CN116210586A - 一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法 - Google Patents
一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116210586A CN116210586A CN202310438667.9A CN202310438667A CN116210586A CN 116210586 A CN116210586 A CN 116210586A CN 202310438667 A CN202310438667 A CN 202310438667A CN 116210586 A CN116210586 A CN 116210586A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- callus
- pineapple
- days
- incubator
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- GTCAXTIRRLKXRU-UHFFFAOYSA-N methyl carbamate Chemical compound COC(N)=O GTCAXTIRRLKXRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 32
- 235000007119 Ananas comosus Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 238000009395 breeding Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 title abstract description 7
- 244000099147 Ananas comosus Species 0.000 title abstract 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 title description 2
- 241000234671 Ananas Species 0.000 claims description 29
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 claims description 29
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 12
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 8
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 claims description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 3
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 3
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 3
- 239000012883 rooting culture medium Substances 0.000 claims description 3
- 238000006748 scratching Methods 0.000 claims description 3
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 3
- 238000002834 transmittance Methods 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 230000002457 bidirectional effect Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
- A01H1/06—Processes for producing mutations, e.g. treatment with chemicals or with radiation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明属于生物育种技术领域，具体为一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法，本发明以凤梨吸芽作为外植体模本实验，采用在切片组织形成愈伤组织阶段采用氨基甲酸甲酯诱变愈伤组织与形成不定芽阶段紫外线照射诱导芽变双向协同，这种协同诱变可一次性得到多个不定向变异特征的新品种，实现产生变异凤梨新特征株系数倍增，快速获得多个变异凤梨新株，根据育种方向选育出具有新遗传特征的多个新品种。
Description
技术领域
本发明属于生物育种技术领域，具体为一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法。
背景技术
凤梨是我国四大热带水果之一，凤梨果形圆润均匀，果色呈金黄色，口感好、营养价值高、市场需求性高，我国海南、广东、广西、云南、福建等省份均有凤梨的种植分布，目前我国凤梨品种相对较少，其原因是凤梨花序较小、传统杂交育种周期长、成功率低，种子极其细微，繁育困难，通常采用无性繁殖的芽苗移栽或工厂化组织培养扩繁进行继代种植，连续多年反复种植品种退化较快，种植中自然变异产生新品种的机率极低，因此开发一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法，相对于杂交育种、单一化学诱变、核辐射诱变手段育种，具有操作简便、成功率高、成本低、周期短等诸多优势，大大提高了变异系数，实现诱变株数量增加，对凤梨产业发展和提高我国凤梨种业国际竞争力都具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的是为了提供一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法，增加凤梨育种变异系数极大提高凤梨产生新品种的育种效率。 为了实现上述发明效果，本发明采用以下技术方案， 一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：
