CN1177884C - 球状线性的含多糖的微粒 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有均匀颗粒形状和大小分布极窄的微粒，它们全部或部分地由水不溶的线性多糖、优选1，4-α-D-多葡聚糖组成，并可以含有特别是其他的生物可降解的聚合物和/或活性物质。它们尤其适合于活性物质的受控传递。制备它们的方法为：将1，4-α-D-多葡聚糖或多糖溶解于溶剂中，将该溶液导入沉淀剂中，冷却得到的混合物，并移去形成的微粒。

Description

球状线性的含多糖的微粒
本发明涉及含有线性多糖的球状微粒、它们的制备方法和其用途，特别是它们对于活性物质受控传递的用途。
用聚合物例如多糖制备各种用途的颗粒的、特别是微粒的方法是需要严格依从各种参数的相当复杂的过程，特别是许多方法还仅获产率低和颗粒分布极宽的结果。应当加以介绍的、与之有关的方法特别是喷雾干燥、相界面冷凝和乳化的方法(例如WO方法＝油包水乳化液，WOW＝水包油-油包水乳化液，凝聚作用，相分离，弥散)。特别是两相系统的乳化方法和喷雾干燥法均需非常严格的过程，并且在多数情况下需要使用助剂(乳化剂)。常以昂贵的花费和要严格控制大量的参数(温度、搅拌速度等)才能够制备稳定的乳化剂，并且全面分离出颗粒会涉及一些问题。颗粒的产率通常非常低，特别是截留活性物质的比例不足。这是在昂贵的药物活性物质实例中可能妨碍将该技术应用的一个方面。
根据US-PS5391696，一方面通过喷雾干燥可得到除含酒石酸的缩聚物以外也可以含有乙基淀粉或其他多糖的球状微粒，但其颗粒大小、尤其是大小的分布却极难控制。在该专利中描述的另一种可能是将聚合物溶解在溶剂或溶剂混合物中，并将该溶液滴加到冷液化气如液体氮中，形成球状颗粒，然后，将该小珠导入水中，同时沉淀聚合物并萃取溶剂。该方法是费时、浪费和不经济的，颗粒大小的均匀度也不符合要求。
EP-B1-0251476描述了用其中分散着大分子多肽的聚交酯制备微粒的方法，在该实例中也需要加强控制各种参数，但得不到球状颗粒。
含有活性物质和气体的微粒在WO95/07072中有所描述，制备所采用的是复杂的乳化方法，颗粒的大小分布非常不均匀。
Yu Jiugao和Liu Jie在淀粉46(7)252-5(1994)中描述了悬浮液-交联-反应条件对于淀粉微珠大小的影响。交联以三个阶段进行，介质是油包水悬浮液，花生油/甲苯混合物作为油相，预胶凝的淀粉被作为含有氢氧化钠和乙二胺四乙酸的水溶液加进去，还需要表面活性剂或稳定剂的存在。
上述方法的缺点是，其结果依赖于众多的因素，即依赖于水相和油相的密度、粘稠度和浓度，依赖于稳定剂和搅拌速度，此外，稳定剂的存在是不利的，加之难以控制大量的给定参数，致使不能满足其重复性。
载有大分子活性物质、并由水不溶的聚合物如聚乳酸或乙基纤维素组成的颗粒可根据公开的EP-B1-0 204 476而得到，其中通过将颗粒活性物质悬浮于聚合物的丙酮溶液中并在室温下蒸发掉溶剂。在该实例中得到的颗粒仍不显示所需的药理效果，致使需要进一步加工成所谓的小丸片。
虽然球状微粒和其制备方法是已知的，但是仍需具有改性的微粒和需要具有更优越、特别是更经济和易重复的制备方法。因此、本发明的目的是提供进一步规则的球状微粒，此外它显示尽可能窄的大小分布，即具有极大的均匀性，以及能够用于许多目的。本发明的另一个目的是提供制备这些颗粒的方法，它简便和经济，制得的颗粒具有规则的结构且极其均匀，并且具有良好的机械性能，是可生物降解的、能够提供各种活性物质并特别适于活性物质的受控传递。
通过平均直径为1nm-100μm、全部或部分地由至少一种水不溶的线性多糖组成的球状微粒来达到该目的。
球状微粒是指具有近似于球形的微粒，如果用从共同的原点向着空间用等长轴-它定义为在空间的所有方向上球的半径-来描述球，那么球状微粒的轴长度可以相对球的理想状态偏离1％-40％。优选的球状微粒的偏离达25％，特别优选达15％。球状微粒的表面与树莓的表面对比，意图使“凹槽”或“凹陷”的深度不超过球状微粒平均直径的20％。
