CN1167678C

CN1167678C - 新颖的维生素d类似物

Info

Publication number: CN1167678C
Application number: CNB008123454A
Authority: CN
Inventors: Cas; C·A·S·布莱亭
Original assignee: Leo Pharmaceutical Products Ltd AS
Current assignee: Leo Pharma AS
Priority date: 1999-08-04
Filing date: 2000-07-11
Publication date: 2004-09-22
Anticipated expiration: 2020-07-11
Also published as: ATE265430T1; CN1372544A; AU5807200A; AU770771B2; EP1206448B1; PL364698A1; HUP0202305A2; PT1206448E; US6573255B1; JP2003506067A; DE60010276D1; HUP0202305A3; JP2003506435A; JP4971571B2; HK1049148B; RU2228928C2; DE60010276T2; CZ2002392A3; CA2381910A1; NZ516913A

Abstract

本发明涉及式(I)化合物，其中式R代表氢，或者R代表(C₁-C₆)烷基、苯基或(C₇-C₉)芳烷基，非必须地被一个或多个选自(C₁-C₃)烷基、F和苯基的基团取代；n是整数0、1或2；X代表羟基或卤素。

Description

新颖的维生素D类似物

发明领域

本发明涉及迄今未知的一类化合物，它们显示强烈的诱导某些细胞、包括皮肤细胞与癌细胞的分化和抑制其不可取的增殖的活性，以及免疫调节与抗炎作用，还涉及含有这些化合物的药物制剂、其制剂的剂量单位和它们在以异常细胞分化和/或细胞增殖为特征的疾病治疗和/或预防中的用途。

发明背景

大量维生素D类似物已被描述为显示一定程度的体外有利于细胞分化诱导的选择性/细胞增殖抑制活性，与之形成对照的是体内对钙代谢的作用(测量到血清钙浓度增加和/或尿钙排泄增加)，后者不利地限制了可能对患者安全给药的剂量。在这种选择性的基础上已经开发出第一种这类药物钙泊三醇(INN)或钙泊三烯(USAN)，现在是世界公认的用于局部治疗牛皮癣的有效和安全的药物。

在这种基础上选择另一种维生素D类似物seocalcitol所进行的研究支持了这样一种概念，系统给药的维生素D类似物在亚毒性剂量下可以体内抑制乳腺癌细胞增殖(Colston，K.W.等Biochem. Pharmacol.44，2273-2280(1992))。

另一种维生素D类似物CB1093(20-表-22-乙氧基-23-炔-24a，26a，27a-三高-1α，25(OH)₂D₃维生素D₃)(Calverley M.J.等Vitamin D，Proceedings of the Ninth Workshop on Vitamin D，Orlando，Florida，Walter de Gruyter，Berlin，1994，pp 85-86；并且公开在WO 93/19044中)已经显示在体外测定中具有有力的抑制人癌细胞侵袭性的活性(Hansen C.M.等Vitamin D，Proeeedings of the NinthWorkshop on Vitamin D，Orlando，Florida，Walter de Gruyter，Berlin，1994，pp 508-509)。

还已证明CB1093对不同类型癌细胞的增殖具有有力的抑制活性，对它们的分化和细胞凋亡具有有力的刺激活性，例如体外对脑神经胶质肿瘤细胞(Baudet，C.等Cancer Lett.1996，100，3)；体外和体内对MCF-7乳腺癌细胞(Colston，K.W.等Vitamin D，Proceedings of theTenth Workshop on Vitamin D，Strasbourg，France，1997，Universityof California，Riverside，1997，pp 443-450；Danielsson，C.等VitaminD，Proceedings of the Tenth Workshop on Vitamin D，Strasbourg，France，1997，University of California，Riverside，1997，pp 485-486；Danielsson，C.等J.Cellular Biochem.1997，66，552)；体外对NB4急性前髓细胞性白血病细胞(Elstner，E.等J.Clin.Invest.1997，99，349)；体外对HL-60和重新的人急性骨髓样白血病细胞(Pakkala，I.等Blood1995，86(10，增刊)，775a；Pakkala，I.等Leucomia Research 1997，21，321)；体外对MG-63人骨肉瘤细胞(Ryhnen，S.等J.Cellular Biochem.1998，70，414)。

CB1093还显著减少伴有继发性甲状旁腺机能亢进的慢性尿毒症大鼠血浆PTH与磷酸盐水平(Hruby，M.等Nephrol.Dial.Transplant1996，11，1781)。

在大鼠尿钙排泄中已经测定CB1093的经典钙血维生素D活性是1α，25(OH)₂D₃的27％，在相同测定法中已经测定seocalcitol的钙血活性是50％(Danielsson，C.等J.Cellular Biochem. 1997，66，552)。在用CB1093治疗乳腺肿瘤大鼠(1μg/kg体重，28天)的体内实验中，最初的肿瘤体积缩小了49％，但是血清钙浓度仍然有轻微增加(出处同上)。这说明治疗窗可能仍然是相当窄的，仍然不能排除关于可能诱导血清钙水平增加的担忧。

在过度增殖性疾病、例如癌症的非局部治疗中使用维生素D类似物的另一个问题是体内代谢稳定性。对实际疗法所用的化合物来说，这种稳定性不得不超过某一最低水平。如表1所示，在采用大鼠肝匀浆“S-9”的代谢稳定性体外模型(Kissmeyer，A.-M.等Biochem.Pharmacol。1997，53，1087)中，CB1093的稳定性比起seocalcitol(T1/2 1.3hr)和1α，25(OH)₂D₃(T1/2 2.5hr)来是相当低的。

因此持续需要新颖的维生素D类似物，与1α，25(OH)₂D₃相比，具有较高的抗细胞增殖和/或细胞分化诱导活性，合理地结合长期治疗活性与最低毒性作用。本发明的目的是提供这类新颖的化合物，本文中新颖的通式I化合物达到了该目的。

发明概述

本发明的化合物构成一类新颖的由通式I代表的维生素D类似物：

其中式R代表氢、或非必须地被一个或多个(C₁-C₃)烷基、F或苯基取代的(C₁-C₆)烷基、苯基或(C₇-C₉)芳烷基；n是整数0、1或2；X代表羟基或卤素。

发明的详细说明

发明的优选实施方式。

优选的式I化合物是其中R代表甲基、乙基、丙基、异丙基、苄基、和邻甲基苄基、间甲基苄基与对甲基苄基的化合物。更优选地R代表甲基或乙基。n优选为0或1；1是更优选的。优选地X代表OH、F或Cl。最优选地X代表F，或者X最优选地代表OH或Cl。

本发明的化合物可以包含一个以上非对映异构形式；也就是式I中标为22、25和26的碳原子上的R与S构型。本发明涵盖所有这些非对映异构体的纯净形式和它们的混合物。优选的异构体是具有构型22(S)，25(S)，26(S)和22(S)，25(S)，26(R)的化合物。另外，其中一个或多个羟基被可以体内转化为羟基的基团所屏蔽的式I化合物前药也可以涵盖其中。

可以这样得到式I化合物的结晶形式，直接从有机溶剂中浓缩，或者从有机溶剂或所述溶剂与一种助溶剂的混合物中结晶或重结晶，该助溶剂可以是有机或无机的，例如水。晶体可以被分离为基本上不含溶剂的形式或溶剂化物，例如水合物。本发明涵盖所有结晶变体与晶型和它们的混合物。

本发明的示范性化合物是

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5-乙基-1(S)，5(S)，6(S)-三羟基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物101)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羟基-5-乙基-1(S)-甲氧基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物102)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物103)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羟基-5-乙基-1(S)-(1-丙氧基)-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物104)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-苄氧基-5(S)，6(S)-二羟基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物105)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(R)，6(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物106)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(R)，6(R)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物107)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(R)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物108)，

(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(S)，5(S)-三羟基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物109)，

(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4(S)，5(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物111)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(R)，5(S)-三羟基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物114)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4(R)，5(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物116)，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(S)-氟-5(S)-羟基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物149)，和

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(R)-氟-5(S)-羟基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物150)。

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羟基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物157)

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羟基-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物158)

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羟基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物159)

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羟基-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物160)

本说明书所用的下列术语具有所示含义：

“烷基”指从烷烃中任意碳原子除去氢原子所得任意一价基团，分别包括正烷基(n-烷基)亚类和伯、仲与叔烷基亚类，具有指定数量的碳原子，例如包括(C₁-C₃)烷基、(C₁-C₆)烷基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。烷烃指具有通式C_nH_2n+2的非环直链或支链烃，因此完全由氢原子和饱和碳原子组成。

“(C₇-C₉)芳烷基”指任意被芳基、例如苯基取代的烷基，具有指定总数的碳原子，优选为(C₇-C₈)芳烷基。实例是苄基、2-苯基-乙基、邻甲基苄基、间甲基苄基和对甲基苄基。

“卤素”表示相同或不同的氟、氯、溴和碘。

本发明提供迄今未公开的一系列维生素D类似物，它是以在侧链26位另外存在羟基或卤原子为特征的。与现有技术的维生素D类似物相比，以CB1093为例，本发明的新维生素D类似物确实具有所需性质(表1)：(在大鼠钙尿模型中)钙血活性减半或更低，(在S-9大鼠肝匀浆模型中)代谢稳定性更高，以及(在两种不同的癌症测定中：U937白血病细胞测定(Kissmeyer，A.-M.等Biochem.Pharmacol.1997，53，1087)和MCF-7乳腺癌细胞测定(Danielsson等J.Cellular Biochem.1997，66，552))抗增殖活性仅有轻微减少。而且，本发明化合物I在牛皮癣模型HaCaT测定(Kissmeyer，A.-M.等Biochem.Pharmacol.1997，53，1087)中的活性略高于CB1093。本发明的26-羟基或26-卤素维生素D类似物的有利性质完全是料想不到的，因为已知类似地在seocalcitol中引入26-羟基导致化合物在U937和HaCaT测定中的活性戏剧性地减少。所有四种可能的26-羟基-seocalcitol类似物都已经显示是seocalcitol的大鼠体外与体内和人体外的天然代谢产物(Binderup，E.等Vitamin D，Proceedings of the Tenth Workshop on Vitamin D，Strasbourg，France，1997，University of California，Riverside，1997，pp 89-90；Kissmeyer，A.-M.等Biochem.Pharmacol.1997，53，1087)。