第一步骤 制备凤梨外植体愈伤组织：选取长度为30cm凤梨吸芽，将叶片剥离干净，选取顶侧部份剪切成长2cm的茎段做外植体，然后进行外植体常规消毒处理，放在无菌滤纸上自然晾干；将晾干后的外植体接种到初代培养基中，放置于培养室中暗箱培养30天完成愈伤组织形成；培养室条件设定为：温度为28℃，空气相对湿度为70%；
第二步骤 氨基甲酸甲酯诱导愈伤组织：①将愈伤组织表皮轻轻划伤，浸泡于配比浓度为2mg/L的氨基甲酸甲酯溶液中浸泡处理6小时，然后再将愈伤组织用无菌纯水冲洗5遍后，置于无菌滤纸上晾干水分；②然后将处理后的愈伤组织接种到增殖培养基中，放置于培养室中培养30天后形成不定芽；本步骤培养室光照强度40μmol·m-2·s-1，光照时间设定为10小时/天；
第三步骤 紫外线照射不定芽诱导分化：将独立避光培养箱内设置的紫光灯打开照射30分钟消毒处理，然后将第二步中②形成的不定芽培养杯移入独立避光培养箱中接受紫外线照射，紫光灯条件设定为15W波长253－265nm，紫光灯与培养杯照射距离30cm，照射6小时后关闭紫光灯在避光培养箱中继续暗培养6天，然后移出避光培养暗箱至培养室内继续光照培养30天；本步骤培养室光照强度40μmol·m-2·s-1，光照时间设定为12小时/天；
第四步骤 生根促壮培养、炼苗、移植、品种选育：第三步骤移出暗箱在培养室内光照培养满30天后，将凤梨组培苗移出接种到生根培养基中进行诱导生根培养，以后每30天更换一次新制备的生根促壮培养基，本步骤培养室光照强度40μmol·m-2·s-1，光照时间设定为14小时/天；90天后可得到根系发达的健康株苗；将培养杯移到室外透光率为70%的遮阳网下进行20天炼苗培养；然后将组培杯中苗分别移植到营养土中培养；一个生长周期见开花结果后，按育种方向选育出优质特征的凤梨品种。
实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明的范围并不仅局限于实例，其要求保护的范围记载于权利要求的权项中, 本实施案例所述的一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法，其特征在于，所述方法实施具体包括以下步骤，
第一步骤 制备凤梨外植体愈伤组织：选取长度为30cm凤梨吸芽，将叶片剥离干净，选取顶侧部份剪切成长2cm的茎段做外植体，然后进行外植体常规消毒处理，放在无菌滤纸上自然晾干；将晾干后的外植体接种到初代培养基中，放置于培养室中暗箱培养30天完成愈伤组织形成；培养室条件设定为：温度为28℃，空气相对湿度为70%；
第二步骤 氨基甲酸甲酯诱导愈伤组织：①将愈伤组织表皮轻轻划伤，浸泡于配比浓度为2mg/L的氨基甲酸甲酯溶液中浸泡处理6小时，然后再将愈伤组织用无菌纯水冲洗5遍后，置于无菌滤纸上晾干水分；②然后将处理后的愈伤组织接种到增殖培养基中，放置于培养室中培养30天后形成不定芽；本步骤培养室光照强度40μmol·m-2·s-1，光照时间设定为10小时/天；
第三步骤 紫外线照射不定芽诱导分化：将独立避光培养箱内设置的紫光灯打开照射30分钟消毒处理，然后将第二步中②形成的不定芽培养杯移入独立避光培养箱中接受紫外线照射，紫光灯条件设定为15W波长253－265nm，紫光灯与培养杯照射距离30cm，照射6小时后关闭紫光灯在避光培养箱中继续暗培养6天，然后移出避光培养暗箱至培养室内继续光照培养30天；本步骤培养室光照强度40μmol·m-2·s-1，光照时间设定为12小时/天；
第四步骤 生根促壮培养、炼苗、移植、品种选育：第三步骤移出暗箱在培养室内光照培养满30天后，将凤梨组培苗移出接种到生根培养基中进行诱导生根培养，以后每30天更换一次新制备的生根促壮培养基，本步骤培养室光照强度40μmol·m-2·s-1，光照时间设定为14小时/天；90天后可得到根系发达的健康株苗；将培养杯移到室外透光率为70%的遮阳网下进行20天炼苗培养；然后将组培杯中苗分别移植到营养土中培养；一个生长周期见开花结果后，按育种方向选育出优质特征的凤梨品种。
本发明在切片组织形成愈伤组织阶段采用氨基甲酸甲酯诱变愈伤组织与形成不定芽阶段紫外线照射诱导芽变双向协同，实现基因突变的机率倍增，一次诱变育种过程产生多个不定向变异新株，大大提高了产生凤梨新品种的育种效率。
Claims (1)
1.一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：
第一步骤 制备凤梨外植体愈伤组织：选取长度为30cm凤梨吸芽，将叶片剥离干净，选取顶侧部份剪切成长2cm的茎段做外植体，然后进行外植体常规消毒处理，放在无菌滤纸上自然晾干；将晾干后的外植体接种到初代培养基中，放置于培养室中暗箱培养30天完成愈伤组织形成；培养室条件设定为：温度为28℃，空气相对湿度为70%；
第二步骤 氨基甲酸甲酯诱导愈伤组织：①将愈伤组织表皮轻轻划伤，浸泡于配比浓度为2mg/L的氨基甲酸甲酯溶液中浸泡处理6小时，然后再将愈伤组织用无菌纯水冲洗5遍后，置于无菌滤纸上晾干水分；②然后将处理后的愈伤组织接种到增殖培养基中，放置于培养室中培养30天后形成不定芽；本步骤培养室光照强度40μmol·m-2·s-1，光照时间设定为10小时/天；
第三步骤 紫外线照射不定芽诱导分化：将独立避光培养箱内设置的紫光灯打开照射30分钟消毒处理，然后将第二步中②形成的不定芽培养杯移入独立避光培养箱中接受紫外线照射，紫光灯条件设定为15W波长253－265nm，紫光灯与培养杯照射距离30cm，照射6小时后关闭紫光灯在避光培养箱中继续暗培养6天，然后移出避光培养暗箱至培养室内继续光照培养30天；本步骤培养室光照强度40μmol·m-2·s-1，光照时间设定为12小时/天；
