CN115380764B - 一株脆木耳菌及其脆木耳的驯化栽培方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一株野生脆木耳菌及其脆木耳的驯化栽培方法，通过野生菌采集、鉴定、分离、纯培养获得一株野生脆木耳菌，命名为赣脆木1号，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.23072；通过该菌株液体扩繁、袋料栽培和出耳温、湿、光、气条件控制等形成了赣脆木1号的驯化栽培方法。通过本发明可实现赣脆木1号商业化栽培，增添了食用菌市场新种类。赣脆木1号的菌龄为90～115d，生物转化率为57.95%～85.05%。赣脆木1号所产脆木耳产品与同属食用菌黑木耳和毛木耳区别明显，其颜色红棕色、耳片大薄、口感爽脆，是一种值得推广的优质食用菌。

Description

一株脆木耳菌及其脆木耳的驯化栽培方法

技术领域

本发明涉及食用菌驯化栽培技术，尤其是涉及一株野生脆木耳菌及其脆木耳的驯化栽培方法。

背景技术

自然界分布的野生食药用菌种类有近千种，而迄今人类可栽培的食药用菌仅有几十种，驯化栽培野生食药用菌一直是广大菌物科技工作者研究热点。

木耳属（Auricularia sp.)是世界广泛分布的木生真菌，世界范围内被确认的木耳属种类有27种，中国有木耳属种类15种。木耳是一类深受人们亲睐的食用菌，目前栽培的种类仅有黑木耳（Auricularia heimuer）和毛木耳（A. cornea），生产规模和产量已经位居我国主要栽培的十大类食用菌。2017年，黑木耳产量在江西位列第五位，超过了7.8万吨，毛木耳在江西栽培产量位列第七位，突破了4.5万吨。

脆木耳（Auricularia fibrillifera）隶属于担子菌(Basidiomycota)，蘑菇纲(Agaricomycetes)，蘑菇目(Agaricales)，木耳科(Auriculariaceae),木耳属（Auricularia）。分布于我国南方部分省区，是人们所认知的野生食用菌。成功驯化栽培野生脆木耳将具有极高的市场经济价值。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一株野生脆木耳菌。

本发明的第二个目的在于提供一株野生脆木耳的驯化栽培方法，该脆木耳的颜色红棕色、耳片大薄、口感爽脆、产量高。

本发明的第一个目的是这样实现的：

一株野生脆木耳菌，包括：

A、菌种分离：从广西河池市天峨县阔叶树腐木上采到一株野生菌JFRL01-92，用1‰ HgCl₂消毒1min，取野生菌JFRL01-92的胶质层间组织块置于PDA（马铃薯葡萄糖琼脂）培养基上培养，待长出白色菌丝后挑取并转接培养，获得该株野生菌纯培养物即菌种；

B、菌种鉴定：形态特征 该菌种的子实体单生或群生，新鲜时胶质或软胶质，透明，盘状或耳状，无柄或似具柄，边缘全缘，最宽处直径可达 60mm，厚度 0.35～0.5mm，淡红棕色，干后 0.04～0.2mm，暗棕色；不孕面具稀疏柔毛；子实层面光滑或具皱褶；横切面似具髓层，处于切面中间位置，非常小的结晶体散落各层；柔毛单生，无色或淡黄棕色，基部明显膨大，厚壁，宽 10～20μm，具宽内腔，常具明显分隔，顶部渐尖或钝圆，宽 2.0～3.5μm，长度为60～100μm；菌丝具锁状联合，在 5%KOH 试剂中菌丝宽度 1.0～3.0μm；担子棒状，３横隔，担孢子梗偶见，大小为 41～57μm×4.0～6.0μm；子实层的末端无拟囊状体；担孢子腊肠状，无色，薄壁，光滑，具 1 或２个大液泡，大小为 11～14μm×4.0～5.0μm，Q=2.45～3.03；分子特征 Genbank NO.：MN622773（ITS），特征是：命名为赣脆木1号，分类命名：脆木耳（Auricularia fiberillifera），保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为 CGMCC No.23072，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2021年8月4日。

步骤A中的菌种分离培养温度为25～30℃，挑取的白色菌丝转接满管培养时间为5～7d。

本发明的第二个目的是这样实现的：

一株野生脆木耳的驯化栽培方法，特征是：按下列步骤进行

A、液体菌种制备：液体培养基组成为去皮马铃薯（浸汁）20%、葡萄糖2%、酵母膏0.2%、MgSO₄·7H₂O 0.1%、KH₂PO₄0.2%、蒸馏水1000 mL，pH自然；在250 mL锥形瓶内装100 mL液体培养基，121℃高压蒸汽灭菌25 min；在无菌环境中严格按照无菌操作将活化好的菌种接种到冷却的锥形瓶装的液体培养基中，放置于恒温震荡培养箱内28℃，180 r/min培养获得液体菌种；

B、栽培培养料的配方与制作：将所需的新鲜杂木屑、玉米芯和棉籽壳晒干粉碎至1～2 cm的粒径；将粉碎好的杂木屑、玉米芯、棉籽壳和麸皮按照配方搅拌均匀；生石灰、石膏根据配方溶解到发酵所需的自来水中，然后倒入上面搅拌好的原料中，加水混合搅拌均匀，让这些原料充分吸收水分发酵，得到栽培培养料；

C、装袋与灭菌：将发酵后的栽培培养料填装到塑料袋中，压实，紧实适中，得到栽培袋；栽培袋在灭菌锅内摆成“井”字型，在121℃高压蒸汽灭菌或常压100℃灭菌，熄火后继续焖锅，以防“胀袋”；灭菌后的栽培袋移放到预先消毒的冷却室或接种室中，待冷却至28℃以下接种；

D、驯化栽培出耳：

a、接种：按每500g袋料接入液体菌种15～20 mL的比例接种于灭菌且冷却的栽培袋中；

b、菌丝培养：栽培袋墙式排放在黑暗的菌丝培养室内，控制温度、湿度，培养后期应定期通风，菌丝长满栽培袋后，继续培养至菌丝成熟；

c、出耳管理：将菌丝成熟的栽培袋移入出耳房，采用吊袋式排袋，即小刀在栽培袋的周边划若干个“＋”或“V”形孔口，相邻孔口的距离5～10 cm，让栽培袋四周出耳；或采用墙式排袋，即一头袋口用小刀离料面4～5 cm处从上往下、往里割栽培袋，在割完袋口的栽培袋的半中央上方留有4～5 cm的薄膜，另一头待头潮耳进入成熟期后，用小刀在袋底对角开2个2 cm 左右的“＋”或“V”形孔口，让栽培袋的两头出耳或仅割开袋口让栽培袋一头出耳；控制温度、湿度、光照，保持良好的通风,原基形成并逐渐出耳，即得脆木耳；

E、采收及采后管理：脆木耳的耳片颜色由深转浅，肉质肥厚，耳根收缩，耳背面产生白色孢子粉时应及时采收；采收后的新鲜脆木耳及时打包售卖或烘干制成干耳保存；采收后应清理栽培袋的料面上的死耳和烂耳以及出耳房内卫生；每批耳采后应养菌，再重新喷水管理出耳。

步骤A中的液体菌种的恒温震荡培养时间为6～8d。

步骤B中的栽培培养料按原料干重配比为：杂木屑30%～50%、玉米芯10%～30%、棉籽壳10%～30%、麸皮6%、生石灰2%、石膏粉2%，配比之和为100%；水分含量占发酵后栽培培养料的60%～65%，发酵1～2d。

步骤C中的栽培袋121℃高压蒸汽灭菌时间为2～3 h，或常压100℃灭菌时间为10～12 h，熄火后继续焖锅时间为3～5 h。

步骤D中的菌丝培养室的相对湿度控制在70%以下，发菌温度23～27℃之间，菌丝满袋天数45～50d，菌丝成熟天数15～20d；出耳房的空气湿度保持在75%～85%之间，温度保持在25～30℃之间，光照为40～500 LX；出耳管理原基形成天数11～15d；菌龄90～115d，生物转化率为57.95%～85.05%。

步骤E中采耳后的间隔养菌时间为3～5 d。

本发明的一株野生脆木耳（Auricularia fibrillfera）菌，即赣脆木1号，是从野生脆木耳JFRL01-92分离纯化并可成功栽培的一株食用菌新品种，隶属于担子菌门Basidiomycota，蘑菇纲Agaricomycetes，蘑菇目Agaricales，木耳科Auriculariaceae，木耳属 Auricularia，主要特征是脆木耳耳片颜色红棕、大而薄、口感爽脆、产量高，属中高温型食用菌品种，适合中国南方推广栽培。

本发明与现有技术相比的优势在于：

1、赣脆木1号是来自自然界的野生脆木耳种源，也是人工分离纯化和驯化栽培的食用菌新品种；

2、赣脆木1号有独特的生长特性和农艺性状：它属中高温型菌，抗逆性强，适宜我国南方自然温、湿条件下栽培，可填补食用菌种植的季节性高温空档期；它生长速度快，生物转化率高，而鲜耳含水率相对较低；耳片颜色红棕色、大而薄、口感爽脆，而现有栽培的黑木耳耳片颜色黑褐、小而薄、口感嫩滑粘糯，毛木耳耳片颜色浅棕、大且厚、口感硬柔；

3、通过制备液体菌种，菌种活力旺，抗杂菌能力强，缩短菌种培育时间、降低成本、简便工艺。

附图说明

图1 为野生脆木耳的袋料栽培出耳图。

具体实施方式

下面结合实施实例并对照附图对本发明作进一步详细说明。

实施例1：

1、菌种分离：取野生脆木耳JFRL01-92胶质层间组织块，置于预先配制好的PDA平板，28℃条件下培养，待长出白色菌丝，挑取纯菌丝转接至6支PDA试管继续培养7d到满管，试管种即为后续利用的母种；

2、液体菌种制备：采用液体摇瓶方法制备液体菌种用于栽培；液体培养基组成为去皮马铃薯（浸汁）20%、葡萄糖2%、酵母膏0.2%、MgSO₄·7H₂O 0.1%、KH₂PO₄0.2%、蒸馏水1000mL，pH自然，灭菌；取试管母种接入液体培养基中，28℃，180 r/min摇瓶培养8d获得液体菌种供栽培用；

3、栽培培养料配方与制作：按干物料重量配比即杂木屑45%、玉米芯20%、棉籽壳25%、麸皮6%、生石灰2%、石膏粉2%混合均匀，加水搅拌让其充分吸水，保持含水量60%，静置发酵1.5d，装袋，121℃高压蒸汽下灭菌2h，待冷却后取出以备栽培用；

4、驯化栽培出耳：将液体菌种接入灭菌且冷却的栽培袋中，再把接种后的栽培袋排放在黑暗的菌丝培养室内，发菌温度保持在25℃，相对湿度控制在70%以下，培养后期应定期通风。48d菌丝长满栽培袋，而后再养菌20d；

5、菌丝满袋成熟后将栽培袋移入出耳房，用塑料绳串起栽培袋，小刀在栽培袋上划 “＋”或“V”形孔口，孔口距离5～10 cm，保持出耳房内空气湿度80%、温度28℃、以及良好通风，光照以40～500 LX为宜，原基形成15d；菌龄115d，生物转化率为85.05%。

实施例2

1、菌种分离：取野生脆木耳JFRL01-92胶质层间组织块，置于预先配制好的PDA平板，25℃条件下培养，待长出白色菌丝，挑取纯菌丝转接至6支PDA试管继续培养7d到满管，试管种即为后续利用的母种；

2、液体菌种制备：采用液体摇瓶方法制备液体菌种用于栽培；液体培养基组成为去皮马铃薯（浸汁）20%、葡萄糖2%、酵母膏0.2%、MgSO₄·7H₂O 0.1%、KH₂PO₄0.2%、蒸馏水1000mL，pH自然，灭菌；取试管母种接入液体培养基中，28℃，180 r/min摇瓶培养6d获得液体菌种供栽培用；

3、栽培培养料配方与制作：按干物料重量杂木屑30%、玉米芯30%、棉籽壳30%、麸皮6%、生石灰2%、石膏粉2%配比混合均匀，加水搅拌让其充分吸水，保持含水量60%，静置发酵1d，装袋，121℃高温高压蒸汽下灭菌2.5h；待冷却后取出以备栽培用；

4、驯化栽培出耳：将液体菌种接入灭菌且冷却的栽培袋中，再把接种后的栽培袋排放在黑暗的菌丝培养室内，发菌温度保持在27℃，相对湿度控制在70%以下，培养后期应定期通风；50d菌丝长满栽培袋，而后再养菌15d；

5、菌丝满袋成熟后将栽培袋移入出耳房，栽培袋在出耳房内堆叠成墙式进行两头出耳,即一头袋口用小刀离料面5 cm处从上往下往里割塑料袋，另一头待头潮耳进入成熟期后，用小刀在袋底对角开2个2 cm 左右的“＋”或“V”形孔口；控制出耳房内空气湿度85%、温度30℃，保持良好的通风，光照以40～500 LX为宜，原基形成13d左右；菌龄108d，生物转化率为 73.56%。

实施例3

1、菌种分离：取野生脆木耳JFRL01-92胶质层间组织块，置于预先配制好的PDA平板，30℃条件下培养，待长出白色菌丝，挑取纯菌丝转接至6支PDA试管继续培养6d到满管，试管种即为后续利用的母种；

2、液体菌种制备：采用液体摇瓶方法制备液体菌种用于栽培；液体培养基组成为去皮马铃薯（浸汁）20%、葡萄糖2%、酵母膏0.2%、MgSO₄·7H₂O 0.1%、KH₂PO₄0.2%、蒸馏水1000mL，pH自然，灭菌；取试管母接入灭菌后液体培养基中，28℃，180 r/min摇瓶培养7d获得液体菌种供栽培用；

3、栽培培养料配方与制作：按干物料重量杂木屑50%、玉米芯20%、棉籽壳20%、麸皮6%、生石灰2%、石膏粉2%配比混合均匀，加水搅拌让其充分吸水，保持含水量60%，静置发酵2d，装袋，常压100℃灭菌12 h，熄火后继续焖3 h再开锅，待冷却后取出以备栽培用；

4、驯化栽培出耳：将液体菌种接入灭菌且冷却的栽培袋中，再把接种后的栽培袋排放在黑暗的菌丝培养室内，发菌温度保持在26℃，相对湿度控制在70%以下，培养后期应定期通风；49d菌丝长满栽培袋，而后再养菌17d；

5、菌丝满袋成熟后将栽培袋移入出耳房，栽培袋在菇房内堆叠成墙式进行单头出耳即用小刀离料面4 cm处从上往下往里割塑料袋；保持出耳房空气湿度75%、温度25℃，以及良好通风，光照以40～500 LX，原基形成11d左右。菌龄95d，生物转化率为57.95%。

本发明不局限于上述实施方式，对于本技术领域的技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以加以改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围内。本说明书中未作详细描述的内容属于本领域专业技术人员公知的现有技术。

Claims (1)

1.一株脆木耳菌，其特征在于：命名为赣脆木1号，分类命名：脆木耳（Auriculariafiberillifera），保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.23072，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2021年8月4日。