CN116138162B - 一种利用凤梨果实冠芽诱变新种质的方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于生物育种技术领域，具体为一种利用凤梨果实冠芽诱变新种质的方法，本发明以凤梨原生果实作为诱变冠芽营养基，采用多种化学试剂协同诱变凤梨冠芽作为培养外植体，再通过常规组织培养获得变异新植株的种质创制方法；这种凤梨冠芽离植体前置诱变后置诱导生芽的方法，可一次性诱变产生更多新株芽苗，操作简便，成本低，效率高，一次可选育出具有新遗传特征的多个品种。

Description

一种利用凤梨果实冠芽诱变新种质的方法

技术领域

本发明属于生物育种技术领域，具体为一种利用凤梨果实冠芽诱变新种质的方法。

背景技术

凤梨是我国四大热带水果之一，是人们生活中高端果盘中和重要水果品种，具有较的食用价值和经济价值，市场需求性高，我国海南、广东、广西、云南、福建等省份均有凤梨的种植分布，目前我国凤梨品种相对较少，主要生产品种大多外来引进，其原因是凤梨花序较小、花期较短，传统杂交育种周期长、成功率低，种子极其细微，繁育困难，通常采用无性繁殖的芽苗移栽继代种植，连续多年种植品种退化较快，开发一种利用凤梨果实冠芽诱变新种质的方法，相对于杂交育种、单一化学诱变、核辐射诱变手段育种，具有操作简便、成功率高、成本低、周期短等诸多优势，大大提高了凤梨创种的效率，对丰富人们高端果盘热带水果品种和提高我国凤梨种业国际竞争力都有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是为了提供一种利用凤梨果实冠芽诱变新种质的方法，可以降低成本、缩短周期、提高凤梨产生新品种的创制效率。为了实现上述发明效果，本发明采用以下技术方案，一种利用凤梨果实冠芽诱变新种质的方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：

S1 制备诱变培养基：按在培养基中的总体浓度配比计取试剂量：氯硫酸2.5%、3-吗啉酮25mg/L、蔗糖25g /L、常规MS基础培养基60%体积比，适量蒸馏水调节配比；取3-吗啉酮、蔗糖与MS基础培养基一起加入蒸馏水中，加热搅拌至溶解，然后取氯硫酸缓慢滴加，边滴加边均匀搅动；调节pH值为5.5，然后经高温灭菌后将培养基倒入培养瓶冷却至常温待用；

S2 制备凤梨冠芽培养体：凤梨二次谢花后生长至60天前后，选取冠芽长达15cm发育良好的凤梨果实，沿冠芽以下果体1/3处切除果尾部分，取前端冠芽和连果部分作为培养体，进行紫外线常规消毒后，放入S1培养瓶中，培养基没过果实切口以上凤梨果眼一目的位置，培养瓶加盖置暗箱设置24°C条件下培养30天以上；

S3 培养体凤梨冠芽见黄、复绿培养：见冠芽叶片变黄叶尖部分有少量枯萎现象后，更换诱变培养基为常规营养的增殖培养基，设置气温28°C条件下进行常规有光培养，每30天更换一次增殖培养基，培养60天以上至叶片复绿，冠芽顶端有新叶长出；

S4 获取冠芽外植体进行组织培养诱导产生新株：将S3复绿冠芽取出，剥离叶片后切长1.5cm的茎段作为外植体，进行常规组织培养至诱导生出新株，获得变异新种质。

实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明的范围并不仅局限于实例，其要求保护的范围记载于权利要求的权项中；

本实施案例所述的一种利用凤梨果实冠芽诱变新种质的方法，所述方法特征具体包括以下步骤：

S1 制备诱变培养基：按在培养基中的总体浓度配比计取试剂量：氯硫酸2.5%、3-吗啉酮25mg/L、蔗糖25g /L、常规MS基础培养基60%体积比，适量蒸馏水调节配比；取3-吗啉酮、蔗糖与MS基础培养基一起加入蒸馏水中，加热搅拌至溶解，然后取氯硫酸缓慢滴加，边滴加边均匀搅动；调节pH值为5.5；然后经高温灭菌后将培养基倒入培养瓶冷却至常温待用；

S2 制备凤梨冠芽培养体：凤梨二次谢花后生长至60天前后，选取冠芽长达15cm发育良好的凤梨果实，沿冠芽以下果体1/3处切除果尾部分，取前端冠芽和连果部分作为培养体，进行紫外线常规消毒后，放入S1培养瓶中，培养基没过果实切口以上凤梨果眼一目的位置，培养瓶加盖置暗箱设置24°C条件下培养30天以上；

S3 培养体凤梨冠芽见黄、复绿培养：见冠芽叶片变黄叶尖部分有少量枯萎现象后，更换诱变培养基为常规营养的增殖培养基，设置气温28°C条件下进行常规有光培养，每30天更换一次增殖培养基，培养60天以上至叶片复绿，冠芽顶端有新叶长出；

S4 获取冠芽外植体进行组织培养诱导产生新株：将S3复绿冠芽取出，剥离叶片后切长1.5cm的茎段作为外植体，进行常规组织培养至诱导生出新株，获得变异新种质。

这种方法育出的凤梨种质新株通过炼苗、移植，几个生长周期驯化培养后选育出新遗传特征品种资源，根据育种方向可选育出新特征的优质水果凤梨品种，新种质变异率可达20%以上，相对于杂交育种、单一化学诱变、核辐射诱变手段育种，具有操作简便、成功率高、成本低、周期短等诸多优势，大大提高了凤梨新品种创制效率，对于丰富我国凤梨品种资源，提高我国凤梨种业国际竞争力都具有重要的意义。

Claims (1)

1.一种利用凤梨果实冠芽诱变新种质的方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤，

S1 制备诱变培养基：按在培养基中的总体浓度配比计取试剂量：氯硫酸2.5%、3-吗啉酮25mg/L、蔗糖25g /L、常规MS基础培养基60%体积比，适量蒸馏水调节配比；取3-吗啉酮、蔗糖与MS基础培养基一起加入蒸馏水中，加热搅拌至溶解，然后取氯硫酸缓慢滴加，边滴加边均匀搅动；调节pH值为5.5；然后经高温灭菌后将培养基倒入培养瓶冷却至常温待用；

S2 制备凤梨冠芽培养体：凤梨二次谢花后生长至60天前后，选取冠芽长达15cm发育良好的凤梨果实，沿冠芽以下果体1/3处切除果尾部分，取前端冠芽和连果部分作为培养体，进行紫外线常规消毒后，放入S1培养瓶中，培养基没过果实切口以上凤梨果眼一目的位置，培养瓶加盖置暗箱设置24°C条件下培养30天以上；

S3 培养体凤梨冠芽见黄、复绿培养：见冠芽叶片变黄叶尖部分有少量枯萎现象后，更换诱变培养基为常规营养的增殖培养基，设置气温28°C条件下进行常规有光培养，每30天更换一次增殖培养基，培养60天以上至叶片复绿，冠芽顶端有新叶长出；

S4 获取冠芽外植体进行组织培养诱导产生新株：将S3复绿冠芽取出，剥离叶片后切长1.5cm的茎段作为外植体，进行常规组织培养至诱导生出新株，获得变异新种质。