CN106106182A - 一种用于蓝莓组培苗培养的生根培养基及其培养方法 - Google Patents

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廖天伟
马辉
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Abstract

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体来说是一种用于蓝莓组培苗培养的生根培养基及其培养方法，培养基为基本培养基改良1/3WPM+4mg/L IBA+300mg/L活性炭。本发明的方法具有高效省时的特点，生产组培苗的成本低廉，平均每株种苗成本1.2元/株，得到的蓝莓组培苗，遗传性状一致，克服了常规繁殖系数低的缺点。

Description

一种用于蓝莓组培苗培养的生根培养基及其培养方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，具体来说是一种用于蓝莓组培苗培养的生根培养基及其培养方法。
背景技术
蓝莓(blueberry)学名越橘，属于杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium SPP.)多年生灌木。果实为蓝紫色小浆果，并披一层白色果粉，甜酸香爽，风味独特，既可鲜食，也可深加工，富含A、Vpp、Vp、VB1、VB2、VB5、D、E、K等多种维生素、有机锗、有机硒等十几种人体所需的微量元素以及熊果苷、花青苷、SOD、鞣花酸、和黄酮类等抗氧化成分，高纤维、低热量，其营养价值远高于普通水果，尤其是蓝浆果的花青素含量居各种果蔬之首。医学研究证明，花青素具有明目强心、预防脑神经老化、增强人体免疫力、抗癌等独特的保健功效。因此蓝莓被誉为“黄金浆果”，是联合国粮农组织(FAO)重点推荐的人类五大健康食品之一。蓝浆果加工性能极佳，其果实柔软多汁、香味独特、色泽鲜艳且色素稳定，适宜加工成果汁、果酱、果酒及天然色素、保健食品等高档产品，也是天然食品抗氧化剂和天然药物的重要原料。
当前因发展迅速，蓝莓生产用苗供应极度紧张已成为吉林省乃至全国发展蓝莓产业的技术瓶颈。而采用植物组织培养方法可以在短期内快速繁殖多种植物，不仅繁殖率高，且因为其是无性繁殖，可以保持原繁殖母株的优良性状，近年来在生产上应用越来越广。蓝莓不同品种之间尽管存在一定的特性差异，但都具有相同的生物学特征：耐酸性土壤环境、耐低温、耐瘠薄、较强的抗旱能力和抗病虫害能力；不耐化肥(嫌钙、嫌氯、嫌钠)、除草剂。这些生物学特征使蓝莓具备优先发展的独有优势。同时，随着生活和消费水平的提高，人们对食品的安全和品质要求越来越高，蓝莓特有保健作用使其备受关注。但是，目前国内蓝莓种苗繁育还处于起步阶段，存在许多问题，还未见大规模工厂化生产报道。
组织培养繁殖植物的技术是一种特殊的营养繁殖方式，现在一般称为快速繁殖技术或微繁殖技术。它是在无菌条件下，利用植物体的一部分，包括细菌、组织和器官，在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物的方法。该技术面临的一个难题是继代培养容易出现苗弱现象。因此，采用复壮培养基替代继代培养基既能防止品种退化，保证种苗质量，又能提供大量优质壮苗，提高快繁质量。现有技术一般用传统继代培养基，导致继代丛生芽弱；而且诱导时间较长，生根难度大，成活率低，不能适应更加快速的市场需求。
发明内容
本发明的目的是针对上述技术存在的问题，提供一种用于蓝莓组培苗培养的生根培养基及其培养方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种用于蓝莓组培苗培养的生根培养基，所述培养基配方为：NH4NO3 1.67mmol/L、Ca(NO3)2 1.39mmol/L、KNO3 0.63mmol/L、MgSO4·7H2O 0.50mmol/L、KH2PO4 0.42mmol/L、MnSO4·H2O 0.04mmol/L、ZnSO4·7H2O0.01mmol/L、H3BO3 0.03mmol/L、CuSO4·5H2O 0.001mmol/L、Na2EDTA 0.03mmol/L、FeSO4·7H2O 0.03mmol/L、肌醇0.17mmol/L、甘氨酸0.01mmol/L、维生素B1 0.001mmol/L、维生素B60.001mmol/L、维生素B5 0.001mmol/L、IBA 4mg/L、活性炭300mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L。
进一步的，所述培养基pH为5.2。
本发明的另一目的是提供一种培养基用于培养蓝莓组培苗的方法，将蓝莓的外植体置于初代培养基上进行诱导分化培养，得到初代组培苗；再将初代组培苗置于生根培养基中进行继代培养，得到继代苗；
进一步的，诱导分化培养的培养条件为：温度为25℃、光照强度为2000-3000lx、光周期为12h光照/12h黑暗，培养40天。
进一步的，所述继代培养的培养条件为：光照强度为3000Lx，光照时间为14-16小时/天；光照培养时温度为20-24℃，黑暗培养时温度为18-22℃，湿度为60％-75％。
本发明的有益技术效果是：本发明的方法具有高效省时的特点，生产组培苗的成本低廉，平均每株种苗成本1.2元/株，得到的蓝莓组培苗，遗传性状一致，克服了常规繁殖系数低的缺点。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
配制培养基：培养基配方如下：NH4NO3 1.67mmol/L、Ca(NO3)2 1.39mmol/L、KNO30.63mmol/L、MgSO4·7H2O 0.50mmol/L、KH2PO4 0.42mmol/L、MnSO4·H2O 0.04mmol/L、ZnSO4·7H2O 0.01mmol/L、H3BO3 0.03mmol/L、CuSO4·5H2O 0.001mmol/L、Na2EDTA0.03mmol/L、FeSO4·7H2O 0.03mmol/L、肌醇0.17mmol/L、甘氨酸0.01mmol/L、维生素B10.001mmol/L、维生素B6 0.001mmol/L、维生素B5 0.001mmol/L、IBA 4mg/L、活性炭300mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L。培养基PH值5.2；培养基在121℃、131kPa的条件下灭菌20min。
一种生根培养基用于培养蓝莓组培苗的方法，将蓝莓的外植体置于初代培养基上进行诱导分化培养，得到初代组培苗；再将初代组培苗置于继代培养基中进行继代培养，得到继代苗；
其中，诱导分化培养的培养条件为：温度为25℃、光照强度为2000lx、光周期为12h光照/12h黑暗，培养40天。
其中，继代培养的培养条件为：光照强度为3000Lx，光照时间为14小时/天；光照培养时温度为20℃，黑暗培养时温度为18℃，湿度为60％。
实施例2
培养基制备同实施例1。
一种生根培养基用于培养蓝莓组培苗的方法，将蓝莓的外植体置于初代培养基上进行诱导分化培养，得到初代组培苗；再将初代组培苗置于继代培养基中进行继代培养，得到继代苗；
其中，诱导分化培养的培养条件为：温度为25℃、光照强度为2500lx、光周期为12h光照/12h黑暗，培养40天。
其中，继代培养的培养条件为：光照强度为3000Lx，光照时间为15小时/天；光照培养时温度为22℃，黑暗培养时温度为20℃，湿度为67％。
实施例3
培养基制备同实施例1。
一种生根培养基用于培养蓝莓组培苗的方法，将蓝莓的外植体置于初代培养基上进行诱导分化培养，得到初代组培苗；再将初代组培苗置于继代培养基中进行继代培养，得到继代苗；
其中，诱导分化培养的培养条件为：温度为25℃、光照强度为3000lx、光周期为12h光照/12h黑暗，培养40天。
其中，继代培养的培养条件为：光照强度为3000Lx，光照时间为16小时/天；光照培养时温度为24℃，黑暗培养时温度为22℃，湿度为75％。
本技术领域技术人员可以理解，除非另外定义，这里使用的所有术语(包括技术术语和科学术语)具有与本发明所属领域中的普通技术人员的一般理解相同的意义。还应该理解的是，诸如通用字典中定义的那些术语应该被理解为具有与现有技术的上下文中的意义一致的意义，并且除非像这里一样定义，不会用理想化或过于正式的含义来解释。
最后所应说明的是：以上实施例仅用以说明而非限制本发明的技术方案，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应该理解：依然可以对本发明进行修改或者等同替换，而不脱离本发明的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (5)

