CN116693653B - 一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法；涉及多肽合成技术领域；本发明采用固相合成方法与液相合成方法结合；将索玛鲁肽分成3~6个索玛鲁肽中间体多肽片段；固相合成方法用于合成索玛鲁肽中间体多肽片段；液相合成方法用于将一个索玛鲁肽中间体多肽片段的羧基末端氨基酸与另一个索玛鲁肽中间体多肽片段的氨基末端氨基酸按照索玛鲁肽的氨基酸序列进行偶联反应；每个索玛鲁肽中间体多肽片段中含有2~15个氨基酸；本发明方法制得的索玛鲁肽具有较高的收率与纯度。
Description
技术领域
本发明属于多肽合成技术领域，具体涉及一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法。
背景技术
索玛鲁肽是一种胰高血糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1 RA)，具有半衰期长的特点，允许每周一次皮下给药。索玛鲁肽与天然GLP-1非常相似，只有两个的结构差异：(1)8位上的丙氨酸氨基酸被α-氨基异丁酸取代，这使得分子对DPP-4的降解更具抵抗力；(2)引入的碳链更长，灵活的脂肪链将C18脂肪二酸缀合至26位赖氨酸，从而改善了与白蛋白结合特性，这延长了药物在血浆中的寿命并降低了药物的肾清除率。这样可以将其在人体内的半衰期延长，而不会显着改变其激活GLP-1受体的能力。
目前，已经报道了很多索玛鲁肽的合成途径，比如：（1）通过多肽固相合成，按照多肽序列中氨基酸顺序逐一完成索玛鲁肽的肽链连接，这种会出现肽链偶联时间长、肽链偶联不完全，粗品纯度低等问题，多肽合成当中微波辅助，在实际放大生产当中具有局限性；（2）固相片段合成法，即在连接多肽的时候，把短肽通过固相合成方法引入索玛鲁肽主肽链上；（3）现有技术CN106749613A公开了固液结合法，采用16+6+9片段的合成方式，同时开展3个片段的合成，通过固相方法合成出特定的片段，再将片段用液相合成连接成整条肽链，降低了固相合成中困难肽序的合成、解决了固相合成中批量放大的困难、提高了合成效率、由于采用液相片段合成使的纯化难度有效的降低、同时大大降低了生产成本。
发明内容
本发明的目的在于提供一种采用固相合成法合成特定的索玛鲁肽中间体多肽片段，再将多个索玛鲁肽中间体多肽片段采用液相合成法按照索玛鲁肽的氨基酸序列合成索玛鲁肽的方法，得到收率与纯度较高的索玛鲁肽。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，采用固相合成方法与液相合成方法结合；将索玛鲁肽分成3~6个中间体多肽片段；其中，
固相合成方法用于合成索玛鲁肽中间体多肽片段；液相合成方法用于将一个索玛鲁肽中间体多肽片段的羧基末端氨基酸与另一个索玛鲁肽中间体多肽片段的氨基末端氨基酸按照索玛鲁肽的氨基酸序列进行偶联反应；
每个索玛鲁肽中间体多肽片段中含有2~16个氨基酸。本发明采用固相合成法合成特定的索玛鲁肽中间体多肽片段，再将多个索玛鲁肽中间体多肽片段采用液相合成法按照索玛鲁肽的氨基酸序列合成索玛鲁肽，能够进一步提高索玛鲁肽的收率和纯度。
本发明固相合成的多肽片段中氨基酸个数优选为2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16。
本发明液相合成中索玛鲁肽中间体多肽片段组合具体优选为2+12+13+4、4+12+11+4、4+12+5+10、11+10+10、8+13+10。本发明固相合成含有特定氨基酸的索玛鲁肽中间体片段，再采用液相合成法合成索玛鲁肽，其具有较高的收率，优于现有技术中的片段法合成的索玛鲁肽。
本发明中索玛鲁肽中间体多肽片段选自下列至少一种：
Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH；
Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)- Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH；
Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys（AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu）-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-OH；
H-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-R（R=Bzl/Me/Et/tBu/OH）；
Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val -OH；
Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH；
H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-R（R=Bzl/Me/Et/tBu/OH）；
Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu) -OH；
Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH；
Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-OH；
Fmoc-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH。
在本发明的一个实施方案中，固相合成方法的步骤包括：
将树脂置于固相合成反应器中，加入带保护基团的氨基酸、溶剂和偶联剂，在室温下反应，加入溶剂再反应，过滤，用溶剂洗涤产物；然后加入脱保护试剂进行搅拌反应，抽滤，除去脱保护试剂，用溶剂洗涤，抽干；
将另一个带保护基团的氨基酸与偶联剂置于容器中，降温至2-8℃，加入溶剂静置反应，然后加入到固相合成反应器中进行搅拌反应，反应完成后，用溶剂洗涤产物；然后加入脱保护试剂进行搅拌反应，抽滤，除去脱保护试剂，溶剂洗涤，抽干；按照多肽片段序列重复上述步骤依次偶联氨基酸，得到肽树脂；
将上述肽树脂加入到裂解液中搅拌反应，过滤，除去树脂，得到滤液，滤液拉干得到索玛鲁肽中间体多肽片段。
本发明固相合成方法中所用的树脂选自CTC树脂或Wang Resin树脂。
在本发明的另一个实施方案中，固相合成方法中，偶联剂选自DIEA、HOBt、HOAt、DIC、HBTU和DIPCDI中的至少一种。
在本发明的另一个实施方案中，溶剂选自二氯甲烷、甲醇、N,N-二甲基甲酰胺、无水乙醚、四氢呋喃和水中的至少一种。
在本发明的另一个实施方案中，固相合成方法中，裂解液选自Pip/DMF和TFE/DCM中的至少一种。
在本发明的另一个实施方案中，裂解液中Pip/DMF的体积比为10~40%；具体优选为10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%。
在本发明的另一个实施方案中，裂解液中TFE/DCM的体积比为1~10%；具体优选为1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%。
在本发明的一个实施方案中，液相合成方法的步骤包括：
步骤1：将两个多肽片段和偶联剂加入到溶剂中溶解，在冰浴条件下加入NMM、偶联剂，在冰浴条件下继续搅拌反应，然后升温至室温进行反应，反应完毕后，再次进行冰浴反应，滴加强碱试剂搅拌反应，反应完毕后，加入水析出固体，过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干，得到产物1；
步骤2：将产物1、一个多肽片段和偶联剂加入到溶剂中溶解，在冰浴条件下加入NMM、偶联剂，在冰浴条件下继续搅拌反应，然后升温至室温进行反应，反应完毕后，再次进行冰浴反应，滴加强碱试剂搅拌反应，反应完毕后，加入水析出固体，过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干，得到产物2；重复上述步骤，直至制得索玛鲁肽的全保护肽；
步骤3：将TFA、茴香硫醚、EDT、苯酚和水混合均匀，配制得到切割液；
步骤4：将索玛鲁肽的全保护肽分批加入到切割液中，在35~45℃下反应2~3h，反应完毕后，将反应液加入到-30℃~-20℃的乙醚中沉降，离心，烘干，纯化，得到索玛鲁肽。
在本发明的另一个实施方案中，液相合成方法中，偶联剂选自DIEA、HOBt、HOAt、DIC、HBTU和DIPCDI中的至少一种。
在本发明的另一个实施方案中，切割液中，TFA、茴香硫醚、EDT、苯酚和水的体积比为35~45：1~3：0.5~1.5：0.5~1.5：0.5~1.5。
在本发明的另一个实施方案中，强碱试剂选自Dbu。
在本发明的另一个实施方案中，液相合成方法中，带保护基团的索玛鲁肽序列与切割液的比例为1~3g：25~50mL。
由于片段法合成索玛鲁肽的制备方法中，由于切割位点不一样，合成难易程度也不一样，本发明采用固相合成法合成特定的索玛鲁肽中间体多肽片段，再将多个索玛鲁肽中间体多肽片段采用液相合成法按照索玛鲁肽的氨基酸序列合成索玛鲁肽，能够进一步提高索玛鲁肽的收率和纯度，优于现有技术中的片段法合成的索玛鲁肽。
附图说明
图1为实施例1中索玛鲁肽的质谱；
图2为实施例1中索玛鲁肽的高效液相色谱图；
图3为索玛鲁肽的收率。
具体实施方式
本发明提供了一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较优的实施方案进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
以下结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细描述：
实施例1
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，包括以下步骤：
首先固相合成法合成出索玛鲁肽中间体多肽片段分别为：
（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH；
（2）Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)- Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH；
（3）Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys（AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu）-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-OH；
（4）H-Arg(Pbf)-Gly-R（R=Bzl/Me/Et/tBu/OH）；
Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH的合成方法如下：
根据现有技术中已知的描述的通用方案：将CTC树脂（6.3g，6.25mmol）置于125mL的固相合成反应器中，加入氨基酸Fmoc-Gly-OH(3.71g，12.5mmol)，加入二氯甲烷（DCM）60mL，在加入DIEA(4.35mL)，25℃条件下反应3小时，加入甲醇6.25mL，反应5分钟。过滤，将树脂用二氯甲烷（DCM）60mL洗涤2次，甲醇60mL洗涤2次，DMF 60mL洗涤2次。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Glu(OtBu)-OH（6.38g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Aib-OH（4.88g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Boc-His(Trt)-OH（7.47g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL，然后用甲醇65mL洗涤2次，DCM溶液65mL洗涤2次，甲醇65mL洗涤2次,真空干燥，得到Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly--CTC-树脂的肽树脂；
将上述肽树脂用1%的TFA/DCM溶液200mL，30℃条件下搅拌反应30分钟，过滤，除去树脂，得到滤液。滤液拉干得到全保护多肽Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly -OH，收率57.5%，纯度91.2%。
Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)- Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH的合成方法如下：
根据现有技术中已知的描述的通用方案：将CTC树脂（6.3g，6.25mmol）置于125mL的固相合成反应器中，加入氨基酸Fmoc-Gly-OH（3.71g，12.5mmol），加入二氯甲烷（DCM）60mL，在加入DIEA（4.35mL），25℃条件下反应3小时，加入甲醇6.25mL，反应5分钟。过滤，将树脂用二氯甲烷（DCM）60mL洗涤2次，甲醇60mL洗涤2次，DMF 60mL洗涤2次。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc- Glu(OtBu)-OH（6.38g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Leu-OH（4.88g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Tyr(tBu)-OH（6.89g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Ser(tBu)-OH（5.75g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Ser(tBu)-OH（5.75g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Val-OH（5.09g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Asp(OtBu)-OH（6.17g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Ser(tBu)-OH（5.75g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Thr(tBu)-OH（5.96g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Phe-OH（5.81g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Thr(tBu)-OH（5.96g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL，每次65mL，然后用甲醇65mL洗涤2次，DCM溶液65mL洗涤2次，甲醇65mL洗涤2次,真空干燥，得到Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-CTC-树脂的肽树脂；
将上述肽树脂用1%的TFA/DCM溶液200mL，30℃条件下搅拌反应30分钟，过滤，除去树脂，得到滤液。滤液拉干得到全保护多肽Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH，收率为65.1%，纯度为85.3%。
Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Ly(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-OH的合成方法如下：
根据现有技术中已知的描述的通用方案：将CTC树脂（6.3g，6.25mmol）置于125mL的固相合成反应器中，加入氨基酸Fmoc-Gly-OH(3.71g，12.5mmol)，加入二氯甲烷（DCM）60mL，在加入DIEA（4.35mL），25℃条件下反应3小时，加入甲醇6.25mL，反应5分钟。过滤，将树脂用二氯甲烷（DCM）60mL洗涤2次，甲醇60mL洗涤2次，DMF 60mL洗涤2次。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Arg(Pbf)-OH（9.73g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Val-OH（5.09g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至2-8℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应10-20分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc- Leu-OH（4.88g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Trp(Boc)-OH（7.90g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Ala-OH（4.67g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Ile-OH（5.30g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Phe-OH（5.81g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至2-8℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应10-20分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Glu(OtBu)-OH（6.38g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-OH（17.95g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Ala-OH（4.67g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Ala-OH（4.67g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至2-8℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应10-20分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Gln(Trt)-OH（9.16g，15mmol），HOBt（2.03g，15mmol）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL，然后用甲醇65mL洗涤2次，DCM溶液65mL洗涤2次，甲醇65mL洗涤2次,真空干燥，得到Fmoc- Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-CTC-树脂的肽树脂；
将上述肽树脂用1%的TFA/DCM溶液200mL，30℃条件下搅拌反应30分钟，过滤，除去树脂，得到滤液。滤液拉干得到全保护多肽Fmoc- Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly -OH，收率为75.9%，纯度为82.4%。
H-Arg(Pbf)-Gly-R（R=Bzl/Me/Et/tBu/OH）的合成方法分别为：
Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OH的合成方法如下：
根据现有技术中已知的描述的通用方案：将CTC树脂（25.2g，25mmol）置于500mL的固相合成反应器中，加入氨基酸Fmoc-Gly-OH(14.87g，50mmol)，加入二氯甲烷（DCM）240mL，在加入DIEA(17.4mL)，25℃条件下反应3小时，加入甲醇25mL，反应5分钟。过滤，将树脂用二氯甲烷（DCM）240mL洗涤2次，甲醇240mL洗涤2次，DMF 240mL洗涤2次。
加入20%Pip/DMF溶液260mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液260mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Arg(Pbf)-OH（38.93g，60mmol），HOBt（8.12g，60mmol）于500mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液100mL，DIC（9.2mL，60mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到500mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次260mL，然后用甲醇260mL洗涤2次，DCM溶液260mL洗涤2次，甲醇260mL洗涤2次，真空干燥，得到Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-CTC-树脂的肽树脂，
将上述肽树脂用1%的TFA/DCM溶液800mL，30℃条件下搅拌反应30分钟，过滤，除去树脂，得到滤液；滤液拉干得到全保护多肽Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OH，收率为82%，纯度为98.63%。
H-Arg(Pbf)-Gly-OH的合成方法如下：
称取Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OH（1g），用DEA/DCM=1/4的混合溶液（10ml）溶解，控温25℃搅拌反应，LC-MS监控反应完全，反应液经萃取干燥蒸干后经薄层层析硅胶柱纯化得到H-Arg(Pbf)-Gly-OH，收率为74.45%，纯度为98.97%。
H-Arg(Pbf)-Gly-OBzl的合成方法如下：
称取Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OH（1g ），无水碳酸钾（0.22g），用5ml DMF溶解，加入溴化苄（0.27g），LC-MS监控反应完全，反应液经萃取干燥蒸干后经薄层层析硅胶柱纯化得到Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OBzl(1.01g)，收率为89.62%，纯度为98.35%。
称取Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OBzl（1g），用DEA/DCM=1/4的混合溶液（10ml）溶解，控温25℃搅拌反应，LC-MS监控反应完全，反应液经萃取干燥蒸干后经薄层层析硅胶柱纯化得到H-Arg(Pbf)-Gly-OBzl，收率为80.47%，纯度为98.69%。
H-Arg(Pbf)-Gly-OMe的合成方法如下：
称取Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OH（1g），用DMF(10ml)溶解，加入甲醇（0.05g），冰浴条件下滴加DIC（0.20g），最后加入DMAP（0.02g），投料完毕后，控温25℃搅拌反应，LC-MS监控反应完全，反应液经萃取干燥蒸干后经薄层层析硅胶柱纯化得到Fmoc-Arg（Pbf）-Gly-OMe(0.88g)，收率为86.28%，纯度为98.09%
称取Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OMe（1g），用DEA/DCM=1/4的混合溶液（10ml）溶解，控温25℃搅拌反应，LC-MS监控反应完全，反应液经萃取干燥蒸干后经薄层层析硅胶柱纯化得到H-Arg(Pbf)-Gly-OMe，收率为78.12%，纯度为98.84%。
H-Arg(Pbf)-Gly-OEt的合成方法如下：
称取Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OH（1g），用DMF(10ml)溶解，加入乙醇（0.07g），冰浴条件下滴加DIC（0.20g），最后加入DMAP（0.02g），投料完毕后，控温25℃搅拌反应，LC-MS监控反应完全，反应液经萃取干燥蒸干后经薄层层析硅胶柱纯化得到Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OEt(0.79g)，收率为75.98%，纯度为99.53%
称取Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OEt（1g），用DEA/DCM=1/4的混合溶液（10ml）溶解，控温25℃搅拌反应，LC-MS监控反应完全，反应液经萃取干燥蒸干后经薄层层析硅胶柱纯化得到H-Arg(Pbf)-Gly-OEt，收率为84.63%，纯度为98.09%。
H-Arg(Pbf)-Gly-OtBu的合成方法如下：
称取Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OH（1g），用DMF(10ml)溶解，加入叔丁醇（0.12g），冰浴条件下滴加DIC（0.20g），最后加入DMAP（0.02g），投料完毕后，控温25℃搅拌反应，LC-MS监控反应完全，反应液经萃取干燥蒸干后经薄层层析硅胶柱纯化得到Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为88.92%，纯度为99.75%。
称取Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-OtBu（1g），用DEA/DCM=1/4的混合溶液（10ml）溶解，控温25℃搅拌反应，LC-MS监控反应完全，反应液经萃取干燥蒸干后经薄层层析硅胶柱纯化得到H-Arg(Pbf)-Gly- OtBu，收率为87.53%，纯度为98.51%。
采用液相合成法将上述索玛鲁肽中间体多肽片段按照索玛鲁肽的氨基酸序列进行偶联反应；具体合成步骤如下：
步骤1：称取 2.00g Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-OH，0.51g H-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，0.17g HoBt用20ml DMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.13g NMM，0.16g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液再次冰浴，滴加0.11g Dbu，搅拌反应30min，TLC板监控反应完毕，反应液中加入20ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到H-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为86.4%，TLC单点；
称取1.80g H-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，1.53g Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH，0.14g HoBt用20mlDMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.10g NMM，0.13g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液再次冰浴，滴加0.09g Dbu，搅拌反应30min，TLC板监控反应完毕，反应液中加入20ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到2.45g H-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为89.02%，TLC单点；
称取2.30g H-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，0.54g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH，0.12gHoBt用30mlDMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.09g NMM，0.11g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液中加入30ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为88.13%，TLC单点；
步骤3：将38.5ml TFA、2.2ml茴香硫醚、1.1ml EDT、1.1ml苯酚与1.1ml水混合均匀，配置44ml切割液；
步骤4：称取2.20g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu分批加入到-20℃现配44ml切割液中，反应控温40℃，2小时后，MS监控反应完毕，反应液缓慢加入到440ml -20℃乙醚中沉降，沉降完毕后将混合液离心洗涤3次，烘干得到H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-17-carboxyheptadecanoyl-OH)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH粗品，收率为80.57%，纯度为72.86%；经反向层析柱纯化得到索玛鲁肽纯品，收率为57.46%，纯度为99.31%。测定制得的索玛鲁肽的质谱图如图1所示，高效液相图如图2所示。
实施例2：
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，与实施例1不同的是：
首先固相合成法合成出索玛鲁肽中间体多肽片段分别为：
（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH；
（2）Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)- Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH；
（3）Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val -OH；
（4）H-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-R（R=Bzl/Me/Et/tBu/OH）；
其中，索玛鲁肽中间体多肽片段除了氨基酸序列不同，其具体合成步骤与实施例1相同。
采用液相合成法将上述索玛鲁肽中间体多肽片段按照索玛鲁肽的氨基酸序列进行偶联反应；具体合成步骤如下：
步骤1：称取 2.00g Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-OH，1.11g H-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，0.20g HoBt用20ml DMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.15g NMM，0.19g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液再次冰浴，滴加0.13g Dbu，搅拌反应30min，TLC板监控反应完毕，反应液中加入20ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到H-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为70.64%，TLC单点；
称取1.80g H-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，1.53g Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH，0.14g HoBt用20mlDMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.10g NMM，0.13g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液再次冰浴，滴加0.09g Dbu，搅拌反应30min，TLC板监控反应完毕，反应液中加入20ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到H-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为80.49%，TLC单点；
称取2.00 g H-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，0.47g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH，0.10gHoBt用30mlDMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.08g NMM，0.10g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液中加入30ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为76.23%，TLC单点；
步骤3：将26.25ml TFA、1.5ml茴香硫醚、0.75ml EDT、0.75ml苯酚与0.75ml水混合均匀，配置30ml切割液；
步骤4：称取1.50g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu分批加入到-20℃现配30ml切割液中，反应控温40℃，2小时后，MS监控反应完毕，反应液缓慢加入到300ml -20℃的乙醚中沉降，沉降完毕后将混合液离心洗涤3次，烘干得到H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-17-carboxyheptadecanoyl-OH)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH粗品，收率为73.07%，纯度为78.24%；经反向层析柱纯化得到索玛鲁肽纯品，收率为60.97%，纯度为99.53%。
实施例3：
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，与实施例1不同的是：
首先固相合成法合成出索玛鲁肽中间体多肽片段分别为：
（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH；
（2）Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu) -Ser(tBu)-Tyr(tBu)- Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH；
（3）Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH；
（4）H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-R（R=Bzl/Me/Et/tBu/OH）；
其中，索玛鲁肽中间体多肽片段除了氨基酸序列不同，其具体合成步骤与实施例1相同。
采用液相合成法将上述索玛鲁肽中间体多肽片段按照索玛鲁肽的氨基酸序列进行偶联反应；具体合成步骤如下：
步骤1：称取 2.00g Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH，2.91g H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，0.29g HoBt用20mlDMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.21g NMM，0.27g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液再次冰浴，滴加0.19g Dbu，搅拌反应30min，TLC板监控反应完毕，反应液中加入20ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到H-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为70.79%，TLC单点；
步骤2：称取2.50g H-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，2.12g Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH，0.19g HoBt用20mlDMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.14g NMM，0.18g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液再次冰浴，滴加0.13g Dbu，搅拌反应30min，TLC板监控反应完毕，反应液中加入20ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到H-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率62.49%，TLC单点
称取2.00 g H-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，0.47g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH，0.10gHoBt用30mlDMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.08g NMM，0.10g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液中加入30ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率79.70%，TLC单点
步骤3：将26.25ml TFA、1.5ml茴香硫醚、0.75ml EDT、0.75ml苯酚与0.75ml水混合均匀，配置30ml切割液；
步骤4：称取1.50g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu分批加入到-20℃现配30ml切割液中，反应控温40℃，2小时后，MS监控反应完毕，反应液缓慢加入到300ml -20℃乙醚中沉降，沉降完毕后将混合液离心洗涤3次，烘干得到H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-17-carboxyheptadecanoyl-OH)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH粗品，收率为84.80%，纯度为71.64%
将0.80g H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-17-carboxyheptadecanoyl-OH)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH粗品经反向层析柱纯化得到索玛鲁肽纯品，收率为50.60%，纯度为99.37%。
实施例4：
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，与实施例1不同的是：
首先固相合成法合成出索玛鲁肽中间体多肽片段分别为：
（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu) -OH；
（2）Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH；
（3）H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-R（R=Bzl/Me/Et/tBu/OH）；
其中，索玛鲁肽中间体多肽片段除了氨基酸序列不同，其具体合成步骤与实施例1相同。
采用液相合成法将上述索玛鲁肽中间体多肽片段按照索玛鲁肽的氨基酸序列进行偶联反应；具体合成步骤如下：
步骤1：称取 2.00g Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH，2.11g H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，0.21gHoBt用20ml DMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.15g NMM，0.19g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液再次冰浴，滴加0.14g Dbu，搅拌反应30min，TLC板监控反应完毕，反应液中加入20ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到H-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为85.02%，TLC单点
步骤2：称取2.50 g H-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，1.64g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-OH ，0.16g HoBt用30ml DMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.12g NMM，0.15g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液中加入30ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为74.77%，TLC单点；
步骤3：将43.75ml TFA、2.5ml茴香硫醚、1.25ml EDT、1.25ml苯酚与1.25ml水混合均匀，配置50ml切割液；
步骤4：称取2.50g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu分批加入到-20℃现配50ml切割液中，反应控温40℃，2小时后，MS监控反应完毕，反应液缓慢加入到500ml -20℃乙醚中沉降，沉降完毕后将混合液离心洗涤3次，烘干得到H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-17-carboxyheptadecanoyl-OH)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH粗品，收率为74.80%，纯度为77.95%；经反向层析柱纯化得到索玛鲁肽纯品，收率为60.67%，纯度为99.72%。
实施例5：
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，与实施例1不同的是：
首先固相合成法合成出索玛鲁肽中间体多肽片段分别为：
（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-OH；
（2）Fmoc-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH；
（3）H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-R（R=Bzl/Me/Et/tBu/OH）；
其中，索玛鲁肽中间体多肽片段除了氨基酸序列不同，其具体合成步骤与实施例1相同。
采用液相合成法将上述索玛鲁肽中间体多肽片段按照索玛鲁肽的氨基酸序列进行偶联反应；具体合成步骤如下：
步骤1：称取2.00g Fmoc-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH，1.82g H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，0.18g HoBt用20ml DMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.13g NMM，0.17g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液再次冰浴，滴加0.12g Dbu，搅拌反应30min，TLC板监控反应完毕，反应液中加入20ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到2.43g H-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率79.53%，TLC单点；
步骤2：称取2.00g
H-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，0.93g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-OH ，0.12g HoBt用30ml DMF溶解，冰浴条件下缓慢加入0.09g NMM，0.11g DIC，投料结束后，继续冰浴搅拌10min，然后将反应液控温25℃反应3小时，TLC板监控反应完毕，反应液中加入30ml水，反应液析出固体，将其过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干得到Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu，收率为83.12%，TLC单点；
步骤3：将35ml TFA+2ml茴香硫醚+1ml EDT+1ml苯酚+1ml水混合均匀，配置40ml切割液；
步骤4：称取2.00 g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu分批加入到-20℃现配40ml切割液中，反应控温40℃，2小时后，MS监控反应完毕，反应液缓慢加入到400ml -20℃乙醚中沉降，沉降完毕后将混合液离心洗涤3次，烘干得到H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-17-carboxyheptadecanoyl-OH)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH粗品，收率为87.96%，纯度为68.59%；经反向层析柱纯化得到索玛鲁肽纯品，收率为57.94%，纯度为99.62%。
实施例6：
本发明的另一实施方案中，对固相合成法合成索玛鲁肽中间体多肽片段的技术方案作进一步改进，将氨基酸偶联所用的偶联剂HOBt与咪唑-2-甲醇作为偶联剂复合物复配使用，作为氨基酸中的羧基与氨基酸中的氨基的偶联剂，进一步提高了多肽片段的收率。
其中，偶联剂HOBt与咪唑-2-甲醇的摩尔比为1：0.2~0.4。
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，与实施例1不同的是：
采用固相合成法合成出索玛鲁肽中间体多肽片段Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH的方法如下：
根据现有技术中已知的描述的通用方案：将CTC树脂（6.3g，6.25mmol）置于125mL的固相合成反应器中，加入氨基酸Fmoc-Gly-OH(3.71g，12.5mmol)，加入二氯甲烷（DCM）60mL，在加入DIEA(4.35mL)，25℃条件下反应3小时，加入甲醇6.25mL，反应5分钟。过滤，将树脂用二氯甲烷（DCM）60mL洗涤2次，甲醇60mL洗涤2次，DMF 60mL洗涤2次。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Glu(OtBu)-OH（6.38g，15mmol），偶联剂复合物（15mmol，其中HOBt与咪唑-2-甲醇的摩尔比为1：0.2）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Fmoc-Aib-OH（4.88g，15mmol），偶联剂复合物（15mmol，其中HOBt与咪唑-2-甲醇的摩尔比为1：0.2）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL。洗涤完成后，进行下一步反应。
加入20%Pip/DMF溶液65mL，搅拌反应30min，抽滤，除去脱保护液，然后用DMF溶液65mL洗涤6次，抽干待用。
取Boc-His(Trt)-OH（7.47g，15mmol），偶联剂复合物（15mmol，其中HOBt与咪唑-2-甲醇的摩尔比为1：0.2）于100mL烧杯中，降温至5℃，加入DMF溶液25mL，DIC（2.3mL，15mmol）静置反应15分钟，并将100mL烧杯中溶液加入到125mL固相合成反应器中，搅拌反应1.5小时，反应完成。树脂用DMF溶液洗涤三次，每次65mL，然后用甲醇65mL洗涤2次，DCM溶液65mL洗涤2次，甲醇65mL洗涤2次,真空干燥，得到Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly--CTC-树脂的肽树脂；
将上述肽树脂用1%的TFA/DCM溶液200mL，30℃条件下搅拌反应30分钟，过滤，除去树脂，得到滤液。滤液拉干得到全保护多肽Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly -OH，收率为64.7%，纯度为92.5%。
实施例7：
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，与实施例6不同的是：偶联剂复合物中HOBt与咪唑-2-甲醇的摩尔比为1：0.4；得到全保护多肽Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly -OH，收率为66.3%，纯度为92.1%。
实施例8：
本发明的又一实施方案中，对索玛鲁肽中间体多肽片段液相合成法合成索玛鲁肽的技术方案的优化步骤，还包括：在步骤3的切割液中加入2-甲基乙酰乙酸乙酯，其加入的体积为切割液总体积的4-7%，将得到的索玛鲁肽的全保护肽置于切割液中进行切割，进一步提高索玛鲁肽的收率。
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，与实施例1不同的是：
采用液相合成法制得索玛鲁肽纯品的步骤3与步骤4如下：
步骤3：38.5ml TFA、2.2ml茴香硫醚、1.1ml EDT、1.1ml苯酚、1.8ml 2-甲基乙酰乙酸乙酯与1.1ml水混合均匀，配置45.8ml切割液；
步骤4：称取2.20g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu分批加入到-20℃现配45.8ml切割液中，反应控温40℃，2小时后，MS监控反应完毕，反应液缓慢加入到440ml -20℃乙醚中沉降，沉降完毕后将混合液离心洗涤3次，烘干得到H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-17-carboxyheptadecanoyl-OH)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH粗品，收率为89.28%，纯度为74.71%；经反向层析柱纯化得到索玛鲁肽纯品，收率为62.59%，纯度为99.35%。
实施例9：
一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，与实施例8不同的是：采用液相合成法制得索玛鲁肽纯品的步骤3与步骤4如下：
步骤3：38.5ml TFA、2.2ml茴香硫醚、1.1ml EDT、1.1ml苯酚、2.2ml 2-甲基乙酰乙酸乙酯与1.1ml水混合均匀，配置46.2ml切割液；
步骤4：称取2.20g Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-OtBu分批加入到-20℃现配46.2ml切割液中，反应控温40℃，2小时后，MS监控反应完毕，反应液缓慢加入到440ml -20℃乙醚中沉降，沉降完毕后将混合液离心洗涤3次，烘干得到H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-17-carboxyheptadecanoyl-OH)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH粗品，收率为90.16%，纯度为74.86%；经反向层析柱纯化得到索玛鲁肽纯品，收率为63.84%，纯度为99.39%。
对比例1：
根据公开号CN 106749613 A的方法制得索玛鲁肽，收率为38.7%，纯度为99.1%。
实验结果说明：
图3为索玛鲁肽的收率；由图3可以看出，本发明采用固相合成法合成特定的索玛鲁肽中间体多肽片段，再将多个索玛鲁肽中间体多肽片段采用液相合成法按照索玛鲁肽的氨基酸序列合成索玛鲁肽，能够进一步提高索玛鲁肽的收率和纯度。
另外，本发明采用固相合成法合成索玛鲁肽中间体多肽片段的过程中，将氨基酸偶联所用的偶联剂HOBt与咪唑-2-甲醇作为偶联剂复合物复配使用，作为氨基酸中的羧基与氨基酸中的氨基的偶联剂，进一步提高了多肽片段的收率。
除此之外，本发明采用液相合成法合成索玛鲁肽的过程中，在步骤3的切割液中加入2-甲基乙酰乙酸乙酯，其加入的体积为切割液总体积的4-7%，将得到的索玛鲁肽的全保护肽置于切割液中进行切割，进一步提高索玛鲁肽的收率。
在不脱离本发明的范围和精神的条件下，本发明阐述各方面的各种修改和变化对本领域技术人员来说是显而易见的。尽管已经结合具体的优选的实施方案对本发明进行了描述，应当理解，所要求的保护的本发明不应当过度受限于这些具体的实施方案。
Claims (11)
1.一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，采用固相合成方法与液相合成方法结合；将索玛鲁肽分成3~4个索玛鲁肽中间体多肽片段；
所述固相合成方法用于合成索玛鲁肽中间体多肽片段；所述液相合成方法用于将一个索玛鲁肽中间体多肽片段的羧基末端氨基酸与另一个索玛鲁肽中间体多肽片段的氨基末端氨基酸按照索玛鲁肽的氨基酸序列进行偶联反应；
索玛鲁肽中间体多肽片段为：（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH；（2）Fmoc-Thr(tBu)- Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH；（3）Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys（AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu）-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-OH；（4）H-Arg(Pbf)-Gly-R，R=Bzl/Me/Et/tBu/OH；或，
（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH；（2）Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu) -Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH；（3）Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA- AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-OH；（4）H-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-R，R=Bzl/Me/Et/tBu/OH；或，
（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH；（2）Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu) -Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-OH；（3）Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA -AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH；（4）H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc) -Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-R，R=Bzl/Me/Et/tBu/OH；或，
（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu) -OH；（2）Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu- OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH；（3）H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val- Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-R，R=Bzl/Me/Et/tBu/OH；或，
（1）Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-OH；（2）Fmoc-Asp(OtBu)- Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OtBu-17-carboxyheptadecanoyl-OtBu)-Glu(OtBu)-OH；（3）H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf) -Gly-Arg(Pbf)-Gly-R，R=Bzl/Me/Et/tBu/OH。
2.根据权利要求1所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述固相合成方法的步骤包括：
将树脂置于固相合成反应器中，加入带保护基团的氨基酸、溶剂和偶联剂，在室温下反应，加入溶剂再反应，过滤，用溶剂洗涤产物；然后加入脱保护试剂进行搅拌反应，抽滤，除去脱保护试剂，用溶剂洗涤，抽干；
将另一个带保护基团的氨基酸与偶联剂置于容器中，降温至2-8℃，加入溶剂静置反应，然后加入到固相合成反应器中进行搅拌反应，反应完成后，用溶剂洗涤产物；然后加入脱保护试剂进行搅拌反应，抽滤，除去脱保护试剂，溶剂洗涤，抽干；按照多肽片段序列重复上述步骤依次偶联氨基酸，得到肽树脂；
将所述肽树脂加入到裂解液中搅拌反应，过滤，除去树脂，得到滤液，滤液拉干得到索玛鲁肽中间体多肽片段。
3.根据权利要求2所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述固相合成方法中，偶联剂选自DIEA、HOBt、HOAt、DIC、HBTU和DIPCDI中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述偶联剂为偶联剂HOBt与咪唑-2-甲醇的偶联剂复合物，偶联剂HOBt与咪唑-2-甲醇的摩尔比为1:0.2~0.4。
5.根据权利要求2所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述溶剂选自二氯甲烷、甲醇、N,N-二甲基甲酰胺、无水乙醚、四氢呋喃和水中的至少一种。
6.根据权利要求2所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述固相合成方法中，裂解液选自Pip/DMF和TFE/DCM中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述液相合成方法的步骤包括：
步骤1：将两个索玛鲁肽中间体多肽片段和偶联剂加入到溶剂中溶解，在冰浴条件下加入NMM、偶联剂，在冰浴条件下继续搅拌反应，然后升温至室温进行反应，反应完毕后，再次进行冰浴反应，滴加强碱试剂搅拌反应，反应完毕后，加入水析出固体，过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干，得到产物1；
步骤2：将所述产物1、一个多肽片段和偶联剂加入到溶剂中溶解，在冰浴条件下加入NMM、偶联剂，在冰浴条件下继续搅拌反应，然后升温至室温进行反应，反应完毕后，再次进行冰浴反应，滴加强碱试剂搅拌反应，反应完毕后，加入水析出固体，过滤，滤饼洗涤后使用乙腈打浆烘干，得到产物2；重复上述步骤，直至制得索玛鲁肽的全保护肽；
步骤3：将TFA、茴香硫醚、EDT、苯酚和水混合均匀，配制得到切割液；
步骤4：将所述索玛鲁肽的全保护肽分批加入到所述切割液中，在35~45℃下反应2~3h，反应完毕后，将反应液加入到-30℃~-20℃的乙醚中沉降，离心，烘干，纯化，得到索玛鲁肽。
8.根据权利要求7所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述液相合成方法中，偶联剂选自DIEA、HOBt、HOAt、DIC、HBTU和DIPCDI中的至少一种。
9.根据权利要求7所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述切割液中，TFA、茴香硫醚、EDT、苯酚和水的体积比为35~45：1~3：0.5~1.5：0.5~1.5：0.5~1.5。
10.根据权利要求7所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述强碱试剂选自Dbu。
11.根据权利要求7所述的一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法，其特征是：所述液相合成方法中，带保护基团的索玛鲁肽序列与切割液的比例为1~3g：25~50mL。
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Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106749613A (zh) * | 2016-12-02 | 2017-05-31 | 江苏诺泰生物制药股份有限公司 | 一种索玛鲁肽的合成方法 |
| CN108034004A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-05-15 | 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 | 一种索玛鲁肽的合成方法 |
| CN109627317A (zh) * | 2019-02-01 | 2019-04-16 | 兰州大学 | 片段缩合制备索马鲁肽的方法 |
| WO2020190757A1 (en) * | 2019-03-15 | 2020-09-24 | Novetide Ltd. | Improved processes for the preparation of semaglutide |
| CN111732651A (zh) * | 2020-08-04 | 2020-10-02 | 苏州金顶生物有限公司 | 一种连续流固相反应制备索马鲁肽的方法 |
| CN112679602A (zh) * | 2019-10-18 | 2021-04-20 | 苏州特瑞药业有限公司 | 索马鲁肽的固相合成方法 |
| EP3819308A1 (en) * | 2019-11-07 | 2021-05-12 | Fresenius Kabi iPSUM S.r.l. | Process for the manufacture of derivatized amino acids |
| CN112912390A (zh) * | 2018-10-09 | 2021-06-04 | 费森尤斯卡比有限公司 | Glp-1类似物的制备方法 |
| CN114685645A (zh) * | 2020-12-30 | 2022-07-01 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种索玛鲁肽的合成方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20200317721A1 (en) * | 2017-10-04 | 2020-10-08 | Chemical & Biopharmaceutical Laboratories Of Patras S.A. | A process for preparing a glucagon-like peptide |
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-
2023
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Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106749613A (zh) * | 2016-12-02 | 2017-05-31 | 江苏诺泰生物制药股份有限公司 | 一种索玛鲁肽的合成方法 |
| CN108034004A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-05-15 | 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 | 一种索玛鲁肽的合成方法 |
| CN112912390A (zh) * | 2018-10-09 | 2021-06-04 | 费森尤斯卡比有限公司 | Glp-1类似物的制备方法 |
| CN109627317A (zh) * | 2019-02-01 | 2019-04-16 | 兰州大学 | 片段缩合制备索马鲁肽的方法 |
| WO2020190757A1 (en) * | 2019-03-15 | 2020-09-24 | Novetide Ltd. | Improved processes for the preparation of semaglutide |
| CN112679602A (zh) * | 2019-10-18 | 2021-04-20 | 苏州特瑞药业有限公司 | 索马鲁肽的固相合成方法 |
| EP3819308A1 (en) * | 2019-11-07 | 2021-05-12 | Fresenius Kabi iPSUM S.r.l. | Process for the manufacture of derivatized amino acids |
| CN111732651A (zh) * | 2020-08-04 | 2020-10-02 | 苏州金顶生物有限公司 | 一种连续流固相反应制备索马鲁肽的方法 |
| CN114685645A (zh) * | 2020-12-30 | 2022-07-01 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种索玛鲁肽的合成方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| "Total Synthesis of Semaglutide Based on a Soluble Hydrophobic-Support-Assisted Liquid-Phase Synthetic Method";Xingbang Liu等;《ACS Comb Sci》;第22卷;第821-825页 * |
| "索玛鲁肽的制备";东圆珍等;《中国医药工业杂志》;第49卷(第6期);第742-747页 * |
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