CN1165339C - 红细胞生成素药物组合物 - Google Patents
红细胞生成素药物组合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1165339C CN1165339C CNB008085048A CN00808504A CN1165339C CN 1165339 C CN1165339 C CN 1165339C CN B008085048 A CNB008085048 A CN B008085048A CN 00808504 A CN00808504 A CN 00808504A CN 1165339 C CN1165339 C CN 1165339C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preparation
- erythropoietin
- buffer agent
- provides
- glycine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1816—Erythropoietin [EPO]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明提供红细胞生成素的含水药物制剂,它不含人血清血液产品,以一定量氨基酸和脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物稳定。本发明也提供含水稳定、可保藏的红细胞生成素药物制剂,它含有抗菌量的甲酚和一定量的氨基酸。
Description
有关申请的交叉引用
本申请要求1999年4月9日提交的美国临时申请序列号60/128,596的优先权,其内容在此列入本文作为参考。
发明领域
本发明提供红细胞生成素的含水药物制剂,它不含人血清血液产品,以一定量氨基酸和脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基(ethanediyl))衍生物稳定。本发明也提供含水稳定、可保藏的红细胞生成素药物制剂,它含有抗菌量的甲酚和一定量的氨基酸。
发明背景
红细胞生成素(EPO)是肾脏应组织缺氧分泌的一种糖蛋白激素,它刺激骨髓(1)中红血细胞的生成。EPO的基因已经被克隆和表达在中国仓鼠卵巢细胞(2,3)中。重组的人红细胞生成素(α型红细胞生成素,rhEPO)具有与人尿红细胞生成素相同的氨基酸序列,并且这两种在功能和免疫学分析上是不能区别的,尽管在蛋白质糖基化方面存在影响体内功效(4,5)的差异。
迄今在临床试验中,rhEPO已经在正常受试者以及具有各种贫血症状病人(6,7)中被评价。EPO在正常人类志愿者中诱发强烈的血液学反应,条件是可获得足够的铁供给,以能够支持增加的血红蛋白合成(8)。大量的试验已经研究了rhEPO在透析维持的慢性肾衰和并非靠透析维持的肾衰的治疗上的安全性和有效性。美国证实的其它适应症包括癌症化疗的继发性贫血和与人免疫缺陷病毒感染的齐多夫定治疗有关关的贫血。世界范围内,EPO已经被用于治疗与类风湿性关节炎、早熟、骨髓纤维变性、镰刀状细胞性贫血、骨髓移植、烧伤(thermalin jury)、β-地中海贫血有关的贫血,作为手术前自体供血的促进剂,以及用作手术前的辅药(6,7)。
尽管rhEPO通常能良好耐受,已经观察到偶然的皮肤疹和荨麻疹,显示对这种α型红细胞生成素制剂的一些成分过敏,有可能为人血清清蛋白。进一步地,尽管血液筛析,当药剂采用人血液产品配制时仍然存在可传播剂感染的风险。因此,稳定和不含人血液产品如清蛋白的rhEPO药物制剂是需要的。
美国专利4,992,419介绍了含有5至50g/L尿素、1至50g/L氨基酸、0.05至5g/L表面活性剂并且不含人血清清蛋白的红细胞生成素冻干制剂。介绍了含水制剂,但是与含有人血清清蛋白的制剂相比显示有限的稳定性,从而商业上不实际。因此最终的用户,无论医师或病人,在给药之前必须立即重新配制这样的制剂。在红细胞生成素的临床制剂中冻干制剂不是优选的,由于重新配制过程是耗时的,造成这种蛋白质制剂不适当操作的风险,或者可以不适当地配制,并且通常需要某些添加剂例如稳定剂以保持药物的充分活性。因此,通常优选红细胞生成素的含水制剂。
美国专利5,376,632描述了含水、冻干或喷雾干燥的制剂,或者含有β或γ环糊精并且不含其它的附加稳定剂如人血清清蛋白、牛血清清蛋白、卵磷脂、甲基纤维素、聚乙二醇、含硫还原剂、尿素、氨基酸和表面活性剂的红细胞生成素(4栏,51-54行)。
美国专利5,661,125介绍了含有抗菌防腐剂如苯甲醇、对羟基苯甲酸酯、苯酚类和其混合物的红细胞生成素含水制剂。制备不含人血清清蛋白的制剂,并检测有关的相应含人血清清蛋白制剂的稳定性。结果表明在不含HSA甲酚(0.5%)和氯甲酚(0.3%)制剂中有明显红细胞生成素沉淀,甚至在0℃时(8栏,1-29行),从而使这些制剂临床上不能实行。进一步地,作为具有不佳促稳定性和更迅速衰退的EPO,介绍了含0.2-0.5%甲酚用量的EPO制剂(6栏,21-25行)。目前商业上可得到的可保藏的多剂量制剂含有1-%的苯甲醇。
对于静脉内(iv)和皮下(sc)注射,在1000IU/0.5mL,2000IU/mL,5000IU/mL,和10,000IU/mL(10K)浓度的柠檬酸盐缓冲剂中制备商业上可得到的rhEPO制剂。这些制剂是临床上证明通常引起与柠檬酸盐-缓冲的制剂(9,10)s.c.给药有关的病人不适。由于rhEPO主要的临床使用是由i.v.转变至s.c.,很明显,这些制剂的局部耐受性并不是最佳的。在注射之前调节药物至室温,或避免体积超过1ml都不足以防止在注射部位的疼痛。由于发现疼痛诱发剂既不是人清蛋白,它在制剂中用作稳定剂,也不是低同渗容摩溶液,rhEPO的柠檬酸盐缓冲剂被提议是候选对象。一种40,000IU/ml.单次剂量、无防腐剂制剂是商业上可得到的,它含有磷酸钠,而不是柠檬酸盐缓冲剂。需要稳定、较低剂量的制剂,它含有磷酸盐缓冲剂而不是欠优选的柠檬酸盐缓冲剂。
发明概述
本发明提供了红细胞生成素的药物制剂,它包含:(a)pH缓冲剂;(b)稳定量的脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基(ethanediyl))衍生物;(c)稳定量的氨基酸;和(d)药用量的红细胞生成素;其中这种制剂不含有尿素或人血液产品。优选的制剂包含作为稳定剂的多山梨醇酯80和甘氨酸的组合。特别优选的制剂包含在磷酸盐缓冲体系内的多山梨醇酯80和甘氨酸的组合作为稳定剂。
本发明也提供了红细胞生成素的药物制剂,它包含:(a)pH缓冲剂;(b)稳定量的人血清清蛋白;(c)稳定量的氨基酸;(d)抗菌量的甲酚;和(e)药用量的红细胞生成素。优选的制剂包含作为稳定剂的人清蛋白和甘氨酸的组合。特别优选的制剂包含在磷酸盐缓冲体系内的人血清清蛋白和甘氨酸的组合作为稳定剂,并含有浓度大约为0.3%的m-甲酚。
本发明的制剂显示类似于目前药物产品的药物动力学性质,例如吸收、消化和血清浓度水平类似于目前市售的重组人红细胞生成素的药物制剂。进一步地,本发明的制剂显示给药时病人较低的不适,并且在注射部位显示更短的不适时期。因此,本发明提供了不含人血清清蛋白或者可保藏的红细胞生成素药物制剂,它可以用于红细胞生成素并且可以被配制以减少病人的不适。
附图简要说明
图1-接受单一150IU/kg s.c.剂量的含和不含0.3%m-甲酚防腐剂的rhEPO的受试者的平均血清红细胞生成素浓度-时间曲线图(基线红细胞生成素水平未修正)。血清红细胞生成素浓度通过放射免疫分析(RIA)测定。
图2-接受单一150IU/kg s.c.剂量的含和不含新稳定剂的rhEPO(2K)的受试者的平均血清红细胞生成素浓度-时间曲线图(基线红细胞生成素水平未修正)。血清红细胞生成素浓度通过放射免疫分析(RIA)测定。
图3-接受单一750IU/kg s.c.剂量的含和不含新稳定剂的rhEPO(40K)的受试者的平均血清红细胞生成素浓度-时间曲线图(基线红细胞生成素水平未修正)。血清红细胞生成素浓度通过RIA测定。
图4-接受单一150IU/kg s.c.剂量的含柠檬酸盐和磷酸盐缓冲剂的rhEPO的受试者的平均血清红细胞生成素浓度-时间曲线图(基线红细胞生成素水平未修正)。血清红细胞生成素浓度通过放射免疫分析(RIA)测定。
详细说明
本发明提供了红细胞生成素稳定的含水药物制剂,这种制剂在缓冲剂中含有氨基酸和脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物稳定剂,并且不含人血液产品或尿素。因此,本发明提供了红细胞生成素药物制剂,其包含:
(a)pH缓冲剂;
(b)稳定量的脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物;
(c)稳定量的氨基酸;
(d)药用量的红细胞生成素;和
其中该制剂不含有尿素或人血液产品。
本发明也涉及甲酚防腐的、以人血清清蛋白和氨基酸的组合稳定的红细胞生成素含水制剂。因此,本发明提供了红细胞生成素药物制剂,它包含:
(a)pH缓冲剂;
(b)稳定量的人血清清蛋白;
(c)稳定量的氨基酸;
(d)抗菌量的甲酚;和
(e)药用量的红细胞生成素。
对于这些制剂一项目标是最小化临床证实的与柠檬酸盐缓冲的制剂的皮下给药相关的病人不适。因此,在本发明的一切制剂中磷酸盐缓冲体系是特别优选的。
本发明的药物组合物中的缓冲剂用量主要取决于该制剂使用的具体缓冲剂和希望的pH。对于这种溶液优选的pH范围是大约5-8之间,大约6-7.5是更优选的,pH大约6.9是最优选的。在这些pH值上,缓冲剂的量通常在大约10mM至大约30mM的范围。优选磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的缓冲体系。其它适合的保持希望的大约5至大约8的pH范围的缓冲体系包括但不限于柠檬酸钠/柠檬酸、醋酸钠/醋酸,和本领域已知的任何其它的药学上可接受的pH缓冲剂。
这里可以加入pH-调节剂例如,但并不局限于盐酸、柠檬酸、氢氧化钠,或者其中的任意盐,柠檬酸钠尤其可用于此目的
用于本发明制剂的调节渗透压剂(tonicity agent)是能够提供本发明制剂与人血液等渗的任何试剂。典型适用的调节渗透压剂在本领域是公知的,包括但不局限于氯化钠、甘露糖醇、甘氨酸、葡萄糖和山梨醇。在本发明制剂中作为调节渗透压剂优选采用氯化钠。
脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物,包括但不限于,多山梨醇酯80或多山梨醇酯20是衍生物的例子,它们用作防止红细胞生成素吸附在盛有含红细胞生成素制剂的容器表面的稳定剂。许多种脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物在本领域是公知的并可用于本发明的制剂。本发明制剂中多山梨醇酯20或80的用量范围,对于每mL含1000-100,000IU每瓶红细胞生成素的制剂,大约为0.01至大约1.0mg。本发明制剂中优选使用多山梨醇酯80,更优选使用0.3mg/mL用量的多山梨醇酯80。
氨基酸,包括但不局限于甘氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-2-苯基丙氨酸、L-谷氨酸和L-苏氨酸,用量为0.1g/L至50g/L,优选0.25g/L至20g/L。本发明的制剂中并不优选L-丙氨酸和L-精氨酸,由于它们的掺入引起EPO结构的构象变化。甘氨酸是优选的氨基酸,优选的用量为0.25g/L至20g/L,在含有多山梨醇酯80和无人血清清蛋白的制剂中特别为0.5g/L。甘氨酸是优选的氨基酸,优选的用量为0.5g/L至50g/L,在含有人血清清蛋白和用甲酚防腐的制剂中特别为2.0g/L。在本发明的制剂中,或者L-或者D-异构形式的任何氨基酸均适于使用,除了L-精氨酸和L-丙氨酸。
特别优选的组合物选自表A或表B列出的那些。
表A | ||
处方说明 | 活性成分 | 非活性成分 |
2000IU/ml 不含HSA | 2000IU EPO | 4.38mg氯化钠1.16mg磷酸二氢钠二水合物2.23mg磷酸氢二钠二水合物5.00mg甘氨酸0.30mg多山梨醇酯80注射用水调节剂1.0ml |
4000IU/ml 不含HSA | 4000IU EPO | 4.38mg氯化钠1.16mg磷酸二氢钠二水合物2.23mg磷酸氢二钠二水合物5.00mg甘氨酸0.30mg多山梨醇酯80注射用水调节至1.0mL |
10,000IU/ml 不含HSA | 10000IU EPO | 4.38mg氯化钠1.16mg磷酸二氢钠二水合物2.23mg磷酸氢二钠二水合物5.00mg甘氨酸0.30mg多山梨醇酯80注射用水调节至1.0mL |
40,000IU/ml 不含HSA | 40000IU EPO | 4.38mg氯化钠1.16mg磷酸二氢钠二水合物2.23mg磷酸氢二钠二水合物5.00mg甘氨酸0.30mg多山梨醇酯80注射用水调节至1.0mL |
表B | ||
处方说明 | 活性成分 | 非活性成分 |
10,000多剂量可保藏的w/甲酚 | 10000IU EPO | 6.25mg人血清清蛋白2.91mg磷酸二氢钠二水合物11.19mg磷酸氢二钠十二水合物50.00mg甘氨酸7.50mg m-甲酚注射用水加至2.5ml |
25,000多剂量可保藏的w/甲酚 | 25000IU EPO | 6.25mg人血清清蛋白2.91mg磷酸二氢钠二水合物11.19mg磷酸氢二钠十二水合物50.00mg甘氨酸7.50mg m-甲酚注射用水加至2.5ml |
40,000多剂量可保藏的w/甲酚 | 40000IU EPO | 5.00mg人血清清蛋白2.33mg磷酸二氢钠二水合物8.95mg磷酸氢二钠十二水合物40.00mg甘氨酸6.00mg m-甲酚注射用水加至2.0ml |
令人惊奇地,发现采用磷酸盐缓冲体系、其中含有氨基酸和脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物以及不含尿素或人血液产品的红细胞生成素含水制剂提供稳定的制剂。尤其,含有甘氨酸和多山梨醇酯80的制剂与本领域所述先前的制剂相比提供良好的和未曾预料得到的稳定性。
组合物中存在的红细胞生成素是治疗有效量。″红细胞生成素″应包括那些蛋白质,即具有人红细胞生成素的生物学活性,以及红细胞生成素同型物,红细胞生成素异构体,红细胞生成素类似物,红细胞生成素片段,杂种红细胞生成素蛋白质,上述物质的融合蛋白寡聚物和多聚体、上述物质的同系物,上述物质的糖基化式样变体,和上述物质的突变型蛋白,不考虑上述的生物学活性,并且更不考虑它们的合成或制备方法,包括但不局限于或由cDNA或者基因组DNA、合成、转基因和基因激活方法制备的重组物。红细胞生成素具体例子包括,α型红细胞生成素(EPREX,ERYPO),新型红细胞生成刺激蛋白(NESP)(欧洲专利申请EP640619介绍的一种重组人红细胞生成素(Epoetin)的超糖基化类似物),人红细胞生成素类似物-国际专利申请WO9966054介绍的人血清清蛋白融合蛋白,国际专利申请WO9938890介绍的红细胞生成素突变体,红细胞生成素欧米茄,它可以通过美国专利5,688,679介绍的人红细胞生成素基因的Apa I抑制片段生产,国际专利申请WO9911781介绍的改变了的糖基化人红细胞生成素,WO9805363或美国专利5,643,575介绍了PEG缀合的红细胞生成素类似物。国际专利申请WO9905268和WO9412650介绍了为了内源人红细胞生成素的表达改性的细胞系的具体例子。
红细胞生成素的作用可通过检测血细胞比容监测,目标血细胞比容范围是30-33%。通过监测血细胞比容可以进行剂量调节。一次使用小瓶的红细胞生成素含有2,000,3,000 4,000 10,000,或40,000单位的红细胞生成素(1IU对应于大约8.4纳克重组红细胞生成素)。由于本发明的一项实施方案中的制剂可保藏,并且提供多剂量的优点,制剂优选含有存在于一次使用小瓶中的多个多倍单位数的红细胞生成素。每瓶含有1,000-100,000个单位或更多的红细胞生成素的组合物包括在本发明范围之内。一般地,预计有效量为大约1至500I.U./kg体重,更优选50至300I.U./kg体重,尤其红细胞生成素sc给药时。有效量进一步取决于待治疗受试者的种类和大小,治疗的具体病症或疾病和其严重性,以及给药途径。任何情形下使用的剂量应该对宿主无毒。
令人惊奇地发现红细胞生成素可配制成含有<0.5%甲酚和含有人血清清蛋白和氨基酸作为稳定剂的可保藏的稳定的含水制剂。优选的甲酚量为0.2%-0.5%,最优选0.3%。甘氨酸是优选的氨基酸稳定剂。本发明提供一种甲酚防腐的、磷酸盐缓冲的制剂,形成的浓度为10,000IU/2.5mL,25,000IU/2.5mL,和40,000IU/2.0mL(40K)。较高单位剂量制剂减小了皮下注射的次数并改善了病人的顺应性。
本发明实施例1的数据表明柠檬酸盐或磷酸盐作为缓冲剂的使用和在制剂中m-甲酚的掺入并未引起红细胞生成素的吸收和消化性能及安全性的降低。因此,可以推断新型保藏的多剂量红细胞生成素磷酸盐-缓冲制剂与目前市售的一次使用的制剂可比拟,并且多剂量红细胞生成素可以用于当前证实红细胞生成素可适用的一切适应症。
药动学上比得上一次使用的EPREX制剂,这种新制剂因此希望临床上也是可比拟的。此外,这种磷酸盐-缓冲的多剂量红细胞生成素比一次使用的红细胞生成素小瓶具有潜在的额外的优点;一个优点是经济。使用红细胞生成素治疗贫血或自体血液预沉积(predeposit)需要激素重复给药,每4周一次,每2周一次,每周一次,每周两次,或每周三次。为一次使用设计,必须弃去任何不用部分的一次使用的红细胞生成素;然而,通常采用适当大小的可保藏的多剂量红细胞生成素,弃去的红细胞生成素量会最小化。此外,本发明可保藏制剂的杀菌性能使得其更适于潜在的自我给药,并适于在公共机构治疗许多病人,在保健费用上转化成显著的节省。多剂量红细胞生成素小瓶通过最大限度地减小病人/保健承办人(provider)必须采用高剂量体积的一次使用的小瓶和安瓿的数量,在药物给药上也提供额外的方便。较高浓度(25,000IU/2.5mL和40,000IU/2.0mL)的多剂量红细胞生成素也可最小化注射体积,尤其对于那些需要较高剂量的适应症。多剂量红细胞生成素也可允许单一小瓶用于剂量给药。例如,对于自体供血方案的建议剂量是600IU/kg,每周(7)两次。对于70kg病人,建议给药方案是大约40K,每周两次。在这样的情形下,单个40K小瓶可以用于一次药物给药。
下列的实施例说明本发明,然而并未限制它们。
实施例1
在实施例1说明的研究中选择10,000IU浓度的制剂,因为这种浓度提供合理的,又最大建议的大约1mL的sc注射体积。通过最小化注射体积,较高浓度的多剂量红细胞生成素可能允许减少sc注射部位的数量,它明显有益于改善病人顺应性。
目的:为了比较在磷酸盐缓冲剂中配制的并含有0.3%m-甲酚防腐剂的重组人红细胞生成素(α型红细胞生成素,rhEPO)(10,000IU/mL)与商业上可得到的柠檬酸盐-缓冲的rhEPO制剂(无防腐剂)皮下给药的安全性和药物动力学。
病人和方法
病人
20-38岁之间(平均年龄26.9岁)、体重在60.8-87.4kg之间(平均体重72.3kg)十八名健康志愿者加入并完成此项研究。组I受试者的平均年龄(28.1岁)比组II受试者的平均年龄(25.8岁)略大,尽管并不希望这种差异影响研究结果。加入本研究的受试者血液学和血清化学上无临床上显著异常的检验值。它们具有阴性尿毒理学筛选、HIV筛选和乙型肝炎表面抗原。它们不具有以下任何迹象:高血压(例如,心舒压≥95mmHg);任何原发性血液疾病史;明显的肝脏、肾脏、心血管、胃肠、泌尿生殖器、代谢、神经病学疾病史;贫血或癫痫发作疾病史;已知对源自哺乳动物产品或人血清清蛋白敏感;习惯和过度饮用含咖啡因饮料;参与任何其它的临床试验或在研究登记的30天之内输血或献血;在研究登记的3个月之内服用过rhEPO;在研究登记的七天之内患病;并且研究登记的14天之内在研究前的体格检查或临床实验室评估上具有显著异常。所有受试者适于安全性评价,并且按计划收集用于药动学分析的所有血液标本。所有研究在公共机构伦理学委员会的许可和受试者同意下进行。
研究设计
在健康男性志愿者中这是阶段I,单个中心,开放标签的,随机的,两期交叉研究。十八名受试者随机分配至两个治疗序列组的一组中(9名受试者/组)。在两个独立的给药期内,如大丸剂在大腿上部s.c.注射给予RhEPO。每个给药期通过14-天的消除期分开。对于两个给药期的每一个,受试者在给药之前至少12小时和给药之后72小时限制在研究中心,但是给药期之间不必。表1总结了给药方案。
表1.给药方案和研究设计
组 N 时期1 消除期 时期2
I 9 150IU/kg含m-甲酚防腐剂 14天 150IU/kg无m-甲酚防腐剂
的rhEPO,s.c.一次给药 的rhEPO,s.c.一次给药
II 9 150IU/kg无m-甲酚防腐剂的 14天 150IU/kg含m-甲酚防腐剂
rhEPO,s.c.一次给药 的rhEPO,s.c.一次给药在这项研究中采用两种EPO制剂。α型红细胞生成素(市售为EPREX),在柠檬酸缓冲剂中含有rhEPO 10,000IU/mL。含防腐剂的rhEPO制剂在含m-甲酚防腐剂的磷酸盐缓冲剂中含有rhEPO25,000IU/2.5mL。
血液取样