表1

化合物 1α，25(OH)₂D₃ No.103§ No.108§ CB1093§，$

25/26构型 25(S)，26(S) 25(S)，26(R) 无26-OH

测定

U937，-log IC 50 7.5±0.3 9.0±0.2 8.9±0.2 9.5±0.1

U937，rel.^* 1.0 36 49 74

MCF-7，-log IC 50 7.7±0.3 9.9±0.1 9.8±0.2 10.2±0.3

MCF-7，rel.^* 1.0 153 89 311

HaCaT，-log IC 50 7.4±0.3 9.0±0.3 8.8±0.2 8.7±0.9

HaCaT，rel.^* 1.0 38 30 18

S-9，体外代谢产物# 0.43 0.29 0.02

钙血，体内 1.0 0.11 0.16 0.27

表1注：

§R＝乙基，n＝1和22(S)-构型

$参照化合物：无26-OH基团；否则结构与化合物103/108相同

^*比例的几何平均值，相对1α，25(OH)₂D₃而言，在所涉及的测定中来自有关化合物的所有实验；数值越高，化合物的效力越大

#温育1小时后的部分

全文采用下列标准缩写：

AcOH＝乙酸

18C6＝18-冠醚-6

b.p.＝沸点

Bn＝苄基

Bu＝正丁基

Comp＝化合物编号

DMAP＝4-二甲氨基吡啶

DMF＝N，N-二甲基甲酰胺

Et＝乙基

EtOAc＝乙酸乙酯

Exam＝实施例编号

eqv＝当量(摩尔)

乙醚＝二乙醚

G.P.＝通用操作编号

Hal＝Cl、Br或I

h＝小时

Me＝甲基

m.p.＝熔点

Ms＝甲磺酸盐

PG＝保护基团

Ph＝苯基

Pr＝正丙基

Prep＝制备例编号

PPTS＝吡啶鎓对-甲苯磺酸盐

Py＝吡啶

TBAF＝氟化四正丁基铵

TBS＝四丁基二甲基甲硅烷基

Tf＝三氟甲磺酰基

THF＝四氢呋喃

THP＝四氢-4H-吡喃-2-基

TMS＝三甲基甲硅烷基

Tol＝甲苯

Ts＝4-甲苯磺酰基

如表4所述式I化合物可以通过流程1的通用方法加以制备：

流程1

流程1注：

一般说明：X¹＝O-PG²、F、Cl、Br或I

PG¹和PG²＝氢或保护基团：相同或不同，或混合的双官能团。

Q＝H或Me₃Si；n＝1、2或3。

(a)CH₃NH-OCH₃，HCl；EtMgBr(3eqv)

(b)i)Q-C≡C-(CH₂)_n-Met；(Met＝-Li，-MgHal；-AlBr₂，-Br+SmI₂)；

如果需要的话(仅就Q＝H而言)：PG¹＝TMS，X¹＝O-PG²＝O-TBS，Q＝H；

ii)Me₃SiCl/Et₃N/CH₂Cl₂/DMAP，

或者如果需要的话：PG¹-PG²＝-C(CH₃)₂-，即X¹＝O-PG²(-PG¹-)，Q＝H：

ii)TBAF/THF，(→PG¹＝PG²＝Q＝H)

iii)CH₂＝C(CH₃)-O-CH₃或(CH₃)₂C(OCH₃)₂/TsOH

或者如果需要的话：PG¹＝TMS，X¹＝F：

化合物509或510(例如按流程1a制备)代替流程1的化合物503和504；

或者如果需要的话：PG¹＝TMS，X¹＝F，Cl，Br或I，Q＝H：

ii)TBAF/THF，(→PG¹＝PG²＝Q＝H，即X¹＝OH)

iii)X¹(＝OH)向X¹＝F，Cl，Br或I的转化，例如流程2所示；

iv)非必须地PG¹＝H向PG¹＝TMS的转化，例如使用Me₃SiCl/Et₃N/CH₂Cl₂/DMAP

(c)i)II+BuLi；ii)1；iii)非必须地22-OH与RZ/碱的烷基化(Z＝良好的离去基团，例如Hal，Ms，Ts或Tf)

(d)i)三重致敏的维生素D三烯的光异构化，从5(6)(E)到5(6)(Z)；ii)非必须地22-OH与RZ/碱的烷基化

(e)i)用HF/CH₃CN/EtOAc或TBAF/THF脱保护，非必须地在PPTS/EtOH之前或之后。

流程1a

流程1a注：

(a)KF，HCONH₂，70℃(Fritz-Langhals等Tetr.Lett.1993，34，293的方法)

(b)CH₃NH-OCH₃，HCl；EtMgBr(3eqv)

化合物I可以从得自维生素D的醛化合物1制备，其合成已有报道(Calverley，M.J.Tetrahedron 1987，43，4609)，例如通过流程1所述途径，与通式II的侧链构件的有机金属衍生物反应。

用于制备其中X＝OH的化合物I的化合物II可以如下合成：

用叔丁基二甲基甲硅烷基氯通过甲硅烷基化作用，将L(-)乳酸乙酯或D(+)乳酸乙酯(或相应的甲基酯)保护起来，得到相应的TBS-乳酸乙酯(501，502)。通过Williams，J.M.等(Tetr.Lett.1995，36，5461)的方法，直接用溴化乙基镁处理，经由中间体N-甲氧基-N-甲基酰胺，转化为相应的乙基酮(503，504)。

通过与Q-C≡C-(CH₂)n-Met(Met＝-Li，-MgHal；-AlBr₂；-Hal+例如SmI₂；Q＝H或Me₃Si；n＝1，2或3)型有机金属试剂的反应，酮503或504转化为通式II的部分被保护的侧链合成子。在Q-C≡C-(CH₂)n-Hal+例如SmI₂的情况下，涉及卤化物、酮与金属/金属盐之间的Barbier型反应。

通常生成两种非对映异构体的混合物：在流程1中标为(25)的碳原子上的R与S异构体，该碳原子结果是最终式I化合物中的碳原子C(25)。如果需要的话，可以在该阶段分离这两种非对映异构体，或者如果更方便的话在侧链合成子II的合成后期进行分离。

完全被保护的侧链合成子II合成的后续步骤是：1)如果Q是三甲基甲硅烷基，那么例如借助一种碱通过脱保护作用使Q转化为氢。2)例如通过甲硅烷基化作用，用TMS-Cl将标为(25)的碳原子上的未保护羟基保护起来；如此PG¹＝TMS(PG²＝TBS)。

或者，例如可以用TBAF除去化合物II的TBS基团(PG²)(如果Q＝TMS，与此同时转化为H)。然后可以在一个步骤中保护分别标为(25)和(26)的碳原子上的两个羟基，例如借助于2-甲氧基丙烯或2，2-二甲氧基丙烷和酸转化为环状缩醛或缩酮，例如丙酮化合物(亚异丙基缩酮)，以致PG¹和PG²连接在一个基团上：-C(CH₃)₂-。1，2-二醇的其他保护方法描述在文献中，例如：Greene，T.W.和Wuts，P.G.M.《有机合成中的保护基团》第二版，John Wiley and Sons，New York 1991，pp118-142。使用环状缩醛或缩酮、例如丙酮化合物作为化合物II的保护基团的优点是它们特别适合于通过核Overhauser增强(NOE)NMR波谱学建立碳(25)与(26)上的立体化学。

用于制备其中X＝F的化合物I的化合物II可以从酮509或510加以制备，并使用流程1a方法和表1a中间体：

表1a

流程1a的氟化侧链构件

Prep Comp G.P. C(26)

42 505 11 R

43 506 11 S

44 507 12 S

45 508 12 R

46 509 1a S

47 510 1a R

用于制备其中X是Cl、Br或I的化合物I的化合物II优选是从其中O-PG¹和O-PG²(＝X¹)都是OH的相应化合物II加以制备的，例如流程2所示：

流程2

流程2注：

其中X¹＝Cl或I的化合物II可以彼此转化或者转化为其中X¹＝F或Br的相应化合物，标准的转化方法例如：R.C.Larock《综合有机转化》VCH Publishers，Inc.，New York，N.Y.，USA，1989，pp.337-339，引用在此作为参考文献。

表2通式II的侧链构件(流程1)

Prep Comp G.P. Q n C(25) C(26) pG¹ pG²

4 201 2 H 1 S S H TBS

5 202 4 H 1 S S H H

6 203 5 H 1 S S -C(CH₃)₂-

7 204 6 H 1 S S TMS TBS

8 205 2 H 1 R S H TBS

9 206 4 H 1 R S H H

10 207 5 H 1 R S -C(CH₃)₂-

11 208 6 H 1 R S TMS TBS

12 209 2 H 1 R R H TBS

13 210 6 H 1 R R TMS TBS

14 211 2 H 1 S R H TBS

15 212 6 H 1 S R TMS TBS

16 213 3 H 0 S S H TBS

17 214 3a TMS 0 S S H TBS

18 215 4 H 0 S S H H

19 216 5a H 0 S S -C(CH₃)₂-

16 217 3 H 0 R S H TBS

17 218 3a TMS 0 R S H TBS

18 219 4 H 0 R S H H

20 220 5a H 0 R S -C(CH₃)₂-

表2注：X¹＝O-PG²

表2a

通式II的氟化侧链构件(流程1)

Prep Comp G.P. Q n C(25) C(26) PG¹ X¹

48 221 2a H 1 R/S S H F

49 222 6 H 1 R/S S TMS F

50 223 2a H 1 R/S R H F

51 224 6 H 1 R/S R TMS F

可以通过有机金属试剂向羰基化合物的标准亲核加成方法进行醛1与得自侧链构件II的有机金属试剂的反应；也就是在适合的无水溶剂中，例如乙醚和/或THF，使炔中间体II与格利雅试剂反应，例如溴化乙基镁，或者与烷基锂反应，例如丁基锂(通用操作7)，生成金属乙炔化物，然后加入1，经过通常的水化处理(正常情况下隐含在所有流程1反应中)后得到III。一般地，反应产物III是两种可能的C-22差向异构体的混合物，这里称为IIIA和IIIB。通常优选的是分离IIIA与IIIB差向异构体，这适宜用层析法进行。

表3和3a给出这类式III化合物的非限制性例证。化合物IIIA的收率比相应的IIIB差向异构体高得多，比例通常约95比5。化合物IIIA、IVA和IA具有22(S)立体化学，相应带有后缀B的化合物具有22(R)立体化学。化合物IA是优选的。

通式III或IV的22-羟基化合物经过非必须地的烷基化作用，得到其中R是(C₁-C₆)烷基、苯基或(C₇-C₉)芳烷基的相应化合物III或IV，这可以按照专业人员熟知的标准方法进行。表3列举了例证性而非限制性的这类化合物。

