CN1164762C - 小球藻生长因子（小球藻精、cgf）提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种小球藻生长因子(小球藻精)提取方法，属于生物技术领域。包括温浴、破壁、酶解、分离、残渣利用等步骤。由于本发明采用加酶水解的方法提取小球藻精，温度要求低、溶液中性，因此避免了国外水提或碱性溶液提取时温度高、强碱性对活性成分有破坏的缺陷。此外，由于本方法提取工艺中首先对小球藻进行破壁，并且充分水解了细胞内容物的氨基酸、核苷酸等，所以产出率高、成本经济、残渣利用率高。
Description
技术领域
本发明涉及一种营养保健品原料的提取方法，尤其是小球藻生长因子(又称小球藻精，英文Chlorella Growth Factor，简称CGF)的提取方法，属于高科技生物技术领域。
背景技术
小球藻是世界上生长最快的植物。任何动、植物均无法像小球藻那样，能够每20小时增长4倍。这主要归功于小球藻的生长因子(小球藻精，CGF)。小球藻的生长因子(小球藻精，CGF)是小球藻特有的细胞活性物质，其中水解氨基酸含量达38.8％，包括氨基酸(有16种氨基酸，其中8种为人体必需氨基酸)，核酸、游离核苷酸含量高于6.8％，多糖7.4％，短连多肽、蛋白质等、维生素、矿物质，此外还有一些“神秘成分”。由于小球藻的生长因子(小球藻精，CGF)具有活化人体细胞、加快儿童生长发育、增强机体免疫能力、抵抗外来疾病的入侵、促进人体受伤组织修复、减少或减轻因有机物、重金属等的中毒反应、能防治胃溃疡、高血压和心血管等疾病等诸多生理功能，因此极具推广应用价值。此外，由于含有大量游离氨基酸、核苷酸，因此还可以做成美容品。
国际市场上，小球藻生长因子的年需要量为(CGF)200-300吨，但目前CGF的产量只能满足40-50％市场需要。国内许多食品、乳酸制品、啤酒厂家拟利用小球藻生长因子开发功能食品、保健品、药物前体、绿色酸奶、绿色啤酒等，因此大量需要CGF，其市场潜力巨大。
然而，目前只有少数发达国家掌握小球藻生长因子(小球藻精，CGF)提取技术，国内尚属空白。据申请人了解，国外主要采用水提或碱性溶液提取的方法，提取过程中破坏了部分功能成分，导致功能成分活性差，并且存在产出率低、成本高、残渣作为废物不能有效利用等问题。
发明内容
本发明的目的在于：针对目前小球藻生长因子(小球藻精，CGF)提取方法存在的问题，给出一种可以避免活性成分被破坏、并且产出率高、成本经济、残渣利用率高的小球藻生长因子(小球藻精)提取方法。
为了达到以上目的，本发明的小球藻生长因子(小球藻精)采用多种酶联合提取，该提取方法包括以下步骤：
A.温浴——将小球藻粉或小球藻泥放入50℃～70℃的温水中浸泡，使小球藻细胞壁扩张、软化；
B破壁——在温浴后的小球藻浆中加入果胶酶，温度控制在30℃～50℃，使小球藻细胞壁发生水解反应，形成破壁藻泥；
C.酶解——在破壁后的小球藻浆中加入核酸酶和蛋白酶，温度控制在30℃～70℃，使其水解为小球藻精的混合物；
C′.分离——用离心设备将水解混合物离心分离得到小球藻生长因子(小球藻精)的液体；
D.残渣利用——将分离残渣喷雾干燥，加工成食品级破壁藻粉。
此后，以分离提取的小球藻生长因子(小球藻精)液体为主要原料，可以制成多种营养保健品。
E.制成——在分离提取后的小球藻精液中加蜜制成口服液，或干燥后制成小球藻精干粉，再辐照后制成胶囊或片剂。
由于本发明采用加酶水解的方法提取小球藻精，温度要求低、溶液中性，因此避免了国外水提或碱性溶液提取时温度高、强碱性对活性成分有破坏的缺陷。此外，由于本方法提取工艺中首先对小球藻进行破壁，并且充分水解了细胞内容物的氨基酸、核苷酸等，所以产出率、成本经济、残渣利用率高。
与现有的水提或碱性溶液提取方法相比，本发明显然有所突破，更为科学合理，不仅填补了国内空白，而且走出了自己的路，可以形成自主知识产权。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的方法作进一步说明。
