(m，1H)，3.73(t，J＝3.4Hz，1H)，3.59-3.09(m，4H)，2.51(s，3H)。
实例25：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-2-(三氟甲基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-2-(三氟甲基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在0℃下，将6-[6-氯-4-[3-(三氟甲基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(200.0mg，0.4mmol)和丙烯酰氯(45.6mg，0.5mmol)、吡啶(0.07mL，0.8mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(3mL)搅拌3小时。完成后，用水(10mL)使溶液淬灭，并用二氯甲烷(3×20mL)进行萃取。用盐水(10mL)洗涤混合有机层，用无水硫酸钠使其干燥，然后过滤，并且在真空下对滤液进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(1/10)进行洗脱，得到1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-2-(三氟甲基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(19.4mg，0.04mmol，收率8.7％)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：531.1[M+H]+。
实例25：1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.73(s，1H)，8.10(s，1H)，7.86-7.75(m，2H)，6.96(s，2H)，6.93-6.88(m，1H)，6.63(d，0.9Hz，1H)，6.27(t，J＝12Hz，1H)，5.90-5.80(m，1H)，5.50-5.38(m，1H)，4.55-4.20(m，3H)，3.90-3.68(m，2H)，3.56-3.40(m，1H)。
实例26：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(240.0mg，0.6mmol)、2-氟丙-2-烯酸(60mg，0.7mmol)、HATU(260mg，0.7mmol)、N,N-二异丙基乙胺(150mg，1.2mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌30min。完成后，用水(20mL)使溶液淬灭并用二氯甲烷(3×30mL)进行萃取。用盐水(20mL)洗涤混合有机层，用无水硫酸钠使其干燥，然后过滤，并且在真空下对滤液进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到108mg(38％)1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)495.1[M+H]+。
实例26：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.68(s，1H)，8.18(s，1H)，7.71(s，1H)，6.61(s，1H)，5.38-5.32(dd，J＝18.8，3.6Hz，1H)，5.29-5.25(dd，J＝13.2，4.0Hz，1H)，4.09-3.96(m，4H)，3.92(s，4H)，2.47(s，3H)。
实例27：1-[4-[7-(3-氨基-8-氟-1-异喹啉基)-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-(6-氯-8-氟-7-(三丁基甲锡烷基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(7-溴-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.0g，4.5mmol)、六丁基二锡(5.2g，9.0mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(413mg，0.45mmol)、三环己基膦(230mg，0.9mmol)和氯化锂(565mg，13.5mmol)的1,4-二噁烷溶液(20mL)在110℃下搅拌5小时。完成后，在真空下对该反应体系进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)进行洗脱，得到4-(6-氯-8-氟-7-(三丁基甲锡烷基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.5g，2.3mmol)，其为红色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：657.2[M+H]+。
第2步：4-(7-(3-氨基-8-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(6-氯-8-氟-7-(三丁基甲锡烷基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，0.76mmol)、1-溴-8-氟异喹啉-3-胺(183mg，0.76mmol)、四(三苯基膦)钯(88mg，0.076mmol)、碘化亚铜(14.4mg，0.076mmol)和氯化锂(96mg，2.28mmol)的1,4-二噁烷溶液(5mL)在120℃下搅拌16小时。完成后，用水(10mL)稀释反应产物，然后用乙酸乙酯(3×20mL)进行萃取。然后将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(2/1)进行洗脱，得到4-(7-(3-氨基-8-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(40mg，0.076mmol，收率10％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：527.2[M+H]+。
第3步：1-(6-氯-8-氟-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-8-氟异喹啉-3-胺
在25℃下，将4-(7-(3-氨基-8-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(60mg，0.1mmol)、三氟乙酸(1.0mL)的二氯甲烷溶液(5.0mL)搅拌30min。完成后，在真空下对溶液进行浓缩。然后将残余物溶于二氯甲烷(10mL)中，并且用N,N-二异丙基乙胺将所得溶液的pH值调节至pH＝8，然后在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到30mg 1-(6-氯-8-氟-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-8-氟异喹啉-3-胺，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：427.1[M+H]+。
第4步：1-[4-[7-(3-氨基-8-氟-1-异喹啉基)-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将1-(6-氯-8-氟-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-8-氟-异喹啉-3-胺(30.0mg，0.07mmol)、丙烯酸(5.1mg，0.07mmol)、N,N-二异丙基乙胺(18.1mg，0.14mmol)和HATU(32.1mg，0.08mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)搅拌30min。完成后，用水(20mL)使反应淬灭，并且用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取。在真空下对溶剂进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(4/96)进行洗脱，得到50mg粗产物。然后，利用制备型HPLC进一步纯化粗产物(色谱条件如下)，得到1-[4-[7-(3-氨基-8-氟-1-异喹啉基)-6-氯-8-氟-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(4.2mg，0.0087mmol，收率12.4％)，其为白色固体。
制备型HPLC条件色谱柱：XBridge C18 OBD制备柱，5μm，19×150mm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在7min内，B由35％增加至49％；254/220nm；室温：5.68min
实例27：LC-MS：(ESI，m/z)：481.1[M+H]+。1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.71(s，1H)，8.04(s，1H)，7.51-7.45(m，2H)，6.87-6.80(m，3H)，6.41(d，J＝5.2Hz，2H)，6.18(d，J＝16.4，2.0Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.94-3.77(m，8H)。
实例28：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-甲基磺酰基-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-甲基磺酰基-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g，1.96mmol)、甲烷亚磺酸钠(810.3mg，7.86mmol)和碘化铜(I)(74.8mg，0.39mmol)的二甲基亚砜溶液(20mL)在80℃下搅拌10小时。完成后，用水(100mL)稀释反应混合物，并且用乙酸乙酯(3×150mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(4/96)进行洗脱，得到4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-甲基磺酰基-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250mg，0.45mmol，收率23％)，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：553.2[M+H]+。
第2步：6-(6-甲基磺酰基-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在25℃下，将4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-甲基磺酰基-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(240.0mg，0.43mmol)和三氟乙酸(1mL)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌1小时。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。将残余物溶于二氯甲烷(5mL)中，并且用N,N-二异丙基乙胺将所得溶液的pH调节至pH＝9。在真空下浓缩后，利用反相色谱法纯化残余物，用水/乙腈(62/38)进行洗脱，得到6-(6-甲基磺酰基-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(150mg，0.33mmol，收率76.3％)，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：453.1[M+H]+。
第3步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-甲基磺酰基-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-甲基磺酰基-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(140.0mg，0.31mmol)、HATU(141.2mg，0.37mmol)、丙烯酸(22.3mg，0.31mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.11mL，0.62mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌1小时。完成后，用水(20mL)使反应淬灭，并且用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物，用水/乙腈(75/25)进行洗脱，得到1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-甲基磺酰基-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(20.5mg，0.0405mmol，收率13.1％)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：507.1[M+H]+。
实例28：1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.74(s，1H)，8.68(s，1H)，7.79(d，J＝9.0Hz，1H)，7.66(s，1H)，6.89(s，2H)，6.86-6.80(m，1H),6.60(d，J＝8.1Hz，1H)，6.19(dd，J＝16.8，2.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.5，2.4Hz，1H)，4.05(m，4H)，3.86-3.72(m，4H)，3.42(s，3H)。
实例29：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-环丙基-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-环丙基-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-环丙基-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(50.0mg，0.12mmol)、丙烯酸(8.7mg，0.12mmol)、HATU(45.87mg，0.12mmol)、N,N-二异丙基乙胺(15.6mg，0.12mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌20min。完成后，用水(20mL)使反应淬灭，并且用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(4/96)进行洗脱，得到粗产物。利用反相色谱法纯化粗产物，用水/乙腈(3/2)进行洗脱，得到1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-环丙基-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(2.8mg，0.006mmol，收率5％)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：469.2[M+H]+。
实例29：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.62(s，1H)，7.85(d，J＝8.7Hz，1H)，7.63(d，J＝11.4Hz，2H)，6.85(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.71(d，J＝9.0Hz，1H)，6.29(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.6，1.9Hz，1H)，3.94(s，8H)，1.82(t，J＝5.8Hz，1H),0.97-0.83(m，3H)，0.71(d，J＝5.6Hz，1H)。
实例30：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：7-溴-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4(3H)-酮
向2-氨基-4-溴-5-氯苯甲酸(10g，39.9mmol)的0℃的氯仿(100mL)与N,N-二异丙基乙胺(7.5mL)混合溶液中，加入三氟乙酸酐(84g，399.2mmol)。添加完成后，将反应混合物加热回流，期间将其搅拌3小时。然后使反应混合物冷却至室温，并且在浓缩后得到粗产物。将粗产物溶于以氨气饱和的氯仿(100mL)中，然后在室温下搅拌2小时。完成后，在真空下将该混合物浓缩，并且用水(100mL)洗涤所得固体。过滤后，收集滤饼，然后利用甲苯进行重结晶，得到2.1g(16％)7-溴-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4(3H)-酮，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：326.9[M+H]+。
第2步：4-(7-溴-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在80℃下，将7-溴-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4(3H)-酮(4.0g，12.2mmol，1.00equiv)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.6g，24.4mmol)、BOP(8.1g，18.3mmol)和N,N-二异丙基乙胺(4.7g，36.5mmol)的氯仿溶液(100mL)搅拌15h。完成后，在真空下对溶液进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)进行洗脱，得到5.2g(85％)4-(7-溴-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为淡黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：495.0[M+H]+。
第3步：4-(6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(7-溴-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.0g，6.0mmol)、双(频哪醇合)二硼(7.6g，30.3mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(490.2mg，0.6mmol)和乙酸钾(1.8g，18.0mmol)的1,4-二噁烷溶液(50mL)在80℃下搅拌2小时。完成后，用二氯甲烷(50mL)稀释所得溶液，并且对其进行过滤。收集滤液，并且在真空下进行浓缩。用石油醚(3×30mL)洗涤固体，并且通过过滤进行收集，得到2.0(纯度80％)4-(6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为灰白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：543.2[M+H]+。
第4步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g粗产物，纯度80％，1.5mmol)、6-氯-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(300mg，1.4mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(50mg，0.07mmol)、氟化钾(250mg，4.3mmol)加入乙腈(4mL)和水(1mL)中并且在100℃下搅拌30min。完成后，用水(50mL)稀释所得溶液，并且用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取。然后将有机层混合，用盐水(3×20mL)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)进行洗脱，得到400mg(46％)4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为灰白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：591.2[M+H]+。
第5步：6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)-2-(三氟甲基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(490mg，0.8mmol)加入二氯甲烷(5mL)和三氟乙酸(5mL)溶液中并且在25℃下搅拌30min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。将残余物溶于二氯甲烷(5mL)中，并且用N,N-二异丙基乙胺将所得溶液的pH调节至pH＝9。在真空下进行浓缩后，利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(85/15)进行洗脱，得到230mg(57％)6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)-2-(三氟甲基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为浅棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：491.1[M+H]+。
第6步：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)-2-(三氟甲基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(210mg，0.4mmol)、丙-2-烯酸(40mg，0.6mmol)、HATU(200mg，0.5mmol)和N,N-二异丙基乙胺(300mg，2.3mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌30min。完成后，用水(20mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。然后利用反相色谱法纯化残余物，用水/乙腈(3/2)进行洗脱，得到49.6mg(21％)1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：545.1[M+H]+。
实例30：1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.24(s，1H)，7.78(s，1H)，6.85-6.78(m，3H)，6.49(s，1H)，6.22-6.15(m，1H)，5.78-5.72(m，1H)，4.08-4.00(m，4H)，3.88-3.70(m，4H)，2.37(s，3H)。
实例31：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(甲基氨基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-[7-溴-6-氯-2-(甲基氨基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在100℃下，将4-(7-溴-2,6-二氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3g，6.5mmol)、盐酸甲胺(900mg，13.3mmol)、碳酸钾(2.3g，16.6mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(60mL)搅拌12h。完成后，用水(150mL)稀释该溶液，并且用乙酸乙酯(3×150mL)进行萃取。然后，将有机层混合，并且用盐水(3×100mL)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到1.5g(51％)4-[7-溴-6-氯-2-(甲基氨基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：456.1[M+H]+。第2步：4-[6-氯-2-(甲基氨基)-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，在80℃下，用微波辐射将4-[7-溴-6-氯-2-(甲基氨基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.1mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.4g，5.5mmol)、乙酸钾(323.1mg，3.3mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(89.8mg，0.1mmol)的1,4-二噁烷溶液(20mL)照射2h。完成后，用二氯甲烷(20mL)稀释所得溶液，并且进行过滤。收集滤液，并且在真空下进行浓缩。用石油醚(3×30mL)洗涤固体，并且通过过滤收集，以得到600mg(粗产物)4-(6-氯-2-(甲基氨基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯。LC-MS：(ESI，m/z)：504.2[M+H]+。
第3步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(甲基氨基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(6-氯-2-(甲基氨基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.0mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(69.8mg，0.1mmol)、氟化钾(115.5mg，2.0mmol)和6-氯-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(229.9mg，1.1mmol)加入乙腈(10mL)和水(2mL)中，并且在110℃下搅拌1h。完成后，用水(50mL)稀释所得溶液，并且用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取。然后将有机层混合，用盐水(3×20mL)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到300mg(55％)4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(甲基氨基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：552.2[M+H]+。
第4步：7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-N-甲基-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-2-胺
将4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(甲基氨基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(110mg，0.2mmol)加入二氯甲烷(5mL)和三氟乙酸(1mL)溶液中并且在25℃下搅拌30min。完成后，在真空下浓缩所得溶液，得到110mg(粗产物)7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-N-甲基-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-2-胺，其为深红色固体，并且不经纯化而直接用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：452.1[M+H]+。
第5步：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(甲基氨基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-N-甲基-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-2-胺(110mg粗产物)、丙-2-烯酸(17.5mg，0.2mmol)、HATU(92.6mg，0.2mmol)和N,N-二异丙基乙胺(125.6mg，1.0mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌30min。完成后，用水(20mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到粗产物。然后利用制备型HPLC纯化粗产物，所用条件如下：色谱柱：XSelect CSH Prep C18 OBD色谱柱，5μm，19×150mm；流动相A:水(0.05％ TFA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在7min内，B由15％增加至58％；254/220nm；室温：6.15min，得到32.8mg(27％)1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(甲基氨基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：506.2[M+H]+。
实例31：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.16(s，1H)，7.59-7.25(m，1H)，6.79(dd，J＝16.8，10.5Hz，1H)，6.65(s，1H)，6.30(dd，J＝16.5，1.8Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.8，2.1Hz，1H)，4.27(s，4H)，3.94(s，4H)，3.09(s，3H)，2.45(s，3H)。
实例32：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-甲基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：7-溴-6-氯-2-甲基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮
在130℃下，将2-氨基-4-溴-5-氯苯甲酸(10g，39.9mmol)和乙酸乙酯(50mL)搅拌3h。完成后，对所得溶液进行浓缩。然后将残余物溶于氯仿(100mL)中，用氨气使其饱和，然后在80℃下搅拌2小时。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，并且用水洗涤所得固体(100mL)。过滤后，收集滤饼，然后利用甲苯进行重结晶，得到8.4g(77％)7-溴-6-氯-2-甲基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：272.9[M+H]+
第2步：4-(7-溴-6-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在8℃下，将7-溴-6-氯-2-甲基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮(1g，3.66mmol)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.37g，7.36mmol)、BOP(2.45g，5.54mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.8mL，10.89mmol)的氯仿溶液(30mL)搅拌15小时。完成后，在真空下对溶液进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)进行洗脱，得到850mg(53％)4-(7-溴-6-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为淡黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：441.1[M+H]+。
第3步：4-[6-氯-2-甲基-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(7-溴-6-氯-2-甲基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2g，4.5mmol)、双(频哪醇合)二硼(3.3g，13.0mmol)、乙酸钾(1.3g，13.6mmol，3.0当量)和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(196mg，0.24mmol)的1,4-二噁烷溶液(30mL)在80℃下搅拌12小时。完成后，用二氯甲烷(30mL)稀释所得溶液，并且对其进行过滤。收集滤液，并且在真空下进行浓缩。用石油醚(3×30mL)洗涤固体，并且通过过滤进行收集，得到1.9g(纯度85％)4-[6-氯-2-甲基-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯粗产物，其为棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：489.2[M+H]+。
第4步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-甲基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-氯-2-甲基-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1g，2.1mmol)、6-氯-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(430mg，2.04mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(144mg，0.2mmol)和氟化钾(195mg，3.4mmol)加入乙腈(20mL)和水(4mL)溶液中并且在100℃下搅拌1h。完成后，用水(100mL)稀释所得溶液，并且用乙酸乙酯(3×100mL)进行萃取。然后将有机层混合，用盐水(3×30mL)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到460mg(42％)4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-甲基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为淡黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：537.2[M+H]+。
第5步：6-[6-氯-2-甲基-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在室温下，将4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-甲基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(350mg，0.65mmol)在三氟乙酸(3mL)和二氯甲烷(10mL)溶液中搅拌30min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，得到700mg(粗产物)6-[6-氯-2-甲基-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：437.1[M+H]+。
第6步：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-甲基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[6-氯-2-甲基-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(285mg，粗产物)、丙-2-烯酸(94mg，1.30mmol)、HATU(370mg，1.0mmol)和N,N-二异丙基乙胺(2mL)的二氯甲烷溶液(15mL)搅拌30min。完成后，用水(20mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到粗产物。利用制备型HPLC纯化粗产物，所用条件如下：色谱柱：XBridge C18，19×150mm，5μm；流动相A：水/0.05％ TFA，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10min内，由30％ B增加至70％ B；254nm，得到79.2mg(12％)1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-甲基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：491.1[M+H]+。
实例32：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.12(s，1H)，7.62(s，1H)，6.84(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.64-6.57(m，1H)，6.29(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.6，2.0Hz，1H)，3.98-3.89(m，8H)，2.63(s，3H)，2.46(s，3H)。
实例33：1-(4-[7-[6-氨基-3-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：1-(4-[7-[6-氨基-3-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(290.0mg，0.7mmol)、HATU(312.9mg，0.8mmol)、N,N-二异丙基乙胺(177.3mg，1.4mmol)、丙-2-烯酸(49.4mg，0.7mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌1h。完成后，用水(20mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用反相色谱柱纯化粗产物，用乙腈/水(3/7)进行洗脱，得到50.8mg(16％)1-(4-[7-[6-氨基-3-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：477.1[M+H]+。
实例33：1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)8.68(s，1H)，8.17(s，1H)，7.76(s，1H)，6.89-6.70(m，2H)，6.50(s，2H)，6.21-6.15(m，1H)，5.78-5.72(m，1H)，3.88-3.78(m，8H)，1.99(s，3H)
实例34：1-(4-(7-(6-氨基-4-环丙基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：2,6-二氯-4-环丙基吡啶
在氮气气氛下，向2,6-二氯-4-碘吡啶(3.6g，13.2mmol)、四(三苯基膦)钯(1.5g，1.3mmol)的无水THF溶液(30mL)中，加入环丙基溴化锌溶液(26.4mL，26.4mmol，1.0M的THF溶液)，然后将该溶液在25℃下搅拌1h。完成后，用水(20mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将粗产物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)进行洗脱，得到2.2g(79％)2,6-二氯-4-环丙基吡啶，其为橙色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：188.0[M+H]+。
第2步：6-氯-4-环丙基吡啶-2-胺
在氮气气氛下，将2,6-二氯-4-环丙基吡啶(1.2g，6.4mmol)、二苯甲胺(1.16g，6.4mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯-氯仿络合物(662mg，0.64mmol)、XantPhos(370mg，0.64mmol)、碳酸铯(4.2g，12.8mmol)的1,4-二噁烷溶液(25mL)在90℃下搅拌2h。完成后，用水(50mL)稀释该溶液，并且用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取。收集有机层，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物溶于氯化氢(10mL，3M的1,4-二噁烷溶液)中，并且在25℃下搅拌1h。完成后，在真空下对溶液进行浓缩。然后将残余物溶于二氯甲烷(50mL)中，并且用N,N-二异丙基乙胺将所得溶液的pH调节至pH＝9。然后在真空下对所得溶液进行浓缩，并且利用硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/3)进行洗脱，得到690mg(64％)6-氯-4-环丙基吡啶-2-胺，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：169.0[M+H]+。
第3步：6-氯-4-环丙基-5-碘吡啶-2-胺
在50℃下，将6-氯-4-环丙基吡啶-2-胺(690mg，4.1mmol)、N-碘代丁二酰亚胺(1.2g，5.3mmol)的乙腈溶液(10mL)搅拌1h。完成后，用饱和硫代硫酸钠溶液(50mL)稀释该溶液，并且用乙酸乙酯(4×50mL)进行萃取。然后将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/4)进行洗脱，得到950mg(79％)6-氯-4-环丙基-5-碘吡啶-2-胺，其为棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：294.9[M+H]+。
第4步：6-氯-4-环丙基-5-碘-N,N-双(4-甲氧苄基)吡啶-2-胺
在110℃下，将6-氯-4-环丙基-5-碘吡啶-2-胺(690mg，2.3mmol)、碳酸钾(1.3g，9.4mmol)、1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(1.5g，9.6mmol)、碘化钾(200mg，1.2mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(5mL)搅拌2h。完成后，用水(25mL)稀释该溶液，并且用乙酸乙酯(3×30mL)进行萃取。将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(3/97)进行洗脱，得到1.2g(96％)6-氯-4-环丙基-5-碘-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]吡啶-2-胺，其为无色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：535.1[M+H]+。
第5步：6-氯-4-环丙基-N,N-双(4-甲氧苄基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在氮气气氛下，将6-氯-4-环丙基-5-碘-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]吡啶-2-胺(1.2g，2.2mmol)、2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(960mg，4.9mmol)和碘化亚铜(880mg，4.621mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(10mL)在100℃下搅拌1h。完成后，用水(25mL)稀释该溶液，并且用乙酸乙酯(3×30mL)进行萃取。将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(3/97)进行洗脱，得到1.0g(93％)6-氯-4-环丙基-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为淡黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：477.1[M+H]+。
第6步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-环丙基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.05mmol)、6-氯-4-环丙基-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(553mg，1.16mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(77.2mg，0.1mmol)、氟化钾(122mg，2.1mmol)加入乙腈(10mL)和水(1mL)溶液中并且在100℃下，搅拌30min。完成后，用水(50mL)稀释所得溶液，并且用乙酸乙酯(3×50mL)进行萃取。然后将有机层混合，用盐水(3×20mL)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)进行洗脱，得到491mg(59％)4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-环丙基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为灰白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：789.3[M+H]+。
第7步：6-(6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-4-环丙基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在25℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-环丙基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(491mg，0.62mmol)在二氯甲烷(5mL)和三氟乙酸(5mL)溶液中搅拌30min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。将残余物溶于二氯甲烷(5mL)中，并且用N,N-二异丙基乙胺将所得溶液的pH调节至pH＝9。在真空下进行浓缩后，利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(83/17)进行洗脱，得到205mg(74％)6-(6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-4-环丙基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为浅棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：449.1[M+H]+。
第8步：1-(4-(7-(6-氨基-4-环丙基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-4-环丙基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(205mg，0.46mmol)、丙-2-烯酸(33mg，0.46mmol)、HATU(210mg，0.55mmol)和N,N-二异丙基乙胺(89mg，0.69mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌30min。完成后，用水(30mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。然后利用反相色谱法纯化残余物，用水/乙腈(3/2)进行洗脱，得到49.6mg(21％)1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-(三氟甲基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：503.1[M+H]+。
实例34：1H NMR(400MHz，CDCl3，ppm)δ8.75(s，1H)，8.09(s，1H)，7.97(s，1H)，6.75-6.65(m，1H)，6.42-6.37(m，1H)，6.22(s，1H)，5.81(dd，J＝7.2，2.4Hz，1H)，4.98(s，1H)，4.05-3.80(m，8H)，2.19(s，1H)，1.25(s，1H)，1.14-1.07(m，2H)，0.88(s，2H)。
实例35：1-(4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(400.0mg，2.04mmol)、4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.00g，2.11mmol)、1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(164.1mg，0.20mmol)和K3PO4(848.0mg，3.99mmol)加入1,4-二噁烷(8mL)和水(0.5mL)溶液中并且在100℃下搅拌60min。完成后，对所得溶液进行浓缩，用二氯甲烷(150mL)稀释，用水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到200.0mg(19％)4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：509.2[M+H]+。
第2步：6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在室温下，将4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500.0mg，0.98mmol)在三氟乙酸(3mL)和二氯甲烷(10mL)溶液中搅拌60min。完成后，对所得溶液进行浓缩。由此得到600.0mg(粗产物)6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为棕色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：409.1[M+H]+。
第3步：1-(4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在室温下，将丙-2-烯酸(10.0mg，0.14mmol)、6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(60.0mg，0.15mmol)、HATU(56.0mg，0.15mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1mL，5.69mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌30min。完成后，对所得溶液进行浓缩，并且用二氯甲烷(150mL)稀释，用盐水(40mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱。通过HPLC制备产物，所用条件如下：色谱柱：XBridge C18，19×150mm，5μm；流动相A：水/0.05％ TFA，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10min内，B由30％增加至70％；254nm。由此得到9.7mg(15％)1-(4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：463.1[M+H]+。
实例35：1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.68(s，1H)，8.14(s，1H)，7.81(d，J＝8.9Hz，1H)，7.72(s，1H)，6.95(s，2H)，6.84(dd，J＝16.5，10.2Hz，1H)，6.62(d，J＝9.0Hz，1H)，6.18(dd，J＝16.8，2.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.5，2.4Hz，1H)，3.87-3.79(m，8H)。
实例36：N-(1-(4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-6-氯喹唑啉-7-基)异喹啉-3-基)环丙烷甲酰胺
合成路线
第1步：N-(1-(4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-6-氯喹唑啉-7-基)异喹啉-3-基)环丙烷甲酰胺
向1-(4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(160mg，0.36mmol)、吡啶(57mg，0.72mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)中，加入环丙烷甲酰氯(41mg，0.4mmol)，然后将该溶液在25℃下搅拌30min。完成后，用水使所得溶液淬灭(30mL)，用二氯甲烷(3×30mL)进行萃取，用盐水(3×10mL)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到粗产物。利用制备型HPLC纯化粗产物，所用条件如下：色谱柱，XBridge Shield RP18 OBD色谱柱，5μm，19×150mm；流动相，水(0.05％氨水)和ACN(10％ ACN，在10min内增加至高达45％)；检测器，UV 254/220nm。由此得到53.9mg(29.3％)N-(1-(4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-6-氯喹唑啉-7-基)异喹啉-3-基)环丙烷甲酰胺，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：513.2[M+H]+。
实例36：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.71(s，1H)，8.55(s，1H)，8.31(s，1H)，7.95-7.92(m，2H)，7.74-7.69(m，1H)，7.55(d，J＝8.4Hz，1H)，7.47-7.42(m，1H)，6.85(dd，J＝16.8，10.8Hz，1H)，6.30(dd，J＝16.8，1.8Hz，1H)，5.83(dd，J＝10.6，1.9Hz，1H)，4.08-4.04(m，4H)，3.98-3.92(m，4H)，1.95-1.92(m，1H)，1.05-1.01(m，2H)，0.94-0.89(m，2H)。