在烷基化反应中，优选使用烷基化剂RZ，其中Z代表良好的离去基团，例如Hal、Ms、Ts、Tf；RZ可以与适当化合物III或IV(R＝H)的阴离子反应，该阴离子是借助适合的强碱从中衍生的，例如碱金属醇化物、烷基碱金属或碱金属氢化物。可以加入适合的冠醚作为相转移剂，以加速烷基化过程。通用操作9描述了一种有用的方法。

在三重致敏剂的存在下，例如蒽，借助UV光进行维生素D三烯、即流程1化合物III 5(6)(E)的光异构化，得到流程1化合物IV 5(6)(Z)；通用操作8和8a描述了有用的方法。表3和3a给出这类通式IV化合物的非限制性例证，以及每种化合物的制备。

维生素D三烯、即化合物III 5(6)(E)的三重致敏的光异构化得到流程1化合物IV 5(6)(Z)，和(非必须地)用RHal/碱烷基化22-OH基团生成其中R≠H的22-O-R化合物，二者可以按任意顺序进行，根据是在每种情况下哪一种顺序是最方便的。

表4列举了本发明化合物I的实例，其合成的最后一步是一步或多步脱保护操作，以除去流程1通式IV化合物的所有保护基团。脱保护例如可以用TBAF进行，以除去甲硅烷基，如TMS或TBS(通用操作4)，或者用HF进行，它除去甲硅烷基和酸敏感性保护基团，例如亚异丙基(缩酮)基团(通用操作10)。或者，如果两种类型的保护基团都要除去，可以按顺序采用两种不同的选择性操作，例如WO97/46522所述(G.P.7)：用TBAF除去甲硅烷基，然后用PPTS选择性除去酸敏感性保护基团；或相反顺序。

表3

通式III与IV的中间体(流程1)

Type Prep Comp G.P. R n C(25) C(26) PG¹ PG²

IIIA 21 301 7 H 1 S S TMS TBS

IIIB 21 302 7 H 1 S S TMS TBS

IVA 22 401 8 H 1 S S TMS TBS

IVA 23 402 9 Me 1 S S TMS TBS

IVA 24 403 9 Et 1 S S TMS TBS

IVA 25 404 9 Pr 1 S S TMS TBS

IVA 26 405 9 Bn 1 S S TMS TBS

IIIA 27 303 7 H 1 R S TMS TBS

IVA 28 406 8 H 1 R S TMS TBS

IVA 29 407 9 Et 1 R S TMS TBS

IIIA 30 301 7 H 1 R R TMS TBS

IVA 31 408 8 H 1 R R TMS TBS

IVA 32 409 9 Et 1 R R TMS TBS

IIIA 33 305 7 H 1 S R TMS TBS

IVA 34 410 8 H 1 S R TMS TBS

IVA 35 411 9 Et 1 S R TMS TBS

IIIA 36 306 7a H 0 S S -C(CH₃)₂-

IVA 37 412 8 H 0 S S -C(CH₃)₂-

IVA 38 413 9 Et 0 S S -C(CH₃)₂-

IIIA 39 307 7a H 0 R S -C(CH₃)₂-

IVA 40 414 8 H 0 R S -C(CH₃)₂-

IVA 41 415 9 Et 0 R S -C(CH₃)₂-

表3注：X¹＝O-PG²

表3a

通式III与IV的氟化中间体(流程1)

类型 Prep Comp G.P. R n C(25) C(26) PG¹ X¹

IIIA 52 308 7 H 1 R/S S TMS F

IVA 53 416 8a H 1 R/S S TMS F

IVA 54 417 9 Et 1 R/S S H F

IIIA 55 309 7 H 1 R/S R TMS F

IVA 56 418 8a H 1 R/S R TMS F

IVA 57 419 9 Et 1 R/S R H F

表4列举了本发明的示范性化合物I，带编号的实施例给出例证性合成方法的参考，以及示范性化合物的波谱数据。

化合物110、112-113、115和117-156的合成步骤顺序类似于化合物101-109、111、114、116和157-160、实施例1-12和16-19的制备所采用的顺序：

按照通用操作7(G.P.7)，使化合物1与适当的通式II侧链构件H-C≡C-(CH₂)_n-C(C₂H₅)(OPG¹)-CH(X¹)CH₃反应，得到相应的式III化合物。

如果表2或2a中没有提到，可以按照与表2或2a所列化合物II的合成所用相似的方法制备有关化合物II。

按照G.P.8或8a，使式III化合物光异构化，得到相应的式IV化合物。

非必须地，按照G.P.9，使式IV化合物与适当的烷基化剂RZ反应，得到其中R≠H的相应式IV化合物。如果需要的话，光异构化步骤和烷基化步骤可以按相反顺序进行。

至于最后一步，按照G.P.4或G.P.10，使式IV化合物脱保护，得到有关化合物I。

表4

通式I化合物

Type Exam Comp G.P. R n X C(25) C(26)

IA 1 101 4 H 1 OH S S

IA 2 102 4 Me 1 OH S S

IA 3 103 4 Et 1 OH S S

IA 4 104 4 Pr 1 OH S S

IA 5 105 4 Bn 1 OH S S

IA 6 106 4 Et 1 OH R S

IA 7 107 4 Et 1 OH R R

IA 8 108 4 Et 1 OH S R

IA 9 109 10 H 0 OH S S

IA 110 10 Me 0 OH S S

IA 10 111 10 Et 0 OH S S

IA 112 10 Pr 0 OH S S

IA 113 10 Bn 0 OH S S

IA 11 114 10 H 0 OH R S

IA 115 10 Me 0 OH R S

IA 12 116 10 Et 0 OH R S

IA 117 10 Pr 0 OH R S

IA 118 10 H 0 OH R R

IA 119 10 Et 0 OH R R

IA 120 10 H 0 OH S R

IA 121 10 Me 0 OH S R

IA 122 10 Et 0 OH S R

IA 123 10 Pr 0 OH S R

IA 124 10 H 1 OH R S

IA 125 10 Me 1 OH R S

IA 124 10 H 1 OH R R

IA 125 10 Me 1 OH R R

IA 126 10 H 1 OH S R

IA 127 10 Me 1 OH S R

IA 128 10 Pr 1 OH S R

IA 129 10 Bn 1 OH S R

Type Exam Comp G.P. R n X C(25) C(26)

IA 131 10 H 2 OH S S

IA 132 10 Me 2 OH S S

IA 133 10 Et 2 OH S S

IA 134 10 Pr 2 OH S S

IA 135 10 Bn 2 OH S S

IA 136 10 Et 2 OH R S

IA 137 10 Et 2 OH R R

IA 138 10 H 2 OH S R

IA 139 10 Me 2 OH S R

IA 140 10 Et 2 OH S R

IA 141 10 Pr 2 OH S R

IB 142 10 Et 1 OH S S

IA 143 10 Me 0 F S S

IA 144 10 Me 0 F S R

IA 145 10 Et 0 F S S

IA 146 10 Et 0 F S R

IA 147 10 Me 1 F S S

IA 148 10 Me 1 F S R

IA 149 10 Et 1 F S S

IA 150 10 Et 1 F S R

IA 151 10 Et 2 F S S

IA 152 10 Me 0 Cl S S

IA 153 10 Et 0 Cl S S

IA 154 10 Me 1 Cl S S

IA 155 10 Et 1 Cl S S

IA 156 10 Et 1 Cl S R

IA 16 157 10 H 1 F R/S S

IA 17 158 10 Et 1 F R/S S

IA 18 159 10 H 1 F R/S R

IA 19 160 10 Et 1 F R/S R

本发明化合物打算用在药物组合物中，该组合物可用于局部或系统治疗或预防人和动物疾病，例如牛皮癣，包括掌跖脓疱病、持续性肢皮炎和指甲牛皮癣，和其他角化作用障碍；与HIV有关的皮肤病；伤口愈合；各种癌症，例如白血病、乳腺癌、脑神经胶质肿瘤、骨肉瘤、骨髓纤维变性、黑素瘤、其他皮肤癌症；免疫系统的疾病或失调，例如宿主对移植物和移植物对宿主的反应；移植排斥；自体免疫疾病，包括盘状与系统性红斑狼疮；糖尿病；自体免疫类型的慢性皮肤病，例如硬皮病和寻常天疱疮；炎性疾病，例如哮喘和类风湿性关节炎；以及大量其他疾病状态，包括甲状旁腺机能亢进，特别是与肾衰有关的继发性甲状旁腺机能亢进；认知缺损或老年性痴呆(阿尔茨海默氏病)，和其他神经变性疾病；高血压；痤疮；脱发；皮肤萎缩，例如甾体诱导的皮肤萎缩；皮肤老化，包括光老化；还用于促进骨生成和治疗/预防骨质疏松和骨软化。

本发明化合物可以与其他药物或处置方法结合使用。在牛皮癣的治疗中，本发明化合物可以与其他抗牛皮癣药结合使用，例如甾体，或者与其他疗法结合使用，例如光-或UV光-疗法或混合的PUVA-疗法。在癌症的治疗中，本发明化合物可以与其他抗癌药或抗癌疗法结合使用，例如放射疗法。在移植物排斥和移植物对宿主反应的预防中，或者在自体免疫疾病的治疗中，本发明化合物可以有利地与其他免疫抑制药/免疫调节药或疗法结合使用，例如环孢菌素A。

式I化合物(以下称为活性成分)为达到治疗效果所需的量当然将因特定化合物、给药途径和接受治疗的哺乳动物而异。本发明化合物可以通过肠胃外、关节内、肠内或局部途径给药。它们在肠内给药后被充分吸收，这在系统性障碍的治疗中是优选的给药途径。在皮肤病学障碍、如牛皮癣或眼部疾病的治疗中，局部或肠内方式是优选的。

尽管有可能将活性成分作为化学原药单独给药，不过优选的是制成药物制剂。活性成分适宜占制剂重量的0.1ppm至0.1％。

本发明的兽医与人类医学用制剂因而包含活性成分和药学上可接受的载体和非必须地的其他成分。载体在与制剂其他成分相容并且对其受者无害的意义上必须是“可接受的”。

制剂例如包括适合于口服、眼部、直肠、肠胃外(包括皮下、肌内和静脉内)、透皮、关节内与局部、鼻部或颊部给药的那些。

术语“剂量单位”表示单元的、即单一的剂量，该剂量能够对患者给药，易于处理和包装，保持为物理与化学稳定的单位剂量，其中包含活性物质本身或其与固体或液体药物稀释剂或载体的混合物。

制剂可以适宜地是剂量单位形式，可以按药学领域熟知的方法加以制备。所有方法包括使活性成分与载体结合的步骤，它们构成一种或多种助剂成分。一般地，制剂是这样制备的，使活性成分与液体载体或微细粉碎的固体载体或二者均匀和紧密结合，然后如果必要的话，使产物成型为所需的制剂。

适合于口服给药的本发明制剂可以是不连续单位的形式，例如胶囊剂、扁囊剂、片剂或锭剂，各自含有预定量的活性成分；粉剂或颗粒剂的形式；在水性液体或非水性液体中的溶液或悬液的形式；或者水包油乳剂或油包水乳剂的形式。活性成分也可以以大丸剂、药糖剂或糊剂的形式给药。

用于直肠给药的制剂可以是栓剂的形式，其中结合有活性成分和载体，或者灌肠剂的形式。

适合于肠胃外给药的制剂适宜包含活性成分的灭菌油性或水性制剂，它优选地是与受者血液等渗的。透皮制剂可以是硬膏剂的形式。

适合于关节内或眼部给药的制剂可以是活性成分的灭菌水性制剂的形式，活性成分可以是微晶形式，制剂例如是水性微晶悬液的形式。还可以使用脂质体制剂或生物可降解聚合物系统进行活性成分的关节内和眼部给药。

适合于局部或眼部给药的制剂包括液体或半液体制剂，例如搽剂、露剂、凝胶剂、涂剂、水包油或油包水乳剂，例如霜剂、软膏剂或糊剂；或者溶液或悬液，例如滴剂。

适合于对鼻腔或颊腔给药的制剂包括粉剂、自推进剂和喷雾剂，例如气雾剂和雾化剂。

除了上述成分以外，本发明的制剂还可以包括一种或多种另外的成分，例如稀释剂、粘合剂、防腐剂等。

组合物可以进一步含有其他常用于治疗上述病理状态的治疗活性化合物，例如用于治疗免疫疾病的免疫抑制剂或用于治疗皮肤疾病的甾体。

本发明进一步涉及治疗患有上述病理状态之一的患者的方法，所述方法是对需要治疗的患者给以有效量的一种或多种式I化合物，单独或者与其他一种或多种常用于治疗所述病理状态的治疗活性化合物结合。可以同时或者按一定间隔用本发明化合物和/或其他治疗活性化合物进行治疗。

在系统治疗中，式I化合物的每日给药剂量为0.001-2μg每千克体重，优选为0.002-0.3μg/kg哺乳动物体重，例如0.003-0.2μg/kg，通常相当于成人的每日剂量为0.2至15μg。在皮肤病学障碍的局部治疗中，将含有0.1-500μg/g、优选为0.1-100μg/g式I化合物的软膏剂、霜剂或洗剂给药。关于眼用软膏剂的局部使用，将含有0.1-500μg/g、优选为0.1-100μg/g式I化合物的滴剂或凝胶剂给药。优选地将口服组合物配制成片剂、胶囊剂或滴剂，每剂量单位含有0.05-50μg、优选为0.1-25μg式I化合物。

下列通用操作、制备例和实施例进一步阐述本发明：

实施例

通用操作、制备例和实施例

一般说明：

THF经过4A分子筛干燥。反应例行在氩气氛下进行，另有注解除外。在标准的后处理操作中，将反应混合物倒在水中，用适合的有机溶剂萃取三次。有机层用水和饱和氯化钠溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在真空中浓缩，得到产物，经过硅胶(40-63μm)层析、结晶或蒸馏法纯化。

关于¹H核磁共振波谱(300MHz)和¹³C NMR(75.6MHz)，引用氘代氯仿溶液的化学位移值(δ)(ppm)，除非另有注解，内标为四甲基硅烷δ＝0.00或氯仿δ＝7.25，或氘代氯仿(¹³C NMRδ＝76.81)。关于多重峰，无论是确定的(双峰(d)、叁峰(t)、四重峰(q))与否(m)，数值都是在大约中点处给出的，引用范围的除外(s＝单峰，b＝宽峰)。

通用操作

通用操作1

酮503和504的合成

在一小时内，向适当的甲硅烷基化乳酸乙酯、化合物501或502(23.2g，0.1mol)与N，O-二甲基羟胺盐酸盐(12.2g，0.125mol)的无水THF(800ml)溶液/悬液中加入3.0摩尔溴化乙基镁的乙醚溶液(167ml，0.5mol)，同时搅拌并冷却至-5℃。继续在25℃下搅拌18小时，然后将反应混合物倒在氯化铵(160g)的水(1.2l)溶液中进行水解。用乙醚后处理后，粗产物经过层析法纯化(洗脱剂：含0％至1％乙醚的石油醚)，得到所需化合物。

变例：

通用操作1a

酮509和510的合成

在一小时内，向适当的R或S的2-氟丙酸甲酯或乙酯(0.1mol)与N，O-二甲基羟胺盐酸盐(10.7g，0.11mol)的无水THF(300ml)溶液/悬液中加入3.0摩尔溴化乙基镁的乙醚溶液(107ml，0.32mol)，同时搅拌并冷却至0至-5℃。继续在0℃下搅拌4小时，再在25℃下搅拌16小时，然后在剧烈搅拌下向反应混合物中加入25％氯化铵水溶液(300ml)进行水解。借助热水浴使温度上升至约35℃并维持；用pH计监测pH(pH约8)。15分钟后，用4N盐酸水溶液调节pH至3，继续搅拌15分钟。分离所得两相混合物，含水相用乙醚(50ml)萃取两次。合并有机相，用饱和氯化钠溶液(25ml)萃取两次，经无水硫酸钠干燥。利用高效蒸馏器(1/16”Dixon网状环，装7cm柱)在大气压下蒸馏除去乙醚和一些THF，使粗物质溶液浓缩。利用连接有干冰冷凝器和收集器的15cm Vigreux柱分馏残余物(约200g)。逐渐降低压力至0.25巴，收集由THF和递增的标题化合物组成的馏分(剩留高沸点中间体和副产物)。如果需要的话，可以通过重蒸馏浓缩第一部分。纯标题化合物的b.p.为约45℃/27毫巴；不过，在干燥并用NMR测定标题化合物的百分比后，与THF混合的馏分可用于下面的合成步骤。

通用操作2

叔炔丙醇化合物II的合成

将铝屑(0.45g)、氯化汞(II)(12mg)与无水THF(10ml)的混合物搅拌20分钟。在25-30℃下，在20分钟内，加入炔丙基溴(1.88ml，2.97g，25mmol)的无水THF(5ml)溶液，并搅拌。继续在40℃下搅拌30分钟。在25℃下，在10分钟内，加入适当酮化合物503或504(5.0g，23mmol)的无水THF(10ml)溶液；将反应混合物在25℃下进一步搅拌1.5小时，然后用乙醚后处理。粗产物经过层析法纯化，用含1％乙醚的石油醚作为洗脱剂，该操作重复两次，合并适合的馏分，得到纯净状态下的两种异构的标题化合物。

变例：

通用操作2a

氟化叔炔丙醇化合物II的合成

将1.5M溴化丙二烯基镁的乙醚溶液(13ml，约20mmol)(L.Brandsma《制备型炔化学》》第2版，Elsevier，Amsterdam 1988，pp.35-36)冷却至-40℃，在30分钟内加入酮509或510(16mmol)的无水THF(20ml)溶液，并搅拌，然后搅拌10分钟，同时冷却至-30至-40℃。将反应混合物倒在25％氯化铵水溶液(50ml)中，同时搅拌并在冰中冷却。含水相用乙醚(20ml)萃取，合并有机相，用硫酸镁干燥，在真空中浓缩，得到标题化合物，为一种油。该产物由两种差向异构体组成，比例为约3∶1，用于下面的合成步骤无需进一步纯化。

通用操作3

叔炔醇化合物II的合成

在35℃下，在20分钟内，向搅拌着的乙炔化锂乙二胺配合物(5.3g，58mmol)的无水THF(250ml)悬液中加入适当酮化合物503或504(12.5g，58mmol)的无水THF(50ml)溶液。继续在25℃下搅拌4小时，然后将反应混合物倒在氯化钠(70g)的水(200ml)溶液中进行水解。用乙醚后处理后，粗产物经过层析法纯化(洗脱剂：含0％至2％乙醚的石油醚)，得到两种异构的标题化合物的仅部分可分离但纯净的混合物。该混合物直接用于下面除去甲硅烷基保护基团的步骤，然后可以借助层析法分离两种异构的25，26-二醇。

通用操作3a

三甲基甲硅烷基叔炔醇化合物II的合成

在-60℃下，在10分钟内，向搅拌着的三甲基甲硅烷基乙炔(0.25ml，0.177g，1.8mmol)的无水THF(6ml)溶液中加入1.6摩尔丁基锂的己烷溶液(0.83ml，1.3mmol)。继续在-60℃下搅拌10分钟，再在25℃下搅拌30分钟。将所得三甲基甲硅烷基乙炔化锂溶液再次冷却至-60℃，在2分钟内加入适当酮化合物503或504(0.3g，1.4mmol)的无水THF(1ml)溶液，继续在-60℃下搅拌3小时，然后将反应混合物倒在氯化铵(2g)的水(20ml)溶液中进行水解。用乙醚后处理后，粗产物经过层析法纯化(洗脱剂：含0％至1％乙醚的石油醚)，得到两种异构的标题化合物的不可分离的混合物。该混合物直接用于下面除去两个甲硅烷基保护基团的步骤，然后可以借助层析法分离两种异构的25，26-二醇。

通用操作4

用TBAF脱保护甲硅烷基保护的化合物

向适当的单-甲硅烷基保护的化合物(0.4mmol)或二-甲硅烷基保护的化合物(0.2mmol)或四-甲硅烷基保护的化合物(0.1mmol)的THF(10ml)溶液中加入TBAF三水合物(0.32g，1.0mmol)(也就是2.5molTBAF每摩尔当量甲硅烷基保护基团)，将混合物加热至回流达一小时，并搅拌。加入1M碳酸氢钠(10ml)后，用乙醚或乙酸乙酯后处理混合物。残余物经过层析法纯化，得到所需化合物。

通用操作5

用2-甲氧基丙烯保护25，26-二醇II为丙酮化合物

将含有3A分子筛(1/16”棒，约0.1g)的、未被保护的25，26-二醇化合物II(0.35mmol)、2-甲氧基丙烯(50mg，0.7mmol)与对-甲苯磺酸(1mg)的无水DMF(2ml)溶液加热至70℃达30分钟，并搅拌。用乙醚后处理后，粗产物经过层析法纯化，用含5％乙醚的石油醚作为洗脱剂，得到纯的丙酮化合物II。

通用操作5a

用2，2-二甲氧基丙烷保护25，26-二醇II为丙酮化合物

将未被保护的25，26-二醇化合物II(2.0mmol)、2，2-二甲氧基丙烷(2ml，1.7g，16mmol)与对-甲苯磺酸(38mg)的无水丙酮(10ml)溶液在25℃下搅拌2小时。加入三乙胺(1ml)，在约b.p.30℃/0.4巴下，用短(约3cm)Vigreux柱浓缩反应混合物至约2ml。加入水(2ml)和1M碳酸氢钠(1ml)，混合物用乙醚萃取(3×8ml)。合并乙醚萃取液，用硫酸镁干燥，(如上)浓缩至约0.5ml。粗产物经过层析法纯化，用含5％乙醚的石油醚作为洗脱剂。合并适当的馏分，(如上)浓缩后，得到纯的丙酮化合物II。

通用操作6

通过三甲基甲硅烷基化作用保护25-单羟基化合物II

在0℃下，在10分钟内，将三甲基氯硅烷(1.08g，10mmol)加入到搅拌着的25-羟基-26-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-(或26-氟-)化合物II(5.0mmol)、三乙胺(1.51g，15mmol)与DMAP(5mg)的无水二氯甲烷(10ml)溶液中。继续在25℃下搅拌48小时。(用乙醚)后处理后，粗产物经过层析法纯化，用石油醚作为洗脱剂，得到纯的25-三甲基甲硅烷氧基-26-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-(或26-氟-)化合物II。

通用操作7

从化合物1和侧链构件II合成化合物III

在2分钟内，向冷却至-78℃并在氩气氛下搅拌的、适当的侧链构件化合物II(3.0mmol)的无水THF(5ml)溶液中滴加正丁基锂(1.6M己烷溶液；1.5ml)。继续在-78℃下搅拌15分钟，再在20℃下搅拌另15分钟。将混合物再次冷却至-78℃，在4分钟内滴加醛化合物1(1.5mmol)的无水THF(5ml)溶液；然后继续在-78℃下搅拌30分钟。(用乙醚)后处理反应混合物，得到含有异构的22-羟基化合物A(弱极性)与B(强极性)的粗产物。通过层析法分离它们(用乙酸乙酯与石油醚的混合物作为洗脱剂)，得到纯化合物III。

变例：通用操作7a

除了使用1.87ml正丁基锂(1.6M)和3mmol化合物1以外，遵循G.P.7。

通用操作8

化合物III向化合物IV的光异构化作用

在约10℃的25ml圆底Pyrex烧瓶内，用来自TQ760Z2型高压紫外灯(Hanau)的700W UV光照射适当化合物III(0.28mmol)、蒽(0.1g)与三乙胺(0.20ml，1.4mmol)的二氯甲烷(16ml)溶液达30分钟(0.08mmol规模15分钟)，同时搅拌。在真空中蒸发反应混合物，残余物用石油醚处理(2×2ml)，过滤。将滤液浓缩，经过层析法纯化，得到所需化合物IV。

变例：通用操作8a

在约10℃的10ml圆底Pyrex试管内，用来自TQ150Z2型高压紫外灯(Hanau)(150W)的UV光照射适当化合物III(0.13mmol)、9-乙酰基蒽(23mg)与三乙胺(0.10ml，0.7mmol)的甲苯(5ml)溶液达60分钟。将反应混合物冷却至-20℃，过滤。在真空中蒸发滤液，残余物经过层析法纯化，得到所需化合物IV，以及一些9-乙酰基蒽，在最后的(脱保护)步骤后除去之。

通用操作9

C-22-羟基化合物III或IV的烷基化作用

在20℃和氩气氛下搅拌的同时，向适当22-羟基化合物(R＝H)(0.5mmol)的无水THF(5ml)溶液中加入20％氢化钾的矿物油悬液(0.2ml)，然后加入烷基化剂RZ(1.5mmol)，最后在5分钟内加入18-冠醚-6(0.13g)的无水THF(2ml)溶液。继续在25℃下搅拌两小时，然后(用乙醚)后处理反应混合物。粗产物经过层析法纯化(用乙醚与石油醚的混合物作为洗脱剂)，得到所需烷氧基化合物III或IV。

通用操作10

用HF脱保护化合物IV合成化合物I

向搅拌着的适当化合物IV(0.25mmol)的乙酸乙酯(3ml)溶液中加入乙腈(6ml)，然后加入5％氢氟酸的乙腈-H₂O 7∶1溶液(4ml)。在25℃下搅拌2小时后，加入乙酸乙酯(40ml)和1M碳酸氢钠，(用乙酸乙酯)后处理反应混合物。残余物经过层析法纯化，得到所需化合物I。

通用操作11

乳酸酯甲磺酸盐的合成

在一小时内，将甲磺酰氯(18.6ml，27.5g，0.24mol)的叔丁基甲基醚(100ml)溶液加入到搅拌着的适当R或S的乳酸甲酯或乙酯(0.20mol)、三乙胺(28.3g，0.28mol)与DMAP(0.24g，0.002mol)的叔丁基甲基醚(200ml)溶液中，同时在冰浴中冷却。继续在冰浴中搅拌1/2小时，然后在25℃下搅拌2小时。将反应混合物再次在冰浴中冷却，缓慢加入水(250ml)，保持温度低于10℃。搅拌20分钟以上后，分离各相，含水相用乙醚(100ml)萃取两次。合并有机相，用1N硫酸(100ml)、水(100ml)、1M碳酸氢钠(100ml)、水(2×100ml)和饱和氯化钠水溶液(100ml)萃取。用硫酸钠干燥后，浓缩溶液(35℃和0.2巴)，利用45cmPodbielniak型柱在真空中分馏残余物，得到所需标题化合物。

通用操作12

R或S的2-氟丙酸甲酯或乙酯的合成

在约27毫巴真空下，在约一小时内，将适当乳酸酯甲磺酸盐(0.125mol)溶液加入到搅拌并在60℃油浴中加热的、(冷冻干燥的)氟化钾(29g，0.5mol)的甲酰胺(70ml)溶液/悬液中。烧瓶装有Claisen型侧臂，后者连接有干冰冷却器和干冰冷却的收集器，在其中冷凝从反应中连续蒸馏的2-氟丙酸酯。继续在60℃和20mmHg下搅拌，直至不再有蒸馏产物被冷凝。这需要4-5小时。将蒸馏产物(含有一些水)用乙醚(40ml)稀释，用硫酸镁干燥，经过蒸馏法纯化，条件类似于上述制备，保持浴温恒定在50-60℃，逐渐降低压力，直至在收集器内收集到纯的标题化合物。

制备例1

化合物502

将(+)-乙基D-乳酸酯(R-异构体，非天然)(5.2g，44mmol)、咪唑(13.6g)与叔丁基二甲基甲硅烷基氯(15g)的无水DMF(50ml)溶液在25℃下搅拌1小时。加入乙酸乙酯(200ml)，有机溶液用水(2×100ml)、3M CaCl₂(2×100ml)、水(100ml)和35％NaCl(100ml)萃取，用硫酸钠干燥，在真空中浓缩。粗产物经过层析法纯化，用含1％乙醚的石油醚作为洗脱剂，得到化合物502，为一种油。

[α]_D ²⁰+30.5°(c2.14，CHCl₃)

¹³C NMRδ173.9，68.3，60.5，25.5，21.1，18.1，14.0，-5.1，-5.5

制备例2

化合物503

方法：通用操作1

原料：(S)-(-)-O-叔丁基二甲基甲硅烷基乳酸乙酯(化合物501)

层析洗脱剂：含0％至5％乙醚的石油醚

[α]_D ²⁰-10.8°(c2.17，CHCl₃)

¹³C NMRδ214.7，74.6，29.9，25.5，20.8，17.8，7.1，-4.9，-5.3

制备例3

化合物504

方法：通用操作1

原料：化合物502

层析洗脱剂：含0％至5％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ214.7，74.6，29.9，25.5，20.8，17.8，7.1，-4.9，-5.3

制备例4

化合物201(+化合物205)

方法：通用操作2

原料：化合物503

层析洗脱剂：含1％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ¹H NMR d 81.1，75.6，71.3，70.0，26.5，25.8，25.6，17.8，17.1，7.4，-4.3，-5.2

制备例5

化合物202

方法：通用操作4

原料：化合物201

层析洗脱剂：含25％至50％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ80.7，75.5，71.2，71.1，27.1，26.0，17.1，7.6

制备例6

化合物203

方法：通用操作5

原料：化合物202

层析洗脱剂：含5％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ106.8，82.4，80.2，78.2，70.8，28.3，26.7，25.6，25.0，14.6，7.2

制备例7

化合物204

方法：通用操作6

原料：化合物201

层析洗脱剂：石油醚

[α]_D ²⁰-4.4°(c1.8，CHCl₃)

¹³C NMRδ82.2，80.1，71.4，70.3，28.8，25.8，24.9，17.9，17.3，7.5，2.4，-4.4，-4.9

制备例8

化合物205(+化合物201)

方法：通用操作2

原料：化合物503

层析洗脱剂：含1％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ80.8，75.1，72.3，70.2，27.8，25.6，24.4，17.8，17.6，7.4，-4.3，-5.2

制备例9

化合物206

方法：通用操作4

原料：化合物205

层析洗脱剂：含25％至50％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ80.8，75.2，71.6，71.1，29.1，24.7，17.0，7.4

制备例10

化合物207

方法：通用操作5

原料：化合物206

层析洗脱剂：含5％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ106.9，83.1，81.0，76.8，70.1，28.4，28.2，26.5，24.5，14.5，8.1

制备例11

化合物208

方法：通用操作6

原料：化合物205

层析洗脱剂：石油醚

[α]_D ²⁰+6.9°(c1.6，CHCl₃)

¹³C NMRδ82.0，79.8，72.7，70.5，27.9，27.0，25.8，25.7，17.6，8.3， 2.5，-4.4，-5.0

制备例12

化合物209(+化合物211)

方法：通用操作2

原料：化合物504

层析洗脱剂：含1-2％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ81.1，75.6，71.3，70.0，26.5，25.8，25.6，17.8，17.1，7.4，-4.3，-5.2

制备例13

化合物210

方法：通用操作6

原料：化合物209

层析洗脱剂：石油醚

[α]_D ²⁰+4.1°(c2.1，CHCl₃)

¹³C NMRδ82.2，80.1，71.4，70.3，28.8，25.8，25.0，17.9，17.3，7.5，2.4，-4.4，-4.9

制备例14

化合物211(+化合物209)

方法：通用操作2

原料：化合物504

层析洗脱剂：含1-2％乙醚的石油醚

制备例15

化合物212

方法：通用操作6

原料：化合物211

层析洗脱剂：石油醚

[α]_D ²⁰-7.0°(c1.2，CHCl₃)

¹³C NMRδ82.0，79.8，72.8，70.5，27.9，27.0，25.7，17.8，17.6，8.3，2.5，-4.4，-5.0

制备例16

化合物213+化合物217

方法：通用操作3

原料：化合物503

层析洗脱剂：含0％至2％乙醚的石油醚

化合物213

¹H NMRδ3.70(q，1H)，2.51(s，1H)，1.80(m，1H)，1.64(m，1H)，1.25(d，3H)，0.98(t，3H)，0.88(s，9H)，0.20(s，6H)

化合物217

¹³C NMRδ83.9，74.7，73.3，73.1，31.0，25.6，25.5，18.6，8.1，-4.3，-5.1

制备例17

化合物214+化合物218

方法：通用操作3a

原料：化合物503

层析洗脱剂：含0％至1％乙醚的石油醚

化合物214

¹³C NMRδ105.9，89.2，74.6，73.5，30.9，25.7，18.7，17.2，8.3，-0.3，-4.5，-4.9

化合物218

¹³C NMRδ105.9，89.6，75.1，73.4，30.9，25.7，25.6，18.7，8.3，-0.3，-4.2，-5.0

制备例18

化合物215+化合物219

方法：通用操作4

原料：化合物213+化合物217

或化合物214+化合物218

层析洗脱剂：a)含40％乙醚的石油醚

b)含33％乙醚的石油醚

化合物215

¹H NMRδ3.84(1H，q)，2.49(1H，s)，1.74(1H，m)，1.61(1H，m)，1.27(3H，d)，1.09(3H，t)

化合物219

从乙醚/正庚烷中结晶的m.p.52-53℃

¹H NMRδ3.65(q，1H)，2.46(s，1H)，1.65(m，2H)，1.31(d，3H)，1.08(t，3H)

制备例19

化合物216

方法：通用操作5a

原料：化合物219

层析洗脱剂：含5％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ108.6，83.9，79.3，79.2，72.8，29.3，28.3，26.0，13.6，8.2

制备例20

化合物220

方法：通用操作5a

原料：化合物215

层析洗脱剂：含5％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ108.6，82.8，81.3，78.4，75.1，31.3，27.6，27.1，15.8，8.8

制备例21

化合物301+化合物302

方法：通用操作7

原料：化合物204

层析洗脱剂：含0％至10％乙醚的石油醚

化合物301

¹³C NMRδ153.4，142.8，135.3，121.5，116.4，106.5，83.2，82.9，80.3，71.6，70.1，67.0，64.6，56.0，51.4，45.5，43.8，41.0，39.6，36.4，29.0，28.7，26.4，25.8，25.7，25.6，25.2，23.2，21.9，18.1，17.9，17.9，17.3，13.0，12.4，7.6，2.5，-4.3，-5.0，-5.1

化合物302

¹³C NMRδ152.5，141.9，134.3，120.5，115.4，105.5，82.3，82.0，79.3，70.7，69.1，66.0，64.7，55.1，51.1，44.6，42.8，41.5，39.2，35.5，28.0，27.7，26.0，24.9，24.7，24.6，24.4，22.3，21.0，17.1，17.0，16.9，16.4，12.4，10.8，6.6，1.5，-5.3，-5.8，-5.9

制备例22

化合物401

方法：通用操作8

原料：化合物301

层析洗脱剂：含0％至2％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.4，135.0，122.0，117.9，111.0，03.1，02.9，00.3，71.0，71.0，07.3，64.6，55.9，51.4，45.8，45.3，44.6，41.0，39.7，29.0，28.6，26.5，25.8，25.7，25.6，25.2，23.2，21.8，18.0，17.9，17.3，13.0，12.3，7.6，2.5，-4.3，-4.9，-5.0，-5.3

制备例23

化合物402

方法：通用操作9

原料：化合物401

层析洗脱剂：含0％至1％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.6，134.9，122.9，117.8，111.0，83.9，80.8，80.4，73.6，71.8，71.7，67.4，56.0，55.8，51.4，45.8，45.3，44.6，40.4，39.4，29.1，28.7，26.5，25.9，25.7，25.6，25.3，23.3，21.8，19.2，18.0，18.0，17.4，13.8，12.4，7.6，2.5，-4.4，-4.9，-5.0，-5.3

制备例24

化合物403

方法：通用操作9

原料：化合物401

层析洗脱剂：含0％至1％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.7，134.8，123.0，117.7，111.0，83.3，81.4，80.4，72.0，71.8，71.7，67.4，63.8，55.9，51.4，45.8，45.4，44.6，40.3，39.3，29.1，28.7，26.4，25.9，25.7，25.6，25.3，23.3，21.8，18.1，18.0，17.4，15.0，13.9，12.4，7.6，2.5，-4.4，-4.9，-5.0，-5.3

制备例25

化合物404

方法：通用操作9

原料：化合物401

烷基化剂：丙基溴

层析洗脱剂：含0％至1％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.8，134.8，123.0，117.7，111.0，83.3，81.5，80.5，72.1，71.8，71.7，70.1，67.4，55.9，51.4，45.8，45.4，44.6，40.4，39.5，29.1，28.7，26.3，25.9，25.7，25.6，25.3，23.3，22.9，21.8，18.0，18.0，17.3，13.9，12.4，10.7，7.6，2.5，-4.4，-4.9，-5.0，-5.3

制备例26

化合物405

方法：通用操作9

原料：化合物401

烷基化剂：苄基溴

层析洗脱剂：含0％至1％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.7，138.5，134.9，128.2，128.0，127.6，127.4，127.1，122.9，117.7，111.0，84.1，81.0，80.4，71.8，71.7，70.1，67.4，55.8，51.4，45.8，45.4，44.6，40.4，39.4，29.2，28.7， 26.3，25.9，25.7，25.6，25.3，23.2，21.8，18.0，18.0，17.4，14.0，12.4，7.7，2.5，-4.4，-4.8，-4.9，-5.0，-5.3

制备例27

化合物303

方法：通用操作7

原料：化合物208

层析洗脱剂：含0％至5％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ153.4，142.8，135.3，121.5，116.4，106.5，83.1，82.9，80.0，77.0，72.9，70.1，67.0，64.6，56.0，51.4，45.5，43.8，41.0，39.6，36.4，28.7，28.0，27.2，26.4，25.8，25.7，25.7，25.6，23.2，21.9，18.1，17.9，17.7，13.0，12.4，8.4，2.5，-4.4，-5.0，-5.1，-5.1

制备例28

化合物406

方法：通用操作8

原料：化合物303

层析洗脱剂：含0％至5％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.5，135.0，122.9，117.9，111.0，83.1，82.9，80.0，72.9，71.8，67.3，64.6，55.9，51.4，45.8，45.3，44.6，41.0，39.7，28.6，28.0，27.2，26.5，25.8，25.7，25.7，25.6，23.2，21.8，18.0，17.9，17.9，17.7，13.0，12.3，8.4，2.5，-4.4，-4.9，-4.9，-5.0，-5.3

制备例29

化合物407

方法：通用操作9

原料：化合物406

烷基化剂：乙基溴

层析洗脱剂：含0％至2％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.8，134.8，123.0，117.7，111.0，83.1，81.4，80.1，72.9，71.9，71.8，67.4，63.8，55.9，51.4，45.8，45.4，44.6，40.4，39.4，28.7，28.0，27.2，26.5，25.8，25.7，25.6，23.3，21.8，18.0，18.0，17.9，17.7，15.0，13.9，12.4，8.3，2.4，-4.4，-4.9，-4.9，-5.0，-5.3

制备例30

化合物304

方法：通用操作7

原料：化合物210

层析洗脱剂：含5％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ153.4.142.8，135.3，121.5，116.4，106.5，83.2，82.9，80.3，71.6，70.1，67.0，64.6，56.0，51.4，45.5，43.8，41.0，39.6，36.4，28.9，28.7，26.4，25.8，25.7，25.6，25.2，23.2，21.9，18.1，18.0，17.9，17.3，13.0，12.4，2.6，2.5，-4.3，-4.9，-5.0，-5.1，-5.1

制备例31

化合物408

方法：通用操作8

原料：化合物304

层析洗脱剂：含5％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.4，135.0，122.9，117.9，111.0，83.1，83.0，80.3，71.8，71.6，67.3，64.6，55.9，51.4，45.8，45.3，44.6，41.0，39.7，28.9，28.6，26.5，25.8，25.7，25.7，25.6，25.2，23.2，21.8，18.0，17.9，17.3，13.0，12.3，7.6，2.5，-4.3，-4.9，-5.0，-5.3

制备例32

化合物409

方法：通用操作9

原料：化合物408

烷基化剂：乙基溴

层析洗脱剂：含1％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.7，134.8，123.0，117.7，111.0，83.4，81.4，80.4，72.0，71.8，71.7，67.8，67.4，63.8，55.9，51.3，45.8，45.4，44.6，40.3，39.3，29.0，28.7，26.3，25.8，25.7，25.6，25.4，25.3，23.3，21.8，18.0，18.0，17.4，15.0，14.0，12.4，7.6，2.5，-4.4，-4.9，-5.0，-5.3

制备例33

化合物305

方法：通用操作7

原料：化合物212

层析洗脱剂：含3％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ263.2，153.4，142.8，135.3，121.5，116.4，106.5，82.9，80.0，72.9，70.1，67.0，64.7，56.0，51.4，45.5，43.8，41.0，39.6，36.4，28.7，28.0，27.2，26.4，25.7，25.7，25.6，23.2，21.9，18.1，17.9，17.6，13.0，12.4，8.4，2.5，-4.4，-5.0，-5.1

制备例34

化合物410

方法：通用操作8

原料：化合物305

层析洗脱剂：含3％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.5，135.0，122.9，117.9，111.0，83.1，82.9，80.0，72.9，71.8，67.3，64.7，55.9，51.4，45.8，45.3，44.6，41.0，39.7，28.7，28.0，27.2，26.5，25.7，25.7，25.6，23.2，21.8，18.1，18.0，17.9，17.6，13.0，12.3，8.4，2.5，-4.4，-4.9，-4.9，-5.0，-5.3

制备例35

化合物411

方法：通用操作9

原料：化合物410

层析洗脱剂：含1％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.2，140.8，134.8，123.0，117.7，111.0，83.0，81.4，80.1，72.9，72.0，71.8，67.4，63.8，55.9，51.4，45.8，45.4，44.7，40.3，39.3，28.7，28.0，27.2，26.4，25.8，25.7，25.6，23.3，21.8，18.0，18.0，17.9，17.6，15.0，14.0，12.4，8.4，2.5，-4.4，-4.9，-4.9，-5.0，-5.3

制备例36

化合物306

方法：通用操作7a

原料：化合物216

层析洗脱剂：含0％至20％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ153.4，142.7，135.4，121.5，116.4，108.1，106.5，85.6，84.8，79.3，78.9，70.1，67.0，64.4，55.9，51.2，45.5，43.8，40.6，39.5，36.4，28.7，28.2，28.0，26.2，25.9，25.7，25.6，23.2，21.9，18.1，17.9，13.5，13.1，12.4，8.2，-5.0，-5.1，-5.1

制备例37

化合物412

方法：通用操作8

原料：化合物306

层析洗脱剂：含10％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.1，140.3，135.0，122.9，117.9，111.0，108.1，85.6，84.7，79.3，78.9，71.9，67.3，64.4，55.8，51.2，45.8，45.3，44.6，40.6，39.5，28.6，28.2，28.0，26.2，25.9，25.7，25.6，23.1，21.8，18.0，17.9，13.5，13.1，12.4，8.2，-4.9，-5.0，-5.3

制备例38

化合物413

方法：通用操作9

原料：化合物412

烷基化剂：乙基溴

层析洗脱剂：含0％至2％乙醚的石油醚

¹H NMRδ6.22(d，1H)，6.00(d，1H)，5.17(d，1H)，4.85(d，1H)，4.36(m，1H)，4.30(q，1H)，4.20(d，1H)，4.16(m，1H)，3.72(m，1H)，3.30(m，1H)，2.82(dd，1H)，2.43(dd，1H)，2.20(dd，1H)，1.99(t，1H)，2.0-0.8(m，15H)，1.44(s，3H)，1.40(s，3H)，1.26(d，3H)，1.18(t，3H)，1.07(t，3H)，1.00(d，3H)，0.87(s，18H)，0.51(s，3H)，0.05(s，12H)

制备例39

化合物307

方法：通用操作7a

原料：化合物220

层析洗脱剂：含0％至20％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ153.4，142.7，135.3，121.5，116.4，108.2，106.5，87.9，83.8，81.2，78.4，70.1，67.0，64.4，55.9，51.3，45.4，43.8，40.7，39.5，36.4，31.3，28.7，27.6，26.8，26.3，25.7，25.6，23.2，21.9，18.1，17.9，15.8，13.1，12.4，8.7，-5.0，-5.1，-5.1

制备例40

化合物414

方法：通用操作8

原料：化合物307

无层析：粗产物用于下面的步骤

¹³C NMRδ6.22(1H，d)，6.01(1H，d)，5.17(1H，d)，4.85(1H，d)，4.67(1H，s)，4.36(1H，m)，4.17(1H，m)，3.85(1H，q)，2.82(1H，dd)，2.43(1H，dd)，2.21(1H，dd)，1.89(1H，t)，1.85-1.00(13H，m)，1.68(2H，q)，1.51(3H，s)，1.35(3H，d)，1.33(3H，s)，1.06(3H，t)，1.04(3H，d)，0.87(18H，s)，0.53(3H，s)，0.05(12H，s)

制备例41

化合物415

方法：通用操作9

原料：化合物414

烷基化剂：乙基溴

层析洗脱剂：含0％至2％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.1，140.7，134.9，122.9，117.8，111.0，108.1，86.5，84.2，81.3，78.5，71.9，71.8，67.3，63.9，55.9，51.4，45.9，45.4，44.6，40.2，39.3，31.4，28.7，27.5，26.9，26.3，25.7， 25.6，23.3，21.8，18.0，18.0，15.8，15.0，14.0，12.4，8.8，-4.9，-5.0，-5.3

制备例42

化合物505

方法：通用操作11

原料：(R)-(+)-乳酸甲酯

纯化：蒸馏；b.p.94℃/1.3毫巴；[α]_D ²⁰+54.4°(c2.29，CHCl₃)

¹³C NMRδ170.0，74.1，52.8，39.1，18.4

制备例43

化合物506

方法：通用操作11

原料：(S)-(-)-乳酸乙酯

纯化：蒸馏；b.p.98℃/1.5毫巴；[α]_D ²⁰-53.1°(c2.03，CHCl₃)

(文献值：Breitschuh，R.等Synthesis 1992，1170：[α]_D ²⁰-54.6°(c4.36，CHCl₃)

制备例44

化合物507

方法：通用操作12

原料：化合物505

纯化：蒸馏；b.p.39℃/53毫巴；[α]_D ²⁰-2.8°(c2.21，CHCl₃)

¹H NMRδ5.02(dq，1H)，3.80(s，3H)，1.58(dd，3H)

制备例45

化合物508

方法：通用操作12

原料：化合物506

纯化：蒸馏；b.p.34℃/27毫巴；[α]_D ²⁰+3.8°(c2.32，CHCl₃)

¹³C NMRδ170.5，85.7，61.5，18.3，14.1

制备例46

化合物509

方法：通用操作1a

原料：化合物507

纯化：蒸馏；b.p.约45℃/27毫巴；[α]_D ²⁰约-51.6°(c2.1，CHCl₃∶THF 4∶1)

¹H NMRδ4.88(dq，1H)；2.64(m，2H)；1.41(dd，3H)；1.08(t，3H)

制备例47

化合物510

方法：通用操作1a

原料：化合物508

纯化：蒸馏；b.p.约45℃/27毫巴；[α]_D ²⁰约+43.3°(c2.0，CHCl₃∶THF 7∶3)

¹³C NMRδ210.8，92.6，30.7，17.7，6.8

制备例48

化合物221

方法：通用操作2a

原料：化合物509

纯化：无

¹³C NMRδ

Major 93.4，79.6，74.3，71.3，27.8，25.0，14.8，7.4

Minor 93.0，80.0，74.6，71.0，27.0，25.4，14.7，7.2

制备例49

化合物222

方法：通用操作6

原料：化合物221

层析洗脱剂：石油醚

制备例50

化合物223

方法：通用操作2a

原料：化合物210

纯化：无

¹³C NMRδ

Major：93.4，79.7，74.3，71.4，27.8，25.0，14.8，7.4

Minor：93.0，80.0，74.8，71.0，27.0，25.4，14.7，7.2

制备例51

化合物224

方法：通用操作6

原料：化合物223

层析洗脱剂：石油醚

¹³C NMRδ

Major：93.2，80.4，78.3，70.5，28.1，25.9，14.9，7.7，2.1

Minor：92.5，80.6，78.2，70.3，27.9，25.1，14.6，7.2，2.1

制备例52

化合物308

方法：通用操作7

原料：化合物1和化合物222

层析洗脱剂：含0％至20％乙醚的石油醚

制备例53

化合物416

方法：通用操作8a

原料：化合物308

层析洗脱剂：含50％二氯甲烷的石油醚

制备例54

化合物417

方法：通用操作9

原料：化合物416

烷基化剂：乙基溴

层析洗脱剂：含0％至10％乙醚的石油醚

制备例55

化合物309

方法：通用操作7

原料：化合物1和化合物224

层析洗脱剂：含0％至20％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ153.4，142.7，135.4，121.5，116.4，106.5，93.3，83.1，81.5，78.5，70.1，67.0，64.6，55.9，51.4，45.5，43.8，41.2，40.9，39.6，36.4，28.9，28.7，28.3，27.5，26.3，25.7，25.6，23.2，22.4，21.9，20.2，19.2，18.1，17.9，15.1，14.8，14.1，13.0，12.4，11.2，7.8，2.2，-5.0，-5.1，-5.1

制备例56

化合物418

方法：通用操作8a

原料：化合物309

层析洗脱剂：含50％二氯甲烷的石油醚

¹H NMRδ6.22(d，1H)，6.02(d，1H)，5.17(d，1H)，4.85(d，1H)，4.62(dq，1H)，4.60(m，1H)，4.37(m，1H)，4.18(m，1H)，2.83(d，1H)，2.50-0.80(m，24H)，1.31(dd，3H)，1.01(d，3H)，0.85(s，18H)，0.83(d，3H)，0.12(s，9H)，0.06(d，12H)

制备例57

化合物419

方法：通用操作9

原料：化合物418

烷基化剂：乙基溴

层析洗脱剂：含0％至10％乙醚的石油醚

¹³C NMRδ148.1，140.6，134.9，122.9，117.8，111.0，93.4，82.6，80.5，74.3，71.9，67.3，64.0，55.8，51.3，45.9，45.4，44.6，40.1，39.3，28.7，27.8，26.2，25.7，25.6，25.0，23.3，21.8，18.0，17.9，14.7，14.0，12.4，7.2，2.2，-4.9，-5.0，-5.3

实施例

实施例1：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5-乙基-1(S)，5(S)，6(S)-三羟基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物101

方法：通用操作4

原料：化合物401

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMR(CD₃OD)δ149.8，142.5，135.8，124.9，119.0，112.1，84.3，82.4，77.1，71.6，71.5，67.4，65.5，57.3，52.7，46.9，46.2，43.7，42.4，40.9，30.1，28.5，27.0，26.2，24.5，23.2，17.3，14.0，13.1，7.9

实施例2：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羟基-5-乙基-1(S)-甲氧基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物102

方法：通用操作4

原料：化合物402

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMRδ147.7，142.9，133.1，124.9，117.2，111.8，82.4，82.0，75.6，73.8，71.3，70.9，66.8，56.4，56.0，51.5，45.7，45.3，42.9，40.3，39.4，29.1，27.2，26.5，26.4，23.5，22.1，17.1，14.1，12.6，7.7

实施例3：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物103

方法：通用操作4

原料：化合物403

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMRδ147.7，142.9，133.2，124.8，117.2，111.8，82.6，81.9，75.6，72.3，71.3，70.8，66.8，64.2，56.0，51.5，45.8，45.3，42.8，40.2，39.3，29.1，27.2，26.4，26.3，23.5，22.2，17.1，15.2，14.2，12.7，7.7

实施例4：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羟基-5-乙基-1(S)-(1-丙氧基)-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物104

方法：通用操作4

原料：化合物404

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMRδ147.7，143.0，133.0，125.0，117.1，111.8，82.9，81.7，75.6，72.4，71.3，70.9，70.5，66.9，56.0，51.5，45.8，45.3，42.9，40.3，39.5，29.1，27.2，26.5，26.3，23.5，23.1，22.2，17.1，14.2，12.7，10.9，7.7

实施例5：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-苄氧基-5(S)，6(S)-二羟基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物105

方法：通用操作4

原料：化合物405

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMRδ147.7，142.9，138.5，133.1，128.2，127.7，127.4，124.9，117.1，111.8，82.6，82.2，75.6，71.9，71.3，70.8，70.4，66.8，56.0，51.5，45.8，45.3，42.9，40.3，39.4，29.0，27.2，26.4，26.3，23.5，22.1，20.8，17.1，12.7，7.7

实施例6：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(R)，6(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物106

方法：通用操作4

原料：化合物407

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMRδ147.7，142.8，133.2，124.8，117.2，111.8，82.9，81.9，75.4，72.3，71.2，70.8，66.8，64.2，56.0，51.5，45.8，45.2，42.9，40.2，39.3，29.2，29.1，26.2，25.1，23.5，22.2，17.1，15.2，14.2，12.7，7.5

实施例7：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(R)，6(R)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物107

方法：通用操作4

原料：化合物409

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMRδ147.7，142.9，133.2，124.9，117.2，111.8，82.6，81.9，75.6，72.3，71.3，70.8，66.8，64.2，56.0，51.5，45.8，45.2，42.8，40.2，39.3，29.1，27.2，26.4，26.3，23.5，22.1，17.1，15.2，14.2，12.7，7.7

实施例8：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(R)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物108

方法：通用操作4

原料：化合物411

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMRδ147.7，142.8，133.2，124.8，117.2，111.8，83.0，81.9，75.4，72.3，71.2，70.8，66.8，64.2，56.0，51.5，45.8，45.2，42.9，40.2，39.3，29.3，29.1，26.3，25.1，23.5，22.1，17.1，15.2，14.2，12.7，7.5

实施例9：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(S)，5(S)-三羟基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物109

方法：通用操作10

原料：化合物412

层析洗脱剂：乙酸乙酯

¹H NMR(CD₃OD)δ6.32(d，1H)，6.08(d，1H)，5.28(d，1H)，4.90(d，1H)，4.57(d，1H)，4.35(t，1H)，4.12(m，1H)，3.63(q，1H)，2.86(dd，1H)，2.55(dd，1H)，2.25(dd，1H)，2.0-1.0(m，16H)，1.27(d，3H)，1.23(d，3H)，1.05(t，3H)，0.56(s，3H)

实施例10：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4(S)，5(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物111

方法：通用操作10

原料：化合物413

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹H NMRδ6.37(d，1H)，6.01(d，1H)，5.32(t，1H)，5.00(d，1H)，4.42(t，1H)，4.41(m，2H)，3.81(q，1H)，3.73(m，1H)，3.31(m，1H)，2.83(dd，1H)，2.59(dd，1H)，2.31(m，2H)，2.1-1.0(m，14H)，1.25(d，3H)，1.21(t，3H)，1.08(t，3H)，1.02(d，3H)，0.55(s，5H)

实施例11：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(R)，5(S)-三羟基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物114

方法：通用操作10

原料：化合物414

层析洗脱剂：乙酸乙酯

¹³C NMRδ(CD₃OD)149.9，142.4，135.8，130.2，124.9，119.1，112.1，73.5，71.5，67.4，65.3，61.6，57.3，52.7，46.9，46.2，43.8，42.2，40.9，32.1，30.1，27.1，24.6，23.2，18.3，14.5，14.0，13.0，9.0

实施例12：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4(R)，5(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物116

方法：通用操作10

原料：化合物415

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMRδ147.6，142.9，133.0，125.0，117.1，111.9，85.8，85.3，75.5，73.2，72.0，70.9，66.9，64.3，56.0，51.5，45.7，45.3，42.9，40.2，39.4，31.0，29.1，26.4，23.5，22.1，18.5，15.2，14.2，12.7，8.3

实施例13：含有化合物103的胶囊剂

将化合物103溶于花生油至最终浓度为1μg化合物103/ml油。在加热下，将10重量份明胶、5重量份甘油、0.08重量份山梨酸钾和14重量份蒸馏水混合在一起，形成软明胶胶囊。然后在每粒胶囊内填充100μl化合物103的油溶液，以便每粒胶囊含有0.1μg化合物103。

实施例14：含有化合物102的皮肤霜剂

在1g杏仁油中溶解0.05mg化合物102。向该溶液中加入40g矿物油和20g半乳化蜂蜡。将混合物加热至液化。加入40ml热水后，使混合物充分混合。所得霜剂含有大约0.5μg化合物102每克霜剂。

实施例15：含有化合物108的注射液

化合物108(活性物质) 10μg

磷酸氢二钠二水合物(缓冲剂) 15.4mg

磷酸二氢钠二水合物(缓冲剂) 2mg

氯化钠 0.8mg

抗坏血酸钠(抗氧化剂) 5mg

来自BASF的Solutol^HS 15(增溶剂) 5mg

注射用水加至1ml

加热至温度最高80℃，将Solutol^HS 15溶于注射用水。覆盖一层氮。加入缓冲物质和氯化钠，然后将溶液冷却至最高30℃。然后加入抗坏血酸钠，最后将化合物108溶于所得溶液。

将溶液无菌过滤，在适当时间-温度条件下高压灭菌。

实施例16：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羟基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物157

方法：通用操作10

原料：化合物416

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

实施例17：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羟基-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物158

方法：通用操作10

原料：化合物417

层析洗脱剂：含50％石油醚的乙酸乙酯

实施例18：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羟基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物159

方法：通用操作10

原料：化合物418

层析洗脱剂：含50％至0％石油醚的乙酸乙酯

¹³C NMRδ147.7，142.7，133.2，124.9，117.3，111.8，93.4，84.2，80.5，74.5，70.9，66.9，64.8，56.0，51.5，45.7，45.3，42.9，41.0，39.6，29.0，28.0，26.4，25.3，23.4，22.1，14.9，13.3，12.6，7.5

实施例19：1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羟基-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯

化合物160

方法：通用操作10

原料：化合物419

层析洗脱剂：含50％石油醚的乙酸乙酯

¹H NMRδ6.37(d，1H)，6.02(d，1H)，5.33(s，1H)，5.00(s，1H)，4.68(dq，1H)，4.43(m，1H)，4.23(m，1H)，4.13(s，1H)，3.73(m，1H)，3.30(m，1H)，2.84(dd，1H)，2.58(m，2H)，2.40(dd，1H)，2.31(dd，1H)，2.05-1.20(m，19H)，1.38(dd，3H)，1.20(t，3H)，1.01(d，3H)，0.96(t，3H)，0.54(s，3H)

Claims

1、式I化合物，包括任意一种可能的式I非对映异构体的纯净形式和式I非对映异构体的任意混合物：

其中式R代表氢，或者R代表(C₁-C₆)烷基、苯基或(C₇-C₉)芳烷基，非必须地被一个或多个选自(C₁-C₃)烷基、F和苯基的基团取代；n是整数0、1或2；X代表羟基或卤素。

2、根据权利要求1的化合物，其中R选自由甲基、乙基、丙基、异丙基、苄基、邻甲基苄基、间甲基苄基和对甲基苄基组成的组。

3、根据任意前述权利要求之一的化合物，其中n是0或1。

4、根据权利要求1或2的化合物，其中n是1。

5、根据权利要求1或2的化合物，其中X代表选自OH、F和Cl的取代基。

6、根据权利要求1或2的化合物，具有构型22(S)，25(S)，26(S)或22(S)，25(S)，26(R)。

7、根据权利要求1的化合物，选自

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羟基-5-乙基-1(S)-甲氧基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(S)-二羟基-5-乙基-1(S)-(1-丙氧基)-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-苄氧基-5(S)，6(S)-二羟基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(R)，6(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(R)，6(R)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5(S)，6(R)-二羟基-1(S)-乙氧基-5-乙基-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(S)，5(S)-三羟基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4(S)，5(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4-乙基-1(S)，4(R)，5(S)-三羟基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(4(R)，5(S)-二羟基-1(S)-乙氧基-4-乙基-2-己炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羟基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(S)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羟基-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)，5(R/S)-二羟基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，和

1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(1(S)-乙氧基-5-乙基-6(R)-氟-2-庚炔-5(R/S)-羟基-1-基)-9，10-开环孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯。

8、制备权利要求1的式I化合物的方法，其特征在于

a)使1(S)，3(R)-双-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-20(R)-甲酰基-9，10-开环孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯与得自侧链构件HC≡C-(CH₂)_n-C(C₂H₅)(O-PG¹)(CHX¹-CH₃)的有机金属试剂反应，其中n和R具有上述含义；X¹代表O-PG²、氟、氯、溴或碘；PG¹和PG²都代表选自三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基的相同或不同基团；或者PG¹和PG²一起构成一个双官能的亚异丙基缩酮保护基团；生成式III化合物，

b)非必须地分离步骤a)所生成的化合物的非对映异构体，

c)使步骤a)或步骤b)所生成的化合物受到三重致敏的光异构化作用，得到5(Z)异构体，

d)非必须地在碱和相转移催化剂的存在下，用(C₁-C₆)烷基或(C₇-C₉)芳烷基溴化物或碘化物烷基化步骤c)所生成的化合物的22-羟基，

e)脱保护步骤c)或步骤d)所生成的化合物，生成式I化合物。

9、药物组合物，含有有效量的一种或多种权利要求1-6的化合物，以及药学上可接受的无毒载体和/或助剂。

10、根据任意权利要求1-6之一的化合物在药物制备中的用途，该药物用于治疗和/或预防以异常细胞分化和/或细胞增殖为特征的疾病，包括掌跖脓疱病、持续性肢皮炎和指甲牛皮癣，和其他角化作用障碍；与HIV有关的皮肤病；伤口愈合；各种癌症；免疫系统的疾病或失调；移植排斥；自体免疫疾病，包括盘状与系统性红斑狼疮；糖尿病；自体免疫类型的慢性皮肤病；炎性疾病；以及大量其他疾病状态，包括甲状旁腺机能亢进；认知缺损或老年性痴呆，和其他神经变性疾病；高血压；痤疮；脱发；皮肤萎缩；皮肤老化，包括光老化；还用于促进骨生成和治疗或预防骨质疏松和骨软化。