CN117106055A - 一种替尔泊肽的合成方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种替尔泊肽的合成方法,属于制药技术领域。本发明包括以下步骤:(1)Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽肽树脂,以氨基树脂为起始树脂,从C端到N端先合成主链,再脱除K20侧链保护基,然后依次偶联侧链各位点;(2)序列中K20位点使用物料Fmoc‑Lys(R1)‑OH(R1=Alloc or Dde)进行偶联;(3)序列中Tyr1和Aib2,Ile12和Aib13分别使用物料Boc‑Tyr(tBu)‑Aib‑OH和Fmoc‑Ile‑Aib‑OH进行偶联;Glu3和Gly4使用Fmoc‑Glu(OtBu)‑Gly‑OH进行偶联;Gly29和Gly30使用Fmoc‑Gly‑Gly‑OH进行偶联,避免该位点产生的工艺杂质;(4)采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到粗肽;(5)对粗肽进行HPLC纯化,转盐,浓缩,冻干,得到替尔泊肽精肽。本发明制得的替尔泊肽其HPLC纯度达99%以上,单个杂质低于0.1%。本方法操作简单,综合合成成本低,非常适合多肽原料药的工业化生产。
Description
【技术领域】
本发明属于制药技术领域,具体涉及一种替尔泊肽的合成方法。
【背景技术】
替尔泊肽(Tirzepatide)是一款葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)和胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体双重激动剂,其将2种促胰岛素的作用整合至一个单分子中,通过双重作用机制激活参与血糖控制的激素受体--GIP和GLP-1两种肠促胰素受体。它通过每周一次皮下注射给药,达到控制血糖目标。2023年5月,Tirzepatide作为“first-in-class”药物获得美国FDA批准上市,是近十年来推出的首个新一代糖尿病药物。
Michael O.Frederick等人在Organic Process Research&Development上发表的“kilogram-scale GMP Manufacture of Tirzepatide Using a Hybrid SPPS/LPPSApproach with Continuous Manufacturing”文中提到了一种固相和液相混合的合成方法。采用固相合成法先合成1~14,15~21,22~29,30~39四个片段。然后用液相合成的方法将片段30~39与22~29偶联成片段22~39;再将片段22~39与15~21以液相合成的方式偶联成片段15~39。最后将片段1~14以液相合成的形式与15~39偶联成替尔泊肽全保护粗品,切割得到替尔泊肽粗肽。该方法使用4个固相合成的肽片段,物料成本高,流程较多,且片段之间偶联时工艺控制难度较大,每个片段都需要纯化,工艺较繁琐。
专利CN201911063432.6中介绍了位点1~4使用了全保护肽片段Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-OH,K20位点使用了全保护肽片段Fmoc-Lys((AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu))-OH;这两个肽片段价格昂贵,工业化程度低,不易于放大生产。
专利CN202011642239.0中介绍了位点1~2使用了全保护肽片段Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH,位点K20使用了全保护肽片段Fmoc-Lys((AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu))-OH;同样存在专利CN201911063432.6中的缺点。
专利CN202110359421.3中介绍了使用多个含有Pro的肽片段进行偶联,虽然解决了缺失Pro产生的杂质问题,但该类片段使用固相合成,制备过程较多,成本高,且每一个片段都需要纯化,杂质控制难度较大,工业化程度低;专利CN202110359422.8中在位点22~26处使用了五肽片段,和专利CN202110359495.7中位点2~6使用了五肽片段,同样存在上述缺点;
专利CN202211588132.1在位点36~38、29~30、12~13、5~6、1~4均使用了肽片段,K20使用了五肽全保护片段,该物料成本较高,制备难度大,工业化程度低。
【发明内容】
针对上述背景技术存在的原料药的生产成本较高,杂质多,纯化难度大,工艺复杂,不利于工业化生产等问题,本发明提出一种替尔泊肽的合成方法,工艺简单易于控制,成本低,收率高,杂质易于控制,工业化程度高,易于放大生产。
为此,本发明采用以下技术方案:一种替尔泊肽的合成方法,包括以下步骤:
步骤一,通过Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽主链肽树脂;
Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(R1)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin(R1=Alloc or Dde);序列中K20位点使用物料Fmoc-Lys(R1)-OH(R1=Alloc or Dde)进行偶联;序列中Tyr1和Aib2,Ile12和Aib13分别使用物料Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH和Fmoc-Ile-Aib-OH进行偶联,序列中Glu3和Gly4使用Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-OH进行偶联,序列中Gly29和Gly30使用Fmoc-Gly-Gly-OH进行偶联。
步骤二,通过脱除K20位点侧链保护基R1后再依次偶联侧链各位点,得Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin。
步骤三,采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到替尔泊肽粗肽。
步骤四,对粗肽进行HPLC纯化,转盐,浓缩,冻干,得到替尔泊肽精肽。
上述一种替尔泊肽的合成方法,其特征在于步骤一中所述的步骤为:通过Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽主链肽树脂指的是以氨基树脂为起始树脂,按照Fmoc/tBu固相法,依次连接Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Ala-OH,Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Gly-Gly-OH,Fmoc-Ala-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Trp(Boc)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Val-OH,Fmoc-Phe-OH,Fmoc-Ala-OH,Fmoc-Lys(R1)-OH(R1=Alloc or Dde),Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ala-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Lys(Boc)-OH,Fmoc-Asp(OtBu)-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Ile-Aib-OH,Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Asp(OtBu)-OH,Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Thr(tBu)-OH,Fmoc-Phe-OH,Fmoc-Thr(tBu)-OH,Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-OH,Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH,得到替尔泊肽主链肽树脂。所述的氨基树脂取代度为0.2~0.7mmol/g,优选0.3~0.5mmol/g;所述的氨基树脂为Rink Amide MBHA Resin、Rink AmideAM Resin、Sieber Resin中的一种,优选Rink Amide AM Resin;所述的缩合试剂为DIC/HOBT,TBTU/DIEA,PyBOP/DIEA中的一种或几种的组合;反应溶剂为二氯甲烷,N,N-二甲基甲酰胺,N-甲基吡咯烷酮中的一种或几种的组合;反应温度为20~40℃,优选25~35℃。所述的Fmoc-保护氨基酸或保护氨基酸片段的用量为所投料树脂总摩尔数的2~6倍。
上述的一种替尔泊肽的合成方法,其特征在于步骤二中具体步骤为:R1选择Alloc作为保护基时,通过四三苯基膦钯/DCM的混合溶液进行脱除;R1选择Dde作为保护基时,通过2~3%水合肼/DMF溶液进行脱除,然后再根据肽序依次偶联Fmoc-AEEA-OH,Fmoc-AEEA-OH,Fmoc-Glu-OtBu,二十烷二酸单叔丁脂,得到替尔泊肽肽树脂。缩合试剂为DIC/HOBT,TBTU/DIEA,PyBOP/DIEA中的一种或几种的组合;反应溶剂为二氯甲烷,N,N-二甲基甲酰胺,N-甲基吡咯烷酮中的一种或几种的组合;反应温度为20~40℃,优选25~35℃。所述的Fmoc-保护氨基酸或二十烷二酸单叔丁酯的用量为所投料树脂总摩尔数的2~6倍。