实例37：N-(1-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基)-2-羟基乙酰胺
合成路线
第1步：N-(1-溴异喹啉-3-基)-2-氯乙酰胺
向1-溴异喹啉-3-胺(200.0mg，0.9mmol)和吡啶(100.0mg，1.3mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)中，加入2-氯乙酰氯(150.0mg，1.3mmol)。将所得溶液在0℃下搅拌30min，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(5/1)进行洗脱，得到210.0mg(78％)N-(1-溴异喹啉-3-基)-2-氯乙酰胺，其为淡黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：299.0[M+H]+。
第2步：2-((1-溴异喹啉-3-基)氨基)-2-氧代乙酸乙酯
在100℃下，将N-(1-溴异喹啉-3-基)-2-氯乙酰胺(150.0mg，0.50mmol)和乙酸钾(75.0mg，0.76mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(5mL)搅拌2h。完成后，使所得溶液冷却至室温，并且用水(50mL)进行稀释。过滤后，收集固体，并且在真空下干燥，得到120mg(66％)2-((1-溴异喹啉-3-基)氨基)-2-氧代乙酸乙酯，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：323.0[M+H]+。
第3步：4-[6-氯-7-[3-(2-羟基乙酰氨基)异喹啉-1-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将2-((1-溴异喹啉-3-基)氨基)-2-氧代乙酸乙酯(150.0mg，0.46mmol)、4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250.0mg，0.53mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(75.0mg，0.10mmol)和碳酸铯(400.0mg，1.20mmol)加入水(1mL)和乙腈(5mL)溶液中并且在80℃下搅拌30min。完成后，对所得溶液进行浓缩，用150mL二氯甲烷稀释，用水(3×80mL)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到200.0mg(78％)4-[6-氯-7-[3-(2-羟基乙酰氨基)异喹啉-1-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为淡黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：549.2[M+H]+。
第4步：N-[1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基]-2-羟基乙酰胺
在25℃下，将4-[6-氯-7-[3-(2-羟基乙酰氨基)异喹啉-1-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200.0mg，0.36mmol)在二氯甲烷(5mL)和三氟乙酸(3mL)溶液中搅拌1h。完成后，在真空下对溶液进行浓缩。然后将残余物溶于二氯甲烷(20mL)中，用N,N-二异丙基乙胺将所得溶液的pH值调节至pH＝8，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(85/15)进行洗脱，得到100.0mg(61％)N-[1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基]-2-羟基乙酰胺，其为淡黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：449.1[M+H]+。
第5步：N-(1-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基)-2-羟基乙酰胺
向N-[1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基]-2-羟基乙酰胺(50.0mg，0.10mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1mL)的THF溶液(5mL)中，加入丙-2-烯酰基氯(11.0mg，0.10mmol)，并且在-78℃下搅拌30min。完成后，用水(30mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物(色谱条件如下：色谱柱，XBridge Shield RP18 OBD色谱柱，5μm，19×150mm；流动相，水(0.05％氨水)和ACN(20％ ACN，在7min内增加至高达45％)。由此得到6.0mg(11％)N-(1-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基)-2-羟基乙酰胺，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：503.2[M+H]+。
实例37：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)：δ8.71(d，J＝4.6Hz，2H)，8.33(s，1H)，8.01(d，J＝8.4Hz，1H)，7.95(s，1H)，7.80-7.74(m，1H)，7.60-7.57(m，1H)，7.53-7.47(m，1H)，6.86(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.31(dd，J＝16.8，1.9Hz，1H)，5.84(dd，J＝10.6，2.0Hz，1H)，4.23(s，2H)，4.10-4.06(m，4H)，3.99-3.94(m，4H)。
实例38：1-[4-(6-氯-7-[3-[(丙-2-基)氨基]异喹啉-1-基]喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-(6-氯-7-[3-[(丙-2-基)氨基]异喹啉-1-基]喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向4-[7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(400.0mg，0.82mmol)、AcOH(1mL，17.45mmol)、丙-2-酮(60.0mg，1.00mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)中，加入NaBH(OAc)3(500mg，2.4mmol)，并且在25℃下搅拌2h。完成后，用二氯甲烷(150mL)稀释所得溶液，用水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到350mg(81％)4-(6-氯-7-[3-[(丙-2-基)氨基]异喹啉-1-基]喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：533.2[M+H]+。
第2步：1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-N-(丙-2-基)异喹啉-3-胺
在25℃下，将4-(6-氯-7-[3-[(丙-2-基)氨基]异喹啉-1-基]喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(350.0mg，0.66mmol)在TFA(2mL)和二氯甲烷(10mL)中搅拌1h。完成后，在真空下对溶液进行浓缩。然后将残余物溶于二氯甲烷(10mL)中，并且用N,N-二异丙基乙胺将所得溶液的pH值调节至pH＝8，然后在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(85/15)进行洗脱，得到230.0mg(81％)1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-N-(丙-2-基)异喹啉-3-胺，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：433.2[M+H]+。
第3步：1-[4-(6-氯-7-[3-[(丙-2-基)氨基]异喹啉-1-基]喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-N-(丙-2-基)异喹啉-3-胺(200.0mg，0.46mmol)的THF溶液(5mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(120.0mg，0.93mmol)和丙-2-烯酰基氯(42.0mg，0.46mmol)，并在-78℃下搅拌60min。完成后，用水(30mL)使溶液淬灭，并用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10:1)进行洗脱。利用制备型HPLC纯化产物，所用条件如下：色谱柱，XBridge Shield RP18 OBD色谱柱，5μm，19×150mm；流动相，水(0.05％氨水)和ACN(28.0％ ACN，在7min内增加至高达70.0％)；检测器，UV 220nm。由此得到10.3mg(4.6％)1-[4-(6-氯-7-[3-[(丙-2-基)氨基]异喹啉-1-基]喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：487.2[M+H]+。
实例38：1H NMR(400MHz，CDCl3，ppm)δ8.80(s，1H)，8.18-8.06(s，2H)，7.64(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52-7.47(m，1H)，7.35-7.33(m，1H)，7.13-7.11(m，1H)，6.66-6.59(m，2H)，6.39(dd，J＝16.8，1.8Hz，1H)，5.80(dd，J＝10.5，1.8Hz，1H)，3.95-3.82(m，9H)，1.35-1.34(m，6H)。
实例39：2-[(1-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基)氨基]乙腈
合成路线
第1步：N-(1-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基)-N-(氰基甲基)氨基甲酸叔丁酯
在氮气气氛下，在80℃下，用微波辐射将[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]硼酸(200.0mg，0.58mmol)、N-(1-溴异喹啉-3-基)-N-(氰基甲基)氨基甲酸叔丁酯(167.0mg，0.46mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(47.0mg，0.06mmol)和碳酸铯(373.0mg，1.14mmol)的乙腈溶液(5mL)照射1.5h。完成后，用二氯甲烷(150mL)稀释所得溶液，用水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到150mg(45％)N-(1-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基)-N-(氰基甲基)氨基甲酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：584.2[M+H]+。
第2步：2-[(1-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基)氨基]乙腈
在80℃下，将N-(1-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基)-N-(氰基甲基)氨基甲酸叔丁酯(200.0mg，0.34mmol)和硅胶(205.0mg，3.41mmol)的甲苯(3mL)溶液搅拌2h。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用甲醇/二氯甲烷(1/10)进行洗脱，得到15.7mg(9％)2-[(1-[6-氯-4-[4-(丙-2-烯酰基)哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]异喹啉-3-基)氨基]乙腈，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：484.2[M+H]+。
实例39：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.71(s，1H)，8.31(s，1H)，7.93(s，1H)，7.77(d，J＝8.4Hz，1H)，7.58(ddd，J＝8.3，6.7，1.2Hz，1H)，7.45-7.42(m，1H)，7.23(ddd，J＝8.4，6.8，1.2Hz，1H)，7.03(s，1H)，6.86(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.31(dd，J＝16.8，1.9Hz，1H)，5.84(dd，J＝10.6，1.9Hz，1H)，4.44(d，J＝1.9Hz，2H)，4.09-4.06(m，4H)，3.97-3.95(m，4H)。
实例40：1-(4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：3-(溴代二氟甲氧基)-2-氯-6-碘吡啶
向2-氯-6-碘吡啶-3-醇(2.0g，7.8mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(15mL)中，加入氢化钠(1.0g，41.7mmol)，然后加入二溴二氟甲烷(5.0g，23.8mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(10mL)，并且在25℃下搅拌3h。完成后，通过加入水(50mL)，使所得溶液淬灭，用二氯甲烷(100mL×3)进行萃取，用水(100mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚进行纯化，得到1.8g(60％)3-(溴代二氟甲氧基)-2-氯-6-碘吡啶，其为淡黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：383.8[M+H]+。
第2步：2-氯-6-碘-3-(三氟甲氧基)吡啶
在氮气气氛下，向3-(溴代二氟甲氧基)-2-氯-6-碘吡啶(1.8g，4.7mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)中加入四氟硼酸银(2.00g，10.30mmol)，并且在-78℃下搅拌16h。过滤出固体，并且在真空下浓缩滤液，得到1.0g(粗产物)2-氯-6-碘-3-(三氟甲氧基)吡啶，其为淡黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：323.9[M+H]+。
第3步：N-(6-氯-5-(三氟甲氧基)吡啶-2-基)乙酰胺
在氮气气氛下，将2-氯-6-碘-3-(三氟甲氧基)吡啶(500.0mg，1.50mmol)、乙酰胺(100.0mg，1.7mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯-氯仿加合物(80.0mg，0.1mmol)、XantPhos(90.0mg，0.2mmol)和碳酸铯(1.0g，3.1mmol)的1,4-二噁烷溶液(5mL)在50℃下搅拌20min。完成后，用乙酸乙酯(200mL)稀释所得溶液，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(93/7)进行洗脱，得到300.0mg(76％)N-[6-氯-5-(三氟甲氧基)吡啶-2-基]乙酰胺，其为浅棕色固体。LC-MS(ESI，m/z)：255.0[M+H]+。
第4步：4-[6-氯-7-[6-乙酰氨基-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将N-[6-氯-5-(三氟甲氧基)吡啶-2-基]乙酰胺(200.0mg，0.79mmol)、4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(400.0mg，0.84mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(40.0mg，0.06mmol)和氟化钾(100.0mg，1.70mmol)加入乙腈(5mL)和水(1mL)溶液中并且在80℃下搅拌20min。完成后，用乙酸乙酯(200mL)稀释所得溶液，用(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(97/3)进行洗脱，得到420mg(94％)4-[6-氯-7-[6-乙酰氨基-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为淡黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：567.2[M+H]+。
第5步：6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺
在室温下，将4-[6-氯-7-[6-乙酰氨基-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸酯(400.0mg，0.70mmol)的盐酸溶液(5mL，3M的甲醇溶液)搅拌2h。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。将残余物溶于水(2mL)中，并且用碳酸钾饱和溶液将pH调节至pH＝10。然后用正丁醇(60mL×3)对混合物进行萃取，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(9:1)进行洗脱，得到150.0mg(50％)6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺，其为淡黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：425.1[M+H]+。
第6步：1-(4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在25℃下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺(100.0mg，0.24mmol)、HATU(150.0mg，0.39mmol)、丙-2-烯酸(20.0mg，0.28mmol)和N,N-二异丙基乙胺(100.0mg，0.80mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌30min。完成后，用水(20mL)使溶液淬灭并用二氯甲烷(3×30mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到68.0mg(60％)1-(4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：479.1[M+H]+。
实例40：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.68(s，1H)，8.22(s，1H)，7.85(s，1H)，7.64-7.55(m，1H)，6.84(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.74(d，J＝9.1Hz，1H)，6.29(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.7，2.0Hz，1H)，4.04-4.00(m，4H)，3.95-3.92(m，4H)。
实例41：1-(4-[7-[6-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：2,6-二氯-3-(二氟甲基)吡啶
向2,6-二氯吡啶-3-甲醛(20.00g，113.64mmol)的二氯甲烷溶液(100mL)中加入二乙胺基三氟化硫(55.27g，342.86mmol)，并且在0℃下搅拌60min。完成后，通过加入400mL碳酸钠饱和水溶液，使反应淬灭，用二氯甲烷(200mL×3)进行萃取，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1:10)进行洗脱，得到15.7g(70％)2,6-二氯-3-(二氟甲基)吡啶，其为无色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：198.0[M+H]+。
第2步：6-氯-5-(二氟甲基)-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]吡啶-2-胺
在100℃下，将(4-甲氧基苯基)甲胺(459.0mg，3.35mmol)和2,6-二氯-3-(二氟甲基)吡啶(600.0mg，3.03mmol)的正丁醇溶液(5mL)搅拌60min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/5)进行洗脱，得到100.0mg(10％)6-氯-5-(二氟甲基)-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]吡啶-2-胺，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：299.1[M+H]+。第3步：4-[6-氯-7-[3-(二氟甲基)-6-[[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]吡啶-2-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将6-氯-5-(二氟甲基)-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]吡啶-2-胺(300.0mg，1.00mmol)、氟化钾(116.2mg，2.00mmol)、4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(568.0mg，1.20mmol)和双(三苯基膦)氯化钯(II)(70.7mg，0.10mmol)加入乙腈(5mL)和水(1mL)溶液中并且在110℃下搅拌60min。在真空下对所得混合物进行浓缩，用乙酸乙酯(200mL)稀释，用盐水(50mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/5)进行洗脱，得到280.0mg(46％)4-[6-氯-7-[3-(二氟甲基)-6-[[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]吡啶-2-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：611.2[M+H]+。
第4步：6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(二氟甲基)吡啶-2-胺
在40℃下，将4-[6-氯-7-[3-(二氟甲基)-6-[[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]吡啶-2-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(280.0mg，0.46mmol)在二氯甲烷(2mL)和三氟乙酸(2mL)溶液中搅拌60min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。将残余物溶于水(2mL)中，并且用碳酸钾饱和溶液将pH调节至pH＝10。然后用乙酸乙酯(50mL×3)对混合物进行萃取，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/5)进行洗脱，得到150.0mg(84％)6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(二氟甲基)吡啶-2-胺，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：391.1[M+H]+。
第5步：1-(4-[7-[6-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在0℃下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(二氟甲基)吡啶-2-胺(100.0mg，0.26mmol)、N,N-二异丙基乙胺(33.0mg，0.26mmol)、HATU(97.44mg，0.26mmol)和丙-2-烯酸(18.48mg，0.26mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌60min。完成后，用水(30mL)使溶液淬灭并用二氯甲烷(3×50mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用甲醇/二氯甲烷(1/10)进行洗脱，得到粗产物。然后利用反相色谱柱纯化粗产物，用乙腈/水(3/7)进行洗脱，得到3.2mg(3％)1-(4-[7-[6-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：445.1[M+H]+。
实例41：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.68(s，1H)，8.22(s，1H)，7.81-7.78(m，2H)，6.87-6.73(m，2H)，6.53-6.16(m，2H)，5.81(dd，J＝10.6，1.9Hz，1H)，4.03-3.99(m，4H)，3.93-3.91(m，4H)。
实例42：1-[4-[7-(6-氨基-3-甲磺酰基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：2,6-二氯-3-(甲基硫烷基)吡啶
在氮气气氛下，向2,6-二氯吡啶(10.00g，67.57mmol)的四氢呋喃溶液(200mL)中，缓慢加入正丁基锂(35.0mL，81.96mmol，2.5M的己烷溶液)，并且在-78℃下搅拌1h。然后在-78℃下缓慢加入(甲基二硫烷基)甲烷(6.50g，69.00mmol)，并且在室温下搅拌5h。完成后，通过加入氯化铵饱和溶液，使所得溶液淬灭，然后在真空下进行浓缩，用二氯甲烷(200mL)进行稀释，用水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/5)进行洗脱，得到5.0g(38％)2,6-二氯-3-(甲基硫烷基)吡啶，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：194.0[M+H]+。
第2步：2,6-二氯-3-甲磺酰基吡啶
向2,6-二氯-3-(甲基硫烷基)吡啶(1.00g，5.15mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)中，加入间氯过氧苯甲酸(3.50g，20.28mmol)，并且在室温下搅拌12小时。完成后，用亚硫酸钠饱和溶液(40mL)使所得混合物淬灭，并且用二氯甲烷(80mL×3)进行萃取。然后收集有机层，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。由此得到1.6g(粗产物)2,6-二氯-3-甲磺酰基吡啶，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：225.9[M+H]+。
第3步：6-氯-5-甲磺酰基吡啶-2-胺
在氨水中，将2,6-二氯-3-甲磺酰基吡啶(1.80g，7.96mmol)的正丁醇溶液(20mL)在90℃下搅拌1h。在真空下对所得混合物进行浓缩，得到1.50g(粗产物)6-氯-5-甲磺酰基吡啶-2-胺，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：207.0[M+H]+。
第4步：4-[7-(6-氨基-3-甲磺酰基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(400.0mg，0.84mmol)、6-氯-5-甲磺酰基吡啶-2-胺(200.0mg，0.97mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)(80.0mg，0.10mmol)和碳酸钠(200.0mg，1.89mmol)加入二噁烷(10mL)和水(2mL)溶液中并且在100℃下搅拌1h。完成后，用二氯甲烷(100mL)稀释所得混合物，并且用盐水(30mL×3)进行洗涤。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(96/4)进行洗脱，得到250mg(57％)4-[7-(6-氨基-3-甲磺酰基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：519.2[M+H]+。
第5步：6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-甲磺酰基吡啶-2-胺
在室温下，将4-[7-(6-氨基-3-甲磺酰基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(240.0mg，0.46mmol)在二氯甲烷(10mL)和三氟乙酸(3mL)溶液中搅拌2h。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩。由此得到200mg(粗产物)6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-甲磺酰基吡啶-2-胺，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：419.1[M+H]+。
第6步：1-[4-[7-(6-氨基-3-甲磺酰基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在室温下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-甲磺酰基吡啶-2-胺(100.0mg粗产物)、HATU(110.0mg，0.29mmol)、丙-2-烯酸(20.0mg，0.28mmol)和N,N-二异丙基乙胺(60mg，0.46mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌30min。完成后，用水使溶液淬灭(20mL)并且用二氯甲烷(3×30mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到40mg粗产物。利用制备型HPLC纯化粗产物，所用条件如下：色谱柱，XBridge Shield RP18 OBD色谱柱，5μm，19×150mm；流动相，水(0.05％氨水)和ACN(28.0％ ACN，在7min内增加至高达70.0％)；检测器，UV 220nm。由此得到2.6mg(2％)1-[4-[7-(6-氨基-3-甲磺酰基吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：473.1[M+H]+。
实例42：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.68(s，1H)，8.17(s，1H)，8.07(d，J＝9.0Hz，1H)，7.84(s，1H)，6.84(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.76(d，J＝9.0Hz，1H)，6.29(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.6，2.0Hz，1H)，4.05-3.92(m，8H)，2.99(s，3H)。
实例43：1-(4-[7-[6-氨基-3-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：3-(溴甲基)-2,6-二氯吡啶
在80℃下，将2,6-二氯-3-甲基吡啶(3.00g，18.52mmol)、2,2'-偶氮双(异丁腈)(300.0mg，1.83mmol)和N-溴代琥珀酰亚胺(3.50g，19.44mmol)的1,2-二氯乙烷溶液(20mL)搅拌12h。完成后，用二氯甲烷(200mL)稀释所得混合物，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)进行洗脱，得到2.5g(56％)3-(溴甲基)-2,6-二氯吡啶，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：239.9[M+H]+。
第2步：2,6-二氯-3-(2,2,2-三氟乙基)吡啶
在氮气气氛下，将3-(溴甲基)-2,6-二氯吡啶(1.00g，4.15mmol)、2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(1.00g，5.21mmol)和碘化亚铜(79.05mg，0.42mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(15mL)在110℃下搅拌2h。完成后，用二氯甲烷(100mL)稀释所得混合物，并且用盐水(20mL×3)进行洗涤。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚:乙酸乙酯(50:1)进行洗脱，得到560.0mg(59％)2,6-二氯-3-(2,2,2-三氟乙基)吡啶，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：230.0[M+H]+。
第3步：N-[6-氯-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯
在氮气气氛下，将2,6-二氯-3-(2,2,2-三氟乙基)吡啶(560.0mg，2.44mmol)、氨基甲酸叔丁酯(570.4mg，4.87mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯-氯仿加合物(126.0mg，0.12mmol)、XantPhos(140.9mg，0.24mmol)和碳酸铯(1.59g，4.87mmol)的1,4-二噁烷溶液(20mL)在110℃下搅拌1h。完成后，用乙酸乙酯(200mL)稀释所得混合物，并且用盐水(80mL×3)进行洗涤。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(50/1)进行洗脱，得到230.0mg(30％)N-[6-氯-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：311.1[M+H]+。
第4步：4-[7-(6-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-3-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将N-[6-氯-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(200.0mg，0.64mmol)、4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(305.6mg，0.64mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(49.7mg，0.07mmol)和氟化钾(112.2mg，1.93mmol)加入乙腈(10mL)和水(1mL)溶液中并且在110℃下搅拌30min。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到200.0mg(50％)4-[7-(6-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-3-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：623.2[M+H]+。
第5步：6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-胺
将4-[7-(6-[[(叔叔丁氧基)羰基]氨基]-3-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100.0mg，0.16mmol)加入三氟乙酸(2mL)和二氯甲烷(10mL)溶液中并且在25℃下搅拌2h。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩，得到100mg(粗产物)6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-胺，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：423.1[M+H]+。
第6步：1-(4-[7-[6-氨基-3-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-胺(60.0mg粗产物)、丙-2-烯酸(10.2mg，0.14mmol)、HATU(64.7mg，0.17mmol)和N,N-二异丙基乙胺(36.7mg，0.28mmol)的二氯甲烷溶液(4mL)搅拌30min。完成后，用水(20mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×20mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到22.0mg(33％)1-(4-[7-[6-氨基-3-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：477.1[M+H]+。
实例43：1H NMR(300MHz，CDCl3，ppm)δ8.80(s，1H)，8.01(s，1H)，7.97(s，1H)，7.62(d，J＝9.0Hz，1H)，6.70(d，J＝8.6Hz，1H)，6.64(dd，J＝16.8，10.5Hz，1H)，6.40(dd，J＝16.8，1.9Hz，1H)，5.80(dd，J＝10.5，1.9Hz，1H)，5.12(brs，2H)，3.94-3.85(m，8H)，3.34-2.99(m，2H)。
实例44：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将6-氯-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(2.00g，9.50mmol)、4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.40g，11.42mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(666.6mg，0.95mmol)和氟化钾(1.60g，28.50mmol)加入乙腈(50mL)和水(5mL)溶液中并且在100℃下搅拌30min。完成后，过滤出固体。用二氯甲烷(200mL)稀释所得混合物，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到3.1g(62％)4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：523.2[M+H]+。
第2步：6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.00g，7.67mmol)加入三氟乙酸(20mL)和二氯甲烷(100mL)溶液中并且在25℃下搅拌1h。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩，得到4.10g(粗产物)6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为黄色油状物。1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.70(s，1H)，8.09(s，1H)，7.68(s，1H)，6.61(s，1H)，3.95-3.81(m，4H)，3.10-3.00(m，4H)，2.46(s，3H)LC-MS(ESI，m/z)：423.1[M+H]+。
第3步：1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(3.00g，7.10mmol)、丙-2-烯酸(600.3mg，8.33mmol)、HATU(4.20g，11.05mmol)和N,N-二异丙基乙胺(4.60g，35.47mmol)的二氯甲烷溶液(50mL)搅拌30min。完成后，用水(50mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×80mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到粗产物。利用反相色谱法纯化粗产物，用乙腈0-40/0.1％碳酸氢铵水溶液进行洗脱，得到2.1g(62％)1-(4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：477.1[M+H]+。
实例44：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.67(s，1H)，8.18(s，1H)，7.71(s，1H)，6.84(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.61(m，1H)，6.29(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.6，2.0Hz，1H)，4.03-3.91(m，8H)，2.48-2.46(m，3H)。
实例45：1-(4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.三氟乙酸盐
合成路线
第1步：4-(7-溴-6-氯-2-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将4-(7-溴-2,6-二氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.00g，8.65mmol)、N,N-二异丙基乙胺(2.20g，17.38mmol)和(2-氨基乙基)二甲胺(3.80g，43.40mmol)的2-丙醇溶液(10mL)搅拌3天。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩，得到2.70g(粗产物)4-(7-溴-6-氯-2-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：513.1[M+H]+。
第2步：4-(7-溴-2-[[(叔丁氧基)羰基][2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将4-(7-溴-6-氯-2-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.70g粗产物)、二碳酸二叔丁酯(1.70g，7.88mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.40g，10.52mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌1h。完成后，用二氯甲烷(200mL)稀释所得混合物，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到1.50g(46％)4-(7-溴-2-[[(叔丁氧基)羰基][2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：613.2[M+H]+。
第3步：4-(2-[[(叔丁氧基)羰基][2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，在80℃下，用微波辐射将4-(7-溴-2-[[(叔丁氧基)羰基][2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-6-氯喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500.0mg，0.81mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(1.00g，4.08mmol)和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)(66.7mg，0.09mmol)、乙酸钾(240.2mg，2.45mmol)的1,4-二噁烷溶液(10mL)照射2h。完成后，用二氯甲烷(200mL)稀释所得混合物，并且用盐水(80mL×3)进行洗涤。然后收集有机层，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩，得到480mg(粗产物)4-(2-[[(叔丁氧基)羰基][2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为深红色固体。LC-MS(ESI，m/z)：661.4[M+H]+。
第4步：4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-2-[[(叔丁氧基)羰基][2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(2-[[(叔丁氧基)羰基][2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500.0mg，0.76mmol)、氟化钾(88.0mg，1.52mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(53.18mg，0.08mmol)和6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(178.0mg，0.91mmol)加入乙腈(10mL)和水(2mL)溶液中并且在110℃下搅拌60min。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10:1)进行洗脱，得到200.0mg(38％)4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-2-[[(叔丁氧基)羰基][2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黑色固体。LC-MS(ESI，m/z)：695.3[M+H]+。
第5步：6-(6-氯-2-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-2-[[(叔丁氧基)羰基][2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200.0mg，0.29mmol)加入二氯甲烷(8mL)和三氟乙酸(2mL)溶液中并且在25℃下搅拌30min。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩，得到200.0mg(粗产物)6-(6-氯-2-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺。LC-MS(ESI，m/z)：495.2[M+H]+。
第6步：1-(4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮；三氟乙酸盐
在-78℃下，将6-(6-氯-2-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(150.0mg，0.30mmol)、HATU(138.4mg，0.36mmol)、N,N-二异丙基乙胺(469.8mg，3.63mmol)和丙-2-烯酸(21.9mg，0.30mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌30min。完成后，用水(60mL)使反应淬灭，用二氯甲烷(100mL×3)进行萃取，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到粗产物。然后利用制备型HPLC纯化粗产物，所用条件如下：色谱柱：XSelectCSH Prep C18 OBD色谱柱，5μm，19×150mm；流动相A:水(0.05％ TFA)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在7min内，B由15％增加至26％；254/220nm；室温：5.92min，得到22.5mg(11％)1-(4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-2-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮；三氟乙酸，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：549.2[M+H]+。
实例45：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.22(s，1H)，7.85(d，J＝9.0Hz，1H)，7.56(s，1H)，6.84-6.75(m，2H)，6.31(dd，J＝16.8，1.9Hz，1H)，5.84(dd，J＝10.6，1.9Hz，1H)，4.31(brs，4H)，4.04-3.92(m，6H)，3.49(t，J＝5.9Hz，2H)，2.99(s，6H)。
实例46a：(2S)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-腈
实例46b：(2R)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-腈
合成路线
第1步：7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-3,4-二氢喹唑啉-4-酮
将4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500.0mg，0.98mmol)和氢氧化钠(80.0mg，2.00mmol)加入乙醇(10mL)和水(1mL)溶液中并且在80℃下搅拌2h。完成后，用盐酸的1,4-二噁烷溶液将所得溶液的pH调节至pH＝7.0，然后在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10:1)进行洗脱，得到150.0mg(45％)7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-3,4-二氢喹唑啉-4-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：341.0[M+H]+。
第2步：4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-2-腈
在室温下，将哌嗪-2-腈(94.0mg，0.85mmol)、7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯-3,4-二氢喹唑啉-4-酮(150.0mg，0.44mmol)、BOP(234.0mg，0.53mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.4mL，2.42mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌12小时。完成后，对所得溶液进行浓缩，用二氯甲烷(150mL)稀释，用盐水(50mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到70.0mg(37％)4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-2-腈，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：434.1[M+H]+。
第3步：(2S)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-腈和(2R)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-腈
在室温下，将4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-2-腈(70.0mg，0.16mmol)、2-氟丙-2-烯酸(15.0mg，0.17mmol)、BOP(85.0mg，0.19mmol)和N,N-二异丙基乙胺(62.0mg，0.48mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌60min。完成后，用水使溶液淬灭(20mL)并且用二氯甲烷(3×30mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10:1)进行洗脱，得到粗产物。然后利用制备型HPLC制备粗产物，所用条件如下：色谱柱：XBridge C18，19×150mm，5μm；流动相A：水/0.05％ TFA，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10min内，B由30％增加至70％；254nm。利用手性制备型HPLC纯化产物，所用条件如下(Prep-HPLC-009)：色谱柱，CHIRAL ART Cellulose-SB，2×25cm，5μm；流动相，HPLC级己烷和HPLC级乙醇(在10min内，保持40％乙醇(HPLC级))；检测器，UV 220/254nm。由此得到5.6mg(7％)(2S)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-腈(假设)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：506.1[M+H]+和6.0mg(7％)(2R)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-腈(假设)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：506.1[M+H]+。
实例46a：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.79(s，1H)，8.31(d，J＝1.8Hz，1H)，7.85-7.83(m，2H)，6.74(dd，J＝8.9，0.9Hz，1H)，5.67(brs，1H)，5.55(dd，J＝4.0，1.3Hz，1H)，5.45-5.40(m，1H)，4.71(dq，J＝14.1，2.3Hz，1H)，4.52-4.47(m，1H)，4.38-4.34(m，1H)，3.83(brs，1H)，3.72(ddd，J＝13.9，10.2，3.6Hz，1H)，3.54-3.43(m，1H)。
实例46b：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.79(s，1H)，8.31(d，J＝1.8Hz，1H)，7.85-7.83(m，2H)，6.74(dd，J＝8.9，0.9Hz，1H)，5.67(brs，1H)，5.55(dd，J＝4.0，1.3Hz，1H)，5.45-5.40(m，1H)，4.71(dq，J＝14.1，2.3Hz，1H)，4.52-4.47(m，1H)，4.38-4.34(m，1H)，3.83(brs，1H)，3.72(ddd，J＝13.9，10.2，3.6Hz，1H)，3.54-3.43(m，1H)。
实例47：1-[4-[7-(6-氨基-3-环丙基吡啶-2-基)-6-甲氧基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-(7-溴-6-甲氧基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将7-溴-6-甲氧基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮(5.00g，19.60mmol)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(7.30g，39.19mmol)、BOP(17.30g，39.21mmol)和N,N-二异丙基乙胺(5.07g，39.23mmol)的乙腈溶液(120mL)搅拌4h。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩，用乙酸乙酯(150mL)稀释，用盐水(40mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(1/1)进行洗脱。由此得到5.00g(60％)4-(7-溴-6-甲氧基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：506.1[M+H]+。
第2步：4-[6-甲氧基-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(7-溴-6-甲氧基喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.00g，4.73mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(4.80g，18.90mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)(139.3mg，0.24mmol)、乙酸钾(927.4mg，9.45mmol)的1,4-二噁烷溶液(100mL)在80℃下搅拌2h。完成后，对所得溶液进行浓缩，用乙酸乙酯(150mL)稀释，用盐水(40mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱。由此得到700.0mg(31％)4-[6-甲氧基-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：471.3[M+H]+。
第3步：4-[7-(6-氨基-3-环丙基吡啶-2-基)-6-甲氧基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-甲氧基-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200.0mg，0.43mmol)、6-氯-5-环丙基吡啶-2-胺(71.6mg，0.43mmol)、Pd2(dba)3(19.5mg，0.02mmol)、三环己基膦(12.0mg，0.04mmol)和碳酸钾(117.5mg，0.85mmol)加入二噁烷(5mL)和水(1mL)溶液中并且在110℃下搅拌30min。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱。由此得到100.0mg(49％)4-[7-(6-氨基-3-环丙基吡啶-2-基)-6-甲氧基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为灰白色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：477.3[M+H]+。
第4步：5-环丙基-6-[6-甲氧基-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]吡啶-2-胺
将4-[7-(6-氨基-3-环丙基吡啶-2-基)-6-甲氧基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100.0mg，0.21mmol)加入三氟乙酸(2mL)和二氯甲烷(10mL)溶液中并且在25℃下搅拌1h。完成后，在真空下对所得混合物进行浓缩。由此得到100mg(粗产物)5-环丙基-6-[6-甲氧基-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]吡啶-2-胺，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：377.2[M+H]+。
第5步：1-[4-[7-(6-氨基-3-环丙基吡啶-2-基)-6-甲氧基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将5-环丙基-6-[6-甲氧基-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]吡啶-2-胺(50.0mg，0.13mmol)、丙-2-烯酸(10.0mg，0.14mmol)、HATU(60.6mg，0.16mmol)和N,N-二异丙基乙胺(20.6mg，0.16mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌1h。完成后，使所得溶液淬灭，用二氯甲烷(150mL)稀释，用盐水(40mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱。由此得到19.6mg(34％)1-[4-[7-(6-氨基-3-环丙基吡啶-2-基)-6-甲氧基喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：431.2[M+H]+。
实例47：1H NMR(300MHz，氯仿-d)δ8.77(s，1H)，7.91(s，1H)，7.22-7.18(m，2H)，6.66(dd，J＝16.8，10.5Hz，1H)，6.56(d，J＝8.5Hz，1H)，6.38(dd，J＝16.8，1.9Hz，1H)，5.79(dd，J＝10.5，1.9Hz，1H)，4.65(brs，2H)，3.92-3.78(m，11H)，1.65-1.55(m，1H)，0.69-0.66(m，2H)，0.55-0.49(m，2H)。
实例48 1-[4-[7-(3-氨基-8-氟异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：2-氰基-2-(2-氰基-3-氟苯基)乙酸甲酯
在室温下，将2,6-二氟苯甲腈(10.00g，71.89mmol)、2-氰基乙酸甲酯(7.50g，75.69mmol)和碳酸钾(20.00g，144.71mmol)的DMSO溶液(50mL)搅拌12h。完成后，用水(100mL)稀释所得溶液。通过过滤收集固体。由此得到11.5g(73％)2-氰基-2-(2-氰基-3-氟苯基)乙酸甲酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：219.0[M+H]+。
第2步：2-(氰基甲基)-6-氟苯甲腈
在70℃下，将2-氰基-2-(2-氰基-3-氟苯基)乙酸甲酯(1.00g，4.58mmol)的DMSO溶液(8mL)和氯化氢溶液(6M)(2mL)搅拌12小时。完成后，用碳酸钠溶液将所得溶液的pH调节至pH＝9.0。通过过滤收集固体。由此得到700.0mg(95％)2-(氰基甲基)-6-氟苯甲腈，其为灰色固体。LC-MS(ESI，m/z)：161.0[M+H]+。
第3步：1-溴-8-氟异喹啉-3-胺
在0℃下，将2-(氰基甲基)-6-氟苯甲腈(3.00g，18.73mmol)的HBr/AcOH(40％)溶液(15mL)搅拌30min。完成后，用碳酸钠饱和水溶液将所得溶液的pH调节至pH＝8.0。通过过滤收集固体。由此得到1.70g(38％)1-溴-8-氟异喹啉-3-胺，其为淡黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：241.0[M+H]+。
第4步：4-[7-(3-氨基-8-氟异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸酯(1.2g，2.48mmol)、1-溴-8-氟异喹啉-3-胺(600.0mg，2.49mmol)、Pd(dppf)Cl2(183.0mg，0.25mmol)和K3PO4(1.00g，4.71mmol)加入乙腈(10mL)和水(0.2mL)混悬剂中并且在100℃下搅拌60min。完成后，对所得溶液进行浓缩，用乙酸乙酯(250mL)稀释，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到200.0mg(9％)4-[7-(3-氨基-8-氟异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为棕色固体。LC-MS(ESI，m/z)：509.2[M+H]+。
第5步：1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-8-氟异喹啉-3-胺
将4-[7-(3-氨基-8-氟异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200.0mg，0.39mmol)加入三氟乙酸(2mL)和二氯甲烷(6mL)溶液中并且在室温下搅拌60min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。由此得到300mg(粗产物)1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-8-氟异喹啉-3-胺，其为棕色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：409.2[M+H]+。
第6步：1-[4-[7-(3-氨基-8-氟异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-8-氟异喹啉-3-胺(100.0mg粗产物)、丙-2-烯酸(53.0mg，0.73mmol)、HATU(109.0mg，0.29mmol)和N,N-二异丙基乙胺(155.0mg，1.20mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌30min。完成后，用水(1mL)使所得溶液淬灭，用二氯甲烷(150mL)稀释，用盐水(40mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物，所用条件如下：色谱柱：XBridge C18，19×150mm，5μm；流动相A：水/0.05％ TFA，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10min内，B由30％增加至70％；254nm。由此得到9.1mg(8％)1-[4-[7-(3-氨基-8-氟异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为淡黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：463.1[M+H]+。
实例48：1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.69(s，1H)，8.14(s，1H)，7.83(s，1H)，7.49-7.40(m，2H)，6.89-6.76(m，3H)，6.35(s，2H)，6.18(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.88(brs，6H)，3.79(brs，2H)。
实例49：1-[4-[7-(3-氨基-7-氟异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：1-[4-[7-(3-氨基-7-氟异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在室温下，将1-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-7-氟异喹啉-3-胺(100.0mg，0.24mmol)、HATU(111.6mg，0.29mmol)、N,N-二异丙基乙胺(63.2mg，0.49mmol)和丙-2-烯酸(17.6mg，0.25mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌30min。完成后，用水(1mL)使所得溶液淬灭，用二氯甲烷(150mL)稀释，用盐水(40mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物(色谱条件如下：色谱柱：XBridge C18，19×150mm，5μm；流动相A：水/0.05％ TFA，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10min内，B由30％增加至70％；254nm。由此得到3.8mg(3％)1-[4-[7-(3-氨基-7-氟异喹啉-1-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：463.1[M+H]+。
实例49：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.70(s，1H)，8.31(s，1H)，7.90(s，1H)，7.73(dd，J＝9.2，5.4Hz，1H)，7.42-7.35(m，1H)，6.99-6.93(m，2H)，6.85(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.29(dd，J＝16.8，1.9Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.6，2.0Hz，1H)，4.09-4.04(m，4H)，3.96-3.93(m，4H)。
实例50：1-(3-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]氮杂环丁烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：3-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将7-溴-4,6-二氯喹唑啉(6.00g，21.59mmol)、[1-[(叔丁氧基)羰基]氮杂环丁烷-3-基]碘锌(30mL，15.49mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯-氯仿加合物(998.0mg，0.96mmol)和三-2-呋喃基膦(500.0mg，2.15mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(30mL)在室温下搅拌30min。完成后，用水(100mL)稀释所得溶液，用乙酸乙酯(100mL×3)进行萃取，用盐水(100mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/5)进行洗脱，得到3.3g(42％)3-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯，其为淡黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：398.0[M+H]+。
第2步：3-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将3-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(2.00g，5.02mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)(400.6mg，0.55mmol)、乙酸钾(1.48g，15.08mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(3.88g，15.28mmol)的1,4-二噁烷溶液(30mL)在80℃下搅拌2h。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，然后用二氯甲烷(150mL)稀释。过滤后，收集滤液，在真空下进行浓缩，并且用石油醚(10mL×3)洗涤。由此得到1.4g(粗产物)3-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯，其为棕色固体。LC-MS(ESI，m/z)：446.2[M+H]+。
第3步：3-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将3-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.40g，3.14mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(220.5mg，0.31mmol)、氟化钾(380.0mg，6.54mmol)和6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(620.0mg，3.15mmol)加入乙腈溶液(20mL)和水(5mL)溶液中并且在110℃下搅拌60min。完成后，用乙酸乙酯(200mL)稀释所得溶液，用盐水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱。由此得到600.0mg(40％)3-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯，其为深红色固体。LC-MS(ESI，m/z)：480.1[M+H]+。
第4步：6-[4-(氮杂环丁烷-3-基)-6-氯喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将3-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(300.0mg，0.63mmol)加入三氟乙酸(5mL)和二氯甲烷(15mL)溶液中并且在25℃下搅拌20min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。由此得到320mg(粗产物)6-[4-(氮杂环丁烷-3-基)-6-氯喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为深红色固体。LC-MS(ESI，m/z)：380.1[M+H]+。
第5步：1-(3-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]氮杂环丁烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[4-(氮杂环丁烷-3-基)-6-氯喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(300.0mg，0.79mmol)、HATU(300.8mg，0.79mmol)、N,N-二异丙基乙胺(408.4mg，3.16mmol)和丙-2-烯酸(57.0mg，0.79mmol)的二氯甲烷溶液(15mL)搅拌60min。完成后，用水(1mL)使所得溶液淬灭，用二氯甲烷(200mL)进行稀释，用盐水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(10:1)进行洗脱。然后利用制备型HPLC纯化粗产物，所用条件如下：色谱柱：XBridge Prep OBDC18色谱柱，30×150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7min内，B由20％增加至50％；254/220nm；室温：6.62min，得到141.2mg(41％)1-(3-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]氮杂环丁烷-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：434.1[M+H]+。
实例50：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ9.33(s，1H)，8.33(s，1H)，7.98(s，1H)，7.82(d，J＝8.9Hz，1H)，6.73(dd，J＝9.0，1.1Hz，1H)，6.47-6.38(m，1H)，6.29(dd，J＝17.0，2.1Hz，1H)，5.78(ddd，J＝10.2，2.3，1.0Hz，1H)，5.00-4.88(m，2H)，4.84-4.76(m，1H)，4.64-4.50(m，2H)。
实例51：1-[4-[7-[6-氨基-3-(2,2,2-三氟乙基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：N-[6-氯-5-(2,2,2-三氟乙基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在85℃下，将6-氯-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-羧酸(300.0mg，1.25mmol)、叠氮磷酸二苯酯(0.27mL，1.25mmol)和三乙胺(0.17mL，1.25mmol)的2-甲基-1-丙醇溶液(10mL)搅拌2小时。完成后，在真空下对溶剂进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(90/10)进行洗脱，得到N-[6-氯-5-(2,2,2-三氟乙基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(100.0mg，0.32mmol，收率25.7％)，其为黄色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：311.1[M+H]+。
第2步：4-[7-[6-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(2,2,2-三氟乙基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(183.4mg，0.39mmol)、N-[6-氯-5-(2,2,2-三氟乙基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(100.0mg，0.32mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(22.7mg，0.03mmol)和氟化钾(56.0mg，0.97mmol)加入乙腈(3mL)和水(0.5mL)溶液中并且在110℃下搅拌20min。完成后，用二氯甲烷(200mL)稀释所得溶液，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(95/5)进行洗脱，得到4-[7-[6-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(2,2,2-三氟乙基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(80mg，0.13mmol，收率39.9％)，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：623.1[M+H]+。
第3步：6-(6-氯-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-胺
将4-[7-[6-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(2,2,2-三氟乙基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(50.0mg，0.08mmol)加入TFA(2mL)和二氯甲烷(10mL)溶液中并且在25℃下搅拌3小时。完成后，在真空下对溶剂进行浓缩。该物质不经进一步纯化，直接用于下一步。LC-MS(ESI，m/z)：423.1[M+H]+。
第4步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(2,2,2-三氟乙基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-胺(50.0mg，0.12mmol)、丙烯酸(8.5mg，0.12mmol)、HATU(54.0mg，0.14mmol)和N,N-二异丙基乙胺(22.9mg，0.18mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌30min。完成后，用水(1mL)使所得溶液淬灭，用二氯甲烷(200mL)进行稀释，用盐水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(95/5)进行洗脱，得到1-[4-[7-[6-氨基-3-(2,2,2-三氟乙基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(7.6mg，收率13.5％)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：477.1[M+H]+。
实例51：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.68(s，1H)，8.24(s，1H)，7.80(s，1H)，7.62(d，J＝8.6Hz，1H)，6.84(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.72(d，J＝8.7Hz，1H)，6.29(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.6，2.0Hz，1H)，4.06-4.01(m，4H)，3.98-3.93(m，4H)，3.43-3.36(m，1H)，3.16-3.00(m，1H)。
实例52：1-[4-[7-[6-氨基-4-乙基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：2,6-二氯-4-乙基吡啶
在氮气气氛下，将2,6-二氯-4-碘吡啶(10.00g，36.51mmol)、三乙基硼烷(36.0mL，36.00mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)(2.67g，3.65mmol)和碳酸钾(10.00g，72.36mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(80mL)在80℃下搅拌60min。完成后，用水(100mL)稀释所得溶液，用乙酸乙酯(150mL×3)进行萃取，用盐水(150mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(3/97)进行洗脱，得到6.3g(98％)2,6-二氯-4-乙基吡啶，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：176.0[M+H]+。
第2步：N-(6-氯-4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在90℃下，将2,6-二氯-4-乙基吡啶(3.00g，17.04mmol)、氨基甲酸叔丁酯(2.20g，18.78mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯-氯仿加合物(880.0mg，0.85mmol)、XantPhos(985.0mg，1.70mmol)和碳酸铯(11.00g，33.76mmol)的1,4-二噁烷溶液(50mL)搅拌60min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，用二氯甲烷(200mL)进行萃取，用盐水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/10)进行洗脱。由此得到3.3g(69％)N-(6-氯-4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：257.1[M+H]+。
第3步：6-氯-4-乙基吡啶-2-胺
将N-(6-氯-4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(3.00g，11.68mmol)加入三氟乙酸(20mL)和二氯甲烷(70mL)溶液中并且在25℃下搅拌60min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，用水(30mL)进行稀释，用碳酸钠饱和水溶液将所得溶液的pH调节至pH＝7.0，用乙酸乙酯(100mL×3)进行萃取，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/3)进行洗脱，得到1.52g(83％)6-氯-4-乙基吡啶-2-胺，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：157.0[M+H]+。
第4步：6-氯-4-乙基-5-碘吡啶-2-胺
在25℃下，将6-氯-4-乙基吡啶-2-胺(1.50g，9.58mmol)和NIS(2.16g，9.60mmol)的乙腈溶液(70mL)搅拌2h。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，用二氯甲烷(200mL)稀释，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/10)进行洗脱，得到1.73g(64％)6-氯-4-乙基-5-碘吡啶-2-胺，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：282.9[M+H]+。
第5步：6-氯-4-乙基-5-碘-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]吡啶-2-胺
在25℃下，将6-氯-4-乙基-5-碘吡啶-2-胺(1.05g，3.72mmol)、1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(1.75g，11.17mmol)和氢化钠(270.0mg，11.25mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(15.00mL)搅拌60min。完成后，用氯化铵饱和溶液使所得溶液淬灭，用乙酸乙酯(100mL×3)进行萃取，用盐水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/10)进行洗脱，得到1.10g(57％)6-氯-4-乙基-5-碘-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]吡啶-2-胺，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：523.1[M+H]+。
第6步：6-氯-4-乙基-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在90℃下，将6-氯-4-乙基-5-碘-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]吡啶-2-胺(1.20g，2.30mmol)、碘化铜(I)(0.87g，4.60mmol)和2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(0.58mL，4.59mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(10mL)搅拌2小时。完成后，用水(50mL)稀释所得溶液，用乙酸乙酯(100mL×3)进行萃取，用盐水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1/10)进行洗脱，得到0.70g(70％)6-氯-4-乙基-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺。LC-MS(ESI，m/z)：465.1[M+H]
第7步：6-氯-4-乙基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将6-氯-4-乙基-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.20g，2.58mmol)加入二氯甲烷(10mL)和三氟乙酸(10mL)溶液中并且在40℃下搅拌2小时。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，用水(50mL)进行稀释，用碳酸钠饱和水溶液将所得溶液的pH调节至pH＝8，用乙酸乙酯(100mL×3)进行萃取，用盐水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(1/10)进行洗脱，得到0.59g(89.6％)6-氯-4-乙基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺。LC-MS(ESI，m/z)：225.0[M+H]+。
第8步：4-[7-[6-氨基-4-乙基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将6-氯-4-乙基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(560.0mg，2.49mmol)、4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.42g，2.99mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(175.5mg，0.25mmol)和氟化钾(289.7mg，4.99mmol)加入乙腈(10mL)和水(2mL)溶液中并且在90℃下搅拌1小时。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，用二氯甲烷(200mL)稀释，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(1/20)进行洗脱，得到250.0mg(18.7％)4-[7-[6-氨基-4-乙基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯。LC-MS(ESI，m/z)：537.2[M+H]+。
第9步：6-(6-氯-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-4-乙基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将4-[7-[6-氨基-4-乙基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250.0mg，0.47mmol)加入二氯甲烷(10mL)和三氟乙酸(2mL)溶液中并且在25℃下搅拌0.5小时。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，用水(50mL)进行稀释，用碳酸钠饱和水溶液将所得溶液的pH调节至pH＝8，用乙酸乙酯(100mL×3)进行萃取，用盐水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(1/5)进行洗脱，得到142.0mg(70％)6-(6-氯-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-4-乙基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺。LC-MS(ESI，m/z)：437.1[M+H]+。
第10步：1-[4-[7-[6-氨基-4-乙基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基)-4-乙基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(211.0mg，0.48mmol)、丙烯酸(0.05mL，0.72mmol)、N,N-二异丙基乙胺(1.0mL，5.74mmol)和HATU(220.4mg，0.58mmol)的二氯甲烷溶液(7mL)搅拌0.5小时。完成后，用二氯甲烷(200mL)稀释所得溶液，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到48.4mg(20.1％)1-[4-[7-[6-氨基-4-乙基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮。LC-MS(ESI，m/z)：491.1[M+H]+。
实例52：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.67(s，1H)，8.11(s，1H)，7.65(s，1H)，6.88-6.81(m，3H)，6.54(s，1H)，6.18(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，3.86(brs，7H)，3.78(brs，1H)，2.74-2.68(m，2H)，1.24(t，J＝7.4Hz，3H)。
实例53：1-(4-[6-氯-7-[6-(甲基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：N-[(叔丁氧基)羰基]-N-[6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯
在60℃下，将6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.04g，5.29mmol)、二碳酸二叔丁酯(2.30g，10.54mmol)、三乙胺(1.55g，15.32mmol)和4-二甲基氨基吡啶(70mg，0.57mmol)的二氯甲烷溶液(6mL)搅拌120min。完成后，用乙酸乙酯(200mL)稀释所得溶液，用水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(0-20％)进行洗脱，得到1.37g(65％)N-[(叔丁氧基)羰基]-N-[6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：397.1[M+H]+。
第2步：N-[6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[(叔丁氧基)羰基]-N-[6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(1.37g，3.45mmol)和氢氧化钠(848.0mg，21.20mmol)加入水(7mL)和四氢呋喃(7mL)溶液中并且在70℃下搅拌120min。完成后，用HCl/1,4-二噁烷将所得溶液的pH调节至pH＝7.0，用乙酸乙酯(200mL)稀释，用水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(0-30％)进行洗脱，得到523.0mg(70％)N-[6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：297.1[M+H]+。
第3步：N-[6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
向N-[6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(1.00g，3.37mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(11mL)中加入氢化钠(206.0mg，8.58mmol)，并且在0℃下搅拌5min。然后加入碘甲烷(1.00g，7.04mmol)，并且在0℃下搅拌30min。完成后，用氯化铵饱和溶液使所得溶液淬灭，用(80mL×3)进行萃取，用(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(0-30％)进行洗脱，得到1.00g(95％)N-[6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：311.1[M+H]+。
第4步：4-[7-(6-[[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将N-[6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(200.0mg，0.64mmol)、4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(360.0mg，0.76mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(45.0mg，0.064mmol)和氟化钾(120.0mg，2.07mmol)加入乙腈(3mL)和水(0.6mL)溶液中并且在80℃下搅拌30min。完成后，用乙酸乙酯(200mL)稀释所得溶液，用(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(0-10％)进行洗脱，得到380mg(95％)4-[7-(6-[[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：623.2[M+H]+。
第5步：6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-N-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将4-[7-(6-[[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基]-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(380.0mg，0.61mmol)加入三氟乙酸(3mL)和二氯甲烷(10mL)溶液中并且在25℃下搅拌30min。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，得到450.0mg(粗产物)6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-N-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为棕色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：523.2[M+H]+。
第6步：1-(4-[6-氯-7-[6-(甲基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[6-氯-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基]-N-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(420.0mg，0.99mmol)、丙-2-烯酸(97.0mg，1.35mmol)、HATU(410.0mg，1.08mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1mL，6.05mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌30min。完成后，用水(1mL)使所得溶液淬灭，用二氯甲烷(200mL)稀释，用水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(0-10％)进行洗脱，得到40.1mg(8％)1-(4-[6-氯-7-[6-(甲基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，其为固体。LC-MS(ESI，m/z)：477.1[M+H]+。
实例53：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.68(s，1H)，8.20(s，1H)，7.80-7.76(m，2H)，6.85(dd，J＝16.8，10.6Hz，1H)，6.65(dd，J＝9.0，0.9Hz，1H)，6.30(dd，J＝16.8，1.9Hz，1H)，5.83(dd，J＝10.6，2.0Hz，1H)，4.03-4.01(m，4H)，3.96-3.91(m，4H)，2.91(s，3H)。
实例54：1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-3-甲基哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：7-溴-4,6-二氯喹唑啉
向7-溴-6-氯-3,4-二氢喹唑啉-4-酮(10.00g，38.54mmol)的亚硫酰氯溶液(40mL)中加入N,N-二甲基甲酰胺(0.2mL)，并且在90℃下搅拌3h。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩。由此得到11.00g(粗产物)7-溴-4,6-二氯喹唑啉，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：276.9[M+H]+。
第2步：(3S)-4-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在90℃下，将7-溴-4,6-二氯喹唑啉(10.00g，35.98mmol)、(3S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10.90g，54.424mmol)和N,N-二异丙基乙胺(9.3g，71.96mmol)的1,4-二噁烷溶液(50mL)搅拌1h。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，用二氯甲烷(300mL)进行稀释，用盐水(80mL×3)洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到10.00g(63％)(3S)-4-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：441.1[M+H]+。
第3步：(3S)-4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(3S)-4-(7-溴-6-氯喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.00g，2.26mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(1.73g，6.81mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(186.0mg，0.23mmol)和乙酸钾(450mg，4.585mmol)的1,4-二噁烷溶液(8mL)在90℃下搅拌1h。完成后，用二氯甲烷(200mL)稀释所得溶液，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到反相色谱柱上，并且用水:乙腈(5％-60％)进行洗脱。由此得到1.2g(36％)(3S)-4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：489.2[M+H]+。
第4步：(3S)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(3S)-4-[6-氯-7-(四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(800.0mg，1.64mmol)、6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(257.0mg，1.31mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(115.0mg，0.16mmol)和氟化钾(190.0mg，3.27mmol)加入乙腈(6mL)和水(1mL)溶液中并且在110℃下搅拌1h。完成后，用二氯甲烷(200mL)稀释所得溶液，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用甲醇/二氯甲烷(1/20)进行洗脱，得到80.0mg(9％)(3S)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS(ESI，m/z)：523.2[M+H]+。
第5步：6-[6-氯-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(3S)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100.0mg，0.19mmol)加入三氟乙酸(1mL)和二氯甲烷(3mL)溶液中并且在室温下搅拌1h。完成后，在真空下对所得溶液进行浓缩，用水(50mL)进行稀释，用碳酸钠饱和水溶液将所得溶液的pH调节至pH＝8，用乙酸乙酯(100mL×3)进行萃取，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。由此得到90mg(粗产物)6-[6-氯-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为灰色固体。LC-MS(ESI，m/z)：423.1[M+H]+。
第6步：1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-3-甲基哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-[6-氯-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(200.0mg，0.47mmol)、丙-2-烯酸(41.0mg，0.57mmol)、HATU(270.0mg，0.71mmol)和N,N-二异丙基乙胺(122.0mg，0.94mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌30min。完成后，用水(1mL)使所得溶液淬灭，用二氯甲烷(200mL)稀释，用盐水(80mL×3)进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱。利用制备型HPLC制备产物，所用条件如下：色谱柱：XBridge C18，19×150mm，5μm；流动相A：水/0.05％ TFA，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10min内，B由30％增加至70％；254nm。由此得到30.5mg(14％)1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-6-氯喹唑啉-4-基]-3-甲基哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：477.1[M+H]+。
实例54：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.69(s，1H)，8.12(s，1H)，7.84(d，J＝8.9Hz，1H)，7.77(s，1H)，6.92-6.80(m，1H)，6.74(dd，J＝8.9，0.8Hz，1H)，6.31(dd，J＝16.9，5.7Hz，1H)，5.84(dd，J＝10.7，1.9Hz，1H)，4.59-4.41(m，1H)，4.34-4.29(m，1H)，4.23-4.05(m，1H)，3.85-3.60(m，2H)，3.39-3.37(m，1H)，3.26-3.19(m，1H)，1.44(d，J＝6.8Hz，3H)。
实例55：2-[4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-基]乙腈
合成路线
第1步：4-(7-溴-2,6-二氯喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向7-溴-2,4,6-三氯喹唑啉(536.5mg，1.67mmol)的1,4-二噁烷(7.5ml)溶液中，加入N,N-二异丙基乙胺(1.00mL，6.00mmol)和2-哌嗪-2-基乙腈二盐酸盐(300mg，1.50mmol)。在60℃下，将该反应混合物搅拌1小时。待反应混合物冷却至室温后，加入4-二甲基氨基吡啶(37.5mg，0.303mmol)和二碳酸二叔丁酯(1022mg，4.54mmol)。在室温下，将该反应混合物搅拌18小时。用水使反应淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到4-(7-溴-2,6-二氯喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(562mg，74％)。LCMS(ESI，m/z)：501.9[M+H]+。
第2步：4-(7-溴-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇(0.334mL，2.70mmol)的四氢呋喃溶液(18mL)中，加入氢化钠(60质量％)的油溶液(108mg，2.70mmol)，并且搅拌20分钟。待反应冷却至0℃后，加入4-(7-溴-2,6-二氯喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(450mg，0.90mmol)的四氢呋喃溶液(3mL)。将反应混合物加热至室温，并且搅拌1小时。用水使反应混合物淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到4-(7-溴-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(224mg，43％)。LCMS(ESI，m/z)：579.1[M+H]+。
第3步：4-(6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向4-(7-溴-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(220mg，0.379mmol)和双(频哪醇合)二硼(147mg，0.570mmol)的1,4-二噁烷溶液(7.0mL)中，加入乙酸钾(55.9mg，0.570mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(28.0mg，0.038mmol)。将反应混合物脱气，然后在95℃下将其加热2小时。通过硅藻土对反应混合物进行过滤，浓缩得到4-(6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯。将该粗产物用于下一步。LCMS(ESI，m/z)：545.1[M+H]+(LCMS示出硼酸的质谱图)。
