CN116113631B - 一类氰基化合物、其制备方法及用途 - Google Patents
一类氰基化合物、其制备方法及用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116113631B CN116113631B CN202280005454.0A CN202280005454A CN116113631B CN 116113631 B CN116113631 B CN 116113631B CN 202280005454 A CN202280005454 A CN 202280005454A CN 116113631 B CN116113631 B CN 116113631B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- cov
- formula
- added
- aryl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- -1 Cyano compound Chemical class 0.000 title description 41
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 107
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 abstract description 25
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 13
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 abstract description 7
- 208000005155 Picornaviridae Infections Diseases 0.000 abstract description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 53
- 238000000034 method Methods 0.000 description 41
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 41
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 39
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 35
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 34
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 32
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 31
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 30
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 30
- QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic anhydride Chemical group FC(F)(F)C(=O)OC(=O)C(F)(F)F QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 27
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 24
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 description 21
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 20
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 20
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 20
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 19
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 18
- SNOOUWRIMMFWNE-UHFFFAOYSA-M sodium;6-[(3,4,5-trimethoxybenzoyl)amino]hexanoate Chemical compound [Na+].COC1=CC(C(=O)NCCCCCC([O-])=O)=CC(OC)=C1OC SNOOUWRIMMFWNE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 18
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 17
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 15
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 14
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 14
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 13
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 12
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 12
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 11
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical group CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 10
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 10
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 8
- 101001017818 Homo sapiens ATP-dependent translocase ABCB1 Proteins 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 7
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 7
- 125000006413 ring segment Chemical group 0.000 description 7
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100033350 ATP-dependent translocase ABCB1 Human genes 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000127282 Middle East respiratory syndrome-related coronavirus Species 0.000 description 6
- NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N Ritonavir Natural products C=1C=CC=CC=1CC(NC(=O)OCC=1SC=NC=1)C(O)CC(CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 6
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 6
- 229960000311 ritonavir Drugs 0.000 description 6
- NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N ritonavir Chemical compound N([C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C[C@H](O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1SC=NC=1)CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N 0.000 description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 6
- 125000001313 C5-C10 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 5
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 229940049937 Pgp inhibitor Drugs 0.000 description 5
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 5
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 5
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 5
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 4
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000005073 adamantyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)* 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000012024 dehydrating agents Substances 0.000 description 4
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 4
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 4
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 4
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SNUSZUYTMHKCPM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxypyridin-2-one Chemical compound ON1C=CC=CC1=O SNUSZUYTMHKCPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 3
- 241001529459 Enterovirus A71 Species 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- ABRVLXLNVJHDRQ-UHFFFAOYSA-N [2-pyridin-3-yl-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl]methanamine Chemical compound FC(C1=CC(=CC(=N1)C=1C=NC=CC=1)CN)(F)F ABRVLXLNVJHDRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 125000005605 benzo group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 3
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 3
- 238000002866 fluorescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 3
- 125000006570 (C5-C6) heteroaryl group Chemical group 0.000 description 2