本发明的“线性的水不溶的多糖”是由单糖、二糖或其他单体结构单元组成的多糖，单糖、二糖或其他单体结构单元总是以相同方式连接在一起。在各实例的各自单体中，以该方式确定的每个基本单元或结构单元仅具有两个键其中一个接向另外一个单体。例外的是形成多糖起始和结尾的两个基本单元，这些基本单元具有唯一的连接另外一个单体的一个键。当具有三个连接键(共价键)时，则存在着所谓的分支，本发明线性的水不溶的多糖多数情况下没有或仅有极小程度的分支，致使常规分析方法无法检出极少比例的分支。
术语“水不溶的多糖”是指落入德国药典(DAB＝德国医药大全，科学出版股份有限公司，斯图加特，Govi-出版股份有限公司，法兰克福，第9版，1987)符合4-7类限定的“少量溶”“难溶”“极难溶”和“实际上不溶”化合物分类的本发明化合物。
在本发明范围内，优选的是用生物技术、特别是生物催化、还有生物转化或发酵方法制备的线性的水不溶的多糖。
通过生物催化剂(还有生物转化)制备的本发明线性的多糖是指在合适的条件下、用所谓的生物催化剂、通常是酶、通过单体结构单元如寡糖例如单一或二糖的催化反应制备的线性多糖。
从发酵制备的、本发明术语名词所称的线性多糖是通过用天然生物体如真菌、藻类或细菌的发酵方法或用非天然生物体、但是带有辅助的通过基因工程的方法改变的天然有机体如通常限定的真菌、藻类或细菌的发酵方法制备得到的线性多糖，或可以用相关的和辅助的发酵方法制备得到的线性多糖。
本发明线性聚合物除了优选的1，4-α-D-多葡聚糖外，也可以是其他多葡聚糖或其他线性多糖如支链淀粉酶、果胶、甘露聚糖或聚果聚糖。
此外，通过用酶以断裂存在的分支-使其除去后，剩下线性多糖-的方式处理带有分枝链的非线性多糖，从其他非线性多糖的反应也能够得到用以制备本发明所述微粒的线性聚合物。所说的酶可能为例如淀粉酶、异淀粉酶、葡糖酸水解酶或支链淀粉酶。
在本发明的一个特别有益的实施方案中，球状微粒由全部或部分1，4-α-D-多葡聚糖组成。优选通过生物催化(生物转化)方法、用多糖合成酶、淀粉合成酶、糖基转移酶、α-1，4-葡聚糖转移酶、糖元合成酶、淀粉蔗糖酶或磷酸化酶制备1，4-α-D-多葡聚糖。
本发明所用的线性多糖的分子量Mw可以在103g/mol-107g/mol的范围内变化。优选应用的线性多糖1，4-α-D-多葡聚糖的分子量Mw优选在104g/mol-105g/mol、特别是在2×104g/mol-5×104g/mol的范围内变化。
现在已经令人吃惊地发现，通过非常简便的、采用水不溶的线性多糖的方法能够大量制备非常均匀的微粒，它们是从市售可得的多糖如直链淀粉或淀粉无法得到的。
因此本发明还涉及制备全部或部分由水不溶的线性多糖、特别是1，4-α-D-多葡聚糖组成的球状微粒的方法，该方法中，将水不溶的线性多糖或1，4-α-D-多葡聚糖溶于溶剂中，在20-70℃下将溶剂导入沉淀剂中混合，冷却至+10至-10℃得到的混合物并移去形成的微粒，权利要求20-23特别给出了本发明方法的特别有益的实施方案。
在另一个有益实施方案中，通过酶处理支链的或高度支链的多糖来制备线性的水不溶的多糖。
二甲基亚砜是优选的溶解线性多糖的溶剂。其他可选的溶剂还有：甲酰胺、乙酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、水存在下的N-甲基吗啉-N-氧化物和其他N-取代的吗啉-N-氧化物的高-或低pH值水溶液。
水是优选的沉淀剂，通过使用能够全部或部分取代水的其他溶剂如二氯甲烷，能够影响本方法，尤其是能够控制沉淀过程的持续时间和颗粒表面的纹理。带有醇例如甲醇、乙醇、异丙醇的水混合物也适于影响工艺方法的参数和颗粒的性质。
沉淀过程期间的温度通常优选5℃至-5℃的范围，但是也可采用较高或较低的温度如10℃至-10℃。