第4步：4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将4-(6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(240mg，0.383mmol)、6-溴-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(195.0mg，0.766mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(27.0mg，0.038mmol)、氟化钾(223mg，3.83mmol)的1,4-二噁烷(7.0mL)和水(3.5mL)混悬剂脱气。在125℃下，将反应混合物微波加热25分钟。通过硅藻土对反应混合物进行过滤。利用快速柱层析法在硅胶柱上对粗产物进行纯化(用MeOH/DCM进行洗脱)，得到4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(112mg，43％)。LCMS(ESI，m/z)：675.4[M+H]+。
第5步：2-(4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙腈
将4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(112mg，0.166mmol)加入5％三氟乙酸的六氟异丙醇溶液(2.509mL，1.66mmol)中并且在室温下搅拌4小时。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。浓缩反应产物，然后利用HPLC纯化粗产物，得到2-(4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(50mg，52％)。LCMS(ESI，m/z)：575.2[M+H]+。
第6步：2-[4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-基]乙腈
向2-(4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(60mg，0.10mmol)、2-氟丙-2-烯酰氧基钠(14mg，0.13mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.09mL，0.52mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(2.0mL)中，加入0℃的HATU(83.5mg，0.21mmol)并且搅拌20分钟。用水使反应淬灭，并且用EtOAc进行萃取。用硫酸钠使有机层干燥，然后过滤，并且通过旋转蒸发仪进行浓缩。利用HPLC纯化粗产物，并且用FA(在15min内，由5％增加至50％)进行洗脱，得到2-[4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-基]乙腈(34mg，50％)。
实例55：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.17-8.06(m，1H)，7.42(d，J＝3.2Hz，1H)，6.77(d，J＝2.9Hz，2H)，6.46(s，1H)，5.48-5.18(m，2H)，4.86(s，1H)，4.36(dt，J＝11.3，5.7Hz，1H)，4.21(qd，J＝10.4，9.0，6.0Hz，3H)，3.11-2.93(m，2H)，2.63(s，1H)，2.40-2.34(m，6H)，2.23(q，J＝8.4Hz，2H)，2.02-1.88(m，1H)，1.67(tdd，J＝16.1，9.6，4.8Hz，3H)。LCMS(ESI，m/z)：647.3[M+H]+。
实例56：2-[4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)哌嗪-2-基]乙腈
实例56根据与实例55相同的方案进行制备，不同之处在于在实例56的第2步，使用((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇作为替代试剂代替[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇。
实例56：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.10(d，J＝3.9Hz，1H)，7.43(d，J＝3.1Hz，1H)，6.77(d，J＝2.8Hz，2H)，6.46(s，1H)，5.41(dd，J＝18.0，4.1Hz，1H)，5.37-5.08(m，2H)，4.39(ddd，J＝11.5，7.6，4.7Hz，1H)，4.25(ddq，J＝24.9，12.6，5.3Hz，3H)，2.92(dd，J＝10.2，5.3Hz，2H)，2.40(s，3H)，2.38-2.33(m，3H)，2.22-2.04(m，1H)，1.91(dddd，J＝33.6，14.8，9.8，5.9Hz，1H)。LCMS(ESI，m/z)：665.3[M+H]+。
实例57：1-[4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-2-(氟甲基)哌嗪-1-基]-2-氟-丙-2-烯-1-酮
实例57根据与实例55相同的方案进行制备，不同之处在于在实例57的第1步，使用2-(氟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯盐酸盐作为替代试剂代替2-哌嗪-2-基乙腈二盐酸盐。
实例57：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.04(d，J＝1.5Hz，1H)，7.42(d，J＝1.7Hz，1H)，6.78(d，J＝2.9Hz，2H)，6.46(s，1H)，5.43-5.18(m，2H)，4.74(d，J＝43.0Hz，3H)，4.43-4.12(m，5H)，2.99-2.93(m，1H)，2.63-2.53(m，1H)，2.36(s，6H)，2.18(q，J＝8.6Hz，1H)，2.01-1.89(m，1H)，1.74-1.56(m，4H)。LCMS(ESI，m/z)：640.3[M+H]+。
实例58：2-[(2R)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-1-(2-氟丙-2-烯酰基)-5-甲基-哌嗪-2-基]乙腈：
实例58根据与实例55相同的方案进行制备，不同之处在于在实例58的第1步，使用2-((2R)-5-甲基哌嗪-2-基)乙腈(中间体2)作为替代试剂代替2-哌嗪-2-基乙腈二盐酸盐，并且在实例58的第2步，使用((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇作为替代试剂代替[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇。
实例58：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.08(d，J＝10.5Hz，1H)，7.43(d，J＝2.5Hz，1H)，6.77(s，2H)，6.46(d，J＝1.5Hz，1H)，5.49-4.92(m，4H)，4.64(s，1H)，4.38(dt，J＝10.6，5.1Hz，1H)，4.34-4.22(m，1H)，4.21-3.93(m，2H)，3.71(d，J＝29.2Hz，2H)，3.53-3.37(m，2H)，3.07-2.84(m，2H)，2.40(dd，J＝2.4，1.1Hz，4H)，2.38-2.34(m，3H)，2.13(ddd，J＝25.1，10.7，4.0Hz，1H)，2.02-1.80(m，1H)，1.15(d，J＝8.5Hz，3H)。LCMS(ESI，m/z)：679.3[M+H]+。
实例59a和59b：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例59a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例59b)
合成路线
第1步：2-氨基-4-溴-3-氟-5-碘苯甲酸
在80℃下，将2-氨基-4-溴-3-氟苯甲酸(31.0g，132.47mmol)和N-碘代丁二酰亚胺(32.86g，146.05mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(100mL)搅拌2小时。LC-MS示出所需产物的形成。用水(2L)稀释所得溶液，过滤，并且收集固体，然后用水洗涤，得到2-氨基-4-溴-3-氟-5-碘-苯甲酸(45g，125.03mmol，收率94.4％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：357.9[M-H]+
第2步：7-溴-8-氟-6-碘喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
在200℃下，将尿素(352.0g，5860.8mmol)和2-氨基-4-溴-3-氟-5-碘苯甲酸(44.0g，122.25mmol)的溶液搅拌1小时。LC-MS示出所需产物的形成。待反应混合物冷却至80℃后，用水进行稀释。过滤后，收集固体，并且用水(约50℃)进行洗涤，得到7-溴-8-氟-6-碘喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(45g，116.9mmol，收率95.6％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：382.8[M-H]+
第3步：7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-碘喹唑啉
在80℃下，将7-溴-8-氟-6-碘喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.0g，2.6mmol)和N,N-二甲基苯胺(0.99mL，7.79mmol)的三氯氧磷溶液(10mL，107.28mmol)搅拌2小时。完成后，将粗产物直接用于下一步。
第4步：(S)-4-(7-溴-2-氯-8-氟-6-碘喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-碘喹唑啉(2.2g，5.22mmol)和N,N-二异丙基乙胺(4.58mL，26.31mmol)的1,4-二噁烷溶液(20mL)搅拌2分钟。加入(3S)-3-甲基-1-哌嗪羧酸叔丁酯(3.1g，15.48mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。完成后，对反应产物进行浓缩，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(85:15)进行洗脱，得到(S)-4-(7-溴-2-氯-8-氟-6-碘喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(700mg，1.1953mmol，收率22.9％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：584.9[M+H]+
第5步：(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-碘喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在120℃下，将(S)-4-(7-溴-2-氯-8-氟-6-碘喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.0g，8.54mmol)和氟化钾(2.5g，43.03mmol)的N,N-二甲基乙酰胺溶液(10mL)搅拌2小时。完成后，用乙酸乙酯稀释溶液，并且用水进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(9:1)进行洗脱，得到(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-碘喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.1g，5.4mmol，收率63.8％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：569.0[M+H]+
第6步：(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-碘喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g，1.76mmol)、碘化铜(I)(3400mg，17.85mmol)和三氟甲硫醇银(I)(1.1g，5.26mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(10mL)在微波条件下且在90℃下搅拌2小时。完成后，利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/水(97:3)进行洗脱，得到(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯。LC-MS：(ESI，m/z)：543.1[M+H]+
第7步：(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，加入(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.0g，3.68mmol)、N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-6-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-胺(3.5g，5.49mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(2.1g，1.82mmol)、碘化铜(I)(400mg，2.1mmol)和氯化锂(400.0mg，9.22mmol)的1,4-二噁烷溶液(20mL)，并且在90℃下搅拌16小时。完成后，过滤反应产物，用乙酸乙酯稀释滤液，并且用水进行洗涤。在减压条件下浓缩有机层。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(80:20)进行洗脱，得到(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.6g，1.9mmol，收率53.6％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：811.3[M+H]+
第8步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.7g，4.56mmol)、N-碘代丁二酰亚胺(1.25g，5.59mmol)和对甲苯磺酸一水合物(44.0mg，0.23mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(20mL)搅拌1小时。完成后，用乙酸乙酯稀释溶液，将其转移至分液漏斗中，并且用水进行洗涤。将有机层混合，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(75:25)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.1g，1.1mmol，收率25.7％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：937.1[M+H]+
第9步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，加入(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200.0mg，0.21mmol)、2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(1000.0mg，5.21mmol)和碘化铜(I)(404mg，2.12mmol)的N,N-二甲基乙酰胺溶液(10mL)，并且在90℃下搅拌2小时。完成后，过滤反应产物，在减压条件下浓缩滤液，然后用乙酸乙酯稀释，并且用水进行洗涤。将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(80:20)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(160mg，0.18mmol，收率85.3％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：879.2[M+H]+
第10步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将氢化钠(165.0mg，4.12mmol)的四氢呋喃溶液(50mL)搅拌5分钟。加入N-甲基-l-脯氨醇(412.5mg，3.58mmol)，并且在25℃下搅拌10分钟。然后加入(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,8-二氟-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1650.0mg，1.88mmol)，并且在25℃下搅拌10分钟。完成后，浓缩反应产物，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯粗产物(1.5g，1.54mmol，收率82％)，将其直接用于下一步而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：974.4[M+H]+
第11步：6-(8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在60℃下，将(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.3g，1.33mmol)的2,2,2-三氟乙酸溶液(20mL)搅拌16小时。完成后，对反应产物进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/水(25/75和60/40)进行洗脱，得到6-(8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(410mg，0.6mmol，收率48.5％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：634.2[M+H]+
第12步：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例59a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例59b)
在-78℃下，将N,N-二异丙基乙胺(288.0mg，2.23mmol)和6-(8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(720.0mg，1.14mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(108.0mg，1.19mmol)，并且在-78℃下将该反应混合物搅拌30分钟。完成后，用甲醇使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行稀释。将所得混合物倒入分液漏斗中，并且用水洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用乙腈/水(65:35)进行洗脱，得到粗产物。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，所用条件如下：色谱柱：Xselect CSH OBD，30×150mm，5μm，n；流动相A：水(含0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min。利用手性制备型HPLC对所得产物进行纯化，所用条件如下：色谱柱CHIRALPAK IC，2×25cm，5μm；流动相A：Hex:DCM＝3:1(10mM NH3-MeOH)，HPLC级，流动相B：HPLC级EtOH；流速：15mL/min；得到1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-((三氟甲基)硫基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(44.5mg，0.06mmol，收率5.7％)，它们均为白色固体。
实例59a：LC-MS：(ESI，m/z)：688.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO，ppm)δ8.12(d，J＝21Hz，1H)，6.84(s，3H)，6.50(s，1H)，6.18(d，J＝36.0Hz，1H)，5.75(dd，J＝2.4，10.2Hz，1H)，4.75-4.63(m，1H)，4.47-4.00(m，5H)，3.67-3.55(m，2H)，3.25-3.16(m，1H)，3.02-2.92(m，1H)，2.66-2.55(m，1H)，2.38(s，6H)，2.25-2.15(m，1H)，2.02-1.85(m，1H)，1.75-1.55(m，3H)，1.45-1.26(m，3H)。手性HPLC：CHIRALPAK IC-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；正己烷/二氯甲烷＝3/1(0.1％二乙胺)；流速＝1.0mL/min；保留时间：0.9min(较快的峰)。
实例59b：LC-MS：(ESI，m/z)：688.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO，ppm)δ8.13(s，1H)，6.92-6.84(m，3H)，6.51(s，1H)，6.20(d，J＝30.0Hz，1H)，5.75(dd，J＝2.4，10.2Hz，1H)，4.75(s，1H)，4.45-4.35(m，1H)，4.30-3.90(m，4H)，3.80-3.55(m，2H)，3.28-3.04(m，1H)，3.01-2.90(m，1H)，2.65-2.55(m，1H)，2.43-2.31(m，6H)，2.23-2.11(m，1H)，2.04-1.87(m，1H)，1.75-1.55(m，3H)，1.34(d，J＝6.6Hz，3H)。手性HPLC：CHIRALPAK IC-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；正己烷/二氯甲烷＝3/1(0.1％二乙胺)；流速＝1.0mL/min；保留时间：1.8min(较慢的峰)。
实例60：1-[(3S,5S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-3,5-二甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(3S,5S)-4-(7-溴-6-氯-喹唑啉-4-基)-3,5-二甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在60℃下，将7-溴-4,6-二氯-喹唑啉(参见实例22的第1步)(1.0g，3.6mmol)、(3S,5S)-3,5-二甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.1g，5.4mmol)和碳酸钠(1.1g，10.7mmol)的二甲基亚砜溶液(10mL)搅拌16小时。完成后，在减压条件下浓缩反应产物。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(9:1)进行洗脱，得到(3S,5S)-4-(7-溴-6-氯-喹唑啉-4-基)-3,5-二甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.50g，1.0mmol，收率30.5％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：455.1[M+H]+
第2步：(3S,5S)-4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]-3,5-二甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(3S,5S)-4-(7-溴-6-氯-喹唑啉-4-基)-3,5-二甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(900.0mg，1.9mmol)、双(频哪醇合)二硼(5.0g，19.7mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(144.3mg，0.20mmol)和乙酸钾(387.0mg，3.9mmol)的1,4-二噁烷溶液(90mL)在80℃下搅拌1小时。完成后，过滤反应产物，并且用己烷洗涤所得固体。将粗产物直接用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：503.3[M+H]+
第3步：(3S,5S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-3,5-二甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(3S,5S)-4-[6-氯-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基]-3,5-二甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g，1.9mmol)、6-溴-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.0g，3.9mmol)、氟化钾(230.6mg，3.9mmol)和双(三苯基膦)氯化钯(II)(139.4mg，0.2mmol)加入乙腈(10mL)和水(2mL)溶液中并且在80℃下搅拌1小时。完成后，用二氯甲烷稀释反应产物，并且用无水硫酸钠使其干燥。浓缩该混合物，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20:1)进行洗脱，得到(3S,5S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-3,5-二甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，0.5mmol，收率27.4％)，其为棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：551.2[M+H]+
第4步：1-[(3S,5S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-3,5-二甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向(3S,5S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-3,5-二甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300.0mg，0.5mmol)的二氯甲烷溶液(6mL)中，加入三氟乙酸(1.2mL，15.7mmol)。在25℃下，将该反应混合物搅拌30分钟，然后进行浓缩。用二氯甲烷(6mL)稀释所得混合物，然后向其中加入N,N-二异丙基乙胺(343.3mg，2.6mmol)。加入-78℃的丙烯酰氯(48.1mg，0.5mmol)，并且将该反应混合物搅拌30分钟。完成后，浓缩反应产物，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20:1)进行洗脱，得到粗产物固体。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，得到1-[(3S,5S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-喹唑啉-4-基]-3,5-二甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(90.1mg，0.18mmol，收率33.5％)，其为白色固体。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，所用条件如下：XBridge Prep C18 OBD色谱柱，19×150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min。
实例60：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.97(d，J＝4.9Hz，1H)，8.22(d，J＝5.2Hz，1H)，7.79(d，J＝5.3Hz，1H)，6.97-6.71(m，3H)，6.55-6.46(m，1H)，6.20(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，4.15-3.89(m，4H)，3.65(s，2H)，2.38(d，J＝2.5Hz，3H)，1.01(d，J＝6.4Hz，6H)。LC-MS：(ESI，m/z)：505.1[M+H]+
实例61：1-((S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(S)-4-(7-溴-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将氢化钠(1.01g，42.00mmol)加入(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇(4.84g，42.00mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(40mL)中，并且在0℃下搅拌5分钟。然后加入(S)-4-(7-溴-2,6-二氯喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体5)(10.00g，21.00mmol)，并且将所得混合物在0℃下搅拌1小时。完成后，用氯化铵水溶液使反应淬灭，用水稀释，用乙酸乙酯进行萃取，用水洗涤，用硫酸钠使其干燥，然后进行浓缩。利用硅胶色谱柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20:1)进行洗脱，得到(S)-4-(7-溴-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10.50g，17.98mmol，收率85.6％)，其为黄色油状物。LCMS：(ESI，m/z)：556.4[M+H]+
第2步：4-((S)-4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基硼酸
在氮气气氛下，将(S)-4-(7-溴-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.00g，3.60mmol)、双(频哪醇合)二硼(2.75g，10.81mmol)、乙酸钾(1.06g，10.81mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(0.27g，0.36mmol)的1,4-二噁烷溶液(15mL)在80℃下搅拌2小时。完成后，浓缩所得溶液，用二氯甲烷进行稀释，然后进行过滤。在真空下浓缩滤液，得到4-((S)-4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基硼酸(3.00g，粗产物)，其为黑色油状物。将该粗产物直接用于下一步。LCMS：(ESI，m/z)：520.2[M+H]+
第3步：(S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-((S)-4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基硼酸(2.20g，2.12mmol)、6-溴-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(0.54g，2.12mmol)、氟化钾(0.25g，4.23mmol)和双(三苯基膦)氯化钯(II)(0.15g，0.21mmol)加入乙腈(35mL)和水(7mL)的混合溶剂溶液中并且在80℃下搅拌2小时。完成后，用二氯甲烷稀释所得溶液，用水进行洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后进行浓缩。利用硅胶色谱柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10:1)进行洗脱，得到(S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.50g，0.72mmol，收率34.2％)，其为棕色固体。LCMS：(ESI，m/z)：650.3[M+H]+
第4步：1-((S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在25℃下，将(S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.30g，0.46mmol)和三氟乙酸(0.6mL，7.79mmol)的二氯甲烷溶液(3mL)搅拌1小时。完成后，浓缩反应混合物，用二氯甲烷进行稀释，并且用N,N-二异丙基乙胺调节至pH>7。然后加入丙烯酰氯(0.03g，0.37mmol)，并且将反应混合物在-78℃下搅拌1小时。完成后，用水稀释所得溶液，用二氯甲烷进行萃取，用硫酸钠使其干燥，然后进行浓缩。利用制备型HPLC纯化粗产物，得到1-((S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(28.7mg，0.05mmol，收率15.1％)，其为白色固体。LCMS：(ESI，m/z)：604.2[M+H]+。制备型HPLC条件：色谱柱：XBridgePrep C18 OBD色谱柱；流动相，A：水，B：乙腈，B％(在7min内，由33％增加至50％)；检测器，UV 254nm
实例61：1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.94(d，J＝3.9Hz，1H)，7.41(s，1H)，6.95-6.72(m，3H)，6.47(s，1H)，6.18(d，J＝18.3Hz，1H)，5.75(d，J＝10.5，2.4Hz，1H)，4.70(s，1H)，4.46-4.31(m，2H)，4.31-3.92(m，4H)，3.73-3.51(m，2H)，3.01-2.91(m，1H)，2.64-2.53(m，1H)，2.36(s，6H)，2.25-2.12(m，1H)，2.00-1.90(m，1H)，1.77-1.56(m，3H)，1.26(d，J＝6.0Hz，3H)。
实例62a和62b：1-((S)-4-((R)-6-氯-8-氟-7-(4-甲基-6-(甲基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例62a)和1-((S)-4-((S)-6-氯-8-氟-7-(4-甲基-6-(甲基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例62b)(2种阻转异构体)
合成路线
第1步：(S)-4-(6-氯-2,8-二氟-7-(6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-N,4-二甲基-6-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-胺(5.5g，10.35mmol)，叔丁基(3S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基)-3-甲基-哌嗪-1-羧酸酯(2.47g，5.17mmol)、四(三苯基膦)钯(1.2g，1.03mmol)、碘化亚铜(296.1mg，1.55mmol)和氯化锂(548.4mg，12.94mmol)加入1,4-二噁烷(100mL)溶液中并且在150℃下搅拌过夜。浓缩反应产物，利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(7/3)进行洗脱，得到(S)-4-(6-氯-2,8-二氟-7-(6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.2g，3.48mmol，收率67.2％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：639.3[M+H]+
第2步：(3S)-4-(6-氯-2,8-二氟-7-(3-碘-6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将(S)-4-(6-氯-2,8-二氟-7-(6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.22g，3.48mmol)、N-碘代丁二酰亚胺(1.57g，6.96mmol)和对甲苯磺酸(129.5mg，0.75mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中，并且在室温下搅拌过夜。用水稀释反应混合物，并且用乙酸乙酯进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(75/25)进行洗脱，得到(3S)-4-(6-氯-2,8-二氟-7-(3-碘-6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.53g，2.00mmol，收率57.5％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：765.1[M+H]+。
第3步：(3S)-4-(6-氯-2,8-二氟-7-(6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(4.39g，22.85mmol)、(3S)-4-(6-氯-2,8-二氟-7-(3-碘-6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.5g，4.57mmol)和碘化亚铜(870.0mg，4.57mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(70mL)在90℃下搅拌6小时。用水稀释反应混合物，并且用乙酸乙酯进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(75/25)进行洗脱，得到(3S)-4-(6-氯-2,8-二氟-7-(6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.5g，3.54mmol，收率77.5％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：707.3[M+H]+
第4步：(3S)-4-(6-氯-8-氟-7-(6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向N-甲基-l-脯氨醇(70mg，0.57mmol)的四氢呋喃溶液(3mL)中，加入0℃的氢化钠(23mg，0.57mmol，60％，分散于矿物油中)。将该反应混合物搅拌0.5小时。向反应混合物中加入(3S)-4-(6-氯-2,8-二氟-7-(6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.2g，0.28mmol)，并且在室温下继续搅拌0.5小时。用水使反应淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(30％)进行洗脱，得到(3S)-4-(6-氯-8-氟-7-(6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，0.12mmol，收率44.1％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：802.1[M+H]+。
第5步：6-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-N,4-二甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将(3S)-4-(6-氯-8-氟-7-(6-((4-甲氧苄基)(甲基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.1g，2.66mmol)的三氟乙酸溶液(40mL)搅拌2小时。浓缩反应溶液，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(2/10)进行洗脱，得到6-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-N,4-二甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.2g，2.11mmol，收率79.3％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：582.1[M+H]+。
第6步：1-((S)-4-((R)-6-氯-8-氟-7-(4-甲基-6-(甲基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例62a)和1-((S)-4-((S)-6-氯-8-氟-7-(4-甲基-6-(甲基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例62b)(2种阻转异构体)
将6-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-N,4-二甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(400.0mg，0.69mmol)和N,N-二异丙基乙胺(177.3mg，1.37mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)冷却至-78℃。向反应混合物中加入丙烯酰氯(62mg，0.69mmol)，并且将混合物在-78℃下搅拌2小时。用水使反应淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用制备型HPLC分离残余物，所用条件如下：色谱柱，CHIRAL ART Cellulose-SB，2×25cm，5μm；流动相，HPLC级己烷和HPLC级乙醇(在10min内保持40％乙醇(HPLC级))；检测器，UV 220/254nm，得到标题化合物。基于效价分配标题化合物的立体化学结构。
实例62a：1-((S)-4-((R)-6-氯-8-氟-7-(4-甲基-6-(甲基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(70.9mg，0.11mmol，收率16.2％，白色固体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.84(d，J＝1.7Hz，1H)，6.93-6.76(m，1H)，6.53(s，1H)，6.31(d，J＝16.8Hz，1H)，5.87-5.79(m，1H)，4.59-4.38(m，3H)，4.28-4.22(m，2H)，4.20-4.15(m，2H)，4.05(d，J＝14.1Hz，1H)，3.76-3.72(m，1H)，3.61(s，1H)，3.40(s，3H)，3.23-3.20(m，1H)，3.15-3.08(m，3H)，2.89(s，3H)，2.81-2.73(m，1H)，2.54-2.50(m，1H)，2.49-2.44(m，3H)，1.43(s，3H)。
实例62b：1-((S)-4-((S)-6-氯-8-氟-7-(4-甲基-6-(甲基氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(65.1mg，0.10mmol，收率14.9％，白色固体)。1H NMR(300MHz，甲醇-d4)δ7.84(d，J＝1.7Hz，1H)，6.85(d，J＝10.7Hz，1H)，6.53(s，1H)，6.31(d，J＝17.5Hz，1H)，5.83(d，J＝10.6Hz，1H)，4.51-4.48(m，3H)，4.31(d，J＝13.9Hz，2H)，4.05(d，J＝13.2Hz，1H)，3.76(d，J＝14.0Hz，2H)，3.18-3.09(m，1H)，2.88(s，4H)，2.56(s，4H)，2.46(s，3H)，2.45-2.34(m，2H)，1.92-1.73(m，3H)，1.45(d，J＝6.8Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：636.1[M+H]+。实例63a和63b：1-((S)-4-((R)-7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例63a)和1-((S)-4-((S)-7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例63b)
合成路线
第1步：(S)-4-(7-溴-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在90℃下，将N-甲基-l-脯氨醇(3.5g，30.39mmol)和碳酸钾(5.6g，40.58mmol)的二甲基亚砜溶液(20mL)搅拌0.5小时。然后加入(S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10.0g，20.24mmol)，并且在90℃下搅拌1小时。完成后，用水稀释反应混合物。用二氯甲烷萃取所得溶液，并且用水进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(94:6)进行洗脱，得到(S)-4-(7-溴-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(6.5g，11.3mmol，收率56.1％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：572.1[M+H]+
第2步：(S)-4-(6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(三丁基甲锡烷基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(S)-4-(7-溴-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g，1.75mmol)、六丁基二锡(2.9g，8.85mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯-氯仿加合物(181.0mg，0.1700mmol)、三环己基膦(100.0mg，0.3600mmol)和氯化锂(189.0mg，4.35mmol)的1,4-二噁烷溶液(100mL)在105℃下搅拌2小时。完成后，用二氯甲烷稀释反应混合物。用水洗涤所得溶液。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/水(19:1)进行洗脱，得到(S)-4-(6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(三丁基甲锡烷基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(340mg，0.4mmol，收率24.9％)，其为棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：784.3[M+H]+
第3步：(3S)-4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(S)-4-(6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(三丁基甲锡烷基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(212.5mg，0.27mmol)、1-溴异喹啉-3-胺(50.0mg，0.2200mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(130.0mg，0.1100mmol)、碘化铜(I)(22.5mg，0.1200mmol)和氯化锂(22.5mg，0.5200mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(5mL)在90℃下搅拌1小时。完成后，浓缩溶液，并且利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/水(97:3)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，0.15mmol，收率70.1％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：636.2[M+H]+
第4步：1-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)异喹啉-3-胺
在25℃下，将(3S)-4-(7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(600.0mg，0.94mmol)加入二氯甲烷(20mL)和三氟乙酸(10mL，129.8mmol)溶液中搅拌1小时。完成后，浓缩反应溶液，并且利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/水(40:60)进行洗脱，得到1-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)异喹啉-3-胺(410mg，0.76mmol，收率81.1％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：536.2[M+H]+
第5步：1-((S)-4-((R)-7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例63a)和1-((S)-4-((S)-7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例63b)
在-78℃下，将1-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)异喹啉-3-胺(410.0mg，0.76mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.13mL，0.77mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(76.0mg，0.84mmol)，并且在-78℃下搅拌30分钟。完成后，用水使反应淬灭，并且对反应产物进行浓缩。利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/水(9:1)进行洗脱，并且利用制备型HPLC进行进一步纯化，所用条件如下：色谱柱：Xcelect CSH F-pheny OBD，19×250mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：甲醇；流速：25mL/min。利用手性制备型HPLC对产物进行纯化，所用条件如下：色谱柱：CHIRALPAK IC，2×25cm，5μm；流动相A：Hex:DCM＝1:1(10mM NH3-MeOH)，HPLC级，流动相B：EtOH，HPLC级；流速：18mL/min。冷却干燥残余物，得到1-((S)-4-((R)-7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例63)(39.7mg，0.06mmol，收率8.8％)和1-((S)-4-((S)-7-(3-氨基异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例63b)(47.0mg，0.079mmol，收率10.4％)，它们均为黄色固体。
实例63a：LC-MS：(ESI，m/z)：590.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，CDCl3，ppm)δ7.74(s，1H)，7.64(d，J＝8.4Hz，1H)，7.54-7.49(m，1H)，7.39(d，J＝8.4Hz，1H)，7.28-7.15(m，1H)，6.88(s，1H)，6.69-6.55(m，1H)，6.39(dd，J＝1.8，16.5Hz，1H)，5.79(dd，J＝1.8，10.5Hz，1H)，4.90-4.70(m，1H)，4.67-4.50(m，3H)，4.39-4.27(m，1H)，4.23-4.11(m，1H)，4.05-3.85(m，1H)，3.72-3.41(m，2H)，3.40-2.95(m，2H)，2.82-2.75(m，1H)，2.52(s，3H)，2.42-1.95(m，3H)，1.95-1.69(m，3H)，1.50-1.25(m，3H)。手性HPLC：CHIRALPAK IG-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(正己烷/二氯甲烷＝1/1)(0.1％二乙胺)/乙醇＝1/1；流速＝1.0mL/min；保留时间：1.5min(较快的峰)
实例63b：LC-MS：(ESI，m/z)：590.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，CDCl3，ppm)δ7.73(s，1H)，7.65(d，J＝8.1Hz，1H)，7.55-7.50(m，1H)，7.40(d，J＝8.4Hz，1H)，7.21-7.18(m，1H)，6.89(s，1H)，6.78-6.50(m，1H)，6.40(dd，J＝2.1，16.8Hz，1H)，5.80(d，J＝11.1Hz，1H)，4.80-4.67(m，1H)，4.65-4.45(m，3H)，4.45-4.32(m，1H)，4.32-4.17(m，1H)，4.12-3.75(m，1H)，3.78-3.43(m，2H)，3.30-3.00(m，2H)，2.97-2.70(m，1H)，2.55(s，3H)，2.45-2.30(m，1H)，2.17-2.03(m，1H)，1.99-1.66(m，4H)，1.54-1.35(m，3H)。手性HPLC：CHIRALPAK IG-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(正己烷/二氯甲烷＝1/1)(0.1％二乙胺)/乙醇＝1/1；流速＝1.0mL/min；保留时间：2.5min(较慢的峰)
实例64a和64b：(S)-5-((((S)-4-((S)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(实例64a)和(S)-5-((((R)-4-((S)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(实例64b)(2种阻转异构体)
合成路线
第1步：(5S)-5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]吡咯烷-2-酮
在25℃下，将(5S)-5-(羟基甲基)-2-吡咯烷酮(15.0g，130.29mmol)、咪唑(17.74g，260.58mmol)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(29.31g，195.43mmol)的二氯甲烷溶液(300mL)搅拌1小时。完成后，浓缩反应产物，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(97/3)进行洗脱，得到25g(83.6％)(5S)-5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]吡咯烷-2-酮，其为无色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：230.1[M+H]+