- YBYIRNPNPLQARY-UHFFFAOYSA-N 1H-indene Natural products C1=CC=C2CC=CC2=C1 YBYIRNPNPLQARY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003627 8 membered carbocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 2
- 101000767160 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) Intracellular protein transport protein USO1 Proteins 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 2
- 230000006229 amino acid addition Effects 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- GTCAXTIRRLKXRU-UHFFFAOYSA-N carbamic acid methyl ester Natural products COC(N)=O GTCAXTIRRLKXRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 2
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 125000006165 cyclic alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 2
- 125000005046 dihydronaphthyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 125000003392 indanyl group Chemical group C1(CCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 125000003454 indenyl group Chemical group C1(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000004973 liquid crystal related substance Substances 0.000 description 2
- OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N methanol-d1 Chemical compound [2H]OC OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002294 quinazolinyl group Chemical group N1=C(N=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005694 sulfonylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 2
- 125000001712 tetrahydronaphthyl group Chemical group C1(CCCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 2
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 2
- AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N (1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-6-[(3-chlorophenyl)methyl]-12,19-difluoro-11-hydroxy-8-(2-hydroxyacetyl)-9,13-dimethyl-6-azapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosa-14,17-dien-16-one Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2[C@H]3[C@]([C@]4(C=CC(=O)C=C4[C@@H](F)C3)C)(F)[C@@H](O)C[C@@]2([C@@]1(C1)C(=O)CO)C)N1CC1=CC=CC(Cl)=C1 AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N 0.000 description 1
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 1
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 1
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 1
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 1
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 1
- 125000005918 1,2-dimethylbutyl group Chemical group 0.000 description 1
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 1
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 description 1
- 125000006218 1-ethylbutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- SHMNLEQWIMKCQA-UHFFFAOYSA-N 2,2,3,3,3-pentafluoropropanoyl chloride Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(Cl)=O SHMNLEQWIMKCQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NOGFHTGYPKWWRX-UHFFFAOYSA-N 2,2,6,6-tetramethyloxan-4-one Chemical compound CC1(C)CC(=O)CC(C)(C)O1 NOGFHTGYPKWWRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006176 2-ethylbutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- SGUAFYQXFOLMHL-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-5-{1-hydroxy-2-[(4-phenylbutan-2-yl)amino]ethyl}benzamide Chemical compound C=1C=C(O)C(C(N)=O)=CC=1C(O)CNC(C)CCC1=CC=CC=C1 SGUAFYQXFOLMHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004493 2-methylbut-1-yl group Chemical group CC(C*)CC 0.000 description 1
- 125000005916 2-methylpentyl group Chemical group 0.000 description 1
- VQNDBXJTIJKJPV-UHFFFAOYSA-N 2h-triazolo[4,5-b]pyridine Chemical compound C1=CC=NC2=NNN=C21 VQNDBXJTIJKJPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WAKMMQSMEDJRRI-UHFFFAOYSA-N 3,5-bis(trifluoromethyl)benzoyl chloride Chemical compound FC(F)(F)C1=CC(C(Cl)=O)=CC(C(F)(F)F)=C1 WAKMMQSMEDJRRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZJIOBDJEKDUUCI-UHFFFAOYSA-N 3,5-dimethylbenzoyl chloride Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C(Cl)=O)=C1 ZJIOBDJEKDUUCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003542 3-methylbutan-2-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000005917 3-methylpentyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003349 3-pyridyl group Chemical group N1=C([H])C([*])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000000590 4-methylphenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- QZLYKIGBANMMBK-UGCZWRCOSA-N 5α-Androstane Chemical compound C([C@@H]1CC2)CCC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CCC[C@@]2(C)CC1 QZLYKIGBANMMBK-UGCZWRCOSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100030988 Angiotensin-converting enzyme Human genes 0.000 description 1
- 101710185050 Angiotensin-converting enzyme Proteins 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000031648 Body Weight Changes Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 1
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 1
- 229940126657 Compound 17 Drugs 0.000 description 1
- 208000003311 Cytochrome P-450 Enzyme Inhibitors Diseases 0.000 description 1
- 229940122280 Cytochrome P450 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 208000020061 Hand, Foot and Mouth Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025713 Hand-foot-and-mouth disease Diseases 0.000 description 1
- 101000929928 Homo sapiens Angiotensin-converting enzyme 2 Proteins 0.000 description 1
- 241000711467 Human coronavirus 229E Species 0.000 description 1
- 241001109669 Human coronavirus HKU1 Species 0.000 description 1
- 241000482741 Human coronavirus NL63 Species 0.000 description 1
- 241001428935 Human coronavirus OC43 Species 0.000 description 1
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 1
- 206010023509 Kyphosis Diseases 0.000 description 1
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 1
- OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N N-{[3-(2-benzamido-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)-pyrazol-5-yl]carbonyl}-G-dR-G-dD-dD-dD-NH2 Chemical compound S1C(C=2NN=C(C=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(N)=O)=C(C)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N 0.000 description 1
- 102000005665 Neurotransmitter Transport Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010084810 Neurotransmitter Transport Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007399 Nuclear hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 241000831652 Salinivibrio sharmensis Species 0.000 description 1
- 206010069363 Traumatic lung injury Diseases 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000004097 X-ray Buerger Methods 0.000 description 1
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 1
- ZEEBGORNQSEQBE-UHFFFAOYSA-N [2-(3-phenylphenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl]methanamine Chemical compound C1(=CC(=CC=C1)OC1=NC(=CC(=C1)CN)C(F)(F)F)C1=CC=CC=C1 ZEEBGORNQSEQBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WREOTYWODABZMH-DTZQCDIJSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-[2-oxo-4-(2-phenylethoxyamino)pyrimidin-1-yl]oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N(C=C\1)C(=O)NC/1=N\OCCC1=CC=CC=C1 WREOTYWODABZMH-DTZQCDIJSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000641 acridinyl group Chemical group C1(=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3C=C12)* 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004538 alprazolam Drugs 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 125000002178 anthracenyl group Chemical group C1(=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3C=C12)* 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 230000004872 arterial blood pressure Effects 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- CBHOOMGKXCMKIR-UHFFFAOYSA-N azane;methanol Chemical compound N.OC CBHOOMGKXCMKIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CSKNSYBAZOQPLR-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonyl chloride Chemical compound ClS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 CSKNSYBAZOQPLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003785 benzimidazolyl group Chemical group N1=C(NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000004603 benzisoxazolyl group Chemical group O1N=C(C2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000004618 benzofuryl group Chemical group O1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000001164 benzothiazolyl group Chemical group S1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000004196 benzothienyl group Chemical group S1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- RROBIDXNTUAHFW-UHFFFAOYSA-N benzotriazol-1-yloxy-tris(dimethylamino)phosphanium Chemical compound C1=CC=C2N(O[P+](N(C)C)(N(C)C)N(C)C)N=NC2=C1 RROBIDXNTUAHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRUDEWIWKLJBPS-UHFFFAOYSA-N benzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N[N][N]C2=C1 QRUDEWIWKLJBPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012964 benzotriazole Substances 0.000 description 1
- 125000004541 benzoxazolyl group Chemical group O1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N benzyl n-[(2r)-1-[(2s,4r)-2-[[(2s)-6-amino-1-(1,3-benzoxazol-2-yl)-1,1-dihydroxyhexan-2-yl]carbamoyl]-4-[(4-methylphenyl)methoxy]pyrrolidin-1-yl]-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl]carbamate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CO[C@H]1CN(C(=O)[C@@H](CCC=2C=CC=CC=2)NC(=O)OCC=2C=CC=CC=2)[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)(O)C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C1 KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000004579 body weight change Effects 0.000 description 1
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000003185 calcium uptake Effects 0.000 description 1
- 125000000609 carbazolyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3NC12)* 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 125000000259 cinnolinyl group Chemical group N1=NC(=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 1
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 1
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 1
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 description 1
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 1
- 229940125810 compound 20 Drugs 0.000 description 1
- 229940126086 compound 21 Drugs 0.000 description 1
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 1
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- LZEPOJMTQYNFTR-UHFFFAOYSA-N cyclopropanecarbonyl cyclopropanecarboxylate Chemical compound C1CC1C(=O)OC(=O)C1CC1 LZEPOJMTQYNFTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PFWWSGFPICCWGU-UHFFFAOYSA-N cyclopropanesulfonyl chloride Chemical group ClS(=O)(=O)C1CC1 PFWWSGFPICCWGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 125000006437 ethyl cyclopropyl group Chemical group 0.000 description 1
- PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonylcarbamate Chemical compound CCOC(=O)NC(=O)OCC PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 125000003983 fluorenyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3CC12)* 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N gtpl8555 Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)N[C@H](B1O[C@@]2(C)[C@H]3C[C@H](C3(C)C)C[C@H]2O1)CCC1=CC=C(F)C=C1 JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N 0.000 description 1
- 125000005059 halophenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007489 histopathology method Methods 0.000 description 1
- 238000002868 homogeneous time resolved fluorescence Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 102000048657 human ACE2 Human genes 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- AKPUJVVHYUHGKY-UHFFFAOYSA-N hydron;propan-2-ol;chloride Chemical compound Cl.CC(C)O AKPUJVVHYUHGKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 125000003453 indazolyl group Chemical group N1N=C(C2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000003406 indolizinyl group Chemical group C=1(C=CN2C=CC=CC12)* 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000622 irritating effect Effects 0.000 description 1
- 125000004491 isohexyl group Chemical group C(CCC(C)C)* 0.000 description 1
- 125000000904 isoindolyl group Chemical group C=1(NC=C2C=CC=CC12)* 0.000 description 1
- 125000002183 isoquinolinyl group Chemical group C1(=NC=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 125000001786 isothiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000842 isoxazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 1
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229960001632 labetalol Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M lithium hydroxide monohydrate Substances [Li+].O.[OH-] GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940040692 lithium hydroxide monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 231100000515 lung injury Toxicity 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000008720 membrane thickening Effects 0.000 description 1
- IZDROVVXIHRYMH-UHFFFAOYSA-N methanesulfonic anhydride Chemical compound CS(=O)(=O)OS(C)(=O)=O IZDROVVXIHRYMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000006431 methyl cyclopropyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004593 naphthyridinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CN=C12)* 0.000 description 1
- 125000001971 neopentyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108020004017 nuclear receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 125000001715 oxadiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002971 oxazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 125000003538 pentan-3-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001791 phenazinyl group Chemical group C1(=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C12)* 0.000 description 1
- 125000001484 phenothiazinyl group Chemical group C1(=CC=CC=2SC3=CC=CC=C3NC12)* 0.000 description 1
- 125000001644 phenoxazinyl group Chemical group C1(=CC=CC=2OC3=CC=CC=C3NC12)* 0.000 description 1
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004592 phthalazinyl group Chemical group C1(=NN=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000007065 protein hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 125000001042 pteridinyl group Chemical group N1=C(N=CC2=NC=CN=C12)* 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 125000000561 purinyl group Chemical group N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 description 1
- 125000003373 pyrazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002098 pyridazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- ATBIAJXSKNPHEI-UHFFFAOYSA-N pyridine-3-carbonyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CN=C1 ATBIAJXSKNPHEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 125000001567 quinoxalinyl group Chemical group N1=C(C=NC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000006103 sulfonylation Effects 0.000 description 1
- YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N sulfuryl dichloride Chemical compound ClS(Cl)(=O)=O YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 125000001113 thiadiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 125000004306 triazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001425 triazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
- C07D207/26—2-Pyrrolidones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
- C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D335/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
- C07D335/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
- C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
- C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
- C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
提供了式I所示化合物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体及其药学上可接受的盐，以及其在预防或治疗由冠状病毒和/或小RNA病毒感染引起的相关疾病中的用途。
Description
本发明要求2021年9月30日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202111168232.4，发明名称为“一类氰基化合物、其制备方法及用途”以及2022年8月15日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202210973184.4，发明名称为“一类氰基化合物、其制备方法及用途”的中国专利申请的优先权。上述在先申请的全文通过援引整体并入本文中。
技术领域
本发明属于药物化学和化学合成领域，具体而言，本发明涉及一类氰基化合物、其制备方法及用途。
背景技术
冠状病毒为单链正义RNA病毒，部分冠状病毒能够在人群中大范围传播并可以引起严重症状。目前已知的可以感染人的冠状病毒有7种，分别是HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、SARS-CoV、MERS-CoV和SARS-CoV-2。冠状病毒大多数功能蛋白由ORF1ab基因编码，先翻译成一个多聚蛋白，再由3CL蛋白酶和PL蛋白酶切割成多个活性蛋白，因此抑制3CL蛋白酶活性能够有效抑制病毒的复制。不同冠状病毒3CL蛋白酶具有高度的结构同源性，因此3CL蛋白酶抑制剂具有广谱抗冠状病毒活性。
除冠状病毒以外，3CL蛋白酶在小RNA病毒编码的多聚蛋白水解中也扮演重要角色，3CL蛋白酶抑制剂能够有效抑制小RNA病毒复制。肠病毒71是一种小RNA病毒，它引起手足口病的常见病毒之一，还可能引起脑膜炎、脑干脑炎、心肌炎等多种疾病。近年来，肠病毒71多次在婴幼儿人群中爆发，临床上仍缺乏高效的治疗药物。
因此，仍需要可以抑制包括冠状病毒/肠病毒71等RNA/小RNA病毒的化合物。
发明内容
发明人基于3CL蛋白酶的晶体结构，合理设计了一类氰基化合物，所述化合物可以有效抑制冠状病毒和/或小RNA病毒的3CL蛋白酶活性、在体外能够有效抑制包括肠病毒71在内的多种小RNA病毒的3CL蛋白酶活性，在细胞水平有效抑制小RNA病毒的复制，可以用于制备冠状病毒和/或小RNA病毒诱发疾病的药物。发明人在此基础上完成了本公开。
本发明的首要目的在于提供如通式I所示的氰基化合物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体及其药学上可接受的盐。
本发明的第二目的在于提供该类化合物的制备方法。
本发明的第三目的在于提供包含该类化合物的药物组合物。
本发明的第四目的在于该类化合物在制备3CL蛋白酶抑制剂方面的用途。
本发明的第五目的在于该类化合物在制备预防或治疗冠状病毒和/或小RNA病毒诱发疾病的药物方面的用途。
为了完成上述目的，本发明采用的技术方案为：
一方面，本发明提供一种如通式I所示的氰基化合物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体及其药学上可接受的盐。
另一方面，本发明提供通式I的化合物的制备方法。
本发明的技术方案至少具有以下技术效果：
本发明的化合物具有3CL蛋白酶抑制活性，能抑制冠状病毒和小RNA病毒的基因表达的蛋白复合体水解，进而抑制病毒复制和发展，可用于冠状病毒或小RNA病毒感染引起疾病的预防与治疗。
本发明涉及通式I所示的氰基化合物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐：
其中，
