CN116445296A

CN116445296A - 一株高温型七妹羊肚菌杂交菌株jyn09及其选育和应用

Info

Publication number: CN116445296A
Application number: CN202310470702.5A
Authority: CN
Inventors: 刘伟; 张亚; 蔡英丽; 刘涛
Original assignee: Sichuan Junyinong Agricultural Technology Co ltd
Current assignee: Sichuan Junyinong Agricultural Technology Co ltd
Priority date: 2023-04-27
Filing date: 2023-04-27
Publication date: 2023-07-18
Anticipated expiration: 2043-04-27
Also published as: CN116445296B

Abstract

本发明提供了一株高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09及其选育和应用，属于菌种选育技术领域。本发明通过多孢杂交及选育得到。首先通过野生菌株的驯化，弹射得到子囊孢子，进而通过多孢杂交得到杂交菌株，对多孢杂交菌株进行培养和栽培，当子囊果生长至3～5cm时，进行高温处理，选择成熟子囊果中性状优良的菌株作为候选材料，对所述候选材料组织分离获得高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09。相比亲本菌株，杂交新菌株温型较高，原基发育最高温提升3.1℃，子囊果发育最高温提升4℃，均产提升60.47％，且肉质松紧度较紧实，折干率低，适用于鲜品流通，并具有抗真菌病害能力强，产量高的优点。

Description

一株高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09及其选育和应用

技术领域

本发明涉及菌种选育技术领域，尤其涉及一株高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09及其选育和应用。

背景技术

羊肚菌(Morchella spp.)是一种名贵的珍稀食用菌，具有较高的文化和药用价值，深受美食爱好者的青睐。当前我国大面积推广应用的品种主要有梯棱羊肚菌(M.importuna)和六妹羊肚菌(M.sextelata)，无论是梯棱羊肚菌还是六妹羊肚菌，均属于低温发育品种，原基发育温度通常在5～11℃之间，高于12℃很难再有新的原基发生。而我国南方地区冬季气温高，春季温度回升快，常规的羊肚菌品种在该地区种植存在着原基发育温度区间短的缺陷，因此，驯化选育一种高温型羊肚菌菌株满足市场需求成为亟需。

发明内容

本发明的目的在于提供一株高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一株高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为武汉大学，保藏日期为2023年2月21日，保藏编号为CCTCCNO：M2023170。

优选的，所述菌株最适培养温度为20～22℃，原基发生的温度为10.5～14.8℃，子囊果发育温度4～25℃。

本发明提供了所述高温型七妹羊肚菌杂交菌株在羊肚菌栽培生产中的应用。

本发明还提供了所述高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09的选育方法，包括以下步骤：

1)对七妹羊肚菌亲本菌株的子囊孢子进行培养，获得菌丝混合物，挑取萌发的菌丝混合物进行培养，获得多孢杂交菌株；

2)利用多孢杂交菌株制备栽培种，将栽培种进行栽培，当子囊果生长至3～5cm时，进行高温处理，所述高温处理的温度为25～32℃，处理时间为6～8天；

3)当子囊果完全成熟后，选择菌盖锥形、菌肉厚度为0.45～0.65cm、菌柄洁白、圆柱形、菌柄菌盖交际处凹陷明显且菌柄不膨大，子囊果高度12～14cm、最宽处为3.5～5.5cm的菌株作为候选材料；

4)将所述候选材料进行菌柄中部组织分离获得纯培养菌株，获得的菌株即高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09。

优选的，步骤1)对子囊孢子进行培养前，还包括将子囊孢子稀释的步骤，稀释后子囊孢子的浓度为10⁴～10⁵个/mL。

优选的，步骤1)中子囊孢子的培养温度为20～25℃，培养时间为2～4天。

优选的，步骤1)中所述菌丝混合物培养的温度为21～24℃，处理时间为7～10天。

优选的，所述高温处理时，空气湿度为65％～85％、土壤湿度为20％～25％。

通过采用上述技术方案，本发明具有如下有益效果：

本发明基于多孢杂交选育技术获得一株高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09，该菌株的典型特征在于原基发育温度10.5～14.8℃，相比亲本菌株提升3.1℃，子囊果发育温度4～25℃，相比亲本菌株最高温提升4℃；与亲本七妹羊肚菌相比，子囊果生长时间减少2天，采菇期延长1天，单菇重提升0.9～1.1g，均产提升60.47％，具有耐高温的优势，克服了常规的羊肚菌品种在气温回升较快的地区种植时，原基发育温度区间短的缺陷，并且JYN09菌株子囊果温度耐受性和白霉病抗性明显优于亲本菌株。JYN09杂交新菌株的产量有很大的提升，平均亩产约475公斤/亩，最高可达650公斤/亩。