在EPO给药之前和之后通过直接静脉穿刺术取得一连串血液。为了检测血清红细胞生成素浓度的静脉血液样品(5mL)在给药之前的~30、20和10分钟(3个基线样品)和给药之后大约下列时间取样:30分钟和1,2,5,8,12,15,18,24,30,36,48,60和72小时。每个血清样品分成两个等分试样。所有血清样品在-20℃贮存。血清样品装在干冰上。在第1天、第4天早上的开始给药之前,第16天和第19天早上给药之前,立即进行快速临床实验室检验(血液学、血清化学和尿分析)。
生物分析法
采用一种放射免疫分析(RIA)试剂盒法(Diagnostic SystemsLaboratory[DSL],Webster TX)测量血清红细胞生成素的浓度。商业上可得到的RIA是一种双抗体,竞争性方法采用抗人尿红细胞生成素的兔多克隆抗血清作为原始抗体,并且一种125I-标记的人尿红细胞生成素作为示踪物。α型红细胞生成素代替DSL试剂盒提供的尿红细胞生成素,在标准和定性控制样品中。此分析中采用的标准浓度是7.8,15.6,31.3,50,62.5,100和125mIU/mL。灵敏度,定义为给予可接受精确度的最低标准的平均修合(back-fit)值,是8.6mIU/mL,分析范围经定性控制稀释扩展至2000mIU/mL。
安全性检测
在每次给药(第1天和16天)之前,和每次给药后的6,24,48,和72小时,立即记录生命特征。安全性检测基于不良反应的发生和种类,以及根据基线的临床实验室检验的变化。此外,评价研究前的生命特征(包括血压)测量的变化和体格检查结果。
数据分析
对于给药前基线红细胞生成素浓度,通过从每个给药后值减去平均基线红细胞生成素浓度来校正给药后的血清浓度值,其中平均基线红细胞生成素浓度由平均给药之前30、20和10分钟收集的3个样品的红细胞生成素水平的平均来测定。给药前的血清红细胞生成素浓度并不包括在平均值计算结果之内,如果它们低于分析的量化(quantification)水平。通过由基线红细胞生成素浓度校正的血清浓度数据,测定药动学参数。
药动学参数通过模型独立的方法基于采用BIOAVL软件8.0版的Digital Equipment Corporation VAX 8600计算机系统(ScientificComputer Systems,RWJPRI)计算。测定下列动药学参数:峰值血清浓度(Cmax);到达峰值血清浓度的时间(tmax);借助于线性梯形法则计算的由时间0至最后取血时间的浓度-时间曲线的面积(AUC):(AUC0-72);和由0.693/消除速率常数计算的末端消除半衰期(t1/2)。通过对数-线性浓度-时间图的末端线性区的连续数据点的线性回归估算消除率常数。计算每次治疗的药动学参数的平均、标准偏差(SD),和变异系数(CV)。计算参数平均值(可保藏的制剂/不可保藏的制剂)的比例。
结果
安全性结果
不良结果的发生率在治疗组中是同样地分布(39%,无防腐剂的rhEPO;33%,含防腐剂的rhEPO)。基线或研究前临床实验室检验或血压无临床上显著的变化,并且研究前体格检查结果和生命特征测量上无显著变化。有趣的是治疗后第4天平均总胆红素下降至基线值的几乎-半。然而,这值的降低在两个治疗组中相似,并且平均总胆红素水平保持在正常范围。其它肝功能(碱性磷酸酶,SGOT,SGPT,LDH)检测上的类似变化并不明显。因而,两组治疗组的安全性曲线相似。
药动学结果
在18名受试者中,接受含和不含m-甲酚防腐剂的单一150IU/kgs.c.剂量rhEPO给药之后,平均血清红细胞生成素浓度-时间曲线(未校正基线红细胞生成素水平)在每个检测时间点是可比拟的(图1)。所有受试者具有在正常生理学范围内的给药前基线红细胞生成素浓度(<8.6至22mIU/mL)。
由给药前平均基线红细胞生成素浓度校正的血清数据测定药动学参数(表2)。对于含防腐剂的rhEPO,Cmax范围在低值85mIU/mL至高值558mIU/mL(平均198±123mIU/mL)之间,对于不含防腐剂的rhEPO,范围在61mIU/mL至高值601mIU/mL(平均226±138mIU/mL)之间。明显的,与其它的16名受试者(即,<400mIU/mL)相比,两名受试者异乎寻常地具有高的Cmax值(即,对于含防腐剂的rhEPO的受试者111[558mIU/mL]和对于不含防腐剂的rhEPO的受试者118[601mIU/mL])。当计算不包括这两项值的Cmax时,含和不含防腐剂的rhEPO制剂的平均Cmax值是更相似的(分别为177±89和196±102mIU/mL)。
对于含防腐剂的rhEPO制剂,平均红细胞生成素AUC(0-72hr)是5,754±2,284mIU.h/mL,范围从2,973至11,185mIU·h/mL。同样地,不含防腐剂的rhEPO制剂平均红细胞生成素AUC(0-72hr)是6,521±2,769mIU.h/mL,范围从3,096至14,235mIU.h/mL(表2)。显著的,与其它的16名受试者(即<10,000mIU/mL)相比,两名受试者具有异常的高AUC(0-72hr)值(即,含防腐剂的rhEPO的受试者111[11,185mIU.h/mL],以及不含防腐剂的rhEPO的受试者118[14,235mIU.h/mL])。当计算不包括这两项值的AUC(0-72hr)时,含和不含防腐剂的rhEPO制剂的平均AUC(0-72hr)值更相似(分别为5,460±1960和6,000±2,100mIU/mL)。
含和不含防腐剂的rhEPO的平均tmax是类似的(分别为12±5和13±5h)。两种rhEPO制剂的tmax范围相似(8-24h)。对于含和不含防腐剂的rhEPO制剂,末端的半衰期值相似(分别为20.2±8.1和19.8±6.6h)。
在此研究的两部分(-20h)观测的末端半衰期值类似于文献(11,12)报道过的sc注射之后的那些。然而,这些半衰期值更长于以前观测的iv给药的半衰期(~5h)(11-14)。如果注射部位的吸收速率,而不是消除速率,是限速步骤,这些更长的半衰期不是预料外的。
表2.150IU/kg含和不含0.3%m-甲酚防腐剂的rhEPO s.c.一次给药之后的平均±SD(%CV)药动学参数
参数 含0.3%m-甲酚的 不含0.3%m-甲酚的 比率a
rhEPO rhEPO
Cmax(MiU/mL) 198±123 226±138 0.88
(62.1%) (61.1%)
fmax(hr) 12±5 13±5 0.92
(41.1%) (35.7%)
AUC(10-72)(IU·h/mL) 5.75±2.28 6.52±2.77 0.88
(39.7%) (42.5%)
t1/2(h) 20.2±8.1 19.8±6.6 1.02
(40.2%) (33.2%)
a参数比率,含m-甲酚的rhEPO/不含m-甲酚的rhEPO
尽管本研究在健康男性受试者中进行,在其它病人群体中可预计类似的吸收特征和安全曲线图;例如具有癌症或慢性肾衰的男性或女性病人、小儿肾衰病人、自体预沉积方案的病人或者计划选择手术的病人。
最后,皮下给予一次剂量的含或不含0.3%m-甲酚防腐剂的rhEPO(150IU/kg)对于健康男性受试者是安全和良好耐受的。基于不良反应的比较发生率,临床实验室数值、生命特征和体格检查结果,用和不用防腐剂配制的rhEPO安全曲线是等同价的。对于病人和保健承办人,建议的多种浓度的新型多剂量EPREX可能提供大量的临床应用。
实施例2
用或不用新稳定剂配制的重组人红细胞生成素的两种制剂在一次皮下给予健康受试者之后的比较安全性、耐受性和药动学
目的:比较两种浓度(2,000[目前制备的最低的]和40,000IU/mL[目前制备的最高的])的以新稳定剂(甘氨酸和多山梨醇酯80)配制的磷酸盐缓冲的重组人红细胞生成素(EPREX,α型红细胞生成素,rhEPO)与商业上可得到的采用人血清清蛋白(HSA)作为稳定剂的EPREX制剂的安全性、耐受性和药动学。
患者和方法
患者
年龄在18-35岁(平均年龄21.9岁)之间、体重在57.2-92.3kg(平均体重74.3kg)之间的24名志愿者参加第一项研究。在第一项研究的两组治疗序列组的平均年龄非常接近(21.8和22.0岁),24名受试者中的23名完成了这项研究。一名受试者完成了第一给药期的所有评估但是决定不进行第二给药期。这名仅接受不含新稳定剂的rhEPO的受试者的安全性和耐受性数据,包括在安全性数据中。然而,这名受试者的血清EPO浓度数据不包括在药动学分析中。
又一组年龄在18-40岁(平均年龄23.8岁)之间并且体重在62.2-93.4kg(平均体重73.1kg)之间的24名男性志愿者加入并完成了第二项研究。两组治疗序列组的平均年龄非常接近(24.5和23.1岁)。
所有加入这两项研究的受试者的研究前的血红蛋白不超过16.0g/dL;血液学或血清化学不具有临床上显著的异常实验室数据;具有阴性的尿毒理学筛选,HIV筛选,乙型肝炎表面抗原和丙型肝炎抗体。受试者无高血压症状(例如,坐位心舒压>95mmHg);无任何原发性血液疾病史;无明显的肝脏、肾脏、心血管、胃肠、泌尿生殖器、代谢、或神经病学疾病史;无贫血或癫痫发作疾病史;受试者对源自哺乳动物产品或HSA不敏感;不习惯和过度饮用含咖啡因饮料;非严重吸烟者(>10支香烟/天);未参与任何其它的临床试验或在研究登记的90天之内输血或献血;在研究登记的3个月之内未服用过rhEPO。所有受试者适于安全性评价,并且按计划收集用于药动学分析的所有血液标本。所有研究在公共机构伦理学委员会的许可和患者同意下进行。
研究设计
两项研究在健康男性志愿者中是阶段I,单一中心,双盲,随机,两期交叉研究。每一项研究中,24名受试者随机分配至两组治疗序列组中的一组(12名受试者/组)。在两个独立的给药期内如大丸剂在大腿上部s.c.注射给予EPO。对于两个给药期的每一个,受试者在给药之前12小时和给药之后至少36小时限制在研究中心。为了必需的评估和取血,在限制期之外受试者返回研究中心。每个给药期通过28天的消除期隔开。给药期之间不必限制受试者(3-29天)。表3总结了给药方案。
表3.给药方案和研究设计
组 N 1期(第1天) 消除期 2期(第30天)
I 12 150IU/kg无新稳定剂的 28天 150 IU/kg含新稳定剂的
rhEPO(2,000IU/mL) s. rhEPO(2,000IU/mL) s.
c.一次给药 c.一次给药
II 12 150IU/kg含新稳定剂的 28天 150IU/kg无新稳定剂的
rhEPO(2,000IU/mL) s. rhEPO(2,000IU/mL) s.
c.一次给药 c.一次给药
III 12 750IU/kg无新稳定剂的 28天 750IU/kg含新稳定剂的
rhEPO(40,000IU/mL)s. rhEPO(40,000IU/mL)s.
c.一次给药 c.一次给药
Iv 12 750IU/kg含新稳定剂的 28天 750IU/kg无新稳定剂的
rhEPO(40,000IU/mL)s. rhEPO(40,000IU/mL)s.