沉淀过程能够在低的温度下相对缓慢地过夜进行或通过改变沉淀剂和温度对其加以影响。
也能够用合适的助剂影响颗粒的性质如大小、表面纹理等和影响对方法的控制。合适的添加剂的实例是表面活性物质如十二烷基磺酸钠或N-甲基葡萄糖酰胺、糖如果糖、蔗糖、葡萄糖。
表面活性物质可以是天然阴离子、阳离子或非离子的。
表面活性物质的通常实例是：
聚山梨酸酯(例如Tween)、烷基聚乙二醇醚、环氧乙烷/环氧丙烷嵌段共聚物(例如Pluronic)、聚乙二醇醚硫酸烷基酯、烷基硫酸盐(例如已介绍过的十二烷基磺酸钠)、脂肪酸乙二醇酯。优选将添加剂加到沉淀剂中。
溶液中线性多糖的浓度可以在宽限内变化，但是优选0.1g多糖/1ml溶剂。
可以是其他范围如0.05g/ml-0.2g/ml或0.02g/ml-0.5g/ml。
本发明颗粒可以由至少一种线性多糖组成，并可以含有至少一种活性物质，其表面可以是光滑或粗糙的。
微粒可以由单独的线性多糖、特别是1，4-α-D-多葡聚糖组成。然而，也能够混合另一种线性的水不溶的多糖，也可以使用其他聚合物、尤其是其他生物相容的或可生物降解的聚合物。能够共同混入的其他聚合物的量-若不加，则会对球的形状和微粒的其他良好性质产生不利改变-取决于加入的聚合物本身。该量可以达10％或更高，在某些情况下也可少些。通过少量混合试验，能够很容易地测定可接受的最大量。
颗粒可以具有的平均直径(数均值)如为1nm-100μm，优选100nm-10μm，特别优选1μm-3μm。
颗粒显示的一个特征是，直径dw/dn(分散度)的值为1.0至10.0，优选1.5至5.0，特别优选2.0至2.6。
dn＝数均直径
dw＝重均直径
在此所用的均值如下限定：
dn＝∑ni×di/∑ni＝数均值
dw＝∑ni×di2/∑ni×di＝重均值
ni＝具有直径di的颗粒数
di＝确定的颗粒直径
i＝连续的参数。
术语“重量”在此不代表质量，而代表加权平均数。较大的直径较为重要；剩方2对较大颗粒直径给出较大加权。
将颗粒直径分布的分散度限定为D＝dw/dn。
将直径分布的非均匀性限定为U＝dw/dn-1＝D-1。
非均匀性的值越接近“0”，则指在大小分布方面颗粒越均匀。
特别因其均匀的形状和大小，微粒也能够例如以纯化的方式或通过携带在最广的意义上的活性物质的方式用在各种用途中，例如：
-作为软膏、扑粉、乳膏、糊剂等的添加剂，
-作为药物或其他用途中活性物质的赋形剂，
-作为如闭合孔隙或修平毛刺的润滑剂，
-作为例如填充成分或改进流变性质的食物添加剂，
-作为改进如乳液聚合物的添加剂，
-作为例如除去杂质的分离辅剂，
-作为胶囊材料，
-作为作为磁性颗粒的载体，
-作为控制性质的、用于生物可分解的聚合物或工业聚合物中的填料，
-作为控制性质例如孔隙度、重量、颜色等的添加剂，
-作为调校或测定未知材料的颗粒大小的颗粒标准。
单独的活性物质或组合的活性物质能够从下列清单中选用：
药物活性物质，药物，药用物质，肽，蛋白质，核酸，疫苗，抗生素，类固醇，寡聚核苷酸，调味品，芳香剂，肥料，农用活性物质如农药、除草剂、杀虫剂、杀真菌剂，有特殊性质的化学品如发光物质、乳化剂、表面活性剂、色素、氧化剂、还原剂、填料(Fullerene)、磁性配合物如顺磁化合物。
本发明还涉及上述微粒在活性物质受控如延迟释放中的用途。
方法包括非常简单的过程，制备颗粒的参数、如溶剂与沉淀剂的比例、沉淀过程中的温度、溶液浓度、向沉淀剂加入溶液的速率可被定在宽的范围内。
颗粒以其粒子大小和直径分布具有极好的均匀性而独具持色。
初始聚合物如1，4-α-D-多葡聚糖的水不溶性能够使它获得特别有利的应用，其中微粒不会迅速分解破坏，且因此也能够特别有利地用在水作为另一种成分存在的产品中。
微粒以其能暴露于高机械应力的能力而出众。
特别是因为颗粒的结构形态和均匀性，使它们具有如对孔隙的修平效果。
优选使用的1，4-α-D-多葡聚糖能够用各种方法制备，非常有益的方法描述于WO95/31553，在该出版物中公开的内容在此引为参考。
借助下列实施例详细地解释本发明。
实施例1
1，4-α-D-多葡聚糖微粒的制备
在大约70℃，将500mg 1，4-α-D-多葡聚糖溶解于2.5ml二甲基亚砜(DMSO，分析级，得自于Riedel-de-Haen)中，伴随着搅拌，将DMSO溶液滴加到100ml双蒸水中，并使溶液在5℃下过夜，以3500转/分的转速，将细粒乳状悬浮液离心15分钟并倾析出上层液，将沉淀悬浮于双蒸水中并再次离心。重复此过程两次以上，其后，冷冻干燥悬浮液，得到311mg白色1，4-α-D-多葡聚糖颗粒，相当于产率为62％的无色微粒。
实施例2
用从植物中分离出的直链淀粉制备微粒的试验
在大约70℃，将500mg直链淀粉(从马铃薯中分离，得自于EGA-Chemie)溶解于2.5ml二甲基亚砜(DMSO，分析级，得自于Riedel-de-Haen)中，DMSO溶液高度粘稠，伴随着搅拌，将其加到100ml双蒸水中并使溶液在5℃下过夜，形成白色絮凝悬浮液，如实施例1所述进行下一个步骤，得到210.3mg包括非颗粒结构的白色固体(产率为42％)。
实施例3
用从植物中分离出的直链淀粉制备微粒的试验
使用Merck提供的500mg直链淀粉(制备商标出：“生化目的的直链淀粉”)，用类似于实施例2的方法进行该尝试。静止过夜后，形成白色絮凝悬浮液，如实施例1所述进行下一个步骤，得到60mg带有非常多孔的结构形态和结构的白色固体(产率为12％)。在类似于参考实施例2的该参考实施例中，没有发现特殊的颗粒状结构。
实施例4-8
用从各种植物中分离出的淀粉制备微粒的试验
在大约70℃，将500mg淀粉(参见说明书表1)溶解于2.5ml二甲基亚砜(DMSO，分析级，得自于Riedel-de-Haen)中，不形成溶液，混合物形成粘稠胶，伴随着搅拌，将其加到100ml双蒸水中。在此期间、该胶消散，使溶液在5℃下过夜，形成带有大量大白片雾状的悬浮液。如实施例1所述进行下一个步骤，实施例的结果列于表1中，很明显，2-8的所有参考实施例中的非线性多糖或其他起始物质与实施例所述的本发明的结果有极大的差别，没有例外，均形成浓重的混浊度和/或大白片。
无法观察到颗粒状的结构，此外，参考实施例2-8的固体产率明显低于实施例1。
表1：
在水中，各种淀粉-DMSO溶液沉淀的结果
实施例 淀粉类型 线性多糖的比例(％) DMSO溶液的稠度 5℃沉淀后悬浮液的粘稠度 最终重量(mg) 产率(％)
 1 1，4-α-D-多葡聚糖*1 100 澄清、低粘稠度溶液 细粒乳状悬浮液 311.0  62
 2 直链淀粉*2(EGA-Chemie) 90-100 2天后溶解，高粘稠度 带有片状的、细粒的悬浮液 210.3  42
 3 直链淀粉*2(Merck) 95-100 2d后溶解，加热高粘稠度 带有片状的、细粒的悬浮液 60.0  12
 4 马铃薯ToffenaTM(Süd-strke) 20 固体胶，澄清 重度混浊 不可分离(离心)  -
 5 玉米淀粉(Merck) 20 粘稠胶 轻度混浊，大片状 83.8  17
 6 玉米淀粉C(National淀粉) 50 粘稠胶 重度混浊，小片状 101.7  20
 7 玉米淀粉HVII(National淀粉) 70 粘稠胶 重度混浊，小片状 211.1  42
 8 豌豆(直链淀粉KG) 70 粘稠胶，雾状 重度混浊，大片状 115.9  23
*1水不溶的
*2水溶解的
实施例9a和b
用1，4-α-D-多葡聚糖大规模制备微粒
a)在60℃下，于1.5小时内，将g的1，4-α-D-多葡聚糖溶解于2升的二甲基亚砜(DMSO，分析级，得自于Riedel-de-Haen)中，然后，室温下搅拌溶液1小时，伴随着搅拌，通过滴液漏斗在2小时内将该溶液加到20升双蒸水中，在4℃下，贮存该混合物44小时，形成细颗粒悬浮液。分离其沉淀并将其上清液滗析掉将底部物质均浆并以小批分份离心(RC5C超速离心：5000转/分钟，每次5分钟)，将固体残渣悬浮于双蒸水中并再次离心，总共三次，收集固体并将大约1000ml的悬浮液冷冻干燥(Christ Delta 1-24KD)，分离得到283g白色固体(71％产率)。
b)将收集的悬浮物贮存于-18℃过夜，进一步的过程如上述。进一步分离得到55g白色固体(15％产率)。
该方法的总产率是85％无色微粒。
实施例10
微粒的脱硫化作用
除去残留于颗粒中的二甲基亚砜的过程如下：
将100g实施例9中的1，4-α-D-多葡聚糖加到1000ml去离子水中，温和搅拌混合物24小时，如实施例9所述移去颗粒(RC5C超速离心：3000rpm，每次15分钟)，冷冻干燥后的最终重量是98.3g(98％产率)，由元素分析测定硫，得到下列值(测试方法：燃烧和IR测定)：
实施例9颗粒的硫含量：     6％+/-0.1％
实施例10颗粒的硫含量：    ＜0.01％
实施例11
通过电镜照相法测定实施例1-9的固体
用扫描电子显微照片(SEM)(Camscan S-4)对颗粒进行鉴定，测定结果记录在表2中，显然，唯一得到球状微粒的情况是使用了水不溶线性多糖(1，4-α-D-多葡聚糖)。相反，使用其他起始聚合物时仅产生多孔、棉状和非颗粒状的结构形状，其分散度无法测定，实施例1中得到的颗粒结构显现于附图1和2中。
表2：
实施例1-3和7-9的固体和颗粒的性状特征
实施例 淀粉类型 线性多糖的比例(％) 颗粒外观
1 1，4-α-D-多葡聚糖*1 100 圆形独立颗粒
2 直链淀粉*2(EGA-Chemie) 90-100 絮凝、多孔、棉状(即非独立的颗粒)
3 直链淀粉*2(Merck) 95-100 絮凝、多孔、棉状(即非独立的颗粒)
7 玉米Hylon HVII(Nationalstarch Chemistry) 70 絮凝、棉状(即非独立的颗粒)
8 豌豆(直链淀粉KG) 70 絮凝、棉状(即非独立的颗粒)
9a 1，4-α-D-多葡聚糖*1 100 圆形独立颗粒
9b 1，4-α-D-多葡聚糖*1 100 圆形独立颗粒
*1水不溶的
*2水溶解的
实施例12
实施例1-9的颗粒大小分布的研究
用mastersizer(Malvern仪器公司)对实施例1-9的颗粒的大小分布进行定性研究，研究在密度为1.080g/cm3和体积浓度范围为0.012％-0.014％的Fraunhofer模型(评价：多模式，数值)中进行，该研究结果列于表3中，该结果显示微粒有极好的均匀性。
实施例13
用淀粉蔗糖酶、以生物催化方法体外制备1，4-α-D-多葡聚糖
将10升20％浓度的蔗糖溶液置于一个15升消毒的容器(蒸汽消毒)中，一次性加入含有淀粉蔗糖酶的酶提取物，该试验中的酶活性计为16单位，装置上配备有同样消毒了的全玻璃搅拌器。将容器冷却并伴随搅拌于37℃放置，仅数小时后便形成白色沉淀，180小时后停止反应，将沉淀滤出并用水洗涤5次，以除去低分子量糖，用膜式泵(CVC2型，Vacuubrand Gmbh & Co)，在真空、40℃、干燥箱中干燥过滤器上的残渣，用该方法得到的1，4-α-D-多葡聚糖能够直接用于品质鉴定和制备微粒。
实施例14
用实施例13中淀粉蔗糖酶合成的水不溶1，4-α-D-多葡聚糖的品质鉴定
在室温下，将2mg 1，4-α-D-多葡聚糖溶解于二甲基亚砜(DMSO，分析级，得自于Riedel-de-Haen)中并过滤(2μm过滤器)，将一部分溶液注入凝胶渗透层析柱中，用DMSO为洗脱剂。信号强度通过R1检测仪测定并对照pullulan标准(由聚合物标准系统公司提供)估算，流速为1.0ml/分钟。
测定显示，14,200g/mol的数均分子量(Mn)和29,500g/mol重均分子量(Mw)，这相应于2.1的分散度。
表3：
实施例1和9的颗粒直径的表征
实施例               直径              颗粒分布范围
