CN111568799A - 一种海参酵解素在美白产品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种海参酵解素在美白产品中的应用，属于天然化妆品技术领域。本发明经研究发现，采用CN 109251954 A提供的制备方法制备得到的海参多肽产品对酪氨酸酶活性具有显著抑制作用，将其应用于面膜中，制成的面膜天然无毒，具有深层滋养保湿、美白等作用，且修复功能强大，同时，本发明制备工艺简单、经济、实用，反应条件温和，可大规模工业化生产，因此具有重要的经济价值和社会效益。
Description
技术领域
本发明属于天然化妆品技术领域，具体涉及一种海参酵解素在美白产品中的应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
随着人们生活水平的提高，人们对护肤品的要求越来越高，但是由于生活压力增加、睡眠不足、环境污染等各种因素又加速皮肤的老化，出现皮肤干燥、毛孔粗大、色斑等一系列问题，人们关注化妆品的保湿、美白、抗老化等功效，往往对皮肤是否能够吸收营养物质未引起足够的重视，目前市场上的面膜往往加入高分子聚合物，分子量过大，皮肤细胞不能吸收，反而过剩的营养物质成为皮肤表面细菌生长繁殖的温床，加速皮肤的损伤。
海参加工过程中产生的副产物海参肠内含有海参多糖、海参皂苷、胶原蛋白等多种生物活性物质，现有技术中报道其具有提高机体免疫力、抗肿瘤、促进造血功能、抗凝血和降血脂等多种生理功效，白白丢弃不但造成资源的极大浪费，同时也污染了海洋环境。因此，以废弃的海参肠为原料进一步制备海参深加工产品以进一步发挥其应用价值，显然具有深远的社会意义、环境意义及丰厚的经济效益。
在前期工作中，发明人以利用微生物发酵法对海参肠进行发酵制备得到一种海参发酵产品，富含丰富的海参多肽等多种营养成分，并已申请了中国专利CN 109251954 A，因此，有必要进一步对该海参发酵产品进行进一步研究，以拓宽其应用领域。
发明内容
本发明提供一种海参酵解素在美白产品中的应用。本发明经研究发现，采用CN109251954 A提供的制备方法制备得到的海参多肽产品(以下简称海参酵解素)对酪氨酸酶活性具有显著抑制作用，将其应用于面膜中，制成的面膜天然无毒，具有深层滋养保湿、美白等作用，且修复功能强大，因此具有良好的实际应用之价值。
为了实现上述技术目的，本发明的技术方案如下：
本发明的第一个方面，提供海参酵解素在美白产品和/或制备美白产品中的应用。
其中，所述应用具体为如下任意一种或多种：
1)抑制酪氨酸酶活性；
2)深层滋养保湿；
3)美白。
所述海参酵解素按照CN 109251954 A提供的方法制备得到。
所述美白产品包括但不限于面膜、保湿水、乳液、面霜、沐浴液和粉底，优选为面膜。
所述美白产品还包括油性成分、无机填料、表面活性剂、保湿剂、增粘剂、低级醇、多价螯合物、有机胺、pH调节剂、防腐剂、防氧化剂、香料和水中的至少一种。
本发明的第二个方面，提供一种面膜，所述面膜包括无纺布面膜纸和面膜多功能液制成；其中，所述面膜多功能液包括上述海参酵解素。
所述海参酵解素在面膜多功能液中的占比为0.1～1％(按质量分数计)，进一步为0.1～0.5％，如0.1％、0.2％或0.5％。
进一步的，所述面膜多功能液还包括基液，本发明中对面膜基液不做具体限定，按照常规方法制备即可。
在本发明的一个具体实施方式中，所述面膜多功能液由以下质量分数的成分组成：
海参酵解素0.1％-0.5％，基液99.9％-99.5％。
本发明的第三个方面，所述面膜具有如下任意一种或多种用途：
1)抑制酪氨酸酶活性；
2)深层滋养保湿；
3)美白。
以上一个或多个技术方案的有益技术效果：
上述技术方案对前期制备得到的海参多肽产品(即海参酵解素)进行进一步研究发现，其对酪氨酸酶活性具有显著抑制作用，将其应用于面膜中，制成的面膜天然无毒，具有深层滋养保湿、美白等作用，且修复功能强大。
同时，上述技术方案制备工艺简单、经济、实用，反应条件温和，可大规模工业化生产，因此具有重要的经济价值和社会效益。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1中海参酵解素对酪氨酸酶活性的影响；
图2为本发明实施例1中海参肽对酪氨酸酶活性的影响。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
本发明的一个具体实施方式中，海参酵解素在美白产品和/或制备美白产品中的应用。
本发明的又一具体实施方式中，所述应用具体为如下任意一种或多种：
1)抑制酪氨酸酶活性；
2)深层滋养保湿；
3)美白。
本发明的又一具体实施方式中，所述海参酵解素按照CN 109251954A提供的方法制备得到。
本发明的又一具体实施方式中，所述海参酵解素按以下方法制得：
(1)取海参肠(湿肠)，清洗、挤压水分后，配成溶液，固形物浓度约为8-15％，pH为7-8；
(2)将(1)溶液加热煮沸；
(3)按每千克海参肠(以干重计)添加微生物培养液0.1～1L的比例向(2)溶液中添加微生物培养液，在温度35～45℃的条件下，发酵1～36小时，然后升温至45～60℃，保持10～30分钟；
(4)将(3)固液分离后，通过冷冻干燥工艺，制成粉剂。
其中，所述微生物培养液的制备方法如下：
枯草芽孢杆菌(CICC 10023)按照1～3％接种量接种于培养基中，在27～35℃、100～220rpm的条件下发酵培养2～5天，制得微生物培养液；
培养基组分如下，均为重量百分比：
葡萄糖1～3％，蛋白胨1～3％，酵母粉1～4％，黄豆粉(豆粕粉)3～5％，麸皮3～5％，硝酸钠0.1～0.3％，硫酸铵0.1～0.3％，磷酸二氢钾0.1～0.3％，氯化钠0.1～0.5％，余量为水。
本发明的又一具体实施方式中，所述美白产品包括但不限于面膜、保湿水、乳液、面霜、沐浴液和粉底，优选为面膜。
本发明的又一具体实施方式中，所述美白产品还包括油性成分、无机填料、表面活性剂、保湿剂、增粘剂、低级醇、多价螯合物、有机胺、pH调节剂、防腐剂、防氧化剂、香料和水中的至少一种。
本发明的又一具体实施方式中，提供一种面膜，所述面膜包括无纺布面膜纸和面膜多功能液制成；其中，所述面膜多功能液包括上述海参酵解素。
所述海参酵解素在面膜多功能液中的占比为0.1～1％(按质量分数计)，进一步为0.1～0.5％，如0.1％、0.2％或0.5％。
本发明的又一具体实施方式中，所述面膜多功能液还包括基液，本发明中对面膜基液不做具体限定，按照常规方法制备即可。
本发明的又一具体实施方式中，所述面膜多功能液由以下质量分数的成分组成：
海参酵解素0.1％-0.5％，基液99.9％-99.5％。
本发明的又一具体实施方式中，所述海参酵解素按以下方法制得：
(1)取海参肠(湿肠)，清洗、挤压水分后，配成溶液，固形物浓度约为8-15％，pH为7-8；
(2)将(1)溶液加热煮沸；
(3)按每千克海参肠(以干重计)添加微生物培养液0.1～1L的比例向(2)溶液中添加微生物培养液，在温度35～45℃的条件下，发酵1～36小时，然后升温至45～60℃，保持10～30分钟；
(4)将(3)固液分离后，通过冷冻干燥工艺，制成粉剂。
本发明的又一具体实施方式中，所述微生物培养液的制备方法如下：
枯草芽孢杆菌(CICC 10023)按照1～3％接种量接种于培养基中，在27～35℃、100～220rpm的条件下发酵培养2～5天，制得微生物培养液；
培养基组分如下，均为重量百分比：
葡萄糖1～3％，蛋白胨1～3％，酵母粉1～4％，黄豆粉(豆粕粉)3～5％，麸皮3～5％，硝酸钠0.1～0.3％，硫酸铵0.1～0.3％，磷酸二氢钾0.1～0.3％，氯化钠0.1～0.5％，余量为水。
本发明的又一具体实施方式中，所述面膜具有如下任意一种或多种用途：
1)抑制酪氨酸酶活性；
2)深层滋养保湿；
3)美白。
以下通过实施例对本发明做进一步解释说明，但不构成对本发明的限制。应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1
实验材料：酪氨酸酶、L-多巴购买于上海宝曼生物科技有限公司；Na2HPO4、NaH2PO4、HCL购买于济南鼎国生物科技有限公司；样品1、2荣成市慧海创达生物科技有限公司生产。
样品的制备：
(1)样品1：海参酵解素(商品名，具体按CN 109251954 A实施例1制备方法制备得到)
(2)样品2：海参肽溶液(样品1经纯化处理后得到的样品，仅保留海参多肽成分)
溶液的配制：
(1)PBS缓冲液：称取15.6gNa2HPO4和35.8gNaH2PO4，用去离子水分别定容至500ml，取255mlNa2HPO4和245mlNaH2PO4溶液混匀，4℃保存备用。
(2)L-多巴溶液：称取0.0493g L-多巴，少量稀盐酸溶解后加入PBS溶液，定容至50ml。
(3)酪氨酸酶溶液：称取3mg酪氨酸酶，定容至10ml，使用时稀释10倍。
样品1对酪氨酸酶活性影响
用移液器分别按表的体积准确吸取L-多巴溶液、PBS及样品1分别置于EP管中，混匀，37℃恒温10min，然后分别在偶数管中加入0.5ml酪氨酸酶，37℃恒温10min，快速用紫外分光光度计在475nm下测定吸光度值。按下列公式计算样品抑制酪氨酸酶活性。
酪氨酸酶活性抑制率＝[1-(AT4-AT3)/(AT2-AT1)]×100％
其中，
AT1：未加样品且未加酪氨酸酶的反应液在475nm处测定的吸光度。
AT2：未加样品且加酪氨酸酶的反应液在475nm处测定的吸光度。
AT3：加样品且未加酪氨酸酶的反应液在475nm处测定的吸光度。
AT4：加样品且加酪氨酸酶的反应液在475nm处测定的吸光度。
样品2对酪氨酸酶活性影响
用移液器分别按表的体积准确吸取L-多巴溶液、PBS及样品2分别置于EP管中，混匀，37℃恒温10min，然后分别在偶数管中加入0.5ml酪氨酸酶，37℃恒温10min，快速用紫外分光光度计在475nm下测定吸光度值。按下列公式计算样品抑制酪氨酸酶活性。
酪氨酸酶活性抑制率＝[1-(AT4-AT3)/(AT2-AT1)]×100％
其中，
AT1：未加样品且未加酪氨酸酶的反应液在475nm处测定的吸光度。
AT2：未加样品且加酪氨酸酶的反应液在475nm处测定的吸光度。
AT3：加样品且未加酪氨酸酶的反应液在475nm处测定的吸光度。
AT4：加样品且加酪氨酸酶的反应液在475nm处测定的吸光度。
实验结果：
(1)样品1对酪氨酸酶活性影响结果
海参酵解素中海参肽含量为37.67％，其中，分子量小于200Da占13.77％，200Da-500Da占63.54％，大于500Da占22.68％。
由图1可以看出，当样品1中海参肽浓度高于0.216×10-2g/ml时，对酪氨酸酶酶有抑制作用，随着海参肽浓度的增加，对酪氨酸酶的抑制率逐渐增加，其中，当对酪氨酸酶活性抑制率达到30％时，海参肽的浓度为1.8g/ml。
(2)样品2对酪氨酸酶活性影响结果
由图2可以看出，当海参肽浓度为0.35g/ml时，对酪氨酸酶有抑制作用，且随着海参肽浓度的增加，对酪氨酸酶的抑制率逐渐增加，其中，当对酪氨酸酶活性抑制率达到30％时，海参肽的浓度为2.90g/ml，可以看出，样品2中海参肽浓度高于样品1中的海参肽浓度，但是其对酪氨酸酶活性的抑制率低于样品1。
从以上数据可以看出，相同样品浓度时，样品1对酪氨酸酶活性抑制率明显高于样品2，而对酪氨酸酶活性有相同抑制率时，样品1的浓度远低于样品2。说明，样品1比样品2有更好的抑制酪氨酸酶活性的作用，即有更好的美白效果。已申请中国专利CN 109251954 A，公开的一种海参多肽的生产方法制备得到的样品具有更优的美白效果。
实施例2
一种海参面膜，其特征在于，所述面膜由无纺布面膜纸和面膜多功能液制成，所述面膜多功能液按照重量份100份计，包括以下组分，海参酵解素0.1％-0.5％，基液99.9％-99.5％。
本发明的产品进行如下试验：
0.1％-0.5％海参酵解素加入到基液中，搅拌均匀溶解，面膜袋封口。
选取25-55岁100例皮肤粗糙、毛孔粗大、暗淡无光、肤色蜡黄的试验者，其中年龄构成为：25-35岁38人，36-45岁35人，46-55岁27人清洁皮肤后，第一个星期每天敷此面膜，第二周-第四周隔一天敷面膜一次，总共敷用周期28天，期间不得使用其他面膜。
使用本实施案例28天后，对100人的使用情况进行客观评价，具体评价结果见表3。
表3：海参酵解素面膜使用效果评价
| 效果非常好 | 效果一般 | 效果差 | |
| 美白 | 94 | 6 | 0 |
| 保湿 | 82 | 18 | 0 |
| 淡斑 | 56 | 21 | 4 |
| 祛皱 | 78 | 26 | 6 |
注：1.100名试验者中19名脸上无斑点
2.所有100名试验者中，均无过敏、红肿等不良反应。
由表3可以看出，海参酵解素面膜可以有效起到美白、保湿、淡斑、祛皱的作用，其中所有试验者均感受到此面膜美白及保湿效果，祛斑、祛皱效果差的试验者分别仅占4.9％、6％。
应注意的是，以上实例仅用于说明本发明的技术方案而非对其进行限制。尽管参照所给出的实例对本发明进行了详细说明，但是本领域的普通技术人员可根据需要对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围。
Claims (10)
1.海参酵解素在美白产品和/或制备美白产品中的应用；
其中，所述海参酵解素按照CN 109251954 A提供的方法制备得到。
2.如权利要求1所述应用，其特征在于，所述应用具体为如下任意一种或多种：
1)抑制酪氨酸酶活性；
2)深层滋养保湿；
3)美白。
3.如权利要求1所述应用，其特征在于，所述美白产品包括面膜、保湿水、乳液、面霜、沐浴液和粉底，优选为面膜。
4.如权利要求1所述应用，其特征在于，所述美白产品还包括油性成分、无机填料、表面活性剂、保湿剂、增粘剂、低级醇、多价螯合物、有机胺、pH调节剂、防腐剂、防氧化剂、香料和水中的至少一种。
5.一种面膜，其特征在于，所述面膜包括无纺布面膜纸和面膜多功能液制成；其中，所述面膜多功能液包括权利要求1-4任一项所述海参酵解素。
6.如权利要求5所述面膜，其特征在于，所述海参酵解素在面膜多功能液中的占比为0.1～1％(按质量分数计)，优选为0.1～0.5％。
7.如权利要求5所述面膜，其特征在于，所述面膜多功能液还包括基液。
8.如权利要求5所述面膜，其特征在于，所述面膜多功能液由以下质量分数的成分组成：
海参酵解素0.1％-0.5％，基液99.9％-99.5％。
9.如权利要求5所述面膜，其特征在于，所述海参酵解素按以下方法制得：
(1)取海参肠(湿肠)，清洗、挤压水分后，配成溶液，固形物浓度约为8-15％，pH为7-8；
(2)将(1)溶液加热煮沸；
(3)按每千克海参肠(以干重计)添加微生物培养液0.1～1L的比例向(2)溶液中添加微生物培养液，在温度35～45℃的条件下，发酵1～36小时，然后升温至45～60℃，保持10～30分钟；
(4)将(3)固液分离后，通过冷冻干燥工艺，制成粉剂；
所述微生物培养液的制备方法如下：
枯草芽孢杆菌(CICC 10023)按照1～3％接种量接种于培养基中，在27～35℃、100～220rpm的条件下发酵培养2～5天，制得微生物培养液；
培养基组分如下，均为重量百分比：
葡萄糖1～3％，蛋白胨1～3％，酵母粉1～4％，黄豆粉(豆粕粉)3～5％，麸皮3～5％，硝酸钠0.1～0.3％，硫酸铵0.1～0.3％，磷酸二氢钾0.1～0.3％，氯化钠0.1～0.5％，余量为水。
10.权利要求5-9任一项所述面膜具有如下任意一种或多种用途：
1)抑制酪氨酸酶活性；
2)深层滋养保湿；
3)美白。
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