CN117431191B - 一种假蕈状芽孢杆菌hdcp1及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种假蕈状芽孢杆菌HDCP1及其应用，具体涉及一种耐盐碱、广谱抗病和具有促生作用的假蕈状芽孢杆菌HDCP1，属于微生物技术领域。所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1的保藏信息为：保藏编号为CGMCC No：28575，保藏日期为2023年9月28日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为假蕈状芽孢杆菌（Bacillus pseudomycoides）。本发明对葡萄灰霉、草莓暹罗炭疽菌、玉米胶孢炭疽菌、梨轮纹病、大豆疫霉和马铃薯致病疫霉这六种供试植物病原真菌具有较好的抑菌效果，耐盐碱，对多种植物具有促生作用。可作为土壤改良、广谱防病和促生的微生物菌剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种假蕈状芽孢杆菌HDCP1及其应用，具体涉及一种耐盐碱、广谱抗病和具有促生作用的假蕈状芽孢杆菌HDCP1，属于微生物技术领域。
背景技术
植物病害是限制农业生产的重要因素，常造成农产品产量损失和品质下降，严重影响着粮食安全。做好植物病害防治具有重要的经济效益、生态效益和社会效益。社会发展对病害防治提出更高要求，既要将病害控制在经济损失允许范围内，又要降低农药的使用量和残留，保护生态环境。因此，开展植物病害的绿色生物防治十分必要。
芽孢杆菌属于革兰氏阳性细菌，在自然界中普遍存在，可从所有的环境生态位中分离。芽孢杆菌属常用来制备农业、工业和医药产品。生物肥料可以作为化肥和农药的替代品，有效拮抗植物病原菌，防止病害的发生或流行，促进植物生长，提高产量。对植物有益的芽孢杆菌在植物根表面形成生物膜，可以促进植物生长。在土壤中施用芽孢杆菌类肥料还可以提高植物根际可利用的养分，控制病原微生物的生长，诱导植物产生对病原菌的抗性。
随着葡萄栽培面积的扩大，葡萄生产中发生的病害日益严重，其中灰霉病是我国葡萄产业最主要的病害之一，以南方地区危害最为严重，该病原菌侵染葡萄叶片、花序和果实，造成大批落果，减产高达50%，对葡萄生产形成很大的威胁，而生物防治是绿色防控技术的首选。
作为全球第三大盐碱地分布国家，中国有近15亿亩盐碱地，相当于现有耕地面积的近八成。15亿亩中约5亿亩有开发利用潜力，如此大面积的土地资源，若能充分利用，将有效增加耕地、保障粮食安全。生物改良或称生物修复是近年来发展较快的盐碱地改良新兴技术，它通常包括植物修复与微生物修复。生物修复措施较之工程措施改良盐碱地具有经济和生态效益高、节省能源和淡水、改良效果持久、可推广应用面积大等诸多优点。
发明内容
本发明提供了一种耐盐碱、广谱抗病和具有促生作用的假蕈状芽孢杆菌HDCP1（Bacillus pseudomycoides）及其应用。本发明获得的假蕈状芽孢杆菌不仅可以有效改良酸、碱土壤，还有效拮抗葡萄灰霉（Botrytis cinerea）、草莓暹罗炭疽菌（Colletotrichum siamense）、梨轮纹菌(Physalospora piricola)、玉米胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）、大豆疫霉（Phytophthora sojae）和马铃薯致病疫霉（Phytophthora infestans），且在葡萄灰霉的离体接种实验中能显著降低葡萄的发病率，减少由此带来的产量损失，在植物真菌病害的防治方面具有广阔的应用前景；所述菌株还能有效促进生菜和黄瓜的生长，在100mM NaCl环境中，能显著提高水稻种子的萌发率。所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1的保藏信息为：保藏编号为CGMCC No：28575，保藏日期为2023年9月28日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为假蕈状芽孢杆菌（Bacillus pseudomycoides）。
所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1在NA固体培养基上逆时针旋转生长，形成类似真菌的乳白色菌落，且液体发酵物类似真菌，形成菌丝球，菌体细胞呈杆状，串生，有刺鼻气味。此外，所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1更适宜在NaCl浓度为100 ~ 400 mM的NA培养基中生长。
本发明还包括所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1的发酵液，所述发酵液的制备方法，步骤如下：
挑取所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1的单菌落，接种于NA液体培养基中，180rpm，过夜培养，得到种子液；按照1％（v/v）的接种量将种子液接种于NA液体培养基，180rpm，培养48h，得到假蕈状芽孢杆菌HDCP1的发酵液；所述培养条件为pH5.0~9.0，培养温度为25~37℃；优选培养条件为pH 8.0，培养温度为37℃；装液量为40%。
本发明还包括含有所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1的制剂，或者含有所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液的制剂。
本发明还包括，所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1、假蕈状芽孢杆菌HDCP1的发酵液、含有所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1的制剂，或者含有所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液的制剂在耐盐、酸土和盐碱土改良、植物真菌病害的防治，以及促进植物生长中的应用。所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1在接种到酸性或碱性土壤培养后，能调节酸土或碱土的pH接近中性。
所述植物病原真菌为葡萄灰霉（Botrytis cinerea）、草莓暹罗炭疽菌（Colletotrichum siamense）、玉米胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）和梨轮纹菌(Physalospora piricola)、大豆疫霉（Phytophthora sojae）和马铃薯致病疫霉（Phytophthora infestans）。
所述植物为黄瓜或者生菜。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
（1）本发明获得的假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液以及含有发酵液的制剂均具有耐盐碱性能，显著提高了含盐环境下水稻种子的萌发率，且可以有效调节酸性或碱性土壤的pH。
（2）本发明获得的假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液以及含有发酵液的制剂均具有广谱抑菌效果，对葡萄灰霉菌（Botrytis cinerea）、草莓暹罗炭疽菌（Colletotrichum siamense）、玉米胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）、梨轮纹菌（Physalospora piricola）、大豆疫霉（Phytophthora sojae）和马铃薯致病疫霉（Phytophthora infestans）的抑菌率分别为62.56%、69.32%、77.28%、69.10%、82.76%和86.60%。
（3）本发明获得的假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液以及含有发酵液的制剂可以提高提高生菜的叶片数、鲜重和叶绿素含量，还能够提高黄瓜的株高和叶绿素含量，具有显著的促生作用。
综上，本发明提供的假蕈状芽孢杆菌HDCP1、其发酵液以及含有发酵液的制剂具有良好的土壤改良作用，提高含盐环境下种子的萌发率，且可作为广谱防病和促生的微生物菌剂。
附图说明
图1 为假蕈状芽孢杆菌HDCP1的形态特征图；其中，A为假蕈状芽孢杆菌HDCP1在NA固体培养基上的形态特征图；B为假蕈状芽孢杆菌HDCP1在NA液体培养基中的摇瓶发酵物形态特征图；C为假蕈状芽孢杆菌HDCP1的杆状菌体细胞图。
图2为基于16S rDNA序列构建的假蕈状芽孢杆菌HDCP1的系统进化树。
图3为假蕈状芽孢杆菌HDCP1的生长曲线图；其中A为假蕈状芽孢杆菌HDCP1在24小时内的生长曲线图；B为假蕈状芽孢杆菌HDCP1在11天内的生长曲线图。
图4 为NA固体培养基上的假蕈状芽孢杆菌HDCP1在不同温度条件下的生长情况图。
图5 为NA液体培养基中的假蕈状芽孢杆菌HDCP1在不同pH条件下的生长情况图。
图6为假蕈状芽孢杆菌HDCP1的耐盐特性图。
图7为假蕈状芽孢杆菌HDCP1耐盐特性的应用情况图。
图8为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对酸性土壤pH的改良效果图。
图9为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对碱性土壤pH的改良效果图。
图10为假蕈状芽孢杆菌HDCP1的平板抑菌效果图。
图11假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对葡萄灰霉病的防治效果图；A为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液在葡萄灰霉离体接种葡萄叶片上的防治效果图；B为葡萄灰霉离体接种的病斑面积图。
图12为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对生菜的促生效果图；A为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对盆栽生菜的促生效果图；B为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对生菜株高的影响图；C为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对生菜叶片数量的影响图；D为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对生菜鲜重的影响图； E为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对生菜叶绿素含量的影响图。
图13为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对黄瓜的促生效果图；A为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对盆栽黄瓜的促生效果图； B为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对黄瓜株高的影响图；C为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液对黄瓜叶绿素含量的影响图。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步描述本发明内容，使本发明的优点和特点更加清楚。但实施例仅是范例性的，对本发明的范围并不构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和实质的情况下，可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均属于本发明的保护范围。
实施例1假蕈状芽孢杆菌HDCP1的分离与鉴定
1.1菌株的分离
菌株HDCP1分离自北京市海淀区土壤样品。采用稀释涂布法，将稀释后澄清的土壤上清液涂布于NA固体培养基上（每升含胰蛋白胨10 g，牛肉浸膏5 g，氯化钠10 g，琼脂粉15g，pH 8，121℃灭菌20min），28℃，培养3天，经过2轮筛选分离得到假蕈状芽孢杆菌（Bacillus pseudomycoides）HDCP1，该菌株的保藏编号CGMCC No：28575，保藏日期2023年9月28日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
1 .2菌株的形态学鉴定
将菌株HDCP1的NA液体摇培物（OD600=0.8）5μL接种于NA固体培养基上，28℃过夜培养，可形成乳白色菌落，形态类似真菌菌落，且呈逆时针旋转生长（图1A）；其液体摇培物（发酵物）也类似真菌，能形成菌丝球（图1B），且有刺鼻的气味；显微镜下观察，其菌体细胞呈杆状，串生（图1C）。
1 .3菌株的分子生物学鉴定
挑取菌株HDCP1的一个单菌落加入到50μL的PCR反应体系中，并加入10 μmol/L的16S rRNA通用引物27F（5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'）和1492R（5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'）各1 μL、2×Taq PCR Master Mix 25 μL和ddH2O 23 μL；混匀，进行PCR扩增，扩增条件为：95℃ 5 min； 95℃ 30 s，58℃ 30 s，72℃ 60 s，35个循环；72℃ 10 min。扩增产物经1％（w/v）的琼脂糖凝胶电泳确定目的条带大小无误后，送至擎科生物科技有限公司进行测序。登录NCBI数据库(https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)，对测序结果进行BLASTn比对分析，并利用MEGA 11.0的邻接法构建进化树，聚类结果显示，菌株HDCP1与假蕈状芽孢杆菌（Bacillus pseudomycoides） MK855402 的序列一致性为99.85%，置信度为95%（图2）。因此，综合菌株HDCP1的菌落形态特征及分子生物学鉴定结果，将该菌株鉴定为假蕈状芽孢杆菌（Bacillus pseudomycoides）。
实施例2假蕈状芽孢杆菌HDCP1的生长曲线
用牙签挑取菌株HDCP1在NA固体培养基上的单菌落，接种到装有40 ml NA液体培养基的100 ml三角瓶中，pH为8.0，180 rpm、28℃培养24 h，获得种子液。按1%（v/v）的接种量将种子液接种到40 ml的NA液体培养基中，180 rpm、28℃培养48h，获得OD600为2.0或以上的发酵液，稀释OD600至0.8后，用于下述实施例中。