实施例号  dn *1(μm)  dw *2(μm)  dw/dn *3  d(10％)*4(μm)   d(50％)*5(μm) d(90％)*6(μm)
    1  1.282  2.692  2.100   0.991   1.263   1.776
    9a  1.664  4.184  2.541   0.873   1.504   2.624
    9b  0.945  2.345  2.481   0.587   0.871   1.399
*1dn：     直径的数均值
*2dw：      直径的重均值
*3dw/dn：  颗粒直径的分散度
*4d(10％)：所有颗粒的10％具有小于规定值的直径
*5d(50％)：所有颗粒的50％具有小于规定值的直径
*6d(90％)：所有颗粒的90％具有小于规定值的直径

Claims (27)

1.具有平均直径为100nm-10μm、全部或部分地由水不溶的线性1，4-α-D-多葡聚糖组成的球状微粒，其中颗粒具有的分散度为1.0-10.0，且独立存在。
2.如权利要求1的球状微粒，其由至少一种生物工程方法制备。
3.如权利要求1的球状微粒，其由至少一种生物催化方法制备。
4.如权利要求1的球状微粒，其由至少一种发酵方法制备。
5.如权利要求1的微粒，其特征在于，1，4-α-D-多葡聚糖通过生物催化方法用多糖合成酶制备。
6.如权利要求1的微粒，其特征在于，1，4-α-D-多葡聚糖通过生物催化方法用淀粉合成酶制备。
7.如权利要求1的微粒，其特征在于，1，4-α-D-多葡聚糖通过生物催化方法用糖基转移酶制备。
8.如权利要求1的微粒，其特征在于，1，4-α-D-多葡聚糖通过生物催化方法用α-1，4-葡聚糖转移酶制备。
9.如权利要求1的微粒，其特征在于，1，4-α-D-多葡聚糖通过生物催化方法用糖元合成酶制备。
10.如权利要求1的微粒，其特征在于，1，4-α-D-多葡聚糖通过生物催化方法用淀粉蔗糖酶制备。
11.如权利要求1的微粒，其特征在于，1，4-α-D-多葡聚糖通过生物催化方法用磷酸化酶制备。
12.如权利要求1的微粒，其特征在于，线性1，4-α-D-多葡聚糖通过用酶处理支链的或高度支链的多糖制备。
13.如权利要求1-12中任一项的微粒，该微粒的平均直径为1-3μm。
14.如权利要求1-12中任一项的微粒，其特征在于，颗粒直径的分散度dw/dn是1.5-5.0。
15.如权利要求1-12中任一项的微粒，其特征在于，颗粒直径的分散度dw/dn是2.0-2.6。
16.如权利要求1-12中任一项的微粒，该微粒还包含一种或多种聚合物。
17.如权利要求16的微粒，其中所述聚合物是可生物降解的。
18.如权利要求1-12中任一项的微粒，该微粒还包含一种或多种活性物质。
19.制备全部或部分地由1，4-α-D-多葡聚糖组成的球状微粒的方法，该方法中，将水不溶的线性1，4-α-D-多葡聚糖溶解于一种溶剂中，将该溶液导入沉淀剂中，将混合物冷却，分离所形成的微粒。
20.如权利要求19的方法，其特征在于，在20-70℃下混合溶液和沉淀剂，将混合物冷却至+10至-10℃的温度。
21.如权利要求20的方法，其特征在于，将混合物冷却至5至-5℃。
22.如权利要求19-21之一的方法，其特征在于，将二甲基亚砜用作溶剂。
23.如权利要求19-21之一的方法，其特征在于，将水或水溶液介质用作沉淀剂。
24.如权利要求19-21之一的方法，其特征在于，在一种或多种聚合物和/或一种或多种活性物质的存在下制备溶液。
25.如权利要求24的方法，其特征在于，所述聚合物是可生物降解的。
26.如权利要求1-12中任一项的微粒或如权利要求19-21之一的方法制备的微粒在活性物质受控传递方面的用途。
27.如权利要求1-12中任一项的微粒或如权利要求19-21之一的方法制备的微粒作为测定颗粒大小的标准样品方面的用途。
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