第四步骤 生根促壮培养、炼苗、移植、品种选育：第三步骤移出暗箱在培养室内光照培养满30天后，将凤梨组培苗移出接种到生根培养基中进行诱导生根培养，以后每30天更换一次新制备的生根促壮培养基，本步骤培养室光照强度40μmol·m-2·s-1，光照时间设定为14小时/天；90天后可得到根系发达的健康株苗；将培养杯移到室外透光率为70%的遮阳网下进行20天炼苗培养；然后将组培杯中苗分别移植到营养土中培养；一个生长周期见开花结果后，按育种方向选育出优质特征的凤梨品种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310438667.9A CN116210586A (zh) | 2023-04-23 | 2023-04-23 | 一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310438667.9A CN116210586A (zh) | 2023-04-23 | 2023-04-23 | 一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116210586A true CN116210586A (zh) | 2023-06-06 |
Family
ID=86587525
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310438667.9A Pending CN116210586A (zh) | 2023-04-23 | 2023-04-23 | 一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116210586A (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107041301A (zh) * | 2017-03-14 | 2017-08-15 | 苏州大学 | 一种采用甲基磺酸乙酯诱变处理红掌愈伤组织的方法 |
| US20210186038A1 (en) * | 2019-01-10 | 2021-06-24 | Pak Gida Üretim Ve Pazarlama Anonim Sirketi | A method of strain development |
| CN114403008A (zh) * | 2022-01-28 | 2022-04-29 | 中国科学院近代物理研究所 | 一种快速的桔梗辐射诱变育种方法 |
| CN114902961A (zh) * | 2022-06-06 | 2022-08-16 | 福建农林大学 | 一种采用ems诱变创制观赏凤梨新品种的方法 |
-
2023
- 2023-04-23 CN CN202310438667.9A patent/CN116210586A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107041301A (zh) * | 2017-03-14 | 2017-08-15 | 苏州大学 | 一种采用甲基磺酸乙酯诱变处理红掌愈伤组织的方法 |
| US20210186038A1 (en) * | 2019-01-10 | 2021-06-24 | Pak Gida Üretim Ve Pazarlama Anonim Sirketi | A method of strain development |
| CN114403008A (zh) * | 2022-01-28 | 2022-04-29 | 中国科学院近代物理研究所 | 一种快速的桔梗辐射诱变育种方法 |
| CN114902961A (zh) * | 2022-06-06 | 2022-08-16 | 福建农林大学 | 一种采用ems诱变创制观赏凤梨新品种的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 林芬, 邓国础: "春兰人工诱变的研究", 湖南农业大学学报, no. 04 * |
| 梁称福;: "植物组织培养研究进展与应用概况", 经济林研究, no. 04, pages 99 - 105 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101258835B (zh) | 铁皮石斛优质种苗快速繁殖方法 | |
| CN101361458B (zh) | 一种甘蔗健康种苗高效繁育方法 | |
| CN102119660B (zh) | 一种高山杜鹃组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法 | |
| CN111280056A (zh) | 一种无刺花椒组培苗的继代繁育方法 | |
| CN113475395B (zh) | 一种祁术下胚轴直接再生与体外生根的方法 | |
| CN111084104B (zh) | 一种橙心姜花快速扩繁的方法 | |
| CN110583280B (zh) | 一种降低植物工厂生菜烧心率的光环境调控方法 | |
| CN106613079B (zh) | 一种半夏种茎生产方法 | |
| CN109258478B (zh) | 多花黄精的组培繁殖方法 | |
| CN110692516A (zh) | 一种树莓组织培养和快速繁殖方法 | |
| CN106106178A (zh) | 一种糖果鸢尾的组织培养方法 | |
| CN110476807B (zh) | 一种建立油用牡丹‘凤丹’成熟种胚无菌培养体系的方法 | |
| CN110800609B (zh) | 一种利用胚性愈伤组织进行钻喙兰人工快繁的方法 | |
| CN106613993A (zh) | 一种枳的组织培养再生苗的培养方法 | |
| CN114698549B (zh) | 一种葡萄砧木茎段快繁的组培培养基和组培方法 | |
| CN105766636A (zh) | 一种牡丹组织培养再生的方法 | |
| CN116019013A (zh) | 一种三角梅快速繁育的方法 | |
| CN113854151B (zh) | 一种油梨组织培养与快速繁殖的方法 | |
| CN115702630B (zh) | 猴耳环无糖组织培养方法 | |
| CN110771512B (zh) | 一种溪荪愈伤组织的高效诱导方法 | |
| CN116210586A (zh) | 一种氨基甲酸甲酯与紫外线照射协同诱变凤梨育种的方法 | |
| CN104221851B (zh) | 一种大叶蚁塔离体培养和快速繁殖的方法 | |
| CN110432146A (zh) | 一种滇重楼育苗及规模化种植方法 | |
| CN116584389B (zh) | 一种水芹的组培快繁方法 | |
| CN110235786B (zh) | 一种‘黄油果’海棠的组培快速繁殖方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |