CN1173989C - 石斛的dna序列及利用该序列鉴定其品种或辨别其真伪的方法 - Google Patents
石斛的dna序列及利用该序列鉴定其品种或辨别其真伪的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1173989C CN1173989C CNB011024348A CN01102434A CN1173989C CN 1173989 C CN1173989 C CN 1173989C CN B011024348 A CNB011024348 A CN B011024348A CN 01102434 A CN01102434 A CN 01102434A CN 1173989 C CN1173989 C CN 1173989C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- its2
- cgc
- dendrobium
- gtc
- ttt
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 title claims abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 241001523681 Dendrobium Species 0.000 title claims description 27
- 240000004638 Dendrobium nobile Species 0.000 claims description 60
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 23
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 12
- 244000030990 Dendrobium fimbriatum Species 0.000 claims description 11
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 claims description 11
- UXDFUVFNIAJEGM-UHFFFAOYSA-N 2-methoxy-5-[2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)ethyl]phenol Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1CCC1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 UXDFUVFNIAJEGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 244000283926 Dendrobium chrysotoxum Species 0.000 claims description 9
- 241001678096 Dendrobium crepidatum Species 0.000 claims description 9
- 244000269590 Dendrobium chrysanthum Species 0.000 claims description 8
- 241001076416 Dendrobium tosaense Species 0.000 claims description 8
- 244000174716 Phaseolus caracalla Species 0.000 claims description 7
- 241000334653 Dendrobium williamsonii Species 0.000 claims description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 6
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 claims description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims description 4
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims description 3
- 101000829958 Homo sapiens N-acetyllactosaminide beta-1,6-N-acetylglucosaminyl-transferase Proteins 0.000 claims description 2
- 102100023315 N-acetyllactosaminide beta-1,6-N-acetylglucosaminyl-transferase Human genes 0.000 claims description 2
- 102100036263 Glutamyl-tRNA(Gln) amidotransferase subunit C, mitochondrial Human genes 0.000 claims 1
- 101001001786 Homo sapiens Glutamyl-tRNA(Gln) amidotransferase subunit C, mitochondrial Proteins 0.000 claims 1
- WCDYMMVGBZNUGB-ORPFKJIMSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(1r,3r,4r,5r,6r)-4,5-dihydroxy-2,7-dioxabicyclo[4.2.0]octan-3-yl]oxy]-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]methyl 3-hydroxy-2-tetradecyloctadecanoate Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](COC(=O)C(CCCCCCCCCCCCCC)C(O)CCCCCCCCCCCCCCC)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]2OC[C@H]2O1 WCDYMMVGBZNUGB-ORPFKJIMSA-N 0.000 claims 1
- WOWHHFRSBJGXCM-UHFFFAOYSA-M cetyltrimethylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C WOWHHFRSBJGXCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 101150075675 tatC gene Proteins 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 7
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 abstract description 3
- 241000283966 Pholidota <mammal> Species 0.000 abstract 1
- 241000334631 Pholidota cantonensis Species 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 241000229499 Dendrobium loddigesii Species 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241001264163 Dendrobium aduncum Species 0.000 description 3
- 244000283944 Dendrobium densiflorum Species 0.000 description 3
- 241001264169 Dendrobium moniliforme Species 0.000 description 3
- 244000210274 Dendrobium moschatum Species 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000334625 Dendrobium hercoglossum Species 0.000 description 2
- 240000005068 Dendrobium jenkinsii Species 0.000 description 2
- 240000001590 Dendrobium lindleyi Species 0.000 description 2
- 241000233855 Orchidaceae Species 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 2
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- RGCLLPNLLBQHPF-HJWRWDBZSA-N phosphamidon Chemical compound CCN(CC)C(=O)C(\Cl)=C(/C)OP(=O)(OC)OC RGCLLPNLLBQHPF-HJWRWDBZSA-N 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 241000732800 Cymbidium Species 0.000 description 1
- 241000026010 Dendrobium candidum Species 0.000 description 1
- 241000334651 Dendrobium lohohense Species 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000015220 Febrile disease Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108091023242 Internal transcribed spacer Proteins 0.000 description 1
- PKFBJSDMCRJYDC-GEZSXCAASA-N N-acetyl-s-geranylgeranyl-l-cysteine Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CSC[C@@H](C(O)=O)NC(C)=O PKFBJSDMCRJYDC-GEZSXCAASA-N 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 206010036067 polydipsia Diseases 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- -1 then Substances 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
- 239000005418 vegetable material Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本发明公开了16种石斛和一种石仙桃的ITS2及5.8S和28S核糖体部分DNA序列，所得DNA序列是采用PCR扩增反应和直接测序法获得的，可用于鉴定石斛品种和分辨其真伪。
Description
本发明涉及贵重中药的DNA序列及利用该序列鉴定其品种和辨别其真伪的方法，更具体地说，本发明涉及中药石斛的ITS2及部份5.8S和28S核糖体部份DNA序列及利用该序列鉴定其品种或辨别其真伪的方法。
石斛为贵重中药材，应用历史悠久，在《神农本草经》中列为上品，具有滋阴消热、生津益胃、润肺止咳等功效，用于热病伤津、口干烦渴、病后虛热等多种病症。现代药理研究表明，石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力及扩张血管的作用。因此石斛在临床上及复方中药制剂中被广泛应用。中国药典(1995年版)收载有5种石斛，即金钗石斛(D.nobile Lindl.)，铁皮石斛(D.candidum Wall.ex Lindl.)，束花石斛(D.chrysanthum Wall.ex.Lindl.)，美花石斛(D.loddigesii Rolfe)和流苏石斛(D.fimbriatum Hook)。
石斛药材的市场需求量甚大，每年达数千吨之多，而部份商品的售价昂贵，例如一级石斛(Herba Dendrobii)每公斤的售价达3500美元。
市售石斛的来源复杂，涉及石斛属植物30多种，并时有其他属的兰花(如石仙桃属)混作石斛药材使用，直接影响到石斛的临床疗效及消費者的利益。再者，石斛药材的原植物均是濒危品种，如铁皮石斛列于中国受保护植物名录的第III类级別。
现行的石斛鉴定方法包括性状鉴別、化学分析及微观解剖。但这些方法仍未对药典所列的石斛品种作全面和客观的鉴定。
植物核糖体脱氧核糖核酸(rDNA)以順反子18S-ITS1-5.8S-ITS2-26S的形式存在。植物大多拥有该順反子的重复序列，其以头尾相连的方式聚集在染色体上。目前研究显示，18S、5.8S和26S等rDNA基因的碱基对序列非常保守，不同植物间的差別很小；而位于植物rDNA基因之间的ITS1(转录空隙区1)和ITS2(转录空隙区2)的碱基对序列则差別较大。同时由于基因转化和交换的作用，就同一品种植物而言，其rDNA序列大致相同(Hillis和Dixon，1991)。
因此，本发明的目的是提供石斛药材的ITS2及5.8S和28S核糖体部份DNA序列。
本发明的另一个目的是提供利用所述DNA序列鉴定石斛的品种及辨别其真伪的方法。
为达到本发明的目的，本发明人从香港及中国大陆的不同地点收集了46种样品，包括16种石斛和一种石仙桃。所有的样品均经过兰科专家鉴定。除了罗河石斛之外，其余每一品种都有从数个不同群体获得的样品。所测得的46个样品的ITS2及5.8S和28S核糖体部份DNA序列如下：
1.钩状石斛(Dendrobium aduncum Lindl.)样品1的ITS2及5.8S和28S核糖体部分rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAA
CCGGCTAA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAG CATTTTAT
CGCTCCGT GCCTAATC TCCCATCC ATGTATGT GTTGCAAA
GGCTCGGA TGTGCACG GTGGCTCC TCGTGCCC CTTGGTGC
GGCGGGCT GAAGGCCG GGTCATCT TCTCGTTG GTTGCCAA
CAATAAGG GGTGGATT AAACAAGG CCTATGCT GTTGTGAT
ATGCGCGC CCGAGAGA TGATCATA CTTTTTAG GTGATCCC
AATTCATG CGCTGATC CATGGATG GCGTATCG AATGCGAC
CCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC TGAGTTTA AGCATATC
AATAAGCG GAGGAAAA GAAACTTA CGAGGATT CCCCTAGT
AACGGCGA GT
2.钩状石斛(Dendrobium aduncum Lindl.)样品2的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCGCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGTAT GTGTTGCA
AAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGC CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAACAA GGCCTATG CTGTTGTG
ATATGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATTCA TGCGCTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGG钩 AAAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
3.钩状石斛(Dendrobium aduncum Lindl.)样品3的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCGCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGTAT GTGTTGCA
AAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGC CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAACAA GGCCTATG CTGTTGTG
ATATGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATTCA TGCGCTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
4.束花石斛(Dendrobium chrysanthum Lindl.)样品1的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGC
CAACCTGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TGTTGCTC CGTGTCTC GTCACCCA TCAATGGA TGTGCTGG
CGAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CCCGTCGT GCCCCTCG
GTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC GCCATCTC GTTGGTTG
CGAACAAT AAGGGGTG GATTAAAT GGAGGCCT ATGCTATT
GTGTCGTG CATGCCTA AGAGATTAAA TTTTTTAG GTGATCCC
AAATCACG CGTCGATC CACGGATG ATGCTTTG AATGCGAC
CCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC CGAGTTTA AGCATATC
AATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CAAGGATT CCCCTAGT
AACGGCGA GT
5.束花石斛(Dendrobium chrysanthum Lindl.)样品2的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AA GTT GCG CCCGAGGC
CAACCTGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TGTTGCTC CGTGTCTC GTCACCCA TCAATGGA TGTGCTGG
CGAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CCCGTCGT GCCCCTCG
GTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC GCCATCTC GTTGGTTG
CGAACAAT AAGGGGTG GATTAAAT GGAGGCCT ATGCTATT
GTGTCGTG CATGCCTA AGAGATTA AATTTTTT AGGTGATC
CCAAATCA CGCGTCGA TCCACGGA TGATGCTT TGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACAAGGA TTCCCCT
AGTAACGG CGAGT
6.鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindl.)样品1的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AATCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTAC
GTCGCTCC GTGTCCAG CCACCCGT CGATGGAT GGGCTGGC
GATGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCCTCGTG CCCCTCGG
CACGGCGG GCTTAAGA GCGGGTAA TCATCTCG TTGGCTGC
GAACAATA TGGGGTGG ATAAATGC GATGCTTA TGATATTG
TGCCGTGC ATGCCCGA GAGATGAT CATACTTA TTCAGGTG
ATCCCAAA CCATGCGT CGATCCAT GGATGGCG TTTTGAAT
GCGACCCC AGGACAGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
7.鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindl.)样品2的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AATCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTAC
GTCGCTCC GTGTCCAG CCACCCGT CGATGGAT GGGCTGGC
GATGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCCTCGTG CCCCTCGG
CACGGCGG GCTTAAGA GCGGGTAA TCATCTCG TTGGCTGC
GAACAATA TGGGGTGG ATAAATGC GATGCCTA TGATATTG
TGCCGTGC ATGCCCGA GAGATGAT CATACTTA TTCAGGTG
ATCCCAAA CCATGCGT CGATCCAT GGATGGCG TTTTGAAT
GCGACCCC AGGACAGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
8.鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindl.)样品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AATCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGGTTACG
TCGCTCCG TGTCCAGC CACCCGTC GATGGATG GGCTGGCG
ATGGCTCG GATGTGCAC AGTGGCTC CTCGTGCC CCTCGGCA
CGGCGGGC TTAAGAGC GGGTAATC ATCTCGTT GGCTGCGA
ACAATATG GGGTGGAT AAATGCGA TGCTTATG ATATTGTG
CCGTGCAT GCCCGAGA GATGATCA TACTTATT CAGGTGAT
CCCAAACC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTT TTGAATGC
GACCCCAG GACAGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT
9.玫瑰石斛(Dendrobium crepidatum Lindl.ex Paxt.)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCG AGG
CCAATCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCATT
TTGTTGCT CCGTGTCT ACTCACAC CCATCGAT GGATGTGC
TGGTGTAG GCTCGGAT GTGCATGC TGGCTCGT CGTTCTCC
CAGGTGCG GCGGGCTG AAGAGCGG GTCATCCT CTCGTTTG
CGGCGAAC AATAAGGG GTGGATTG AAGAGAGG TCTATGCT
ATTGTGTC GTGCATGC CTGAGAGA TGATTAAC TTTTTTGT
GATCCTAA ATCATGCA TCGATCCA TGGATGAT GCTTTGAA
TGTGACCC CAGGATGG GCGAGGCT ACCCGCTG AGTTTAAG
CATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCC
CCTAGTAA CGGCGAGT
10.玫瑰石斛(Dendrobium crepidatum Lindl.ex Paxt.)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AATCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
GTTGCTCC GTGTCTAC TCACACCC ATCGATGG ATGTGCTG
GTGTAGGC TCGGATGT GCATGCTG GCTCGTCG TTCTCCCA
GGTGCGGC GGGCTGAA GAGCGGGT CATCCTCT CGTTTGCG
GCGAACAA TAAGGGGT GGATTGAA GAGAGGTC TATGCTAT
TGTGTCGT GCATGCCT GAGAGATG ATTAACTT TTTTGTGA
TCCCAAAT CATGCATC GATCCATG GATGATGC TTTGAATG
TGACCCCA GGATGGGC GAGGCTAC CCGCTGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
11.玫瑰石斛(Dendrobium crepidatum Lindl.ex Paxt.)样品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGCCCGAGGC
CAATCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TGTTGCTC CGTGTCTA CTCACACC CATCGATG GATGTGCT
GGTGTAGG CTCGGATG TGCATGCT GGCTCGTC GTTCTCCC
AGGTGCGG CGGGCTGA AGAGCGGG TCATCCTC TCGTTTGC
GGCGAACA ATAAGGGG TGGATTGA AGAGAGGT CTATGCTA
TTGTGTCG TGCATGCC TGAGAGAT GATTAACT TTTTTGTG
ATCCCAAA TCATGCAT CGATCCAT GGATGATG CTTTGAAT
GTGACCCC AGGATGGG CGAGGCTA CCCGCTGA GTTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCC
CCTAGTAC GGCGAGT
12.密花石斛(Dendrobium densiflorum Lindl.)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC A AG TTG CGC CCG AGG
CCAACCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCGTT
ATGTCGCT CCGTGTTA ACTCCATC CCATCGAT GTATGGGC
TGGCGAAG GCTCGGAT GTGCAGTG TGGCTCGT CGTGCCCC
TTGGTGCG GCGAGCTG AAAAGCGG GTAATCAT CTCGTTGG
CTGCGAAC GATAAGGG GTGGATTA AAGCGAGA CCTATGTT
ATTGTGTC GTGTATGC CCGAGAGA AGATTATA CATACTCA
GGTGATCC TGAATCAT GCGTCGAT CAAAGGAC GGCGCTTG
GAATGCGA CCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTT
AAGCATAT TAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTT ACGAGGAT
TCCCCTAG TAACGGCG AGT
13.密花石斛(Dendrobium densiflorum Lindl.)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTGA ACGCAAGT TGCGCCCG AGGCCAAC
CGGCCAAG GGCACGTC TGCCTGGG CGTCAAGC GTTATGTC
GCTCCGTG TTAACTCC ATCCCATC GATGTATG GGCTGGCG
AAGGCTCG GATGTGCA GTGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGAG CTGAAAAG CGGGTAAT CATCTCGT TGGCTGCG
AACGATAA GGGGTGGA TTAAAGCG AGACCTAT GTTATTGT
GTCGTGTA TGCCCGAG AGAAGATT ATACATAC TCAGGTGA
TCCTGAAT CATGCGTC GATCAAAG GACGGCGC TTGGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCA
TATTAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCC C
TAGTAACG GCGAGT
14.密花石斛(Dendrobium densiflorum Lindl.)样品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCG AGGCCA
ACCGGCCA AGGGCACG TCTGCCTG GGCGTCAA GCGTTATG
TCGCTCCG TGTTAACT CCATCCCA TCGATGTA TGGGCTGG
CGAAGGCT CGGATGTG CAGTGTGG CTCGTCGT GCCCCTTG
GTGCGGCG AGCTGAAA AGCGGGTA ATCATCTC GTTGGCTG
CGAACGAT AAGGGGTG GATTAAAG CGAGACCT ATGTTATT
GTGTCGTG TATGCCCG AGAGAAGA TTATACAT ACTCAGGT
GATCCTGA ATCATGCG TCGATCAA AGGACGGC GCTTGGAA
TGCGACCC CAGGATGG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAG
CATATTAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCC
CCTAGTAA CGGCGAGT
15.流苏石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAA
CAGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG TGTTATGT
CGCTCCAT GCCAAGTC ACCCATCG ATGGATGG GCCGGCGA
AGGCTCGG ATGTGCAC AGTGGCTC GCCGTGCC CCTCGGTG
CGGCGGGC TGAAGAGC GGGTCATT ATCTTGTT GGCTGCAG
GCAATAAT GGGTGGAT AAACGCGA GGCCTTTG TTATTGTG
TCGTGCAT GCCTAAGA TATGATTA AACTTTTT AGGTGAT
CCCAAATC ATGCGTCG ATCCACGG ATGGCGTT TTGAATGC
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT
16.流苏石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.)样品2ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AACAGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGTGTTAT
GTCGCTCC ATGCCAAG TCACCCAT CGATGGAT GGGCCGGC
GAAGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCGCCGTG CCCCTCGG
TGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TTATCTTG TTGGCTGC
AGGCAATA ATGGGTGG ATAAACGC GAGGCCT TTGTTATT
GTGTCGTG CATGCCTA AGATATGA TTAAACTT TTTAGGTG
ATCCCAAA TCATGCGT CGATCCAC GGATGGCG TTTTGAAT
GCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
17.流苏石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.)样品3ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AACAGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGTGTTAT
GTCGCTCC ATGCCAAG TCACCCAT CGATGGAT GGGCCGGC
GAAGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCGCCGTG CCCCTCGG
TGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TTATCTTG TTGGCTGC
AGGCAATA ATGGGTGG ATAAACGC GAGGCCTT TGTTATTG
TGTCGTGC ATGCCTAA GATATGAT TAAACTTT TTAGGTGA
TCCCAAAT CATGCGTC GATCCACG GATGGCGT TTTGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
18.重唇石斛(Dendrobium hercoglossum Rchb.f.)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AA CCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CG CCTGAGGC
CAACCGGC TGAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TATCGCTC CGTGCCTA GTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGC
CAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGC
CAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGT
GTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTC ATACTTAT TAGGTGAT
CCCAATTC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGT
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT
19.重唇石斛(Dendrobium hercoglossum Rchb.f.)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CG CCT GAGGC
CAACCGGC TGAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TATCGCTC CGTGCCTA GTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGC
CAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGC
CAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGT
GTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTCA TACTTATT AGGTGATC
CCAATTCA TGCGTCGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
20.小黃花石斛(Dendrobium jenkinsii Lindl.)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAA
TCGGCCAA GGGCACGT TCGCCTGG GCGTCAAG CATTACGT
CGCTCCAT GTCAACTC CATCC CTTCTTTTGA TGGGCTGGT
AAAAGGCT TGGACGTG TAAAGTGG CTCGTCGT GCCCCTCG
GTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC ATCATCTC GTTGGCTA
CGAACAAT TACGTGTG GATTAAAG TGCGGCCT ATCTTATT
GTGTCATG TATGCCTG AGAAGATT ATGCATTT TTAGGTGA
TCCCAAAT CATGCGTC GATCCATG GATGACGT TTGGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGTCAC CCGCTGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
21.小黃花石斛(Dendrobium jenkinsii Lindl.)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AATCGGCC AAGGGCAC GTTCGCCT GGGCGTCA AGCATTAC
GTCGCTCC ATGTCAAC TCCATCCC TTCTTTTG ATGGGCTG
GTAAAAGG CTTGGACG TGTAAAGT GGCTCGTC GTGCCCCT
CGGTGCGG CGGGCTTA AGAGCGGG TCATCATC TCGTTGGC
TACGAACA ATTACGTG TGGATTAA AGTGCGGC CTATCTTA
TTGTGTCA TGTATGCC TGAGAAGA TTATGCAT TTTTAGGT
GATCCCAA ATCATGCG TCGATCCA TGGATGAC GTTTGGAA
TGCGACCC CAGGATGG GCGAGGTC ACCCGCTG AGTTTAAG
CATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCC
CCTAGTAA CGGCGAGT
22.聚石斛(Dendrobium lindleyi Stendel)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAA
TCGGCCAG GGCACGTT CGCCTGGG CGTCAAGC ATTATGAC
GCTCCCTG TCAACTCC ATCCCATC TTTTAATG GGCTGGCG
AAGGCTCG GATGTGCA AAGTGGCT CGTCGTGC CTCTCAGT
GCGGCGGG CTTAAGAG CGGGTCAT CATCTCGT TGGCTACG
AACAATTA CGGGTGGA TTAAAGTG AGGCCTAT ATTATATT
GTCGTGTA TGCCTGAG AGAAGATT ATTCATTT TTTGGTTA
TCCCAAAT CATGCGTC GATCCATA GATCACGT TTGGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGTCAC CCGCTGAG TTTAAGCA
TATCACTA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
23.聚石斛(Dendrobium lindleyi Stendel)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAA
TCGGCCAA GGGCACGT TCGCCTGG GCGTCAAG CATTATGA
CGCTCCCT GTCAACTC CATCCCAT CTTTTAAT GGGCTGGC
GAAGGCTC GGATGTGC AAAGTGGC TCGTCGTG CCTCTCAG
TGCGGCGG GCTTAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTAC
GAACAATT ACGGGTGG ATTAAAGT GAGGCCTA TATTATAT
TGTCGTGT ATGCCTGA GAGAAGAT TATTCATT TTTTGGTT
ATCCCAAA TCATGCGT CGATCCAT AGATCACG TTTGGAAT
GCGACCCC AGGATGGG CGAGGTCA CCCGCTGA GTTTAAGC
ATATCACT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
24.美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCG AGG
CCAACCGG CCAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAGTCATT
TTATCGCT CTGTGCCA AGCTACCC ATCGATTG ATGTGTTG
GCGAAGGC TTGGATGT GCATTATG GCTCATCG TGCCCCTG
GGCGCGGC GGGCTGAA GAGCGGGT CATCATCT CGTTGGCT
GCGAACAA TAAGGGGT GGACTGAA GGGAGACC TATGCTAT
TGTGTCGT GCATGCCT AAGAGTTG ATCATACC TTTGAGGA
GATCCCAA ATCATGCG TCGATCTA TGGACGGC GCTTTGAA
TGCGACCC CAGGATGG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAG
CATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCC
CCTAGTAA CGGCGAGT
25.美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTT GCGC CCGAG GCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA GTCATTTT
ATCGCTCT GTGCCAAG CTAACCAT CGATTGAT GTGTTGGC
GAAGGCTT GGATGTGC ATTATGGC TCATCGTG CCCCTGGG
CGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTGC
GAACAATA AGGGGTGG ACTGAAGG GAGACCTA TGCTATTG
TGTCGTGC ATGCCTAA GAGTTGAT CATACCTT TGAGGAGA
TCCCAAAT CATGCGTC GATCTATG GACGGCGC TTTGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
26.美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe)样品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA GTCATTTT
ATCGCTCT GTGCCAAG CTACCCAT CGATTGAT GTGTTGGC
GAAGGCTT GGATGTGC ATTATGGC TCATCGTG CCCCTGGG
CGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTGC
GAACAATA AGGGGTGG ACTGAAGG GAGACCTA TGCTATTG
TGTCGTGC ATGCCTAA GAGTTGAT CATACCTT TGAGGAGA
TCCCAAAT CATGCGTC GATCTATG GACGGCGC TTTGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
27.罗河石斛(Dendrobium lohohense T.Tang et F.T.Wang)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAA
CCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CATTACAT
CGCTCCAT GTCAAGTC ACCCTTCG ATGGATGG GCTGGCGA
AGGCTTGG ATGTGCAC AGTGGCTC GTCGTGCC ACTTGGTG
CGGCGGGC TGAAGAGC GGGTCGTC ATCCTCTT GGCCGCGA
ACAATAAT GGGTGGAT TAAAGCGA TGCCTAAG TTATTGTG
TGTGCATG CCTAAGAG ATGATTAT ACTTTTTA AGTGATCC
CAATTCAT GCGTCGAT CCATGGAT GACGTTTT GAATGCGA
CCCCAGGA TAGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTT AAGCATAT
CAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTT ACGAGGAT TCCCCTAG
TAACGGCG AGT
28.细茎石斛(Dendrobium moniliforme(L.)Sw.)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGGCC
AACCGGCT GAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCACTCC GTGCCTAC TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTGCT
AAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAATAA GGCCTATG CTATTGTG
TCAAGCGC GCCCGAGA GATGGTCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATTCA TGCGTTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
29.细茎石斛(Dendrobium moniliforme(L.)Sw.)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGGCC
AACCGGCT GAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCACTCC GTGCCTAC TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTGCT
AAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAATAA GGCCTATG CTATTGTG
TCAAGCGC GCCCGAGA GATGGTCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATTCA TGCGTTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
30.细茎石斛(Dendrobium moniliforme(L.)Sw.)样品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCT GAGGCCAA
CCGGCTGA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAG CATTTTAT
CACTCCGT GCCTACTC TCCCATCC ATGGATGT GTTGCTAA
GGCTCGGA TGTGCACG GTGGCTCG TCGTGCCC CTTGGTGC
GGCGGGCT GAAGGGCG GGTCATCT TCTCGTTG GCTGCCAA
CAATAAGG GGTGGATT AAATAAGG CCTATGCT ATTGTGTC
AAGCGCGC CCGAGAGA TGGTCATA CTTTTTAG GTGATCCC
AATTCATG CGTTGATC CATGGATG GCGTATCG AATGTGAC
CCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC TGAGTTTA AGCATATC
AATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATT CCCCTAGT
AACGGCGA GT
31.杓唇石斛(Dendrobium moschatum(Buch.-Ham.)Sw.)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTG AGG
CCAACCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCGAT
ATGTCGCT CTGTGCTA AGTTAACC ATCGATGG ATGGGTTG
GCGAAGGC TCGGATGT GCATAATG GCTCGTTG TGCCCCTC
AGCGTGGC GGGCTGAA GAGGGGGT CATCATCT TGTTAGTC
GCAAACAA TAAGGGGT GGATAAAT ATGAGGCC TATGTTAT
TGTGTTGT GCATGCCC AAGAGATG ATTAAACC TTTTTTGT