附图说明

图1为野生标本和高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09的ITS系统发育学分析(JQ代表的编号源自公开发表的羊肚菌数据，下载自NCBI公共数据库)。

图2为高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09和亲本菌株的拮抗实验(2015-119为亲本菌株，JYN09为高温型七妹羊肚菌杂交新菌株)。

图3为高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09养菌阶段的发育状态(A为播种后第7天的菌丝表现；B为播种后第34天的菌丝表现；C为播种后第50d的菌丝表现)。

图4为高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09在不同基地的生长状态(A，2016年4月2日河南省南阳市羊肚菌JYN09的出菇情况；B，2019年4月10日四川省崇州市实验基地JYN09的生长状态；C，2022年3月25日云南省昆明市试验基地JYN09的出菇情况；D，2023年3月27日四川省广元市试验基地JYN09的出菇情况)。

生物保藏说明

本发明提供的高温型七妹羊肚菌杂交菌株(Morchella eximia JYN09)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2023170，保藏日期为2023年2月21日，保藏位置为武汉大学，中国典型培养物保藏中心。

具体实施方式

本发明提供了一株高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为武汉大学，保藏日期为2023年2月21日，保藏编号为CCTCC NO：M2023170。

本发明的高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09，其最适培养温度为20～22℃，原基发生的温度为10.5～14.8℃，子囊果发育温度4～25℃。

本发明还提供了一种高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09的选育方法，包括以下步骤：

4)将所述候选材料进行组织分离获得纯培养菌株，获得的菌株即高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09。

在本发明中，所述七妹羊肚菌亲本菌株由野生七妹羊肚菌经组织分离获得，所述组织优选为菌柄部位组织。所述野生七妹羊肚菌优选采集于四川省凉山州。

本发明采集野生七妹羊肚菌后，对野生菌株进行分子鉴定，所述分子鉴定优选为ITS鉴定，本发明对所述ITS鉴定方法以及参数没有特殊限定，采用本领域常规的ITS鉴定方法即可。

本发明对野生七妹羊肚菌进行鉴定并证实菌株为七妹羊肚菌后，采用常规的羊肚菌大田栽培方案对野生七妹羊肚菌进行栽培生产，在出菇季节，优选成熟且健壮的子囊果，洁净环境下进行孢子弹射，获得子囊孢子。所述获取子囊孢子优选在超净工作台中进行，本发明将子囊果悬挂在无菌培养皿上方1～1.5cm处，用容器将整个子囊果和培养皿罩着，10～12h后，在子囊果下面的培养皿上获得一层白色粉末状孢子粉，即为野生七妹羊肚菌的子囊孢子。在本发明中，所述容器优选为透明容器。

本发明在获得所述野生七妹羊肚菌的子囊孢子后，将其进行稀释得到子囊孢子稀释液，然后取取90～110μl所述子囊孢子稀释液涂布在培养基上培养。在本发明中，所述稀释优选用无菌水进行稀释，所述子囊孢子稀释液的浓度优选为10⁴～10⁵个/mL，子囊孢子培养用的培养基优选为PDA固体培养基，培养温度优选为22～24℃，进一步优选为23℃。

本发明在所述子囊孢子培养2～4天，优选3天时，挑取萌发的菌丝混合物置于新的培养基中进行培养，获得多孢杂交菌株。所述菌丝萌发物所用培养基优选为PDA斜面培养基，所述培养温度优选为22～24℃，进一步优选为23℃；所述培养时间优选为7～10天，优选为8天。

本发明在获得所述多孢杂交菌株后，利用母种、原种和栽培种的三级菌种制作技术制作栽培种，然后将栽培种菌株进行栽培，所述栽培在大田的温室大棚内进行，确保羊肚菌的健壮生长，所述栽培温度优选为10～23℃，进一步优选为14～18℃，更优选为16℃；所述栽培的空气湿度优选为75～95％，进一步优选为80～90％，更优选为85％；所述栽培的土壤湿度优选为23～28％，进一步优选为25～27％，更优选为26％。本发明在子囊果生长至3～5cm，优选4cm后，进行高温处理，所述高温处理的温度优选为25～32℃，进一步优选为27～30℃，更优选为28℃；所述高温处理的空气湿度优选为65～85％，进一步优选为70～80％，更优选为75％；所述高温处理的土壤湿度优选为20～25％，进一步优选为22～24％，更优选为23％；期间维持地表温度18～26℃，进一步优选为20～24℃，更优选为24℃；所述高温处理的时间优选为6～8天，进一步优选为7天。

本发明在高温处理后，维持温度20～25℃，优选为22～24℃，更优选为23℃，直至子囊果完全成熟。本发明在菌株子囊果完全成熟后，选择子囊果高度为12～14cm、最宽处3.5～5.5cm、菌盖锥形、菌肉厚度为0.45～0.65cm、菌柄洁白、圆柱形、菌柄菌盖交际处凹陷明显且菌柄不膨大的菌株作为候选标本材料。

本发明在获得候选标本材料后，对所述候选标本材料进行组织分离，优选对所述标本材料菌柄中部进行组织分离进行纯培养；获得所述高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

亲本菌株采集和分离：野生标本采集于2015年8月，采集地点四川省凉山州，菌柄部位组织分离获得野生亲本菌株，记为2015-119。

野生标本的形态特征：子囊果宝塔形、宽锥形，子囊果大小中等，高7.5-10.5cm，最宽处3.8-5cm；菌盖宽锥形，顶尖，色深棕色、黑褐色，纵横脊明显，凹坑明显；菌盖与菌柄交界处凹陷，2-5mm；菌柄圆柱状，白色或浅黄白色，基部略膨大。八孢子囊孢子(17-)18-25(-30)×10-15(-20)μm，椭圆形，表面光滑；子囊175-275×12-25μm；圆柱形顶端钝圆，无色；侧丝100-200×5-12.5μm，圆柱形具尖的、近棒状或近纺锤状的顶端，有隔；不育脊上的刚毛60-200×7-18μm，有隔，顶端细胞近棒状，少量的近头状或不规则形状。

野生菌株的分子鉴定：菌株通过PDA(土豆200g煮汁，葡萄糖20g，蒸馏水1L，121℃高压蒸汽灭菌25分钟)液体培养基静置培养约7天，收集菌丝干制后置于-80°保存备用或直接使用。DNA提取和ITS扩增：液氮研磨成粉末状，用CTAB裂解缓冲液进行裂解(100mmol/LTris-Hcl，20mmol/LEDTA，1.4mmol/L Nacl，2％CTAB，2％PVP，pH 8.0)，用苯酚-氯仿-异戊醇(体积比：25:24:1)去蛋白，无水乙醇沉淀获得高纯度基因组DNA。使用ITS-1(5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’)和ITS-4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)序列，对样本进行ITS区域扩增。ITS-PCR产物经过1％的琼脂糖凝胶电泳进行检测，对目标条带进行胶切回收后直接进行双向测序；测序结果通过NCBI blastn进行初步比对，根据比对结果，选择公开发表的近缘物种序列，借助MEGA-x进行系统发育树的构建，确证供试菌株的系统发育学地位。ITS扩增结果显示，实验菌株ITS序列长度651bp，序列提交至NCBI获得序列号为OQ421465(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/OQ421465)，系统发育分析显示和七妹羊肚菌(M.eximia)具有最近的遗传距离(图1)，结合标本子囊果的形态特征和微观特征，确证实验菌株为七妹羊肚菌。

栽培试验和孢子弹射：采用常规的羊肚菌大田栽培方案，具体包括菌种制备、土壤整理、遮阳棚搭建、播种、外源营养袋补料、养菌、保育催菇、小菇养育和采收等环节，具体参考(刘伟张亚何培新：编著羊肚菌生物学与栽培技术.吉林科技出版社.2017.3)。对2015-119菌株进行栽培生产，在出菇季节，选择成熟且健壮的子囊果，带回实验室，洁净环境下弹射获得子囊孢子，具体操作如下：在超净工作台内，将成熟的子囊果置于无菌平皿上方1.5cm处，之后将子囊果和平皿整个用洁净的大号烧杯罩着，室温过夜弹射；第二日可见平皿上有一层白色粉末状孢子粉，即为羊肚菌的子囊孢子；将孢子粉在超净工作台内微风吹干后密封4℃长期保存备用。

多孢杂交：无菌操作条件下，将上述得到的子囊孢子用无菌水稀释至10⁴～10⁵个/mL浓度，取100μl孢子悬液涂布在PDA固体培养基上，23℃恒温培养3天，挑取萌发的菌丝混合物置于新的PDA斜面试管23℃恒温培养7天，获得菌株视为多孢杂交菌株，记为2016-63。

培养基制作：

母种培养基：PDA固体培养基；

原种培养基：重量组成为小麦10％、木屑87.5％、石灰1％、石膏1.5％，含水量65％，高压蒸汽灭菌；

栽培种培养基：重量组成为小麦30％、木屑67.5％、石灰1％、石膏1.5％，含水量65％，高温蒸汽灭菌；

外源营养袋：重量组成为小麦65％、玉米芯32.5％、石灰1％、石膏1.5％，含水量65％，高温蒸汽灭菌。

栽培生产：将多孢杂交菌株2016-63按照母种→原种→栽培种的三级菌种制作工艺进行栽培种菌种制备，其中，母种23℃恒温培养7天使用；原种23℃恒温培养15天使用；栽培种23℃恒温培养20天使用。获得栽培种后，按照常规的羊肚菌大田栽培技术在温室大棚内进行大田栽培，其中栽培种用量为每亩地150kg，采用条播或撒播，覆土厚度3cm；养菌10天间进行外源营养袋补料操作，每亩地使用外源营养袋总物料重量800Kg，约2000袋；养菌周期确保60天后进行催菇处理。催菇后通过温室大棚的通风、遮阴和喷水调节控制大棚内的温度维持在10-23℃之间，空气湿度75％-95％之间，土壤湿度23％-28％之间，确保羊肚菌的健壮生长，在子囊果生长至3-5cm后，保持棚体温度25-32℃、空气湿度65％-85％、土壤湿度20％-25％，持续7天，期间地表温度18-26℃之间；高温处理后维持温室大棚温度20-25℃，直至子囊果完全成熟。高温处理后大部分子囊果遭受不同程度的损伤，包括子囊果畸形、红腿死亡等，选择子囊果形态依旧较好(子囊果12-14cm高度、最宽处3.5-5.5cm、菌盖锥形、菌肉厚实、菌柄洁白、圆柱形、菌柄菌盖交际处凹陷明显且菌柄不膨大)的子囊果作为候选标本材料，采用组织分离方法对候选标本材料菌柄中部进行组织分离，进行纯培养，获得本文所述“高温型”七妹羊肚菌杂交菌株，菌株编号记为JYN09。

杂交菌株的ITS分子鉴定：DNA提取和ITS序列扩增如前所述，经ITS重测序分析显示JYN09菌株和亲本菌株具有100％的相似度，JYN09菌株的ITS序列提交至NCBI数据库，序列编号为OQ421466(图1)。

杂交菌株与亲本菌株的拮抗实验：在PDA固体平板中轴线上，相距3cm配对接种活化的候选菌株，配对组合包括“亲本菌株×亲本菌株”、“亲本菌株×杂交菌株”、“杂交菌株×杂交菌株”。配对完成后，置于21℃恒温培养14天，观察记录配对菌株的拮抗情况。拮抗实验表明杂交菌株和亲本具有明显的拮抗线，是不同于亲本的新的杂交菌株(图2)。

菌种保藏：高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为武汉大学，保藏日期为2023年2月21日，保藏编号为CCTCCNO：M 2023170。

高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09的生理及栽培性状

形态特征:

子囊果：子囊果宝塔形、宽锥形，子囊果大小中等，高7.5-10.5cm，最宽处3.8-5cm；菌盖宽锥形，顶尖，色浅，浅棕色、棕黄色，纵横脊明显，凹坑明显；菌盖与菌柄交界处凹陷，2-5mm；菌柄圆柱状，白色或浅黄白色，基部略膨大；单菇重8.0-25.0g，菌盖最宽处直径3.8-5.0cm，菌盖长度6.0-8.5cm，菌柄圆柱状，基部稍膨大，宽1.8-2.8厘米，长1.5-3.0厘米，鲜菇折干率7.5-8.5:1。

菌丝和菌核：菌丝圆筒状、表面光滑，部分菌丝表面具大小不等颗粒物，6-13(-16.4)μm，细胞长54-150(-181)μm，细胞核多核，隔膜明显，初期菌丝无色，老菌丝棕色或棕黄色菌丝增多；菌核为不规则球形密集交织而成，初期细小颗粒状，大量的菌核可凝集成片状菌核，菌核初期白色后期至浅黄色或浅棕黄色。

微观特征：

八孢子囊孢子(17-)18-25(-30)×10-15(-20)μm，椭圆形，表面光滑；孢子印亮黄色；子囊175-275×12-25μm；圆柱形顶端钝圆，无色；侧丝100-200×5-12.5μm，圆柱形具尖的、近棒状或近纺锤状的顶端，有隔；不育脊上的刚毛60-200×7-18μm，有隔，顶端细胞近棒状，少量的近头状或不规则形状。

生理性状：

PDA培养基最适培养温度为21℃，平均长速1.63±0.16cm/d，菌落圆形，前端整齐，气生菌丝弱，初期白色，后期随着培养时间延长颜色加深至浅黄色、浅棕黄色，培养5-7d开始形成菌核，细小颗粒状，大量菌核可在接种块附近凝集成片状，初期白色，后期随着培养时间延长至浅棕黄色。

麦粒木屑培养基21℃长速约1.58±0.12cm/d，菌丝初期白色，略稀疏，随着培养时间延长，菌丝密度加大，菌核在菌丝长至袋子三分之二后开始形成，细小颗粒状，初期白色，后期至浅黄色至浅棕黄色，菌核袋子中上部较多。

栽培性状：

菌丝：略具沙性透气、腐殖质含量丰富的土壤最好，土壤温度10-18℃为最佳播种温度，播种后12-24小时，可见菌种块表面的菌丝萌发出纤细的菌丝；2-3d，可形成初期纤细的菌丝网络，4-5d可形成明显的菌丝层，初期菌丝无色或浅白色(图3中A)。

菌霜：菌霜在播种后7-10d形成，初期菌霜为稀疏白色粉末状，后期随着时间的延长，裸露至地表的菌丝将全部形成大片洁白粉末状菌霜，在四川一带，菌霜在形成后30-35d开始转色至轻微黄色或浅黄白色，伴有消退迹象(图3)。

原基发生：地温达到12℃开始形成原基，原基初期白色小球状，密，少量原基可直接从土壤内分化长出，初期原基肉白色、球形，之后顶端朝上生长至锥形或棒状，基部膨大，地表温度12-20℃为最佳发育温度，约4-7d可长至1cm转入幼菇分化阶段。

子囊果发育：子囊果发育温度4-25℃均可，最适宜地表温度10-22℃，空气湿度80％-95％，土壤湿度20％-25％，从1cm左右的幼菇至成熟需要15-20d时间。环境温度高，子囊果发育速度加快。幼嫩子囊果菌盖尖锥形至半椭圆形，菌盖灰黑色至灰褐色，菌柄白色，基部略膨大；随着时间延长，菌盖表面的凹坑细线状，菌盖表面的纵脊整体呈上下排列，略交错弯曲，脊厚实，颜色相比幼菇变浅，浅灰黄色；成熟子囊果锥形，灰黄色至棕灰色，凹坑明显、深，纵脊薄、分叉，横脊倾斜与纵脊交错，菌盖6.8-8.5cm，最宽处3.8-5.0cm，菌柄圆柱状，基部稍膨大，宽1.8-2.8厘米，长1.5-3.0厘米。

实验例1高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09和常规商用菌株的栽培评比实验

以原始亲本菌株2015-119、市场上大面积推行的梯棱羊肚菌No.1和六妹羊肚菌No.8为对照，进行菌株农艺性状的评比实验，试验点安排在四川省成都市新津县实验基地，单品种实验面积不小于300m²。播种时间2018年12月6号，外源营养袋摆放时间12月14号，催菇时间1月30日至2月4日，最早出菇时间2月10日，最早采收时间3月3日，生产结束时间4月25日。

栽培试验采用常规的羊肚菌大田栽培方案，包括：菌种制备、土地整理、遮阳棚搭建、播种、外源营养袋补料、养菌、保育催菇、出菇管理和采收环节。栽培生产过程中详细记录菌丝长势、原基发生时间、采菇时间、采菇周期、产量、羊肚菌大小、折干率、抗病虫害能力、采收储藏过程中的菌盖易碎程度等数据。栽培评比结果如表1所示。

表1不同羊肚菌品种的大田栽培评比实验

由表1可知：高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09相比亲本菌株的生长周期延长14天，原基发生温度升高原基和子囊果耐受的温度均高于亲本菌株，原基发育的最高温高于亲本3.1℃，原基发生的温度为10.5-14.8℃，子囊果发育温度4-25℃，最高温相比亲本菌株高4℃；菇型和颜色与亲本菌株近似一致；菌核数量明显增多，高于亲本约150％；单位面积的平均产量也高于亲本60.47％，均产475kg/m²，最高产可达650kg/m²；JYN09新菌株抵抗白霉病的能力也优于亲本菌株。

与梯棱羊肚菌和六妹羊肚菌菌株相比，2015-119野生菌株和JYN09实验菌株养菌期均较长，JYN09原基发生温度最高，当梯棱羊肚菌No.1和六妹羊肚菌No.8将要采摘完毕后，JYN09实验菌株才开始大量长出；JYN09菌株原基发育温度为地温10.5-14.8℃。与对照相比，JYN09实验菌株子囊果颜色浅，个头略小，但个头均匀，菌柄尺寸最短，做干货时损耗最小；实验菌株表现出良好的抗真菌病害特点，即便是在后期温度升高后，染病几率仍旧较低；另一个典型的特征是实验菌株肉质松紧度较紧实，折干率低，采后储藏过程中可保持5d菌盖仍不易碎裂，适合于鲜品流通。

实验菌株JYN09先后在河南省南阳市，湖北省宜昌市，四川省成都市，重庆市彭水县，四川省广元市、云南省迪庆州，贵州省遵义市，陕西省汉中市，山西省武乡县，内蒙古省赤峰市等基地进行实验和示范性栽培，每个试验基地栽培面积不小于667m²，栽培过程中记录发菌状态、菌丝密度、外源营养袋污染率、原基发生温度、原基成活率、子囊果真菌性病害比例、总产量、折干率等详细数据，结果表明，JYN09菌株在各基地间的栽培形状和出菇状态均表现一致；与亲本菌株相比，JYN09杂交菌株在菌核数量、原基发育的温度需求、子囊果温度耐受性和抗白霉病方面明显不同于，也优于亲本菌株，最高产可达650kg/m²。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一株高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09，其特征在于，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为武汉大学，保藏日期为2023年2月21日，保藏编号为CCTCCNO：M2023170。

2.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于，其最适培养温度为20～22℃，原基发生的温度为10.5～14.8℃，子囊果发育温度4～25℃。

3.权利要求1所述的高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09在羊肚菌栽培生产中的应用。

4.权利要求1所述高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：

4)将所述候选材料进行菌柄部位组织分离获得纯培养菌株，获得的菌株即高温型七妹羊肚菌杂交菌株JYN09；

5)将获得的候选高温型七妹羊肚菌杂交菌株与亲本菌株进行拮抗检测，确定候选菌株是不同于亲本的新菌株。

5.根据权利要求4所述的选育方法，其特征在于，步骤1)对子囊孢子进行培养前，还包括将子囊孢子稀释的步骤，稀释后子囊孢子的浓度为10⁴～10⁵个/mL。

6.根据权利要求4所述的选育方法，其特征在于，步骤1)中子囊孢子的培养温度为20～25℃，培养时间为2～4天。

7.根据权利要求4所述的选育方法，其特征在于，步骤1)中所述菌丝混合物培养的温度为21～24℃，处理时间为7～10天。

8.根据权利要求4所述的选育方法，其特征在于，所述高温处理时，空气湿度为65％～85％、土壤湿度为20％～25％。