CN116671440B - 一种丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制 - Google Patents
一种丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116671440B CN116671440B CN202310733016.2A CN202310733016A CN116671440B CN 116671440 B CN116671440 B CN 116671440B CN 202310733016 A CN202310733016 A CN 202310733016A CN 116671440 B CN116671440 B CN 116671440B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture medium
- hypocotyl
- towel gourd
- induction
- seedlings
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title claims abstract description 28
- 235000003956 Luffa Nutrition 0.000 title claims abstract description 24
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 6
- 244000050983 Luffa operculata Species 0.000 title abstract 2
- 241000219122 Cucurbita Species 0.000 claims abstract description 32
- 235000009852 Cucurbita pepo Nutrition 0.000 claims abstract description 32
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 claims abstract description 29
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 25
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims abstract description 10
- 241000219138 Luffa Species 0.000 claims description 22
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 11
- 244000280244 Luffa acutangula Species 0.000 claims description 10
- 235000009814 Luffa aegyptiaca Nutrition 0.000 claims description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 9
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000012883 rooting culture medium Substances 0.000 claims description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000009466 transformation Effects 0.000 abstract description 5
- 238000011177 media preparation Methods 0.000 abstract description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 abstract description 2
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 abstract description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 11
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 11
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 5
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 2
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 2
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 2
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 2
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009194 climbing Effects 0.000 description 1
- 230000032459 dedifferentiation Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 238000012214 genetic breeding Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/002—Culture media for tissue culture
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
- A01G24/10—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing inorganic material
