CN103548696B - 一种繁殖蓝莓苗的方法 - Google Patents

一种繁殖蓝莓苗的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103548696B
CN103548696B CN201310541515.8A CN201310541515A CN103548696B CN 103548696 B CN103548696 B CN 103548696B CN 201310541515 A CN201310541515 A CN 201310541515A CN 103548696 B CN103548696 B CN 103548696B
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
rootage
wpm
medium
improvement
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201310541515.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103548696A (zh
Inventor
李靖
孙淑霞
陈栋
涂美艳
谢红江
江国良
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Horticulture Research Institute of Sichuan Academy of Agricultural Sciences
Original Assignee
Horticulture Research Institute of Sichuan Academy of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Horticulture Research Institute of Sichuan Academy of Agricultural Sciences filed Critical Horticulture Research Institute of Sichuan Academy of Agricultural Sciences
Priority to CN201310541515.8A priority Critical patent/CN103548696B/zh
Publication of CN103548696A publication Critical patent/CN103548696A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103548696B publication Critical patent/CN103548696B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Abstract

本发明属于果树组织培养技术领域，具体为一种繁殖蓝莓苗的方法。包括材料处理步骤，诱导、增殖与生根培养步骤和炼苗移栽步骤，其特征在于：在诱导、增殖与生根培养步骤中采用改良WPM作为基本培养基，所述的改良WPM是指大量元素中采用KNO3？含量495mg/L替代K2SO4含量990mg/L。还包括在诱导、增殖与生根培养步骤中的生根培养时，改良WPM基本培养基成分中的含量，除铁盐含量不变外，其它成分含量都减半。本发明苗木生长周期短，繁殖效率高，成本低。实验效果均能达到：诱导分化培养，诱导分化率达91%以上；增殖培养，单次单株苗木增殖倍数为10倍以上；生根培养，批次生根率为94%以上；批次移栽成活率达91%以上。

