CN110613623A - 一种小分子鞣花酸溶液的制备方法 - Google Patents

一种小分子鞣花酸溶液的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于化妆品原料技术领域，具体公开了一种小分子鞣花酸溶液的制备方法。该方法包括以下步骤：发酵菌悬液制备、石榴皮的固态发酵、萃取和鞣花酸溶液制备，本发明的鞣花酸经过了特殊工艺处理，改变了鞣花酸吸收不好，不稳定的特点，使溶液中的鞣花酸变成小分子，容易吸收，效果见效快，且性质稳定，改进的小分子鞣花酸美白效果是普通鞣花酸五倍，将其应用于制备具有抗氧化、美白、抗衰老功效的护肤品具有显著的应用的前景。

Description

一种小分子鞣花酸溶液的制备方法
技术领域
本发明属于化妆品原料技术领域，具体涉及一种小分子鞣花酸溶液的制备方法。
背景技术
鞣花酸是一种多酚二内酯，是没食子酸的二聚衍生物。鞣花酸广泛存在于各种软果、坚果等植物组织中的一种天然多酚组分，鞣花酸与三氯化铁的显色反应呈蓝色，遇硫酸呈黄色，Greiss-meger反应呈阳性，还易与金属阳离子如Ca2+、Mg2+结合。经过美国HSI(Health Sciences Institute)实验室研究和南韩大学(Ca tholic University of SouthKorea)的近期实验室研究，发现鞣花酸中的C元素在高温加入催化剂的情况下会增加鞣花酸的功效，并且不会改变鞣花酸中原有的分子结构。现有技术制备得到的鞣花酸分子量大，不容易被肌肤吸收，并且性质不稳定，限制其作为化妆品原料的使用。
发明内容
本发明的目的是提供一种小分子鞣花酸溶液的制备方法。本发明的鞣花酸经过了特殊工艺处理，改变了鞣花酸吸收不好，不稳定的特点，使溶液中的鞣花酸变成小分子，容易吸收，效果见效快，改进的小分子鞣花酸美白效果是普通鞣花酸五倍。
本发明是通过以下技术方案予以实现的：
一种小分子鞣花酸溶液的制备方法，包括以下步骤：
(1)发酵菌悬液制备：将黑曲霉孢子、假丝酵母菌悬液接种至营养培养基中，搅拌混匀，得到发酵菌悬液，使培养基中含黑曲霉孢子数≥1×108个/mL，假丝酵母菌≥1×107个/mL，所述的营养培养基组成为：NaNO3 2～4g/L、K2HPO4 1～2g/L、MgSO4 0.5～1g/L、KCl0.5～1g/L、葡萄糖25～35g/L，溶剂为水；
(2)石榴皮的固态发酵：将新鲜石榴皮干燥、粉碎，得到石榴皮粉末；往石榴皮粉末中加入发酵菌悬液，所述发酵菌悬液的用量占石榴皮粉末重量的35～50％，搅拌混匀，得到发酵物料，将发酵物料置于发酵罐中，在28～35℃、相对湿度85～90％的条件下发酵5～6天，终止发酵，得到发酵产物，将发酵产物干燥后备用；
(3)萃取：将干燥后的发酵产物再次粉碎，然后加入发酵产物总重量8～12倍量的无水甲醇浸泡30～60分钟，回流提取2～3次，每次1～3小时，过滤，合并滤液，将滤液旋蒸回收甲醇，所得固体经去离子水水洗后冷冻干燥即得鞣花酸冻干粉；
(4)鞣花酸溶液制备：称取1.03g鞣花酸冻干粉，加入20mL去离子水，通入氮气并使反应全程都在氮气氛围下进行，将盛有鞣花酸水溶液的反应容器置于15～30℃水浴中反应3～5h，将反应容器进行遮光处理，保证反应在避光条件下进行，得到小分子鞣花酸溶液。
进一步的，所述的黑曲霉孢子、假丝酵母菌悬液的接种量为1％v/v。
进一步的，所述的营养培养基组成为：NaNO3 3g/L、K2HPO4 1.5g/L、MgSO4 0.5g/L、KCl 0.5g/L、葡萄糖35g/L，溶剂为水。
优选的，步骤(4)中是将盛有鞣花酸水溶液的反应容器置于25℃水浴中反应4h。
本发明还提供一种护肤品，所述的护肤品含有10～30wt.％的根据上述的小分子鞣花酸溶液的制备方法制得的小分子鞣花酸溶液。优选，所述的护肤品为具有抗氧化、美白和/或抗衰老功效的面膜液、精华素、膏霜或乳液。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明的鞣花酸经过了特殊工艺处理，改变了鞣花酸吸收不好，不稳定的特点，使溶液中的鞣花酸变成小分子，容易吸收，效果见效快，且性质稳定，改进的小分子鞣花酸美白效果是普通鞣花酸五倍，将其应用于制备具有抗氧化、美白、抗衰老功效的护肤品具有显著的应用的前景。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。下述实施例中配方的组分，若无特别说明，均为常规市售产品。
实施例1
一种小分子鞣花酸溶液的制备方法，包括以下步骤：
(1)发酵菌悬液制备：将黑曲霉孢子、假丝酵母菌悬液按1％v/v的接种量接种至营养培养基中，搅拌混匀，得到发酵菌悬液，使培养基中含黑曲霉孢子数≥1×108个/mL，假丝酵母菌≥1×107个/mL，所述的营养培养基组成为：NaNO3 3g/L、K2HPO4 1.5g/L、MgSO4 0.5g/L、KCl 0.5g/L、葡萄糖35g/L，溶剂为水；
(2)石榴皮的固态发酵：将新鲜石榴皮干燥、粉碎，得到石榴皮粉末；往石榴皮粉末中加入发酵菌悬液，所述发酵菌悬液的用量占石榴皮粉末重量的45％，搅拌混匀，得到发酵物料，将发酵物料置于发酵罐中，在30℃、相对湿度85％的条件下发酵5天，终止发酵，得到发酵产物，将发酵产物干燥后备用；
(3)萃取：将干燥后的发酵产物再次粉碎，然后加入发酵产物总重量10倍量的无水甲醇浸泡60分钟，回流提取3次，每次2小时，过滤，合并滤液，将滤液旋蒸回收甲醇，所得固体经去离子水水洗后冷冻干燥即得鞣花酸冻干粉；
(4)鞣花酸溶液制备：称取1.03g鞣花酸冻干粉，加入20mL去离子水，通入氮气并使反应全程都在氮气氛围下进行，将盛有鞣花酸水溶液的反应容器置于25℃水浴中反应4h，将反应容器进行遮光处理，保证反应在避光条件下进行，得到小分子鞣花酸溶液。
实施例2
一种小分子鞣花酸溶液的制备方法，包括以下步骤：
(1)发酵菌悬液制备：将黑曲霉孢子、假丝酵母菌悬液按1％v/v的接种量接种至营养培养基中，搅拌混匀，得到发酵菌悬液，使培养基中含黑曲霉孢子数≥1×108个/mL，假丝酵母菌≥1×107个/mL，所述的营养培养基组成为：NaNO3 2g/L、K2HPO4 1g/L、MgSO4 1g/L、KCl 1g/L、葡萄糖25g/L，溶剂为水；
(2)石榴皮的固态发酵：将新鲜石榴皮干燥、粉碎，得到石榴皮粉末；往石榴皮粉末中加入发酵菌悬液，所述发酵菌悬液的用量占石榴皮粉末重量的50％，搅拌混匀，得到发酵物料，将发酵物料置于发酵罐中，在35℃、相对湿度90％的条件下发酵6天，终止发酵，得到发酵产物，将发酵产物干燥后备用；
(3)萃取：将干燥后的发酵产物再次粉碎，然后加入发酵产物总重量12倍量的无水甲醇浸泡30分钟，回流提取2次，每次3小时，过滤，合并滤液，将滤液旋蒸回收甲醇，所得固体经去离子水水洗后冷冻干燥即得鞣花酸冻干粉；
(4)鞣花酸溶液制备：称取1.03g鞣花酸冻干粉，加入20mL去离子水，通入氮气并使反应全程都在氮气氛围下进行，将盛有鞣花酸水溶液的反应容器置于15℃水浴中反应5h，将反应容器进行遮光处理，保证反应在避光条件下进行，得到小分子鞣花酸溶液。
实施例3
一种小分子鞣花酸溶液的制备方法，包括以下步骤：
(1)发酵菌悬液制备：将黑曲霉孢子、假丝酵母菌悬液按1％v/v的接种量接种至营养培养基中，搅拌混匀，得到发酵菌悬液，使培养基中含黑曲霉孢子数≥1×108个/mL，假丝酵母菌≥1×107个/mL，所述的营养培养基组成为：NaNO3 4g/L、K2HPO4 2g/L、MgSO4 0.5g/L、KCl 0.5g/L、葡萄糖35g/L，溶剂为水；
(2)石榴皮的固态发酵：将新鲜石榴皮干燥、粉碎，得到石榴皮粉末；往石榴皮粉末中加入发酵菌悬液，所述发酵菌悬液的用量占石榴皮粉末重量的35％，搅拌混匀，得到发酵物料，将发酵物料置于发酵罐中，在28℃、相对湿度85％的条件下发酵5天，终止发酵，得到发酵产物，将发酵产物干燥后备用；
(3)萃取：将干燥后的发酵产物再次粉碎，然后加入发酵产物总重量8倍量的无水甲醇浸泡50分钟，回流提取3次，每次2小时，过滤，合并滤液，将滤液旋蒸回收甲醇，所得固体经去离子水水洗后冷冻干燥即得鞣花酸冻干粉；
(4)鞣花酸溶液制备：称取1.03g鞣花酸冻干粉，加入20mL去离子水，通入氮气并使反应全程都在氮气氛围下进行，将盛有鞣花酸水溶液的反应容器置于30℃水浴中反应3h，将反应容器进行遮光处理，保证反应在避光条件下进行，得到小分子鞣花酸溶液。
试验例一、美白效果评价
筛选60名女性志愿受试者，年龄30-50岁，平均年龄35±5岁，所有志愿受试者均无严重系统疾病、无免疫性缺陷或自身免疫性疾病者、无过敏性疾病，受试期间未使用各种化妆品等，并能按实验要求完成规定的内容者，并且面部有由于日晒、工作压力、年龄等造成的斑点。将志愿受试者分为6组，每组10人，分别为试验1-3组和对比1-3组，其中，试验1-3组分别使用实施例1-3制得的小分子鞣花酸溶液(鞣花酸浓度为0.01g/mL)，对比1组使用实施例1制得的鞣花酸冻干粉溶液(将实施例1制得的鞣花酸冻干粉直接溶于去离子水，搅拌溶解即得，鞣花酸浓度为0.01g/mL)，对比2组使用某市售化妆品原料鞣花酸溶液(将某市售化妆品原料鞣花酸直接溶于去离子水，搅拌溶解即得，鞣花酸浓度为0.01g/mL)，对比3组使用β-熊果苷溶液(将β-熊果苷直接溶于去离子水，搅拌溶解即得，β-熊果苷浓度为0.01g/mL)
使用方法：早晚洁面爽肤后，取受试的样品适量，点涂于脸部，均匀涂抹并按摩至吸收。分别在使用前，使用1个月后用德国Courage+Khazaka公司(德国CK公司)制造的皮肤黑色素MexameterMX18测试探头，测试脸部皮肤的黑色素值，面部测试区域为眉心正中间往上2cm额头区域、下嘴唇正中间往下2cm下巴区域、鼻尖与瞳孔交线处左、右脸颊区域。取平均值，结果见下表1所示。
表1各组志愿者皮肤黑色素含量比较(％)
组别 使用前 使用后 降幅
试验1组 168.30 129.46 -38.84
试验2组 170.48 133.96 -36.52
试验3组 172.67 135.31 -37.36
对比1组 169.83 160.81 9.02
对比2组 173.05 165.37 7.68
对比3组 175.24 172.79 2.45
结果表明，本发明实施例1-3制得的小分子鞣花酸溶液可显著降低志愿者皮肤黑色素含量，具有显著的美白效果，效果优于对比1-3组。由对比例1-2组可知，改进的小分子鞣花酸美白效果是普通鞣花酸五倍左右，由对比例3组可知，改进的小分子鞣花酸美白效果是β-熊果苷的15倍左右。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种小分子鞣花酸溶液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)发酵菌悬液制备：将黑曲霉孢子、假丝酵母菌悬液接种至营养培养基中，搅拌混匀，得到发酵菌悬液，使培养基中含黑曲霉孢子数≥1×108个/mL，假丝酵母菌≥1×107个/mL，所述的营养培养基组成为：NaNO3 2～4g/L、K2HPO4 1～2g/L、MgSO4 0.5～1g/L、KCl 0.5～1g/L、葡萄糖25～35g/L，溶剂为水；
(2)石榴皮的固态发酵：将新鲜石榴皮干燥、粉碎，得到石榴皮粉末；往石榴皮粉末中加入发酵菌悬液，所述发酵菌悬液的用量占石榴皮粉末重量的35～50％，搅拌混匀，得到发酵物料，将发酵物料置于发酵罐中，在28～35℃、相对湿度85～90％的条件下发酵5～6天，终止发酵，得到发酵产物，将发酵产物干燥后备用；
(3)萃取：将干燥后的发酵产物再次粉碎，然后加入发酵产物总重量8～12倍量的无水甲醇浸泡30～60分钟，回流提取2～3次，每次1～3小时，过滤，合并滤液，将滤液旋蒸回收甲醇，所得固体经去离子水水洗后冷冻干燥即得鞣花酸冻干粉；
(4)鞣花酸溶液制备：称取1.03g鞣花酸冻干粉，加入20mL去离子水，通入氮气并使反应全程都在氮气氛围下进行，将盛有鞣花酸水溶液的反应容器置于15～30℃水浴中反应3～5h，将反应容器进行遮光处理，保证反应在避光条件下进行，得到小分子鞣花酸溶液。
2.根据权利要求1所述的小分子鞣花酸溶液的制备方法，其特征在于，所述的黑曲霉孢子、假丝酵母菌悬液的接种量为1％v/v。
3.根据权利要求1所述的小分子鞣花酸溶液的制备方法，其特征在于，所述的营养培养基组成为：NaNO3 3g/L、K2HPO4 1.5g/L、MgSO4 0.5g/L、KCl 0.5g/L、葡萄糖35g/L，溶剂为水。
4.根据权利要求1所述的小分子鞣花酸溶液的制备方法，其特征在于，是将盛有鞣花酸水溶液的反应容器置于25℃水浴中反应4h。
5.一种护肤品，其特征在于，含有10～30wt.％的根据权利要求1-4任一所述的小分子鞣花酸溶液的制备方法制得的小分子鞣花酸溶液。
6.根据权利要求5所述的护肤品，其特征在于，所述的护肤品为具有抗氧化、美白和/或抗衰老功效的面膜液、精华素、膏霜或乳液。
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