CN110692516A - 一种树莓组织培养和快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种树莓组织培养和快速繁殖方法，具体是选择未萌发的秋福树莓腋芽为外植体，经消毒接种、萌芽诱导培养、分化培养、增殖培养生根培养和炼苗后，得到可直接进行大田移栽的树莓秧苗；该育种方法中所用诱导培养基为MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.2m/L，分化培养基为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L，增殖培养基为MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L，生根培养基为1/2MS+IBA 1.0mg/L+细沙+珍珠岩；该育种方法发芽率高，栽培成活率可达90%以上，且培养周期短，具有较好的推广价值。
Description
技术领域
本发明涉及一种树莓组织培养和快速繁殖方法，属于育苗技术领域。
背景技术
树莓为蔷薇科( Rosaceae) 、悬钩子属( Rubus L) 落叶稀常绿灌木、半灌木或多年生匍匐草本植物。树莓种类繁多，形态多异，主要产地在北半球温带，少数分布到热带和南半球。据陆玲娣1983 年统计，已知的悬钩子属植物有750 余种。其果实风味佳，营养价值远远高于苹果、橘子、葡萄等水果，堪称“世界水果之王”，是近年来世界上发展最为迅速的、集营养与保健于一身的第三代新兴水果。
本发明通过对树莓的腋芽、茎段培养，筛选出用于大量增殖的最佳培养基配方。以期提供一种树莓组织培养和快速繁殖方法可短期内获得大量优质种苗，以解决秋福树莓产业化开发中优质种苗较少的问题。
发明内容
本发明涉及一种树莓组织培养和快速繁殖方法，具体是选择未萌发的秋福树莓腋芽为外植体，经消毒接种、萌芽诱导培养、分化培养、增殖培养生根培养和炼苗后，得到可直接进行大田移栽的树莓秧苗；该育种方法发芽率高，栽培成活率可达90%以上，且培养周期短，具有较好的推广价值。
为了达到上述目的，本发明所采用的方法方案是：
一种树莓组织培养和快速繁殖方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：选择生长健壮且无病虫害的秋福树莓单株，取材时间为初春，此时植株尚未发芽，取包被鳞片的腋芽为外植体；
（2）消毒：先用洗衣粉液浸泡10 min，用流水冲洗1 h，然后放入超净台，用70%酒精消毒30 s，再以0． 1% 升汞溶液处理15 min，无菌水浸洗5 次后供接种使用；
（3）接种和诱导培养：将消毒后的将腋芽剥去外面包被的鳞片，露出幼嫩芽体，将其接种于诱导培养基中，20天后观察统计污染及萌发情况；
（4）分化培养：待腋芽萌发并且基部愈伤组织形成后，不切割，将其接种在化培养基上，30 d 后观察统计苗分化情况；
（5）增殖培养：在丛生芽形成后，将苗剪成茎段，接种在增殖培养基上，30天后观察统计平均增殖系数及苗的生长情况；
（6）生根培养：将丛生苗分割成单苗后，接入根诱导培养基，30天后观察统计苗生根情况；
（7）移栽：将瓶苗放到日光温室大棚炼苗1周，然后移栽至沙床，覆盖黑网遮光，同时保湿。
所述诱导培养基为MS + BA 0.5mg/L + NAA 0.2m /L，所述分化培养基为MS + BA2.0 mg/L + NAA 0.2mg/L，所述增殖培养基为MS + BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L，所述生根培养基为1/2MS + IBA 1.0mg/L + 细沙+珍珠岩。
所述培养条件培养温度为20-25℃，光照强度为1500 lx，光照时间为12 h /d，培养基pH 为5.8。
本发明具有如下优点：
本发明的育苗方法发芽率高，栽培成活率可达90%以上，且培养周期短，具有较好的推广价值。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。
实施例1
一种树莓组织培养和快速繁殖方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：选择生长健壮且无病虫害的秋福树莓单株，取材时间为初春，此时植株尚未发芽，取包被鳞片的腋芽为外植体；
（2）消毒：先用洗衣粉液浸泡10 min，用流水冲洗1 h，然后放入超净台，用70%酒精消毒30 s，再以0． 1% 升汞溶液处理15 min，无菌水浸洗5 次后供接种使用；