实施例一
本实施例的小球藻生长因子(小球藻精)提取最终制成品为小球藻精干粉，其步骤如下：
A.温浴——将小球藻粉或小球藻泥放入50℃～70℃的温水中浸泡约10小时，使小球藻细胞壁扩张、软化；
B、破壁——在温浴后的小球藻浆中加入果胶酶，温度控制在40℃～50℃，时间约12小时，使小球藻细胞壁发生水解反应，形成破壁藻泥；
C.酶解——在破壁后的小球藻浆中加入核酸酶和蛋白酶，温度控制在40℃～50℃，使其水解为小球藻精的混合物；
C′.分离——用离心设备将水解混合物离心分离得到小球藻生长因子(小球藻精)的液体；
D.残渣利用——将分离残渣喷雾干燥，加工成食品级破壁藻粉；
E.制成——在分离提取后的小球藻精液中加蜜制成口服液。
以上步骤中的温度控制在40℃～50℃，将获得更佳的破壁和酶解效果。实验表明，本实施例的方法从根本上解决了现有CGF提取过程中存在的问题，避免了活性成分的破坏，生理活性比国外高50％；国外产出率为4-5％，而本实施例的产出率超过10％；国外的残渣被抛弃，而本方法中残渣利用率达95％，其销售价格甚至比原材料藻粉还高；经济效益将比国外高40-50％，比直接出口藻粉高1倍以上。
实施例二
本实施例的小球藻生长因子(小球藻精)提取最终制成品为小球藻精胶囊或片剂，其步骤如下：
A.温浴——将小球藻粉或小球藻泥放入50℃～70℃的温水中浸泡，使小球藻细胞壁扩张、软化；
B破壁——在温浴后的小球藻浆中加入果胶酶和纤维素酶，温度控制在40℃～50℃，使小球藻细胞壁发生水解反应，形成破壁藻泥；
C.酶解——在破壁后的小球藻浆中加入核酸酶和蛋白酶，温度控制在40℃～50℃，使其水解为小球藻精的混合物；
C′.分离——用离心设备将水解混合物离心分离得到小球藻生长因子(小球藻精)的液体；
D.残渣利用——将分离残渣喷雾干燥，加工成食品级破壁藻粉；
E.制成——将分离提取后的小球藻精液干燥后制成小球藻精干粉，再辐照后制成胶囊或片剂。
以上步骤B中在加入果胶酶的同时还加入纤维素酶，可以使破壁的水解反应更顺利。本实施例的小球藻生长因子(小球藻精)提取方法的卫生学指标经江苏省卫生防疫站分析测定，结果为：小球藻生长因子(小球藻精)的微生物，重金属铅、砷、汞的含量都比国家保健食品标准规定的含量还低；在促进生长发育方面，喂养CGF的老鼠比对照体重、身长分别高20％、21％；免疫调节功能效果试验表明，喂养CGF的老鼠比对照增强30％；毒理试验(小鼠急性神经毒性、AMES试验、小鼠微核、染色体畸变分析等试验)完全符合国家保健食品指标。
Claims (5)
1.一种小球藻生长因子(小球藻精)提取方法，其特征在于包括以下步骤：
A.温浴——将小球藻粉或小球藻泥放入50℃～70℃的温水中浸泡，使小球藻细胞壁扩张、软化；
B、破壁——在温浴后的小球藻浆中加入果胶酶，温度控制在40℃～50℃，使小球藻细胞壁发生水解反应，形成破壁藻泥；
C.酶解——在破壁后的小球藻浆中加入核酸酶和蛋白酶，温度控制在40℃～50℃，使其水解为小球藻精的混合物；
C’.分离——用离心设备将水解混合物离心分离得到小球藻生长因子(小球藻精)的液体。
2.根据权利要求1所述小球藻生长因子(小球藻精)提取方法，其特征在于：在步骤C’之后还包括步骤
D.残渣利用——将分离残渣喷雾干燥，加工成食品级破壁藻粉。
3.根据权利要求2所述小球藻生长因子(小球藻精)提取方法，其特征在于：在步骤D之后还包括步骤
E.制成——在分离提取后的小球藻精液中加蜜制成口服液。
4.根据权利要求2所述小球藻生长因子(小球藻精)提取方法，其特征在于：在步骤D之后还包括步骤
E.制成——将分离提取后的小球藻精液干燥后制成小球藻精干粉，
再辐照后制成胶囊或片剂。
5.根据权利要求4所述小球藻生长因子(小球藻精)提取方法，其特征在于：在破壁步骤中还加入纤维素酶。
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