- A01G24/12—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing inorganic material containing soil minerals
- A01G24/15—Calcined rock, e.g. perlite, vermiculite or clay aggregates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
- A01G24/20—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material
- A01G24/28—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material containing peat, moss or sphagnum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G31/00—Soilless cultivation, e.g. hydroponics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明公开了一种丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制。属于植物组织培养和生物技术领域,具体步骤:1、无菌苗的制备;2、愈伤组织和不定芽的诱导;3、生根诱导;4、炼苗;5、移栽。本发明的特点是:1、本发明通过丝瓜下胚轴实现离体再生,只需要一种培养基配方不需要多次更换培养基配方即能实现离体再生;2、本发明以丝瓜下胚轴作为外植体,经诱导可获得大量不定芽,可不受季节限制获得再生植株,为丝瓜转基因提供技术支撑。本发明建立的丝瓜离体再生方法为丝瓜新品种创制、分子机理研究等提供技术保障,促进丝瓜产业发展;3、本发明主要解决丝瓜离体组织再生的问题,同时为丝瓜遗传转化的研究做铺垫。
Description
技术领域
本发明属于植物组织培养和生物技术领域,涉及了一种丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制;具体的是,涉及了一种高效丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制。
背景技术
丝瓜又名布瓜、天罗,一年生攀缘草本葫芦科丝瓜属作物,是我国普遍栽培的一种蔬菜;丝瓜具有丰富的营养价值,蛋白质、淀粉、钙、磷、铁以及各种维生素的含量都比较高,深受消费者的喜爱。随着科研人员对丝瓜的深入研究,丝瓜在遗传育种和分子生物学方面都有一定的进展;但分子育种方面进行缓慢,严重制约了丝瓜新品种的创制和推广,成为丝瓜推广和产业化进程的绊脚石。
由于东南亚之外地区丝瓜食用及栽培较少,丝瓜的研究不大重视,丝瓜组织培养研究的报道也较少;Nahar等(2010)及Singh等(2011)对丝瓜进行组织快繁,但再生植株获得率极低。Shrivastava等(2013)以丝瓜子叶为试材,在MS+1.5mg/LBAP培养基上进行诱导,仅获得愈伤组织。
国内研究者开展了比较多的研究,部分研究成功获得了再生植株;王慧莲(1999)用普通丝瓜子叶进行了离体培养,诱导出大量愈伤组织,形成丛芽后生根培养,成苗率高达98%;谭兆平等(2001)以有棱丝瓜‘绿旺‘的真叶、下胚轴、上胚轴及胚芽为外植体进行组织培养,经诱导形成愈伤组织并分化成苗;尽管国内有报道丝瓜能够通过愈伤组织再生成植株,但重复性差,不同研究的结果差异也较大。
随着分子生物学的发展,分子育种在培育新品种方面发挥着日益重要的作用;实现分子育种的关键是高效稳定的遗传转化体系。但丝瓜遗传转化困难,严重影响丝瓜育种的进展。其中制约遗传转化最关键的因素就是丝瓜的离体再生困难。
发明内容
发明目的:本发明的目的在于提供了一种丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制,。
技术方案:本发明所述的一种丝瓜下胚轴离体再生方法,其具体制备步骤如下:
步骤(1)、无菌苗的制备:采用次氯酸钠(V次氯酸钠:v无菌水=1:1)对丝瓜种子进行2次消毒,再用无菌水冲洗3次;
将丝瓜种子平铺到组培瓶中,每瓶平铺3粒;
步骤(2)、愈伤组织和不定芽的诱导:切取步骤(1)丝瓜发芽后5-7天的下胚轴(优选长度5mm左右)接种于愈伤诱导和不定芽诱导培养基;
其中,愈伤诱导培养基和不定芽诱导培养基均为MS+2.256-BAmg/L+0.1NAAmg/L、MS+1 6-BAmg/L+0.1mg/LNAA、MS+2.256-BAmg/L+0.2mg/LNAA、MS+1 6-BAmg/L+0.2mg/LNAA、MS+2.256-BAmg/L+0NAAmg/L、MS+1 6-BAmg/L+0mg/L NAA;
将其放在12h光照和12h黑暗条件下培养6-7周,下胚轴外植体即可产生不定芽;
其中,最优组合为MS+2.25 6-BAmg/L+0.1NAAmg/L,不定芽发生率为82.3%;
步骤(3)、生根诱导:取步骤(2)单个不定芽放入生根培养基,于12h光照12h黑暗下培养7d左右,生根诱导率为98.3%;
其中,生根培养基为MS基本培养基,
步骤(4)、炼苗:挑选步骤(3)中已经生根且长势旺盛的瓶苗进行炼苗;
所述炼苗方法为:将瓶盖打开2-3d置于室温(常规在25摄氏度左右)、自然光下培养;
将瓶苗掏出清洗干净根部的培养基;
步骤(5)、移栽:将炼苗后的再生苗进行移栽,移栽基质配比草炭:蛭石:珍珠岩=3:1:1;
将再生苗移栽在种植盆里,2周后统计成活率,成活率在93.4%以上。
有益效果:本发明与现有技术相比,本发明的特点是:1、本发明通过丝瓜下胚轴实现离体再生,只需要一种培养基配方不需要多次更换培养基配方即能实现离体再生;2、本发明以丝瓜下胚轴作为外植体,经诱导可获得大量不定芽,可不受季节限制获得再生植株,为丝瓜转基因提供技术支撑。本发明建立的丝瓜离体再生方法为丝瓜新品种创制、分子机理研究等提供技术保障,促进丝瓜产业发展;3、本发明主要解决丝瓜离体组织再生的问题,同时为丝瓜遗传转化的研究做铺垫。
附图说明
图1是本发明的操作流程图。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明的技术方案,下面结合附图对本发明的技术方案做进一步的详细说明;
实施例一:
(1)、取材:选取饱满的‘肉丝瓜’丝瓜种子;
(2)、消毒:种子用次氯酸钠(v次氯酸钠:v无菌水=1:1)2次消毒后,用无菌水冲洗3次,接种至1/4MS培养基中,培养14d后获得无菌苗,此时子叶展开,真叶显露(一般发芽后5-7d即可达到这个状态);
其中培养基含有30g/L蔗糖、7g/L琼脂、pH为5.8;培养条件20-25℃,光照强度2000-3000lx,光照12h,黑暗12h;
(3)、愈伤组织和不定芽的诱导:选(2)中的无菌苗用解剖刀切5mm左右下胚轴,接种于愈伤诱导和不定芽诱导培养基上;愈伤诱导和不定芽诱导培养基均是以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA(2.25、1.0mg/L、0mg/L)与NAA(0.1、0.2、0mg/L);
两种常用植物激素进行不同浓度的组合,旨在获得高效诱导愈伤不定芽的激素配比(表1);2周后统计愈伤率;
其中培养基所含的蔗糖为30g/L,所含琼脂粉为7g/L,调节pH为5.8;培养条件20-25℃,光照强度2000-3000lx,12h光照、12h黑暗,每个处理重复3次,每个重复30瓶;
结果表明,不同浓度的NAA和6-BA激素组合均能诱导下胚轴产生愈伤组织;当6-BA浓度一定时随着NAA浓度升高,愈伤诱导率出现逐渐上升的趋势,最适的NAA浓度为0.1mg/L;当NAA浓度一定时,随着6-BA浓度的升高,愈伤组织呈现上升的趋势;最佳6-BA浓度为2.25mg/L;尽管愈伤组织诱导率均呈上升状态,但激素浓度配比的不同对愈伤生长状态不同;MS+2.25mg/L 6-BA+0.1NAA下胚轴愈伤组织致密,愈伤组织生长状态最佳。
表1不同激素组合对诱导下胚轴愈伤组织及不定芽出芽率的影响
备注:愈伤率和愈伤组织质地在接种15d统计;不定芽诱导在接种后45d统计
从表1中,发现不同激素浓度配比对愈伤组织质地的影响很大,愈伤组织质地状态对不定芽的出芽率有一定的影响,只有愈伤组织质地紧密,出芽率才能提高;疏松的愈伤组织没有出不定芽,可能是激素的配比不适宜影响细胞的脱分化进而影响不定芽的发生。
表2激素对不定芽生根的影响
从表2可知,激素对不定芽生根的影响仅体现在生根时间的长短,加入激素后能够提早发根,不加入激素丝瓜不定芽的生根率也很高,说明激素有无丝瓜不定芽都能生根。
将已经生根的丝瓜苗进行炼苗,将组培瓶丝瓜苗放入室温、自然光照下,开盖2-3d;将丝瓜根部培养基清洗干净,定植于种植盆内(草炭:蛭石:珍珠岩=3:1:1);在25℃左右、光照强度2000-3000lx、12h光照、12h黑暗温室内生长良好,长成与自然生长的小苗一致的丝瓜再生苗。
以上仅是本发明的优选实施方式,本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例,凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰,应视为本发明的保护范围。
Claims (4)
1.一种丝瓜下胚轴离体再生方法,其特征在于,其具体制备步骤如下:
步骤(1)、无菌苗的制备:采用次氯酸钠溶液对丝瓜种子进行2次消毒,再用无菌水冲洗3次;
将丝瓜种子平铺到组培瓶中,每瓶平铺3粒;
其中,在所述次氯酸钠溶液中,次氯酸钠与无菌水的体积比是:1:1;
步骤(2)、愈伤组织和不定芽的诱导:切取步骤(1)中丝瓜发芽后5-7天的下胚轴接种于愈伤诱导和不定芽诱导培养基,将其放在12h光照和12h黑暗条件下培养6-7周,下胚轴外植体即可产生不定芽;
其中,所述下胚轴的长度为5mm;
所述愈伤诱导和不定芽诱导培养基为MS+2.25mg/L 6-BA +0.1mg/L NAA或MS+2.25mg/ L6-BA +0.2mg/L NAA;
步骤(3)、生根诱导:取步骤(2)中单个不定芽放入生根培养基中,于12h光照12h黑暗下培养7d;
其中,所述生根培养基为MS基本培养基;
步骤(4)、炼苗;
步骤(5)、移栽。
2.根据权利要求1所述的一种丝瓜下胚轴离体再生方法,其特征在于,
在步骤(4)中,所述炼苗具体是:挑选步骤(3)中已生根且长势旺盛的瓶苗进行炼苗。
3.根据权利要求2所述的一种丝瓜下胚轴离体再生方法,其特征在于,
所述炼苗的方法为:将瓶盖打开2-3d置于室温、自然光下培养;
再将瓶苗掏出清洗干净根部的培养基。
4.根据权利要求1所述的一种丝瓜下胚轴离体再生方法,其特征在于,
在步骤(5)中,所述移栽具体是:将炼苗后的再生苗进行移栽;
将再生苗移栽在种植盆里。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310733016.2A CN116671440B (zh) | 2023-06-20 | 2023-06-20 | 一种丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310733016.2A CN116671440B (zh) | 2023-06-20 | 2023-06-20 | 一种丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN116671440A CN116671440A (zh) | 2023-09-01 |
CN116671440B true CN116671440B (zh) | 2024-05-03 |
Family
ID=87790730
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202310733016.2A Active CN116671440B (zh) | 2023-06-20 | 2023-06-20 | 一种丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN116671440B (zh) |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002062130A2 (en) * | 2001-02-06 | 2002-08-15 | National Agricultural Research Foundation (N.Ag.Re.F.) | Genetic resistance of cucumber (cucumis sativus) against the fungal pathogenfusarium oxysporum f.sp.radicis-cucumerinum |