R1选自-COR8和-SO2R9；
R2与R3各自独立地选自H、D、C1～C10烷基、金刚烷基和C3～C7环烷基，或者，R2与R3和与之相连的碳原子形成3～8元碳环；
X选自O、S、S(＝O)2和S＝O；
Y不存在或选自O、S、S(＝O)2和S＝O；
R4选自H、C1～C10烷基、C3～C8环烷基、C6～C20芳基、C1～C10烷基取代的C6～C20芳基、C1～C10烷氧基取代的C6～C20芳基和卤代C6～C20芳基；
R5选自H、C1～C10烷基和C3～C7环烷基；
或者，R4与R5彼此相连共同形成C2-C6亚烷基，从而连接X和Y；
R6选自
R7选自H和D；
R8选自H、C1～C10烷基、C1～C10烷氧基、C3～C7环烷基、卤代C1～C10烷基、卤代C3～C7环烷基、-NR13R14、C6～C20芳基、卤代C6～C20芳基、C1～C10烷基取代的C6～C20芳基、卤代C1～C10烷基取代的C6～C20芳基、5～20元杂芳基和卤代5～20元杂芳基；
R9选自C1～C10烷基、C3～C7环烷基、卤代C1～C10烷基、卤代C3～C7环烷基、-NR15R16、C6～C20芳基、卤代C6～C20芳基、C1～C10烷基取代的C6～C20芳基、卤代C1～C10烷基取代的C6～C20芳基、5～20元杂芳基和卤代5～20元杂芳基；
R13和R14各自独立地选自H和C1～C10烷基；
R15和R16各自独立地选自H和C1～C10烷基。
在一些实施方式中，R2与R3各自独立地选自H、D、C1～C6烷基、金刚烷基和C3～C7环烷基，或者，R2与R3和与之相连的碳原子形成3～8元碳环。
在一些实施方式中，R2与R3各自独立地选自H、异丙基、叔丁基、环戊基和金刚烷基，或者，R2与R3和与之相连的碳原子形成环丙基和环戊基。
在一些实施方式中，R2与R3中的一个选自H，另一个选自异丙基、叔丁基、环戊基和金刚烷基，或者，R2与R3和与之相连的碳原子形成环丙基和环戊基。
在一些实施方式中，R4选自H、C1～C6烷基、C3～C8环烷基、C6～C10芳基、C1～C6烷基取代的C6～C10芳基、C1～C6烷氧基取代的C6～C10芳基和卤代C6～C10芳基；
R5选自H、C1～C6烷基和C3～C7环烷基；
或者，R4与R5彼此相连共同形成C2-C6亚烷基，从而连接X和Y。
在一些实施方式中，X选自O、S、S(＝O)2和S＝O；Y不存在或选自O、S和S＝O；R4选自C1～C6烷基和C6～C10芳基，R5选自H；或者，R4与R5彼此相连共同形成C2～C6亚烷基，从而连接X和Y。
在一些实施方式中，R4与R5彼此相连共同形成CH2CH2和CH2CH2CH2，从而连接X和Y。
在一些实施方式中，X、Y各自独立地选自O、S和S＝O，R4与R5彼此相连共同形成CH2CH2和CH2CH2CH2，从而连接X和Y。
在一些实施方式中，X、Y各自独立地选自O和S，R4与R5彼此相连共同形成CH2CH2，从而连接X和Y。
在一些实施方式中，X、Y均选自S，或者X、Y均选自O，R4与R5彼此相连共同形成CH2CH2，从而连接X和Y。
在一些实施方式中，X选自S，Y不存在，R4选自苯基和异丙基，R5选自H。
在一些实施方式中，R6选自
在一些实施方式中，R7选自H。
在一些实施方式中，R8选自H、C1～C6烷基、C1～C6烷氧基、C3～C7环烷基、卤代C1～C6烷基、卤代C3～C7环烷基、-NR13R14、C6～C10芳基、卤代C6～C10芳基、C1～C6烷基取代的C6～C10芳基、卤代C1～C6烷基取代的C6～C10芳基、5～10元杂芳基和卤代5～10元杂芳基。
在一些实施方式中，R8选自C1～C6烷基、卤代C1～C6烷基、C1～C6烷氧基、-NR13R14、C3～C7环烷基、卤代C3～C7环烷基、苯基、卤代苯基、C1～C6烷基取代的苯基、卤代C1～C6烷基取代的苯基和5～6元杂芳基。
在一些实施方式中，R9选自C1～C6烷基、C3～C7环烷基、卤代C1～C6烷基、卤代C3～C7环烷基、-NR15R16、C6～C10芳基、卤代C6～C10芳基、C1～C6烷基取代的C6～C10芳基、卤代C1～C6烷基取代的C6～C10芳基、5～10元杂芳基和卤代5～10元杂芳基。
在一些实施方式中，R9选自C1～C6烷基、C3～C7环烷基、苯基、C1～C6烷基取代的苯基和卤代C1～C6烷基取代的苯基。
在一些实施方式中，R13和R14各自独立地选自H和C1～C6烷基。
在一些实施方式中，R15和R16各自独立地选自H和C1～C6烷基。
在一些实施方式中，R8选自CH3、CF3、CH2CF3、CF2CF3、甲氧基、环丙基、/>苯基、/>和吡啶-3-基。
在一些实施方式中，R9选自CH3、环丙基、苯基、对甲基苯基和对三氟甲基苯基。
在一些实施方式中，通式I所示的氰基化合物选自通式IA所示的氰基化合物：
其中，R1、R2、R3、R4、R5、X和Y如上文所定义。
在一些实施方式中，通式I所示的氰基化合物选自通式IB所示的氰基化合物：
其中，各取代基定义如上所述。
在一些实施方式中，通式I所示的氰基化合物选自如下通式所示的氰基化合物中的任一种：
其中，R1、R2、R3和R6如上文所定义。
在一些实施方式中，本发明通式I所示的化合物选自以下化合物：
本发明提供了制备通式I所示化合物的方法，所述方法为以下方法之一：
方法i：
ia)由式II所示化合物与式III所示化合物通过缩合反应得到式IV所示化合物；
优选地，所述步骤ia)为：式II所示化合物在-20℃～50℃温度下，在溶剂中，通过缩合剂和碱的作用与式III所示化合物反应0.1-12h，从而得到式IV所示化合物；
其中，所述溶剂为以下的一种或几种混合，四氢呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、乙酸乙酯和1，4-二氧六环；
任选地，所述缩合剂为以下的一种或几种混合：2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、1-羟基苯并三唑、2-羟基吡啶-N-氧化物、1-丙基磷酸酐、1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐、N，N′-羰基二咪唑和O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸盐；
任选地，所述碱为N，N-二异丙基乙胺、三乙胺和N-甲基吗啉；
ib)式IV所示化合物通过脱水得到通式I所示化合物；
优选地，所述步骤ib)为：式IV所示化合物在-20℃～50℃温度下，在无水溶剂中，与脱水剂反应1-24h得到通式I所示化合物；
其中，所述无水溶剂为以下的一种或几种混合，四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯、1，4-二氧六环和吡啶；
所述脱水剂为三氟醋酸酐和N-(三乙基铵磺酰)氨基甲酸甲酯；或者
方法ii：
iia)由式V所示化合物与式III所示化合物缩合得到式VI所示化合物，其中式V所示化合物中的PG为氨基的保护基团；
优选地，所述步骤iia)为：式V所示化合物在-20℃～50℃温度下，在溶剂中，通过缩合剂和碱的作用与式III所示化合物反应0.1-12h，从而得到式VI所示化合物，
其中，所述溶剂为以下的一种或几种混合，四氢呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、乙酸乙酯和1，4-二氧六环，
所述缩合剂为以下的一种或几种混合，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、1-羟基苯并三唑、2-羟基吡啶-N-氧化物、1-丙基磷酸酐、1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐、N，N′-羰基二咪唑和O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸盐；
所述碱为N，N-二异丙基乙胺、三乙胺和N-甲基吗啉；
所述氨基的保护基团PG为叔丁氧羰基、苄基和对甲氧基苄基；
iib)式VI所示化合物脱保护得到式VII所示化合物；
优选地，所述步骤iib)为：在-20℃～50℃温度下，将式VI所示化合物与三氟醋酸或氯化氢的有机溶液或Pd/C/H2反应得到式VII所示化合物；
iic)式VII所示化合物通过氨基酰化、磺酰化或缩合反应得到式IV所示化合物；
优选地，所述步骤iic)为：
在-20℃～50℃温度下，将式VII所示化合物与酰氯或酸酐在加入碱的条件下进行氨基酰化反应得到式IV所示化合物；或者，
在-20℃～50℃温度下，将式VII所示化合物与磺酰氯或磺酸酐在碱的条件下进行磺酰化反应得到式IV所示化合物；或者，
在-20℃～50℃温度下，将式VII所示化合物与羧基化合物在缩合剂与碱的条件下进行缩合反应得到式IV所示化合物；
任选地，所述碱为N，N-二异丙基乙胺、三乙胺和N-甲基吗啉；
任选地，所述缩合剂为以下的一种或几种混合，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、1-羟基苯并三唑、2-羟基吡啶-N-氧化物、1-丙基磷酸酐、1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐、N，N′-羰基二咪唑和O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸盐，
iid)式IV所示化合物通过脱水得到通式I所示化合物；
优选地，所述步骤iid)为：式IV所示化合物在-20℃～50℃温度下，在无水溶剂中，与脱水剂反应1-24h得到通式I所示化合物；
其中，所述无水溶剂为以下的一种或几种混合，四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯、1，4-二氧六环和吡啶；
任选地，所述脱水剂为三氟醋酸酐和N-(三乙基铵磺酰)氨基甲酸甲酯，
其中，各取代基定义如上所述。
本发明另一方面还提供一种药物组合物，其包含选自通式I的氰基化合物，其外消旋体、对映异构体和非对映异构体，和它们的药学上可接受的盐中的一种或多种。所述药物组合物还可以包括一种或者多种药学上可接受的辅料、稀释剂、载体、赋形剂或佐剂。
本发明另一方面还提供一种药物组合物，其包含选自通式I的氰基化合物，或其外消旋体、对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料；任选地，所述药物组合物还进一步包含利托那韦或其药学上可接受的盐。
本发明另一方面还提供一种药物组合，其包含选自通式I的氰基化合物，其外消旋体、对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐，以及利托那韦或其药学上可接受的盐。
本发明另一方面还提供一种药物组合物，其包含选自通式I的氰基化合物或其药学上可接受的盐，利托那韦或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。
经实验证明，本发明化合物具有冠状病毒3CL蛋白酶和小RNA病毒的3CL蛋白酶抑制活性。
因此，本发明再一方面提供一种冠状病毒3CL蛋白酶抑制剂和/或一种小RNA病毒的3CL蛋白酶抑制剂，其包含选自通式I的氰基化合物，其外消旋体、对映异构体和非对映异构体，和它们的药学上可接受的盐中的一种或多种，或上述药物组合物。
本发明还提供上述氰基化合物，其外消旋体、对映异构体、非对映异构体、其药学上可接受的盐，或它们的混合物，或上述药物组合物在制备药物中的用途，所述药物选自用于抑制冠状病毒3CL蛋白酶活性的药物，用于预防和/或治疗冠状病毒感染的药物，用于抑制小RNA病毒的3CL蛋白酶活性的药物，和用于预防和/或治疗小RNA病毒感染的药物。
本发明还提供一种抑制3CL蛋白酶的方法，所述方法包括向需要处理的对象施用根据选自本发明的通式I的氰基化合物，其外消旋体、对映异构体和非对映异构体，和它们的药学上可接受的盐中的一种或多种，或者根据本发明的药物组合物。
本发明还提供一种预防和/或治疗疾病或病症的方法，所述方法包括向需要治疗的对象施用根据选自本发明的通式I的氰基化合物，其外消旋体、对映异构体和非对映异构体，和它们的药学上可接受的盐中的一种或多种，或者根据本发明的药物组合物，所述疾病或病症为3CL蛋白酶介导的疾病或病症，特别是与冠状病毒感染和/或小RNA病毒感染相关的疾病或病症。
本发明还提供上述通式I所示氰基化合物，其外消旋体、对映异构体和非对映异构体，和它们的药学上可接受的盐中的一种或多种，或其药物组合物在制备预防或治疗由冠状病毒和/或小RNA病毒感染引起的相关疾病的药物中的用途。
本发明还提供预防或治疗由冠状病毒和/或小RNA病毒感染引起的相关疾病的方法，该方法包括给以患者治疗上有效剂量的包含本发明通式I所示氰基化合物，其外消旋体、对映异构体和非对映异构体，和它们的药学上可接受的盐中的一种或多种的药物制剂。
在一些实施方式中，所述冠状病毒选自SARS-CoV、MERS-CoV、H229E-CoV、HKU1-CoV、NL63-CoV、OC43-CoV或SARS-CoV-2。
在一些实施方式中，所述冠状病毒感染引起的相关疾病选自呼吸道感染、肺炎或其并发症。
术语定义和说明