Description

一种繁殖蓝莓苗的方法
技术领域
本发明属于果树组织培养技术领域，具体为一种繁殖蓝莓苗的方法。
背景技术
蓝莓(Blueberry),又名越橘、蓝浆果,为多年生落叶或常绿灌木或小灌木浆果果树。蓝莓果实中除含常规的糖、蛋白质、果酸和Vc外，还富含Ve、Va、Vb、SOD、熊果苷、花青素、食用纤维以及丰富的K、Fe、Zn、Ca等矿物质元素。研究表明，经常食用蓝莓及其制品，有助预防结肠癌的发生，还可明显地增强视力、增强心脏功能、营养皮肤、延缓脑神经衰老、预防老年痴呆，同时对由糖尿病引起的毛细血管病变也有很好的治疗效果。被联合国粮农组织将蓝莓列为人类五大健康食品之一，誉为“黄金浆果”。蓝莓作为一种名优稀特高档果品，已成为欧洲、美国、日本等发达国家和地区需求量急速增加的水果。我国对蓝莓的研究、引种和栽培起步较晚，栽培面积小，产量低，这与我国作为一个水果生产大国、一个具有传统保健意识的多民族国家的国情不相符。因此，加快蓝莓产业化建设十分重要。
蓝莓苗木繁殖通常采用扦插法，这种方法繁殖速度慢、成活率低，阻碍了我国蓝莓产业的快速发展。通过组织培养方法进行蓝莓苗木的快速繁殖，能在短期内大量繁殖出保持亲本性状的苗木，是解决这一问题的有效途径。但是蓝莓组织培养快速繁殖苗木近年来所得苗木繁殖系数、生根率、移栽后的成活率较低，没有解决实际的问题。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供有利于在短期内大量繁殖出保持亲本性状的优质苗木，加快我国蓝莓产业化建设的一种繁殖蓝莓苗的方法。
本发明解决其技术问题，所采用的技术方案是：
一种繁殖蓝莓苗的方法，包括材料处理步骤，诱导、增殖与生根培养步骤和炼苗移栽步骤，该方法中主要的特点为在诱导、增殖与生根培养步骤中采用改良WPM作为基本培养基，即在大量元素中采用KNO3含量495(mg/L)替代K2SO4含量990(mg/L)。将大量元素中的K2SO4用KNO3代替，且使用量减半。
一种繁殖蓝莓苗的方法，其与传统的繁殖蓝莓苗的方法的区别改进还包括在诱导、增殖与生根培养步骤中的生根培养时，改良WPM基本培养基成分中除铁盐含量不变外，其它所有成分含量都减半，即：铁盐成分含量相对加倍了。
繁殖蓝莓苗的方法中改良WPM采用的大量元素为KNO3、MgSO4﹒7H2O、KH2PO4、NH4NO3、Ca(NO3)2﹒4H2O，其余成分与传统的WPM相同。
所述的诱导、增殖与生根培养步骤中，诱导分化培养采用的培养基为改良WPM+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+ZT2.0(1.0～2.0)mg/L+IBA0.1(0.1～0.3)mg/L，pH值为4.9～5.2。
所述的诱导、增殖与生根培养步骤中，增值培养采用的培养基为改良WPM+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+ZT0.5(0.5～1.0)mg/L，pH值为4.9～5.2。
所述的诱导、增殖与生根培养步骤中，生根培养采用的培养基为改良1/2WPM+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+IBA0.3(0.3～0.5)mg/L，铁盐加倍，pH值为4.9～5.2。
所述的诱导、增殖与生根培养的条件为培养温度25℃，光照强度为2000～3000lx，光照时间为12h/d。
一种繁殖蓝莓苗的方法，具体包括以下步骤：
(1)材料处理
取当年生健壮枝条置于4℃条件下24～48小时，然后在常温下用肥皂水浸泡2～3小时，用流水冲洗3小时，将冲洗后的材料带进接种室用75％的酒精处理30s，0.1％升汞表面灭菌8min，无菌水冲洗3～5次，备用；
(2)诱导、增殖与生根培养
①将步骤(1)中灭菌后的枝条剪成1～2cm长的带腋芽茎段转入由改良WPM+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+ZT2.0(1.0～2.0)mg/L+IBA0.1(0.1～0.3)mg/L，pH值为4.9～5.2制成的培养基中进行诱导分化培养；
②将步骤①中所得的苗子转入由改良WPM+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+ZT0.5(0.5～1.0)mg/L，pH值为4.9～5.2制成的培养基中进行增殖培养；
③将步骤②中所得的苗子转入由改良1/2WPM+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+IBA0.3(0.3～0.5)mg/L，铁盐加倍，pH值为4.9～5.2制成的培养基中进行生根培养；
(3)炼苗移栽
将步骤(2)中所得的生根苗转入移栽基质草炭土：蛭石上进行炼苗移栽。所述的移栽基质草炭土与蛭石的质量比为1:1。
步骤①中的诱导分化培养、步骤②增殖培养和步骤③中的生根培养的培养条件均为培养温度25℃，光照强度为2000～3000lx，光照时间为12h/d。
本发明的积极效果是：
(一)本发明苗木生长周期短，繁殖效率高，成本低。本发明经多次实验反复验证该方法，实验效果均能达到：诱导分化培养，诱导分化率达91％以上；增殖培养，单次单株苗木增殖倍数为10倍以上；生根培养，批次生根率为94％以上；批次移栽成活率达91％以上。传统的扦插技术只能让一个扦插枝长成一株小苗，而且成活率相对较低，为44～71％，本发明可周年生产，能使一个接种枝在短期内按几何级数繁殖生长成规格一致的批量优质种苗或脱病毒种苗。与传统WPM、传统扦插技术相比，本方法获得苗木成本最低。
(二)本发明的推广性和应用性强。本发明只在现有组织培养技术的基础上改良了基本培养基的成分以及成分含量，操作方法简单，为我国蓝莓产业的苗木繁育提供了一项简便、有效的方法。因此，本发明具有广阔的应用前景。
具体实施方式实例：
为了使本发明实现的技术手段、发明特征、达成目的与功效易于明白了解，下面举实例对本发明进行详细描述。
实施例1：
传统的WPM培养基的母液配方如下表所示：
WPM培养基配方如下：
本方法所采用的改良WPM作为基本培养基的成分，其按照传统方法进行配制即可，改良WPM母液配制及培养基配方如下表
注：配制母液为100倍液。
将田间取回的当年生健壮枝条置于4℃条件下24小时，常温下用肥皂水浸泡2.5小时，然后用流水冲洗3小时，将冲洗后的材料带进接种室用75％的酒精处理30s，0.1％升汞表面灭菌8min，无菌水冲洗5次，备用。将灭菌后的枝条剪成2cm长的带腋芽茎段转入改良WPM(KNO34个浓度处理，浓度见附表1)+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+ZT1.0mg/L+IBA0.1mg/L培养基和传统WPM(K2SO44个浓度处理，浓度见附表1)+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+ZT1.0mg/L+IBA0.1mg/L培养基中，培养基pH值为4.9～5.2，进行诱导分化培养。将诱导分化所得的苗子转入改良WPM(KNO34个浓度处理，浓度见附表1)+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+ZT0.5mg/L培养基和传统WPM(K2SO44个浓度处理，浓度见附表1)+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+ZT0.5mg/L培养基中，培养基pH为4.9～5.2，进行增殖培养。将增殖培养所得的苗子转入改良1/2WPM(KNO3，495mg/l，铁盐4个浓度处理，浓度见附表2)+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+IBA0.3mg/L培养基和传统1/2WPM(铁盐4个浓度处理，浓度见附表2)+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+IBA0.3mg/L培养基中，培养基PH为4.9～5.2，进行生根培养。
培养条件：培养温度25℃，光照强度为2000～3000lx，光照时间为12h/d。将所得的生根苗转入移栽基质(草炭土：蛭石质量比为1：1)上进行炼苗移栽。
培养结果见附表1、附表2：
附表1诱导分化、增殖培养基筛选实验结果
注：同一试验中，除改良成分不同外，其余成分完全相同；表中的各项数据为3次重复试验平均值。
从实验过程观察得知，无论采用哪种配方的培养基，所得组培苗生长势基本一致，表观差异不显著。从附表1中数据得知，改良后，用KNO3、3/4KNO3、1/2KNO3三种基本培养基所得外植体诱导分化率为91％以上，苗木增殖倍数为10倍以上，且三者之间差异不明显，因此，从成本考虑，选用改良WPM(1/2KNO3)培养基更经济。
附表2增殖、生根、移栽配套技术实验结果
注：传统WPM培养只列了最好的一组实验数据；同一试验中，除改良成分不同外，其余成分完全相同；表中的各项数据为3次重复试验平均值。本表中(一株苗成本)为扦插和组织培养同时取数量相等外植体(枝梢)，到成苗的平均成本价格。
从附表2中数据得知，生根时选用改良WPM(1/2KNO3)基本培养基各成分减半，铁盐成分不变，所得苗木生根率和移栽成活率最高，分别为94.4％、93.2％，且获得一株苗木的成本最低，为0.54元/株。
本研究用KNO3代替K2SO4主要有两个原因，一个原因是K2SO4配制母液时很难溶解，另一个原因是经实验验证，用KNO3代替后，苗木培养效果较好，且相对成本较低。
以上描述了本发明的基本原理和主要特征以及本发明的优点。本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明意图和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。

Claims (1)

1.一种繁殖蓝莓苗的方法，具体包括以下步骤：
（1）材料处理
取当年生健壮枝条置于4℃条件下24～48小时，然后在常温下用肥皂水浸泡2～3小时，用流水冲洗3小时，将冲洗后的材料带进接种室用75%的酒精处理30s，0.1%升汞表面灭菌8min，无菌水冲洗3～5次，备用；
（2）诱导、增殖与生根培养
①将步骤（1）中灭菌后的枝条剪成1～2cm长的带腋芽茎段转入由改良WPM+蔗糖20g/L+琼脂6.5g／L+ZT1.0～2.0mg/L+IBA0.1～0.3mg/L，pH值为4.9～5.2制成的培养基中进行诱导分化培养；
②将步骤①中所得的苗子转入由改良WPM+蔗糖20g/L+琼脂6.5g／L+ZT0.5～1.0mg/L，pH值为4.9～5.2制成的培养基中进行增殖培养；
③将步骤②中所得的苗子转入由改良1/2WPM+蔗糖20g/L+琼脂6.5g／L+IBA0.3～0.5mg/L，pH值为4.9～5.2制成的培养基中进行生根培养；
（3）炼苗移栽
将步骤（2）中所得的生根苗转入由草炭土和蛭石制成的移栽基质上进行炼苗移栽；所述的移栽基质草炭土与蛭石的质量比为1:1；
步骤①中的诱导分化培养、步骤②增殖培养和步骤③中的生根培养的培养条件均为培养温度25℃，光照强度为2000～3000lx，光照时间为12h/d；
在诱导、增殖与生根培养步骤中采用改良WPM作为基本培养基，所述的改良WPM是指大量元素中采用KNO3含量495mg/L替代K2SO4含量990mg/L，改良WPM采用的大量元素KNO3495mg/L、MgSO4﹒7H2O370mg/L、KH2PO4170mg/L、NH4NO3400mg/L、Ca(NO3)2·4H2O556mg/L；其余成分与传统的WPM相同；改良1/2WPM培养基与改良WPM培养基原料配比一致，除铁盐含量不变外，其它成分用量为改良WPM的一半。
CN201310541515.8A 2013-11-05 2013-11-05 一种繁殖蓝莓苗的方法 Expired - Fee Related CN103548696B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310541515.8A CN103548696B (zh) 2013-11-05 2013-11-05 一种繁殖蓝莓苗的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310541515.8A CN103548696B (zh) 2013-11-05 2013-11-05 一种繁殖蓝莓苗的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103548696A CN103548696A (zh) 2014-02-05
CN103548696B true CN103548696B (zh) 2015-12-02

Family

ID=50003214

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310541515.8A Expired - Fee Related CN103548696B (zh) 2013-11-05 2013-11-05 一种繁殖蓝莓苗的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103548696B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103999773B (zh) * 2014-05-27 2016-07-27 昆明凌览生物科技有限公司 一种樟叶越桔的组织培养方法
CN104012411B (zh) * 2014-06-09 2016-06-08 赵兰 一种越橘的组织培养方法
CN105075865B (zh) * 2015-09-22 2017-03-29 江苏农林职业技术学院 一种蓝莓美登初代培养的培养基及其制备方法和应用
CN106106182A (zh) * 2016-08-05 2016-11-16 四川省农业科学院经济作物育种栽培研究所 一种用于蓝莓组培苗培养的生根培养基及其培养方法
CN106172007A (zh) * 2016-08-08 2016-12-07 四川千草生物技术股份有限公司 一种组培蓝莓高效生根培养基
CN106613962A (zh) * 2016-11-14 2017-05-10 宁波市农业科学研究院 一种蓝莓组培苗生根的培养基及使用该培养基的培养方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102812905A (zh) * 2012-09-14 2012-12-12 四川立益生态农业开发有限公司 蓝莓嫩茎段组培快繁工艺
CN102870680A (zh) * 2012-10-23 2013-01-16 刘如石 一种适宜脱毒兔眼蓝莓的高效快繁技术
CN103222425A (zh) * 2013-02-21 2013-07-31 邱义兰 一种适宜南高丛蓝莓高效快繁技术

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101405391B1 (ko) * 2012-04-18 2014-06-11 충청북도 (관리부서:충청북도 농업기술원) 블루베리 품종인 웨어마우스，듀크，블루레이，넬슨，노스랜드 또는 스파르탄의 생장점 배양 방법을 이용한 식물체 형성 방법
KR101405390B1 (ko) * 2012-04-18 2014-06-11 충청북도 (관리부서:충청북도 농업기술원) 블루베리 품종인 블루골드，엘리자베스，오따드 또는 티프블루의 엽편 배양 방법을 이용한 식물체 형성 방법

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102812905A (zh) * 2012-09-14 2012-12-12 四川立益生态农业开发有限公司 蓝莓嫩茎段组培快繁工艺
CN102870680A (zh) * 2012-10-23 2013-01-16 刘如石 一种适宜脱毒兔眼蓝莓的高效快繁技术
CN103222425A (zh) * 2013-02-21 2013-07-31 邱义兰 一种适宜南高丛蓝莓高效快繁技术

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
高灌蓝莓离体繁殖的研究;黄文江等;《安徽师范大学学报（自然科学版）》;20040930;第27卷(第3期);第314-317页，尤其是摘要、第315页第1.2.2节，第2.2节。 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN103548696A (zh) 2014-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103548696B (zh) 一种繁殖蓝莓苗的方法
CN103651121B (zh) 一种白及分化、壮苗培养基
CN103461120B (zh) 一种空气凤梨组织培养基及组培快繁空气凤梨的方法
CN103651122B (zh) 一种白及原球茎诱导培养基
CN101595824B (zh) 用檀香树种子胚离体快速育苗的方法
CN104160956A (zh) 一种高效快速繁殖金线莲组培苗的方法
CN103931497A (zh) 一种提高火龙果组培苗成苗率的方法
CN102640705B (zh) 一种水生植物莲花的快速繁殖方法
CN104106468A (zh) 一种五指毛桃的组织培养快速繁殖方法
CN106561456A (zh) 一种海伦兜兰无菌播种快速繁殖方法
CN101983557B (zh) 檀香种胚苗茎段的离体快速繁殖方法
CN104137779A (zh) 一种白木乌桕茎段快速诱导再生植株的方法
CN109220790A (zh) 一种红果参离体外繁方法
CN105475129A (zh) 一种竹叶兰组培快繁的方法
CN105519442B (zh) 一种欧李愈伤组织再生体系的培植方法
CN106258960A (zh) 一种蕙兰种子萌发快繁方法
CN103621405B (zh) 一种诸葛菜人工种子制作方法
CN105875410B (zh) 一种墨兰与虎头兰的杂交兰种苗的快速繁殖方法
CN104396746A (zh) 一种黄花贝母不定芽诱导增殖方法
CN103598093A (zh) 一种蓝莓胚状体的诱导方法
CN104396747B (zh) 一种皖贝母愈伤组织诱导增殖方法
CN104737913B (zh) 玛咖杂交种的无性快速繁殖方法
CN107155882A (zh) 一种药用白芨无菌播种快速育苗方法
CN107568063B (zh) 一种油料植物白檀组培快繁方法
CN103125383A (zh) 一种建立橡胶树未授粉胚珠再生体系的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20151202

Termination date: 20181105

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee