CN117357599A - 一种口腔喷雾及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种口腔喷雾，包括以下原料：中药组合物、处理用酶、发酵用菌种以及辅料，中药组合物包括：18～20份黄连、15～16份半夏、11～12份枇杷叶、10～11份大腹皮、5～6份陈皮、5～6份甘草、2～3份辛夷、5～6份防风、48～50份桂心、25～28份枣肉、11～12份川芎以及6～7份鸡内金；还包括鲜山楂过滤液、米醋和川穹过滤液，处理用酶包括蜗牛酶和葡萄糖氧化酶，发酵用菌种包括副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，辅料包括1.20％～1.24％磷酸氢二钠、0.8％～1.0％柠檬酸、0.6％～0.8％硫酸角质素、0.4％～0.5％乳清乳铁蛋白、0.1％～0.12％L‑抗坏血酸、0.2％～0.24％吐温80、0.5％～0.6％D‑丙酸钠，余量为蒸馏水。本发明还公开了该口腔喷雾的制备方法。该口腔喷雾成分安全，能够长效持久的清除口腔异味，并且从舌部给药，对病理性口臭具有显著疗效。

Description

一种口腔喷雾及其制备方法
技术领域
本发明涉及口腔清洁用品技术领域，具体涉及的是一种口腔喷雾及其制备方法。
背景技术
口腔就像一个微型工厂，里面寄生着大量细菌，它们发酵食物残屑，制造出发酵腐败的臭味，并随着呼吸散发出来，这正是口臭(口腔异味)的来源。口腔健康状态是反映生命健康质量的一面镜子。近年来，口腔问题越来越得到重视，口腔异味在交谈中容易给人留下不礼貌的印象，不利于人际交往。
口臭(口腔异味)分为生理性和病理性。生理性口臭指人们在生活中产生的一种短暂现象，如饥饿时、食用某些刺激性食品(洋葱、大蒜)、吸烟、晚餐距睡眠时间过短等。病理性口臭主要包括以下原因：口腔疾病、胃肠道疾病、长期便秘、服用使唾液分泌减少的药物、心理压力过大等。近些年来，市面上存在的口腔喷雾剂品类繁多，但功效单一，使用后很难达到长效持久的清新口气，对于消除生理性口臭的效果较为明显，但对于消除病理性口臭很难起到明显的作用。如专利申请CN102198065A使用罗汉果、淡竹叶、金银花、野菊花、甘草和薄荷作为主要活性成分制备了一种口腔喷雾剂，以实现清新口气和滋润咽喉的作用，但是其难以根治病理性的口腔异味问题，停药后患者复发的可能性较大。
中医认为，口臭多由肺、脾、胃积热，肝郁或食积不化所致、而且和唾液分泌物的异常有很大关系。因此，想要根治病理性口臭乃至使身体保持健康，研究一种持久安全有效的从舌部给药调节身体、提升唾液分泌，并且能发挥持久抑菌、除臭效果的口腔喷雾具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种口腔喷雾及其制备方法，成分安全，能够长效持久的清除口腔异味，并且从舌部给药调节身体，对病理性口臭具有显著疗效。
为了达成上述目的，本发明的解决方案是：
一种口腔喷雾，包括以下原料：中药组合物、处理用酶、发酵用菌种以及辅料，所述中药组合物包括如下重量份的组分：18～20份黄连、15～16份半夏、11～12份枇杷叶、10～11份大腹皮、5～6份陈皮、5～6份甘草、2～3份辛夷、5～6份防风、48～50份桂心、25～28份枣肉、11～12份川芎以及6～7份鸡内金；还包括鲜山楂过滤液、米醋和川穹过滤液，所述鲜山楂过滤液与所述中药组合物的质量用量比为1～1.1:1，所述中药组合物和所述鲜山楂过滤液混合形成中药材预处理物料，所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量用量比为1:3～3.3:3～3.3；所述处理用酶包括蜗牛酶和葡萄糖氧化酶，所述发酵用菌种包括副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，所述辅料包括1.20％～1.24％磷酸氢二钠、0.8％～1.0％柠檬酸、0.6％～0.8％硫酸角质素、0.4％～0.5％乳清乳铁蛋白、0.1％～0.12％ L-抗坏血酸、0.2％～0.24％吐温80、0.5％～0.6％ D-丙酸钠，余量为蒸馏水。
所述蜗牛酶的用量为所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量总用量的0.48％～0.5％，所述葡萄糖氧化酶的添加量为所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量总用量的0.09％～0.1％。
所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液混合并经过所述处理用酶的酶解后形成中药材处理液，所述副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌的比例分别占所述中药材处理液的质量用量的0.3％～0.35％。
所述中药材处理液经过所述发酵用菌种的发酵后得到发酵过滤液，所述辅料与所述发酵过滤液的质量用量比为5～5.2:1。
一种口腔喷雾的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、先按比例取18～20份黄连、15～16份半夏、11～12份枇杷叶、10～11份大腹皮、5～6份陈皮、5～6份甘草、2～3份辛夷、5～6份防风、48～50份桂心、25～28份枣肉、11～12份川芎以及6～7份鸡内金，得中药组合物，温干至水分低于8％，研磨成100～120目的中药细粉末；
步骤2、然后向中药细粉末中加入鲜山楂过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1～1.1:1，搅拌至不黏手、成团，静置3～4h得到中药材预处理物料；
步骤3、然后按比例向中药材预处理物料加入米醋和川穹过滤液，在50～60rpm的转速下搅拌10～12min后，继续搅拌，按顺序加入蜗牛酶、葡萄糖氧化酶进行酶解，酶解后得中药材处理液；
步骤4、然后在中药材处理液中接种副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，进行发酵，发酵15～16天后得中药材发酵液；
步骤5、待发酵完成后，将中药材发酵液静置10～12h，取上层上清液，并对沉淀的药渣进行压榨处理，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得药渣过滤液；
步骤6、最后调节辅料的pH至5.0～5.6，并将上清液与药渣过滤液混合均匀后，得到发酵过滤液，将发酵过滤液与辅料按1:5～5.2的质量比例混合，在100～120rpm的转速下搅拌10～12min，经紫外线消毒后灌装成瓶，即得所述口腔喷雾。
步骤2中，所述鲜山楂过滤液的制备方法为：取鲜山楂捣碎，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得鲜山楂过滤液。
步骤3中，所述川穹过滤液的制备方法为：取川穹切片，加入纯化水浸泡10～11h后，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得川穹过滤液，川穹切片与纯化水的质量用量比为1:10～11；所述蜗牛酶的用量为所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量总用量的0.48％～0.5％，所述蜗牛酶的酶解条件为：酶解温度30～40℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至3.8～5.0，酶解时间为60～80min。
步骤3中，所述葡萄糖氧化酶的酶活性为1800～2200U，所述葡萄糖氧化酶的用量为所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量总用量的0.09％～0.1％，所述葡萄糖氧化酶的酶解条件为：酶解温度30～40℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至6.0～6.8，酶解时间为20～30min。
步骤4中，所述副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌的接种比例为所述中药材处理液的质量用量的0.3％～0.35％；
所述发酵的过程为：
0～2天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于5.0，温度为35～38℃，不搅拌；
2～10天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于6.0，温度为28～35℃，在100～120rpm的转速下搅拌；
10天后，在50～60rpm的转速下搅拌。
步骤6中，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节所述辅料的pH至5.0～5.6；所述紫外线消毒的条件为：采用253.7nm波长的紫外灯，在200～300mm的距离下照射50～60min。
采用上述技术方案后，本发明一种口腔喷雾及其制备方法，具有以下有益效果：
1、本发明中的主要中药成分含有黄连、半夏、枇杷叶、大腹皮、陈皮、辛夷、防风、鸡内金、枣肉、川芎、桂心、甘草、山楂和米醋。其中，黄连专入胃肠，而能清热燥湿为君药；半夏、枇杷叶降气化浊共为臣药；大腹皮、陈皮理气化湿共为佐药；辛夷、防风通窍辟秽；鸡内金、山楂等乃开胃消食之圣品，食积消，热无以附则易去；川穹、枣肉补脾益气；米醋降火解毒；桂心气味芳香；甘草调和众药。上述诸法并进，可奏清热消食生津、芳香化浊之功，口臭自愈。
2、处理用酶由蜗牛酶和葡萄糖氧化酶组成，其中，蜗牛酶为复合酶，含有纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、蛋白酶、寡糖酶、霉解酶等20多种酶，纤维素酶、果胶酶等能有效破解中药材成分的细胞壁，促使其中的有效成分的释放，淀粉酶、蛋白酶则能在发酵前提前将大分子的淀粉、蛋白降解为小分子的糖、氨基酸，以供初期尚未产酶的微生物使用，寡糖酶、霉解酶等则能分解中药材原料成分中的抗营养因子、毒素成分等以减少产品副作用；葡萄糖氧化酶能将葡萄糖分解为葡萄糖酸及过氧化氢，能起到在发酵初期及成品使用时抑制杂菌的作用，同时其也能分解一部分的霉菌毒素。
3、本发明中的发酵用菌由副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌组成。其中，副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌均属于乳酸菌中的乳杆菌属，长双歧杆菌则属于双歧杆菌属，以上菌均为口腔、肠道中的常见益生菌，发酵过程中可产生多种酶、有机酸及多种有益代谢产物，可以有效提升中药材的使用效果，同时其在使用时可以定植与口腔与肠道中，建立并维护口腔与肠道中的微生态系统，抑制有害菌的增值，进而消除口臭。
4、本发明中的辅料由磷酸氢二钠、柠檬酸、硫酸角质素、乳清乳铁蛋白、L-抗坏血酸、吐温80、D-丙酸钠组成，其中，磷酸氢二钠、柠檬酸为pH缓冲对，起到稳定pH的作用，同时柠檬酸作为有机弱酸，有抑制有害菌及除臭的作用；硫酸角质素是以蛋白多糖形式存在的一种粘多糖，其能加速表皮细胞更新，维持细胞屏障；乳清乳铁蛋白作为一种蛋白质增稠剂，能提升中药制剂在口腔中的附着力，提升作用时间，且其也具备一定的抗菌消炎效果，同时其作为蛋白，能与硫酸角质素结合，提升硫酸角质素的稳定性及生效时间；L-抗坏血酸作为抗氧化剂，主要起到提高本中药制剂稳定性的效果；吐温80为乳化剂、助溶剂，能提升溶液的均匀度，提高溶质的溶解度，防止沉淀出现；D-丙酸钠则是作为防腐剂起效，能有效抑制霉菌、酵母菌等真菌的繁殖，同时其作为有机酸钠盐，能与溶质中的小分子物质结合，也能作为助溶剂提升溶质的溶解性；辅料保护的pH环境调节至5.0～5.6，保持弱酸性可以提升中药制剂的抑菌能力，也不至于由于酸性过强导致部分有效成分的析出而影响使用效果。
5、本发明的口腔喷雾经过将中药组合物粉碎后与鲜山楂过滤液混合，通过山楂中含有的有机酸、脂肪酶等对中药原料进行初步处理，抑制杂菌繁殖的同时分解部分大分子油脂类物质；之后通过加入蜗牛酶和葡萄糖氧化酶进行酶解，在初期对纤维素、果胶、淀粉、蛋白等大分子物质进行分解以促进后续的发酵过程，同时也能起到一定的抑制杂菌作用；酶解结束后接种发酵用菌种，与中药材中原有的有益菌进行为期15天以上的发酵，通过益生菌发酵的作用使中药有效成分得以最大幅度的释放，且能有效分解中药材中的毒性成分并产生有机酸等风味物质，提升口感；最后过滤后添加辅料并经消毒步骤制得成品，通过添加辅料以提升产品的稳定性、保质期和使用效果等。
因此，本发明的目的在于提供一种口腔喷雾及其制备方法，成分安全，能够长效持久的清除口腔异味，并且从舌部给药调节身体，对病理性口臭具有显著疗效。
进一步，本发明的发酵过程中调控pH、温度、搅拌转速进行工艺控制。其中，0～2天，控制pH不低于5.0，温度为35～38℃，不搅拌，是因为发酵初期各种目标菌还未完成扩培，中高温情况下利于目标菌扩培，pH控制不低于5.0也是因为pH过低会影响目标菌的扩培，而5.0的pH对于目标乳酸菌、双歧杆菌的繁殖虽然影响不大，但可以在发酵前期目标菌还有形成优势菌群的情况下起到抑制杂菌滋生的作用，不搅拌也是为了降低溶氧以抑制杂菌；2～10天，控制pH不低于6.0，温度为28～35℃，搅拌的转速为100～120rpm，是因为发酵中期目标菌扩培基本完成，主要目的是分解中药成分并生成代谢产物，接近中性的pH及较低的温度有利于目标菌的代谢活动，较高的转速也是为了防止代谢产物的负反馈作用；10天后，不控制pH和温度，搅拌的转速为50～60rpm，则是因为发酵后期需要目标菌在自然条件下完成发酵以提高产品成品的稳定性。
进一步，本发明采用辅料对产品的稳定性起到保护作用，辅料的PH不得过低，过低则会导致中药材中有效成分的析出，过高则会影响抑菌效果。
具体实施方式
为了进一步解释本发明的技术方案，下面通过具体实施例来对本发明进行详细阐述。
一种口腔喷雾，包括以下原料：中药组合物、处理用酶、发酵用菌种以及辅料，中药组合物包括如下重量份的组分：18～20份黄连、15～16份半夏、11～12份枇杷叶、10～11份大腹皮、5～6份陈皮、5～6份甘草、2～3份辛夷、5～6份防风、48～50份桂心、25～28份枣肉、11～12份川芎以及6～7份鸡内金；还包括鲜山楂过滤液、米醋和川穹过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1～1.1:1，中药组合物和鲜山楂过滤液混合形成中药材预处理物料，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3～3.3:3～3.3；处理用酶包括蜗牛酶和葡萄糖氧化酶，发酵用菌种包括副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，所述辅料包括1.20～1.24％磷酸氢二钠、0.8％～1.0％柠檬酸、0.6％～0.8％硫酸角质素、0.4％～0.5％乳清乳铁蛋白、0.1％～0.12％ L-抗坏血酸、0.2％～0.24％吐温80、0.5％～0.6％ D-丙酸钠，余量为蒸馏水。
蜗牛酶的用量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.48％～0.5％，葡萄糖氧化酶的添加量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.09％～0.1％。
中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液混合并经过处理用酶的酶解后形成中药材处理液，副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌分别占中药材处理液的质量用量的0.3％～0.35％。
中药材处理液经过发酵用菌种的发酵后得到发酵过滤液，辅料与发酵过滤液的质量用量比为5～5.2:1。
一种口腔喷雾的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、先按比例取18～20份黄连、15～16份半夏、11～12份枇杷叶、10～11份大腹皮、5～6份陈皮、5～6份甘草、2～3份辛夷、5～6份防风、48～50份桂心、25～28份枣肉、11～12份川芎以及6～7份鸡内金，得中药组合物，温干至水分低于8％，研磨成100～120目的中药细粉末；
步骤2、然后向中药细粉末中加入鲜山楂过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1～1.1:1，搅拌至不黏手、成团，静置3～4h得到中药材预处理物料；
步骤3、然后按比例向中药材预处理物料加入米醋和川穹过滤液，在50～60rpm的转速下搅拌10～12min后，继续搅拌，按顺序加入蜗牛酶、葡萄糖氧化酶进行酶解，酶解后得中药材处理液；
步骤4、然后在中药材处理液中接种副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，进行发酵，发酵15～16天后得中药材发酵液；
步骤5、待发酵完成后，将中药材发酵液静置10～12h，取上层上清液，并对沉淀的药渣进行压榨处理，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得药渣过滤液；
步骤6、最后调节辅料的pH至5.0～5.6，将上清液与药渣过滤液混合均匀后，得到发酵过滤液，将发酵过滤液与辅料按1:5～5.2的质量比例混合，在100～120rpm的转速下搅拌10～12min，经紫外线消毒后灌装成瓶，即得口腔喷雾。
步骤2中，鲜山楂过滤液的制备方法为：取鲜山楂捣碎，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得鲜山楂过滤液。
步骤3中，川穹过滤液的制备方法为：取川穹切片，加入纯化水浸泡10～11h后，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得川穹过滤液，川穹切片与纯化水的质量用量比为1:10～11。
步骤3中，蜗牛酶的用量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.48％～0.5％，蜗牛酶的酶解条件为：酶解温度30～40℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至3.8～5.0，酶解时间为60～80min。
步骤3中，葡萄糖氧化酶的酶活性为1800～2200U，葡萄糖氧化酶的用量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.09％～0.1％，所述葡萄糖氧化酶的酶解条件为：酶解温度30～40℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至6.0～6.8，酶解时间为20～30min。
步骤4中，副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌的接种比例为中药材处理液的质量用量的0.3％～0.35％。
步骤4中，发酵的过程为：
0～2天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于5.0，温度为35～38℃，不搅拌；
2～10天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于6.0，温度为28～35℃，在100～120rpm的转速下搅拌；
10天后，在50～60rpm的转速下搅拌。
步骤6中，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节所述辅料的pH至5.0～5.6。
步骤6中，紫外线消毒的条件为：采用253.7nm波长的紫外灯，在200～300mm的距离下照射50～60min。
中药组合物的组分、鲜山楂、川穹和米醋采购自亳州市万草堂药业有限公司；蜗牛酶采购自南京沃博生物科技有限公司、葡萄糖氧化酶采购自南宁东恒华道生物科技有限责任公司；副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌、长双歧杆菌均采购自江苏久佳生物科技有限公司，辅料的组分均采购自北京路桥技术股份有限公司。
实施例1
一种口腔喷雾，包括以下原料：中药组合物、处理用酶、发酵用菌种以及辅料，中药组合物包括如下重量份的组分：20份黄连、15份半夏、12份枇杷叶、10份大腹皮、6份陈皮、5份甘草、3份辛夷、5份防风、50份桂心、25份枣肉、12份川芎以及6份鸡内金。
还包括鲜山楂过滤液、米醋和川穹过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1:1，中药组合物和鲜山楂过滤液混合形成中药材预处理物料，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3:3。
处理用酶包括蜗牛酶和葡萄糖氧化酶，蜗牛酶的用量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.5％，葡萄糖氧化酶的添加量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.1％。
发酵用菌种包括副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液混合并经过处理用酶的酶解后形成中药材处理液，各发酵用菌种的接种比例占中药材处理液的质量用量的0.35％。
辅料包括1.20％磷酸氢二钠、1.0％柠檬酸、0.6％硫酸角质素、0.5％乳清乳铁蛋白、0.1％ L-抗坏血酸、0.2％吐温80、0.6％ D-丙酸钠，余量为蒸馏水。中药材处理液经过发酵用菌种的发酵后得到发酵过滤液，辅料与发酵过滤液的质量用量比为5:1。
一种口腔喷雾的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、先按比例取20份黄连、15份半夏、12份枇杷叶、10份大腹皮、6份陈皮、5份甘草、3份辛夷、5份防风、50份桂心、25份枣肉、12份川芎以及6份鸡内金，得中药组合物，采用铜锅温干至水分低于8％，研磨成100目的中药细粉末；
步骤2、然后向中药细粉末中加入鲜山楂过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1:1，搅拌至不黏手、成团，静置3h得到中药材预处理物料；
步骤3、然后按比例向中药材预处理物料加入米醋和川穹过滤液，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3:3，在50rpm的转速下搅拌12min后，继续搅拌，按顺序加入蜗牛酶、葡萄糖氧化酶进行酶解，酶解后得中药材处理液；
其中，蜗牛酶的用量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.5％，蜗牛酶按对酵母细胞壁的溶解活性评估其性能：每μg的蜗牛酶，2小时内，30℃水浴中可有效降解1.0～2.0×106个酵母细胞壁，酶解条件为：酶解温度35℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至4.2，酶解时间60min；葡萄糖氧化酶的酶活性为1800～2200U，葡萄糖氧化酶的用量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.1％，葡萄糖氧化酶的酶解条件为：酶解温度35℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至6.4，酶解时间30min；
步骤4、然后在中药材处理液中接种副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，进行发酵，发酵15天后得中药材发酵液；
其中副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌的接种比例分别为中药材处理液的质量用量的0.35％，
发酵的过程为：
0～2天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于5.0，温度为37℃，不搅拌；
2～10天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于6.0，温度为30℃，在100rpm的转速下搅拌；
10天后，不控制pH和温度，在50rpm的转速下搅拌；
步骤5、待发酵完成后，将中药材发酵液静置12h，取上层上清液，并对沉淀的药渣进行压榨处理，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得药渣过滤液；
步骤6、最后采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节辅料的pH至5.4，将上清液与药渣过滤液混合均匀后，得到发酵过滤液，将发酵过滤液与辅料按1:5的质量比例混合，在120rpm的转速下搅拌10min，经紫外线消毒后灌装成瓶，即得口腔喷雾。
步骤2中，鲜山楂过滤液的制备方法为：取鲜山楂捣碎，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得鲜山楂过滤液。
步骤3中，川穹过滤液的制备方法为：取川穹切片，加入纯化水浸泡10h后，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得川穹过滤液，川穹切片与纯化水的质量用量比为1:11。
步骤6中，紫外线消毒的条件为：采用253.7nm波长的紫外灯，在300mm的距离下照射60min。
实施例2
本实施例与实施例1的差别在于，中药组合物包括如下重量份的组分：18份黄连、16份半夏、11份枇杷叶、11份大腹皮、5份陈皮、6份甘草、2份辛夷、6份防风、48份桂心、28份枣肉、11份川芎以及7份鸡内金。
实施例3
本实施例与实施例1的区别在于，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1.1:1；中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3.3:3.3；辅料与发酵过滤液按5.2:1的质量比例混合。
实施例4
本实施例与实施例1的区别在于：辅料包括1.24％磷酸氢二钠、0.8％柠檬酸、0.8％硫酸角质素、0.4％乳清乳铁蛋白、0.12％ L-抗坏血酸、0.24％吐温80以及0.5％ D-丙酸钠，余量为蒸馏水。
对比例1
与实施例1的区别在于，对比例1中步骤1～步骤3的制备方法略有不同：
步骤1、先按比例取20份黄连、15份半夏、12份枇杷叶、10份大腹皮、6份陈皮、5份甘草、3份辛夷、5份防风、50份桂心、25份枣肉、12份川芎以及6份鸡内金，得中药组合物，采用铜锅温干至水分低于8％，研磨成100目的中药细粉末；
步骤2、然后向中药细粉末中加入蒸馏水，蒸馏水与中药组合物的质量用量比为1:1，搅拌至不黏手、成团，静置3h得到中药材预处理物料；
步骤3、然后按比例向中药材预处理物料加入米醋、川穹过滤液和鲜山楂过滤液，中药材预处理物料、米醋、川穹过滤液和鲜山楂过滤液的质量用量比为1:3:3:1，在50rpm的转速下搅拌12min后，继续搅拌，按顺序加入蜗牛酶、葡萄糖氧化酶进行酶解，酶解后得中药材处理液。
对比例2
一种口腔喷雾，包括以下原料：中药组合物、处理用酶、发酵用菌种以及辅料，中药组合物包括如下重量份的组分：20份黄连、15份半夏、12份枇杷叶、10份大腹皮、6份陈皮、5份甘草、3份辛夷、5份防风、50份桂心、25份枣肉、12份川芎以及6份鸡内金。
还包括鲜山楂过滤液、米醋和川穹过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1:1，中药组合物和鲜山楂过滤液混合形成中药材预处理物料，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3:3。
还包括辅料包括1.20％磷酸氢二钠、1.0％柠檬酸、0.6％硫酸角质素、0.5％乳清乳铁蛋白、0.1％ L-抗坏血酸、0.2％吐温80、0.6％D-丙酸钠，余量为蒸馏水。
一种口腔喷雾的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、先按比例取20份黄连、15份半夏、12份枇杷叶、10份大腹皮、6份陈皮、5份甘草、3份辛夷、5份防风、50份桂心、25份枣肉、12份川芎以及6份鸡内金，得中药组合物，采用铜锅温干至水分低于8％，研磨成100目的中药细粉末；
步骤2、然后向中药细粉末中加入鲜山楂过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1:1，搅拌至不黏手、成团，静置3h得到中药材预处理物料；
步骤3、然后按比例向中药材预处理物料加入米醋和川穹过滤液，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3:3，在50rpm的转速下搅拌12min后，得中药材处理液；
步骤4、然后将中药材处理液静置12h，取上层上清液，并对沉淀的药渣进行压榨处理，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得药渣过滤液；
步骤5、最后采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节辅料的pH至5.4，将上清液和药渣过滤液混合后，与辅料按1:5的质量比例混合，在120rpm的转速下搅拌10min，经紫外线消毒后灌装成瓶，即得口腔喷雾。
对比例2与实施例1的区别在于：不添加处理用酶和发酵用菌种，制备方法中不进行酶解和发酵。
对比例3
一种口腔喷雾，包括以下原料：中药组合物、处理用酶、发酵用菌种以及辅料，中药组合物包括如下重量份的组分：20份黄连、15份半夏、12份枇杷叶、10份大腹皮、6份陈皮、5份甘草、3份辛夷、5份防风、50份桂心、25份枣肉、12份川芎以及6份鸡内金。
还包括鲜山楂过滤液、米醋和川穹过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1:1，中药组合物和鲜山楂过滤液混合形成中药材预处理物料，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3:3。
发酵用菌种包括副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液混合后形成中药材处理液，各发酵用菌种的接种比例分别占中药材处理液的质量用量的0.35％。
辅料包括1.20％磷酸氢二钠、1.0％柠檬酸、0.6％硫酸角质素、0.5％乳清乳铁蛋白、0.1％ L-抗坏血酸、0.2％吐温80、0.6％ D-丙酸钠，余量为蒸馏水。中药材处理液经过发酵用菌种的发酵后得到发酵过滤液，辅料与发酵过滤液的质量用量比为5:1。
一种口腔喷雾的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、先按比例取20份黄连、15份半夏、12份枇杷叶、10份大腹皮、6份陈皮、5份甘草、3份辛夷、5份防风、50份桂心、25份枣肉、12份川芎以及6份鸡内金，得中药组合物，采用铜锅温干至水分低于8％，研磨成100目的中药细粉末；
步骤2、然后向中药细粉末中加入鲜山楂过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1:1，搅拌至不黏手、成团，静置3h得到中药材预处理物料；
步骤3、然后按比例向中药材预处理物料加入米醋和川穹过滤液，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3:3，在50rpm的转速下搅拌12min后，得中药材处理液；
步骤4、然后在中药材处理液中接种副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，进行发酵，发酵15天后得中药材发酵液；
其中副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌的接种比例分别为中药材处理液的质量用量的0.35％，
发酵的过程为：
0～2天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于5.0，温度为37℃，不搅拌；
2～10天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于6.0，温度为30℃，在100rpm的转速下搅拌；
10天后，不控制pH和温度，在50rpm的转速下搅拌；
步骤5、待发酵完成后，将中药材发酵液静置12h，取上层上清液，并对沉淀的药渣进行压榨处理，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得药渣过滤液；
步骤6、最后采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节辅料的pH至5.4，将上清液与药渣过滤液混合均匀后，得到发酵过滤液，将发酵过滤液与辅料按1:5的质量比例混合，在120rpm的转速下搅拌10min，经紫外线消毒后灌装成瓶，即得口腔喷雾。
对比例3与实施例1的区别在于：不添加处理用酶，制备方法中不进行酶解。
对比例4
一种口腔喷雾，包括以下原料：中药组合物、处理用酶、发酵用菌种以及辅料，中药组合物包括如下重量份的组分：20份黄连、15份半夏、12份枇杷叶、10份大腹皮、6份陈皮、5份甘草、3份辛夷、5份防风、50份桂心、25份枣肉、12份川芎以及6份鸡内金。
还包括鲜山楂过滤液、米醋和川穹过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1:1，中药组合物和鲜山楂过滤液混合形成中药材预处理物料，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3:3。
处理用酶包括蜗牛酶和葡萄糖氧化酶，蜗牛酶的用量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.5％，葡萄糖氧化酶的添加量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.1％。
辅料包括1.20％磷酸氢二钠、1.0％柠檬酸、0.6％硫酸角质素、0.5％乳清乳铁蛋白、0.1％ L-抗坏血酸、0.2％吐温80、0.6％ D-丙酸钠，余量为蒸馏水。
一种口腔喷雾的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、先按比例取20份黄连、15份半夏、12份枇杷叶、10份大腹皮、6份陈皮、5份甘草、3份辛夷、5份防风、50份桂心、25份枣肉、12份川芎以及6份鸡内金，得中药组合物，采用铜锅温干至水分低于8％，研磨成100目的中药细粉末；
步骤2、然后向中药细粉末中加入鲜山楂过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1:1，搅拌至不黏手、成团，静置3h得到中药材预处理物料；
步骤3、然后按比例向中药材预处理物料加入米醋和川穹过滤液，中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量用量比为1:3:3，在50rpm的转速下搅拌12min后，继续搅拌，按顺序加入蜗牛酶、葡萄糖氧化酶进行酶解，酶解后得中药材处理液；
其中，蜗牛酶的用量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.5％，蜗牛酶按对酵母细胞壁的溶解活性评估其性能：每μg的蜗牛酶，2小时内，30℃水浴中可有效降解1.0～2.0×106个酵母细胞壁，酶解条件为：酶解温度35℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至4.2，酶解时间60min；葡萄糖氧化酶的酶活性为1800～2200U，葡萄糖氧化酶的用量为中药材预处理物料、米醋和川穹过滤液的质量总用量的0.1％，葡萄糖氧化酶的酶解条件为：酶解温度35℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至6.4，酶解时间30min；
步骤4、待酶解完成后，将中药材处理液静置12h，取上层上清液，并对沉淀的药渣进行压榨处理，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得药渣过滤液；
步骤6、最后采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节辅料的pH至5.4，将上清液与药渣过滤液混合均匀后，得到过滤液，将过滤液与辅料按1:5的质量比例混合，在120rpm的转速下搅拌10min，经紫外线消毒后灌装成瓶，即得口腔喷雾。
对比例4与实施例1的区别在于：不添加发酵用菌种，制备方法中不进行发酵。
对比例5
与实施例1的区别在于，原料的处理用酶不添加蜗牛酶，在步骤3的酶解过程中也不进行蜗牛酶的酶解过程。
对比例6
与实施例1的区别在于，原料的处理用酶不添加葡萄糖氧化酶，在步骤3的酶解过程中也不进行葡萄糖氧化酶的酶解过程。
对比例7
与实施例1的区别在于，制备方法中，步骤4的发酵过程不控制温度和pH。
对比例8
与实施例1的区别在于，步骤6中，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节辅料的pH至6.2。
对比例9
与实施例1的区别在于，原料的辅料成分不添加磷酸氢二钠。
对比例10
与实施例1的区别在于，原料的辅料成分不添加D-丙酸钠。
对比例11
与实施例1的区别在于，原料的辅料成分不添加L-抗坏血酸。
对比例12
与实施例1的区别在于，原料的辅料成分不添加硫酸角质素、乳清乳铁蛋白。
对比例13
与实施例1的区别在于，原料的辅料成分不添加硫酸角质素。
对比例14
与实施例1的区别在于，原料的辅料成分不添加乳清乳铁蛋白。
实验例1
(1)样品的准备
取以上实施例1-4，对比例1-8所得的口腔喷雾，分别作为实验组1-4和对比组1-8；
含0.5％醋酸氯己定的水溶液，作为竞品实验组；
0.03mol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)(pH＝7.2～7.4)作为阳性对照组。
(2)抑菌测试
抑菌率检测依据WS/T 650-2019《抗菌和抑菌效果评价方法》中的5.1.1条的悬液定量抑菌试验，指示菌采用金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)，作用时间为1min，抑菌率的计算公式如下：
抑菌率(％)＝[阳性对照组菌量(cfu/mL)-样品组菌量(cfu/mL)]/阳性对照组菌量(cfu/mL)*100％。
抑菌测试结果如表1所示。
表1各口腔喷雾样品的抑菌率
由实施例1-4与竞品实验组的对比数据可以看出，相比市面上常规的0.5％醋酸氯己定的的口腔喷雾液体，本发明的口腔喷雾的抑菌效果更好；由对比例1可以看出，未将山楂过滤汁与中药材原料混合后静置进行预处理，让其内的有机酸、脂肪酶在中药材原料预处理时发挥作用，对于抑菌率有较明显的影响；由对比例2-4可以看出，未进行酶解和/或发酵工序均会导致抑菌率大幅度的下降，尤其以未进行发酵最为明显，这是因为发酵是本发明最重要的一道工序；由对比例5、6可以看出，在酶解工艺中去除蜗牛酶或者葡萄糖氧化酶均会导致抑菌率明显下降，尤其以去除蜗牛酶更为明显，这是因为蜗牛酶起到促进中药材中小分子成分释放的作用；由对比例7可以看出，在发酵过程中不进行工艺调控的话，会导致发酵效果的降低进而影响抑菌率；由对比例8可以看出，辅料的pH过高也会导致抑菌率的下降。
实验例2
(1)样品的准备
取以上实施例1-4，对比例9-11所得的口腔喷雾，作为实验组1-4和对比组9-11；
含0.5％醋酸氯己定的水溶液，作为竞品实验组；
0.03mol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)(pH＝7.2～7.4)作为阳性对照组。
(2)抑菌测试
保存条件为避光、阴凉处，抑菌率检测依据WS/T 650-2019《抗菌和抑菌效果评价方法》中的5.1.1条的悬液定量抑菌试验，指示菌采用金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)，作用时间为1min。
抑菌率的计算公式如下：
抑菌率(％)＝[阳性对照组菌量(cfu/mL)-样品组菌量(cfu/mL)]/阳性对照组菌量(cfu/mL)*100％。
表2各口腔喷雾样品随着时间保存下的抑菌率变化
由表2中实施例1-4与竞品实验组的差别可以看出，竞品实验组不仅刚开始的抑菌率低于本发明的口腔喷雾，随着保存时间的推进，其抑菌率下降的速度更是远快于本发明的口腔喷雾；由对比例9～11可以看出，辅料中省略磷酸氢二钠、D-丙酸钠、L-抗坏血酸其中之一，均会导致抑菌率更快地下降，尤其以去除磷酸氢二钠(对比例9)下降最为显著，这是因为磷酸氢二钠作为缓冲盐的主要成分，能起到稳定pH的作用。
实验例3临床应用
(1)样品的准备
取实施例1，对比例12-14所得的口腔喷雾样品，置于通用喷雾工具内，作为实验组1、对比组12-14；
含0.5％醋酸氯己定的水溶液，置于通用喷雾工具内，作为竞品实验组。
(2)测试方法
对实验组、对比组和竞品对照组进行感官测试，感官测试的项目包括口臭缓解效果、口臭缓解效果的持续时间、口腔舒适感。
感官测试的方法为：选取20名测试人员，每名测试人员均测评其中3组，每组均测试12人次，测评方法为在舌下进行喷雾3次，1小时后打分，打分标准见表3，最后取平均值，测试结果如表4所示。
表3评分标准
表4测试结果
口臭缓解效果 持续时间 口腔舒适感
实验组1 8.1 9.2 7.8
对比组12 4.9 3.8 6.0
对比组13 5.4 7.9 7.3
对比组14 5.9 5.0 7.1
竞品实验组 6.7 4.6 6.1
由表4中实验组、对比组、竞品实验组的对比可见，实验组中的口腔喷雾液体在口臭缓解效果、持续时间及舒适感均明显优于对比组、竞品实验组；从对比组的口臭缓解效果和口腔舒适感这两项指标可以看出，硫酸角质素和乳清乳铁蛋白可以相辅相成提升产品的口臭缓解效果和舒适感；从对比组的持续时间这一指标可以看出，对比例13的持续时间优于对比例12和对比例14，因此乳清乳铁蛋白对于产品的持续时间提升效果很显著。
另外，本发明实验组1在临床进行了500例实验，476例经3天连续喷雾后口腔异味不再出现，24例经5天连续喷雾后口腔异味不再出现，有效率100％。
综上所述，本发明的口腔喷雾液体抑菌能力强，短期内可迅速消除口臭且效果持久，长期使用后可基本起到根治病理性口臭的效果，且经临床反馈，本品的效果安全持久。
上述实施例并非限定本发明的产品形态和式样，任何所属技术领域的普通技术人员对其所做的适当变化或修饰，皆应视为不脱离本发明的专利范畴。

Claims (10)

1.一种口腔喷雾，包括以下原料：中药组合物、处理用酶、发酵用菌种以及辅料，其特征在于：所述中药组合物包括如下重量份的组分：18～20份黄连、15～16份半夏、11～12份枇杷叶、10～11份大腹皮、5～6份陈皮、5～6份甘草、2～3份辛夷、5～6份防风、48～50份桂心、25～28份枣肉、11～12份川芎以及6～7份鸡内金；还包括鲜山楂过滤液、米醋和川穹过滤液，所述鲜山楂过滤液与所述中药组合物的质量用量比为1～1.1:1，所述中药组合物和所述鲜山楂过滤液混合形成中药材预处理物料，所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量用量比为1:3～3.3:3～3.3；所述处理用酶包括蜗牛酶和葡萄糖氧化酶，所述发酵用菌种包括副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，所述辅料包括1.20％～1.24％磷酸氢二钠、0.8％～1.0％柠檬酸、0.6％～0.8％硫酸角质素、0.4％～0.5％乳清乳铁蛋白、0.1％～0.12％L-抗坏血酸、0.2％～0.24％吐温80、0.5％～0.6％D-丙酸钠，余量为蒸馏水。
2.根据权利要求1所述的一种口腔喷雾，其特征在于：所述蜗牛酶的用量为所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量总用量的0.48％～0.5％，所述葡萄糖氧化酶的添加量为所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量总用量的0.09％～0.1％。
3.根据权利要求1所述的一种口腔喷雾，其特征在于：所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液混合并经过所述处理用酶的酶解后形成中药材处理液，所述副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌的接种比例分别占所述中药材处理液的质量用量的0.3％～0.35％。
4.根据权利要求1所述的一种口腔喷雾，其特征在于：所述中药材处理液经过所述发酵用菌种的发酵后得到发酵过滤液，所述辅料与所述发酵过滤液的质量用量比为5～5.2:1。
5.制备如权利要求1所述的一种口腔喷雾的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1、先按比例取18～20份黄连、15～16份半夏、11～12份枇杷叶、10～11份大腹皮、5～6份陈皮、5～6份甘草、2～3份辛夷、5～6份防风、48～50份桂心、25～28份枣肉、11～12份川芎以及6～7份鸡内金，得中药组合物，温干至水分低于8％，研磨成100～120目的中药细粉末；
步骤2、然后向中药细粉末中加入鲜山楂过滤液，鲜山楂过滤液与中药组合物的质量用量比为1～1.1:1，搅拌至不黏手、成团，静置3～4h得到中药材预处理物料；
步骤3、然后按比例向中药材预处理物料加入米醋和川穹过滤液，在50～60rpm的转速下搅拌10～12min后，继续搅拌，按顺序加入蜗牛酶、葡萄糖氧化酶进行酶解，酶解后得中药材处理液；
步骤4、然后在中药材处理液中接种副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌，进行发酵，发酵15～16天后得中药材发酵液；
步骤5、待发酵完成后，将中药材发酵液静置10～12h，取上层上清液，并对沉淀的药渣进行压榨处理，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得药渣过滤液；
步骤6、最后调节辅料的pH至5.0～5.6，并将上清液与药渣过滤液混合均匀后，得到发酵过滤液，将发酵过滤液与辅料混合，在100～120rpm的转速下搅拌10～12min，经紫外线消毒后灌装成瓶，即得所述口腔喷雾。
6.根据权利要求5所述的一种口腔喷雾的制备方法，其特征在于：步骤2中，所述鲜山楂过滤液的制备方法为：取鲜山楂捣碎，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得鲜山楂过滤液。
7.根据权利要求5所述的一种口腔喷雾的制备方法，其特征在于：步骤3中，所述川穹过滤液的制备方法为：取川穹切片，加入纯化水浸泡10～11h后，经脱脂棉纱布过滤取汁，即得川穹过滤液，川穹切片与纯化水的质量用量比为1:10～11；所述蜗牛酶的用量为所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量总用量的0.48％～0.5％，所述蜗牛酶的酶解条件为：酶解温度30～40℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至3.8～5.0，酶解时间为60～80min。
8.根据权利要求5所述的一种口腔喷雾的制备方法，其特征在于：步骤3中，所述葡萄糖氧化酶的酶活性为1800～2200U，所述葡萄糖氧化酶的用量为所述中药材预处理物料、所述米醋和所述川穹过滤液的质量总用量的0.09％～0.1％，所述葡萄糖氧化酶的酶解条件为：酶解温度30～40℃，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节酶解的pH至6.0～6.8，酶解时间为20～30min。
9.根据权利要求5所述的一种口腔喷雾的制备方法，其特征在于：步骤4中，所述副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌和长双歧杆菌的接种比例为所述中药材处理液的质量用量的0.3％～0.35％；
所述发酵的过程为：
0～2天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于5.0，温度为35～38℃，不搅拌；
2～10天，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节pH不低于6.0，温度为28～35℃，在100～120rpm的转速下搅拌；
10天后，在50～60rpm的转速下搅拌。
10.根据权利要求5所述的一种口腔喷雾的制备方法，其特征在于：步骤6中，采用10％磷酸溶液或者10％碳酸氢钠溶液调节所述辅料的pH至5.0～5.6；所述紫外线消毒的条件为：采用253.7nm波长的紫外灯，在200～300mm的距离下照射50～60min。
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