第2步：(5S)-5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-1-甲基-吡咯烷-2-酮
向(5S)-5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]吡咯烷-2-酮(18.0g，78.47mmol)的四氢呋喃溶液(300mL)中加入氢化钠(10.99g，274.64mmol，60％，分散于矿物油中)，并且在25℃下搅拌10分钟。然后加入碘甲烷(22.29g，156.94mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。完成后，用水使所得溶液淬灭，并且对混合物进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到10g(52.4％)(5S)-5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-1-甲基-吡咯烷-2-酮，其为无色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：244.1[M+H]+
第3步：(5S)-5-(羟基甲基)-1-甲基-吡咯烷-2-酮
在25℃下，将(5S)-5-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-1-甲基-吡咯烷-2-酮(1.06g，4.35mmol)的HCl/二噁烷溶液(30mL，4.35mmol)搅拌2小时。完成后，浓缩反应产物，并且利用碳酸氢钠水溶液将pH调节至7-8。浓缩反应产物，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化所得混合物，用二氯甲烷/甲醇(95/5)进行洗脱，得到550mg(97.8％)(5S)-5-(羟基甲基)-1-甲基-吡咯烷-2-酮，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：130.1[M+H]+
第4步：(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S)-1-甲基-5-氧代-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向(5S)-5-(羟基甲基)-1-甲基-吡咯烷-2-酮(0.54g，4.18mmol)的四氢呋喃溶液(8mL)中加入0℃的氢化钠(292.65mg，7.32mmol，60％，分散于矿物油中)，并且在25℃下搅拌1小时。然后加入(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(参见实例17a/17b的第9步)(1.7g，2.09mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。完成后，用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后将有机层混合，用水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(95/5)进行洗脱，得到1.676g(86.9％)(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S)-1-甲基-5-氧代-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：922.3[M+H]+
第5步：(5S)-5-[[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-2-基]氧甲基]-1-甲基-吡咯烷-2-酮
在50℃下，将(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S)-1-甲基-5-氧代-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.63g，1.77mmol)的三氟乙酸溶液(8mL)搅拌24小时。完成后，对反应产物进行浓缩。用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至8。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：乙腈，B％(在30min内由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到785mg(76.1％)(5S)-5-[[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-2-基]氧甲基]-1-甲基-吡咯烷-2-酮，其为淡黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：582.2[M+H]+
第6步：(S)-5-((((S)-4-((S)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(实例64a)和(S)-5-((((R)-4-((S)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(实例64b)(2种阻转异构体)
向(5S)-5-[[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-2-基]氧甲基]-1-甲基-吡咯烷-2-酮(463.0mg，0.80mmol)和N,N-二异丙基乙胺(513.13mg，3.98mmol)的二氯甲烷溶液(12mL)中，加入-78℃的丙烯酰氯(57.6mg，0.6400mmol)，并且在-78℃下搅拌1小时。完成后，用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：乙腈，B％(在30min内由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到251mg粗产物，其为白色固体。利用制备型手性HPLC分离非对映异构体混合物(色谱柱，CHIRALPAK IE-3，0.46×5cm，3μm；流动相，(己烷:二氯甲烷＝3:1)(含0.1％ DEA):EtOH＝50:50；检测器，254nm；流速，1.0mL/min；柱温：25℃)，得到96.5mg(19.1％)(S)-5-((((S)-4-((S)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)-1-甲基吡咯烷-2-酮和95.1mg(18.8％)(S)-5-((((R)-4-((S)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)-1-甲基吡咯烷-2-酮，它们均为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：636.2[M+H]+
实例64a：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.85(d，J＝1.6Hz，1H)，6.92-6.77(m，1H)，6.62(s，1H)，6.30(dd，J＝16.8，3.2Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.8，8.8Hz，1H)，4.82-4.78(m，1H)，4.52-4.48(m，2H)，4.31-4.28(m，1H)，4.28-4.01(m，2H)，3.87-3.52(m，2H)，3.40-3.44(m，1H)，3.32-3.17(m，1H)，2.92(s，3H)，2.61-2.58(m，1H)，2.46(d，J＝1.2Hz，3H)，2.37-2.27(m，2H)，2.10-2.05(m，1H)，1.43(d，J＝6.8Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：636.2[M+H]+手性HPLC：CHIRALPAK IE-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％ DEA):EtOH＝50:50；流速＝1mL/min；保留时间：1.74min(较快的峰)。
实例64b：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.85(d，J＝1.6Hz，1H)，6.92-6.77(m，1H)，6.62(s，1H)，6.30(dd，J＝16.8，3.2Hz，1H)，5.81(dd，J＝10.8，8.8Hz，1H)，4.85-4.77(m，1H)，4.53-4.49(m，2H)，4.31-4.28(m，1H)，4.28-4.01(m，2H)，3.87-3.52(m，2H)，3.36-3.34(m，1H)，3.30-3.17(m，1H)，2.92(s，3H)，2.61-2.58(m，1H)，2.46(d，J＝1.2Hz，3H)，2.37-2.27(m，2H)，2.11-2.05(m，1H)，1.43(d，J＝6.8Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：636.2[M+H]+手性HPLC：CHIRALPAK IE-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％ DEA):EtOH＝50:50；流速＝1mL/min；保留时间：3.48min(较慢的峰)。
实例65：(E)-1-((S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4,4-二氟丁-2-烯-1-酮
合成路线
在25℃下，将(S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(参见实例61的第3步)(0.29g，0.53mmol)和三氟乙酸(0.6mL，7.79mmol)的二氯甲烷溶液(3mL)搅拌1小时。完成后，对反应混合物进行浓缩。将所得混合物重新溶于二氯甲烷(3mL)中，并且向其中加入N,N-二异丙基乙胺(0.18mL，1.05mmol)、(E)-4,4-二氟丁-2-烯酸(0.07g，0.58mmol)和2-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(0.26g，0.69mmol)。在25℃下，将该混合物搅拌1小时。完成后，用水稀释所得溶液，用二氯甲烷进行萃取，用硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到产物。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，得到23mg(E)-1-((S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4,4-二氟丁-2-烯-1-酮，其为白色固体。LCMS：(ESI，m/z)：654.3[M+H]+。制备型HPLC条件：色谱柱：XBridge Shield RP18 OBD色谱柱；流动相，A：水，B：乙腈，B％(在7min内，由40％增加至62％)；检测器，UV 220nm。
实例65：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.94(t，J＝7.2Hz，1H)，7.41(s，1H)，7.23-7.08(m，1H)，6.78(s，2H)，6.69-6.62(m，1H)，6.53-6.45(m，1H)，4.84-4.63(m，1H)，4.43-4.22(m，2H)，4.19-3.98(m，3H)，3.98-3.80(m，1H)，3.78-3.42(m，2H)，3.28-3.08(m，1H)，2.97-2.92(m，1H)，2.63-2.55(m，1H)，2.41-2.33(m，6H)，2.18(q，J＝8.4Hz，1H)，2.01-1.92(m，1H)，1.73-1.58(m，3H)，1.35-1.23(m，3H)。
实例66：1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[2-(二甲基氨基)环戊氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：2-(二甲基氨基)环戊烷-1-醇
在氮气气氛下，向2-氨基环戊烷-1-醇(5.0g，49.4mmol)溶液中加入室温下的甲酸(10mL)。加入甲醛(2.8g)，并且将反应混合物在100℃下搅拌2小时。待反应混合物冷却至室温后，用水进行稀释，并且用碳酸氢钠将溶液的pH调节至9。用二氯甲烷萃取所得混合物，用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩，得到2-(二甲基氨基)环戊烷-1-醇(5g，粗产物)，其为黄色油状物，并且不经纯化而用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：129.2[M+H]+。
第2步：(3S)-4-(7-溴-6-氯-2-((2-(二甲基氨基)环戊基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向2-(二甲基氨基)环戊烷-1-醇(1.0g，7.7mmol)的N,N-二甲基乙酰胺(30mL)的溶液中，加入室温下的氢化钠(584mg，14.6mmol，60％，分散于矿物油中)。在室温下，将所得溶液搅拌30min。然后加入(3S)-4-(7-溴-2,6-二氯-喹唑啉-4-基)-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体5)(2.0g，4.2mmol)，并且在40℃下搅拌2小时。用水使反应淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。然后将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/8)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-溴-6-氯-2-((2-(二甲基氨基)环戊基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2g，3.52mmol，收率83％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：568.9[M+H]+。
第3步：(3S)-4-(6-氯-2-((2-(二甲基氨基)环戊基)氧)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(3S)-4-(7-溴-6-氯-2-((2-(二甲基氨基)环戊基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.0g，3.52mmol)、双(频哪醇合)二硼(8.0g，31.3mmol)、二氯[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)(256mg，0.35mmol)和乙酸钾(1400mg，10.9mmol)的1,4-二噁烷溶液(20mL)在80℃下搅拌2小时。用乙酸乙酯(100mL)稀释反应混合物，并且用水(3×100mL)进行洗涤，得到(3S)-4-(6-氯-2-((2-(二甲基氨基)环戊基)氧)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1g，1.6mmol，收率5.2％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：616.0[M+H]+。
第4步：(3S)-4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-(二甲基氨基)环戊基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(3S)-4-(6-氯-2-((2-(二甲基氨基)环戊基)氧)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1000mg，1.8mmol)、6-溴-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(500mg，1.9mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(120mg，0.2mmol)和氟化钾(300mg，6.5mmol)加入乙腈(10mL)和水(1mL)溶液中并且在80℃下搅拌3小时。用二氯甲烷(50mL)稀释反应混合物。通过硅藻土垫对混合物进行过滤，并且在真空下浓缩滤液。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(1:13)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-(二甲基氨基)环戊基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，0.2mmol，收率14.5％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：650.1[M+H]+
第5步：6-[6-氯-2-[2-(二甲基氨基)环戊氧基]-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(3S)-4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-(二甲基氨基)环戊基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，0.3mmol)加入2,2,2-三氟乙酸(5mL)和二氯甲烷(20mL)中并且在室温下搅拌1小时。在真空下浓缩溶剂，得到6-[6-氯-2-[2-(二甲基氨基)环戊氧基]-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(150mg，0.3mmol，收率79.5％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：564.1[M+H]+
第6步：1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[2-(二甲基氨基)环戊氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向6-[6-氯-2-[2-(二甲基氨基)环戊氧基]-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(250mg，0.4mmol)的二氯甲烷(5mL)和DIEA(171mg，1.3mmol)溶液中，加入-78℃的丙烯酰氯(32mg，0.3mmol)并且搅拌1小时。在真空下对溶剂进行浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物，得到1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[2-(二甲基氨基)环戊氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(32mg，0.1mmol，收率11.6％)，其为白色固体。
实例66：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.93(s，1H)，7.42(d，J＝3.4Hz，1H)，6.89-6.80(m，1H)，6.77(s，2H)，6.46(s，1H)，6.19(d，J＝16.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，5.40(s，1H)，4.70(s，1H)，4.40-4.19(m，1H)，4.15-3.89(m，2H)，3.62-3.40(m，2H)，3.25-3.05(m，2H)，2.40-2.25(m，8H)，2.13-1.97(m，3H)，1.68-1.52(s，4H)，1.39-1.25(m，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：618.2[M+H]+
实例67a和67b：1-((S)-4-((R)-7-(3-氨基-4-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例67a)和1-((S)-4-((S)-7-(3-氨基-4-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例67b)(2种阻转异构体)
合成路线
第1步：(3S)-4-(7-(3-乙酰氨基-4-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(S)-4-(6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(三丁基甲锡烷基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(参见实例63a/63b的第2步)(138.0mg，0.18mmol)、N-(1-溴-4-氟-3-异喹啉基)乙酰胺(50.0mg，0.18mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(102.0mg，0.09mmol)、碘化铜(I)(17.0mg，0.09mmol)和氯化锂(19.0mg，0.4400mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(2mL)在105℃下搅拌16小时。完成后，过滤反应产物，用乙酸乙酯稀释滤液，并且用水进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(92:8)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(3-乙酰氨基-4-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(60mg，0.08mmol，收率48.8％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：696.3[M+H]+
第2步：N-(1-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-氟异喹啉-3-基)乙酰胺
将(3S)-4-(7-(3-乙酰氨基-4-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(800.0mg，1.15mmol)加入2,2,2-三氟乙酸(10mL)和二氯甲烷(10mL)中并且在25℃下搅拌1小时。完成后，浓缩反应溶液，并且利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化所得残余物，用甲醇/水(3:7)进行洗脱，得到N-(1-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-氟异喹啉-3-基)乙酰胺(500mg，0.83mmol，收率73％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：596.2[M+H]+
第3步：1-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-氟异喹啉-3-胺
将N-(1-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-氟异喹啉-3-基)乙酰胺(400.0mg，0.67mmol)加入甲醇(20mL)和盐酸(1mL，10mmol)溶液中并且在25℃下搅拌16小时。完成后，在真空下对溶液进行浓缩。将粗产物1-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-氟异喹啉-3-胺(350mg，0.63mmol，收率94.1％)直接用于下一步而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：554.3[M+H]+
第4步：1-((S)-4-((R)-7-(3-氨基-4-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例67a)和1-((S)-4-((S)-7-(3-氨基-4-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例67b)(2种阻转异构体)
在-78℃下，将1-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-氟异喹啉-3-胺(220.0mg，0.4000mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1mL，5.74mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(36.0mg，0.4000mmol)，并且在-78℃下将反应混合物继续搅拌30分钟。浓缩反应产物，并且利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化所得残余物，用乙腈/水(7:3)进行洗脱，得到粗产物。利用手性制备型HPLC对产物进行纯化，所用条件如下：色谱柱：CHIRALPAK IC，2×25cm，5μm；流动相A：Hex:DCM＝1:1(10mM NH3-MeOH)，HPLC级，流动相B：EtOH，HPLC级；流速：17mL/min，得到1-((S)-4-((R)-7-(3-氨基-4-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(36.9mg，0.060mmol，收率15.3％)和1-((S)-4-((S)-7-(3-氨基-4-氟异喹啉-1-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(41.4mg，0.068mmol，收率17.1％)，它们均为白色固体。
实例67a：LC-MS：(ESI，m/z)：608.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO，ppm)δ8.01-7.74(m，2H)，7.73-7.60(m，1H)，7.40-7.30(m，1H)，7.25-7.17(m，1H)，6.75-7.00(m，1H)，6.33(s，2H)，6.22-6.09(m，1H)，5.74(dd，J＝2.4，10.5Hz，1H)，4.80(s，1H)，4.42-3.95(m，5H)，3.87-3.37(m，2H)，3.29-3.02(m，1H)，2.98-2.83(m，1H)，2.68-2.54(m，1H)，2.32(s，3H)，2.19-2.09(m，1H)，2.00-1.85(m，1H)，1.70-1.52(m，3H)，1.38-1.25(m，3H)。手性HPLC：CHIRALPAK IC-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(正己烷/二氯甲烷＝1/1)(0.1％二乙胺)/乙醇＝1/1；流速＝1.0mL/min；保留时间：1.4min(较快的峰)。
实例67b：LC-MS：(ESI，m/z)：608.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO，ppm)δ8.05-7.75(m，2H)，7.73-7.53(m，1H)，7.51-7.30(m，1H)，7.27-7.10(m，1H)，7.00-6.6.63(m，1H)，6.33(s，2H)，6.22-6.15(d，J＝21，1H)，5.74(dd，J＝2.4，10.5Hz，1H)，4.80(s，1H)，4.42-3.95(m，5H)，3.87-3.37(m，2H)，3.29-3.02(m，1H)，2.98-2.83(m，1H)，2.68-2.54(m，1H)，2.32(s，3H)，2.19-2.09(m，1H)，2.01-1.87(m，1H)，1.80-1.53(m，3H)，1.33-1.17(m，3H)。手性HPLC：CHIRALPAK IC-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(正己烷/二氯甲烷＝1/1)(0.1％二乙胺)/乙醇＝1/1；流速＝1.0mL/min；保留时间：2.4min(较慢的峰)。
实例68a和68b：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(实例68a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(实例68b)(2种阻转异构体)
合成路线
在25℃下，将6-[6-氯-8-氟-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(参见实例17的第11步)(450.0mg，0.79mmol)、2-氟丙烯酸(64.21mg，0.71mmol)、HATU(451.85mg，1.19mmol)和N,N-二异丙基乙胺(408.8mg，3.17mmol)的二氯甲烷溶液(4mL)搅拌1小时。完成后，用二氯甲烷稀释反应并用水进行洗涤。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：乙腈，B％(在30min内由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到150mg 1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基]-2-氟-丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。直接利用制备型HPLC纯化粗产物(色谱柱，XBridge Prep C18 OBD，19×15mm，5μm，C-0013；流动相，A：10mmol HCOOH水溶液，B：ACN和B％(在7min内由51％增加至73％)；检测器，UV 254nm，得到粗产物(130mg)，其为白色固体。利用制备型手性HPLC分离非对映异构体混合物(色谱柱，CHIRALPAK IC-3，0.45×5cm，3μm；流动相，(己烷:二氯甲烷＝3:1)(含0.1％ DEA):EtOH＝50:50；检测器，254nm；流速，1.0mL/min；柱温：25℃)，得到32mg(6.3％)1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(在1.01min处)和48mg(9.5％)1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(在1.41min处)，它们均为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：640.2[M+H]+
实例68a：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.81(s，1H)，6.85(s，2H)，6.49(s，1H)，5.37-5.20(m，2H)，4.76(s，1H)，4.39(dd，J＝10.8，6.0Hz，1H)，4.18-4.11(m，3H)，4.11-3.93(m，1H)，3.91-3.69(m，2H)，3.20-3.03(m，1H)，2.96-2.92(m，1H)，2.60-2.57(m，1H)，2.37-2.35(m，6H)，2.19-2.14(m，1H)，1.96-1.92(m，1H)，1.70-1.62(m，3H)，1.28(d，J＝6.8Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：640.2[M+H]+手性HPLC：CHIRALPAK IC-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％DEA):EtOH＝50:50；流速＝1mL/min；保留时间：1.00min(较快的峰)。
实例68b：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.79(s，1H)，6.84(s，2H)，6.49(s，1H)，5.37-5.19(m，2H)，4.73(s，1H)，4.37(dd，J＝10.8，6.0Hz，1H)，4.18-4.01(m，3H)，4.01-3.79(m，1H)，3.79-3.66(m，2H)，3.31-3.03(m，1H)，2.96-2.92(m，1H)，2.59-2.56(m，1H)，2.37-2.35(m，6H)，2.18-2.14(m，1H)，1.97-1.93(m，1H)，1.70-1.62(m，3H)，1.31(d，J＝6.8Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：640.2[M+H]+手性HPLC：CHIRALPAK IC-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％DEA):EtOH＝50:50；流速＝1mL/min；保留时间：1.41min(较慢的峰)。
实例69：1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲醇(300mg，2.2mmol)的四氢呋喃溶液(20mL)中加入氢化钠(206mg，1.9mmol)。在室温下，将所得溶液搅拌30min。然后加入(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(参见实例17a/17b的第9步)(1.6g，1.9mmol)，并在室温下再搅拌1小时。用水使反应淬灭。用乙酸乙酯(3×100mL)对所得溶液进行萃取，并将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(30％)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(900mg，0.8mmol，收率44.4％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：926.4[M+H]+
第2步：1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
在50℃下，将(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(900mg，0.9mmol)的2,2,2-三氟乙酸溶液(10mL)搅拌5小时。浓缩反应产物，得到6-[6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(500mg，0.7mmol，收率79％)，其为黄色固体。然后在-78℃下向6-[6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(500mg，0.7mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.2g，2.7mmol)的二氯甲烷溶液(30mL)中加入丙烯酰氯(70mg，0.7mmol)。在-78℃下，将所得溶液搅拌1小时，用水淬灭，并用二氯甲烷(3×100mL)进行萃取。将有机层混合，然后浓缩，并且利用制备型HPLC纯化残余物(色谱柱，CHIRALPAK IC-3，0.46×5cm，3μm；流动相，(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％ DEA):EtOH＝50:50；检测器，254nm；流速，1.0ml/min；柱温：25℃)，得到1-[(3S)-4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(53mg，0.1mmol，收率9.5％)(在1.058min处)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：640.2[M+H]+
实例69：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.80(s，1H)，6.85(s，3H)，6.50(s，1H)，6.25-6.12(m，1H)，5.74(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，5.19(d，J＝56.6Hz，1H)，4.71(s，1H)，4.51-4.19(m，3H)，4.19-3.91(m，2H)，3.61(d，J＝12.3Hz，2H)，3.45(m，J＝25.6，11.5，5.3Hz，1H)，3.25-3.02(m，1H)，2.93(dd，J＝10.1，5.3Hz，1H)，2.42-2.34(m，7H)，2.24-2.05(m，1H)，1.92(m，J＝33.7，14.9，10.0，6.0Hz，1H)，1.30(d，J＝6.6Hz，3H)。
实例70：(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向N-甲基-l-脯氨醇(45.0mg，0.39mmol)的四氢呋喃溶液(5mL)中，加入氢化钠(22.0mg，0.54mmol，60％，分散于矿物油中)，并且将该混合物在25℃下搅拌5分钟。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.26mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。用水使反应溶液淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。然后将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(7/3)进行洗脱，得到(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(210mg，0.24mmol，收率93.4％)。LC-MS：(ESI，m/z)：862.2[M+H]+
第2步：(S)-6-(6-氯-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200.0mg，0.2300mmol)的三氟乙酸溶液(5mL)搅拌2小时。完成后，在真空下对溶剂进行浓缩。利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用乙腈/水(7/3)进行洗脱，得到(S)-6-(6-氯-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(90mg，0.17mmol，收率74.3％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：522.2[M+H]+
第3步：(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将(S)-6-(6-氯-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100.0mg，0.19mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.0mL，5.74mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(17.0mg，0.19mmol)，并且在-78℃下搅拌30分钟。完成后，在真空下对溶剂进行浓缩。利用制备型HPLC纯化粗产物，得到(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(19.3mg，0.034mmol，收率17.5％)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：576.2[M+H]+
实例70：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.04(s，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，1H)，7.46(s，1H)，6.90(s，2H)，6.82(dd，J＝10.0，16.4Hz，1H)，6.60(d，J＝8.8Hz，1H)，6.17(dd，J＝2.4，16.8Hz，1H)，5.74(dd，J＝2.0，10.4Hz，1H)，4.36-4.33(m，1H)，4.19-4.15(m，1H)，3.85-3.77(m，8H)，2.96-2.95(m，1H)，2.68-2.65(s，1H)，2.35(s，3H)，2.19-2.13(m，1H)，1.97-1.88(m，1H)，1.68-1.60(m，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：576.2[M+H]+。
实例71：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇
在室温下，将(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-乙氧基-吡咯烷-2-羧酸(600.0mg，2.31mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入氢化铝锂(352.0mg，9.26mmol)，并在25℃下搅拌6小时。用水使反应淬灭，并用水和乙酸乙酯进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩，得到((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇(150mg，粗产物)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：160.1[M+H]+
第2步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇(84.0mg，0.53mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)中，加入氢化钠(21.6mg，0.54mmol，60％，分散于矿物油中)，并且将该混合物在25℃下搅拌30分钟。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.26mmol)，并且在25℃下搅拌6小时。用水使反应淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(4/1)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(160mg，0.18mmol，收率67.7％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：906.4[M+H]+
第3步：6-(6-氯-2-(((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150.0mg，0.17mmol)的三氟乙酸溶液(20mL)搅拌6小时。浓缩反应产物，并且利用C18快速柱层析法纯化残余物，用乙腈/水(7/3)进行洗脱，得到6-(6-氯-2-(((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(80mg，0.14mmol，收率85.4％)，其为灰白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：566.2[M+H]+
第4步：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-2-(((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(70.1mg，0.12mmol)和N,N-二异丙基乙胺(48.1mg，0.37mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5分钟。然后将丙烯酰氯(12.0mg，0.13mmol)逐滴加入反应体系中，并且在-78℃下搅拌30分钟。完成后，用水使反应淬灭，并且进行浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物，得到1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-乙氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(32.9mg，0.053mmol，收率42.9％)，其为白色固体。
实例71：1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.09(s，1H)，7.80(d，J＝9.0Hz，1H)，7.54(s，1H)，6.89-6.77(m，1H)，6.71-6.66(m，1H)，6.31-6.25(m，1H)，5.86-5.75(m，1H)，4.52-4.48(m，2H)，4.10(s，1H)，3.98(s，4H)，3.93(s，4H)，3.56-3.36(m，3H)，3.17(s，1H)，2.60(s，3H)，2.56-2.47(m，1H)，2.12(s，1H)，2.00(d，J＝8.2Hz，1H)，1.18(t，J＝7.0Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：620.3[M+H]+。
实例72：(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4-甲基-4-氮杂螺[2.4]-庚-5-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(S)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧)甲基)-4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚烷
在氮气气氛下，向(S)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧)甲基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(参见实例64a和64b的第2步)(3.0g，12.32mmol)的四氢呋喃溶液(40mL)中，加入25℃下的CH3Ti(Oi-Pr)3(13.96g，49.3mmol)。将所得溶液搅拌0.5小时。加入0℃的溴化乙基镁(13.14g，98.6mmol)，并且在25℃下搅拌6小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(7/1)进行萃取，得到(S)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧)甲基)-4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚烷(1.5g，5.87mmol，收率47.6％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：256.2[M+H]+
第2步：(S)-(4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲醇
在50℃下，将(S)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧)甲基)-4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚烷(1.4g，5.48mmol)的HCl/1,4-二噁烷溶液(20mL)搅拌6小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(5/1)进行洗脱，得到(S)-(4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲醇(300mg，2.12mmol，收率38.8％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：142.1[M+H]+
第3步：(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将(S)-(4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲醇(148.0mg，1.05mmol)和氢化钠(60％)(50.0mg，2.08mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌0.5小时。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.26mmol)，并且在25℃下搅拌6小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用石油醚/乙酸乙酯(8/1)进行洗脱，得到(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(96mg，0.11mmol，收率41.5％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：888.5[M+H]+
第4步：(S)-6-(6-氯-2-((4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(80.0mg，0.09mmol)的2,2,2-三氟乙酸溶液(10mL)搅拌5小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，用二氯甲烷/甲醇(7/1)进行洗脱，获得(S)-6-(6-氯-2-((4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(40mg，0.073mmol，收率81.1％)。LC-MS：(ESI，m/z)：548.2[M+H]+
第5步：(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将(S)-6-(6-氯-2-((4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(30.0mg，0.05mmol)和N,N-二异丙基乙胺(22.0mg，0.17mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(5.0mg，0.06mmol)，并且在-78℃下搅拌0.5小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物，得到(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4-甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(10.8mg，0.018mmol，收率32.8％)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：602.3[M+H]+。制备型HPLC条件：色谱柱：XBridge Shield RP18 OBD色谱柱；流动相，A：水，B：乙腈，B％(在7min内，由40％增加至62％)；检测器，UV 220nm。
实例72：1H NMR(400MHz，CDCl3，ppm)δ7.89(s，1H)，7.82(d，J＝8.7Hz，1H)，7.68(s，1H)，6.72-6.50(m，2H)，6.48-6.23(m，1H)，5.89-5.68(m，1H)，5.03-4.82(m，2H)，4.56(s，1H)，4.34(s，1H)，4.02-3.73(m，8H)，3.17(s，1H)，2.24(s，3H)，2.20-2.11(m，1H)，2.01-1.89(m，1H),1.89-1.72(m，2H)，0.91(s，1H)，0.67(s，1H)，0.52(s，1H)，0.31(s，1H)。
实例73：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4,4-二氟-2-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯
在氮气气氛下，将(2S)-4,4-二氟吡咯烷-1,2-二羧酸1-叔丁基-2-甲基酯(3.0g，11.31mmol)和二异丙基氨基锂(6.8mL，13.57mmol，2M四氢呋喃溶液)的四氢呋喃溶液(25mL)在-78℃下搅拌0.5小时。将碘甲烷(2.09g，14.7mmol)逐滴加入反应体系中，并且在-78℃下搅拌5小时。完成后，用水稀释溶液，并且用乙酸乙酯进行萃取。收集有机层，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。获得所需的粗产物4,4-二氟-2-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲基酯(2.6g，9.3097mmol，收率82.3％)。LC-MS：(ESI，m/z)：280.1[M+H]+
第2步：(4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲醇
在25℃下，将4,4-二氟-2-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲基酯(2.5g，8.95mmol)的四氢呋喃溶液(25mL)搅拌0.5小时。然后将氢化铝锂(1.36g，35.81mmol)加入反应体系中，并且在25℃下搅拌5小时。完成后，用水稀释溶液，并且用乙酸乙酯进行萃取。收集有机层，用无水硫酸钠使其干燥，并且进行浓缩，获得粗产物(4,4-二氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基)甲醇(1.3g，7.87mmol，收率87.9％)。LC-MS：(ESI，m/z)：166.1[M+H]+
第3步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将(4,4-二氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基)甲醇(130.0mg，0.79mmol)的四氢呋喃溶液(20mL)搅拌0.5小时。加入氢化钠(19.0mg，0.79mmol)，并且在25℃下搅拌0.5小时，然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(400.0mg，0.52mmol)，并且在25℃下搅拌5小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(9:1)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(286mg，0.31mmol，收率60.1％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：912.4[M+H]+
第4步：6-(6-氯-2-((4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(276.0mg，0.30mmol)的2,2,2-三氟乙酸溶液(25mL)搅拌8小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(97:3)进行洗脱，得到6-(6-氯-2-((4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(120mg，0.21mmol，收率69.4％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：572.2[M+H]+