“C1～C10烷基”表示具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的直链或支链饱和烃基。所述烷基的具体实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1，2-二甲基丙基、新戊基、1，1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3，3-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，1-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基或1，2-二甲基丁基等；“C1～C6烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，包含但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基等。
“亚烷基”可理解为表示具有直链或支链饱和二价烃基。“C2～C6亚烷基”可理解为表示具有直链或支链饱和二价烃基，其具有2-6个碳原子，包含但不限于CH2CH2、CH2CH2CH2、CH2CH2CH2CH2、CH2CH2CH2CH2CH2或CH2CH2CH2CH2CH2CH2等。
“C3～C8环烷基”表示含有3-8个环碳原子的环状烷基。“C3～C7环烷基”表示含有3-7个环碳原子的环状烷基，本公开的环烷基包括但不限于环丙基、甲基环丙基、乙基环丙基、二甲基环丙基、环丁基、甲基环丁基、乙基环丁基、环戊基、环己基等。
“C1～C10烷氧基”表示直链、支链或环状的含有1-10个碳原子的烷氧基。“C1～C6烷氧基”表示直链、支链或环状的含有1-6个碳原子的烷氧基，本公开的烷氧基包含但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、异戊氧基、环戊氧基、己氧基、环己氧基等。
“芳基”是指具有共轭的π电子体系的全碳单环或稠合多环的芳香环基团。芳基可以具有6-20个碳原子，6-14个碳原子或6-12个碳原子。“C6～C20芳基”可理解为具有6～20个碳原子的芳基。特别是具有6个碳原子的环(“C6芳基”)，例如苯基；或者具有9个碳原子的环(“C9芳基”)，例如茚满基或茚基；或者具有10个碳原子的环(“C10芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基；或者具有13个碳原子的环(“C13芳基”)，例如芴基；或者是具有14个碳原子的环(“C14芳基”)，例如蒽基。“C6～C10芳基”可理解为具有6～10个碳原子的芳基。特别是具有6个碳原子的环(“C6芳基”)，例如苯基；或者具有9个碳原子的环(“C9芳基”)，例如茚满基或茚基；或者具有10个碳原子的环(“C10芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基。
“杂芳基”是具有芳香性的环基，其含有5-20个环原子，其中有一个或多个环原子为选自N、O或S的杂原子，其余环原子为碳。“5～20元杂芳基”可理解为具有5～20个环原子，特别是5或6或9或10或13或14个环原子，且其包含1-7个独立选自N、O和S的杂原子的杂芳基。“5～10元杂芳基”可理解为具有5～10个环原子，特别是5或6或9或10个环原子，且其包含1-5个独立选自N、O和S的杂原子的杂芳基。“5～6元杂芳基”可理解为具有5或6个环原子且其包含1-3个独立选自N、O和S的杂原子的杂芳基。本发明所述杂芳基可选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基或噻二唑基等以及它们的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基或异吲哚基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基或三嗪基等以及它们的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基或异喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它们的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基或吩噁嗪基等。
“卤素”选自氟、氯、溴、碘。
“卤代”包括单卤代、多卤代或全卤代，即一个、多个或全部氢原子被卤素取代。
“取代”是指基团上的一个或多个氢原子被一个或多个取代基取代。
术语“任选”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可以发生或不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。
“治疗有效量”意指(i)治疗特定疾病、病况或障碍，(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状，或(iii)延迟本文中所述的特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状发作的本发明化合物的用量。构成“治疗有效量”的本发明化合物的量取决于该化合物、疾病状态及其严重性、给药方式以及待被治疗的哺乳动物的年龄而改变，但可例行性地由本领域技术人员根据其自身的知识及本公开内容而确定。
“药学上可接受的盐”是指药学上可接受的酸或碱的盐，包括化合物与无机酸或有机酸形成的盐，以及化合物与无机碱或有机碱形成的盐。
术语“药物组合”是指包含两种或两种以上的活性成分或其药学上可接受的盐的组合。在本发明的一些实施方式中，所述药物组合中的活性成分或其药学上可接受的盐可以同时施用，在本发明的一些实施方式中，所述药物组合中的活性成分或其药学上可接受的盐也可以分别或序贯施用。
“药物组合物”是指一种或多种本发明的化合物或其盐与药学上可接受的辅料组成的混合物。药物组合物的目的是有利于对有机体给予本发明的化合物。
“药学上可接受的辅料”是指对有机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些辅料。合适的辅料是本领域技术人员熟知的，例如碳水化合物、蜡、水溶性和/或水可膨胀的聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等。
附图说明
图1为化合物2对SARS-CoV-2的WIV04株体外活性的抑制率-浓度的图。
图2为化合物2对SARS-CoV-2的B.1.351株体外活性的抑制率-浓度的图。
图3为实施例26中分别感染2天后(图A)及4天后(图B)化合物2对小鼠肺部病毒滴度的抑制效果图。
图4为实施例26中的小鼠体重变化图。
图5为实施例26中感染4天后化合物2对小鼠脑部病毒滴度的抑制效果图。
具体实施方式
以下通过实施例进一步描述本公开。在以下的实施例中，原料可商业购买，或者能够通过文献中记载的方法/本领域已知的有机合成方法制备。
实施例1
化合物1-1制备：
步骤1：将起始原料SMA(2.74g，11.85mmol)、35ml二氯甲烷和35ml DMF加入反应瓶中，降温至0℃，依次加入起始原料SMB(3.56g，11.86mmol)、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲氨基)磷鎓六氟磷酸盐(BOP，6.29g，14.22mmol)和N-甲基吗啉(NMM，3.91ml，35.56mmol)，升温至室温反应10h，反应结束后，加入适量二氯甲烷，有机相依次用1N盐酸水溶液、饱和食盐水洗涤，洗涤结束后有机相用无水硫酸钠干燥，有机相浓缩至干，柱层析得3.71g INT-1；ESI-MS：433.2m/z[M+H]+；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δH：6.75(d，J＝9.2Hz，1H)，4.38(t，J＝8.2Hz，1H)，4.25(d，J＝10.9Hz，1H)，4.11(d，J＝9.3Hz，1H)，3.93(t，J＝9.3Hz，1H)，3.62(s，3H)，3.40-3.31(m，4H)，2.70(dd，J＝13.1，7.9Hz，1H)，2.37(dd，J＝13.2，8.4Hz，1H)，1.37(s，9H)，0.94(s，9H)。
步骤2：将INT-1(3.71g，8.58mmol)、37ml的THF和37ml的纯化水和一水合氢氧化锂(0.72g，17.16mmol)加入反应瓶中，室温反应2h，反应结束后，用浓盐酸调至pH＝4，过滤，得3.4g化合物1-1；ESI-MS：419.2m/z[M+H]+；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δH：12.68(s，1H)，6.71(d，J＝9.4Hz，1H)，4.38-4.19(m，2H)，4.11(d，J＝9.4Hz，1H)，3.88(d，J＝10.9Hz，1H)，3.41-3.29(m，4H)，2.69(dd，J＝13.1，7.9Hz，1H)，2.34(dd，J＝13.2，8.9Hz，1H)，1.38(s，9H)，0.94(s，9H)。
化合物1-2制备：
将氨气-甲醇溶液(700ml，7mol/L)、起始原料SMD(100g，0.349mol)加入反应瓶中，搅拌溶清，保温25±5℃，反应36h，反应结束后，将反应液浓缩至剩余反应液约为250ml，加入异丙醇300ml继续减压浓缩至剩余反应液约250ml(重复三次)，氮气置换，降温至10+5℃，将500ml氯化氢-异丙醇溶液(4mol/L)加入反应釜中，加入结束后，升温至25±5℃，保温25±5℃反应9h。反应结束后，将反应液减压浓缩至剩余反应液体积约250ml，加入300ml异丙醇继续减压浓缩至剩余反应液体积约250ml(重复两次)，加入100ml异丙醇，搅拌30±5min，过滤，滤饼用50ml异丙醇淋洗，得湿品；45±5℃真空干燥，得66.7g化合物1-2，收率：92％；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δH：8.45(d，J＝5.1Hz，3H)，8.25-8.04(m，1H)，7.95(s，1H)，7.67-7.49(m，1H)，3.85-3.80(m，1H)，3.19-3.13(m，2H)，2.59-2.51(m，1H)，2.32-2.27(m，1H)，2.05-1.98(m，1H)，1.82-1.66(m，2H)；ESI-MS：172.1 m/z[M+H]+。
化合物1的制备：
化合物1-1(419mg，1mmol)置于双口瓶中，氮气保护下加入5mL二氯甲烷，随后加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(400mg，1.1mmol)室温下搅拌1h。化合物1-2(1mmol)溶于1mL二氯甲烷中加入到以上体系中，随后在冰水浴下加入N，N-二异丙基乙胺(0.5mL，1mmol)，撤去冰水浴，体系置于室温搅拌过夜。后处理，加二氯甲烷50mL后用1M盐酸水溶液洗三次，碳酸氢钠饱和水溶液洗三次，饱和食盐水洗有机相，无水硫酸钠干燥，过滤旋干得到化合物1-3(白色固体，469mg，产率82％)。ESI-MS：m/z 572.3[M+H]+。
化合物1-3(114mg，0.2mmol)与伯吉斯试剂(15eq)加入到双口瓶中，充放氮气三次后加入分子筛干燥过的二氯甲烷，室温搅拌过夜，薄层层析检测显示原料基本反应完全。后处理，柱层析得到化合物1(白色固体，52mg，产率47％)，ESI-MS：554.3 m/z [M+H]+.
实施例2
化合物1-3(572mg，1mmol)溶于3mL 4M氯化氢/1，4-二氧六环溶液中，或者溶于2mL二氯甲烷后逐滴加入2mL三氟醋酸，环境温度下搅拌，薄层层析检测显示原料基本反应完全后充分旋干溶剂。得到的粗品溶于2mL二氯甲烷，氮气保护，加入三乙胺(3mmol)后将体系置于冰水浴中，逐滴加入三氟醋酸酐(1.2mmol)，薄层层析检测显示原料基本反应完全后，加二氯甲烷50mL后用1M盐酸水溶液洗三次，碳酸氢钠饱和水溶液洗三次，饱和食盐水洗有机相，无水硫酸钠干燥，过柱得到化合物2-1(白色固体，265mg，产率46％)。ESI-MS：m/z 568.3[M+H]+。
化合物2-1(113mg，0.2mmol)与伯吉斯试剂(1.5eq)加入到双口瓶中，充放氮气三次后加入分子筛干燥过的二氯甲烷，室温搅拌过夜，薄层层析检测显示原料基本反应完全。后处理，柱层析得到化合物2(白色固体，41mg，产率47％)，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.46(d，J＝8.7Hz，1H)，9.05(d，J＝8.6Hz，1H)，7.67(s，1H)，4.97(ddd，J＝11.0，8.5，5.0Hz，1H)，4.53(d，J＝8.7Hz，1H)，4.34(dd，J＝9.9，7.1Hz，1H)，4.26-4.14(m，1H)，3.92(d，J＝10.9Hz，1H)，3.50-3.34(m，4H)，3.22-3.11(m，1H)，3.06(td，J＝9.3，7.1Hz，1H)，2.68-2.58(m，1H)，2.50-2.43(m，1H)，2.31(dd，J＝13.0，10.0Hz，1H)，2.23-2.07(m，2H)，1.71(tdd，J＝14.9，10.3，7.4Hz，2H)，0.99(s，9H).ESI-MS：550.3 m/z[M+H]+.
实施例3
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以醋酸酐代替三氟醋酸酐，得到化合物3(白色固体，45mg，产率45％)，ESI-MS：496.3 m/z[M+H]+.
实施例4
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以环丙烷甲酸酐代替三氟醋酸酐，得到化合物4(白色固体，32mg，产率31％)，ESI-MS：522.3 m/z[M+H]+.
实施例5
按照实施例1中相同的方法，不同之处在于：以5-1代替1-1，得到化合物5(白色固体，22mg，产率20％)，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.03(d，J＝8.4Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.41(dd，J＝9.1，2.6Hz，1H)，4.96(ddd，J＝10.6，8.4，5.4Hz，1H)，4.58-4.50(m，1H)，4.34(dd，J＝9.8，7.2Hz，1H)，4.26-4.21(m，1H)，3.89(d，J＝11.0Hz，1H)，3.45-3.33(m，4H)，3.22-3.03(m，2H)，2.64-2.57(m，1H)，2.45(ddd，J＝10.1，8.5，4.5Hz，1H)，2.31(dd，J＝12.9，9.8Hz，1H)，2.20-2.10(m，2H)，1.84-1.67(m，2H)，1.39-1.31(m，2H)，1.24(t，J＝9.5Hz，2H)，0.97(s，9H).ESI-MS：540.2 m/z[M+H]+.
实施例6
按照实施例1中相同的方法，不同之处在于：以6-1代替1-1，得到化合物6(白色固体，38mg，产率37％)，ESI-MS：512.2 m/z[M+H]+.
实施例7
按照实施例1中相同的方法，不同之处在于：以7-1代替1-1，得到化合物7(白色固体，49mg，产率44％)，ESI-MS：553.3 m/z[M+H]+.
实施例8
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以苯甲酸酐代替三氟醋酸酐，得到化合物8(白色固体，44mg，产率39％)，ESI-MS：558.3 m/z[M+H]+.
实施例9
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以3，5-双(三氟甲基)苯甲酰氯代替三氟醋酸酐，得到化合物9(白色固体，39mg，产率28％)，ESI-MS：694.2 m/z[M+H]+
实施例10
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以3，5-二甲基苯甲酰氯代替三氟醋酸酐，得到化合物10(白色固体，31mg，产率26％)，ESI-MS：586.2 m/z[M+H]+.
实施例11
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以3，3，3-三氟丙酸酐代替三氟醋酸酐，得到化合物11(白色固体，28mg，产率25％)，ESI-MS：564.2 m/z[M+H]+.
实施例12
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以3-吡啶甲酰氯代替三氟醋酸酐，得到化合物12(白色固体，39mg，产率35％)，ESI-MS：559.2 m/z[M+H]+.
实施例13
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以五氟丙酰氯代替三氟醋酸酐，得到化合物13(白色固体，41mg，产率34％)，ESI-MS：600.2 m/z[M+H]+.
实施例14
按照实施例1中相同的方法，不同之处在于：以14-1代替1-1，得到化合物14(白色固体，32mg，产率29％)，ESI-MS：550.2 m/z[M+H]+.
实施例15
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以甲基磺酸酐代替三氟醋酸酐，得到化合物15(白色固体，38mg，产率36％)，1H NMR(400MHz，Methanol-d4)δ5.06(dd，J＝11.5，4.5Hz，1H)，4.46(dd，J＝10.3，7.1Hz，1H)，4.27(dd，J＝11.0，1.6Hz，1H)，4.02-3.89(m，2H)，3.45(qt，J＝8.6，4.7Hz，4H)，3.30-3.23(m，1H)，2.92(s，3H)，2.78(tdd，J＝10.3，8.5，4.0Hz，1H)，2.68(ddd，J＝13.0，7.2，1.6Hz，1H)，2.51(dd，J＝13.0，10.3Hz，1H)，2.45-2.27(m，2H)，1.94-1.77(m，2H)，1.05(s，9H).ESI-MS：532.2 m/z[M+H]+.
实施例16
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以环丙磺酰氯代替三氟醋酸酐，得到化合物16(白色固体，29mg，产率26％)，1H NMR(400MHz，Methanol-d4)δ5.06(dd，J＝11.5，4.5Hz，1H)，4.44(dd，J＝10.3，7.0Hz，1H)，4.28(dd，J＝11.0，1.6Hz，1H)，4.00-3.94(m，2H)，3.52-3.38(m，4H)，3.31-3.21(m，1H)，2.79(tdd，J＝10.4，8.5，4.1Hz，1H)，2.72-2.65(m，1H)，2.57(ddd，J＝7.9，6.2，3.9Hz，1H)，2.51(dd，J＝13.0，10.4Hz，1H)，2.43-2.29(m，2H)，1.92-1.74(m，2H)，1.34-1.29(m，1H)，1.14(qt，J＝6.4，3.8Hz，1H)，1.06(s，9H)，1.01(ddt，J＝7.9，5.8，2.7Hz，2H)，0.97-0.87(m，1H).ESI-MS：558.2 m/z[M+H]+.
实施例17
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于：以苯磺酰氯代替三氟醋酸酐，得到化合物17(白色固体，35mg，产率29％)，ESI-MS：594.2 m/z[M+H]+.
实施例18
按照实施例1中相同的方法，不同之处在于：以18-1代替1-1，得到化合物18(白色固体，44mg，产率42％)，ESI-MS：518.2 m/z[M+H]+.
实施例19
按照实施例1中相同的方法，不同之处在于：以19-1代替1-1，得到化合物19(白色固体，41mg，产率36％)，ESI-MS：568.2 m/z[M+H]+.
实施例20
按照实施例1中相同的方法，不同之处在于：以20-1代替1-1，得到化合物20(白色固体，45mg，产率35％)，ESI-MS：648.2 m/z[M+H]+.
实施例21
按照实施例1中相同的方法，不同之处在于：以21-1代替1-1，得到化合物21(白色固体，34mg，产率31％)，ESI-MS：640.2 m/z[M+H]+.