1.一种用于蓝莓组培苗培养的生根培养基，其特征在于，所述培养基配方为：NH4NO31.67mmol/L、Ca(NO3)2 1.39mmol/L、KNO3 0.63mmol/L、MgSO4·7H2O0.50mmol/L、KH2PO40.42mmol/L、MnSO4·H2O 0.04mmol/L、ZnSO4·7H2O 0.01mmol/L、H3BO3 0.03mmol/L、CuSO4·5H2O 0.001mmol/L、Na2EDTA 0.03mmol/L、FeSO4·7H2O 0.03mmol/L、肌醇0.17mmol/L、甘氨酸0.01mmol/L、维生素B1 0.001mmol/L、维生素B6 0.001mmol/L、维生素B50.001mmol/L、IBA 4mg/L、活性炭300mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L。
2.根据权利要求1所述用于蓝莓组培苗培养的生根培养基，其特征在于，所述培养基pH为5.2。
3.根据权利要求1或2所述培养基用于培养蓝莓组培苗的方法，其特征在于，将蓝莓的外植体置于初代培养基上进行诱导分化培养，得到初代组培苗；再将初代组培苗置于生根培养基中进行继代培养，得到继代苗。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述诱导分化培养的培养条件为：温度为25℃、光照强度为2000-3000lx、光周期为12h光照/12h黑暗，培养40天。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述生根培养的培养条件为：光照强度为3000Lx，光照时间为14-16小时/天；光照培养时温度为20-24℃，黑暗培养时温度为18-22℃，湿度为60％-75％。
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