第5步：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-2-((4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(110.0mg，0.19mmol)和N,N-二异丙基乙胺(75.0mg，0.58mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5分钟。然后将丙烯酰氯(18.0mg，0.20mmol)逐滴加入反应体系中，并且在-78℃下搅拌30分钟。完成后，用水使溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物，得到1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((4,4-二氟-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(54.5mg，0.09mmol，收率45.3％)，其为白色固体。
实例73：LC-MS：(ESI，m/z)：626.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，甲醇-d4)δ8.09(s，1H)，7.80(d，J＝9Hz，1H)，7.55(s，1H)，6.91-6.75(m，1H)，6.70(d，J＝9Hz，1H)，6.34-6.18(m，1H)，5.86-5.74(m，1H)，4.49-4.31(m，2H)，4.06-3.84(m，8H)，3.43-3.32(m，1H)，3.22-3.01(m，1H)，2.69-2.45(m，1H)，2.39(s，3H)，2.30-2.12(m，1H)，1.26(s，3H)。
实例74：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[1-甲基-1-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]丙-2-醇
将2-[(2S)-吡咯烷-2-基]丙-2-醇(1.0g，7.74mmol)加入0.2mL 0℃的甲酸中，然后加入0.15mL 40％的甲醛水溶液。然后将混合物在120℃下回流24小时。完成后，用5N盐酸使混合物酸化，然后将其蒸发。将残余物溶于最小量的水中，用氢氧化钠使其饱和，并且用氯仿进行萃取。用碳酸钾使混合提取物干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(96/4)进行洗脱，得到510mg(46％)2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]丙-2-醇，其为黄棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：144.3[M+H]+
第2步：(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙-2-基)氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向2-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]丙-2-醇(112.01mg，0.78mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(22mL)溶液中加入0℃的氢化钠(125.13mg，3.13mmol，60％，分散于矿物油中)，并且在25℃下搅拌1小时。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(300.0mg，0.39mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。完成后，用水使所得溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后将有机层混合，用水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(4％)进行洗脱，得到105mg(30.2％)(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙-2-基)氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：890.4[M+H]+
第3步：(S)-6-(6-氯-2-((2-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙-2-基)氧)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((2-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙-2-基)氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(96.0mg，0.11mmol)的三氟乙酸(21mL，0.11mmol)溶液搅拌5小时。完成后，对反应产物进行浓缩。将该粗产物用于下一步反应。LC-MS：(ESI，m/z)：550.4[M+H]+
第4步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[1-甲基-1-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向(S)-6-(6-氯-2-((2-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙-2-基)氧)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(59.0mg，0.11mmol)和N,N-二异丙基乙胺(55.35mg，0.43mmol)的二氯甲烷溶液(19mL)中，加入-78℃的丙烯酰氯(6.8mg，0.08mmol)，并且在-78℃下搅拌1小时。完成后，用水使所得溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：乙腈，B％(在30min内由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到粗产物。直接利用制备型HPLC纯化粗产物(色谱柱，XBridge Prep C18 OBD，19×15mm，5μm，C-0013；流动相，A：10mmol碳酸氢铵水溶液，B：ACN和B％(在7min内，由51％增加至73％)；检测器，UV 254nm，得到8mg(12.3％)1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[1-甲基-1-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：604.4[M+H]+。
实例74：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.00(s，1H)，7.77(d，J＝9.2Hz，1H)，7.43(s，1H)，6.88-6.78(m，3H)，6.59(d，J＝8.8Hz，1H)，6.16(dd，J＝16.4，2.0Hz，1H)，5.73(dd，J＝10.8，2.4Hz，1H)，3.83-3.79(m，8H)，3.12-3.09(m，1H)，2.98-2.96(m，1H)，2.37(d，J＝9.6Hz，3H)，2.29-2.24(m，1H)，1.90-1.84(m，1H)，1.71-1.58(m，3H)，1.57-1.52(m，6H)。LC-MS：(ESI，m/z)：604.4[M+H]+。
实例75a和75b：(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例75a)和(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例75b)
合成路线
第1步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[(1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，将(1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲醇(39.5mg，0.3mmol)和氢化钠(纯度60％)(23.4mg，0.5mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(2mL)搅拌30分钟。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(150.0mg，0.2mmol)，并且在室温下搅拌2小时。完成后，用饱和氯化铵使反应淬灭。用乙酸乙酯对所得溶液进行萃取，并且将有机层混合。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[(1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120.0mg，0.1mmol，收率72％)，其为黄色液体。LC-MS：(ESI，m/z)：848.3[M+H]+
第2步：(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例75a)和(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例75b)
在50℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[(1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100.0mg，0.1mmol)的三氟乙酸溶液(2.6mL，35.3mmol)搅拌12小时。完成后，对反应产物进行浓缩。将所得混合物重新溶于二氯甲烷(1mL)中，随后加入N,N-二异丙基乙胺(76.1mg，0.5mmol)和丙烯酰氯(17.8mg，0.2mmol)。在-78℃下，将该反应混合物搅拌0.5小时。用水使所得溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。收集有机层，将其浓缩，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上进行纯化，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到粗产物。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，所用条件如下：XBridge Prep OBD C18色谱柱，30×150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；得到非对映异构体，其为无色油状物。利用制备型手性HPLC分离非对映异构体(色谱柱：CHIRALPAK IE-3，4.6×50mm，3μm；流动相A：(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％ DEA):IPA＝80:20)，得到(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例75a)(6.1mg，0.01mmol，收率5.5％)和(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-甲基氮杂环丁烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例75b)(6.6mg，0.01mmol，收率6％)，它们均为白色固体。
实例75a：LC-MS：(ESI，m/z)：562.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.05(s，1H)，7.78(d，J＝8.7Hz，1H)，7.47(s，1H)，6.91(s，2H)，6.82(dd，J＝16.5，10.2Hz，1H)，6.60(d，J＝8.7Hz，1H)，6.17(dd，J＝16.8，2.4Hz，1H)，5.74(dd，J＝10.5，2.4Hz，1H)，4.33(d，J＝5.4Hz，2H)，3.85-3.77(m，8H)，2.82-2.72(m，1H)，2.29(s，3H)，2.02-1.93(m，2H)，1.26-1.23(m，2H)。手性HPLC：色谱柱：CHIRALPAK IE-3，4.6×50mm，3μm；在254nm下检测；(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％ DEA):IPA＝80:20；流速：1mL/min；保留时间：3.723min(较快的峰)。
实例75b：LC-MS：(ESI，m/z)：562.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.04(s，1H)，7.78(d，J＝8.7Hz，1H)，7.46(s，1H)，6.91-6.78(m，3H)，6.60(d，J＝8.7Hz，1H)，6.17(dd，J＝16.8，2.4Hz，1H)，5.74(dd，J＝10.5，2.4Hz，1H)，4.30(d，J＝5.4Hz，2H)，3.85-3.77(m，8H)，2.78-2.70(m，1H)，2.25(s，3H)，2.01-1.87(m，2H)，1.26-1.23(m，2H)。手性HPLC：色谱柱：CHIRALPAK IE-3，4.6×50mm，3μm；在254nm下检测；(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％ DEA):IPA＝80:20；流速：1mL/min；保留时间：4.650min(较慢的峰)。
实例76：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
加入2-[3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基]乙醇(70.0mg，0.5300mmol)和氢化钠(20.0mg，0.5mmol，纯度60％)的四氢呋喃溶液(5mL)，并且在25℃下搅拌5分钟。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.26mmol)，并且在25℃下搅拌30分钟。完成后，在真空下对该溶液进行浓缩，得到粗产物。将该粗产物直接用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：880.3[M+H]+
第2步：6-(6-氯-2-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(241.0mg，0.27mmol)的2,2,2-三氟乙酸溶液(10mL)搅拌2小时。完成后，对反应产物进行浓缩。利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/水(25:75)进行洗脱，得到6-(6-氯-2-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(140mg，0.25mmol，收率94.7％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：540.2[M+H]+
第3步：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-2-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(140.0mg，0.26mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.09mL，0.52mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(24.0mg，0.27mmol)，并在-78℃下搅拌1小时。完成后，对反应产物进行浓缩。利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用乙腈/水(25:75)进行洗脱，得到粗产物。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，所用条件如下：Xselect CSH OBD色谱柱，30×150mm，5μm；流动相A：水(含0.1％ FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min，得到1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐(16.8mg，0.026mmol，收率10.1％)，其为白色固体。
实例76：LC-MS：(ESI，m/z)：594.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO，ppm)δ8.04(s，1H)，7.78(d，J＝9.0Hz，1H)，7.46(s，1H)，7.00-6.67(m，3H)，6.60(d，J＝8.7Hz，1H)，6.17(dd，J＝2.1，16.5Hz，1H)，5.74(dd，J＝2.1，10.5Hz，1H)，4.58(d，J＝6.3Hz，1H)，4.42(d，J＝6.3Hz，1H)，4.31-4.15(m，2H)，3.93-3.70(m，8H)，3.32-3.29(m，2H)，3.02-2.93(m，2H)，2.83-2.66(m，3H)。
实例77：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲醇
将氢化铝锂(146.63mg，3.86mmol)加入0℃下的(2R,3S)-1-叔丁氧基羰基-3-氟-吡咯烷-2-羧酸(450.0mg，1.93mmol)的四氢呋喃溶液(18mL)。然后将反应混合物加热至60℃并且加热1.5小时。冷却反应混合物，用水使其淬灭，然后进行过滤和浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(96/4)进行洗脱，得到80mg(31％)[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲醇，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：134.3[M+H]+。
第2步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲醇(138.85mg，1.04mmol)的四氢呋喃溶液(12mL)中，加入0℃的氢化钠(166.84mg，4.17mmol)。将反应混合物加热至25℃并且搅拌1小时。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(400.0mg，0.52mmol)，并在25℃下搅拌1小时。完成后，用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。将有机层混合，用水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(1/1)进行洗脱，得到69mg(15％)4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：880.5[M+H]+。
第3步：6-[6-氯-2-[[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(61.0mg，0.07mmol)的三氟乙酸溶液(16mL)搅拌3小时。完成后，对反应产物进行浓缩。用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至10。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeCN，B％(在30min内，由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到37mg 6-[6-氯-2-[[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为淡黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：540.3[M+H]+
第4步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向6-[6-氯-2-[[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(37.0mg，0.07mmol)和N,N-二异丙基乙胺(35.36mg，0.27mmol)的二氯甲烷溶液(4.6mL)中，加入-78℃的丙烯酰氯(3.72mg，0.04mmol)，并且在-78℃下搅拌1小时。完成后，用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。将有机层混合，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。直接利用制备型HPLC纯化粗产物(色谱柱，XBridge Prep C18 OBD，19×15mm，5μm，C-0013；流动相，A：TFA水溶液，B：ACN和B％(在7min内，由51％增加至73％)；检测器，UV 254nm，得到7.5mg(18.4％)1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2R,3S)-3-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：594.2[M+H]+
实例77：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.05(s，1H)，7.78(d，J＝8.0Hz，1H)，7.46(s，1H)，6.91(s，2H)，6.98-6.78(m，1H)，6.59(d，J＝8.8，1H)，6.17(dd，J＝16.8，2.0Hz，1H)，5.74(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，5.09(d，J＝52.0，1H)，4.39-4.35(m，1H)，4.15-4.13(m，1H)，3.90-3.86(m，6H)，3.76(s，2H)，2.94(d，J＝6.8，1H)，2.84-2.75(m，1H)，2.49-2.43(m，4H)，1.96-1.90(m，2H)。LC-MS：(ESI，m/z)：594.2[M+H]+。
实例78a：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲醇
在25℃下，将(1S,2S,5R)-3-(叔丁氧基羰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸(200.0mg，0.88mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌0.5小时。然后加入氢化铝锂(67.0mg，1.77mmol)，并在25℃下搅拌6小时。完成后，用水使反应淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩，得到((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲醇(90mg，0.71mmol，收率80.4％)，将其直接用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：128.1[M+H]+
第2步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，将((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲醇(100.0mg，0.7900mmol)和氢化钠(32.0mg，1.33mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌0.5小时。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.26mmol)，并且将反应混合物在25℃下搅拌3小时。完成后，用水使反应淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(97:3)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(56mg，0.06mmol，收率24.6％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：874.4[M+H]+。
第3步：6-(6-氯-2-(((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(83.0mg，0.09mmol)的2,2,2-三氟乙酸溶液(10mL)搅拌5小时。浓缩反应产物，得到6-(6-氯-2-(((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(25mg，0.05mmol，收率89％)。LC-MS：(ESI，m/z)：534.2[M+H]+
第4步：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-2-(((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(50.0mg，0.09mmol)和N,N-二异丙基乙胺(37.0mg，0.29mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(9.0mg，0.10mmol)，并在-78℃下将该混合物搅拌0.5小时。完成后，用水(2mL)使溶液淬灭，并且用二氯甲烷(3×5mL)进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用制备型HPLC进一步分离粗产物(色谱柱，Xselect CSH OBD，30×150mm，5μm，n；流动相A：水(含0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min)；得到1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1S,2S,5R)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(15.2mg，0.03mmol，收率46％)，其为白色固体。
实例78a：LC-MS：(ESI，m/z)：588.3[M+H]+，1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.09(s，1H)，7.80(d，J＝9Hz，1H)，7.54(s，1H)，6.83(dd，J＝16.8，10.8Hz，1H)，6.71(d，J＝8.7，1H)，6.29(dd，J＝16.8，2.1Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.5，1.8Hz，1H)，4.62-4.51(m，1H)，4.48-4.33(m，1H)，4.05-3.86(m，8H)，3.13(d，J＝9Hz，1H)，3.01-2.92(m，1H)，2.58(dd，J＝9，3.9Hz，1H)，2.43(s，3H)，1.76-1.61(m，1H)，1.58-1.39(m，1H)，0.82-0.63(m，1H)，0.45-0.26(m，1H)。
实例78b：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲醇
在25℃下，将(1R,2S,5S)-3-(叔丁氧基羰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-羧酸(200.0mg，0.88mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入氢化铝锂(67.0mg，1.77mmol)，并在25℃下搅拌6小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩，得到((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲醇(86mg，0.68mmol，收率76.8％)，将其直接用于下一步而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：128.1[M+H]+
第2步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，将((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲醇(100.0mg，0.79mmol)和氢化钠(32.0mg，1.33mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌0.5小时。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.26mmol)，并且将反应混合物在25℃下搅拌3小时。浓缩反应混合物，并且利用硅胶色谱法纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(97:3)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(93mg，0.11mmol，收率40.8％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：874.4[M+H]+
第3步：6-(6-氯-2-(((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(83.0mg，0.09mmol)的2,2,2-三氟乙酸溶液(10mL)搅拌5小时。浓缩反应产物，得到6-(6-氯-2-(((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(40mg，0.09mmol，收率70.2％)。LC-MS：(ESI，m/z)：534.2[M+H]+
第4步：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-2-(((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(50.0mg，0.09mmol)和N,N-二异丙基乙胺(37.0mg，0.29mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌0.5小时。然后加入丙烯酰氯(10mg，0.10mmol)，并且在-78℃下搅拌0.5小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且进行浓缩。利用制备型HPLC进一步分离粗产物(色谱柱：Xselect CSH OBD，30×150mm，5μm，n；流动相A：水(含0.1％ FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min)；得到1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((1R,2S,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(15.4mg，0.026mmol，收率37.8％)，其为白色固体。
实例78b：LC-MS：(ESI，m/z)：588.2[M+H]+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.11(s，1H)，7.82(d，J＝8.9Hz，1H)，7.57(s，1H)，6.83(dd，J＝10.8，10.4Hz，1H)，6.72(d，J＝8.8Hz，1H)，6.29(dd，J＝16.8，1.6Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.6，2Hz，1H)，4.72-4.56(m，1H)，4.55-4.37(m，1H)，4.14-3.68(m，8H)，3.29-3.13(m，2H)，2.79(d，J＝9.6Hz，1H)，2.54(s，3H)，1.68-1.52(m，2H)，0.83-0.69(m，1H)，0.63-0.47(m，1H)。
实例79a和79b：(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮和(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将1-二甲基氨基-2-丙醇(40.0mg，0.39mmol)和氢化钠(10.0mg，0.4200mmol，纯度60％)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌15分钟。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.26mmol)，并且在25℃下搅拌2小时。完成后，对反应产物进行浓缩。将粗产物直接用于下一步而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：850.2[M+H]+
第2步：6-(6-氯-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(243.0mg，0.29mmol)的2,2,2-三氟乙酸溶液(10mL)搅拌2小时。完成后，在真空下浓缩反应产物，并且将所得产物直接用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：510.2[M+H]+
第3步：(R)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮和(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(60.0mg，0.12mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.06mL，0.35mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(11.0mg，0.12mmol)，并且在-78℃下搅拌30分钟。完成后，浓缩反应混合物以得到粗产物。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，所用条件如下：色谱柱：Xselect CSH OBD，30×150mm，5μm，n；流动相A：水(含0.1％ FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min。利用手性制备型HPLC对所得产物进行纯化(色谱柱：CHIRALPAK IC，2×25cm，5μm；流动相A：Hex:DCM＝3:1(10mM NH3-MeOH)，HPLC级，流动相B：MeOH，HPLC级；流速：18mL/min)，得到1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[(1S)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(8.1mg，0.014mmol，收率12.2％)和1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(9.5mg，0.016mmol，收率14.3％)，它们均为白色固体。
实例79a：LC-MS：(ESI，m/z)：564.2[M+H]+，1H NMR(400MHz，DMSO，ppm)δ8.03(s，1H)，7.79(d，J＝8.0，1H)，7.43(s，1H)，6.89(s，2H)，6.89-6.72(m，1H)，6.58(d，J＝12.0，1H)，6.17(dd，J＝2.4，16.8Hz，1H)，5.74(dd，J＝2.4，10.4Hz，1H)，5.41-5.23(m，1H)，3.95-3.62(m，8H)，2.60-2.51(m，1H)，2.40-2.31(m，1H)，2.19(s，6H)，1.35-1.20(m，3H)。手性HPLC：CHIRALPAK IC-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(正己烷/二氯甲烷＝3/1)(含0.1％二乙胺)/甲醇＝7/3；流速＝1.0mL/min；保留时间：2.2min(较快的峰)。
实例79b：LC-MS：(ESI，m/z)：564.2[M+H]+，1H NMR(400MHz，DMSO，ppm)δ8.03(s，1H)，7.78(d，J＝8.8，1H)，7.43(s，1H)，6.89(s，2H)，6.85-6.72(m，1H)，6.60(d，J＝8.8，1H)，6.17(dd，J＝2.4，16.8Hz，1H)，5.74(dd，J＝2.4，10.4Hz，1H)，5.41-5.23(m，1H)，3.93-3.65(m，8H)，2.64-2.54(m，1H)，2.40-2.28(m，1H)，2.19(s，6H)，1.40-1.29(m，3H)。手性HPLC：CHIRALPAK IC-3(0.46×5cm；3μm)；在254nm下检测；(正己烷/二氯甲烷＝3/1)(含0.1％二乙胺)/甲醇＝7/3；流速＝1.0mL/min；保留时间：3.0min(较慢的峰)。
实例80：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((5-(甲氧基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(1-甲基吡咯烷-2,5-二基)二甲醇
在25℃下，将2,5-双(羟基甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1500.0mg，6.49mmol)和氢化铝锂(369.0mg，9.72mmol)的四氢呋喃溶液(60mL)搅拌8小时。完成后，对反应产物进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(1:4)进行洗脱，得到(1-甲基吡咯烷-2,5-二基)二甲醇(500mg，3.44mmol，收率53.1％)，其为无色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：146.2[M+H]+
第2步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((5-(羟基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将(1-甲基吡咯烷-2,5-二基)二甲醇(76.0mg，0.52mmol)和氢化钠(40.0mg，1mmol)的四氢呋喃溶液(20mL)搅拌10分钟。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200.0mg，0.26mmol)，并在25℃下搅拌2小时。完成后，用水使反应淬灭，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(5:95)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((5-(羟基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg，0.13mmol，收率51.4％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：892.4[M+H]+。
第3步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((5-(甲氧基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在40℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((5-(羟基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100.0mg，0.11mmol)和氢化钠(9.0mg，0.23mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入碘甲烷(32.0mg，0.23mmol)，并且在40℃下搅拌2小时。完成后，浓缩反应混合物，并且利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化残余物，用乙腈/水(97:3)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((5-(甲氧基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(50mg，0.055mmol，收率49.2％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：906.4[M+H]+。
第4步：6-(6-氯-2-((5-(甲氧基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((5-(甲氧基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10.0mg，0.01mmol)的2,2,2-三氟乙酸(0.8mL)溶液搅拌2小时。完成后，浓缩反应混合物，并且将粗产物直接用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：566.3[M+H]+
第5步：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((5-(甲氧基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-2-((5-(甲氧基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(100.0mg，0.17mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.06mL，0.33mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(15.0mg，0.17mmol)，并且在-78℃下搅拌30分钟。完成后，用水使反应淬灭，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化所得残余物，用乙腈/水(95:5)进行洗脱，得到粗产物。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，所用条件如下：XBridge Prep OBD C18色谱柱，30×150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min)，得到1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((5-(甲氧基甲基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮甲酸盐(34.4mg，0.051mmol，收率30.2％)，其为白色固体。
实例80：LC-MS：(ESI，m/z)：620.4[M+H]+，1H NMR(300MHz，MeOD，ppm)δ8.09(s，1H)，7.80(d，J＝8.7Hz，1H)，7.54(s，1H)，6.82(dd，J＝10.5，16.8Hz，1H)，6.70(d，J＝8.4Hz，1H)，6.27(dd，J＝1.8，16.8Hz，1H)，5.80(dd，J＝1.8，10.5Hz，1H)，4.59-4.45(m，2H)，4.10-3.89(m，10H)，3.54-3.41(m，2H)，3.39(s，3H)，2.78-2.53(m，3H)，2.20-1.87(m，2H)，1.83-1.59(m，2H)。S
实例81a和81b：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例81a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例81b)(2种阻转异构体)
合成路线
第1步：3-溴-2,4-二氟-6-碘苯胺
在20℃下，将3-溴-2,4-二氟苯胺(10.0g，48.08mmol)、硫酸银(14.98g，48.32mmol)和碘(13.5g，53.15mmol)的乙醇溶液(200mL)搅拌4小时。对反应混合物进行过滤，并且将滤液浓缩到硅胶柱上。利用快速柱层析法纯化所得混合物，用石油醚进行洗脱，得到3-溴-2,4-二氟-6-碘苯胺(15g，44.92mmol，收率93.4％)，其为棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：333.9[M+H]+
第2步：2-氨基-4-溴-3,5-二氟苯甲酸甲酯
在一氧化碳下，将3-溴-2,4-二氟-6-碘苯胺(15.0g，44.92mmol)和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(3.3g，4.51mmol)的甲醇溶液(500mL)在25℃下搅拌5分钟。然后加入三乙胺(21mL，314.47mmol)，并且在25℃下搅拌8小时。浓缩溶剂，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(3/97)进行洗脱，得到2-氨基-4-溴-3,5-二氟苯甲酸甲酯(8.6g，32.3mmol)，其为淡黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：266.0[M+H]+
第3步：7-溴-6,8-二氟喹唑啉-2,4-二醇
将2-氨基-4-溴-3,5-二氟苯甲酸甲酯(15.0g，56.4mmol)和NaOH(4.5g，112.8mmol)加入水(300mL)和甲醇(300mL)溶液中并且在25℃下搅拌3小时。待2-氨基-4-溴-3,5-二氟苯甲酸甲酯消失后，用乙醚对反应体系进行洗涤。然后用HOAc(30mL，56.4mmol)将溶液的pH调节至4。向所得溶液中加入KOCN(11.4g，140.53mmol)，并且在40℃下搅拌3小时。将该操作重复三次，直至在LCMS检测中检出大部分中间体。然后加入NaOH(90g，2256mmol)，并且在室温下搅拌2小时。完成后，用浓盐酸将反应体系的pH调节至4。在过滤后收集固体，并且用水洗涤，得到7-溴-6,8-二氟喹唑啉-2,4-二醇(5g，18.049mmol，收率32％)，其为红色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：276.9[M+H]+
第4步：7-溴-2,4-二氯-6,8-二氟喹唑啉
在120℃下，将7-溴-6,8-二氟-喹唑啉-2,4-二醇(5.0g，18.05mmol)的POCl3溶液(150mL)搅拌5分钟。然后加入N,N-二异丙基乙胺(46.7g，361.0mmol)，并且在120℃下搅拌3小时。完成后，在真空下浓缩溶剂，得到7-溴-2,4-二氯-6,8-二氟-喹唑啉(4g，黄色油状物，粗产物)，将其直接用于下一步而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：312.9[M+H]+
第5步：(S)-4-(7-溴-2-氯-6,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向7-溴-2,4-二氯-6,8-二氟-喹唑啉(4g，粗产物)的二氯甲烷(120mL)中加入N,N-二异丙基乙胺(10mL)，将所得溶液在20℃下搅拌5分钟，然后加入(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.96g，29.8mmol)并且将反应混合物在20℃下搅拌5小时。完成后，用盐水洗涤所得溶液。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(1/4)进行洗脱，得到(S)-4-(7-溴-2-氯-6,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.6g，9.6mmol，收率65％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：477.0[M+H]+
第6步：(S)-4-(7-溴-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(S)-4-(7-溴-2-氯-6,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g，2.1mmol)和氟化钾(2.5g，43.0mmol)的DMSO溶液(25mL)在120℃下搅拌2小时。对反应混合物进行过滤，用乙酸乙酯稀释滤液，用盐水洗涤，然后进行干燥和浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)进行洗脱，得到(S)-4-(7-溴-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(600mg，1.3mmol，收率62.1％)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：461.1[M+H]+
第7步：(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，在65℃下，将(S)-4-(7-溴-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500.0mg，1.08mmol)、(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)硼酸(850.0mg，2.17mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(90.0mg，0.11mmol)的四氢呋喃(30mL)和水(6mL)溶液中加入磷酸钾(460.0mg，2.17mmol)。在65℃下，将所得溶液搅拌3小时。浓缩反应混合物，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(9/1)进行洗脱，得到(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(650mg，0.89mmol，收率82.3％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：729.3[M+H]+。
第8步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基吡啶-2-基)-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500.0mg，0.69mmol)和对甲苯磺酸(12.0mg，0.07mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入NIS(309.0mg，1.37mmol)，并且在25℃下搅拌3小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后将有机层混合，用水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(30/1)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，0.23mmol，收率34.1％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：855.2[M+H]+。
第9步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500.0mg，0.59mmol)和CuI(450.0mg，2.36mmol)的N,N-二甲基乙酰胺溶液(20mL)搅拌5分钟。然后加入2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(1130.0mg，5.88mmol)，并且在氮气气氛下在90℃下搅拌3小时。浓缩反应混合物，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(20/1)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(430mg，0.54mmol，收率92.2％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：797.3[M+H]+。
第10步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇(168.0mg，1.26mmol)和NaH(101.6mg，2.54mmol，60％，分散于矿物油中)的四氢呋喃溶液(20mL)搅拌0.5小时。然后加入(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500.0mg，0.63mmol)，并且在25℃下搅拌2小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后将有机层混合，用水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(4/1)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(350mg，0.38mmol，收率61.3％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：910.4[M+H]+
第11步：6-(6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(350.0mg，0.38mmol)的三氟乙酸溶液(10mL)搅拌6小时。完成后，在真空下浓缩溶剂，得到6-(6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(200mg，粗产物)，将其直接用于下一步而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：570.2[M+H]+
第12步：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例81a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例81b)(2种阻转异构体)
在-78℃下，将6-(6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(400.0mg，0.70mmol)和DIEA(274.0mg，2.12mmol)的二氯甲烷溶液(40mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(64.0mg，0.71mmol)，并且在-78℃下搅拌0.5小时。完成后，用水使溶液淬灭，并且在真空下进行浓缩。依次用制备型HPLC和手性HPLC对残余物进行纯化，得到标题化合物。基于效价分配标题化合物的立体化学结构。
实例81a：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(67.7mg，0.11mmol，收率15.5％，白色固体)。1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.53(dd，J＝9.9，8.1Hz，1H)，6.89-6.72(m，1H)，6.60(s，1H)，6.31-6.25(m，1H)，5.81(dd，J＝18，10.5Hz，1H)，5.35-5.03(m，1H)，4.81(s，1H)，4.64-4.31(m，3H)，4.31-3.94(m，2H)，3.82-3.45(m，3H)，3.28-3.06(m，2H)，2.73-2.62(m，1H)，2.55(s，3H)，2.45(d，J＝1.5，3H)，2.32-2.20(m，1H)，2.17-1.98(m，1H)，1.40(d，J＝6.6Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：624.3[M+H]+。手性HPLC：色谱柱：CHIRALPAK IE-3，4.6×50mm，3μm；流动相：
(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％ DEA):EtOH＝80:20，流速：1.0mL/min；保留时间：1.836min(较快的峰)。
实例81b：1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6,8-二氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.53(dd，J＝9.9，8.1Hz，1H)，6.94-6.71(m，1H)，6.60(s，1H)，6.38-6.20(m，
1H)，5.81(dd，J＝18，10.5Hz，1H)，5.45-5.03(m，1H)，4.81(s，1H)，4.64-4.31(m，3H)，4.31-3.94(m，2H)，3.82-3.45(m，3H)，3.28-3.06(m，2H)，2.79-2.60(m，1H)，2.55(s，3H)，2.45(d，J＝1.5，3H)，2.39-2.20(m，1H)，2.17-1.78(m，1H)，1.40(d，J＝6.6Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：624.3[M+H]+。手性HPLC：色谱柱：CHIRALPAK IE-3，4.6×50mm，3μm；流动相：(Hex:DCM＝3:1)(含0.1％ DEA):EtOH＝80:20，流速：1.0mL/min；保留时间：2.322min(较快的峰)。
实例82a和82b：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(实例82a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(实例82b)
合成路线
在室温下，将6-[6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(在实例69的第2步中制得的中间体)(0.6g，1.02mmol)、2-氟丙烯酸(0.09g，1.02mmol)、HATU(0.58g，1.54mmol)和N,N-二异丙基乙胺(397mg，3.07mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌2小时。完成后，用水稀释反应混合物，并且用二氯甲烷进行萃取。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用制备型HPLC和手性HPLC对粗产物进行纯化，得到1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(55.2mg，0.084mmol，收率8.2％)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(42.8mg，0.065mmol，收率6.4％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：658.3[M+H]+。制备型HPLC条件：色谱柱：XBridge Shield RP18 OBD色谱柱，30×150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min。手性HPLC CHIRALPAK IC，3×25cm，5μm；流动相A：Hex:DCM＝3:1(10mM NH3-MeOH)，HPLC级，流动相B：EtOH，HPLC级；流速：2mL/min。
实例82a 1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.82(s，1H)，6.60(s，1H)，5.42-5.02(m，3H)，4.82(s，1H)，4.50(d，J＝5.0Hz，2H)，4.42-3.93(m，3H)，3.86-3.39(m，4H)，3.21-3.00(m，1H)，2.77-2.51(s，4H)，2.51-2.39(m，3H)，2.38-1.92(m，2H)，1.43(d，J＝6.7Hz，3H)。
实例82b 1H NMR(300MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.82(s，1H)，6.60(s，1H)，5.51-5.00(m，3H)，4.82(s，1H)，4.50(d，J＝5.0Hz，2H)，4.46-3.93(m，3H)，3.88-3.39(m，4H)，3.26-3.00(m，1H)，2.78-2.51(m，4H)，2.51-2.40(m，3H)，2.40-1.90(m，2H)，1.43(d，J＝6.7Hz，3H)。
实例83a、83b、83c和83d：
2-((R)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(实例83a)；
2-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(实例83b)；
2-((R)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(实例83c)；和
2-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(实例83d)
合成路线
第1步：4-(7-溴-2,6-二氯-8-氟喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在20℃下，将7-溴-2,6-二氯-8-氟喹唑啉-4(3H)-酮(3.9g，12.5mmol)和N,N-二异丙基乙胺(6.5g，50.3mmol)的二氯甲烷溶液(80mL)搅拌5分钟。加入甲基磺酸酐(8.8g，50.3mmol)，并且在20℃下将所得混合物搅拌20分钟。然后加入2-哌嗪-2-基乙腈(5.0g，40.0mmol)和N,N-二异丙基乙胺(9.7g，75.5mmol)，并且将该混合物在20℃下继续搅拌1小时。完全转化为所需的产物后，加入二碳酸二叔丁酯(32.7g，150mmol)，并且将该混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入分液漏斗中，并且用盐水进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(1/4)进行洗脱，得到4-(7-溴-2,6-二氯-8-氟-喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.9g，9.4mmol，收率75.5％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：518.0，520.0[M+H]+。
第2步：4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在120℃下，将4-(7-溴-2,6-二氯-8-氟-喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(9.7g，18.7mmol)和氟化钾(43.7g，752.6mmol)的DMA溶液(200mL)搅拌3小时。对反应混合物进行过滤，用乙酸乙酯(1L)稀释，并且用盐水(200mL×5)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(1/5)进行洗脱，得到4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(6.6g，13.1mmol，收率70.3％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：502.0，504.0[M+H]+。
第3步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.5g，10.9mmol)、[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-2-吡啶基]硼酸(12.0g，30.6mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1.32g，1.8mmol)和磷酸钾(5.12g，24.1mmol)加入四氢呋喃(400mL)和水(80mL)溶液中并且在65℃下搅拌2小时。对反应混合物进行过滤，然后用二氯甲烷(500mL)稀释滤液，并且用盐水(50mL×5)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(1/3)进行洗脱，得到4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5g，6.5mmol，收率59.3％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：770.3[M+H]+。
第4步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-碘-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在20℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.0g，6.5mmol)、乙酸银(2.7g，16.3mmol)和碘(4.97g，19.57mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(50mL)搅拌4小时。对反应混合物进行过滤。用乙酸乙酯(250mL)稀释滤液，并且用饱和硫代硫酸钠溶液(100mL×5)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，石油醚/乙酸乙酯(1/3)进行洗脱，得到4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-碘-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.8g，5.4mmol，收率82.5％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：896.2[M+H]+。
第5步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在90℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-碘-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.5g，2.8mmol)、2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸甲酯(13.4g，69.8mmol)和碘化亚铜(5.3g，27.9mmol)的N,N-二甲基乙酰胺溶液(80mL)搅拌6小时。对反应混合物进行过滤。用乙酸乙酯(400mL)稀释滤液，并且用盐水(100mL×5)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(1/3)进行洗脱，得到4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.2g，2.6mmol，收率94.1％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：838.4[M+H]+。
第6步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-氟-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-2-丙-2-炔基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲醇(420.37mg，3.16mmol)的四氢呋喃溶液(43mL)中加入0℃的氢化钠(180.39mg，4.51mmol，60％，分散于矿物油中)，并且在25℃下搅拌1小时。然后加入4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(944.0mg，1.13mmol)，并在25℃下搅拌1小时。完成后，用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后将有机层混合，用水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(4％)进行洗脱，得到4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-氟-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-2-丙-2-炔基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(929mg，0.98mmol，收率86.3％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：951.3[M+H]+。
第7步：2-[4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-2-基]乙腈
在50℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-氟-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-2-丙-2-炔基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(909.0mg，0.96mmol)的三氟乙酸溶液(91mL，0.96mmol)搅拌3小时。完成后，浓缩反应混合物，将残余物溶于二氯甲烷中，并且用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至10。浓缩混合物，利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeCN，B％(在30min内由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到2-[4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(373mg，0.61mmol，63.9％)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：611.2[M+H]+。
第8步：2-((R)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(实例83a)；2-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(实例83b)；2-((R)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(实例83c)；和2-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(实例83d)
将2-[4-[7-[6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(373.0mg，0.61mmol)、N,N-二异丙基乙胺(393.75mg，3.05mmol)、HATU(232.12mg，0.61mmol)和2-氟丙烯酸(71.46mg，0.79mmol)加入二氯甲烷(10mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)溶液中并且在25℃下搅拌1小时。完成后，对所得反应产物进行浓缩。直接利用制备型HPLC纯化粗产物(色谱柱，XBridge Prep C18 OBD，19×15mm，5μm，C-0013；流动相，A：1mmol FA水溶液，B：ACN和B％(在7min内，由51％增加至73％)；检测器，UV 254nm)，得到480mg 2-(4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈，其为白色固体。利用手性制备型HPLC进一步纯化产物(所用条件如下：色谱柱，CHIRALPAK IE-3，4.6×50mm，3μm；流动相，Hex(含0.1％ DEA):EtOH＝50:50；检测器，254nm；流速，1.0mL/min；柱温：25℃；以及色谱柱CHIRALCellulose-SB，4.6×100mm，3μm；流动相，MtBE(含0.1％ DEA):EtOH＝70:30；检测器，254nm；流速，1.0mL/min；柱温：25℃)，得到标题化合物。基于效价数据分配标题化合物的立体化学结构。
实例83a：2-((R)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(62.4mg，0.09mmol，收率15％，白色固体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.96(d，J＝1.6Hz，1H)，6.62(s，1H)，5.42-5.12(m，3H)，5.11-4.90(m，1H)，4.58-4.40(m，4H)，4.35-4.01(m，1H)，3.91-3.59(m，3H)，3.57-3.46(m，1H)，3.18-3.07(m，3H)，2.73-2.62(m，1H)，2.57(s，3H)，2.46(d，J＝1.2Hz，3H)，2.36-2.25(m，1H)，2.12-1.96(m，1H)。LC-MS：(ESI，m/z)：683.3[M+H]+。手性HPLC：CHIRAL Cellulose-SB，4.6×100mm，3μm；在214nm下检测；MtBE(0.1％ DEA):EtOH＝70:30；流速＝1mL/min；保留时间：2.041min(第一个峰)。
实例83b：2-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(64mg，0.09mmol，收率15.3％，白色固体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.96(d，J＝1.6Hz，1H)，6.62(s，1H)，5.42-5.12(m，3H)，5.11-4.92(m，1H)，4.53-4.40(m，4H)，4.38-4.00(m，1H)，3.89-3.59(m，3H)，3.62-3.46(m，1H)，3.19-3.13(m，2H)，3.09-3.03(m，1H)，2.73-2.62(m，1H)，2.57(s，3H)，2.46(d，J＝1.6Hz，3H)，2.33-2.18(m，1H)，2.15-1.91(m，1H)。LC-MS：(ESI，m/z)：683.3[M+H]+。手性HPLC：CHIRAL Cellulose-SB，4.6×100mm，3μm；在214nm下检测；MtBE(0.1％ DEA):EtOH＝70:30；流速＝1mL/min；保留时间：2.704min(第二个峰)。
实例83c：2-((R)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈(40.2mg，0.0589mmol，收率9.6％，白色固体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.96(d，J＝1.6Hz，1H)，6.62(s，1H)，5.42-5.11(m，3H)，5.08-4.93(m，1H)，4.66-4.39(m，4H)，4.38-4.10(m，1H)，3.89-3.49(m，4H)，3.19-3.04(m，3H)，2.76-2.63(m，1H)，2.59(s，3H)，2.46(d，J＝1.2Hz，3H)，2.33-2.26(m，1H)，2.16-1.98(m，1H)。LC-MS：(ESI，m/z)：683.3[M+H]+。手性HPLC：CHIRALPAK IE-3，4.6×50mm，3μm；在254nm下检测；Hex(含0.1％ DEA):EtOH＝50:50；流速＝1mL/min；保留时间：2.395min(第三个峰)。
实例83d：2-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-1-(2-氟丙烯酰)哌嗪-2-基)乙腈。(92.1mg，0.13mmol，收率22.1％，白色固体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.96(d，J＝1.6Hz，1H)，6.62(s，1H)，5.43-5.14(m，3H)，5.11-4.91(m，1H)，4.62-4.40(m，4H)，4.37-3.98(m，1H)，3.90-3.47(m，4H)，3.22-3.05(m，3H)，2.89-2.69(m，1H)，2.61(s，3H)，2.46(d，J＝4.0Hz，3H)，2.39-2.28(m，1H)，2.15-1.99(m，1H)。LC-MS：(ESI，m/z)：683.3[M+H]+。手性HPLC：CHIRALPAK IE-3，4.6×50mm，3μm；在254nm下检测；Hex(含0.1％ DEA):EtOH＝50:50；流速＝1mL/min；保留时间：3.052min(第四个峰)
实例84a和84b：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-3,4-二甲基吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例84a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-3,4-二甲基吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例84b)(2种阻转异构体)
合成路线
第1步：(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3,4-二甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-碘-4-甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.00g，4.5mmol)和双(三苯基膦)氯化钯(II)(321.8mg，0.4mmol)的1,4-二噁烷溶液(40mL)在25℃下搅拌5分钟。然后加入二甲基锌的甲苯溶液(1.2M)(7.6mL，9.1mmol)，并且在50℃下搅拌20小时。完成后，用水使反应淬灭，用乙酸乙酯进行萃取，用无水硫酸钠使其干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)进行洗脱，得到(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3,4-二甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.00g，3.9mmol，收率86.1％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI，m/z)：759.3[M+H]+。
第2步：(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3,4-二甲基-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，将[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲醇(1052.2mg，7.9mmol)的四氢呋喃溶液(30mL)搅拌2分钟。然后加入氢化钠(纯度60％)(632.1mg，15.8mmol)，并在0℃下搅拌10分钟。然后加入(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3,4-二甲基-2-吡啶基]-6-氯-2,8-二氟-喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.0g，3.9mmol)，并在25℃下搅拌1小时。完成后，用饱和氯化铵使反应淬灭，用乙酸乙酯进行萃取，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3,4-二甲基-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.4g，2.7mmol，收率69.6％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：872.4[M+H]+。
第3步：6-[6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4,5-二甲基-吡啶-2-胺
在50℃下，将(3S)-4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3,4-二甲基-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]-3-甲基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.4g，2.7mmol)的三氟乙酸溶液(9g，82.5mmol)搅拌1小时。完成后，对反应产物进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用乙腈/水(40:60)进行洗脱，得到6-[6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4,5-二甲基-吡啶-2-胺(1.2g，2.2mmol，收率82％)，其为黄色固体。LCMS(ESI，m/z)：532.2[M+H]+。
第4步：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-3,4-二甲基吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例84a)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-3,4-二甲基吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(实例84b)(2种阻转异构体)
在-78℃下，将6-[6-氯-8-氟-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]喹唑啉-7-基]-4,5-二甲基-吡啶-2-胺(900.0mg，1.6mmol)、丙烯酸(97.5mg，1.3mmol)和N,N-二异丙基乙胺(654.6mg，5.0mmol)的二氯甲烷溶液(9mL)搅拌2分钟。然后在-78℃下，在1小时内加入HATU(643.2mg，1.6mmol)。完成后，用水使反应淬灭，用乙酸乙酯进行萃取，用无水硫酸钠使其干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到197mg粗产物固体。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，所用条件如下：XBridge Prep OBD C18色谱柱，30×150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；得到117mg所需产物。利用手性制备型HPLC纯化所得固体，所用条件如下：色谱柱，CHIRALPAK IC-3，0.46×5cm；3μm；流动相：MtBE(0.3％ IPAmine):MeOH＝50:50；检测器，UV 254nm。在1.142min处获得较快洗脱的峰。在1.629min处获得较慢洗脱的峰。由此得到1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-3,4-二甲基吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(38mg，0.06mmol，收率3.8％)和1-((S)-4-((S)-7-(6-氨基-3,4-二甲基吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(35.1mg，0.06mmol，收率3.5％)，它们均为白色固体。
实例84a：1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.82(s，1H)，6.92-6.74(m，1H)，6.39(s，1H)，6.26-6.11(m，1H)，5.81-5.66(m，3H)，5.18(d，J＝56.2Hz，1H)，4.75(s，1H)，4.50-4.23(m，3H)，4.19-3.91(m，2H)，3.74-3.38(m，3H)，3.26-2.85(m，2H)，2.44-2.29(m，4H)，2.24-2.05(m，4H)，2.03-1.87(m，1H)，1.81(s，3H)，1.28(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS(ESI，m/z)：586.3[M+H]+手性HPLC：色谱柱：CHIRALPAK IC-3，4.6×50mm，3μm；在254nm下检测；MtBE(0.3％IPAmine):MeOH＝50:50；流速：1mL/min；保留时间：1.136min(较快的峰)。
实例84b：1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.82(s，1H)，6.95-6.74(m，1H)，6.39(s，1H)，6.25-6.11(m，1H)，5.84-5.65(m，3H)，5.19(d，J＝56.1Hz，1H)，4.74(s，1H)，4.49-4.22(m，3H)，4.21-3.88(m，2H)，3.74-3.53(m，2H)，3.50-3.38(m，2H)，3.25-3.01(m，1H)，3.03-2.86(m，1H)，2.41(s，3H)，2.20(s，3H)，2.13-1.87(m，2H)，1.83(s，3H)，1.30(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS(ESI，m/z)：586.3[M+H]+手性HPLC：色谱柱：CHIRALPAK IC-3，4.6×50mm，3μm；在254nm下检测；MtBE(0.3％ IPAmine):MeOH＝50:50；流速：1mL/min；保留时间：1.629min(较慢的峰)。
实例85：(E)-1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-羟丁-2-烯-1-酮
合成路线
在25℃下，将6-((R)-6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(参见实例17a/17b的第11步)(156.0mg，0.27mmol)、4-羟基-丁-2-烯酸(42.06mg，0.41mmol)、N,N-二异丙基乙胺(141.72mg，1.1mmol)和HATU(156.64mg，0.4100mmol)的二氯甲烷溶液(6.5mL)搅拌1小时。完成后，用二氯甲烷稀释反应混合物，并且用盐水进行洗涤。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeCN，B％(在30min内由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到117mg(65.3％)所需的阻转异构体(E)-1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-羟丁-2-烯-1-酮，其为白色固体。
实例85：LC-MS：(ESI，m/z)：652.3[M+H]+，1HNMR：(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ7.83(s，1H)，6.83-6.79(m，3H)，6.64-6.55(m，1H)，6.50(s，1H)，5.03-5.01(m，1H)，4.76(s，1H)，4.47-4.23(m，3H)，4.15-3.88(m，4H)，3.65-3.30(m，3H)，3.24-2.98(m，2H)，2.90-2.68(m，1H)，2.49-2.44(m，3H)，2.37-2.32(m，3H)，1.99-1.91(m，1H)，1.72-1.65(m，3H)，1.27(s，3H)。
实例86：(E)-1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-氯丁-2-烯-1-酮
合成路线
在25℃下，将6-((R)-6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(参见实例17a/17b的第11步)的所需阻转异构体(108.0mg，0.190mmol)、(E)-4-氯丁-2-烯酸(20.63mg，0.1700mmol)、N,N-二异丙基乙胺(98.11mg，0.7600mmol)和HATU(108.44mg，0.2900mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)搅拌1小时。完成后，用水洗涤反应混合物，并且用二氯甲烷进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeCN，B％(在30min内由5％增加至70％)；检测器，UV254nm)，得到白色固体。直接利用制备型HPLC纯化粗产物(色谱柱，XBridge Prep C18 OBD，19×15mm，5μm，C-0013；流动相，A：0.1％mmol FA水溶液，B：ACN和B％(在7min内，由51％增加至73％)；检测器，UV 254nm)，得到44mg(34.5％)(E)-1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)-4-氯丁-2-烯-1-酮，其为白色固体。
实例86：LC-MS：(ESI，m/z)：670.3[M+H]+，1HNMR：(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.18(s，1H)，7.82(s，1H)，6.83-6.71(m，3H)，6.49(s，1H)，4.90-4.75(m，1H)，4.40-4.30(m，3H)，4.30-4.06(m，3H)，4.01-3.88(m，1H)，3.67-3.55(m，2H)，3.13-3.15(m，1H)，3.05-2.93(m，1H)，2.61-2.56(m，1H)，2.43-2.26(m，6H)，2.19-2.15(m，1H)，1.97-1.93(m，1H)，1.70-1.62(m，3H)，1.28-1.25(m，3H)。
实例87：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：叔丁基-二甲基-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]硅烷
在50℃下，将叔丁基-二甲基-[[(2S)-吡咯烷-2-基]甲氧基]硅烷(1600.0mg，7.43mmol)、3-氧杂环丁烷酮(2700.0mg，37.47mmol)和氰基硼氢化钠(500.0mg，7.94mmol)的混合物加入甲醇(10mL)中搅拌4小时。用水稀释所得溶液，用二氯甲烷进行萃取，并且将有机层混合。利用制备型HPLC对所得混合物进行纯化，得到叔丁基-二甲基-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]硅烷(1200mg，4.41mmol，收率59.5％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：272.2[M+H]+
第2步：[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲醇
在50℃下，将叔丁基-二甲基-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]硅烷(1800.0mg，6.63mmol)与三氟乙酸(3mL，40.39mmol)的混合物搅拌3小时。完成后，用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至约8.0。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，得到[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲醇(880mg，5.57mmol，收率84.4％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：158.1[M+H]+。
第3步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向氢化钠(36.0mg，1.5mmol)的四氢呋喃(3mL)溶液中加入[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲醇(90.0mg，0.57mmol)，并且将该混合物在0℃下搅拌15分钟。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(300.0mg，0.39mmol)并且在室温下搅拌2小时。完成后，用饱和氯化铵使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩，得到粗产物，将其直接用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：904.4[M+H]+
第4步：6-[6-氯-2-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250.0mg，0.28mmol)与三氟乙酸(3mL，40.39mmol)的混合物搅拌3小时。用N,N-二异丙基乙胺将反应混合物的pH调节至8。用水稀释所得溶液，并且用二氯甲烷进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩，得到粗产物6-[6-氯-2-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(150mg，0.27mmol，收率96.2％)。将该粗产物直接用于下一步而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：564.2[M+H]+
第5步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲醇(60.0mg，0.11mmol)的二氯甲烷溶液(1mL)中加入N,N-二异丙基乙胺(25.0mg，0.19mmol)、6-[6-氯-2-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(60.0mg，0.11mmol)，并且将该混合物在-78℃下搅拌0.5小时。完成后，浓缩有机层，并且利用制备型HPLC纯化粗产物(色谱柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD，19×250，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：EtOH；流速：25mL/min)；得到1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(氧杂环丁-3-基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(14.2mg，0.023mmol，收率21.6％)，其为白色固体。
实例87：LC-MS：(ESI，m/z)：618.3[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.05(s，1H)，7.78(d，J＝8.9Hz，1H)，7.48(d，J＝2.3Hz，1H)，6.98-6.75(m，3H)，6.60(d，J＝8.8Hz，1H)，6.17(dd，J＝16.7，2.4Hz，1H)，5.74(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，4.65-4.15(m，2H)，3.95-3.60(m，10H)，3.29-3.07(m，3H)，2.97-2.69(m，1H)，2.65-2.55(m，1H)，2.18-2.01(m，1H)，1.77-1.46(m，3H)，1.38-1.13(m，1H)。
实例88：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)环丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(1-氨基环丙基)甲醇
将(1-(羟基甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯(10.0g，53.41mmol)的四氢呋喃溶液(100mL)加入盐酸(200mL，2M四氢呋喃溶液)中。在25℃下，将该混合物搅拌16小时。完成后，浓缩反应混合物，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上进行纯化，用二氯甲烷/甲醇(4:1)进行洗脱，得到(1-氨基环丙基)甲醇(4g，45.9mmol，收率86％)，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：88.3[M+H]+
第2步：(1-(二甲基氨基)环丙基)甲醇
在100℃下，将(1-氨基环丙基)甲醇(500.0mg，5.74mmol)、甲醛(16.7mL，66.6mmol)和甲酸(500.0mg，10.86mmol)溶液搅拌8小时。完成后，浓缩反应混合物，并且加入氢氧化钠，将pH调节至13。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用甲醇/二氯甲烷(3:7)进行萃取，得到(1-(二甲基氨基)环丙基)甲醇(150mg，1.3mmol，收率22.7％)，其为无色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：116.2[M+H]+
第3步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)环丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在40℃下，将(1-(二甲基氨基)环丙基)甲醇(60mg，0.50mmol)和氢化钠(25.0mg，1.1mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.3mmol)，并且在40℃下搅拌1小时。完成后，浓缩反应产物，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)环丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250mg，0.17mmol，收率56.7％，纯度60％)，其为黄色油状物，直接用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：862.4[M+H]+
第4步：6-(6-氯-2-((1-(二甲基氨基)环丙基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)环丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250mg，0.17mmol，纯度60％)在2,2,2-三氟乙酸(5mL)和二氯甲烷(15mL)中搅拌2小时。浓缩反应混合物，并且利用快速柱层析法在C18硅胶柱上纯化反应混合物，用甲醇/水(3:7)进行洗脱，得到6-(6-氯-2-((1-(二甲基氨基)环丙基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(80mg，0.15mmol，收率90.3％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：522.3[M+H]+
第5步：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)环丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-2-((1-(二甲基氨基)环丙基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(30.0mg，0.057mmol)、N,N-二异丙基乙胺(10.0mg，0.077mmol)和二氯甲烷(5mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(5.2mg，0.06mmol)，并且在-78℃下搅拌30分钟。浓缩反应产物，并且利用快速柱层析法在C18硅胶柱上进行纯化，用乙腈/水(7:3)进行洗脱，得到粗产物。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，所用条件如下：XBridge Prep OBD C18色谱柱，30×150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min)；得到1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(二甲基氨基)环丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(17.3mg，0.03mmol，收率52.3％)，其为白色固体。
实例88：LC-MS：(ESI，m/z)：576.2[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO，ppm)δ8.04(s，1H)，7.77(d，J＝9.0Hz，1H)，7.43(s，1H)，6.87(s，2H)，6.79(dd，J＝12.0，18.0Hz，1H)，6.58(d，J＝9.0Hz，1H)，6.15(dd，J＝3.0，18.0Hz，1H)，5.72(dd，J＝3.0，9.0Hz，1H)，4.40(dd，J＝12.0，27.0Hz，2H)，3.93-3.80(m，6H)，3.81-3.72(m，2H)，2.34(s，6H)，0.75-0.53(m，4H)。
实例89：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(2S,4R)-4-氟吡咯烷-2-羧酸甲酯
在25℃下，将(2S,4R)-4-氟吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯(5.0g，20.22mmol)的三氟乙酸溶液(192mL)搅拌1小时。完成后，对溶剂进行浓缩。用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至10，然后浓缩混合物，并且将其直接用于后续反应。LC-MS：(ESI，m/z)：148.0[M+H]+
第2步：(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-羧酸甲酯
在50℃下，将(2S,4R)-4-氟吡咯烷-2-羧酸甲酯(2.8g，19.03mmol)、2-溴乙基甲基醚(5.82g，41.86mmol)和碳酸钾(5.78g，41.86mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(40.8mL)搅拌4小时。完成后，用水使反应淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。将该粗产物用于下一步反应。LC-MS：(ESI，m/z)：206.1[M+H]+
第3步：[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲醇
在0℃下，对(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-羧酸甲酯(1.45g，7.07mmol)的四氢呋喃溶液(14mL)进行搅拌。加入氢化铝锂(0.54g，14.13mmol)，并且将反应混合物在25℃下搅拌1小时。用水(0.5mL)使反应淬灭，加入氢氧化钠溶液(15％)(0.5mL)和水(1.5mL)，并且在0℃下搅拌1小时。用甲醇(50mL)稀释混合物，并且在25℃下搅拌30分钟。然后对混合物进行过滤和浓缩。将所得油状物重新溶于二氯甲烷中，用无水硫酸钠使其干燥，然后进行过滤和浓缩，得到粗产物，将其进一步用于下一步。LC-MS：(ESI，m/z)：178.3[M+H]+
第4步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲醇(250.86mg，1.42mmol)的四氢呋喃(27.84mL)溶液中加入0℃的氢化钠(188.74mg，4.72mmol，60％，分散于矿物油中)，并且在25℃下搅拌1小时。加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(362.0mg，0.4700mmol)，并且将反应混合物在25℃下搅拌1小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。收集有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeCN，B％(在30min内，由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到180mg(41.3％)4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：924.5[M+H]+
第5步：6-[6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(164.0mg，0.18mmol)的三氟乙酸溶液(23mL)搅拌5小时。完成后，对反应产物进行浓缩。用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至10。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeCN，B％(在30min内，由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到60mg(57.9％)6-[6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：584.2[M+H]+
第6步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向6-[6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(48.0mg，0.0800mmol)和N,N-二异丙基乙胺(42.41mg，0.3300mmol)的二氯甲烷溶液(4mL)中加入-78℃的丙烯酰氯(4.46mg，0.0500mmol)，并且在-78℃下搅拌1小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用制备型HPLC纯化粗产物(色谱柱，XBridgePrep C18 OBD，19×15mm，5μm，C-0013；流动相，A：碳酸氢铵和NH3H2O水溶液，B：ACN和B％(在7min内，由51％增加至73％)；检测器，UV 254nm)，得到17mg(32.4％)1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-氟-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：638.2[M+H]+
实例89 1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.04(s，1H)，7.77(d，J＝9.2Hz，1H)，7.46(s，1H)，6.89(s，2H)，6.86-6.72(m，1H)，6.59(d，J＝8.8Hz，1H)，6.19(d，J＝2.4Hz，1H)，5.73(dd，J＝12.4，2.0Hz，1H)，5.18(d，J＝48Hz，1H)，4.43-4.31(m，1H)，4.30-4.18(m，1H)，3.98-3.58(m，8H)，3.52-3.42(m，1H)，3.41-3.37(m，2H)，3.22-3.13(m，4H)，3.13-3.05(m，1H)，2.72-2.57(m，2H)，2.21-2.09(m，1H)，1.98-1.78(m，1H)。LC-MS：(ESI，m/z)：638.2[M+H]+。
实例90：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲醇
在0℃下，将氢化铝锂(310mg，8.1mmol)加入(2S,4R,5S)-1-叔丁氧基羰基-4-氟-5-甲基-吡咯烷-2-羧酸(1.0g，4.0mmol)的四氢呋喃溶液(25mL)中。然后将反应混合物加热至60℃，并且加热1.5小时。完成后，用水使反应淬灭。过滤后，在减压条件下浓缩滤液。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(96/4)进行洗脱，得到139mg(15％)[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲醇，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：148.3[M+H]+
第2步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲醇(95.9mg，0.66mmol)的四氢呋喃溶液(8mL)中，加入0℃的氢化钠(62.56mg，1.56mmol)，并且将混合物搅拌30分钟。加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.26mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(97/3)进行洗脱，得到170mg(72.9％)4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：894.5[M+H]+
第3步：6-[6-氯-2-[[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(170.0mg，0.19mmol)的三氟乙酸溶液(26mL)搅拌3小时。完成后，对反应产物进行浓缩。用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至10。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeCN，B％(在30min内，由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到105mg 6-[6-氯-2-[[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为淡黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：554.2[M+H]+
第4步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向6-[6-氯-2-[[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(105.0mg，0.19mmol)和N,N-二异丙基乙胺(122.25mg，0.95mmol)的二氯甲烷溶液(12mL)中，加入-78℃的丙烯酰氯(10.29mg，0.11mmol)，并且将混合物搅拌1小时(-78℃)。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeCN，B％(40％)；检测器，UV 254nm)，得到粗产物，利用制备型HPLC对其进行纯化(色谱柱，XBridge Prep C18 OBD，19×15mm，5μm，C-0013；流动相，A：FA水溶液，B：ACN和B％(在7min内，由51％增加至73％)；检测器，UV 254nm)，得到25mg(21.7％)1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R,5S)-4-氟-1,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：608.2[M+H]+
实例90：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.10(s，1H)，7.81(d，J＝8.0Hz，1H)，7.55(s，1H)，6.86-6.79(m，1H)，6.71(d，J＝8.8Hz，1H)，6.29(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，5.82(dd，J＝10.4，1.6Hz，1H)，4.88-4.62(m，1H)，4.54-4.44(m，2H)，4.00-3.93(m，8H)，3.15-3.11(m，1H)，2.75-2.62(m，1H)，2.51(s，3H)，2.26-1.98(m，2H)，1.21(d，J＝6.4Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：608.2[M+H]+。
实例91：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：叔丁基-二甲基-[[(2S)-吡咯烷-2-基]甲氧基]硅烷
向L-脯氨醇(20g，197.73mmol)、咪唑(4g，587.54mmol)的四氢呋喃溶液(200mL)中，加入叔丁基二甲基氯硅烷(45g，298.57mmol)，将该混合物在室温下搅拌2小时。完成后，用水稀释所得溶液，用二氯甲烷进行萃取，并且将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且浓缩得到粗产物，将其直接用于下一步而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：216.2[M+H]+
第2步：叔丁基-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-二甲基-硅烷
在室温下，将叔丁基-二甲基-[[(2S)-吡咯烷-2-基]甲氧基]硅烷(3.8g，13.93mmol)、2-溴乙基甲基醚(3.85g，27.7mmol)和碳酸钾(5.77g，41.81mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(30mL)搅拌2小时。完成后，用水稀释反应混合物，并且用二氯甲烷进行萃取。用盐水洗涤有机层，然后用无水硫酸钠使其干燥，并且进行浓缩，得到粗产物。将该粗产物直接用于下一步而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：274.2[M+H]+
第3步：[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲醇
在50℃下，将叔丁基-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-二甲基-硅烷(2.0g，7.31mmol)的三氟乙酸溶液(2.mL，26.93mmol)搅拌4小时。用N,N-二异丙基乙胺将反应混合物的pH调节至8。利用制备型HPLC对粗产物进行纯化，得到[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲醇(800mg，5.0mmol，收率68.7％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：160.1[M+H]+
第4步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲醇(62.0mg，0.39mmol)的四氢呋喃溶液(1mL)中加入氢化钠(20.0mg，0.83mmol)，然后在0℃下搅拌15分钟。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(200.0mg，0.26mmol)，并且在室温下搅拌2小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。浓缩有机层，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上进行纯化，用二氯甲烷/甲醇(19:1)进行洗脱，得到4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg，0.125mmol，收率50.8％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：906.4[M+H]+
第5a步：6-[6-氯-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
向4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150.0mg，0.17mmol)中，加入三氟乙酸(1mL，13.23mmol)。在50℃下，将该混合物搅拌2小时。用N,N-二异丙基乙胺将反应混合物的pH调节至8。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化粗产物，用甲醇/水(3/1)进行洗脱，得到6-[6-氯-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(80mg，0.14mmol，收率85.4％)，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：566.2[M+H]+
第5b步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向6-[6-氯-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(80.0mg，0.14mmol)和N,N-二异丙基乙胺(54mg，0.42mmol)的二氯甲烷溶液(1mL)中，加入丙烯酰氯(14.0mg，0.15mmol)，并且将该混合物在-78℃下搅拌0.5小时。利用制备型HPLC纯化粗产物(色谱柱：XBridge Prep OBD C18，19×250mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：MeOH，HPLC级；流速：25mL/min)；得到1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(15.1mg，0.024mmol，收率17.2％)，其为白色固体。
实例91：LC-MS：(ESI，m/z)：620.3[M+H]+，1H NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.04(s，1H)，7.78(d，J＝8.9Hz，1H)，7.46(s，1H)，6.96-6.74(m，3H)，6.60(d，J＝8.8Hz，1H)，6.17(dd，J＝16.6，2.4Hz，1H)，5.74(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，4.38-4.27(m，1H)，4.15-3.99(m，1H)，3.94-3.70(m，8H)，3.42(t，J＝6.2Hz，3H)，3.21(s，3H)，3.09-2.95(m，2H)，2.84(s，1H)，2.31-2.18(m，1H)，1.95-1.80(m，1H)，1.75-1.54(m，3H)。
实例92：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯
在氮气气氛下，向(2S,4R)-4-羟基吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯(4.8g，19.57mmol)的乙腈溶液(66mL)中，加入25℃的碘化亚铜(0.74g，3.91mmol)，并且在50℃下进行搅拌。然后加入二氟(氟磺酰基)乙酸(4.18g，23.48mmol)的乙腈溶液(19.8mL)，并且在50℃下搅拌1小时。浓缩反应混合物，并且将残余物在乙酸乙酯中浆液化。过滤后，在减压条件下浓缩滤液。将该粗产物用于下一步反应。LC-MS：(ESI，m/z)：296.3[M+H]+
第2步：((2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇
向(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯(5.0g，16.93mmol)的四氢呋喃溶液(66mL)中加入0℃的氢化铝锂(1.29g，33.87mmol)，并且在60℃下搅拌30分钟。用水使反应淬灭，并且进行过滤。浓缩滤液，并且利用快速柱层析法在硅胶柱上进行纯化，用二氯甲烷/甲醇(96/4)进行洗脱，得到320mg(10.4％)((2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：182.3[M+H]+
第3步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲醇(183.02mg，1.01mmol)的四氢呋喃溶液(16.5mL)中，加入0℃的氢化钠(80.81mg，2.02mmol，60％，分散于矿物油中)，并且在25℃下搅拌1小时。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(310.0mg，0.40mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后将有机层混合，用水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(96/4)进行洗脱，得到245mg(65.3％)4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：928.5[M+H]+。
第4步：6-[6-氯-2-[[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(229.0mg，0.25mmol)的三氟乙酸溶液(29mL)搅拌3小时。浓缩反应混合物，然后用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至约10，并且浓缩混合物。利用反相色谱法纯化残余物(色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeOH，B％(在30min内，由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm)，得到93mg 6-[6-氯-2-[[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：588.4[M+H]+
第5步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向6-[6-氯-2-[[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(87.0mg，0.15mmol)和N,N-二异丙基乙胺(95.44mg，0.74mmol)的二氯甲烷溶液(14.5mL)中，加入-78℃的丙烯酰氯(10.71mg，0.12mmol)，并且在-78℃下搅拌1小时。完成后，用水使所得溶液淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后将有机层混合，用水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物，所用条件为：色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：MeCN，B％(40％)；检测器，UV 254nm。利用制备型HPLC再次纯化混合物(色谱柱，XBridge Prep C18 OBD，19×15mm，5μm，C-0013；流动相，A：TFA水溶液，B：ACN和B％(在7min内，由51％增加至73％)；检测器，UV254nm)，得到30mg(31.6％)1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(2S,4R)-4-(二氟甲氧基)-1-甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：642.1[M+H]+
实例92：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ8.14(s，1H)，7.82(d，J＝8.8Hz，1H)，7.57(s，1H)，6.86-6.79(m，1H)，6.73-6.71(m，1H)，6.52(s，1H)，6.33-6.27(m，1H)，5.82(dd，J＝10.4，1.6Hz，1H)，4.99-4.98(m，1H)，4.77-4.73(m，1H)，4.63-4.58(m，1H)，3.98(d，J＝3.6Hz，8H)，3.83-3.79(m，2H)，3.17-3.14(m，1H)，2.93(s，3H)，2.43-2.33(m，2H)。LC-MS：(ESI，m/z)：642.1[M+H]+。
实例93：1-((3S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在25℃下，将(S)-2-(羟基甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(149.0mg，0.74mmol)和氢化钠(30.0mg，0.75mmol，60％，分散于矿物油中)的四氢呋喃溶液(10mL)搅拌0.5小时。然后加入(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(参见实例17a/17b的第9步)(300.0mg，0.37mmol)，并且在25℃下搅拌3小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。将有机层混合，用盐水洗涤，用无水硫酸钠使其干燥，然后在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)进行洗脱，得到(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(298mg，0.30mmol，收率81.2％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：994.4[M+H]+
第2步：6-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将(3S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-(((S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(283.0mg，0.28mmol)的三氟乙酸溶液(10mL)搅拌6小时。对反应产物进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20/1)进行洗脱，得到6-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(140mg，0.25mmol，收率88.8％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：554.2[M+H]+
第3步：1-((3S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-8-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-(((S)-吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(70.0mg，0.13mmol)和N,N-二异丙基乙胺(49.0mg，0.38mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5分钟。然后加入丙烯酰氯(12.0mg，0.13mmol)，并且在-78℃下搅拌0.5小时。完成后，在真空下对该溶液进行浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物，得到1-((3S)-4-(7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-(((S)-吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(4.3mg，0.0071mmol，收率5.6％)，其为白色固体。
实例93：1H NMR(400MHz，甲醇-d4，ppm)δ7.67(d，J＝1.6Hz，1H)，6.92-6.73(m，1H)，6.60(s，1H)，6.29(d，J＝18.0Hz，1H)，5.87-5.76(m，1H)，4.69(s，1H)，4.54(d，J＝16.2Hz，1H)，4.41-4.23(m，1H)，4.22-3.96(m，2H)，3.95-3.81(m，1H)，3.80-3.52(m，6H)，2.46(s，3H)，2.28-1.77(m，4H)，1.37(d，J＝6.6Hz，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：608.2[M+H]+。
实例94：(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(S)-2,2-二氟-1-(2-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)乙-1-酮
在20℃下，将(S)-吡咯烷-2-基甲醇(5.0g，49.4mmol)、2,2-二氟乙酸(7.1g，74.1mmol)、HATU(28.2g，74.1mmol)和N,N-二异丙基乙胺(19.1g，148.3mmol)的二氯甲烷溶液(50mL)搅拌1小时。用饱和氯化钠(200mL)洗涤反应混合物，使其干燥(Na2SO4)，然后进行过滤和浓缩，得到(S)-2,2-二氟-1-(2-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)乙-1-酮(8.0g，44.7mmol，收率90.3％)，其为棕色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：178.1[M-H]+
第2步：(S)-(1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲醇
在20℃下，将(S)-2,2-二氟-1-(2-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)乙-1-酮(5.0g，27.9mmol)和氢化铝锂(4.2g，111.6mmol)的四氢呋喃溶液(40mL)搅拌1小时。用氯化铵水溶液(40mL)使反应淬灭。对混合物进行过滤，然后用二氯甲烷(5×40mL)萃取滤液。将有机层混合，用硫酸钠使其干燥，然后浓缩得到(S)-(1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲醇(380mg，2.3005mmol，收率8.2％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：166.1[M+H]+
第3步：(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将氢化钠(124.0mg，3.1mmol)加入(S)-(1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲醇(320.0mg，1.9mmol)的四氢呋喃溶液(8mL)中。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(297mg，0.4mmol)，并且将反应混合物在25℃下搅拌1小时。用氯化铵水溶液(20mL)使反应淬灭，然后用二氯甲烷进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且在真空下进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(320mg，0.35mmol，收率18.1％)，其为黄色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：912.3[M+H]+。
第4步：(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在50℃下，将(S)-4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150.0mg，0.16mmol)的三氟乙酸溶液(16mL)搅拌12小时，然后进行浓缩。然后将所得油状物溶于二氯甲烷(9mL)中，并且加入N,N-二异丙基乙胺(424.0mg，3.3mmol)。在-78℃下，将丙烯酰氯(13.0mg，0.14mmol)加入所得混合物中，并且搅拌15分钟。用饱和氯化铵(30mL)使反应淬灭。用二氯甲烷(5×25mL)对反应混合物进行萃取，并且将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，然后进行过滤和浓缩。利用制备型HPLC纯化粗产物，得到(S)-1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(33.9mg，0.05mmol，收率32.9％)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：626.3[M+H]+。
实例94：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.04(s，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，1H)，7.46(s，1H)，6.90(s，2H)，6.82(dd，J＝10.4，10.8Hz，1H)，6.60(d，J＝8.8Hz，1H)，6.24-5.88(m，2H)，5.79-5.68(m，1H)，4.38-4.24(m，1H)，4.20-4.07(m，1H)，3.92-3.68(m，8H)，3.39-3.21(m，1H)，3.16-3.06(m，1H)，3.05-2.95(m，1H)，2.90-2.74(m，1H)，2.45-2.37(m，1H)，1.98-1.86(m，1H)，1.79-1.68(m，2H)，1.67-1.56(m，1H)。
实例95：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(2S,4R)-4-甲氧基吡咯烷-1,2-二羧酸1-叔丁基-2-甲酯
在20℃下，将(2S,4R)-4-羟基吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯(30.0g，122.3mmol)和氢化钠(5.88g，245mmol)的四氢呋喃溶液(1.3L)搅拌0.5小时。加入碘甲烷(34.74g，244.7mmol)，并且将反应混合物在20℃下搅拌1小时。用氯化铵水溶液(300mL)使反应淬灭。用乙酸乙酯萃取所得混合物，用无水硫酸钠使其干燥，然后进行过滤和浓缩，得到(2S,4R)-4-甲氧基吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯(22g，84.8mmol，收率69.4％)，其为棕色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：260.3[M+H]+
第2步：(2S,4R)-4-甲氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯
在20℃下，将(2S,4R)-4-甲氧基吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯(30.0g，115.7mmol)和氯化氢的1,4-二噁烷溶液(200mL)搅拌1.5小时。在真空下浓缩混合物，得到(2S,4R)-4-甲氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(12g，75.4mmol)，其为棕色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：160.2[M+H]+
第3步：(2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-羧酸甲酯
在80℃下，将(2S,4R)-4-甲氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(5.0g，31.4mmol)、2-溴乙基甲基醚(6.51g，46.8mmol)和碳酸铯(20.5g，62.9mmol)的乙腈溶液(150mL)搅拌2小时。过滤后，在减压条件下对滤液进行浓缩，得到(2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-羧酸甲酯(4.4g，20.252mmol，收率64.5％)，其为棕色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：218.3[M+H]+
第4步：((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲醇
在20℃下，将(2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-羧酸甲酯(2.0g，9.2mmol)和氢化铝锂(700.0mg，18.42mmol)的四氢呋喃溶液(40mL)搅拌1小时。用氯化铵水溶液使反应淬灭，并且用乙酸乙酯进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，然后进行浓缩，得到((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲醇(750mg，3.963mmol，收率43.1％)，其为棕色油状物。LC-MS(ESI，m/z)：190.3[M+H]+。
第5步：4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，加入((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲醇(650.0mg，3.4mmol)的四氢呋喃溶液(20mL)和氢化钠(275.0mg，6.9mmol)。将所得溶液在20℃下搅拌0.5小时。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(300.0mg，0.39mmol)，并且在20℃下搅拌1小时。用氯化铵水溶液(15mL)使反应淬灭。用乙酸乙酯对所得溶液进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10/1)进行洗脱，得到4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(240mg，0.26mmol，收率7.5％)，其为棕色固体。LC-MS(ESI，m/z)：936.6[M+H]+。
第6步：6-(6-氯-2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(230.0mg，0.250mmol)的2,2,2-三氟乙酸溶液(50mL)搅拌4小时。对所得混合物进行过滤，并且将滤液浓缩，得到6-(6-氯-2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(120mg，0.20mmol，收率81.9％)，其为棕色固体。LC-MS(ESI，m/z)：596.2[M+H]+。
第7步：1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-(6-氯-2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(110mg，0.18mmol)和N,N-二异丙基乙胺(71.0mg，0.55mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)搅拌5min。加入丙烯酰氯(15.0mg，0.17mmol)，并在-78℃下将该混合物搅拌15分钟。用氯化铵水溶液(5mL)使反应淬灭。用二氯甲烷(5×8mL)萃取所得溶液，并且将有机层混合。用无水硫酸钠使有机层干燥，然后进行过滤和浓缩。用制备型HPLC纯化粗产物，得到1-(4-(7-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(22.2mg，0.034mmol，收率18.5％)，其为白色固体。LC-MS(ESI，m/z)：650.4[M+H]+。
实例95：1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.10(s，1H)，7.80(d，J＝8.8Hz，1H)，7.57(m，1H)，6.87-6.76(m，1H)，6.70(d，J＝8.8Hz，1H)，6.31-6.23(m，1H)，5.84-5.77(m，1H)，4.63-4.48(m，2H)，4.05-3.99(m，5H)，3.92(s，4H)，3.66-3.36(m，5H)，3.33(s，5H)，3.29(d，J＝1.2Hz，1H)，3.05-2.78(m，2H)，2.55-1.88(m，2H)。
实例96：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：(4R)-4-氟-2-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯
向(4R)-4-氟吡咯烷-1,2-二羧酸1-叔丁基-2-甲基酯(5.00g，20.22mmol)的四氢呋喃溶液(19mL)中，加入二异丙基氨基锂(12.1mL，24.27mmol，2.0M的四氢呋喃溶液)，并且在-78℃下搅拌1小时。加入-78℃的碘甲烷(4.31g，30.33mmol)，并且将反应混合物在25℃下搅拌1小时。浓缩反应产物，并且将粗产物用于下一步反应。LC-MS：(ESI，m/z)：206.1[M-55]+
第2步：[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲醇
向(4R)-4-氟-2-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯(4.00g，粗产物)的四氢呋喃溶液(75mL)中，加入0℃的氢化铝锂(1.45g，38.27mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。用水使反应淬灭，然后进行过滤，并且将滤液浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化所得混合物，用二氯甲烷/甲醇(96/4)进行洗脱，得到700mg(31.1％)[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲醇，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：148.1[M+H]+
第3步：4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲醇(479.6mg，3.26mmol)的四氢呋喃溶液(14mL)中加入0℃的氢化钠(208.5mg，5.21mmol，60％，分散于矿物油中)，并且在25℃下搅拌1小时。然后加入4-(7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-氟喹唑啉-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体3)(500.0mg，0.65mmol)，并且在25℃下搅拌1小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。然后用无水硫酸钠使有机层干燥，然后进行过滤和浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(96/4)进行洗脱，得到450mg(80％)4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其为黄色油状物。LC-MS：(ESI，m/z)：894.5[M+H]+
第4步：6-[6-氯-2-[[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将4-[7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(420.0mg，0.47mmol)的三氟乙酸溶液(42mL)搅拌3小时。完成后，对反应产物进行浓缩。用N,N-二异丙基乙胺将pH调节至10，并且浓缩混合物。将粗产物用于下一步反应而不经纯化。LC-MS：(ESI，m/z)：554.2[M+H]+
第5步：1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮
向6-[6-氯-2-[[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-喹唑啉-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(160.0mg，0.29mmol)和N,N-二异丙基乙胺(149.03mg，1.16mmol)的二氯甲烷溶液(14.76mL)中，加入-78℃的丙烯酰氯(18.3mg，0.20mmol)，并且在-78℃下搅拌1小时。用水使反应淬灭，并且用二氯甲烷进行萃取。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用反相色谱法纯化残余物，所用条件为：色谱柱，C18硅胶柱；流动相，A：水，B：乙腈，B％(在30min内，由5％增加至70％)；检测器，UV 254nm。利用制备型HPLC再次纯化所得混合物(色谱柱，XBridge Prep C18 OBD，19×15mm，5μm，C-0013；流动相，A：10mmol/L NH4HCO3水溶液，B：ACN和B％(在7min内，由51％增加至73％)；检测器，UV 254nm)，得到47mg(26.8％)1-[4-[7-[6-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-2-[[(4R)-4-氟-1,2-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮，其为白色固体。LC-MS：(ESI，m/z)：608.2[M+H]+
实例96：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.04(s，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，1H)，7.47(s，1H)，6.90(s，2H)，6.85-6.82(m，1H)，6.59(d，J＝8.8Hz，1H)，6.19(d，J＝2.4Hz，1H)，5.73(dd，J＝10.4，2.4Hz，1H)，5.26(d，J＝56Hz，1H)，4.26-4.16(m，2H)，3.88-3.85(m，6H)，3.85-3.70(m，2H)，3.07-2.99(m，1H)，2.91-2.78(m，1H)，2.27(s，3H)，2.19-2.00(m，2H)，1.02(s，3H)。LC-MS：(ESI，m/z)：608.2[M+H]+
实例97：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
合成路线
第1步：2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-醇
在25℃下，将1,2,3,4-四氢异喹啉-5-醇(1.0g，6.7mmol)和甲醛(0.4g，13.4mmol)的MeOH溶液(10mL)搅拌10分钟。然后加入氰基硼氢化钠(1.3g，20.1mmol)，并且在25℃下搅拌30分钟。完成后，对混合物进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10:1)进行洗脱，得到2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-醇(0.8g，4.5mmol，收率67.3％)，其为白色固体。LCMS(ESI，m/z)：164.2[M+H]+。
第2步：(S)-4-((R)-7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在室温下，将2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-5-醇(0.8g，4.92mmol)和氢化钠(0.4g，9.84mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(20mL)搅拌20分钟。然后加入(S)-4-((R)-7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(参见实例17a/17b的第9步)(2.0g，2.46mmol)并在60℃下搅拌30分钟。用水(10mL)使反应淬灭，并用二氯甲烷(100mL)进行稀释。用水(30mL×3)洗涤有机层，用无水硫酸钠使其干燥，然后进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10:1)进行洗脱，得到(S)-4-((R)-7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.8g，0.77mmol，收率31.3％)，其为白色固体。LCMS(ESI，m/z)：956.3[M+H]+。
第3步：6-((R)-6-氯-8-氟-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)氧)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N,N-双(4-甲氧苄基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在50℃下，将(S)-4-((R)-7-(6-(双(4-甲氧苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.8g，0.78mmol)的三氟乙酸溶液(10mL)搅拌5小时。浓缩后，用N,N-二异丙基乙胺(10mL)将pH调节至约7。利用反相色谱法纯化所得残余物，用乙腈水溶液(0-40％)进行洗脱，得到6-((R)-6-氯-8-氟-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)氧)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N,N-双(4-甲氧苄基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(0.23g，0.34mmol，收率43.8％)，其为白色固体。LCMS(ESI，m/z)：616.2[M+H]+。
第4步：1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在-78℃下，将6-((R)-6-氯-8-氟-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)氧)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N,N-双(4-甲氧苄基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(0.23g，0.37mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1g，0.75mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)搅拌2分钟。然后加入丙烯酰氯(0.03g，0.37mmol)，并在-78℃下搅拌20分钟。用水(5mL)使反应淬灭。用二氯甲烷(50mL)稀释反应混合物，并用水(20mL×3)进行洗涤。用无水硫酸钠使有机层干燥，并且进行浓缩。利用快速柱层析法在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(10:1)进行洗脱，得到粗产物。利用手性制备型HPLC纯化混合物(色谱柱：CHIRAL ARTCellulose-SB，2×25cm，5μm；流动相A：Hex(8mmol/L氨的甲醇溶液)，流动相B：EtOH；流速：18mL/min)，得到1-((S)-4-((R)-7-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-基)氧基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(38.9mg，0.0575mmol，收率15.4％)，其保留时间为6.942min。LCMS(ESI，m/z)：670.3[M+H]+
实例97：1H NMR(400MHz，DMSO-d6，ppm)7.84(s，1H)，7.19(t，J＝7.8Hz，1H)，6.99(t，J＝8.5Hz，2H)，6.87(s，2H)，6.83-6.74(m，1H)，6.50(s，1H)，6.22-6.12(m，1H)，5.78-5.70(m，1H)，4.54(d，J＝29.3Hz，1H)，4.30-3.86(m，3H)，3.55(td，J＝24.5，23.0，13.2Hz，4H)，3.24-3.02(m，1H)，2.60(d，J＝6.0Hz，2H)，2.57-2.52(m，2H)，2.37(d，J＝2.3Hz，3H)，2.32(s，3H)，1.19(t，J＝5.8Hz，3H)。
由实例1-97得到的数据汇总于表2中。
表2
生物实例
K-Ras G12C、SOS1、Raf RBD均相时间分辨荧光(HTRF)测定对GTP交换的抑制
为测定化合物抑制核苷酸交换的效力，在各种浓度下用K-Ras G12C进行孵育(反应混合物中的浓度为25nm，最终浓度为12.5nm)。在室温下孵育18小时后，添加SOS1 GTP交换因子(交换过程中的浓度为1.67nm，最终浓度为1.25nm)以启动核苷酸与GTP的交换(交换过程中的浓度为200μM，最终浓度为150μM)。通过添加浓度分别以50nm、1nm和12.5nm的源于C-Raf的Ras结合结构域和HTRF检测抗体Tb-anti-FLAG和D2-anti-his(Cis-Bio)，对GTP交换水平进行评估。2小时后，在Envision读板仪(Perkin Elmer)上测量665nm至615nm下的发射与320nm下的激发的比率。
在包含20mM HEPES、150mM NaCl、1mM MgCl2、0.1％ BSA、0.03％ Tween-20和1mMDTT的缓冲液中，ProxiPlate-384F Plus(Perkin Elmer)的最终反应体积为20μL。K-RasG12C(残基2-188)和SOS1(残基564-1049)具有N端6-His、Raf-RBD构建体(RAF1的残基51-186)具有N端Flag-tag。所有构建体均在大肠杆菌中表达，并且在纯化过程中未使用的目标标签和蛋白之间具有Tev裂解位点。HTRF数据列于下面的表3中。
蛋白印迹法检测K-Ras G12C的细胞烷基化
将HCC1171细胞保持在补充有10％ FBS的RPMI1640中。将细胞以20,000个细胞/孔的量接种到96孔板中，第二天将化合物加入细胞中。在37℃下孵育18小时后，将细胞在包含0.5％ SDS和蛋白酶/磷酸酶抑制剂混合物的RIPA缓冲液(Sigma R0278)中裂解。经过混合使其完全裂解后，通过离心除去裂解物，然后从每个孔中转移20μL，并且与上样缓冲液和还原剂混合。在95℃下加热10分钟后，将15μL各个样品上样至4-20％ Tris-甘氨酸凝胶中，并且在SDS-PAGE运行缓冲液中在110V下电泳165分钟。将凝胶转移至硝酸纤维素膜上，封闭1小时，并且在4℃下用抗K-Ras的一抗(多克隆抗体，Proteintech 12063-1-AP)染色过夜。然后彻底清洗膜，并且在室温下用抗兔IRDye 800CW(LI-COR 926-32211)复染一小时。经过最终洗涤后，在LI-COR Odyssey CLx上以中等分辨率对膜进行成像。通过未修饰的K-Ras的电泳迁移，可以看到烷基化K-Ras。为量化这种影响，使用LICOR软件在每个孔的烷基化带和非烷基化带上绘制一个矩形，并测量每个带中的总荧光强度(FI)。然后使用以下公式计算每个孔的烷基化百分比：FI(烷基化)/(FI(烷基化)+FI(非烷基化))×100。
使用7点剂量反应曲线确定各种化合物的IC50。细胞烷基化数据列于下面的表3中。
表3提供了如上所述的HTRF和蛋白印迹分析的结果。
表3.
ND＝未测定
全血稳定性测定
用新鲜血液进行全血稳定性测定，药物最终浓度为1μM。将药物-血液混合物在37℃下孵育180分钟。示例性化合物的半衰期如表4所示。
表4.
实例编号 半衰期(min)
17a 360
18a 240
19 160
59a 390
61 160
62a 310
65 37
67a 250
68a >540
69 >540
70 61
71 91
81a 47
83d >540
84a 420
86 290
92 180
K-Ras G12C活力和选择性3D培养CTG分析
增殖评估可评估化合物对K-Ras G12C驱动的癌细胞系活力和特异性的影响。在超低附着平板上，使用3个G12C驱动(H358、HCC1171和HCC1792)和2个非G12C驱动(PC-9和A427)的细胞系进行增殖评估，以刺激3D类球体的生长。在第1天，以每孔1000个细胞的量将细胞接种到384孔黑色透明圆底超低附着板(Corning 3830)中，加入50μL RPMI1640培养基(其中添加有10％FBS和2mM L-谷氨酰胺)。第二天，添加各种浓度的化合物，使用剂量响应滴定法从20μM开始，并且使最终DMSO含量保持在0.3％。加入化合物7天后，通过添加40μLCTG 3D试剂(Promega G9683)来测定活细胞的数量，该试剂裂解细胞并且产生与释放的ATP量成比例的萤光素酶信号。将平板剧烈振摇25分钟。然后将平板继续孵育10分钟。然后将平板简单地离心，然后在Envision读板仪(Perkin Elmer)上读取发光。仅使用经DMSO处理的孔的发光测定总增殖量，并且使用1μM星形孢菌素确定100％抑制。
******
在前述说明书或所附权利要求中公开的特征以其特定形式或执行所公开的功能的手段或获得所公开的结果的方法或过程的方式表达，它们在适当情况下可单独或以此类特征的任意组合使用，从而以不同的形式实现本发明。
为清楚和便于理解起见，已通过说明和示例方式对上述发明进行了详细描述。对本领域的技术人员显而易见的是，可在所附权利要求的范围内进行改变和修改。因此，应当理解，上述说明旨在为示例性的而非限制性的。因此，本发明的范围不应参考上述说明确定，而应参考下文所附的权利要求以及此类权利要求的等同形式的完整范围确定。
本文所引用的专利、已公开的专利申请和科学文献建立了本领域的技术人员的知识，并且据此全文以引用方式并入本文，如同其具体且单独地引用一样。

Claims (15)

1.一种式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R1是能够与K-Ras G12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分；
R2选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、环丙基和-NHR，其中R选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷酰基、C1-6羟基烷酰基、C1-6氰基烷基、C1-6烷基氨基、-(C1-6亚烷基)NH(CH3)-(C1-6亚烷基)N(CH3)2和-(C1-3亚烷基)(3-7元杂环基)；
R3和R4各自独立地选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和环丙基；
R5选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C1-6烷基氨基和C3-7环烷基，
其中R2、R3、R4和R5中的至少一个并非H；或者
R2和R3、R3和R4、或R4和R5与其各自键合的原子一起形成C3-7环烷基、3至7元杂环烷基、C6-14芳基或5至10元杂芳基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被任选地由1-4个Y1a取代基所取代的4至10元杂环基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基和C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、
C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；并且
n选自由以下项组成的组：0、1和2。
2.一种式(I)的化合物，其具有式(IV)：
或其药学上可接受的盐；
其中，
R1是能够与K-Ras G12C突变蛋白的12位半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分；
X选自由以下项组成的组：NH2、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C3-7环烷基、4至7元杂环基和4至7元杂环基氨基；其每一个任选地被1至4个取代基取代，其中每个取代基独立地选自由以下项组成的组：OH、NH2、卤素、氰基、羧基、氨基甲酰基、C1-6烷基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基和4至7元杂环基；其中两个偕取代基可一起形成C3-7螺环烷基或4至7元螺杂环基；
Y选自由以下项组成的组：-L-Y1或Y1；
Y1选自由以下项组成的组：H、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被任选地由1-4个Y1a取代基所取代的4至10元杂环基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基取代基取代的C1-6烷基、被C1-6二烷基氨基环丙基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、被C1-6烷基取代的C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、被C1-6二烷基氨基取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环基、被甲基、羟基和氧代基团取代的4至10元杂环基；
每个Y1a独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3至7元杂环基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代、羟基、NH2、氰基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C1-6羟烷基、
C1-6卤代烷氧基；
L选自由以下项组成的组：化学键、O、S和N(La)；
La选自由以下项组成的组：氢和C1-3烷基；
U为C(R6a)；
V为C(R6b)；
W为C(R6c)或N；
R6a、R6b和R6c中的每个独立地选自由以下项组成的组：H、OH、NH2、卤素、氰基、氨基甲酰基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、被4至10元杂环基取代基取代的C1-6烷基、C1-6烷基硫烷基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷硫基、C2-6炔基、C1-6烷基氨基、C6-14芳基、C1-6氨基烷基、C1-6氨基甲酰基烷基、C1-6羧基烷基、C1-6氰基烷基、C3-7环烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6卤代烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环基；
n选自由以下项组成的组：0、1和2；并且
R11选自由以下项组成的组：
3.一种化合物或其药学上可接受的盐，如表1所提供。
4.一种药物组合物，其包含权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。
5.一种治疗癌症的方法，其包括向有此需要的个体施用治疗有效量的权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者权利要求4所述的药物组合物。
6.一种用于调节K-Ras G12C突变蛋白活性的方法，所述方法包括使所述突变蛋白与权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐反应。
7.一种用于抑制细胞群增殖的方法，所述方法包括使所述细胞群与权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐接触。
8.一种用于治疗有此需要的个体的由K-Ras G12C突变介导的疾患的方法，所述方法包括：
确定所述个体是否具有所述突变；以及
如果确定所述个体具有所述突变，则向所述个体施用治疗有效量的权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，
或者权利要求4所述的药物组合物。
9.一种用于制备带标记的K-Ras G12C突变蛋白的方法，所述方法包括使K-Ras G12C突变蛋白与权利要求1-3中任一项所述的带标记的化合物或其药学上可接受的盐反应，以得到所述带标记的K-Ras G12C突变蛋白。
10.一种用于抑制肿瘤转移的方法，其包括向有此需要的个体施用治疗有效量的权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者向有此需要的个体施用治疗有效量的权利要求4所述的药物组合物。
11.权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在生产用于治疗癌症的药物中的用途。
12.权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在生产用于抑制肿瘤转移的药物中的用途。
13.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者根据权利要求4所述的药物组合物，其在通过疗法治疗人或动物体的方法中的用途。
14.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者根据权利要求4所述的药物组合物，其在治疗癌症的方法中的用途。
15.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或者根据权利要求4所述的药物组合物，其在抑制肿瘤转移的方法中的用途。
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