CN111892650A - 一种利拉鲁肽固相合成方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种利拉鲁肽固相合成方法，属于多肽药物制备方法及纯化技术领域，该方法包括如下步骤：在活化剂系统的存在下，由王树脂为起始，通过固相合成法，按照利拉鲁肽主链肽的顺序一一合成，共31个氨基酸组成，序列为：His‑Ala‑Glu‑Gly‑Thr‑Phe‑Thr‑Ser‑Asp‑Val‑Ser‑Ser‑Tyr‑Leu‑Glu‑Gly‑Gln‑Ala‑Ala‑Lys‑Glu‑Phe‑Ile‑Ala‑Trp‑Leu‑Val‑Arg‑Gly‑Arg‑Gly。其中Lys侧链修饰，依次偶联Fmoc‑Glu‑OtBu、棕榈酰氯、羧基活化。本发明具有杂质少、易纯化、产品收率高、降低工作量及生产成本的优点。

Description

一种利拉鲁肽固相合成方法
技术领域
本发明属于多肽药物制备方法及纯化技术领域，具体是涉及一种利拉鲁肽固相合成方法。
背景技术
利拉鲁肽，英文名为Liraglutide，其肽序列为：H-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(Nε-(Nα-Palmitoyl)-Lγ-GLu)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH。
利拉鲁肽是胰高血糖素样肽受体激动剂，作为一种皮下注射制剂，能起到良好的降低血糖的作用。
但现有的利拉鲁肽主要是通过基因工程等生物学方法制备，生产成本高，技术难度大，研发周期长，不利于利拉鲁肽的工业化生产。而以往利拉鲁肽固相合成方法也存在步骤繁琐、废液多、成本高等缺点。
发明内容
本发明要解决的问题是提供一种杂质少、易纯化、产品收率高、降低工作量及生产成本的利拉鲁肽固相合成方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种利拉鲁肽固相合成方法，包括以下步骤：
步骤一，通过液相合成的方法制备赖氨酸三肽片段Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH；
步骤二，在活化剂环境的作用下，从王树脂为起始端，与Fmoc-Gly-OH偶联制备得到Fmoc-Gly-wang树脂；
步骤三，通过固相合成法，按照利拉鲁肽主链肽序依次偶联具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸，其中赖氨酸三肽片段采用Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH；
步骤四，裂解，纯化，冻干，得到利拉鲁肽。
在步骤一中，所述片段Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH的液相合成方法为：正十六烷酸、HOSu、DCC偶联得到Palmitoyl-OSu活化脂，然后和H-Glu-OtBu反应得到二肽片段Palmitoyl-Glu-OtBu；Palmitoyl-Glu-OtBu、HOSu、DCC偶联得到Palmitoyl-Glu(OSu)-OtBu活化脂，然后和Fmoc-Lys-OH反应得到赖氨酸三肽片段Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH。
在步骤二中，树脂固体载体采用王树脂，所述活化剂系统选自DIC、HOBt和DMF，所述Fmoc-Gly-Wang树脂为0.2～0.4mmol/g取代度。
在步骤三中，所述固相合成法包括以下步骤：
1)在活化剂环境的作用下，从王树脂为起始端，与Fmoc-Gly-OH偶联制备得到Fmoc-Gly-wang树脂；
2)采用由体积比为1：3的PIP和DMF组成的去保护液脱除Fmoc-Gly-树脂上的Fmoc保护基，得到H-Gly-树脂；
3)在偶联剂系统的存在下，H-Gly-树脂和Fmoc保护且侧链保护的精氨酸偶联得到Fmoc-Arg(pbf)-Gly-树脂；
4)重复上述步骤，按照利拉鲁肽主链肽序依次进行氨基酸的偶联，其中赖氨酸三肽片段采用Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH，偶联氨基酸顺序为：Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(BOC)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ala-OH、Boc-His(Boc)-OH。
在步骤四中，裂解剂的筛选：
Figure BDA0002570288020000021
在上述裂解剂中，最优的裂解剂为TFA：PhSMe：TES：EDT：H2O(90:1:2:2:5)即三氟乙酸：茴香硫醚：乙二硫醇：三乙基硅烷：水为90:1:2:2:5。
纯化工艺：将从树脂裂解下来的利拉鲁肽粗品经过溶剂(优选乙醚：乙腈＝2:1)反复洗涤，在进入制备液相纯化之前进行初步纯化，将含量由63％提升至85％以上。
可见，本发明在活化剂系统的存在下，由王树脂为起始；通过固相合成法，按照利拉鲁肽主链肽的顺序一一合成，共31个氨基酸组成，序列为：His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly，其中Lys侧链修饰，依次偶联Fmoc-Glu-OtBu、棕榈酰氯、羧基活化。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：在纯化工艺中，使用乙醚/乙腈混合溶剂，对利拉鲁肽粗品进行打浆纯化的工艺，有效的将粗品纯度从63％提高至85％，这一步骤大大缩短了后面利拉鲁肽制备纯化的周期，同时也降低了生产成本。
具体实施方式
下面结合实施例进一步叙述本发明：
实施例：本发明中涉及的试剂及原料如下：
王树脂、1-羟基苯并三唑(HOBt)、N,N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)、三氟乙酸(TFA)、N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)、苯甲硫醚、苯甲醚、N,N’-二甲基甲酰胺(DMF)、哌啶(PIP)、苯酚及茚三酮、Fmoc-氨基酸(Fmoc-His(Boc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Mtt)-OH、Fmoc-Lle-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、H-Glu-OtBu)。
(1)棕榈酰基苯并三唑的合成(R5)：将10mmol苯并三唑(R3)溶于20℃的100ml甲基叔丁醚中，加入11mmol三乙胺，全溶后冰浴冷却，缓慢滴入11mmol棕榈酰氯(R4)，滴毕撤去冰浴，自然升到室温继续搅拌2h。过滤，滤液于60℃减压蒸干，剩余白色固体中加入50ml丙酮，60℃水浴溶解，置4℃冰箱中结晶12h后过滤，滤饼用冷丙酮15ml*2洗涤，室温减压干燥，得白色固体R5。TLC[展开剂：石油醚：乙酸乙酯(2:1)]显示为单一斑点。
上述反应的化学方程式为：
Figure BDA0002570288020000041
(2)棕榈酰基-L-谷氨酸叔丁酯的合成(R6)：将12mmol H-Glu-OtBu溶于200ml DMF中，加入15mmol三乙胺，再加入10mmol R5，搅拌反应16h加入0.2mol/L 150ml盐酸，冰箱冷藏放置3h，过滤，滤饼用水100ml*3洗涤，35℃真空干燥箱减压干燥，得白色固体R6。TLC[展开剂：二氯甲烷：甲醇(10：1)]显示为单一斑点。
上述反应的化学方程式为：
Figure BDA0002570288020000042
(3)N-棕榈酰基-L-谷氨酸-5-琥珀酰亚胺酯叔丁酯的合成(R7)：将5mmol R6溶于300ml THF中，加入6mmol HOSu和6mmol DCC，全溶后磁力搅拌12h，反应结束后过滤，滤液于40℃减压蒸干，得白色固体R7粗品。TLC[展开剂：正己烷：乙酸乙酯(1:1)]显示为混合斑点。
上述反应的化学方程式为：
Figure BDA0002570288020000043
(4)N-棕榈酰基-L-谷氨酸-5-琥珀酰亚胺酯叔丁酯的纯化(R7)：将R7粗品在丙酮-正己烷(1:4)混合液中结晶，过滤，滤饼用正己烷15ml*3洗涤，室温减压干燥，得白色固体R7(收率92.03％)。TLC[展开剂：正己烷：乙酸乙酯(1:1)]显示为单一斑点。
(5)Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH的合成：称取36.74g 0.1mol Fmoc-Lys-OH和15.90g 0.15mol Na2CO3加入到100ml水和100ml THF的混合溶液中溶解，称取53.87g 0.1mol Palmitoyl-Glu(OSu)-OtBu加入到100mlTHF，溶解后滴加上述混合溶液中，室温下反应过夜，用10％稀盐酸调节PH到7，旋蒸除去THF，之后调节PH到2，得到大量白色沉淀，过滤，35℃真空干燥箱减压干燥，得到Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH，HPLC纯度为92.14％，收率87％。
(6)Fmoc-Gly-Wang树脂的合成：称取取代度为0.5mmol/g的王树脂10g，加入到固相合成管中，用DMF洗涤2次，用DMF溶胀树脂30分钟。称取10mmol Fmoc-Gly-OH和12.5mmolHOBt，用50ml DMF溶解，加入12.5mmol DIC活化3分钟后加入到上述固相合成管中，反应1h后采用茚三酮检测判断(如果树脂无色透明则反应完全)。反应结束后使用DMF反复冲洗树脂6次，得到Fmoc-Gly-Wang树脂，测定其取代度为0.32mmol/g。
(7)Fmoc-Gly-Wang树脂脱保护：取9.37g 3mmol Fmoc-GIy-Wang树脂，置于250ml的多肽合成反应器中，加入150ml DMF，混合后浸泡30min使树脂充分溶胀。加入脱保护试剂PIP 20ml，通入氮气充分混合45min；用DMF 100ml*9洗涤，取出少许树脂置0.5ml EP管中，加入茚三酮检测试剂20μl 5％茚三酮的无水乙醇溶液，80μl 80％苯酚的无水乙醇溶液，沸水浴加热5min。若树脂为紫红色，则Fmoc保护基脱除完全，进行下步偶联反应；若树脂为无色或浅黄色，则需要延长脱保护时间。
(8)肽链延长：向上述混合反应器中加入12mmol的Fmoc-Arg(Pbd)-OH和两种缩合试剂HOBt、DIC(各12mmol)，室温反应，以茚三酮试剂检测反应进程，若缩合完全，树脂则呈无色或浅黄色；若为紫红色则需要延长缩合时间或重复缩合。待缩合完全后，树脂用DMF100ml*6洗涤按(7)步骤进行Fmoc脱保护，脱保护完全且洗涤好的树脂按(8)步骤进行下一个氨基酸的缩合，如此循环，直至最后一个氨基酸的偶联完成。肽链合成结束后，用无水乙醇洗涤8次，然后用氮气吹干树脂。
重复上述脱除Fmoc保护和加入相应氨基酸偶联的步骤，按照利拉鲁肽序列，依次完成Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ala-OH、Boc-His(Boc)-OH的偶联。
(9)利拉鲁肽粗肽的制备与纯化
称取100g全保护的利拉鲁肽王树脂，加入到2L的三口圆底烧瓶中，按TFA：PhSMe：TES：EDT：H2O(90:1:2:2:5)的体积比配置裂解液1L，将裂解液加入上述树脂中，室温反应2小时，过滤，用少量TPA洗涤裂解后的树脂3次，合并滤液，浓缩，将浓缩后的液体加入到冰乙醚中沉淀1小时，离心，无水乙醚离心洗涤6次，真空干燥，得到利拉鲁肽粗肽34.13g，HPLC纯度63.26％，粗肽收率65％。
将利拉鲁肽粗肽30g用300ml乙醚和乙腈(2:1)溶液搅拌2h充分搅拌洗涤，抽滤，滤饼于35℃真空干燥箱减压干燥，得22.87g利拉鲁肽粗肽，HPLC纯度85.23％，粗肽收率67％。
(10)利拉鲁肽粗品的精制：称取22.87g利拉鲁肽粗品，加水搅拌，用氨水调pH8.5至完全溶解，溶液用0.45μm混合微孔滤膜过滤，纯化备用。采用高效液相色谱法进行纯化，纯化用色谱填料为10μm的反相C18，流动相系统为0.1％TFA/水溶液-0.1％TFA/乙腈溶液，77mm*250mm的色谱柱流速为90ml/min，采用梯度系统洗脱，循环进样纯化，取粗品溶液上样于色谱柱中，启动流动相洗脱，收集主峰蒸去乙腈后，得利拉鲁肽纯化中间体浓缩液。
取利拉鲁肽纯化中间体浓缩液，用0.45μm滤膜滤过备用，采用高效液相色谱法进行换盐，流动相系统为1％醋酸/水溶液-乙腈，纯化用色谱填料为10μm的反相C18，77mm*250mm的色谱柱流速为90ml/min(可根据不同规格的色谱柱，调整相应的流速)；采用梯度洗脱，循环上样方法，上样于色谱柱中，启动流动相洗脱，采集图谱，观测吸收度的变化，收集换盐主峰并用分析液相检测纯度，合并换盐主峰溶液，减压浓缩，得到利拉鲁肽醋酸水溶液，冷冻干燥，得利拉鲁肽纯品9.29g，总收率为41％。
以上对本发明的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本专利涵盖范围之内。

Claims (6)

1.一种利拉鲁肽固相合成方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一，通过液相合成的方法制备赖氨酸三肽片段Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH；
步骤二，在活化剂环境的作用下，从王树脂为起始端，与Fmoc-Gly-OH偶联制备得到Fmoc-Gly-wang树脂；
步骤三，通过固相合成法，按照利拉鲁肽主链肽序依次偶联具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸，其中赖氨酸三肽片段采用Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH；
步骤四，裂解，纯化，冻干，得到利拉鲁肽。
2.根据权利要求1所述的利拉鲁肽固相合成方法，其特征在于：在步骤一中，所述片段Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH的液相合成方法为：正十六烷酸、HOSu、DCC偶联得到Palmitoyl-OSu活化脂，然后和H-Glu-OtBu反应得到二肽片段Palmitoyl-Glu-OtBu；Palmitoyl-Glu-OtBu、HOSu和DCC偶联得到Palmitoyl-Glu(OSu)-OtBu活化脂，然后和Fmoc-Lys-OH反应得到赖氨酸三肽片段Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH。
3.根据权利要求1所述的利拉鲁肽固相合成方法，其特征在于：在步骤二中，树脂固体载体采用王树脂，所述活化剂系统选自DIC、HOBt和DMF，所述Fmoc-Gly-Wang树脂为0.2～0.4mmol/g取代度。
4.根据权利要求1所述的利拉鲁肽固相合成方法，其特征在于：在步骤三中，所述固相合成法包括以下步骤：
1)在活化剂环境的作用下，从王树脂为起始端，与Fmoc-Gly-OH偶联制备得到Fmoc-Gly-wang树脂；
2)采用由体积比为1：3的PIP和DMF组成的去保护液脱除Fmoc-Gly-树脂上的Fmoc保护基，得到H-Gly-树脂；
3)在偶联剂系统的存在下，H-Gly-树脂和Fmoc保护且侧链保护的精氨酸偶联得到Fmoc-Arg(pbf)-Gly-树脂；
4)重复上述步骤，按照利拉鲁肽主链肽序依次进行氨基酸的偶联，其中赖氨酸三肽片段采用Fmoc-Lys-(Glu(Nα-Palmitoyl)-OtBu)-OH。
5.根据权利要求1所述的利拉鲁肽固相合成方法，其特征在于：在步骤四中，裂解剂为TFA：PhSMe：TES：EDT：H2O＝90:1:2:2:5。
6.根据权利要求1所述的利拉鲁肽固相合成方法，其特征在于：在步骤四中，纯化是将从树脂裂解下来的利拉鲁肽粗品经过乙醚：乙腈＝2:1反复洗涤，在进入制备液相纯化之前进行初步纯化，将含量由63％提升至85％以上。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113265007A (zh) * 2021-06-10 2021-08-17 江南大学 一种治疗代谢疾病的融合蛋白及其制备方法和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101747426A (zh) * 2009-12-18 2010-06-23 深圳市翰宇药业有限公司 一种合成普兰林肽的方法
CN103980358A (zh) * 2014-01-03 2014-08-13 杭州诺泰制药技术有限公司 一种制备利拉鲁肽的方法
CN106699871A (zh) * 2016-12-27 2017-05-24 哈药集团技术中心 一种利拉鲁肽的制备方法
WO2017138855A1 (en) * 2016-02-11 2017-08-17 Polypeptide Laboratories Holding (Ppl) Ab Method for preparation of liraglutide using bal linker

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101747426A (zh) * 2009-12-18 2010-06-23 深圳市翰宇药业有限公司 一种合成普兰林肽的方法
CN103980358A (zh) * 2014-01-03 2014-08-13 杭州诺泰制药技术有限公司 一种制备利拉鲁肽的方法
WO2017138855A1 (en) * 2016-02-11 2017-08-17 Polypeptide Laboratories Holding (Ppl) Ab Method for preparation of liraglutide using bal linker
CN106699871A (zh) * 2016-12-27 2017-05-24 哈药集团技术中心 一种利拉鲁肽的制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DANIEL CARBAJO, ET AL.: "Pseudo-Wang Handle for the Preparation of Fully Protected Peptides. Synthesis of Liraglutide by Fragment Condensation", 《ORGANIC LETTERS》 *
阴新强等: "大规模固相合成肽类药物研究进展", 《中国现代医药杂志》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113265007A (zh) * 2021-06-10 2021-08-17 江南大学 一种治疗代谢疾病的融合蛋白及其制备方法和应用
CN113265007B (zh) * 2021-06-10 2022-02-15 江南大学 一种治疗代谢疾病的融合蛋白及其制备方法和应用

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