CN103734021A

CN103734021A - 一种旱冬瓜腋芽外植体采集与诱导方法

Info

Publication number: CN103734021A
Application number: CN201410042147.7A
Authority: CN
Inventors: 聂艳丽; 施彬; 查贵生; 董晓光; 周汝敏; 杨卫; 杨正华; 杨建荣; 李秀君; 铁学江
Original assignee: YUNNAN FORESTRY TECHNOLOGY PROMOTION GENERAL STATION
Current assignee: YUNNAN FORESTRY TECHNOLOGY PROMOTION GENERAL STATION
Priority date: 2014-01-28
Filing date: 2014-01-28
Publication date: 2014-04-23

Abstract

本发明公开一种旱冬瓜腋芽外植体采集与诱导方法，涉及植物无性繁殖技术领域。该方法选择6年生以上的旱冬瓜主干2m以下萌生的3～5cm长的健壮幼嫩腋芽，经消毒后剪切成带1个腋芽的1～2cm茎段作为外植体，发明选择取主干上的芽比取侧枝上的芽幼化效果更好，经诱导培养，其诱导率达55%以上。且成苗能更好地保持了优树的优良特性，如优树的生长特性、树干通直性、木材质量等。

Description

一种旱冬瓜腋芽外植体采集与诱导方法

技术领域

本发明涉及植物无性繁殖技术领域，具体涉及旱冬瓜组织培养繁殖技术中腋芽外植体的采集与诱导方法。

背景技术

旱冬瓜（Alnus nepalensis）别名蒙自桤木、桤木树、西南桤木等，属于桦木科桤木属，为桦木科桤木属的一种阔叶落叶乔木，是云南省广泛分布的优良乡土速生用材树种，是值得推广的荒山绿化树种，是营建生态林、用材林等多功能林的优良树种，也是云南重要的薪材树种。但其良种化程度不高，良种资源十分缺乏。多年来由于人口负荷增大、全球气候变迁、环境污染加重、旱冬瓜木制家具走俏等诸多因素，天然旱冬瓜种质资源损失和破坏日趋严重。目前生产上主要采用传统的播种育苗方法培育造林苗木，良种运用不充分，林木生长相对缓慢，且造林后生长表型不一，分化严重，很难达到群体高产优质的目标。采用植物组织培养繁殖技术可以快速繁殖基因优良的无性系苗木，从而造林后可达到群体高产优质的目的，但组织培养过程中外植体的采集与诱导是一个关键技术，常常成为阻碍旱冬瓜物织培养技术应用的瓶颈。

发明内容

发明目的是选用适宜的外植体，使其诱导率得到大幅提高，组培成苗后树干直立

生长、干形通直，培育出高产、优良的无性系苗木。

为达到本发明目的，本发明的技术方案如下：

一种旱冬瓜腋芽外植体采集与诱导方法，按以下步骤进行：

1．一种旱冬瓜腋芽外植体采集与诱导方法，按以下步骤进行：

（1）腋芽外植体的采集

①优良母树的选择

选择6年生以上的旱冬瓜优树；

②主干腋芽的促萌方法

在9月～11月，对选中的母树周围直径3米～5米范围内的杂草、灌木进行清除；

③采集腋芽外植体

第二年3月～4月，剪取从上往下至地表面2m之间的主干上萌生的2～3cm长的健壮幼嫩腋芽，经消毒后剪切成带1个腋芽的1～2cm茎段作为腋芽外植体；

（2）腋芽外植体的诱导培养

将腋芽外植体垂直接种于诱导培养基，培养温度23～28℃，光照强度3000～5000Lx，每天光照明间8～12小时，培养室空气相对湿度70%～80%，培养时间40～60天，所述诱导培养基为：1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂5500mg/L+聚乙烯吡咯烷酮5000mg/L，pH值为5.8～6.2。

步骤（1）③采集腋芽外植体中所述的消毒是将2～3cm长的健壮幼嫩腋芽先用3%无磷洗涤剂水浸泡20min，然后在超净工作台上用75%的酒精消毒10～15s，再用0.1%的升汞消毒5～10min，最后用无菌水冲洗干净，所述的百分数为质量分数。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、本发明选择6年生以上旱冬瓜树主干2m以下萌生的带腋芽的茎段为腋芽外植体，芽幼化效果更好，更有利于诱导成功，大幅度提高了诱导率，诱导率达55%以上。

2、本发明从主干取芽，充分利用了位置效应，能更好地保持优树的优良特性，如优树的生长特性、树干通直性、木材质量等

3、与采用传统的播种育苗方法相比，该发明方法能显著地提高木材质量,可形成林木干形圆满、纹理通直，提高了林农收入。提高了科技兴林的意识，使采用良种良法营建无性系林的意识更加深入人心。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步描述。以下各实施例中所用的复合肥、农药等材料均可在市场购买。

实施例中无特别说明的均为常规方法。

实施例1本发明方法实施例

实施地点：云南省玉溪市峨山县

按以下步骤进行（3次重复）：

（1）腋芽外植体的采集

①优良母树的选择

2011年在6年生旱冬瓜人工林中选择优树10棵。所述的旱冬瓜优树是按常规的5株优势木对比法，在立地条件相对一致的同龄林分里，以候选树为中心，半径10～15m的范围内选择5株优势木作为对比木（优势木是指在候选树同一林分的一定范围内，生长、立地和树龄相同或接近，在评选优树时，作为比较对象的仅次于候选树的对比木），测定对比木和候选木的胸径、树高、枝下高，并计算材积，采用邓肯多重比较，在5%的显著水平下，候选树的胸径、树高、枝下高、材积指标显著高于优势木，并且目测候选树干通直圆满，裂纹通直、无扭曲，树冠完整，自然整枝良好、侧枝较细，健康无病虫害的单株即为旱冬瓜优树。

②主干腋芽的促萌方法

2011年在10月，对选中的母树周围直径5米范围内的杂草、灌木进行清除，使树干充分接受阳光照射，30～50天后，待其萌芽。

③采集腋芽外植体

2012年3月，剪取从上往下至地表面2m之间的主干上萌生的2～3cm长的健壮幼嫩腋芽，经消毒后剪切成带1个腋芽的1～2cm茎段作为腋芽外植体；共采集腋芽外植体75条，所述的消毒是将2～3cm长的健壮幼嫩腋芽先用3%无磷洗涤剂水浸泡20min，然后在超净工作台上用75%的酒精消毒10～15s，再用0.1%的升汞消毒5～10min，最后用无菌水冲洗干净，所述的百分数为质量分数。

（2）腋芽外植体的诱导培养

将消毒处理后的腋芽外植体垂直接种于诱导培养基上，培养温度26℃～28℃，光照强度3000～5000Lx，每天光照明间12小时，培养室空气相对湿度70%～80%，培养时间45天，所述诱导培养基为：1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂5500mg/L+聚乙烯吡咯烷酮5000mg/L，pH值为5.8～6.2。

用本方本进行旱冬瓜外植体的采集与诱导，诱导成功率60%。

实施例2

实施地点：云南省会泽县

本实施例除以下步骤不同外，其余步骤与实施例1相同。

（1）腋芽外植体的采集

①优良母树的选择

2012年在10年生旱冬瓜人工林中选择优树10棵。

②主干腋芽的促萌方法

2012年在11月，对选中的母树周围直径4米范围内的杂草、灌木进行清除，使树干充分接受阳光照射，30～50天后，主干上会萌出新芽。

③采集腋芽外植体

2013年4月，共采集腋芽外植体60条。

（2）腋芽外植体的诱导培养

诱导培养的培养温度23℃～25℃，，每天光照明间10小时，培养时间60天。

用本方本进行旱冬瓜腋芽外植体的采集与诱导，诱导成功率55%。

表1 实施例1—实施例2旱冬瓜腋芽外植体的诱导成功率调查表

本发明选择6年生以上旱冬瓜树主干2m以下萌生的腋芽作为腋芽外植体，大幅度提高了诱导率，诱导率达55%以上。本发明选择取主干上的芽比取侧枝上的芽幼化效果更好，更有利于诱导成功。本发明从主干取芽，充分利用了位置效应，能更好地保持优树的优良特性，如优树的生长特性、树干通直性、木材质量等。

Claims

1.一种旱冬瓜腋芽外植体采集与诱导方法，按以下步骤进行：

（1）腋芽外植体的采集

①优良母树的选择

选择6年生以上的旱冬瓜优树；

②主干腋芽的促萌方法

③采集腋芽外植体

（2）外植体的诱导培养

将消毒处理后的腋芽外植体垂直接种于诱导培养基，培养温度23～28℃，光照强度3000～5000Lx，每天光照明间8～12小时，培养室空气相对湿度70%～80%，培养时间40～60天，所述诱导培养基为：1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂5500mg/L+聚乙烯吡咯烷酮5000mg/L，pH值为5.8～6.2。

2.根据权利要求1所述的旱冬瓜腋芽外植体采集与诱导方法，步骤（1）③采集腋芽外植体中所述的消毒是将2～3cm长的健壮幼嫩腋芽先用3%无磷洗涤剂水浸泡20min，然后在超净工作台上用75%的酒精消毒10～15s，再用0.1%的升汞消毒5～10min，最后用无菌水冲洗干净，所述的百分数为质量分数。