CN102274272A (zh) * | 1998-05-19 | 2011-12-14 | 研究发展基金会 | 三萜组合物和它们的使用方法 |
CN103734021A (zh) * | 2014-01-28 | 2014-04-23 | 云南省林业技术推广总站 | 一种旱冬瓜腋芽外植体采集与诱导方法 |
CN105052710A (zh) * | 2015-09-22 | 2015-11-18 | 江苏农林职业技术学院 | 一种丝瓜育苗营养基质 |
CN108848989A (zh) * | 2018-07-16 | 2018-11-23 | 贵州省果树科学研究所 | 一种全雌苦瓜的育苗方法 |
CN113016610A (zh) * | 2021-02-26 | 2021-06-25 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 一种藜麦下胚轴离体再生方法 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018069392A1 (en) * | 2016-10-11 | 2018-04-19 | Vib Vzw | Means and methods for improved regeneration |
-
2023
- 2023-06-20 CN CN202310733016.2A patent/CN116671440B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102274272A (zh) * | 1998-05-19 | 2011-12-14 | 研究发展基金会 | 三萜组合物和它们的使用方法 |
WO2002062130A2 (en) * | 2001-02-06 | 2002-08-15 | National Agricultural Research Foundation (N.Ag.Re.F.) | Genetic resistance of cucumber (cucumis sativus) against the fungal pathogenfusarium oxysporum f.sp.radicis-cucumerinum |
CN103734021A (zh) * | 2014-01-28 | 2014-04-23 | 云南省林业技术推广总站 | 一种旱冬瓜腋芽外植体采集与诱导方法 |
CN105052710A (zh) * | 2015-09-22 | 2015-11-18 | 江苏农林职业技术学院 | 一种丝瓜育苗营养基质 |
CN108848989A (zh) * | 2018-07-16 | 2018-11-23 | 贵州省果树科学研究所 | 一种全雌苦瓜的育苗方法 |
CN113016610A (zh) * | 2021-02-26 | 2021-06-25 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 一种藜麦下胚轴离体再生方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN116671440A (zh) | 2023-09-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101889547B (zh) | 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法 | |
CN104885948B (zh) | 一种油茶子叶节直接再生植株的方法 | |
CN108770695B (zh) | 一种红心火龙果离体组培快速成苗的方法 | |
CN100429306C (zh) | 索尔邦百合组培培养基及其快速繁殖方法 | |
CN102144543A (zh) | 一项铁线莲阿拉贝拉组织培养快繁技术 | |
CN106538382B (zh) | 一种以幼穗为外植体建立假俭草高效再生体系的方法 | |
CN104737912A (zh) | 一种非洲菊组培快繁培养基及其培育方法 | |
CN108243959B (zh) | 一种以黄粱木茎段为外植体的高效再生方法 | |
CN108064699B (zh) | 一种葛根植物的组织离体培养繁殖方法 | |
CN1631109A (zh) | 秋石斛兰优质种苗组织培养快速繁殖方法 | |
CN115885855B (zh) | 一种以紫魁茶树下胚轴为外植体建立再生体系的方法 | |
CN115633640B (zh) | 一种美人蕉试管苗叶鞘不定芽再生的方法及其应用 | |
CN101904302B (zh) | 一种药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法 | |
CN113907005B (zh) | 一种简便快速高效的绿豆直接再生组培方法 | |
CN116671440B (zh) | 一种丝瓜下胚轴离体再生方法及培养基配制 | |
CN110771512B (zh) | 一种溪荪愈伤组织的高效诱导方法 | |
CN113016610B (zh) | 一种藜麦下胚轴离体再生方法 | |
CN104115751A (zh) | 一种利用大白菜球叶获得再生植株的培养方法 | |
CN109757379B (zh) | 一种以杉木子叶为外植体的高效再生方法 | |
CN115968779B (zh) | 一种蛇床的组织培养方法 | |
CN115812599B (zh) | 一种以日本落叶松子叶为外植体的高效再生方法 | |
CN115644056B (zh) | 一种猪笼草组织培养工厂化生产方法 | |
CN112655564B (zh) | 一种乌桕茎段高效再生体系的建立方法 | |
CN117136842B (zh) | 一种柘树的微体组织培养快繁方法 | |
CN113475402B (zh) | 一种利用橡胶树幼嫩茎段离体培养试管苗的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |