CN116377009A - 一种人参皂苷提取物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于人参皂苷提取技术领域，提供了一种人参皂苷提取物及其制备方法和应用，所述人参皂苷提取物的制备方法包括以下步骤：(1)将人参烘干后粉碎，与糖苷酶溶液混合后进行酶解，得到酶解液；(2)将上述酶解液灭菌后与复合菌剂混合进行发酵，得到人参皂苷提取物。采用上述制备方法制备得到的人参皂苷提取物中含有多种稀有人参皂苷，能够制备成具有舒缓修护、抗皱美白、防脱生发的产品，为化妆品行业提供新思路。
Description
技术领域
本发明涉及人参皂苷提取技术领域，尤其涉及一种人参皂苷提取物及其制备方法和应用。
背景技术
中药人参为五加科植物人参的根，具有大补元气、补脾益肺、生津止渴、安神增智等功效。人参中含有多种活性成分，其中人参皂苷便是人参发挥功效最主要的成分之一。人参皂苷中含量较高的为Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1，但是其生物活性较低，在人体内的吸收率也很低。而生物活性较高的稀有人参皂苷则含量少，不易被提取出来，通常需要额外的制备方法。目前制备稀有人参皂苷的方法有3种：利用微生物发酵将人参皂苷中的主要成分转化成稀有皂苷；利用代谢工程和合成生物学改造大肠杆菌和酵母等微生物直接产稀有人参皂苷；利用糖苷酶将主要皂苷转化成稀有皂苷。但是上述三种制备方法工艺复杂，需要付出大量的人力物力，不利于工业生产。因此，亟待提供一种工艺简单的稀有皂苷制备方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种人参皂苷提取物及其制备方法和应用，将人参经过酶解和发酵后，使得提取物中含有多种稀有人参皂苷，能够制备成具有舒缓修护、抗皱美白、防脱生发的产品。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种人参皂苷提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将人参烘干后粉碎，与糖苷酶溶液混合后进行酶解，得到酶解液；
(2)将上述酶解液灭菌后与复合菌剂混合进行发酵，得到人参皂苷提取物。
优选的，步骤(1)中所述烘干的温度为40～50℃，所述烘干的时间为2～6h。
优选的，步骤(1)中所述人参与糖苷酶溶液的比例为1g：5～10mL；
所述糖苷酶溶液包括β-葡萄糖苷酶、β-半乳糖苷酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶中的一种或几种；
所述糖苷酶溶液中酶的浓度独立为3～10U/mL。
优选的，步骤(1)中所述酶解的温度为40～50℃，所述酶解的时间为20～40min。
优选的，在进行酶解前调节溶液的pH值为4.5～5.5。
优选的，步骤(2)中所述复合菌剂包括发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌，所述发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌的质量比为1:1～3。
优选的，步骤(2)中所述复合菌剂的接种量为5～10％，所述发酵的温度为35～40℃，所述发酵的时间为24～48h。
本发明还提供了上述任一项所述制备方法制备得到的人参皂苷提取物。
本发明还提供了上述人参皂苷提取物在制备舒缓修护、抗皱美白、防脱生发功效的产品中的应用。
优选的，所述产品的类型包括洁面乳、精华液、精华霜、面霜、面膜、护发素、洗发水、身体乳。
相比于现有技术，本发明的有益效果为：
本发明将人参中的稀有皂苷经过酶解和发酵后进行富集，得到的人参皂苷提取物中含有多种稀有皂苷，制备方法简单，得到的提取物中活性成分含量高，可用于制备成具有舒缓修护、抗皱美白、防脱生发功效的化妆品。
具体实施方式
本发明提供了一种人参皂苷提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将人参烘干后粉碎，与糖苷酶溶液混合后进行酶解，得到酶解液；
(2)将上述酶解液灭菌后与复合菌剂混合进行发酵，得到人参皂苷提取物。
在本发明中，首先将人参烘干后粉碎，与糖苷酶溶液混合后进行酶解，得到酶解液，所述烘干的温度为40～50℃，优选为42～48℃，进一步优选为44～46℃；所述烘干的时间为2～6h，优选为3～5h，进一步优选为3.5～4.5h；所述烘干方法采用本领域常规烘干方法即可。
在本发明中，所述粉碎方法采用本领域常规粉碎方法即可。
在本发明中，所述人参与糖苷酶溶液的比例为1g：5～10mL，优选为1g：6～9mL，进一步优选为1g：7～8mL；所述糖苷酶溶液包括β-葡萄糖苷酶、β-半乳糖苷酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶中的一种或几种；所述糖苷酶溶液中各酶的浓度独立为3～10U/mL，优选为4～8U/mL，进一步优选为5～6U/mL。
在本发明中，所述酶解的温度为40～50℃，优选为42～48℃，进一步优选为44～46℃；所述酶解的时间为20～40min，优选为25～35min，进一步优选为28～32min。
在本发明中，在进行酶解前调节溶液的pH值为4.5～5.5，优选为4.7～5.3，进一步优选为4.9～5.1。
在本发明中，将上述酶解液灭菌后与复合菌剂混合进行发酵，得到人参皂苷提取物，所述复合菌剂包括发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌，所述发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌的质量比为1:1～3，优选为1:1.5～2.5，进一步优选为1:1.8～2.2；所述发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌中的活菌数独立为108～109CFU/g，优选为1.2×108～1.8×108CFU/g，进一步优选为1.4×108～1.6×108CFU/g。
在本发明中，所述灭菌的温度为120～130℃，优选为122～128℃，进一步优选为124～126℃；所述灭菌的时间为20～30min，优选为22～28min，进一步优选为24～26min。
在本发明中，所述复合菌剂的接种量为5～10％，优选为6～9％，进一步优选为7～8％；所述发酵的温度为35～40℃，优选为36～39℃，进一步优选为37～38℃；所述发酵的时间为24～48h，优选为30～45h，进一步优选为35～40h。
在本发明中，在发酵完成后还包括离心处理步骤，以分离菌体，所述离心的转速为1000～2000rpm，优选为1200～1800rpm，进一步优选为1400～1600rpm；所述离心的时间为5～10min，优选为6～9min，进一步优选为7～8min。
在本发明中，经过离心处理后灭菌，所述灭菌的温度为120～130℃，优选为122～128℃，进一步优选为124～126℃；所述灭菌的时间为20～30min，优选为22～28min，进一步优选为24～26min。
本发明还提供了上述任一项所述制备方法制备得到的人参皂苷提取物。
本发明还提供了上述人参皂苷提取物在制备舒缓修护、抗皱美白、防脱生发功效的产品中的应用。
在本发明中，所述产品的类型包括洁面乳、精华液、精华霜、面霜、面膜、护发素、洗发水、身体乳。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
本实施例提供了一种人参皂苷提取物，其制备方法包括以下步骤：
(1)取洗净的人参，放入烘干箱中45℃烘干5h后粉碎，得到人参粉末。
(2)取β-葡萄糖苷酶、β-半乳糖苷酶(均购自上海麦克林生化科技有限公司)制成各酶独立浓度为5U/mL的糖苷酶溶液，取人参粉末100g，与800mL糖苷酶溶液混合，调节其pH值为5.0，以45℃酶解30min后得到酶解液，121℃灭菌20min后备用。
(3)将活菌数为108cfu/g的发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌(均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心)按照1:2的质量比混合，然后以5％的接种量接入上述发酵液中，在37℃条件下发酵36h，得到人参皂苷发酵液，将发酵液以1000rpm离心10min后，121℃灭菌20min，即得到人参皂苷提取物。
实施例2
本实施例提供了一种人参皂苷提取物，其制备方法包括以下步骤：
(2)取洗净的人参，放入烘干箱中40℃烘干6h后粉碎，得到人参粉末。
(2)取β-葡萄糖苷酶、β-半乳糖苷酶和β-木糖苷酶(均购自上海麦克林生化科技有限公司)制成各酶独立浓度为6U/mL的糖苷酶溶液，取人参粉末100g，与500mL糖苷酶溶液混合，调节其pH值为4.8，以40℃酶解40min后得到酶解液，121℃灭菌20min后备用。
(3)将活菌数为109cfu/g的发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌(均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心)按照1:1的质量比混合，然后以8％的接种量接入上述发酵液中，在35℃条件下发酵48h，得到人参皂苷发酵液，将发酵液以1000rpm离心10min后，121℃灭菌20min，即得到人参皂苷提取物。
实施例3
本实施例提供了一种人参皂苷提取物，其制备方法包括以下步骤：
(3)取洗净的人参，放入烘干箱中50℃烘干4h后粉碎，得到人参粉末。
(2)取β-半乳糖苷酶、α-阿拉伯味喃糖和β-木糖苷酶(均购自上海麦克林生化科技有限公司)制成各酶独立浓度为10U/mL的糖苷酶溶液，取人参粉末100g，与1000mL糖苷酶溶液混合，调节其pH值为5.2，以45℃酶解30min后得到酶解液，121℃灭菌20min后备用。
(3)将活菌数为109cfu/g的发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌(均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心)按照1:3的质量比混合，然后以6％的接种量接入上述发酵液中，在38℃条件下发酵36h，得到人参皂苷发酵液，将发酵液以1000rpm离心10min后，121℃灭菌20min，即得到人参皂苷提取物。
对比例1
本对比例与实施例1相比，区别在于，在得到人参酶解液后不进行后续发酵处理，其余参数与方法和实施例1相同。
对比例2
本对比例与实施例1相比，区别在于，在得到人参粉末后不进行酶解处理，直接将人参粉末与8倍量的水混合后进行发酵，其余参数与方法和实施例1相同。
对比例3
本对比例与实施例1相比，区别在于，发酵使用的复合菌剂为质量比为2:1的发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌，其余参数与方法和实施例1相同。
实验例1
本实验例探究了实施例1～3制备得到的人参皂苷提取物的舒缓修护效果，步骤如下：选取70名年龄20～50岁、皮肤正常的女性志愿者，将其随机平均分为7组，分别为实施例1～3组，对比例1～3组和对照组。利用辣椒油刺激志愿者手臂皮肤，在室温，环境舒适的情况下，将各组志愿者左右前臂清洗干净，在左右前臂上各划定一块5cm×5cm的正方形区域，在区域内涂抹2mL的辣椒油，刺激左右前臂20min后，冲洗掉辣椒油，之后在涂抹辣椒油的区域分别涂抹2mL对应组的人参皂苷提取物，并保留另一侧手臂涂抹辣椒油的区域不涂抹任何产品，作为空白对照区域。对照组涂抹2mL清水。每隔一段时间观察志愿者前臂的红肿状况，并记下前臂完全止痛的时间以及完全退红的时间。结果见表1。
表1.各组志愿者舒缓修护结果比较
| 组别 | 止痛所需时间/min | 退红所用时间/min |
| 实施例1 | 27.9 | 53.4 |
| 实施例2 | 30.8 | 55.5 |
| 实施例3 | 29.2 | 53.4 |
| 对比例1 | 68.2 | 86.4 |
| 对比例2 | 73.8 | 95.1 |
| 对比例3 | 74.1 | 95.6 |
| 对照 | 85.6 | 115.4 |
由表1可知，本发明制备得到的人参皂苷提取物具有舒缓修复的功效，使用后能够使辣椒油刺激的皮肤快速止痛和退红，且效果明显优于对比例1～3组。
实验例2
本实验例探究了实施例1～3制备得到的人参皂苷提取物的抗皱美白效果。
1.抗皱功效
选取70名年龄20～50岁的女性志愿者，将其随机平均分为7组，分别为实施例1～3组，对比例1～3组和对照组。利用VISIA-CR面部皮肤图像分析仪观察各组志愿者脸部皮肤的皱纹深度，实验方法为：各组志愿者在使用清水洁面后，取对应组的产品涂于面部，对照组使用清水涂于面部，按摩至完全吸收，1次/d，连续使用28d。在第1d使用前和第28d使用产品后利用VISIA-CR面部皮肤图像分析仪观察皱纹深度，统计各组志愿者使用产品后的皱纹减少率。结果见表2。
表2.各组志愿者抗皱结果比较
| 组别 | 使用28d后皱纹减少率/％ |
| 实施例1 | 34.05 |
| 实施例2 | 32.59 |
| 实施例3 | 33.97 |
| 对比例1 | 20.11 |
| 对比例2 | 18.23 |
| 对比例3 | 21.74 |
| 对照 | 8.70 |
由表2可知，本发明制备得到的人参皂苷提取物具有抗皱功效，使用后能够修复受损的胶原蛋白和胶原纤维，且效果明显优于对比例1～3组。
2.美白功效
选取70名年龄20～30岁的女性志愿者，将其随机平均分为7组，分别为实施例1～3组，对比例1～3组和对照组。利用德国CK多探头皮肤测试系统MPA9测定各组志愿者脸部皮肤的黑色素含量，实验方法为：各组志愿者在使用清水洁面后，取对应组的产品涂于面部，对照组使用清水涂于面部，按摩至完全吸收，1次/d，连续使用28d。在第1d、第7d、第14d、第21d、第28d使用产品2h后，在相同的脸部位置利用探头测定其黑色素含量。结果见表3。
表3.各组志愿者美白结果比较
由表3可知，本发明制备得到的人参皂苷提取物具有美白的效果，使用后能够有效减少肌肤中的黑色素沉积，提亮肤色，且效果明显优于对比例组。
实验例3
本实验例探究了实施例1～3制备得到的人参皂苷提取物的防脱生发效果，步骤如下：选择健康的SD大鼠70只，将其随机平均分为7组，分别为实施例1～3组，对比例1～3组和对照组，每组大鼠使用基础饲料喂养7d后，剔除背部3cm×3cm的背毛，脱毛第2d起实施例1～3组和对比例1～3组在大鼠裸露皮肤上涂抹对应的人参皂苷提取液，空白对照组涂抹生理盐水。每组大鼠涂抹药剂的量为1mL/次，1次/d，连续抹药12d。从第5d起每次抹药前记录大鼠背部毛发的生长情况，将大鼠毛发生长情况分为5个等级，分别为0、1、2、3、4，“0”代表没有毛发生长，“1”代表有少量绒毛生出，“2”代表有明显毛发生出，“3”代表有毛发生长良好，“4”代表毛发生长情况达到正常水平。结果见表4。
表4.大鼠背毛生长情况比较
由表4可知，采用本发明制备得到的人参皂苷提取物涂抹大鼠裸露皮肤后能够在第6～7天长出绒毛，明显早于对比例组和对照组，且在第11～12天毛发生长情况就能够达到正常水平。并且在实验过程中实施例1～3组大鼠皮肤没有出现过敏现象，对大鼠的活动及摄食也没有造成影响，说明本发明制备得到的人参皂苷提取物无刺激性，具有防脱生发的功效。
由以上实施例可知，本发明提供了一种人参皂苷提取物及其制备方法和应用，将人参经过酶解和发酵后，使得提取物中含有多种稀有人参皂苷，能够制备成具有舒缓修护、抗皱美白、防脱生发的产品。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种人参皂苷提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将人参烘干后粉碎，与糖苷酶溶液混合后进行酶解，得到酶解液；
(2)将上述酶解液灭菌后与复合菌剂混合进行发酵，得到人参皂苷提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述烘干的温度为40～50℃，所述烘干的时间为2～6h。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述人参与糖苷酶溶液的比例为1g：5～10mL；
所述糖苷酶溶液包括β-葡萄糖苷酶、β-半乳糖苷酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶中的一种或几种；
所述糖苷酶溶液中酶的浓度独立为3～10U/mL。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述酶解的温度为40～50℃，所述酶解的时间为20～40min。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，在进行酶解前调节溶液的pH值为4.5～5.5。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述复合菌剂包括发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌，所述发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌的质量比为1:1～3。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述复合菌剂的接种量为5～10％，所述发酵的温度为35～40℃，所述发酵的时间为24～48h。
8.权利要求1～7任一项所述制备方法制备得到的人参皂苷提取物。
9.权利要求8所述的人参皂苷提取物在制备舒缓修护、抗皱美白、防脱生发功效的产品中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述产品的类型包括洁面乳、精华液、精华霜、面霜、面膜、护发素、洗发水、身体乳。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| CN202310599329.3A CN116377009A (zh) | 2023-05-25 | 2023-05-25 | 一种人参皂苷提取物及其制备方法和应用 |
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