c.一次给药 c.一次给药
在每项研究中采用两种EPO制剂。在第一项研究中采用2,000IU/mL(2K)浓度、含HSA作稳定剂的EPO和2K浓度的含甘氨酸和多山梨醇酯80作为新稳定剂的磷酸盐缓冲的rhEPO新制剂。在第二项研究中采用40,000IU/mL(40K)浓度、含HSA作为稳定剂的EPO和40K浓度的含新稳定剂的磷酸盐缓冲的rhEPO新制剂。
血液取样
通过直接静脉穿刺术在EPO给药之前或之后采集一连串血液;不采用肝素固定(lock)。为了检测血清红细胞生成素浓度的静脉血液样品(5mL)在给药之前的~30、20和10分钟(3个基线样品)和给药之后大约下列时间取样:0.5,1,2,5,8,12,15,18,24,30,36,48,60和72小时(所有组)。第二项研究的受试者在96,120,144和168小时进行额外的血液样品取样。每个血清样品分成两个等分试样。所有血清样品在-20℃贮存。血清样品装在干冰上。在第1天、第4天早上的开始给药之前,第30天和第33天早上给药之前,立即进行快速实验室检验(血液学、血清化学和尿分析)。
生物分析法
在LabCorp进行血清红细胞生成素水平样品分析。采用一种放射免疫分析(RIA)试剂盒法(Diagnostic Systems Laboratory(DSL),Webster,TX制造)测量血清红细胞生成素的浓度。商业上可得到的RIA是一种双抗体、竞争性方法,它采用抗人尿红细胞生成素的兔多克隆抗血清作为原始抗体,并且一种125I-标记的人尿红细胞生成素作为示踪物。通过在标准和定性控制样品中α型红细胞生成素代替尿红细胞生成素进行DSL试剂盒的改性。此分析中采用的标准浓度是7.8,15.6,31.3,50,62.5,100和125mIU/mL。灵敏度,定义为给予可接受精确度的最低标准的平均修合(back-fit)值,是7.8mIU/mL,分析范围经定性控制稀释扩展至5,000mIU/mL。
安全性检测
在每次给药(第1天和30天)之前,和每次给药后的6,24,30,36,48,60和72小时,立即记录生命特征。安全性检测基于不良反应的发生和种类,以及根据基线的临床实验室检验的变化(直至给药后72小时)。此外,评价研究前的生命特征(包括血压)测量的变化和体格检查结果。
耐受性检测
评定注射部位耐受性的试验在每次注射给药后45分钟(第1和30天)给药。每次给药分成3,4或5次注射,评定最疼痛的注射部位。有两种疼痛尺度:由10cm未分等级的水平线组成的视觉模拟尺度(VAS),和口述描述尺度(VDS);由五个垂直放置的毗连说明的箱子组成。VAS尺度的端点范围从″不疼″至″我能想像出的最坏的″,VDS尺度的端点范围从″不疼″至″非常严重的疼痛″。然后询问受试者疼痛的持续时间。如果疼痛持续超过45分钟,耐受性试验以小时计的间隔进行直至恢复正常。
数据分析
对于给药前基线红细胞生成素浓度,通过从每个给药后值减去平均基线红细胞生成素浓度来校正给药后的血清浓度值,其中平均基线红细胞生成素浓度由平均给药之前大约30、20和10分钟收集的3个样品的红细胞生成素水平测定。给药前的血清红细胞生成素浓度并不包括在平均值计算结果之内,如果它们低于分析的量化水平。通过由基线红细胞生成素浓度校正的血清浓度数据,测定药动学参数。
药动学参数通过采用WinNonlin软件1.1版(ScientificConsulting,Inc.)的模型独立的方法计算。测定下列药动学参数:峰值血清浓度(Cmax);到达峰值血清浓度的时间(tmax);借助于线性梯形法则计算的由时间0至最后取血时间的浓度-时间曲线的面积(AUC):(AUC(0-72))[组I和II]和(AUC(0-168))[组III和IV];和由0.693/消除速率常数计算的末端消除半衰期(t1/2)。通过对数-线性浓度-时间图的末端线性区的连续数据点的线性回归估算消除率常数。在回归中采用最小的三个数据点。对于相关系数小于0.975的那些,相应的t1/2值EPO中并未报道(EPOrted)。计算每次治疗的药动学参数的平均、标准偏差(SD),和变异系数(CV)。计算药动学参数平均值(含新稳定剂的rhEPO/不含新稳定剂的rhEPO)的比例。
对原始和对数-转换的生物利用度参数、AUC进行统计学分析。方差模型分析拟合到原始AUC数据和对数-转换的AUC数据作为从属的变量,而归因于治疗序列组的效果、序列组内嵌套的受试者、治疗和周期作为预示变量。治疗序列组效果试验通过采用归因于序列组内嵌套受试者的作为误差项的均方在10%水平进行。周期作用采用残留误差项在5%水平试验。采用以上模型的误差均方以评估受试者内变异性。采用评估过的以上模型的最小二乘方和受试者内变异性,以便对该比例的含新稳定剂的EPREX平均值/含HSA的EPREX平均值构建90%置信区间。以先前研究获得的40%CV为基准,24名受试者的样本大小对于评估90%置信度的真值在±20%内的比例是足够的。分别报道原始和转换的Cmax、tmax和t1/2。
作为无正交(planned)的统计学分析,三个局部耐受性参数借助于交叉试验方法(11)分析。在能够进行统计学试验之前,VAS值和疼痛持续时间值转换至标准化。采用SAS之内的Proc glm对已转换的VAS和疼痛持续时间值进行交叉分析。研究方案指定了28-天消除期以消除给药期之间的转入(carry-over)的可能性。因此,计算的结果基于标准交叉模型,不具有转入效应。以VDS评估的疼痛结果借助于Wilcoxon-Mann-Whitney秩和(rank sum)检验,按照Koch等人介绍的对交叉试验的方法分析(12)。简言之,这种方法包括排列试验中所有受试者的时期差异,接着对于两组序列组之间的差异采用Wilcoxon-Mann-Whitney检验。
结果
安全性结果
不良反应的总发生率均匀地分布在所有治疗组中。对于2K浓度发生率是63%(无新稳定剂的rhEPO)和61%(含新稳定剂的rhEPO)并且对于40K浓度是54%(无新稳定剂的rhEPO)和46%(含新稳定剂的rhEPO)。所有不良反应是短暂的并且可无需干预解决,除了对乙酰氨基酚之外,由于温和的头痛或温和的流行性感冒状综合症它被给予五名受试者(三名接受2KrhEPO,两名接受40KrhEPO)。所有组中报道EPO(EPOrted)最频繁的不良反应是头痛。
被分类为可能涉及到接受40K浓度rhEPO受试者的研究药物的不良反应包括:肌肤甲错(n=4),头痛(n=2),肌痛(n=1),和疲劳(n=1)。在接受2K浓度rhEPO的受试者中,可能涉及到研究药物的不良反应包括头痛(n=2)和疲劳(n=2)。四例报道过的EPO(EPOrts)皮疹均发生在含新稳定剂的rhEPO给药后三和八天之间;所有反应都是温和的并且在两至三天之内得到解决。除了四例报道的皮疹之外,在这种类型和发生率的不良反应中,以任何一种制剂对于两种rhEPO浓度,未注意到临床上显著的差异。研究药物给药后,以任何一种制剂对于两种rhEPO浓度,头四天内在临床实验室检验、血压、体格检查结果和生命特征测定方面无临床上显著变化。在所有治疗组中,与基线相比在第4天观察到网状细胞略微升高。伴随地,在所有组中,与基线相比在第4天观察到淋巴细胞略微下降。所有治疗组从基线至第4天在平均总胆红素上有显著降低。在研究的头四天观察到血清化学参数上较小的变化;然而,没有一个被认为是临床显著的。因而,所有四个治疗组的安全性曲线图类似。
耐受性结果
150IU/kg含和不含新稳定剂的rhEPO(2K)s.c.一次给药之后的平均VAS值不存在显著差异(p=0.608)。同样地,750IU/kg含和不含新稳定剂的rhEPO(40K)s.c.一次给药之后的平均VAS值不存在显著差异(p=0.402)。当通过Wilcoxon氏秩和检验评估VDS疼痛严重性时,两种制剂之间对于组I和组II的受试者不存在显著性差异(p=0.610),对于组III和IV的受试者也不存在(p=0.581)。
对于所有研究药物给药的总的平均疼痛持续期间,组I和II受试者是1.01分钟,组III和IV受试者是3.03分钟。对于组I和II受试者,一般报道疼痛持续期间持续3分钟或更少,对于组III和IV受试者是2分钟或更少。疼痛持续期间的结果与对其它耐受性参数已获得的一致。注射后接受含和不含新稳定剂的EPREX的组I和II(p=0.159)和组III和IV(p=0.951)受试者之间,未观察到在疼痛持久性上有统计学上的显著性差异。
接受两种不同浓度的α型红细胞生成法之间的疼痛对照启示在组I和II中研究药物(2K rhEPO)所有给药之后报道有疼痛。相反地,报道在组III和组IV受试者(40K rhEPO)s.c.给药(50%)48名中24名根本无疼痛。此外,一次150IU/kg给药剂量的rhEPO(2K)之后的平均疼痛值(VAS,VDS)大于一次750IU/kg给药剂量的rhEPO(40K)后的值。然而,报道一次150IU/kg给药剂量的rhEPO(2K)之后比一次750IU/kg给药剂量的rhEPO(40K)之后的疼痛发生率更高以及有更高的平均疼痛值。这可能是因为在组I和II中为了获得需要的剂量,每次研究药物给药时多次注射是必需的,这归因于与组III和IV中使用的制剂(40K)相比,此处为弱制剂(2K)。还应注意的是,组I和II受试者给药使用的针比组III和IV受试者使用的更狭窄和更易曲,这使得s.c.注射给药更困难。最后,组III和IV(40K)的平均疼痛持续期间比组I和II(2K)的更长,但是这可能归因于接受40K强度rhEPO的两名个体在两种治疗之后,与所有治疗组中的所有受试者相比具有更长的持久疼痛。
药动学结果
接受含和不含新稳定剂的、接受或者150IU/kg rhEPO(组I和II)s.c.一次给药或者750IU/kg rhEPO(组III和IV)s.c.一次给药之后,所有受试者的平均血清红细胞生成素浓度-时间曲线如分别图2和3所示(未校正基线红细胞生成素浓度)。所有受试者(n=48)具有在正常生理学范围内(<7.8至32mIU/mL)的给药前基线红细胞生成素浓度。在含和不含新稳定剂的150IU/kg rhEPO(2K)s.c.一次给药之后,第4天的平均血清红细胞生成素水平(分别为36±11和33±11mIU/mL)接近给药前内源性红细胞生成素的平均水平(分别为16±6和16±7mIU/mL)。类似地,在含和不含新稳定剂的750IU/kgrhEPO(40K)s.c.一次给药之后,第7天的平均血清红细胞生成素水平(分别为26±9和23±7)也接近给药前内源性红细胞生成素的平均水平。
对给药前平均基线红细胞生成素浓度校正的血清数据测定药动学参数。在组I和II中,对于含新稳定剂的、150IU/kg rhEPO(2K)s.c.一次给药之后,Cmax范围在低值86.6mIU/mL至高值681mIU/mL(平均222±128mIU/mL)之间,而对于不含新稳定剂的rhEPO为119mIU/mL至高值377mIU/mL(平均226±79mIU/mL)(表4)。一名接受含新稳定剂的150IU/kg rhEPO(2k)一次给药剂量的受试者具有异常高的Cmax值,一名在同样组内的受试者具有异常低的Cmax值。并不知晓这些异常的Cmax值的原因。在组III和IV中,含新稳定剂的rhEPO(40K),750IU/kg s.c.一次给药之后,Cmax值范围在低值1194mIU/mL至高值4334mIU/mL(平均2978±808mIU/mL,而对于不含新稳定剂的rhEPO为1892mIU/mL至高值3997mIU/mL(平匀3065±705mIU/mL)(表5)。对于2K和40K浓度的、含和不含新稳定剂的rhEPO制剂,Cmax之间无统计学上显著性差异(p<0.05)。
在组I和II,150IU/kg含新稳定剂的rhEPO(2K)s.c.一次给药之后,AUC(0-72)从低值3238至高值11,318(平均6647±2488mIU.h/mL)。类似地,150IU/kg不含新稳定剂的rhEPO(2K)s.c.一次给药之后,AUC(0-72)从低值4234至高值10,968(平均6983±1855mIU.h/mL)(表4)。组III和IV中,750IU/kg含新稳定剂的rhEPO(40K)s.c.一次给药之后,AUC(0-168)从低值48,347至高值136,290(平均102,768±21,500mIU.h/mL)。类似地,750IU/kg不含新稳定剂的rhEPO(40K)s.c.一次给药之后,AUC(0-168)从低值69,537至高值136,689(平均104,897±15,781mIU.h/mL)(表5)。对于2K和40K浓度的、含和不含新稳定剂的rhEPO制剂,Cmax之间无统计学上显著性差异(p<0.05)。明显的,含新稳定剂的rhEPO(40K)与不含新稳定剂的rhEPO(40K)之间,治疗序列作用统计学上是显著的。
含和不含新稳定剂的150IU/kg rhEPO(2K)s.c.一次给药之后,平均tmax相似(分别为17.4±7.3和15.4±7.5hr)(表4)。同样地,含和不含新稳定剂的750IU/kg rhEPO(40K)s.c.一次给药之后,平均tmax分别为16.7±6.8和16.6±4.8hr(表5)。对于两种2KrhEPO制剂的tmax范围是8-30小时。对于40,000IU/mL rhEPO浓度,含新稳定剂的制剂的tmax范围为8-36小时,不含新稳定剂的制剂tmax范围为12-30小时。
尽管组I和II中仅仅小百分比的受试者报道了末端半衰期值,含和不含防腐剂的150IU/kg rhEPO(2K)s.c.一次给药之后所得的值是类似的(分别为19.7±12.8和20.1±10.4hr)。750IU/kg rhEPO(40K)s.c.一次给药之后,组III和IV的受试者中含和不含防腐剂的末端半衰期值类似(分别为25.7±14.9和23.8±11.8hr)。
表4.150IU/kg含和不含新稳定剂的rhEPO(2,000IU/mL)s.c.一次给药之后平均±SD(%CV)药动学参数
组I和II
不含新稳定剂的 含新稳定剂的 90%置信区间
参数 rhEPO rhEPO 比例a
Cmax(mIU/mL) 226±79 222±128 0.98 NDb
(34.5%) (57.4%)
tmax(hr) 15.4±7.5 17.4±7.3 1.13 ND
(49.0%) (41.8%)
AUC(0-72) 6983±1859 6642±2488 0.95 83.5-107c
(mIU·h/mL) (26.6%) (37.4%) 81.1-105d
a参数比例,含新稳定剂的rhEPO/不含新稳定剂的rhEPO
b未测定
c原始数据
d对数-转换数据
表5.750IU/kg含和不含新稳定剂的rhEPO(40,000IU/mL)s.c.一次给药之后平均±SD(%CV)药动学参数
组III和IV
不含新稳定剂的 含新稳定剂的 90%置信区间
参数 rhEPO rhEPO 比例a
Cmax(IU/mL) 3065±705 2978±808 0.97 NDb
(23.0%) (27.1%)
tmax(hr) 16.6±4.8 16.7±6.8 1.00 ND
(29.1%) (40.7%)
AUC(0-168) 104,897±15,781 102,768±21,500 0.98 91.6-104c
(mIU·h/mL) (15.0%) (20.8%) 89.8-104d
a参数比例,含新稳定剂的rhEPO/不含新稳定剂的rhEPO
b未测定
c原始数据
d对数-转换数据
含甘氨酸和多山梨醇酯80作为新蛋白质稳定剂的EPREX制剂提供了适于病人和保健承办人的目前已证实的EPREX适用的所有适应症的选择性制剂。各种浓度的(即,2K,4K,10K,和40K)含新稳定剂的EPO与所有各种浓度的(即,2K,4K,10K,和40K)含HSA的EPO可互换地使用。
实施例3
两种制剂一次皮下给予健康受试者重组人红细胞生成素之后药动学、安全性和耐受性研究
目的:比较以磷酸盐或柠檬酸盐缓冲的重组人红细胞生成素(α型红细胞生成素,rhEPO)两种制剂皮下单次给药剂量的药动学、耐受性和安全性并评估缓冲成分诱导疼痛的显著性。
患者和方法
患者
18-40岁之间(平均年龄27岁)、体重62.6-82.2kg(平均体重70.1kg)的十八名健康志愿者加入并完成此项研究。加入此项研究的受试者血液学或血清化学上无临床显著的异常检验值;具有阴性的尿毒理学筛选、HIV筛选和乙型肝炎表面抗原。受试者无高血压迹象(例如,心舒压>95mmHg);无任何原发性血液疾病史;明显的肝脏、肾脏、心血管、胃肠、泌尿生殖器、代谢、或神经病学疾病史;有贫血或癫痫发作疾病史;已知对源自哺乳动物产品或人血清清蛋白敏感;在过去两年期间具有酒精或药物滥用史;受试者不习惯和过度饮用含咖啡因饮料;受试者未参与任何其它的临床试验或在研究登记的30天之内输血或献血;受试者在研究登记的3个月之内未服用过rhEPO;受试者在研究登记七天之内无疾病;并且受试者在研究登记的14天之内在研究前体格检查或临床实验室评估上无明显异常。所有受试者适于安全性评价,并且按计划收集用于药动学分析的所有血液标本。所有研究在公共机构伦理学委员会的许可和患者同意下进行。
研究设计
在健康男性志愿者中这是阶段I,单个中心,开放标签的,随机的,两期交叉研究。十八名受试者随机分配至两个治疗序列组的一组(9名受试者/组)。在两个独立的给药期内,如大丸剂在大腿上部s.c.注射给予RhEPO。每个给药期通过14-天的消除期分开。对于两个给药期的每一个,受试者在给药之前至少12小时和给药之后72小时限制在研究中心。表6总结了给药方案。
表6.给药方案和研究设计
组 N 1期 消除期 2期
I 9 150IU/kg含磷酸盐缓冲剂的 14天 150IU/kg含柠檬酸盐缓冲剂
rhEPO,s.c.一次给药 的rhEPO,s.c.一次给药
II 9 150IU/kg含柠檬酸盐缓冲剂 14天 150IU/kg含磷酸盐缓冲剂的
的rhEPO,s.c.一次给药 rhEPO,s.c.一次给药
此项研究采用两种EPO制剂。在柠檬酸盐缓冲剂中制备的α型红细胞生成素(市售为EPREX,10,000IU/mL)和在磷酸盐缓冲剂中制备的rhEPO新制剂(10,000IU/mL)。两种制剂都是由Ortho McNeilJanssen药物有限公司Ortho生物制剂部制备(Manati,PuertoRico)。
血液取样
通过直接静脉穿刺术在EPO给药之前和之后采集一连串的血液;不采用肝素固定。为了检测血清红细胞生成素浓度的静脉血液样品(5mL),在给药之前的~30、20和10分钟(3个基线样品)和给药之后大约下列时间取样:30分钟和1,2,5,8,12,15,18,24,48,和72小时。每个血清样品分成两个等分试样。所有血清样品在-20℃贮存。
血清样品装在干冰上。在第1天、第2天早上开始给药之前,第16天和第17天早上给药之前,立即进行快速临床实验室检验(血液学、血清化学和尿分析)。
生物分析法
在RWJPRI进行对血清红细胞生成素水平的样本分析。采用一种放射免疫分析(RIA)试剂盒法(Diagnostic SystemsLaboratory(DSL),Webster,TX制造)测量血清红细胞生成素的浓度。商业上可得到的RIA是一种双抗体、竞争性方法,它采用抗人尿红细胞生成素的兔多克隆抗血清作为原始抗体,并且一种125I-标记的人尿红细胞生成素作为示踪物。通过在标准和定性控制样品中用α型红细胞生成素代替尿红细胞生成素,将DSL试剂盒改性。此分析中采用的标准浓度是7.8,15.6,31.25,50,62.5,100和125mIU/mL。灵敏度,定义为给予可接受精确度的最低标准的平均修合值,是8.6mIU/mL,分析范围经定性控制稀释扩展至2,000mIU/mL。
安全性检测
在每次给药(第1天和16天)之前,和每次给药后的6,24,48,和72小时,立即记录生命特征。安全性检测基于不良反应的发生和种类,以及根据基线的临床实验室检验变化。此外,评价研究前的生命特征(包括血压)测量的变化和体格检查结果。
耐受性检测
评定注射部位耐受性的试验在给药日每次注射后45分钟进行。有两种疼痛尺度:由10cm未分等级的水平线组成的视觉模拟尺度(VAS),和由五个垂直放置的毗连说明的箱子组成的口述描述尺度(VDS)。VAS尺度的端点范围从″不疼″至″我能想像出的最坏的″,VDS尺度的端点范围从″不疼″至″非常严重的疼痛″。此外,询问受试者疼痛的持续时间。
数据分析
对于给药前基线红细胞生成素浓度,通过从每个给药后值减去平均基线红细胞生成素浓度来校正给药后的血清浓度值,其中平均基线红细胞生成素浓度由平均给药之前30、20和10分钟收集的3个样品的红细胞生成素水平测定。给药前的血清红细胞生成素浓度并不包括在平均值计算结果之内,如果它们低于分析的量化水平。通过由基线红细胞生成素浓度校正的血清浓度数据,测定药动学参数。
药动学参数通过模型独立的方法基于采用BIOAVL软件8.0版的Digital Equipment Corporation VAX 8600计算机系统(ScientificComputer Systems,RWJPRI)计算。测定下列药动学参数:峰值血清浓度(Cmax);到达峰值血清浓度的时间(tmax);借助于线性梯形法则计算的由时间0至最后取血时间浓度-时间曲线的面积(AUC)(AUC0-72);和由0.693/消除速率常数计算末端消除半衰期(t1/2)。通过对数-线性浓度-时间图的末端线性区的连续数据点的线性回归估算消除率常数。在回归中采用最小的三个数据点。对于具有确定系数(r2)<0.95的那些回归,相应的t1/2值并未报道。计算每次治疗的药动学参数的平均、标准偏差(SD),和变异系数。计算药动学参数平均值(磷酸盐/柠檬酸盐)的比例。
对原始和对数-转换的生物利用度参数进行统计学分析。方差模型分析拟合到具有一种有意义的生物利用度的数据(AUC,原始或对数-转换的Cmax)作为从属的变量,而归因于治疗序列组的效果、序列组内嵌套的受试者、治疗和周期作为预示变量。治疗序列组效果检验通过采用归因于序列组内嵌套受试者的作为误差项的均方在10%显著性水平进行。周期和治疗作用采用残留误差项在5%显著性水平试验。采用以上模型的误差均方以评估受试者内变异性。采用评估过的受试者内变异性,以便对含磷酸盐缓冲剂的rhEPO与含柠檬酸盐缓冲剂的rhEPO的平均生物利用度参数的比例构建90%置信区间。
对于三个耐受性参数进行统计学分析。进行统计学检验之前,VAS值和疼痛持续时间值转换至标准化。所有三个参数通过交叉检验法分析。采用SAS之内Proc glm对已转换的VAS和疼痛持续时间值进行交叉分析。研究方案指定了14-天消除期以消除两个给药期之间的转入的可能性。因此,计算的结果基于标准交叉模型,不具有转入效应。以VDS评估的疼痛结果借助于Wilcoxon-Mann-Whitney秩和检验,按照Koch等人介绍的对交叉试验的方法分析。简言之,这种方法包括排列试验中所有受试者的时期差异,接着对于两组序列组之间的差异采用Wilcoxon-Mann-Whitney检验。
结果
安全性结果
两个给药期内报道了六名受试者的六例临床不良反应(AEs):接受柠檬酸盐缓冲的制剂后报道了两名受试者的两例AEs(11%),接受磷酸盐缓冲的药物制剂后报道了四名受试者的四例AEs(22%)。柠檬酸盐缓冲的制剂注射之后两例报道过的AEs均在呼吸系统内(即,咽炎和窦炎)。磷酸盐缓冲的制剂注射之后四例报道过的AEs包括:肌肉痉挛、头痛、腿疼和皮炎。两组的所有AEs分类为温和的并本质上是短暂的。
在所有受体中在两次注射两种制剂日之后观测到总血清胆红素浓度的下降。两个观察日内,平均总胆红素降至给药前基线值的几乎一半。然而,这种下降的尺度在两个治疗组中相似,并且平均总胆红素水平保持在正常范围之内。这种下降显示是短暂的,由于两个给药前基线值(16天分隔)非常相似。并未观察到其它肝功能(碱性磷酸酶,SGOT,SGPT,LDH)检测上的类似变化。
除了在总血清胆红素上有未曾预期的降低之外,给药后头两天在体格检查、临床实验室检验、血压和生命特征测量上无临床上显著变化。从而,这两个治疗组的安全性曲线图类似。
耐受性结果
在每期期间的一组,两名接受柠檬酸盐缓冲制剂的患者具有失去疼痛记录。与所有16名柠檬酸盐注射的34.3±28.6mm相比,所有18名磷酸盐注射的平均VAS值是21.5±27.5mm(p=0.0692)。而磷酸盐溶液之后的疼痛感觉不须依赖于注射时期,柠檬酸盐制剂之后的疼痛,在I期比在II期感觉更严重(39.3±31.7mm对29.4±26.3mm)。
这两种制剂VDS严重性之间的差异统计学上显著(p=0.0339)。磷酸盐缓冲制剂给药之后,十三名受试者(72%)没有任何或仅有温和的疼痛,五名受试者(28%)在磷酸盐缓冲制剂给药之后具有中等的/严重的非常严重的疼痛。柠檬酸盐缓冲制剂给药之后相应的记录分别是8(44%)和10(56%)名受试者。此外,当序列是柠檬酸盐/磷酸盐时感觉到VDS疼痛感觉略微更严重。
柠檬酸盐缓冲制剂给药之后的疼痛持续时间(1.5±2.0分钟)显著(p=0.0057)长于磷酸盐缓冲过的制剂给药后的疼痛持续时间(0.4±0.5分钟)。而I期期间的差异已是明显的(平均0.8对0.3分钟),II期期间的差异变得相当明显(平均2.2对0.5分钟),即,正接受柠檬酸盐的受试者已经接受过磷酸盐溶液时。明显地,I期期间两种药物制剂有一个失去记录。本项研究证明,标准EPREX制剂(含柠檬酸盐)在注射部位产生比使用磷酸盐作为缓冲剂的制剂更显著的疼痛。当试验序列是与磷酸盐/柠檬酸盐相对的柠檬酸盐/磷酸盐时,柠檬酸盐诱导的疼痛的感觉更强烈,表明基准体验会修正疼痛知觉。至于疼痛持续时间,两种制剂之间存在极显著的差异(p=0.0057),然而,当序列是磷酸盐/柠檬酸盐时,此背景下感觉到柠檬酸盐诱导的疼痛较长。
药动学结果
在18名受试者中,接受柠檬酸盐或磷酸盐缓冲过的150IU/kgrhEPO s.c.一次给药之后,平均血清红细胞生成素浓度-时间曲线(未校正基线红细胞生成素水平)是相似的(图4)。所有受试者具有在正常生理学范围内的给药前基线红细胞生成素浓度(<8.6至18mIU/mL)。
由校正了给药前平均基线红细胞生成素浓度的血清数据测定药动学参数(表7)。对于含柠檬酸盐缓冲剂的rhEPO,Cmax范围在低值74mIU/mL至高值583mIU/mL(平均260±169mIU/mL)之间,对于有磷酸盐缓冲剂的rhEPO,Cmax值为64mIU/mL至高值642mIU/mL(平均245±167mIU/mL)。每组中少数受试者具有异常的高Cmax值。在两种制剂的Cmax之间无统计学上显著性差异(p>0.05)。对于含柠檬酸盐的rhEPO制剂,平均红细胞生成素AUC(0-72h)是7,992±3,319mIU.h/mL,范围从3,215至13,077mIU.h/mL。类似地,含磷酸盐缓冲剂的rhEPO制剂具有的平均红细胞生成素AUC(0-72h)是8,059±4,021mIU.h/mL,范围从3,445至17,996mIU.h/m L.(表7)。在两种制剂之间的AUC(0-72h)上不存在统计学上显著性差异(p>0.05)。对于含柠檬酸盐和磷酸盐缓冲剂的rhEPO,平均tmax类似(分别为14±5和17±10hr)。对于两种rhEPO制剂,tmax范围相似(8-24hr)。对于含柠檬酸盐和磷酸盐缓冲剂的rhEPO,平均末端半衰期值类似(分别为13.4±10.8和19.7±14.9hr)。
表7.150IU/kg含柠檬酸盐和磷酸盐缓冲剂的rhEPO s.c.一次给药之后平均±SD(%CV)药动学参数
参数 含磷酸盐缓冲剂的 含柠檬酸盐缓冲剂的 比例a 90%置信区间
rhEPO rhEPO
Cmax(mIU/mL) 245±167 260±159 0.94 73.3-115.2b
(68.1%) (61.0%) 77.1-111.0c
tmax(hr) 17±10 14±5 1.21 NDd
(57.7%) (39.4%)
AUC(0-72) 8.06±4.02 7.99±3.32 1.01 84.3-117.3c
(mIU·h/mL) (49.9%) (41.5%) 87.0-112.4d
t1/2(hr) 19.7±14.9 13.4±10.8 1.47 ND
(75.7%) (80.5%)
a参数比例,含磷酸盐缓冲剂的rhEPO/含柠檬酸盐缓冲剂的rhEPO
b原始数据
c对数-转换数据
d未测定
参考文献
1.Koury ST.Bondurat MC,Koury MJ.(1988)Localization oferythropoietin synthesizing cells in murine kidneys by in situhybridization.Blood 71:524-527.
2.Jacobs K,Shoemaker C,Rudersdorf R,Neill SD,Kaufman RJ,MufsonA,et al.(1985)lsolation and characterization of genomic and cDNAclones of human erythropoietin.Nature 313:806-810.
3.Lin FK,Suggs S,Lin Ck,Browne JK,Smalling R,Egrie JC,et al.(1985)Cloning and expression of the human erythropoietin gene.ProcNatl Acad Sci USA 82:7580-7584.
4.Jelkmann W.(1992)Erythropoietin:structure,control ofproduction,and function.Physiol Rev 72:449-489.
5.Egrie JC,Browne JK,Lai P,Lin FK.(1986)Characterization andbiological effects of recombinant human erythropoietin.Immunobiology 172:213-224.
6.Faulds D,Sorkin EM.(1989)Epoetin(Recombinant HumanErythropoietin):A review of its pharmacodynamic andpharmacokinetic properties and therapeutic potential in anemia and thestimulation of erythropoiesis Drugs 38:863-899.
7.Markham A,Bryson HM.(1995)Epoetin alfa:A review of itspharmacodynamic and pharmacokinetic properties and therapeutic usein nonrenal applications Drugs 49:232-254.
8.Breymann C,Bauer C,Major A,et al.(1996)Optimal timing ofrepeated rh-erythropoietin administration improves its effectiveness instimulating erythropoiesis in healthy volunteers.Brit J Heamatol92:295-301.
9.Granolleras C,Leskopf W,Shaldon S,Fourcade J.(1991)Experienceof pain after subcutaneous administration of different preparations ofrecombinant human erythropoietin:a randomized,double-blindcrossover study.Clin Nephrol 36:294-298.
10.Frenken LA,Van Lier HJ,Jordans JG,et al.(1993)Identification ofthe component part in an epoetin alfa preparaion that causes pain aftersubcutaneous inject.Am J Kidney Dis 22:553-556.
11.Halstenson CE,Macres M,Katz SA,et al.(1991)ComparativePharmacokinetics and pharmacodynamics of epoetin alfa and epoetinbeta.Clin Pharmacol Ther 50:702-712.
12.Ateshkadi A,Johnson CA,Oxton LL,Hammond TG,Bohenek WS,Zimmerman SW.(1993)Pharmacokinetics of intraperitoneal,intravenous,and subcutaneous recombinant human erythropoietin inpatients on continuous ambulatory peritoneal dialysis.Am J KidneyDis 21:635-642.
13.McMahon FG,Vargas R,Ryan M,et al.(1990).Pharmacokinetics andeffects of recombinant human erythropoietin after intravenous andsubcutaneous injections in healthy volunteers.Blood 76:1718-1722.
14.Salmonson T,Danielson BG,Wikstrom B.(1990)Thepharmacokinetics of recombinant human erythropoietin afterintravenous and subcutaneous administration to healthy subjects.Brit Jclin Pharmacol 29:709-713.
