CN116549381A - 一种硝酸异山梨酯葡萄糖注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种硝酸异山梨酯葡萄糖注射液及其制备方法，本发明的注射液由药物活性成分硝酸异山梨酯、葡萄糖、pH调节剂和注射用水组成。本发明改变了硝酸异山梨酯和葡萄糖的投料顺序，极大地缩短了生产时间，降低了微生物污染水平；本发明生产过程中去除了活性炭的使用，解决了因活性炭吸附而使硝酸异山梨酯过量投料；运用超滤新技术，有效去除了药液中的热源，最大程度降低不溶性微粒带来的危害，保证产品在有效期内的稳定性。

Description

一种硝酸异山梨酯葡萄糖注射液及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种硝酸异山梨酯葡萄糖注射液及其制备方法。

背景技术

硝酸异山梨酯是目前应用较广的一种血管扩张药，低剂量时它可以扩张静脉容量血管，较大剂量时它可以扩张冠脉血管和阻力血管，减轻心脏的前负荷、后负荷和改善冠脉循环。因此常通过舌下给药来缓解心绞痛和通过口服给药来预防心绞痛。硝酸异山梨酯口服后体内血药浓度迅速达峰，但由于该药首过效应大，口服后生物利用度很低，只有静脉注射生物利用度的3％。因此舌下给药和注射给药是最理想的给药途径。但对于需要深切治疗的病人，舌下给药已不可能时，注射给药是唯一可以选择的给药方案。

硝酸异山梨酯兼具动脉及静脉扩张作用，因此硝酸异山梨酯比硝酸甘油更具有优越性。在治疗急性心肌梗塞时，硝酸异山梨酯静滴需要较少的次数调整剂量，而在24小时内增多的剂量比硝酸甘油小，而且采用硝酸异山梨酯进行治疗不会像硝酸甘油那样导致低血压。

由于硝酸异山梨酯水溶性差，为了解决硝酸异山梨酯的溶解度差的问题，现有专利文献中采用助溶剂或增溶剂来增加硝酸异山梨酯在水中的溶解度，但是临床使用过程可能会存在安全隐患。如现有专利文献(CN200310117201.1)《硝酸异山梨酯注射液的制备工艺》公开的制备方法中利用羟丙基-β环糊精及聚维酮K30的一种或二种作为助溶剂来增加硝酸异山梨酯的溶解度，文献报道羟丙基-β环糊精具有一定的肾毒性，也有其致癌性的文献报道，而且存在的更严重的毒副作用尚不为我们所知，国外只有几个特殊适应症的制剂(如治疗重度感染和肿瘤)中使用，聚维酮K30用于静脉注射时能妨碍凝血的过程，用于本注射剂存在不安全隐患，不宜用于注射剂中。又如专利文献(CN104027329B)《一种硝酸异山梨酯氯化钠注射液》公开的制备方法中利用L-半胱氨酸盐酸盐和/或L-抗坏血酸作为助溶剂来增加硝酸异山梨酯的溶解度，而L-半胱氨酸盐酸盐和L-抗坏血酸具有药理活性，将对主药的药效产生影响，从而产生安全隐患，不宜使用。又如现有专利文献(CN1283245C)《硝酸异山梨酯的冻干粉针及其制备方法》公开的制备方法中使用吐温表面等活性剂作为增溶剂增加硝酸异山梨酯在水中的溶解度，加入吐温可明显改善硝酸异山梨酯溶液的溶解度，但是临床上使用可能会产生溶血现象。

为了解决硝酸异山梨酯注射在储存过程中有白色结晶析出，注射液不溶性微粒不合格的问题，专利文献(CN115073486A)《一种硝酸异山梨酯及其注射液的制备方法》制备方法中采用药液经大孔吸附树脂和复合滤膜过滤、活性炭吸附工艺步骤，以上工艺极为复杂，且大孔吸附树脂中可能存在有害残留物苯、甲苯、对二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯等，加之在工艺过程中所使用的活性炭用硝酸银进行处理，导致重金属超标的可能性很大，存在极大的不安全隐患。

硝酸异山梨酯和单硝酸异山梨酯虽然同为降血脂药，但实为两种不同的物质，两者的溶解度截然不同，硝酸异山梨酯在水中的溶解度比单硝酸异山梨酯小，两者溶解度相差近100倍，所以与单硝酸异山梨酯注射剂相关的专利文献只对本发明具有参考意义。

硝酸异山梨酯葡萄糖注射液因其良好的疗效和安全性进入2021年国家医保目录，目前国内拥有硝酸异山梨酯葡萄糖注射液生产批件的厂家达30家，但至今只有极个别企业生产和销售，其中生产工艺存在缺陷而导致产品质量不可控可能是导致诸多企业不能正常生产的主要原因之一。

发明内容

本申请的发明人对硝酸异山梨酯葡萄糖注射液及其生产工艺进行了研究，结果发现现有工艺在以下缺陷：①硝酸异山梨酯葡萄糖注射液原制备工艺投料顺序是先投入葡萄糖溶解后，再投入硝酸异山梨酯使溶解，导致硝酸异山梨酯在葡萄糖溶液中溶解时间过长，不能保证从配制到灌装结束时间控制在12小时之内，增加了微生物污染的风险。②由于硝酸异山梨酯剂量较小，活性炭对硝酸异山梨酯吸附达20％以上，必须采用过量投料的方式补偿吸附的主药。这种“校正”的方式，看似合理，但实际上与当今药品严格监管的要求是背道而驰的，会带来后期的生产中间体控制、成品质量检验乃至药理刺激性、临床疗效的不可预估的可能性变化和风险，因此，从药品监管的风险控制角度，除非必要的情况下，“过量投料”是不被认可的。另外此方法对活性炭用量和来源等均具有一定要求，否则可能造成批与批之间质量不一致，在生产中存在一定风险。③我们通过试验发现，在硝酸异山梨酯葡萄糖注射液制备过程中无论使用改变原辅料投料顺序、使用或不使用活性炭等工艺，按照大输液通常的制备工艺，配制好的药液经0.45μm和0.22μm滤芯过滤，灌装，灭菌，所制得的成品不溶性微粒均不符合规定。注射剂中的不溶性微粒粒径在1～50μm、肉眼不可见，但因其可随血液流动却不能被代谢而可能对人体造成难以发现和潜在的严重危害。

为了解决现有技术不能正常生产出合格且稳定的硝酸异山梨酯葡萄糖注射液的缺陷，在研究过程中，本申请的发明人意外地发现改变硝酸异山梨酯和葡萄糖的投料顺序对硝酸异山梨酯溶解时间有较大影响，改进后的投料顺序是先投入硝酸异山梨酯溶解后，再投入葡萄糖使溶解，保证了药液从配制到灌装结束时间控制在12小时之内，降低了微生物污染的风险，提高了生产效率。为了解决因活性炭吸附硝酸异山梨酯需要过量投料问题，我们在制备工艺中去除了活性炭的使用，减少了因活性炭的使用带来的安全风险。

目前在无菌制剂生产工艺中，多采用活性炭吸附法除热源，该方法操作复杂，不利于清洁生产，而且由于国产活性炭的来源及处理工艺各异，其中存在的杂质可能在生产过程中析出对产品的质量反而带来风险。我们惊奇地发现运用超滤技术彻底解决了硝酸异山梨酯葡萄糖注射液可见异物和不溶性微粒不合格的问题，有关物质含量极低，且稳定性好。

在此基础上，本发明提供一种硝酸异山梨酯葡萄糖注射液及其制备方法。本发明方法得到的制剂中不溶性微粒、可见异物、有关物质的含量都极低，各项指标均符合国家药品质量标准要求，而且其中的硝酸异山梨酯纯度高，稳定性好，批间稳定，质量可靠；另外本发明省去活性炭吸附步骤，工艺简单，便于生产操作和控制，适合大规模生产。

本发明采用如下技术方案来实现上述目的。

一方面，本发明提供一种硝酸异山梨酯葡萄糖注射液，该注射液由药物活性成分硝酸异山梨酯、葡萄糖、pH调节剂和注射用水组成。

优选地，所述pH调节剂选自盐酸、醋酸、枸橼酸的一种或多种，优选为盐酸。

优选地，所述注射液中，所述硝酸异山梨酯的浓度为0.08～0.12mg/ml，优选为0.1mg/ml。

优选地，所述注射液中，所述葡萄糖的浓度为0.049～0.052g/ml，优选为0.05g/ml。

优选地，所述注射液中，所述pH调节剂的浓度为0～0.2mol/L，优选浓度为0.1mol/L。

优选地，所述注射液的pH值为3.5～5.5，优选为4.0～5.0。

另一方面，本发明提供一种上述硝酸异山梨酯葡萄糖注射液的制备方法，该方法包括如下步骤：

在容器中加入注射用水，然后加入硝酸异山梨酯，搅拌至完全溶解后，再加入葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用pH调节剂调节pH值，接着，加入注射用水定容，药液经预过滤，超滤，灌装，灭菌，即得。

优选地，所述注射用水的量为药液总量的70％～90％，优选为80％～90％，更优选为85％～90％。

优选地，所述注射用水的温度为20℃～60℃，优选为40～55℃。

优选地，定容至每1ml含硝酸异山梨酯0.1mg的药液。

优选地，加入注射用水定容之后，药液经孔径为0.45μm的滤膜预过滤后，药液再进行超滤。

优选地，所述超滤使用分子截留量为20～40KD的超滤膜，优选所述超滤使用分子截留量为30KD的超滤膜。

优选地，所述灭菌的条件为在115℃热压蒸汽灭菌30min。

与现有技术相比，本发明至少存在如下优势：

1、本发明改变了硝酸异山梨酯与葡萄糖的投料顺序，从而使从配液开始到灌装结束时间控制在规定的范围内，提高了配制液的稳定性，降低药液微生物污染的风险。

2、本发明生产工艺中去除了活性炭的使用，硝酸异山梨酯不需要过量投料。

3、本发明生产工艺中增加了超滤工序，不仅有效去除了本品的热源(细菌内毒素)，彻底解决了硝酸异山梨酯葡萄糖注射液不溶性微粒不符合规定的问题。

具体实施方式

实施例1

在配液罐中加入180L注射用水(水温40～55℃)，将20g硝酸异山梨酯投入稀配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入10kg葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，加入注射用水定容至200L，搅拌混合均匀，药液经0.45μm滤膜预过滤，用超滤膜(分子截留量为30KD)进行超滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

实施例2

在配液罐中加入170L注射用水(水温40～55℃)，将20g硝酸异山梨酯投入稀配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入10kg葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，加入注射用水定容至200L，搅拌混合均匀，药液经0.45μm滤膜预过滤，用超滤膜(分子截留量为30KD)进行超滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

对比实施例1

在配液罐中加入120L注射用水(水温40～55℃)，将20g硝酸异山梨酯投入稀配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入10kg葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，加入注射用水定容至200L，搅拌混合均匀，药液经0.45μm预过滤，用超滤膜(分子截留量为30KD)进行超滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

对比实施例2

在配液罐中加入60L注射用水(水温40～55℃)，将20g硝酸异山梨酯投入稀配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入10kg葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，加入注射用水定容至200L，搅拌混合均匀，药液经0.45μm滤膜预过滤，用超滤膜(分子截留量为30KD)进行超滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

对比实施例3

在配液罐中加入180L注射用水(水温40～55℃)，将10kg葡萄糖投入稀配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入20g硝酸异山梨酯，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，加入注射用水定容至200L，搅拌混合均匀，药液经0.45μm滤膜预过滤，用超滤膜(分子截留量为30KD)进行超滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

对比实施例4

在配液罐中加入180L注射用水(水温80～90℃)，将20g硝酸异山梨酯投入稀配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入10kg葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，加入注射用水定容至200L，搅拌混合均匀，药液经0.45μm滤膜预过滤，用超滤膜(分子截留量为30KD)进行超滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

对比实施例5

在配液罐中加入180L注射用水(水温40～55℃)，将20g硝酸异山梨酯投入稀配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入10kg葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，加入注射用水定容至200L，搅拌混合均匀，药液经0.45μm滤膜预过滤，用超滤膜(分子截留量为10KD)进行超滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

对比实施例6

在配液罐中加入180L注射用水(水温40～55℃)，将20g硝酸异山梨酯投入稀配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入10kg葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，加入注射用水定容至200L，搅拌混合均匀，药液经0.45μm滤膜预过滤，用超滤膜(分子截留量为50KD)进行超滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

对比实施例7～11

在配液罐中加入180L的注射用水(水温40-55℃)，将20g硝酸异山梨酯投入浓配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入10kg葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，将活性炭用适量注射用水润湿后加入，搅拌30min，用钛棒过滤器过滤脱炭，过滤至稀配罐中。加入注射用水定容至200L，药液经0.45μm、0.22μm二级过滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

对比实施例12

在配液罐中加入180L注射用水(水温40～55℃)，将20g硝酸异山梨酯投入稀配罐中，搅拌至完全溶解后，再加入10kg葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH在4.0～5.0后，加入注射用水定容至200L，搅拌混合均匀，药液依次经0.45μm滤膜、0.22μm滤膜过滤，灌装，115℃热压蒸汽灭菌30min，出箱，灯检，即得成品。

试验例

将实施例1-2和对比实施例1-3例中硝酸异山梨酯溶解时间进行对比，结果见表1：

表1：硝酸异山梨酯溶解时间考察结果

由实施例1-2和对比实施例1-2硝酸异山梨酯溶解考察时间结果可知，硝酸异山梨酯的溶解时间度随着注射用水用量的增加而减少，配液过程中预先加入注射用水用量控制在85％～90％更为合适。

由实施例1-2和对比实施例3硝酸异山梨酯溶解考察时间结果可知，硝酸异山梨酯与葡萄糖的投料顺序对硝酸异梨酯的溶解时间影响极大，改变原辅料投料顺序，能缩短配液时间，提高配制液的稳定性，降低药液微生物污染的风险。

将实施例1-2和对比实施例4例所制得的制剂进行外观性状、pH值、有关物质和含量进行对比，样品检验结果见表2：

表2：实施例1-2例和对比实施例4例样品检测结果

将实施例1-2和对比实施例4例所制得的制剂检测结果可知，样品性状、pH值、硝酸异山梨酯的有关物质及5-羟甲基糠醛随着配液用注射用水温度的升高有明显变化并超出国家药品标准规定范围(有关物质总杂≤1.0％，5-羟甲基糠醛≤0.32)。

将实施例1和对比实施例5-6进行不同截留分子量超滤膜去除细菌内毒素比较，试验结果见表3：

表3：不同截留分子量超滤膜去除细菌内毒素结果

(注：“+”表示鲎试剂法检测样品细菌内毒素的检测结果为阳性，“－”表示鲎试剂法检测样品细菌内毒素的检测结果为阴性)

结果表明，超滤前药液细菌内毒素均呈阳性，经过不同分子截留量的膜过滤后，细菌内毒素<0.25EU/ml，符合硝酸异山梨酯葡萄糖注射液国家标准要求，说明三种超滤膜均能去除内毒素，但是50KD超滤膜效果稍差，用灵敏度为0.06EU/ml鲎试剂检查有阳性结果出现，说明其除热源效果不可靠，用于除热源还是存在一定的风险。10KD和30KD的膜除热源效果可靠，考虑到实际生产过程中还需考虑膜通量，以减少超滤时间，因此最终选用30KD的超滤膜用于硝酸异山梨酯葡萄糖注射液除细菌内毒素。

将实施例1和对比实施例5-6进行不同截留分子量超滤膜对硝酸异山梨酯的吸附和不溶性微粒影响结果比较，试验结果见表4：

表4：超滤膜对硝酸异山梨酯的吸附和不溶性微粒结果比较

结果表明：超滤膜对硝酸异山梨酯基本无吸附，经超滤膜过滤后药液不溶性微粒均符合规定。

将采用活性炭除热源工艺对比实施例7-11制备的样品进行细菌内毒素效果、活性炭对硝酸异山梨酯的吸附和不溶性微粒对比研究，试验结果见表5和表6：

表5：活性炭吸附后内毒素检测结果

(注：“+”表示鲎试剂法检测样品细菌内毒素的检测结果为阳性，“－”表示鲎试剂法检测样品细菌内毒素的检测结果为阴性)

由表5可知，活性炭对溶液中的内毒素确实有一定的吸附效果，且随着加入活性炭的比例增加，其吸附溶液中内毒素的效果越彻底。但当活性炭的比例为小于0.2％(g/ml)时，用灵敏度为0.06EU/ml的鲎试剂检测均有阳性样品出现，说明其不能完全有效地去除溶液中存在的内毒素，应用在本品生产中存在一定的风险；当活性炭的比例大于0.2％(g/ml)时，所有的样品均为阴性，内毒素吸附效果较好，能完全有效地吸附溶液中的内毒素。

表6：活性炭吸附工艺对主药含量和不溶性微粒的影响

由表6可知，有使用活性炭吸附硝酸异山梨酯葡萄糖注射液溶液中的内毒素的同时，活性炭对药物活性成分硝酸异山梨酯有较大的吸附，且随着活性炭加入比例的提高，主药含量下降非常明显，实际生产中要过量投料，超出了过量投料限度范围；采用活性炭吸附热源工艺制备的样品不溶性微粒均不符合规定。

影响因素试验

将本发明实施例1-2和对比实施例12制得的成品制剂置于高温60℃的恒温恒湿箱中，分别于5天和10天、30天取样，考察样品外观性状、pH值、不溶性微粒、细菌内毒素、有关物质和含量的变化，试验结果见表7：

表7：影响因素(高温60℃)考察结果

长期试验

将本发明实施例1-2和对比实施例12制得的成品制剂置于20℃、RH60％的恒温恒湿箱中，分别于0、3、6、12月取样，按注射液重点考察项目考察结果见表8：

表8：长期试验考察结果

经过影响因素高温60℃考察30天结果可知，实施例1-2和对比实施例12中样品有关物质和5-羟甲基糠醛均有增长趋势，实施例1-2高温放置30天后可见异物和不溶性微粒均符合规定，而对比实施例12高温放置5天后即发现明显可见异物和不溶性微粒超过质量标准规定。

经过长期试验考察结果可知，实施例1-2中样品各项指标均符合硝酸异山梨酯葡萄糖注射液国家药品质量标准规定，各项检测项目无明显变化，对比实施例12样品长期放置3个月后可见异物和不溶性微粒均超过质量标准规定，说明本发明具有实际生产的可行性。

Claims (10)

1.一种硝酸异山梨酯葡萄糖注射液，该注射液由药物活性成分硝酸异山梨酯、葡萄糖、pH调节剂和注射用水组成。

2.根据权利要求1所述的注射液，其中，所述pH调节剂选自盐酸、醋酸、枸橼酸的一种或多种，优选为盐酸。

3.根据权利要求1或2所述的注射液，其中，所述注射液中，所述硝酸异山梨酯的浓度为0.08～0.12mg/ml，优选为0.1mg/ml。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的注射液，其中，所述注射液中，所述葡萄糖的浓度为0.049～0.052g/ml，优选为0.05g/ml。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的注射液，其中，所述注射液中，所述pH调节剂的浓度为0～0.2mol/L，优选浓度为0.1mol/L；

优选地，所述注射液的pH值为3.5～5.5，优选为4.0～5.0。

6.一种权利要求1至5中任一项所述的硝酸异山梨酯葡萄糖注射液的制备方法，该方法包括如下步骤：

在容器中加入注射用水，然后加入硝酸异山梨酯，搅拌至完全溶解后，再加入葡萄糖，搅拌至完全溶解后，用pH调节剂调节pH值，接着，加入注射用水定容，药液预过滤，超滤，灌装，灭菌，即得。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其中，所述注射用水的温度为20℃～60℃，优选为40℃～55℃；

优选地，容器中加入注射用水的量为药液总量的70％～90％，优选为80％～90％，更优选为85％～90％。

8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其中，定容至每1ml含硝酸异山梨酯0.1mg的药液。

9.根据权利要求6至8中任一项所述的制备方法，其中，加入注射用水定容之后，药液经孔径为0.45μm的滤膜预过滤后，药液再进行超滤；

优选地，所述超滤使用分子截留量为10～50KD的超滤膜，优选所述超滤使用分子截留量为30KD的超滤膜。

10.根据权利要求6至9中任一项所述的制备方法，其中，所述灭菌的条件为在115℃热压蒸汽灭菌30min。