已公开的发明专利中大多采用Lys五肽进行侧链的连接,Lys五肽物料成本很高,物料性状差,不利于取料,同时其生产工艺极其复杂,势必引入更多的外源性杂质,给成品的质量控制带来难度,因此其缺陷显而易见。本发明人在开发替尔泊肽的工艺过程中发现,先连接主链再脱除Lys的侧链保护基连接侧链是能够以很高的收率得到目标产物的。
上述的一种替尔泊肽的合成方法,其特征在于步骤三中具体步骤为:采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到替尔泊肽粗肽。TFA混合溶液为TFA与苯酚,水,乙二硫醇,三异丙基硅烷,苯甲硫醚,苯甲醚,二硫苏糖醇,3,6-二氧代-1、8-辛二硫醇等清除剂的组合,其中TFA的体积比不低于85%,各捕获剂的含量为2.5%~7.5%;酸裂解液用量为树脂重量的6~10ml/g,酸裂解时间为2~4h,酸裂解温度为20~30℃。
上述的一种替尔泊肽的合成方法,其特征在于步骤四中具体步骤为粗肽加水搅拌,用氨水调pH 9.0~9.5至完全溶解,溶液用0.45μm混合微孔滤膜过滤,采用高效液相色谱法进行纯化制备,收集替尔泊肽馏分;再采用高效液相色谱法进行换盐,收集换盐主峰并用分析液相检测纯度,合并换盐主峰溶液,减压浓缩,得到替尔泊肽醋酸水溶液,冷冻干燥得到替尔泊肽成品。
本发明可以达到以下有益效果:本发明方法制得的替尔泊肽其HPLC纯度达99%以上,单个杂质低于0.1%。本方法操作简单,综合合成成本低,非常适合多肽原料药的工业化生产。
【附图说明】
图1为本发明的合成流程示意图。
图2为替尔泊肽粗肽的HPLC图谱
图3为替尔泊肽粗肽的MS图谱
图4为替尔泊肽粗肽的HPLC图谱
图5为替尔泊肽粗肽的MS图谱
图6为替尔泊肽成品的HPLC图谱。
图7为替尔泊肽成品的MS图谱。
图8为替尔泊肽成品的HPLC图谱。
图9为替尔泊肽成品的MS图谱。
【具体实施方式】
下面结合附图对本发明的具体实施方式进行详细描述,所描述的实施例只是对本发明的说明和解释,并不构成对本发明的唯一限定。
在本发明具体实施方式中,申请文件中所用的英文缩写对应的中文含义见表1
表1
下面结合实例进一步阐述本发明。
替尔泊肽肽树脂:
Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)
-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin。
使用氨基树脂为起始树脂,通过激活和偶联反应,得到加载第一个位点的氨基酸树脂(Fmoc-Ser(tBu)-Resin),然后通过去Fmoc保护、保护氨基酸激活和偶联,依次与表2中所示的保护氨基酸偶联,制得替尔泊肽肽树脂。本实例所使用的保护氨基酸相对应的保护氨基酸或片段如下所示:
表2
实施例1替尔泊肽主链肽树脂的制备
取135mmol第1个保护氨基酸和135mmol HOBT,用适量DMF溶解并冷却至0~15℃;另取135mmol DIC,搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中,于0~15℃环境中搅拌反应10分钟,得到活化后的保护氨基酸溶液,备用。
取45mmol的氨基树脂(取代度0.40mmol/g),采用DMF溶液溶胀60分钟,使用20%Pip/DMF溶液去保护30min,洗涤过滤得到待反应的树脂。
将活化后的第1个保护氨基酸溶液加入到待反应的树脂中,于25~35℃条件下偶联反应120~300分钟,过滤洗涤,得含1个保护氨基酸的树脂。
采用上述同样方法,依次接入上述对应的第2~39个保护氨基酸或片段,其中K20位点使用物料Fmoc-Lys(Alloc)-OH进行偶联;得替尔泊肽主链肽树脂。
实例2替尔泊肽肽树脂制备
脱除K20(Alloc)位点侧链保护基后再依次偶联侧链各位点。脱除Alloc保护基时,使用四三苯基膦钯/DCM的混合溶液进行脱除;四三苯基膦钯用量为树脂摩尔量的0.1倍。再依次接入Fmoc-AEEA-OH,Fmoc-AEEA-OH,Fmoc-Glu-OtBu,二十烷二酸单叔丁酯,得替尔泊肽肽树脂。
实施例3替尔泊肽粗品的制备
取实施例2制得的替尔泊肽肽树脂,加入TFA混合溶液,混合溶液配比为TFA:EDT/Tis/苯酚/H2O=90:2.5:2.5:2.5:2.5,裂解试剂10ml/克树脂;20~30℃搅拌反应2~4小时,反应混合物使用砂芯漏斗过滤,收集滤液,树脂再用少量TFA洗涤3次,合并滤液后加入MTBE沉淀,再用MTBE洗沉淀3次,抽干得类白色粉末即为替尔泊肽粗品217.4g,粗品纯度为72.84%(图2),分子量为4813.50(图3)。
实施例4替尔泊肽精肽的制备
取实施例3制得的替尔泊肽粗品,加水搅拌,用氨水调pH 9.0~9.5至完全溶解,溶液用0.45μm混合微孔滤膜过滤;
采用高效液相色谱法进行纯化制备,收集替尔泊肽馏分;
采用高效液相色谱法进行换盐,收集换盐主峰并用分析液相检测纯度,合并换盐主峰溶液,减压浓缩,得到替尔泊肽醋酸水溶液,冷冻干燥,得替尔泊肽精肽108.80g,纯度为99.76%,最大单一杂质0.07%(图6),总收率为50.23%,分子量为4813.3(图7)。
实施例5替尔泊肽主链肽树脂的制备
取600mmol第1个保护氨基酸和600mmol HOBt,用适量DMF溶解并冷却至0~15℃;另取600mmol DIC,搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中,于0~15℃环境中搅拌反应30分钟,得到活化后的保护氨基酸溶液,备用。
取200mmol的氨基树脂(取代度为0.37mmol/g),采用DMF溶液溶胀60分钟,洗涤过滤得到待反应的树脂。
将活化后的第1个保护氨基酸溶液加入到待反应的树脂中,于25~35℃条件下偶联反应120~300分钟,过滤洗涤,得含1个保护氨基酸的树脂。
采用上述同样方法,依次接入上述对应的第2~39个保护氨基酸或片段,其中K20位点使用物料Fmoc-Lys(Dde)-OH进行偶联;得替尔泊肽主链肽树脂。
实例6替尔泊肽肽树脂制备
脱除K20(Dde)位点侧链保护基后再依次偶联侧链各位点。脱除Dde保护基时,使用2~3%水合肼/DMF溶液进行脱除,再依次接入Fmoc-AEEA-OH,Fmoc-AEEA-OH,Fmoc-Glu-OtBu,二十烷二酸单叔丁酯,得替尔泊肽肽树脂
实施例7替尔泊肽粗品的制备
取实施例6制得的替尔泊肽肽树脂,加入TFA混合溶液,混合溶液配比为TFA:EDT/Tis/苯酚/H2O=90:2.5:2.5:2.5:2.5,裂解试剂10ml/克树脂;20~30℃搅拌反应2~4小时,反应混合物使用砂芯漏斗过滤,收集滤液,树脂再用少量TFA洗涤3次,合并滤液后加入MTBE沉淀,再用MTBE洗沉淀3次,抽干得类白色粉末即为替尔泊肽粗品1020.1g,粗品纯度为71.55%(图4),分子量为4813.2(图5)。
实施例8替尔泊肽精肽的制备
取实施例7制得的替尔泊肽粗品,加水搅拌,用氨水调pH 9.0~9.5至完全溶解,溶液用0.45μm混合微孔滤膜过滤;
采用高效液相色谱法进行纯化制备,收集替尔泊肽馏分;
采用高效液相色谱法进行换盐,收集换盐主峰并用分析液相检测纯度,合并换盐主峰溶液,减压浓缩,得到替尔泊肽醋酸水溶液,冷冻干燥,得替尔泊肽精肽526.11g,纯度为99.91%,最大单一杂质0.06%(图8),总收率为54.65%,分子量为4813.2(图9)。
上述实施例表明,本发明提供的方法所得产品纯度大于99.0%,单一杂质均小于0.1%,提高了产品质量和总收率,工艺简单易于控制,工业化程度高,具有广泛的实用价值和应用前景。
Claims (5)
1.一种替尔泊肽的合成方法,其特征在于包括以下步骤:
步骤一,通过Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽主链肽树脂;
Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(R1)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin(R1=Alloc or Dde);序列中K20位点使用物料Fmoc-Lys(R1)-OH(R1=Alloc or Dde)进行偶联;序列中Tyr1和Aib2,Ile12和Aib13分别使用物料Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH和Fmoc-Ile-Aib-OH进行偶联,序列中Glu3和Gly4使用Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-OH进行偶联;序列中Gly29和Gly30使用Fmoc-Gly-Gly-OH进行偶联;
步骤二,通过脱除K20位点侧链保护基R1后再依次偶联侧链各位点,得到Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ile-Ala-Gln(Trt)-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-(OtBu)-Eicosanedioic acid-OtBu)-Ala-Phe-Val-Gln(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-Resin;
步骤三,采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到替尔泊肽粗肽;
步骤四,对粗肽进行HPLC纯化,转盐,浓缩,冻干,得到替尔泊肽精肽。
2.根据权利要求1所述的一种替尔泊肽的合成方法,其特征在于步骤一中所述的步骤为:通过Fmoc/tBu固相法合成替尔泊肽主链肽树脂指的是以氨基树脂为起始树脂,按照Fmoc/tBu固相法,依次连接Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Ala-OH,Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Gly-Gly-OH,Fmoc-Ala-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Trp(Boc)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Val-OH,Fmoc-Phe-OH,Fmoc-Ala-OH,Fmoc-Lys(R1)-OH(R1=Alloc orDde),Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ala-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Lys(Boc)-OH,Fmoc-Asp(OtBu)-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Ile-Aib-OH,Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Asp(OtBu)-OH,Fmoc-Ser(tBu)-OH,Fmoc-Thr(tBu)-OH,Fmoc-Phe-OH,Fmoc-Thr(tBu)-OH,Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-OH,Boc-Tyr(tBu)-Aib-OH,得到替尔泊肽主链肽树脂;所述的氨基树脂取代度为0.2~0.7mmol/g,优选0.3~0.5mmol/g,所述的氨基树脂为Rink Amide MBHAResin、Rink Amide AM Resin、Sieber Resin中的一种,优选Rink Amide AM Resin;所述的缩合试剂为DIC/HOBT,TBTU/DIEA,PyBOP/DIEA中的一种或几种的组合;反应溶剂为二氯甲烷,N,N-二甲基甲酰胺,N-甲基吡咯烷酮中的一种或几种的组合;反应温度为20~40℃,优选25~35℃;所述的Fmoc-保护氨基酸或保护短肽片段的用量为所投料树脂总摩尔数的2~6倍。
3.根据权利要求1所述的一种替尔泊肽的合成方法,其特征在于步骤二中具体步骤为:R1选择Alloc作为保护基时,通过四三苯基膦钯/DCM的混合溶液进行脱除;R1选择Dde作为保护基时,通过2~3%水合肼/DMF溶液进行脱除,然后再根据肽序依次偶联Fmoc-AEEA-OH,Fmoc-AEEA-OH,Fmoc-Glu-OtBu,二十烷二酸单叔丁脂,得到替尔泊肽肽树脂;缩合试剂为DIC/HOBT,TBTU/DIEA,PyBOP/DIEA中的一种或几种的组合;反应溶剂为二氯甲烷,N,N-二甲基甲酰胺,N-甲基吡咯烷酮中的一种或几种的组合;反应温度为20~40℃,优选25~35℃;所述的Fmoc-保护氨基酸或二十烷二酸单叔丁酯的用量为所投料树脂总摩尔数的2~6倍。
4.根据权利要求1所述的一种替尔泊肽的合成方法,其特征在于步骤三中具体步骤为:采用TFA混合溶液对肽树脂进行切割得到替尔泊肽粗肽;TFA混合溶液为TFA与苯酚,水,乙二硫醇,三异丙基硅烷,苯甲硫醚,苯甲醚,二硫苏糖醇,3,6-二氧代-1、8-辛二硫醇等清除剂的组合,其中TFA的体积比不低于85%,各捕获剂的含量为2.5%~7.5%;酸裂解液用量为树脂重量的6~10ml/g,酸裂解时间为2~4h,酸裂解温度为20~30℃。
5.根据权利要求1所述的一种替尔泊肽的合成方法,其特征在于步骤四中具体步骤为对粗肽进行纯化,转盐,浓缩,冻干,得到替尔泊肽精肽。
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN117736273A (zh) * | 2023-12-08 | 2024-03-22 | 广东省卓肽医药有限公司 | 一种替尔泊肽的纯化方法 |
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2023
- 2023-08-18 CN CN202311050210.7A patent/CN117106055A/zh active Pending
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CN117736273A (zh) * | 2023-12-08 | 2024-03-22 | 广东省卓肽医药有限公司 | 一种替尔泊肽的纯化方法 |
CN117736273B (zh) * | 2023-12-08 | 2024-05-07 | 广东省卓肽医药有限公司 | 一种替尔泊肽的纯化方法 |
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