（3）接种和诱导培养：将消毒后的将腋芽剥去外面包被的鳞片，露出幼嫩芽体，将其接种于诱导培养基中，20 d 后观察统计污染及萌发情况；
（4）分化培养：待腋芽萌发并且基部愈伤组织形成后，不切割，将其接种在化培养基上，30 d 后观察统计苗分化情况；
（5）增殖培养：在丛生芽形成后，将苗剪成茎段，接种在增殖培养基上，30d后观察统计平均增殖系数及苗的生长情况；
（6）生根培养：将丛生苗分割成单苗后，接入根诱导培养基，30d后观察统计苗生根情况；
（7）移栽：将瓶苗放到日光温室大棚炼苗1w，然后移栽至沙床，覆盖黑网遮光，同时保湿。
所述诱导培养基为MS + BA 0.5mg/L + NAA 0.2m /L，所述分化培养基为MS + BA2.0 mg/L + NAA 0.2mg/L，所述增殖培养基为MS + BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L，所述生根培养基为1/2MS + IBA 1.0mg/L + 细沙+珍珠岩。
所述培养条件培养温度为23℃，光照强度为1500 lx，光照时间为12 h /d，培养基pH 为5.8。
实施例2
一种树莓组织培养和快速繁殖方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：选择生长健壮且无病虫害的秋福树莓单株，取材时间为初春，此时植株尚未发芽，取包被鳞片的腋芽为外植体；
（2）消毒：先用洗衣粉液浸泡10 min，用流水冲洗1 h，然后放入超净台，用70%酒精消毒30 s，再以0． 1% 升汞溶液处理15 min，无菌水浸洗5 次后供接种使用；
（3）接种和诱导培养：将消毒后的将腋芽剥去外面包被的鳞片，露出幼嫩芽体，将其接种于诱导培养基中，20 d 后观察统计污染及萌发情况；
（4）分化培养：待腋芽萌发并且基部愈伤组织形成后，不切割，将其接种在化培养基上，30 d 后观察统计苗分化情况；
（5）增殖培养：在丛生芽形成后，将苗剪成茎段，接种在增殖培养基上，30d后观察统计平均增殖系数及苗的生长情况；
（6）生根培养：将丛生苗分割成单苗后，接入根诱导培养基，30d后观察统计苗生根情况；
（7）移栽：将瓶苗放到日光温室大棚炼苗1w，然后移栽至沙床，覆盖黑网遮光，同时保湿。
所述诱导培养基为MS + BA 0.5mg/L + NAA 0.2m /L，所述分化培养基为MS + BA2.0 mg/L + NAA 0.2mg/L，所述增殖培养基为MS + BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L，所述生根培养基为1/2MS + IBA 1.0mg/L + 细沙+珍珠岩。
所述培养条件培养温度为24℃，光照强度为1500 lx，光照时间为12 h /d，培养基pH 为5.8。
实施例3
一种树莓组织培养和快速繁殖方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：选择生长健壮且无病虫害的秋福树莓单株，取材时间为初春，此时植株尚未发芽，取包被鳞片的腋芽为外植体；
（2）消毒：先用洗衣粉液浸泡10 min，用流水冲洗1 h，然后放入超净台，用70%酒精消毒30 s，再以0． 1% 升汞溶液处理15 min，无菌水浸洗5 次后供接种使用；
（3）接种和诱导培养：将消毒后的将腋芽剥去外面包被的鳞片，露出幼嫩芽体，将其接种于诱导培养基中，20 d 后观察统计污染及萌发情况；
（4）分化培养：待腋芽萌发并且基部愈伤组织形成后，不切割，将其接种在化培养基上，30 d 后观察统计苗分化情况；
（5）增殖培养：在丛生芽形成后，将苗剪成茎段，接种在增殖培养基上，30d后观察统计平均增殖系数及苗的生长情况；
（6）生根培养：将丛生苗分割成单苗后，接入根诱导培养基，30d后观察统计苗生根情况；
（7）移栽：将瓶苗放到日光温室大棚炼苗1w，然后移栽至沙床，覆盖黑网遮光，同时保湿。
所述诱导培养基为MS + BA 0.5mg/L + NAA 0.2m /L，所述分化培养基为MS + BA2.0 mg/L + NAA 0.2mg/L，所述增殖培养基为MS + BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L，所述生根培养基为1/2MS + IBA 1.0mg/L + 细沙+珍珠岩。
所述培养条件培养温度为25℃，光照强度为1500 lx，光照时间为12 h /d，培养基pH 为5.8。
实施例4
一种树莓组织培养和快速繁殖方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：选择生长健壮且无病虫害的秋福树莓单株，取材时间为初春，此时植株尚未发芽，取包被鳞片的腋芽为外植体；
（2）消毒：先用洗衣粉液浸泡10 min，用流水冲洗1 h，然后放入超净台，用70%酒精消毒30 s，再以0． 1% 升汞溶液处理15 min，无菌水浸洗5 次后供接种使用；
（3）接种和诱导培养：将消毒后的将腋芽剥去外面包被的鳞片，露出幼嫩芽体，将其接种于诱导培养基中，20 d 后观察统计污染及萌发情况；
（4）分化培养：待腋芽萌发并且基部愈伤组织形成后，不切割，将其接种在化培养基上，30 d 后观察统计苗分化情况；
（5）增殖培养：在丛生芽形成后，将苗剪成茎段，接种在增殖培养基上，30d后观察统计平均增殖系数及苗的生长情况；
（6）生根培养：将丛生苗分割成单苗后，接入根诱导培养基，30d后观察统计苗生根情况；
（7）移栽：将瓶苗放到日光温室大棚炼苗1w，然后移栽至沙床，覆盖黑网遮光，同时保湿。
所述诱导培养基为MS + BA 0.5mg/L + NAA 0.2m /L，所述分化培养基为MS + BA2.0 mg/L + NAA 0.2mg/L，所述增殖培养基为MS + BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L，所述生根培养基为1/2MS + IBA 1.0mg/L + 细沙+珍珠岩。
所述培养条件培养温度为20℃，光照强度为1500 lx，光照时间为12 h /d，培养基pH 为5.8。
Claims (3)
1.一种树莓组织培养和快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）外植体选择：选择生长健壮且无病虫害的秋福树莓单株，取材时间为初春，此时植株尚未发芽，取包被鳞片的腋芽为外植体；
（2）消毒：先用洗衣粉液浸泡10 min，用流水冲洗1 h，然后放入超净台，用70%酒精消毒30 s，再以0.1% 升汞溶液处理15 min，无菌水浸洗5 次后供接种使用；
（3）接种和诱导培养：将消毒后的腋芽剥去外面包被的鳞片，露出幼嫩芽体，将其接种于诱导培养基中，20天后观察统计污染及萌发情况；
（4）分化培养：待腋芽萌发并且基部愈伤组织形成后，不切割，将其接种在分化培养基上，30天 后观察统计苗分化情况；
（5）增殖培养：在丛生芽形成后，将苗剪成茎段，接种在增殖培养基上，30d后观察统计平均增殖系数及苗的生长情况；
（6）生根培养：将丛生苗分割成单苗后，接入生根培养基，30d后观察统计苗生根情况；
（7）移栽：将瓶苗放到日光温室大棚炼苗1周，然后移栽至沙床，覆盖黑网遮光，同时保湿。
2.根据权利要求1所述一种树莓组织培养和快速繁殖方法，其特征在于：所述诱导培养基为MS + BA 0.5mg/L + NAA 0.2m /L，所述分化培养基为MS + BA 2.0 mg/L + NAA0.2mg/L，所述增殖培养基为MS + BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L，所述生根培养基为1/2MS +IBA 1.0mg/L + 细沙+珍珠岩。
3.根据权利要求1所述一种树莓组织培养和快速繁殖方法，其特征在于：所述培养条件培养温度为20-25℃，光照强度为1500 lx，光照时间为12 小时/天，培养基pH 为5.8。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114051929A (zh) * | 2021-11-23 | 2022-02-18 | 河北农业大学 | 一种树莓芽的组培快繁的接种方法 |
| CN114916443A (zh) * | 2022-05-27 | 2022-08-19 | 广西特色作物研究院 | 一种广西甜茶优良单株愈伤组织分化丛生芽的方法 |
| CN115968778A (zh) * | 2022-10-19 | 2023-04-18 | 北京大学现代农业研究院 | 树莓离体再生培养的方法 |
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 毕海林等: "秋福树莓组织培养和快速繁殖技术研究", 《江西农业学报》 * |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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