Claims (97)
1.一种红细胞生成素药物制剂,它包含:
(a)pH缓冲剂;
(b)稳定量的脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物;
(c)稳定量的氨基酸;
(d)药用量的红细胞生成素;和
其中该制剂不含尿素或人血液产品。
2.权利要求1的制剂,其中的制剂是含水的。
3.权利要求1的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
4.权利要求1的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
5.权利要求3的制剂,其中的pH缓冲剂提供6至7.5的pH。
6.权利要求5的制剂,其中的pH缓冲剂提供6.9的pH。
7.权利要求1的制剂,其中的pH缓冲剂选自磷酸二氢钠/磷酸氢二钠、柠檬酸钠/柠檬酸和醋酸钠/醋酸。
8.权利要求7的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
9.权利要求8的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
10.权利要求9的制剂,其中的pH缓冲剂提供6至7.5的pH。
11.权利要求10的制剂,其中的pH缓冲剂提供6.9的pH。
12.权利要求1的制剂,其中的脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物选自多山梨醇酯80和多山梨醇酯20。
13.权利要求1的制剂,其中的氨基酸是甘氨酸。
14.权利要求1的制剂,其进一步含有调节渗透压剂(tonicityagent),其中该调节渗透压剂选自氯化钠、甘露糖醇、甘氨酸、葡萄糖和山梨醇。
15.权利要求1的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供每次给药量为1000IU至100,000IU的红细胞生成素。
16.权利要求15的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供选自如下的每次给药量:2,000IU、3,000IU、4,000IU、10,000IU、20,000IU、25,000IU或40,000IU。
17.权利要求16的制剂,其中的脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物是多山梨醇酯80,氨基酸是甘氨酸。
18.权利要求17的制剂,其中的多山梨醇酯范围是0.01至1.0g/L,甘氨酸范围是1g/L至50g/L。
19.权利要求18的制剂,其进一步含有调节渗透压剂,其中的调节渗透压剂选自氯化钠、甘露糖醇、甘氨酸、葡萄糖和山梨醇。
20.权利要求19的制剂,其中的pH缓冲剂选自磷酸二氢钠/磷酸氢二钠、柠檬酸钠/柠檬酸和醋酸钠/醋酸。
21.权利要求20的制剂,其中的pH缓冲剂提供pH5至pH8的pH。
22.一种红细胞生成素药物制剂,它包含:
(a)pH缓冲剂;
(b)稳定量的脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物;
(c)稳定量的氨基酸;
(d)药用量的红细胞生成素;
(e)调节渗透压剂;和
其中该制剂不含尿素或人血液产品。
23.权利要求22的制剂,其中的制剂是含水的。
24.权利要求22的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
25.权利要求22的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
26.权利要求24的制剂,其中的pH缓冲剂提供6至7.5的pH。
27.权利要求26的制剂,其中的pH缓冲剂提供6.9的pH。
28.权利要求22的制剂,其中的pH缓冲剂选自磷酸二氢钠/磷酸氢二钠、柠檬酸钠/柠檬酸和醋酸钠/醋酸。
29.权利要求28的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
30.权利要求29的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
31.权利要求30的制剂,其中的pH缓冲剂提供6至7.5的pH。
32.权利要求31的制剂,其中的pH缓冲剂提供6.9的pH。
33.权利要求22的制剂,其中的脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物选自多山梨醇酯80和多山梨醇酯20。
34.权利要求22的制剂,其中的氨基酸是甘氨酸。
35.权利要求22的制剂,其中的调节渗透压剂选自氯化钠、甘露糖醇、甘氨酸、葡萄糖和山梨醇。
36.权利要求22的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供每次给药量1000IU至100,000IU的红细胞生成素。
37.权利要求3 6的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供选自如下的每次给药量:2,000IU、3,000IU、4,000IU、10,000IU、20,000IU、25,000IU或40,000IU。
38.权利要求37的制剂,其中的脱水山梨醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1,2-乙二基)衍生物是多山梨醇酯80,氨基酸是甘氨酸。
39.权利要求38的制剂,其中的多山梨醇酯的范围是0.01至1.0g/L,甘氨酸范围是1g/L至50g/L。
40.权利要求39的制剂,其进一步包含调节渗透压剂,其中的调节渗透压剂选自氯化钠、甘露糖醇、甘氨酸、葡萄糖和山梨醇。
41.权利要求40的制剂,其中的pH缓冲剂选自磷酸二氢钠/磷酸氢二钠、柠檬酸钠/柠檬酸和醋酸钠/醋酸。
42.权利要求41的制剂,其中的pH缓冲剂提供pH5至pH8的pH。
43.一种红细胞生成素药物制剂,其选自由下列组成的组:
(a)2000IU红细胞生成素,4.38mg氯化钠,1.16mg磷酸二氢钠二水合物,2.23mg磷酸氢二钠二水合物,5.00mg甘氨酸,0.30mg多山梨醇酯80,以水调节至1.0mL;
(b)4000IU红细胞生成素,4.38mg氯化钠,1.16mg磷酸二氢钠二水合物,2.23mg磷酸氢二钠二水合物,5.00mg甘氨酸,0.30mg多山梨醇酯80,以水调节至1.0mL;
(c)10,000IU红细胞生成素,4.38mg氯化钠,1.16mg磷酸二氢钠二水合物,2.23mg磷酸氢二钠二水合物,5.00mg甘氨酸,0.30mg多山梨醇酯80,以水调节至1.0mL;和
(d)40,000IU红细胞生成素,4.38mg氯化钠,1.16mg磷酸二氢钠二水合物,2.23mg磷酸氢二钠二水合物,5.00mg甘氨酸,0.30mg多山梨醇酯80,以水调节至1.0mL。
44.一种红细胞生成素药物制剂,它包含:
(a)pH缓冲剂;
(b)稳定量的人血清清蛋白;
(c)稳定量的氨基酸;
(d)抗菌量的甲酚;和
(e)药用量的红细胞生成素。
45.权利要求44的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
46.权利要求45的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
47.权利要求46的制剂,其中的pH缓冲剂提供大约6至7.5的pH。
48.权利要求47的制剂,其中的pH缓冲剂提供6.9的pH。
49.权利要求44的制剂,其中的pH缓冲剂选自磷酸二氢钠/磷酸氢二钠、柠檬酸钠/柠檬酸和醋酸钠/醋酸。
50.权利要求49的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
51.权利要求50的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
52.权利要求51的制剂,其中的pH缓冲剂提供6至7.5的pH。
53.权利要求52的制剂,其中的pH缓冲剂提供6.9的pH。
54.权利要求44的制剂,其中的甲酚防腐剂是间-甲酚,并且其中这种m-甲酚的范围是0.2%至0.5%。
55.权利要求54的制剂,其中的间-甲酚防腐剂是0.3%。
56.权利要求44的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供每次给药量1000IU至100,000IU的红细胞生成素。
57.权利要求56的制剂,其中的pH缓冲剂选自磷酸二氢钠/磷酸氢二钠、柠檬酸钠/柠檬酸和醋酸钠/醋酸。
58.权利要求57的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
59.权利要求58的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
60.权利要求59的制剂,其中这种制剂以多剂量小瓶提供,其剂量选自10,000IU/2.5mL、25,000IU/mL或40,000IU/2mL。
61.权利要求44的制剂,其中的稳定量的清蛋白是0.25g/L。
62.权利要求44的制剂,其中的氨基酸是甘氨酸。
63.权利要求62的制剂,其中的稳定量的甘氨酸是5g/L至50g/L。
64.权利要求63的制剂,其中的氨基酸是甘氨酸,用量是0.25g/L至20g/L。
65.权利要求64的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供每次给药量为1000IU至100,000IU。
66.权利要求65的制剂,其中这种制剂以多剂量小瓶提供,其剂量选自10,000IU/2.5mL、25,000IU/mL或40,000IU/2mL。
67.权利要求62的制剂,其中的甘氨酸是5g/L,并且其中稳定量的清蛋白是0.25g/L。
68.权利要求67的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供每次给药量1000IU至100,000IU的红细胞生成素。
69.权利要求44的制剂,其中所述的制剂是含水的。
70.一种红细胞生成素药物制剂,它包含:
(a)pH缓冲剂;
(b)稳定量的人血清清蛋白;
(c)稳定量的氨基酸;
(d)抗菌量的甲酚;
(e)药用量的红细胞生成素;和
(f)调节渗透压剂。
71.权利要求70的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
72.权利要求71的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
73.权利要求72的制剂,其中的pH缓冲剂提供6至7.5的pH。
74.权利要求73的制剂,其中的pH缓冲剂提供6.9的pH。
75.权利要求70的制剂,其中的pH缓冲剂选自磷酸二氢钠/磷酸氢二钠、柠檬酸钠/柠檬酸和醋酸钠/醋酸。
76.权利要求75的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
77.权利要求76的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
78.权利要求77的制剂,其中的pH缓冲剂提供6至7.5的pH。
79.权利要求78的制剂,其中的pH缓冲剂提供6.9的pH。
80.权利要求70的制剂,其中的甲酚防腐剂是间-甲酚,并且其中这种m-甲酚的范围是0.2%至0.5%。
81.权利要求80的制剂,其中的间-甲酚防腐剂是0.3%。
82.权利要求70的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供每次给药量1000IU至100,000IU的红细胞生成素。
83.权利要求82的制剂,其中的pH缓冲剂选自磷酸二氢钠/磷酸氢二钠、柠檬酸钠/柠檬酸和醋酸钠/醋酸。
84.权利要求83的制剂,其中的pH缓冲剂的范围是10mM至30mM。
85.权利要求84的制剂,其中的pH缓冲剂提供5至8的pH。
86.权利要求85的制剂,其中这种制剂以多剂量小瓶提供,其剂量选自10,000IU/2.5mL、25,000IU/mL或40,000IU/2mL。
87.权利要求70的制剂,其中稳定量的清蛋白是0.25g/L。
88.权利要求70的制剂,其中的氨基酸是甘氨酸。
89.权利要求88的制剂,其中的稳定量的甘氨酸是5g/L至50g/L。
90.权利要求89的制剂,其中的氨基酸是甘氨酸,并且以用量0.25g/L至20g/L提供的。
91.权利要求90的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供每次给药量为1000IU至100,000IU。
92.权利要求91的制剂,其中这种制剂以多剂量小瓶提供,其剂量选自10,000IU/2.5mL、25,000IU/mL或40,000IU/2mL。
93.权利要求70的制剂,其中的调节渗透压剂选自氯化钠、甘露糖醇、甘氨酸、葡萄糖和山梨醇。
94.权利要求88的制剂,其中的甘氨酸是5g/L,并且其中稳定量的清蛋白是0.25g/L。
95.权利要求94的制剂,其中配制药用量的红细胞生成素,以便提供每次给药量1000IU至100,000IU的红细胞生成素。
96.权利要求70的制剂,其中所述的制剂是含水的。
97.一种红细胞生成素药物制剂,其选自由下列组成的组:
(a)10,000IU红细胞生成素,6.25mg人血清清蛋白,2.91mg磷酸二氢钠二水合物,11.19mg磷酸氢二钠十二水合物,50.00mg甘氨酸,7.50mg m-甲酚,以水调节至2.5mL;
(b)25,000IU红细胞生成素,6.25mg人血清清蛋白,2.91mg磷酸二氢钠二水合物,11.19mg磷酸氢二钠十二水合物,50.00mg甘氨酸,7.50mg m-甲酚,以水调节至2.5mL;和
(c)40,000IU红细胞生成素,5.00mg人血清清蛋白,2.33mg磷酸二氢钠二水合物,8.95mg磷酸氢二钠十二水合物,40.00mg甘氨酸,6.00mg m-甲酚,以水调节至2.0mL。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US12859699P | 1999-04-09 | 1999-04-09 | |
US60/128,596 | 1999-04-09 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1354669A CN1354669A (zh) | 2002-06-19 |
CN1165339C true CN1165339C (zh) | 2004-09-08 |
Family
ID=22436082
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNB008085048A Expired - Fee Related CN1165339C (zh) | 1999-04-09 | 2000-04-07 | 红细胞生成素药物组合物 |
Country Status (27)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US6696056B1 (zh) |
EP (1) | EP1181036B1 (zh) |
JP (1) | JP2002541208A (zh) |
KR (1) | KR100740794B1 (zh) |
CN (1) | CN1165339C (zh) |
AR (1) | AR029623A1 (zh) |
AT (1) | ATE401908T1 (zh) |
AU (1) | AU775041B2 (zh) |
BG (1) | BG106046A (zh) |
BR (1) | BR0010665A (zh) |
CA (1) | CA2369444C (zh) |
CY (1) | CY1108418T1 (zh) |
DE (1) | DE60039598D1 (zh) |
DK (1) | DK1181036T3 (zh) |
ES (1) | ES2308978T3 (zh) |
HK (1) | HK1041445B (zh) |
HU (1) | HUP0201068A3 (zh) |
IL (1) | IL145816A0 (zh) |
MX (1) | MXPA01010208A (zh) |
NO (1) | NO20014893L (zh) |
NZ (1) | NZ515380A (zh) |
PL (1) | PL203797B1 (zh) |
PT (1) | PT1181036E (zh) |
RU (1) | RU2225221C2 (zh) |
TR (1) | TR200103788T2 (zh) |
WO (1) | WO2000061169A1 (zh) |
ZA (1) | ZA200109236B (zh) |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7304150B1 (en) | 1998-10-23 | 2007-12-04 | Amgen Inc. | Methods and compositions for the prevention and treatment of anemia |
NZ515380A (en) * | 1999-04-09 | 2003-10-31 | Ortho Mcneil Pharm Inc | Aqueous stable preserved pharmaceutical compositions of erythropoietin |
US7371787B2 (en) * | 2000-04-14 | 2008-05-13 | Viance, Llc | Methods of incorporating treatment agents into wood based composite products |
ES2237574T5 (es) * | 2000-05-15 | 2017-08-09 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Composición farmacéutica líquida que contiene un derivado de eritropoyetina |
US6818613B2 (en) * | 2001-11-07 | 2004-11-16 | Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. | Aqueous sustained-release formulations of proteins |
JP4871720B2 (ja) * | 2003-06-10 | 2012-02-08 | エルジー ライフサイエンス リミテッド | 血清アルブミンを含まない、安定なヒトエリスロポエチン水溶液 |
DE10333317A1 (de) * | 2003-07-22 | 2005-02-17 | Biotecon Therapeutics Gmbh | Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA) |
CN1852700A (zh) * | 2003-09-23 | 2006-10-25 | 爱尔康公司 | 曲安奈德和醋酸阿奈可他注射用制剂 |
US7141544B2 (en) * | 2003-10-10 | 2006-11-28 | Baxter International, Inc. | Stabilization of pharmaceutical protein formulations with small peptides |
DE102004011663B4 (de) | 2004-03-10 | 2006-04-27 | Bioceuticals Arzneimittel Ag | Erythropoietin-Flüssigformulierung |
US7588745B2 (en) * | 2004-04-13 | 2009-09-15 | Si Options, Llc | Silicon-containing products |
US20050255112A1 (en) * | 2004-05-17 | 2005-11-17 | Lee Jong Y | Compositions and methods for preventing erythropoietin-associated hypertension |
JP2008513356A (ja) * | 2004-08-09 | 2008-05-01 | アリオス バイオファーマ インク. | 合成高度糖鎖付加プロテアーゼ耐性ポリペプチド変異体、それを使用する経口製剤および方法 |
US7597884B2 (en) | 2004-08-09 | 2009-10-06 | Alios Biopharma, Inc. | Hyperglycosylated polypeptide variants and methods of use |
KR20080031684A (ko) | 2005-06-14 | 2008-04-10 | 암젠 인코포레이티드 | 자가 - 완충성 단백질 제형 |
AU2006295340B2 (en) * | 2005-08-05 | 2010-11-11 | Amgen Inc. | Stable aqueous protein or antibody pharmaceutical formulations and their preparation |
CN101015684B (zh) * | 2006-02-10 | 2011-08-24 | 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 | 一种重组人红细胞生成素溶液制剂 |
US20080050749A1 (en) * | 2006-08-17 | 2008-02-28 | Ildiko Amann-Zalan | Use of bnp-type peptides for the stratification of therapy with erythropoietic stimulating agents |
ES2962777T3 (es) | 2007-11-15 | 2024-03-21 | Amgen Inc | Formulación acuosa de anticuerpos estabilizada por antioxidantes para la administración parenteral |
US8883146B2 (en) | 2007-11-30 | 2014-11-11 | Abbvie Inc. | Protein formulations and methods of making same |
KR100956431B1 (ko) | 2007-12-07 | 2010-05-06 | 주식회사 제이에스마루 | 혈장크린접착제 및 이의 제조방법 |
EP2342223B1 (en) | 2008-09-26 | 2017-04-26 | Ambrx, Inc. | Modified animal erythropoietin polypeptides and their uses |
HUE049282T2 (hu) | 2012-09-07 | 2020-09-28 | Coherus Biosciences Inc | Adalimumab stabil vizes formulációi |
US11229702B1 (en) | 2015-10-28 | 2022-01-25 | Coherus Biosciences, Inc. | High concentration formulations of adalimumab |
US11071782B2 (en) | 2016-04-20 | 2021-07-27 | Coherus Biosciences, Inc. | Method of filling a container with no headspace |
BR112019007858A2 (pt) | 2016-10-21 | 2019-07-02 | Amgen Inc | formulações farmacêuticas e métodos para produzir as mesmas |
CA3065540A1 (en) * | 2017-06-06 | 2018-12-13 | Kindred Biosciences, Inc. | Erythropoietin and analogs for veterinary use |
CN111150837B (zh) * | 2020-02-11 | 2022-07-12 | 中国人民解放军陆军军医大学 | Epo在抗金黄色葡萄球菌感染药物中的应用 |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6191131A (ja) * | 1984-10-09 | 1986-05-09 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 医薬品の吸着防止方法および組成物 |
JPS6197229A (ja) * | 1984-10-18 | 1986-05-15 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 安定なエリトロポエチン製剤 |
DK173067B1 (da) * | 1986-06-27 | 1999-12-13 | Univ Washington | Humant erythropoietin-gen, fremgangsmåde til ekspression deraf i transficerede cellelinier, de transficerede cellelinier sa |
DE3729863A1 (de) | 1987-09-05 | 1989-03-16 | Boehringer Mannheim Gmbh | Stabilisierte erythropoietin-lyophilisate |
GB8822857D0 (en) | 1988-09-29 | 1988-11-02 | Patralan Ltd | Pharmaceutical formulations |
GB9001987D0 (en) * | 1990-01-29 | 1990-03-28 | Janssen Pharmaceutica Nv | Improved cyclodextrin based erythropietin formulation |
US5543575A (en) * | 1990-06-20 | 1996-08-06 | Pioneer-Hi-Bred International, Inc. | Inbred corn line PHK46 |
DE4126984A1 (de) * | 1991-08-15 | 1993-02-18 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur herstellung von humanprotein-enthaltenden, gut vertraeglichen arzneimitteln fuer infusions- oder injektionszwecke |
DE4126983A1 (de) * | 1991-08-15 | 1993-02-18 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur herstellung von humanprotein-enthaltenden, konservierten arzneimitteln fuer infusions- oder injektionszwecke |
US5661125A (en) | 1992-08-06 | 1997-08-26 | Amgen, Inc. | Stable and preserved erythropoietin compositions |
US5766582A (en) | 1994-10-11 | 1998-06-16 | Schering Corporation | Stable, aqueous alfa interferon solution formulations |
DE19539574A1 (de) * | 1995-10-25 | 1997-04-30 | Boehringer Mannheim Gmbh | Zubereitungen und Verfahren zur Stabilisierung biologischer Materialien mittels Trocknungsverfahren ohne Einfrieren |
TWI240627B (en) * | 1996-04-26 | 2005-10-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Erythropoietin solution preparation |
TW586933B (en) | 1996-06-20 | 2004-05-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Compositions for treating liver-complaints using EPO |
NZ515380A (en) * | 1999-04-09 | 2003-10-31 | Ortho Mcneil Pharm Inc | Aqueous stable preserved pharmaceutical compositions of erythropoietin |
-
2000
- 2000-04-07 NZ NZ515380A patent/NZ515380A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-04-07 PT PT00921929T patent/PT1181036E/pt unknown
- 2000-04-07 EP EP00921929A patent/EP1181036B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-07 HU HU0201068A patent/HUP0201068A3/hu unknown
- 2000-04-07 JP JP2000610501A patent/JP2002541208A/ja active Pending
- 2000-04-07 WO PCT/US2000/009414 patent/WO2000061169A1/en active Application Filing
- 2000-04-07 AT AT00921929T patent/ATE401908T1/de active
- 2000-04-07 US US09/545,479 patent/US6696056B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-07 DK DK00921929T patent/DK1181036T3/da active
- 2000-04-07 CN CNB008085048A patent/CN1165339C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-07 DE DE60039598T patent/DE60039598D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-07 CA CA002369444A patent/CA2369444C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-04-07 BR BR0010665-8A patent/BR0010665A/pt not_active Application Discontinuation
- 2000-04-07 TR TR2001/03788T patent/TR200103788T2/xx unknown
- 2000-04-07 IL IL14581600A patent/IL145816A0/xx unknown
- 2000-04-07 ES ES00921929T patent/ES2308978T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-04-07 MX MXPA01010208A patent/MXPA01010208A/es active IP Right Grant
- 2000-04-07 RU RU2001130142/15A patent/RU2225221C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-04-07 KR KR1020017012906A patent/KR100740794B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-04-07 PL PL351837A patent/PL203797B1/pl unknown
- 2000-04-07 AU AU42186/00A patent/AU775041B2/en not_active Ceased
- 2000-04-10 AR ARP000101631A patent/AR029623A1/es unknown
-
2001
- 2001-10-08 NO NO20014893A patent/NO20014893L/no not_active Application Discontinuation
- 2001-10-24 BG BG106046A patent/BG106046A/xx unknown
- 2001-11-08 ZA ZA200109236A patent/ZA200109236B/xx unknown
-
2002
- 2002-04-19 HK HK02102987.9A patent/HK1041445B/zh not_active IP Right Cessation
-
2004
- 2004-02-10 US US10/775,928 patent/US20040248797A1/en not_active Abandoned
-
2008
- 2008-10-16 CY CY20081101147T patent/CY1108418T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN1165339C (zh) | 红细胞生成素药物组合物 | |
CN1222315C (zh) | 稳定的液体干扰素制剂 | |
CN1636014A (zh) | 用高活性低副作用重组促红细胞生成素治疗患者的治疗方法 | |
CN1367701A (zh) | 红细胞生成素给药的药代动力学和药效模型 | |
CN1367703A (zh) | Hgf冻干制剂 | |
CN1901934A (zh) | 促红细胞生成素在治疗慢性炎症性肠病中铁分布紊乱中的用途 | |
US20030134795A1 (en) | Erythropoietin dosing regimen for treating anemia | |
MXPA05004880A (es) | Precursor de n - acetilgalactosamina - 4 - sulfatasa, metodos de tratamiento que utilizan dicha enzima y metodos para producir y purificar dicha enzima. | |
CN1878570A (zh) | 包含粒细胞集落形成刺激因子的稳定的药物组合物 | |
CN1668333A (zh) | 包含红细胞生成素的稳定的药物组合物 | |
CN1638791A (zh) | 包含红细胞生成素的稳定的药物组合物 | |
US10052361B2 (en) | Liquid pharmaceutical composition of conjugated erythropoietin | |
CN1739793A (zh) | 一种人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子喷雾剂及其制备方法 | |
US6348444B1 (en) | Human growth hormone to stimulate hematopoiesis and immune reconstitution after hematopoietic stem cell transplantation in humans |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20040908 Termination date: 20180407 |