GATCCTAA ATCATGCG TCAATCCA TGTATGGC GTTTTGAA
TGCGACCC CAGGATGG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAG
CATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACA AGGATTCC
CCTAGTAA CGGCGAGT
32.杓唇石斛(Dendrobium moschatum(Buch.-Ham.)Sw.)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGGCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGATAT
GTCGCTCT GTGTTAAG TTAACCAT CGATGGAT GGGTTGGC
GAAGGCTC GGATGTGC ATAATGGC TCGTTGTG CCCCTCAG
CGTGGCGG GCTGAAGA GGGGGTCA TCATCTTG TTAGTCGC
AAACAATA AGGGGTGG ATAAATAT GAGGCCTA TGTTATTG
TGTTGTGC ATGCCCAA GAGATGAT TAAACCTT TTTTGTGA
TCCTAAAT CATGCGTC AATCCATG TATGGCGT TTTGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGTGG AGAAGAAA CTTACAAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
33.杓唇石斛(Dendrobium moschatum(Buch.-Ham.)Sw.)样品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCT GAGGCCAA
CCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGATATGT
CGCTCTGT GCTAAGTT AACCATCG ATGGATGG GTTGGCGA
AGGCTCGG ATGTGCAT AATGGCTC GTTGTGCC CCTCAGCG
TGGCGGGC TGAAGAGG GGGTCATC ATCTTGTT AGTCGCAA
ACAATAAG GGGTGGAT AAATATGA GGCCTATG TTATTGTG
TTGTGCAT GCCCAAGA GATGATTA AACCTTTT TTGTGATC
CTAAATCA TGCGTCAA TCCATGTA TGGCGTTT TGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACAAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
34.金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GA ACGCAAGT TGCGCCTG AGGC
CAATCGGT TGAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCAT
TTTATCGC TCCGTGCC TAGTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGC
CAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCGTCGTG CCCGTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGC
CAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGT
GTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTC ATACTTTT TAGGTGAT
CCCAATTC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGT
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT
35.金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTG AGG
CCAACCGG CTGAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATT
TTATCGCT CCGTGCCT AGTCTCCC ATCCATGG ATGTGTTG
CCAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CTCGTCGT GCCCCTTG
GTGCGGCG GGCTGAAG GGCGGGTC ATCTTCTC GTTGGCTG
CCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAT AAGGCCTA TGCTATTG
TGTCAAGC GCGCCTGA GAGATGGT CATACTTA TTAGGTGA
TCCCAATT CATGCGTC GATCCATG GATGGCGT ATCGAATG
TGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
36.金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)样品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGG
CCAACCGG CTGAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATT
TTATCGCT CCGTGCCT AGTCTCCC ATCCATGG ATGTGTTG
CCAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CTCGTCGT GCCCCTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGC
CAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGT
GTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTC ATACTTAT TAGGTGAT
CCCAATTC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGT
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT
37.铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCA AGG
CCAACCGG CTAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATT
TTATCTCT CCGTGCCT AATCTCCC ATCCATGG ATGTGTTA
CTAAGGCT CGGATGTG CATGGTGG CTCCTCGT GCCCCTTG
GTGCGGCG GGCTGAAG GGCGGGTC ATCTTCTC GTTGGTTG
CCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAA AAGGCCTA TGCTATTG
TGATAAGC GCGCCCGA GAGATGAT CATACTTT TTAGGTGA
TCCCAATC CATGCGCT AATCCATG GATGGCGT ATCGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CTGCTGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AAAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
38.铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCC
AACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACT
AAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAAA A GGCCTATG CTATTGTG
ATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATCCA TGCGCTAA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCT GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
39.铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)样品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCC
AACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACT
AAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAAAAA GGCCTATG CTATTGTG
ATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATCCA TGCGCTAA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCT GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
40.铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)样品4的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCC
AACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACT
AAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAAAAA GGCCTATG CTATTGTG
ATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATCCA TGCGCTAA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCT GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
41.铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)样品5的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCC
AACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACT
AAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAAAAA GGCCTATG CTATTGTG
ATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATCCA TGCGCTAA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCT GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
42.铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)样品6的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCC
AACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACT
AAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAAAAA GGCCTATG CTATTGTG
ATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATCCA TGCGCTAAT CCATGGAT GGCGTATC GAATGCGA
CCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCTG CTGAGTTT AAGCATAT
CAATAAGC GGAGGAAA AGAAACTT ACGAGGAT TCCCCTAG
TAACGGCG AGT
43.黑毛石斛(Dendrobium williamsonii Day et Rchb.f.)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AA GTT GCG CCT GAG GCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTAC
GTCACTCC GTGCCAAC TCCATTCC ATCGATGG ATGGGCCG
GTGAAGGC TCGGATGT GTAGAGTG GCTCGTCG TGCCCGTC
GGTGCGGC GGGTTGAA GAGTGGGT CATCATCTC GTTGGCTG
CGAACAAT AAGGGGTG GAATAAAG TGAGACCT ATGTTATT
GTGTCGTG TATGCCTG AGAGAAGA CCATTATC AGGAGATC
CCAAATCA TGCGTCGA TCCATGAA TGGCGTTT GGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
44.黑毛石斛(Dendrobium williamsonii Day et Rchb.f.)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGG
CCAACCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCGTT
ACGTCACT CCGTGCCA ACTCCATT CCATCGAT GGATGGGC
CGGTGAAG GCTCGGAT GTGTAGAG TGGCTCGT CGTGCCCG
TCGGTGCG GCGGGTTG AAGAGTGG GTCATCAT CTCGTTGG
CTGCGAAC AATAAGGG GTGGAATA AAGTGAGA CCTATGTT
ATTGTGTC GTGTATGC CTGAGAGA AGACCATT ATCAGGAG
ATCCCAAA TCATGCGT CGATCCAT GAATGGCG TTTGGAAT
GCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
45.细叶石仙桃(Pholidota cantonensis Rolfe)样品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTGC
GTCGCTCC GTGCCATC CCCGTCCC ACGAATGC GTGCGACG
GTCGAGGC CCGGACGT GCAGAGTG GCTCGTCG TGCCCGTT
GGTGCGGC GGGCTGAA GAGTGTGG GCTATCGT CTCGTTGG
CCAACAGC GACAAGGG GTGGATGA AAGCTGTA TGAGCAAA
GAGAGCCT ATGTTGTT GCTTGCTT GGCCCGAG AAAAGATT
CCCAGCTG ATGATCCC AACCCACG CGTCGATC CACAGGCG
ACGGCTTG GAATGCGA CCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCG
CCGAGTTT AAGCATAT CAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTT
ACGAGGAT TCCCCTAG TAACGGCG AGT
46.细叶石仙桃(Pholidota cantonensis Rolfe)样品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAA
CCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGTTGCGT
CGCTCCGT GCCATCCC CGTCCCAC GAATGCGT GCGACGGT
CGAGGCCC GGACGTGC AGAGTGGC TCGTCGTG CCCGTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGA GTGTGGGC TATCGTCT CGTTGGCC
AACAGCGA CAAGGGGT GGATGAAA GCTGTATG AGCAAAGA
GAGCCTAT GTTGTTGC TTGCTTGG CCCGAGAA AAGATTCC
CAGCTGAT GATCCCAA CCCACGCG TCGATCCA CAGGCGAC
GGCTTGGA ATGCGACC CCAGGATG GGCGAGGC CACCCGCC
GAGTTTAA GCATATCA ATAAGCGG AGGAGAAG AAACTTAC
GAGGATTC CCCTAGTA ACGGCGAGT
上述46个样品的ITS2及5.8S和28S核糖体部分DNA序列的测定方法包括下列步骤：
(1)收集植物样品，进行品种鉴定工作；
(2)从步骤(1)选出的植物中提取DNA；
(3)以步骤(2)提取的DNA为模板，以寡核苷酸作为聚合酶链反应(PCR)的引物，扩增ITS2及部份5.8S和28S的区段，所用的引物分別采自植物5.8S和28S的保守区段；
(4)应用直接测序技术对步骤(3)中所获得的PCR产物进行测序。
每一样品至少重复测序4次。而每一样品的序列也在互联网页National Center for Biotechnology Information(NCBI)和GeneticsComputer Group package(GCG)与其他兰花品种的序列作比较和验证以确保本发明的46个序列准确。
如上所示，除了罗河石斛之外，所测得的同一品种的样品之间在DNA水平的变异百份率不高于1.22％。所述16种石斛的种间DNA序列(ITS2及部份5.8S和28S)的差异为2％至17％，而石斛与细叶石仙桃的DNA序列(ITS 2及部份5.8S和28S)的差异为16％至20％。
本发明利用石斛类植物内ITS2(转录空隙区2)和部份5.8S及28S的DNA序列进行种间和种内的比较，借此鉴定不同的石斛品种并辨别其真伪。所采用的方法包括下列步骤：
(1)从植物中提取DNA；
(2)以步骤(1)中提取的DNA为模板，以寡核苷酸作为聚合酶链反应(PCR)的引物，扩增ITS2及部份5.8S和28S的区段，所用的引物分別采自植物5.8S和28S的保守区段；
(3)应用直接测序技术对步骤(2)中所获得的PCR产物进行测序；
(4)将步骤(3)中测得的植物ITS2及部份5.8S和28S的DNA序列与上述46个石斛及石仙桃样品的DNA序列比较以鉴定所测植物的石斛品种或分辩其真伪。
下面详细描述所述方法：
(1)DNA的提取
植物DNA提取方法与Draper和Scott(Draper和Scott，1988)所述大致相同，简述如下：将干燥的植物材料用70％乙醇的蒸馏水溶液冲洗，然后，与液氮混合并研磨成粉末。将所得的粉末样品与12倍体积的CTAB混勻，在56℃水浴中保温30分钟后，加入等量的氯仿-异戊醇(24∶1)混合液，离心，取上清液。向残余物中加入0.1体积的10％CTAB溶液，室温放置10分钟后再用氯仿-异戊醇萃取一次，离心，取上清液并与前次的上清液混合。向所得上清液中加入等量的CTAB产生沉淀，室温放置1小时后以13000g离心15分钟。将DNA沉淀物用乙醇纯化后溶解于TE缓冲液(10mM Tris-HCl，pH 7.5，1mM EDTA)中备用。
(2)PCR扩增反应
ITS2及部份5.8S和28S区段的DNA由PCR扩增反应得到。反应所用的引物为5.8d和28cc(Hillis和Dixon，1991)：
5.8d采自植物5.8S保守区段
5’AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC A 3’
28cc采自植物28S保守区段
5’ACT CGC CGT TAC TAG GGG AA 3’
反应溶液包括：1ng植物DNA，1Xtaq缓冲液(10mM Tris-HCl，pH8.3，0.001％明胶)，0.2mM dNTPs，1μM引物(5.8d和28cc)，以及1个单位的Taq DNA多聚酶。反应条件为：于94℃预处理5分钟，然后进行35个循环，循环条件是：94℃，1分钟，60℃，1分钟，72℃，2分钟；最后72℃，10分钟。
(3)直接测序技术
将步骤(2)得到的PCR产物用乙醇醇化后，取出1μL(约50ng)PCR醇化产物，与4μL反应终止混合液，0.64μL 25μM引物(5.8d和28cc)，以及4.86μL蒸馏水混合。然后进行以下25个循环，反应条件为：96℃，10秒，56℃，5秒，60℃，4分钟。最后使用Perkin Elmer的序列分析软件(“Sequencing Analysis第三版”软件和Hitachi“DNASIS第七版”)分析和确定样品的DNA序列。
因此，采用本发明提供的石斛的ITS2及部份5.8S和28S区段的DNA序列及鉴定方法，通过其ITS2及部份5.8S和28S区段的DNA序列的比较，使得对贵重中药石斛的鉴定更加方便和可靠。
Claims (3)
1.一种石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部分DNA序列，包括：
(1)钩状石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部分rDNA序列：
AAC CATCGA GTCTTT GAA CGC AAGTTGCGC CCGAGGCCAA
CCGGCTAA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTAAGC ATTTTATC
GCTCCGTG CCTAATCT CCCATCCA TGTATGTG TTGCAAAG
GCTCGGAT GTGCACGG TGGCTCCT CGTGCCCC TTGGTGCG
GCGGGCTG AAGGCCGG GTCATCTT CTCGTTGG TTGCCAAC
AATAAGGG GTGGATTA AACAAGGC CTATGCTG TTGTGATA
TGCGCGCC CGAGAGAT GATCATAC TTTTTAGG TGATCCCA
ATTCATGC GCTGATCC ATGGATGG CGTATCGA ATGCGACC
CCAGGATG GGCGAGGC CACCCGCT GAGTTTAA GCATATCA
GCATATCAAT AAG CGGAGG AAAA GAAA CTTACGAGGATT
CCC CTA GTA ACG GCG AGT；
(2)束花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCATCGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGC
CAACCTGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TGTTGCTC CGTGTCTC GTCACCCA TCAATGGA TGTGCTGG
CGAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CCCGTCGT GCCCCTCG
GTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC GCCATCTC GTTGGTTG
CGAACAAT AAGGGGTG GATTAAAT GGAGGCCT ATGCTATT
GTGTCGTG CATGCCTA AGAGATTA AATTTTTT AGGTGATC
CCAAATCA CGCGTCGA TCCACGGA TGATGCTT TGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACAAGGA TT CCC
CTA GTA ACG GCG AGT；
(3)鼓槌石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGC
CAATCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCGTTA
CGTCGCTC CGTGTCCA GCCACCCG TCGATGGA TGGGCTGG
CGATGGCT CGGATGTG CACAGTGG CTCCTCGT GCCCCTCG
GCACGGCG GGCTTAAG AGCGGGTA ATCATCTC GTTGGCTG
CGAACAAT ATGGGGTG GATAAATG CGATGCTT ATGATATT
GTGCCGTG CATGCCCG AGAGATGA TCATACTT ATTCAGGT
GATCCCAA ACCATGCG TCGATCCA TGGATGGC GTTTTGAA
TGCGACCC CAGGACAG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAG
CATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCC
CCTAGTAA CGGCG AGT
(4)玫瑰石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCG AGG CCA
ATCGGCCA AGGGCACG TCTGCCTG GGCGTCAA GCATTTTG
TTGCTCCG TGTCTACT CACACCCA TCGATGGA TGTGCTGG
TGTAGGCT CGGATGTG CATGCTGG CTCGTCGT TCTCCCAG
GTGCGGCG GGCTGAAG AGCGGGTC ATCCTCTC GTTTGCGG
CGAACAAT AAGGGGTG GATTGAAG AGAGGTCT ATGCTATT
GTGTCGTG CATGCCTG AGAGATGA TTAACTTT TTTGTGAT
CCTAAATC ATGCATCG ATCCATGG ATGATGCT TTGAATGT
GACCCCAG GATGGGCG AGGCTACC CGCTGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG A TT CCC
CTA GTA ACG GCG AGT
(5)密花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC A AG TTGCGCCCGAGG
CCAACCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCGTT
ATGTCGCT CCGTGTTA ACTCCATC CCATCGAT GTATGGGC
TGGCGAAG GCTCGGAT GTGCAGTG TGGCTCGT CGTGCCCC
TTGGTGCG GCGAGCTG AAAAGCGG GTAATCAT CTCGTTGG
CTGCGAAC GATAAGGG GTGGATTA AAGCGAGA CCTATGTT
ATTGTGTC GTGTATGC CCGAGAGA AGATTATA CATACTCA
GGTGATCC TGAATCAT GCGTCGAT CAAAGGAC GGCGCTTG
GAATGCGA CCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTT
AAGCATATT AATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATT
CCCCTAGT A ACG GCG AGT
(6)流苏石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CATCGAGTC TTTGAACGCA AGTTGCGC CCGAGGCC
AACAGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGTGTTAT
GTCGCTCC ATGCCAAG TCACCCAT CGATGGAT GGGCCGGC
GAAGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCGCCGTG CCCCTCGG
TGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TTATCTTG TTGGCTGC
AGGCAATA ATGGGTGG ATAAACGC GAGGCCTT TGTTATTG
TGTCGTGC ATGCCTAA GATATGAT TAAACTTT TTAGGTGA
TCCCAAAT CATGCGTC GATCCACG GATGGCGT TTTGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAGGA TT CCC
CTA GTA ACG GCG AGT
(7)重唇石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AA CCAT CGA GTC TTT GAA CGC A
AGTTGCGCCTG AGGCCAACCG GCTGAGGGCA
CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT TATCGCTC CGTGCCTA
GTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGC CAAGGCTC GGATGTGC
ACGGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGG TGCGGCGG GCTGAAGG
GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGC CAACAATA AGGGGTGG
ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGT GTCAAGCG CGCCTGAG
AGATGGTC ATACTTAT TAGGTGAT CCCAATTC ATGCGTCG
ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGT GACCCCAG GATGGGCG
AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT ATCAATAA GCGGAGGA
GAAGAAAC TTA CGA GGA TT CCC CTA GTA ACG GCG AGT
(8)小黄花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCC
AATCGGCC AAGGGCAC GTTCGCCTG GGCGTCAA GCATTACG
TCGCTCCA TGTCAACTC CATCC CTTC TTTTGATG GGCTGGTA
AAAGGCTT GGACGTGT AAAGTGGC TCGTCGTG CCCCTCGG
TGCGGCGG GCTTAAGA GCGGGTCAT CATCTCGT TGGCTACG
AACAATTA CGTGTGGA TTAAAGTG CGGCCTAT CTTATTGT
GTCATGTA TGCCTGAG AAGATTAT GCATTTTT AGGTGATC
CCAAATCA TGCGTCGA TCCATGGA TGACGTTT GGAATGCG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGTCACCC GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACG GCG AGT
(9)聚石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTG CGCCCGAGGC
CAATCGGC CAAGGGCA CGTTCGCC TGGGCGTC AAGCATTA
TGACGCTC CCTGTCAA CTCCATCC CATCTTTT AATGGGCT
GGCGAAGG CTCGGATG TGCAAAGT GGCTCGTC GTGCCTCT
CAGTGCGG CGGGCTTA AGAGCGGG TCATCATC TCGTTGGC
TACGAACA ATTACGGG TGGATTAA AGTGAGGC CTATATTA
TATTGTCG TGTATGCC TGAGAGAA GATTATTC ATTTTTTG
GTTATCCC AAATCATG CGTCGATC CATAGATC ACGTTTGG
AATGCGAC CCCAGGAT GGGCGAGG TCACCCGC TGAGTTTA
AGCATATC ACTAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATT
CCC CTA GTA ACG GCG AGT
(10)美花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC A AGTTGCGC CCGAGGCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA GTCATTTT
ATCGCTCT GTGCCAAG CTACCCAT CGATTGAT GTGTTGGC
GAAGGCTT GGATGTGC ATTATGGC TCATCGTG CCCCTGGG
CGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTGC
GAACAATA AGGGGTGG ACTGAAGG GAGACCTA TGCTATTG
TGTCGTGC ATGCCTAA GAGTTGAT CATACCTT TGAGGAGA
TCCCAAAT CATGCGTC GATCTATG GACGGCGC TTTGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
(11)罗河石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAA
CCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CATTACAT
CGCTCCAT GTCAAGTC ACCCTTCG ATGGATGG GCTGGCGA
AGGCTTGG ATGTGCAC AGTGGCTC GTCGTGCC ACTTGGTG
CGGCGGGC TGAAGAGC GGGTCGTC ATCCTCTT GGCCGCGA
ACAATAAT GGGTGGAT TAAAGCGA TGCCTAAG TTATTGTG
TGTGCATG CCTAAGAG ATGATTAT ACTTTTTA AGTGATCC
CAATTCAT GCGTCGAT CCATGGAT GACGTTTT GAATGCGA
CCCCAGGA TAGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTT AAGCATAT
CAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTT ACGAGGAT TCCCCTAG
TAACGGCG AGT
(12)细茎石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTT GCGCCTGA GGCC
AACCGGCT GAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCACTCC GTGCCTAC TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTGCT
AAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAATAA GGCCTATG CTATTGTG
TCAAGCGC GCCCGAGA GATGGTCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATTCA TGCGTTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TT CCC CTA
GTA ACG GCG AGT
(13)杓唇石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTTGAACGCA AGTTGCGC CTGAGGCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGATAT
GTCGCTCT GTGCTAAG TTAACCAT CGATGGAT GGGTTGGC
GAAGGCTC GGATGTGC ATAATGGC TCGTTGTG CCCCTCAG
CGTGGCGG GCTGAAGA GGGGGTCA TCATCTTG TTAGTCGC
AAACAATA AGGGGTGG ATAAATAT GAGGCCTA TGTTATTG
TGTTGTGC ATGCCCAA GAGATGAT TAAACCTT TTTTGTGA
TCCTAAAT CATGCGTC AATCCATG TATGGCGT TTTGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACAAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
(14)金钗石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GA ACGCAAGTTG CGCCTGAG GCCA
ATCGGTTG AGGGCACG TCCGCCTG GGCGTCAA GCATTTTA
TCGCTCCG TGCCTAGT CTCCCATC CATGGATG TGTTGCCA
AGGCTCGG ATGTGCAC GGTGGCTC GTCGTGCC CGTTGGTG
CGGCGGGC TGAAGGGC GGGTCATC TTCTCGTT GGTTGCCA
ACAATAAG GGGTGGAT TAAATAAG GCCTATGC TATTGTGT
CAAGCGCG CCTGAGAG ATGGTCAT ACTTTTTA GGTGATCC
CAATTCAT GCGTCGAT CCATGGAT GGCGTATC GAATGTGA
CCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTT AAGCATAT
CAATAAGC GGAGGAGA AGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
(15)铁皮石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCAAGGC
CAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TATCTCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGGA TGTGTTAC
TAAGGCTC GGATGTGC ATGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGC
CAACAATA AGGGGTGG ATTAAAAA AGGCCTAT GCTATTGT
GATAAGCG CGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGAT
CCCAATCC ATGCGCTA ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGC
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC TGCTGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA AAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGGCGAGT
(16)黑毛石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AA GTT GCG CCT GAG GCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTAC
GTCACTCC GTGCCAAC TCCATTCC ATCGATGG ATGGGCCG
GTGAAGGC TCGGATGT GTAGAGTG GCTCGTCG TGCCCGTC
GGTGCGGC GGGTTGAA GAGTGGGT CATCATCT CGTTGGCT
GCGAACAA TAAGGGGT GGAATAAA GTGAGACC TATGTTAT
TGTGTC GT GTATGCCT GAGAGAAG ACCATTAT CAGGAGAT
CCCAAATC ATGCGTCG ATCCATGA ATGGCGTT TGGAATGC
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT；或
(17)与上述序列(1)至序列(16)中任一个具有至少98.78％同源性的DNA序列。
2.权利要求1所述的DNA序列，其中所述与上述序列(1)至序列(16)中任一个具有至少98.78％同源性的DNA序列选自：
(1a)钩状石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC
GAGGCCAA CCGGCTAA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAG
CATTTTAT CGCTCCGT GCCTAATCTCCCATCC ATGTATGTGT
TGCAAAGG CTCGGATG TGCACGGT GGCTCCTC GTGCCCCT
TGGTGCGG CGGGCTGA AGGCCGGG TCATCTTC TCGTTGGC
TGCCAACA ATAAGGGG TGGATTAA ACAAGGCC TATGCTG
TTGTGATA TGCGCGCC CGAGAGAT GATCATAC TTTTTAGG
TGATCCCA ATTCATGC GCTGATCC ATGGATGG CGTATCGA
ATGCGACC CCAGGATG GGCGAGGC CACCCGCT GAGTTTAA
GCATATCAAT AAG CGGAGG AAAA GAAA CTTACGAGGATT
CCC CTA GTA ACG GCG AGT
(1b)钩状石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGC
CAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TATCGCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGTA TGTGTTGC
AAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG CCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGC
CAACAATA AGGGGTGG ATTAAACA AGGCCTAT GCTGTTGT
GATATGCG CGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGAT
CCCAATTC ATGCGCTG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGC
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCTGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGG AGG AAAA GAAA CTTA CGA GGATT CCC
CTA GTA ACG GCG AGT
(2a)束花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCATCGA GTC TTT GAA CGC AA GTTGCGCC CGAGGCCA
ACCTGCCA AGGGCACG TCTGCCTG GGCGTCAA GCATTTTG
TTGCTCCG TGTCTCGT CACCCATC AATGGATG TGCTGGCG
AAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCC CGTCGTGC CCCTCGGT
GCGGCGGG CTTAAGAG CGGGTCGC CATCTCGT TGGTTGCG
AACAATAA GGGGTGGA TTAAATGG AGGCCTAT GCTATTGT
GTCGTGCA TGCCTAAG AGATTAAA TTTTTTAG GTGATCCC
AAATCACG CGTCGATC CACGGATG ATGCTTTG AATGCGAC
CCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC CGAGTTTA AGCATATC
AATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CAAGGATT CCCCTAGT
AACGGCG AGT
(3a)鼓槌石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGC
CAATCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCGTTA
CGTCGCTC CGTGTCCA GCCACCCG TCGATGGA TGGGCTGG
CGATGGCT CGGATGTG CACAGTGG CTCCTCGT GCCCCTCG
GCACGGCG GGCTTAAG AGCGGGTA ATCATCTC GTTGGCTG
CGAACAAT ATGGGGTG GATAAATG CGATGCCT ATGATATT
GTGCCGTG CATGCCCG AGAGATGA TCATACTT ATTCAGGT
GATCCCAA ACCATGCG TCGATCCA TGGATGGC GTTTTGAA
TGCGACCC CAGGACAG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAG
CATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATT
CCC CTA GTA ACG GCG AGT
(3b)鼓槌石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAA
TCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGTTACGT
CGCTCCGT GTCCAGCC ACCCGTCG ATGGATGG GCTGGCGA
TGGCTCGG ATGTGCAC AGTGGCTC CTCGTGCC CCTCGGCA
CGGCGGGC TTAAGAGC GGGTAATC ATCTCGTT GGCTGCGA
ACAATATG GGGTGGAT AAATGCGA TGCTTATG ATATTGTG
CCGTGCAT GCCCGAGA GATGATCA TACTTATT CAGGTGAT
CCCAAACC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTT TTGAATGC
GACCCCAG GACAGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GA AGA AAC TTA CGA GGATT CCC
CTA GTA ACG GCG AGT
(4a)玫瑰石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGC
CAATCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TGTTGCTC CGTGTCTA CTCACACC CATCGATG GATGTGCT
GGTGTAGG CTCGGATG TGCATGCT GGCTCGTC GTTCTCCC
AGGTGCGG CGGGCTGA AGAGCGGG TCATCCTC TCGTTTGC
GGCGAACA ATAAGGGG TGGATTGA AGAGAGGT CTATGCTA
TTGTGTCG TGCATGCC TGAGAGAT GATTAACT TTTTTGTG
ATCCCAAA TCATGCAT CGATCCAT GGATGATG CTTTGAAT
GTGACCCC AGGATGGG CGAGGCTA CCCGCTGA GTTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
(4b)玫瑰石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTG CGCCCGAG
GCCAATCG GCCAAGGG CACGTCTG CCTGGGCG TCAAGCAT
TTTGTTGC TCCGTGTC TACTCACA CCCATCGA TGGATGTG
CTGGTGTA GGCTCGGA TGTGCATG CTGGCTCG TCGTTCTC
CCAGGTGC GGCGGGCT GAAGAGCG GGTCATCC TCTCGTTT
GCGGCGAA CAATAAGG GGTGGATT GAAGAGAG GTCTATGC
TATTGTGT CGTGCATG CCTGAGAG ATGATTAA CTTTTTTG
TGATCCCA AATCATGC ATC GATC CATGGATG ATGC TTTG
AATG TGAC CCCA GGAT GGGC GAGG CTAC CCGC TGAG
TTTA AGCA TATC AATA AGCG GAGG AGAA GAAA CTTA
CGAG GA TT CCC CTA GTA ACG GCG AGT
(5a)密花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAA
CCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGTTATGT
CGCTCCGT GTTAACTC CATCCCAT CGATGTAT GGGCTGGC
GAAGGCTC GGATGTGC AGTGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGA GCTGAAA GCGGGTAA TCATCTCG TTGGCTGC
GAACGATA AGGGGTGG ATTAAAGC GAGACCTA TGTTATTG
TGTCGTGT ATGCCCGA GAGAAGAT TATACATA CTCAGGTG
ATCCTGAA TCATGCGT CGATCAAA GGACGGCG CTTGGAAT
GCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGC
ATATTAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTA GTA ACG GCG AGT
(5b)密花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：AAC CATCGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCGC CCGAGGCCAA
CCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGTTATGT
CGCTCCGT GTTAACTC CATCCCAT CGATGTAT GGGCTGGC
GAAGGCTC GGATGTGC AGTGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGA GCTGAAAA GCGGGTAA TCATCTCG TTGGCTGC
GAACGATA AGGGGTGG ATTAAAGC GAGACCTA TGTTATTG
TGTCGTGT ATGCCCGA GAGAAGAT TATACATA CTCAGGTG
ATCCTGAA TCATGCGT CGATCAAA GGACGGCG CTTGGAAT
GCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGC
ATATTAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
(6a)流苏石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCCGA
GGCCAACA GGCCAAGG GCACGTCT GCCTGGGC GTCAAGTG
TTATGTCG CTCCATGC CAAGTCAC CCATCGAT GGATGGGC
CGGCGAAG GCTCGGAT GTGCACAG TGGCTCGC CGTGCCCC
TCGGTGCG GCGGGCTG AAGAGCGG GTCATTAT CTTGTTGG
CTGCAGGC AATAATGG GTGGATAA ACGCGAGG CCTTTGTT
ATTGTGTC GTGCATGC CTAAGATA TGATTAAA CTTTTTAG
GTGATCCC AAATCATG CGTCGATC CACGGATG GCGTTTTG
AATGCGAC CCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC CGAGTTTA
AGCATATC AATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGA GGA
TT CCC CTA GTA ACG GCG AGT
(6b)流苏石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：AAC CATCGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CC CGAGGCCA
ACAGGCCA AGGGCACG TCTGCCTG GGCGTCAA GTGTTATG
TCGCTCCA TGCCAAGT CACCCATC GATGGATG GGCCGGCG
AAGGCTCG GATGTGCA CAGTGGCT CGCCGTGC CCCTCGGT
GCGGCGGG CTGAAGAG CGGGTCAT TATCTTGT TGGCTGCA
GGCAATAA TGGGTGGA TAAACGCG AGGCCTTT GTTATTGT
GTCGTGCA TGCCTAAG ATATGATT AAACTTTT TAGGTGAT
CCCAAATC ATGCGTCG ATCCACGG ATGGCGTT TTGAATGC
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGGA TT CCC
CTA GTA ACG GCG AGT
(7a)重唇石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCTGAGGC
CAACCGGC TGAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TATCGCTC CGTGCCTA GTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGC
CAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGC
CAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGT
GTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTC ATACTTAT TAGGTGAT
CCCAATTC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGT
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTA ACG GCG AGT
(8a)小黄花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAA
TCGGCCAA GGGCACGT TCGCCTGG GCGTCAAG CATTACGT
CGCTCCAT GTCAACTC CATCCCTT CTTTTGAT GGGCTGGT
AAAAGGCT TGGACGTG TAAAGTGG CTCGTCGT GCCCCTCG
GTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC ATCATCTC GTTGGCTA
CGAACAAT TACGTGTG GATTAAAG TGCGGCCT ATCTTATT
GTGTCATG TATGCCTG AGAAGATT ATGCATTT TTAGGTGA
TCCCAAAT CATGCGTC GATCCATG GATGACGT TTGGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGTCAC CCGCTGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
(9a)聚石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCATCGAGTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAA
TCGGCCAA GGGCACGT TCGCCTGG GCGTCAAG CATTATGA
CGCTCCCT GTCAACTC CATCCCAT CTTTTAAT GGGCTGGC
GAAGGCTC GGATGTGC AAAGTGGC TCGTCGTG CCTCTCAG
TGCGGCGG GCTTAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTAC
GAACAATT ACGGGTGG ATTAAAGT GAGGCCTA TATTATAT
TGTCGTGT ATGCCTGA GAGAAGAT TATTCATT TTTTGGTT
ATCCCAAA TCATGCGT CGATCCAT AGATCACG TTTGGAAT
GCGACCCC AGGATGGG CGAGGTCA CCCGCTGA GTTTAAGC
ATATCACT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCC
CTA GTA ACG GCG AGT
(10a)美花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTT GCGC CCGAGGC
CAACCGG CCAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAGTCATT
TTATCGCT CTGTGCCA AGCTAACC ATCGATTG ATGTGTTG
GCGAAGGC TTGGATGT GCATTATG GCTCATCG TGCCCCTG
GGCGCGGC GGGCTGAA GAGCGGGT CATCATCT CGTTGGCT
GCGAACAA TAAGGGGT GGACTGAA GGGAGAC CTATGCTA
TTGTGTCG TGCATGCC TAAGAGTT GATCATAC CTTTGAGG
AGATCCCA AATCATGC GTCGATCT ATGGACGG CGCTTTGA
ATGCGACC CCAGGATG GGCGAGGC CACCCGCC GAGTTTAA
GCATATCA ATAAGCGG AGGAGAAG AAACTTAC GAGGATTC
CC CTA GTA ACG GCG AGT
(10b)美花石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA GTCATTTT
ATCGCTCT GTGCCAAG CTACCCAT CGATTGAT GTGTTGGC
GAAGGCTT GGATGTGC ATTATGGC TCATCGTG CCCCTGGG
CGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTGC
GAACAATA AGGGGTGG ACTGAAGG GAGACCTA TGCTATTG
TGTCGTGC ATGCCTAA GAGTTGAT CATACCTT TGAGGAGA
TCCCAAAT CATGCGTC GATCTATG GACGGCGC TTTGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACGGCG AGT
(11a)细茎石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGT TGCGCCTG AGGCCA
ACCGGCTG AGGGCACG TCCGCCTG GGCGTCAA GCATTTTA
TCACTCCG TGCCTACT CTCCCATC CATGGATG TGTTGCTA
AGGCTCGG ATGTGCAC GGTGGCTC GTCGTGCC CCTTGGTG
CGGCGGGC TGAAGGGC GGGTCATC TTCTCGTT GGCTGCCA
ACAATAAG GGGTGGAT TAAATAAG GCCTATGC TATTGTGT
CAAGCGCG CCCGAGAG ATGGTCAT ACTTTTTA GGTGATCC
CAATTCAT GCGTTGAT CCATGGAT GGCGTATC GAATGTGA
CCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCG CTGAGTTT AAGCATAT
CAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTT ACGAGGAT TCCCCTAG
TAACGGCG AGT
(11b)细茎石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCATCG A GTC TTT GAA CGC AAGTTGCGC CTGAGGCCAA
CCGGCTGA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAG CATTTTAT
CACTCCGT GCCTACTC TCCCATCC ATGGATGT GTTGCTAA
GGCTCGGA TGTGCACG GTGGCTCG TCGTGCCC CTTGGTGC
GGCGGGCT GAAGGGCG GGTCATCT TCTCGTTG GCTGCCAA
CAATAAGG GGTGGATT AAATAAGG CCTATGCT ATTGTGTC
AAGCGCGC CCGAGAGA TGGTCATA CTTTTTAG GTGATCCC
AATTCATG CGTTGATC CATGGATG GCGTATCG AATGTGAC
CCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC TGAGTTTA AGCATATC
AATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATT CCCCTAGT
AACGGCGAGT
(12a)杓唇石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGT TGCGCCTGAG GCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGA TAT
GTCGCTCT GTGTTAAG TTAACCAT CGATGGAT GGGTTGGC
GAAGGCTC GGATGTGC ATAATGGC TCGTTGTG CCCCTCAG
CGTGGCGG GCTGAAGA GGGGGTCA TCATCTTG TTAGTCGC
AAACAATA AGGGGTGG ATAAATAT GAGGCCTA TGTTATTG
TGTTGTGC ATGCCCAA GAGATGAT TAAACCTT TTTTGTGA
TCCTAAAT CATGCGTC AATCCATG TATGGCGT TTTGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGTG GAGAAGAA ACTTACAA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
(12b)杓唇石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCTGAGGC
CAACCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AA GCGATA
TGTCGCTC TGTGCTAA GTTAACCA TCGATGGA TGGGTTGG
CGAAGGCT CGGATGTG CATAATGG CTCGTTGT GCCCCTCA
GCGTGGCG GGCTGAAG AGGGGGTC ATCATCTT GTTAGTCG
CAAACAAT AAGGGGTG GATAAATA TGAGGCCT ATGTTATT
GTGTTGTG CATGCCCA AGAGATGA TTAAACCT TTTTTGTG
ATCCTAAA TCATGCGT CAATCCAT GTATGGCG TTTTGAAT
GCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACAA GGATTCCC
CTAGTAAC GGCGAGT
(13a)金钗石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCT GAGGCC
AACCGGCT GAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTT
ATCGCTCC GTGCCTAG TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTGCC
AAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGT
GCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAATAA GGCCTATG CTATTGTG
TCAAGCGC GCCTGAGA GATGGTCA TACTTATT AGGTGATC
CCAATTCA TGCGTCGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTG
ACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATA
TCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTA
GTAACGGC GAGT
(13b)金钗石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AACCATCGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCT GAGGCCAA
CCGGCTGA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAG CATTTTAT
CGCTCCGT GCCTAGTC TCCCATCC ATGGATGT GTTGCCAA
GGCTCGGA TGTGCACG GTGGCTCG TCGTGCCC CTTGGTGC
GGCGGGCT GAAGGGCG GGTCATCT TCTCGTTG GCTGCCAA
CAATAAGG GGTGGATT AAATAAGG CCTATGCT ATTGTGTC
AAGCGCGC CTGAGAGA TGGTCATA CTTATTAG GTGATCCC
AATTCATG CGTCGATC CATGGATG GCGTATCG AATGTGAC
CCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC CGAGTTTA AGCATATC
AATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATT CCCCTAGT
AACGGCGAGT
(14a)铁皮石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCAAGGC
CAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TATCTCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGGA TGTGTTAC
TAAGGCTC GGATGTGC ATGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTG
CCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAA AAGGCCTA TGCTATTG
TGATAAGC GCGCCCGA GAGATGAT CATACTTT TTAGGTGA
TCCCAATC CATGCGCT AATCCATG GATGGCGT ATCGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CTGCTGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AAAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
(14b)铁皮石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCAAGGC
CAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TATCTCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGGA TGTGTTAC
TAAGGCTC GGATGTGC ATGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGC
CAACAATA AGGGGTGG ATTAAAAA AGGCCTAT GCTATTGT
GATAAGCG CGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGAT
CCCAATCC ATGCGCTA ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGC
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC TGCTGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA AAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT
(14c)铁皮石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCAAGGC
CAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT
TATCTCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGGA TGTGTTAC
TAAGGCTC GGATGTGC ATGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGG
TGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGC
CAACAATA AGGGGTGG ATTAAAA AGGCCTAT GCTATTGT
GATAAGCG CGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGAT
CCCAATCC ATGCGCTA ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGC
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC TGCTGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA AAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT
(14d)铁皮石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCA AGG
CCAACCGG CTAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATT
TTATCTCT CCGTGCCT AATCTCCC ATCCATGG ATGTGTTA
CTAAGGCT CGGATGTG CATGGTGG CTCCTCGT GCCCCTTG
GTGCGGCG GGCTGAAG GGCGGGTC ATCTTCTC GTTGGTTG
CCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAA AAGGCCTA TGCTATTG
TGATAAGC GCGCCCGA GAGATGAT CATACTTT TTAGGTGA
TCCCAATC CATGCGCT AATCCATG GATGGCGT ATCGAATG
CGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CTGCTGAG TTTAAGCA
TATCAATA AGCGGAGG AAAAGAAA CTTACGAG GATTCCCC
TAGTAACG GCGAGT
(14e)铁皮石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCA AGG
CCAACCGG CTAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATT
TTATCTCT CCGTGCCT AATCTCCC ATCCATGG ATGTGTTA
CTAAGGCT CGGATGTG CATGGTGG CTCCTCGT GCCCCTTG
GTGCGGCG GGCTGAAG GGCGGGTC ATCTTCTC GTTGGTTG
CCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAA AAGGCCTA TGCTATTG
TGATAAGC GCGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGAT
CCCAATCC ATGCGCTA ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGC
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC TGCTGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA AAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT
(15a)黑毛石斛的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列：
AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGCCTGAG GCC
AACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTAC
GTCACTCC GTGCCAAC TCCATTCC ATCGATGG ATGGGCCG
GTGAAGGC TCGGATGT GTAGAGTG GCTCGTCG TGCCCGTC
GGTGCGGC GGGTTGAA GAGTGGGT CATCATCT CGTTGGCT
GCGAACAA TAAGGGGT GGAATAAA GTGAGACC TATGTTAT
TGTGTCGT GTATGCCT GAGAGAAG ACCATTAT CAGGAGAT
CCCAAATC ATGCGTCG ATCCATGA ATGGCGTT TGGAATGC
GACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT
ATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCT
AGTAACGG CGAGT。
3.一种鉴定石斛品种或辨别其真伪的方法，该方法包括如下步骤：
a.从植物样品中提取DNA；
b.以步骤a提取的DNA为模板，以寡核苷酸作为聚合酶链反应(PCR)引物，扩增ITS2及部份5.8S和28S的区段，所用的引物分别采自植物5.8S和28S的保守区段；
c.应用直接测序技术测定步骤b所获得的PCR产物的序列；
d.将步骤c测得的DNA序列与权利要求1或2中所述的任一石斛品种的ITS2及5.8S和28S核糖体部份rDNA序列比较以确定石斛品种或辨别其真伪。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB011024348A CN1173989C (zh) | 2001-01-31 | 2001-01-31 | 石斛的dna序列及利用该序列鉴定其品种或辨别其真伪的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB011024348A CN1173989C (zh) | 2001-01-31 | 2001-01-31 | 石斛的dna序列及利用该序列鉴定其品种或辨别其真伪的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1368504A CN1368504A (zh) | 2002-09-11 |
| CN1173989C true CN1173989C (zh) | 2004-11-03 |
Family
ID=4652717
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB011024348A Expired - Fee Related CN1173989C (zh) | 2001-01-31 | 2001-01-31 | 石斛的dna序列及利用该序列鉴定其品种或辨别其真伪的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1173989C (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8442245B2 (en) | 2008-12-22 | 2013-05-14 | Siemens Medical Instruments Pte. Ltd. | Hearing device with automatic algorithm switching |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102732513B (zh) * | 2012-06-19 | 2014-01-15 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 采用特异性引物pcr检测鼓槌石斛的方法 |
| CN103173532B (zh) * | 2012-09-29 | 2015-02-18 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 一种鉴别金银花和山银花的方法及其应用 |
| CN103571949A (zh) * | 2013-10-12 | 2014-02-12 | 杭州师范大学 | 一组用于鉴定硬脚和软脚铁皮石斛的微卫星分子标记 |
| CN104531872A (zh) * | 2014-12-29 | 2015-04-22 | 杭州师范大学 | 鉴别重唇石斛和钩状石斛的分子特异性标记引物及方法 |
| CN106399475B (zh) * | 2016-08-26 | 2019-06-04 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 一种获取rDNA ITS2序列用来对铁皮枫斗鉴定的方法 |
-
2001
- 2001-01-31 CN CNB011024348A patent/CN1173989C/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8442245B2 (en) | 2008-12-22 | 2013-05-14 | Siemens Medical Instruments Pte. Ltd. | Hearing device with automatic algorithm switching |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1368504A (zh) | 2002-09-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1156587C (zh) | 中国石斛属植物及其药材的dna分子鉴定方法 | |
| CN101074450A (zh) | 诊断探针检测系统 | |
| CN1584049A (zh) | 转基因产品检测寡核苷酸芯片的制作方法及其应用 | |
| CN1675373A (zh) | 用于鉴别水稻品种的方法 | |
| CN1264988C (zh) | 应用聚合酶链反应对小麦真菌病原体的检测 | |
| CN1877328A (zh) | 用23s核糖体基因探针阵列检测水生动物病原菌的方法 | |
| CN1748028A (zh) | 用于变异基因检测的信号扩增方法 | |
| CN101045945A (zh) | 检测多种常见细菌病原体的基因芯片、制备方法、试剂盒 | |
| CN1173989C (zh) | 石斛的dna序列及利用该序列鉴定其品种或辨别其真伪的方法 | |
| CN1697883A (zh) | 靶核苷酸序列的检测方法、该方法实施中使用的检测靶结构以及其制造方法、和靶核苷酸序列检测用分析试剂盒 | |
| CN1633500A (zh) | 用于持家基因mRNA检测的核酸扩增用引物和使用该引物的检查方法 | |
| CN1616676A (zh) | 稳定的杂交体 | |
| CN1202264C (zh) | 基于基因组外显子芯片的数量性状基因位点定位方法 | |
| CN1160459C (zh) | 乳发酵短杆菌细胞色素bd型醌醇氧化酶基因 | |
| CN1778930A (zh) | 激发机体抗鸡球虫感染的融合基因及其编码蛋白与应用 | |
| CN1152139C (zh) | 啤酒花遗传变种的鉴定方法 | |
| CN100351374C (zh) | 用于检测结核分枝杆菌的寡核苷酸和方法 | |
| CN1186457C (zh) | 均相基因矩阵 | |
| CN1969044A (zh) | Dna阵列与单核苷酸多态性的检测方法 | |
| CN1877327A (zh) | 利用核糖体操纵子间区探针检测水生动物病原菌的方法 | |
| CN1966726A (zh) | 检测REG IV mRNA的方法 | |
| CN1771337A (zh) | 包含单核苷酸多态性且与结肠癌有关的多核苷酸、包括该多核苷酸的微阵列和诊断试剂盒以及用该多核苷酸诊断结肠癌的方法 | |
| CN1169969C (zh) | Ret寡核苷酸微芯片及其用于检测遗传性癌症的方法 | |
| CN1606622A (zh) | 通过全面检测和定量食物中毒细菌的热稳定直接溶血素相关的基因 ( t d h ) 相关溶血素基因)对产溶血素细菌进行检测和定量的方法 | |
| CN1526111A (zh) | 可用于评估干扰素疗效的多态标记 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: GR Ref document number: 1047753 Country of ref document: HK |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20041103 Termination date: 20160131 |
|
| EXPY | Termination of patent right or utility model |