吸取稀释好的发酵液400μl至装有40 ml NA液体培养基的100 ml三角瓶中，180rpm、28℃培养，每2小时测定一次OD600，24 h之后每24h测定一次OD600。以培养时间为横坐标、以OD600为纵坐标绘制假蕈状芽孢杆菌HDCP1的生长曲线，结果显示，菌株HDCP1接种后的0~4 h为延迟期；4~24 h为对数增长期，之后菌株缓慢增长，24 h后进入稳定期，144h后开始进入衰亡期，如图3所示，其中，图3A为假蕈状芽孢杆菌HDCP1在24小时内的生长曲线图；图3B为假蕈状芽孢杆菌HDCP1在11天内的生长曲线图。
实施例3假蕈状芽孢杆菌HDCP1摇瓶发酵条件的优化
3.1 最适生长温度
按照实施例2获得菌株HDCP1的发酵稀释液，取5 μl接种于NA固体培养基，分别置于4℃、10℃、19℃、25℃、28℃、37℃，培养48 h。结果发现，在 25℃~37℃温度范围内，菌株HDCP1均生长良好，其最适生长温度为37℃；而在4~19℃范围内，菌株HDCP1虽能生长，但生长显著缓慢，如图4所示。
3.2 最适生长pH
按照实施例2获得菌株HDCP1的发酵稀释液（OD600=0.8），以1%（v/v）的接种量分别接种于pH为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0和11.0的NA液体培养基中，180rpm、28℃培养48 h，测定其OD600。结果发现，在pH 5.0~9.0之间，菌株HDCP1生长良好，发酵液的OD600值均能达到2.0或以上，其最适pH为8.0；在pH4.0、10.0和11.0条件下，菌株HDCP1虽能生长，但生长显著缓慢，如图5所示。
实施例4假蕈状芽孢杆菌HDCP1的耐盐特性及应用
4.1假蕈状芽孢杆菌HDCP1的耐盐特性
按照实施例2获得菌株HDCP1的发酵稀释液（OD600=0.8），以1%（v/v）的接种量接种于NaC1浓度依次为0、100、200、300、400、500、600、700、800、900和1000 mM的NA液体培养基中，180 rpm、28℃培养48 h，测定OD600。结果发现，在0~1000 mM 的NaCl 浓度范围内，菌株HDCP1均能生长；在 0~400 mM的NaCl 浓度范围内，菌株HDCP1发酵液的OD600值均能达到或超过2.0，尤其在100~400mM的NaCl浓度范围内生长最好；在500~800 mM的NaCl 浓度范围内，菌株HDCP1发酵液的OD600值在1到2之间，生长较好；NaCl浓度高于800mM时，菌株HDCP1的生长显著缓慢。因此，NaC1浓度为100~400 mM时菌株HDCP1生长更优，如图6所示。
4.2假蕈状芽孢杆菌HDCP1耐盐特性的应用
挑取50粒饱满的丽江新团黑谷水稻种子，整齐摆放在垫有无菌滤纸的10cm×10cm方皿中。按照实施例2获得菌株HDCP1的发酵稀释液（OD600=0.8），分别取三管各20ml发酵稀释液，5000rpm，离心10min，收集HDCP1菌体细胞；用0mM、100mM、200mM的无菌NaCl溶液各20ml重悬菌体；分别取NaCl菌悬液4ml转入上述摆有水稻种子的方皿，并以4ml的0mM、100mM、200mM无菌NaCl溶液作为对照。28℃，光照培养3天，统计萌发率。结果发现，NaCl不存在时，HDCP1菌悬液处理的水稻种子和对照组种子的萌发率无显著性差异；NaCl浓度为100mM时，HDCP1菌悬液处理种子的萌发率为60%，而对照组的萌发率为40%，差异极显著（p<0.01），HDCP1使水稻萌发率显著提高20%；NaCl浓度为200mM时，HDCP1菌悬液处理的种子萌发率为10%，对照组的萌发率仅为4%，虽然差异显著（p<0.05），能促进萌发，但萌发率总体相对偏低，如图7所示。因此，NaCl浓度为100mM时，菌株HDCP1的发酵液能极显著提高水稻种子的萌发率。
实施例5假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液在改良酸碱土中的应用
5.1酸性土壤的改良效果
称取酸性土壤10 g置于150 ml三角瓶，加入50 ml NA液体培养基和500μl按照实施例2获得的菌株HDCP1发酵稀释液（OD600=0.8），180 rpm、28℃培养，每24小时测定一次pH。结果发现，经过24小时，酸性土壤的pH由4.95变为7.63，且后续6天pH一直持续稳定在7.64~8.12之间，而对照组酸性土壤的pH值几乎没有变化，如图8所示。这说明菌株HDCP1的发酵液具有调节酸性土壤的pH接近中性，并使其pH保持稳定的潜能和应用。
5.2碱性土壤的改良效果
称取碱性土壤10 g置于150 ml三角瓶内，加入50 ml NA液体培养基和500μl按照实施例2获得的HDCP1发酵稀释液（OD600=0.8），180 rpm、28℃培养，每24小时测定一次pH值。经过24小时，碱性土壤的pH从9.79降低到8.47，后续6天都一直稳定在8.50左右，而对照组碱性土壤的pH几乎没有变化，如图9所示。说明菌株HDCP1的发酵液具有调节碱性土壤的pH接近中性，并使其pH保持稳定的潜能和应用。
实施例6假蕈状芽孢杆菌HDCP1的生防应用
6.1 假蕈状芽胞杆菌HDCP1有效抑制多种真菌的生长
将葡萄灰霉（Botrytis cinerea）、草莓暹罗炭疽菌（Colletotrichum siamense）、玉米胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）、梨轮纹菌(Physalospora piricola)、大豆疫霉（Phytophthora sojae）和马铃薯致病疫霉（Phytophthora infestans）这些植物病原真菌分别接种于直径为90 mm的 PDA固体培养基（土豆200 g，葡萄糖20 g，蒸馏水补足1000 ml，添加浓度20 g琼脂粉，121℃灭菌20min）中央，28℃培养，待菌落长至直径4~5 cm用于打孔接种。采用平板对峙法，分别吸取5μL按照实施例2获得的菌株HDCP1发酵稀释液（OD600=0.8）和ddH2O滴于病原菌菌饼两侧20mm处，置于超净工作台中自然风干，28℃，黑暗倒置培养4~6天。采用十字交叉法测量病原真菌菌落的直径，按下式计算抑菌率：抑制率（％）＝（对照菌落直径-处理菌落直径）/对照菌落直径× 100%。 结果发现，菌株HDCP1对供试多种植物病原真菌均具有显著的抑菌效果，对葡萄灰霉菌（Botrytis cinerea）、草莓暹罗炭疽菌（Colletotrichum siamense）、玉米胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）、梨轮纹菌(Physalospora piricola)、大豆疫霉（Phytophthora sojae）和马铃薯致病疫霉（Phytophthora infestans）的抑菌率分别为62.56%、69.32%、77.28%、69.10%、82.76%和86.60%，如图10所示。因此，菌株HDCP1具有广谱抑菌效果。
6.2假蕈状芽胞杆菌HDCP1发酵液在葡萄灰霉离体接种时的生防效果
选取红地球葡萄的新鲜叶片，用无菌水冲洗3次，晾干表面水滴后，在每片叶面喷洒0.5 mL按照实施例2获得的菌株HDCP1发酵稀释液（OD600=0.8），以喷洒无菌NA液体培养基做空白对照，取直径为6 mm 的葡萄灰霉菌饼置于叶脉两侧，19℃，保湿培养3天。结果发现，喷施菌株HDCP1发酵液的叶片，葡萄灰霉病斑没有显著扩展，病斑面积仅为0.88cm2，而对照组的发病面积却高达6.37cm2，如图11所示，其中图11A为假蕈状芽孢杆菌HDCP1发酵液在葡萄灰霉离体接种葡萄叶片上的防治效果图；图11B为葡萄灰霉离体接种的病斑面积图。这说明该菌株HDCP1发酵液可以有效抑制葡萄灰霉的侵染，降低葡萄灰霉病的发病程度。
实施例7假蕈状芽孢杆菌HDCP1的促生效果
7.1 菌株HDCP1发酵液对生菜的促生效果
采用盆栽方式，挑选饱满的小奶油绿生菜种子，4℃春化24 小时后，播种于育苗盘；待生菜苗长至第二片真叶时，移栽至90 mm×65 mm花盆中，每盆一株；按照实施例2获得菌株HDCP1的发酵稀释液（OD600=0.8），进行灌根处理，每盆60mL，并以无菌NA液体培养基做空白对照，每个处理3株生菜苗。置于温室，定期浇水管理。本实验独立重复了3次。45天后发现，相对于浇灌NA液体培养基的对照组生菜，经菌株HDCP1发酵液处理的生菜的叶片数、鲜重和叶绿素含量均有显著提高（p<0.05），如图12C、图12D和图12E所示；但对株高无显著影响，如图12B所示。这些数据表明菌株HDCP1的发酵液对生菜具有显著的促生作用，如图12A所示。
7.2 菌株HDCP1发酵液对黄瓜的促生效果
采用盆栽方式，挑选饱满的中农2号黄瓜种子，4℃春化24 小时后，播种于育苗盘中；待黄瓜苗生长至第二片真叶时，移栽到25 cm×16.5 cm花盆中，每盆一株；按照实施例2获得菌株HDCP1的发酵稀释液（OD600=0.8），进行灌根处理，每盆20mL；并以无菌NA液体培养基做空白对照，每个处理3株黄瓜苗。将处理好的黄瓜苗放置于温室，定期浇水管理。本实验独立重复了2次。14天后发现，相对于浇灌NA液体培养基的对照组黄瓜苗，经菌株HDCP1发酵液处理的黄瓜幼苗的株高和叶绿素均有显著提高（p<0.05），如图13A、图13B和图13C所示，这表明菌株HDCP1的发酵液对黄瓜幼苗具有显著的促生作用，如图13所示。
Claims (7)
1.一种假蕈状芽孢杆菌（Bacillus pseudomycoides）HDCP1，其特征在于，保藏编号为CGMCC No：28575，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2023年9月28日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.一种含有如权利要求1所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1的发酵液。
3.如权利要求2所述发酵液的制备方法，其特征在于，所述制备方法的步骤如下：
挑取所述假蕈状芽孢杆菌HDCP1的单菌落接种于液体营养琼脂培养基NA中，180 rpm，过夜培养得到种子液；将种子液接种于所述液体营养琼脂培养基NA液体培养基中，接种量为1％v/v，180rpm，培养48 小时，得到假蕈状芽孢杆菌HDCP1的摇瓶发酵液，培养条件为pH5.0~9.0，培养温度为25~37℃。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述培养条件中pH为8.0，培养温度为37℃。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述培养基中装液量为40%。
6.一种含有如权利要求1所述的假蕈状芽孢杆菌HDCP1，或如权利要求2所述发酵液的制剂。
7.如权利要求1所述的假蕈状芽孢杆菌HDCP1、或如权利要求2所述的发酵液、或如权利要求6所述的制剂在耐盐、酸土和碱土的改良、植物真菌病害的防治，以及促进植物生长中的应用；在耐盐方面，适宜假蕈状芽孢杆菌HDCP1生长的NaCl浓度为100~400 mM，在100mMNaCl盐胁迫环境下，假蕈状芽孢杆菌HDCP1的发酵液能显著提高水稻种子的萌发率；在植物真菌病害防治方面，所述植物真菌病害的病原真菌为葡萄灰霉（Botrytis cinerea）、草莓暹罗炭疽菌（Colletotrichum siamense）、梨轮纹菌(Physalospora piricola)和玉米胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）、大豆疫霉（Phytophthora sojae）和马铃薯致病疫霉（Phytophthora infestans）；在促进植物生长方面，所述植物为黄瓜或者生菜。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103642710A (zh) * | 2013-10-08 | 2014-03-19 | 暨南大学 | 一种分解玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌及其应用 |
| CN112625944A (zh) * | 2020-12-10 | 2021-04-09 | 西北工业大学 | 假蕈状芽孢杆菌及其在减轻铜离子对植物胁迫作用方面的应用 |
| KR20220005690A (ko) * | 2020-07-07 | 2022-01-14 | 주식회사 엘제이바이오 | 바실러스 슈도마이코이데스 ｋｓ２ 균주를 포함하는 가축 사체 분해 촉진용 미생물 제제 |
| CN114703094A (zh) * | 2022-03-18 | 2022-07-05 | 山东野田生物科技有限公司 | 一株假蕈状芽胞杆菌及在制备植物病原菌抑菌剂中的应用 |
| CN115029277A (zh) * | 2022-06-24 | 2022-09-09 | 四川省烟草公司凉山州公司 | 一株耐酸抗青枯病的假蕈状芽孢杆菌 |
-
2023
- 2023-12-19 CN CN202311745160.4A patent/CN117431191B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103642710A (zh) * | 2013-10-08 | 2014-03-19 | 暨南大学 | 一种分解玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌及其应用 |
| KR20220005690A (ko) * | 2020-07-07 | 2022-01-14 | 주식회사 엘제이바이오 | 바실러스 슈도마이코이데스 ｋｓ２ 균주를 포함하는 가축 사체 분해 촉진용 미생물 제제 |
| CN112625944A (zh) * | 2020-12-10 | 2021-04-09 | 西北工业大学 | 假蕈状芽孢杆菌及其在减轻铜离子对植物胁迫作用方面的应用 |
| CN114703094A (zh) * | 2022-03-18 | 2022-07-05 | 山东野田生物科技有限公司 | 一株假蕈状芽胞杆菌及在制备植物病原菌抑菌剂中的应用 |
| CN115029277A (zh) * | 2022-06-24 | 2022-09-09 | 四川省烟草公司凉山州公司 | 一株耐酸抗青枯病的假蕈状芽孢杆菌 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 假蕈状芽孢杆菌34kDa纤溶酶成熟肽基因的原核表达、纯化及活性分析;刘慧娟等;《华北农学报》;20110428;第26卷(第02期);第143-146页 * |
Also Published As
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| CN117431191A (zh) | 2024-01-23 |
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