实施例22
按照实施例1中相同的方法，不同之处在于：以22-1代替1-1，22-1代替1-2，得到化合物22(白色固体，22mg，产率18％)，ESI-MS：614.2 m/z[M+H]+.
实施例23
化合物23-1(497mg，1mmol)置于双口瓶中，氮气保护下加入5mL二氯甲烷，随后加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(400mg，1.1mmol)室温下搅拌1h。化合物1-2(或其相应的盐，1mmol)溶于1mL二氯甲烷中加入到以上体系中，随后在冰水浴下加入N，N-二异丙基乙胺(0.5mL，1mmol)，撤去冰水浴，体系置于室温搅拌过夜。后处理，加二氯甲烷50mL后用1M盐酸水溶液洗三次，碳酸氢钠饱和水溶液洗三次，饱和食盐水洗有机相，无水硫酸钠干燥，过滤旋干得到化合物23-2(白色固体，421mg，产率65％)。ESI-MS：m/z 650.3[M+H]+。
化合物23-2(325mg，0.5mmol)溶于1.5mL 4M氯化氢/1，4-二氧六环溶液中，或者溶于1mL二氯甲烷后逐滴加入1mL三氟醋酸，环境温度下搅拌，薄层层析检测显示原料基本反应完全后充分旋干溶剂。得到的粗品溶于2mL二氯甲烷，氮气保护，加入三乙胺(1.5mmol)后将体系置于冰水浴中，逐滴加入三氟醋酸酐(0.6mmol)，薄层层析检测显示原料基本反应完全后，加二氯甲烷25mL后用1M盐酸水溶液洗三次，碳酸氢钠饱和水溶液洗三次，饱和食盐水洗有机相，无水硫酸钠干燥，过柱得到化合物23-3(白色固体，167mg，产率52％)。ESI-MS：m/z 646.3[M+H]+。
化合物23-3(130mg，0.2mmol)与伯吉斯试剂(1.5eq)加入到双口瓶中，充放氮气三次后加入分子筛干燥过的二氯甲烷，室温搅拌过夜，薄层层析检测显示原料基本反应完全。后处理，柱层析得到化合物23(白色固体，37mg，产率29％)，ESI-MS：628.2 m/z[M+H]-。
实施例24：化合物抑制SARS-CoV-23CLpro活性测试
利用荧光共振能量转移方法评价测定化合物对SARS-CoV-23CLpro酶活的抑制活性。整个酶促反应体系的体积为120μL，蛋白酶的终浓度为30nM，底物终浓度为20μM。反应体系的缓冲液包括50mM Tris pH7.3、1mM EDTA。在96孔板中加入SARS-CoV-2 3CLpro蛋白酶和不同浓度的化合物，30℃孵育10min，加入底物并迅速放入酶标仪中读数。激发光和发射光分别为320nM和405nM。测试时间为3.5min，每隔35s读一次荧光值。最终结果取前2min的读值拟合出反应速率，并与对照组(DMSO)比较，计算抑制率。利用软件GraphPad Prism 8拟合得到IC50值以及抑制率曲线。
实验结果如表1所示。结果表明，本发明化合物对SARS-CoV-2 3CLpro具有强效抑制作用。IC50值的范围为：A表示＜0.1μM，B表示0.1-1μM，C表示1-10μM。
表1：化合物1-23对SARS-CoV-2 3CLpro的抑制作用
/>
/>
/>
/>
实施例24-2：化合物2对于SARS-CoV-2奥密克戎株突变型3CL蛋白酶抑制活性测试
实验原理：应用酶与底物反应产生荧光共振能量转移(FRET)的方法，研究了本发明化合物对奥密克戎株突变型3CL蛋白酶(P132H)活性的抑制效果。
实验材料如下表所示：
实验仪器及设备：
| 仪器名称 | 品牌 | 型号 |
| Echo纳升级声波移系统 | Labcyte | Echo 650 |
| Flexstation 3酶标仪 | MolecMar Devices | FLEX3 |
| 离心机 | Eppendorf | 5810 |
实验步骤：
配制反应缓冲液，含有20mM Tris-HCl、1mM EDTA、0.01％BSA、1mM DTT和100mMNaCl。用Echo移液系统将待测化合物在二甲基亚砜(DMSO)中稀释到不同浓度，转移至384孔板中。用反应缓冲液稀释突变型3CL蛋白酶，并且以10μL/孔的量加入384孔板中，1000rpm离心1min，随后室温孵育30分钟。然后加入10μL/孔的底物，1000rpm离心30s启动酶反应。反应体系中，酶的终浓度为50nM，底物终浓度为20μM，化合物的浓度范围为10000nM至0.51nM。随即在Flexstation 3酶标仪上选取Kinetic Reduction Vmax模式，每隔75秒连续读取490nm波长的荧光值，共35次，获得反应速率值(V)，计算抑制率，并使用XLfit软件进行四参数拟合获取半数抑制浓度(IC50)。抑制率计算方法如下：
抑制率＝(Vmax-Vcompound)/(Vmax-Vmin)*100％
其中，Vmax为仅含有酶和底物的孔的反应速率值，Vmin为仅含有底物的孔的反应速率值，VCompound为含有待测化合物、酶和底物的孔的反应速率值。
实验结果：对于SARS-CoV-2奥密克戎株中具有P132H突变的3CL蛋白酶，化合物2依旧保持了显著的抑制活性(三次独立测试IC50为0.022±0.00090μM)。
表2：化合物2对SARS-CoV-2奥密克戎株3CL蛋白酶活性的抑制效果
| 3CL蛋白酶 | 化合物2IC50(μM)(n＝3*) |
| SARS-CoV-2(奥密克戎株) | 0.022±0.00090 |
*指三次独立重复实验。
实施例24-3：化合物2对于不同来源的冠状病毒3CL蛋白酶抑制活性测试
实验目的：研究化合物2对于来源于其它六种能够感染人类的冠状病毒的3CL蛋白酶活性的抑制效果，这六种病毒分别是：SARS-CoV、MERS-CoV、OC43-CoV、H229E-CoV、NL63-CoV和HKU1-CoV。
实验材料：
3CL蛋白酶：根据冠状病毒基因组序列自制重组全长冠状病毒3CL蛋白酶，所用SARS-CoV、MERS-CoV、H229E-CoV、HKU1-CoV、NL63-CoV和OC43-CoV基因组GenBank号分别为AAP13442.1、MT387202.1、AF304460.1、AY597011.2、AY567487.2和AY903459.1，六种冠状病毒3CL蛋白酶蛋白表达所需DNA序列购自南京金斯瑞生物科技有限公司。
3CL蛋白酶底物购自南京金斯瑞生物科技有限公司。
糜蛋白酶底物购自吉尔生化有限公司。
其他试剂如下表所示：
| 试剂材料 | 品牌 | 货号 |
| 牛胰腺来源的糜蛋白酶 | Sigma | C4129 |
| Tris | Sigma | BCBX3837 |
| EDTA | Sigma | 0001434776 |
实验步骤：
配制反应缓冲液(含有50mM Tris和1mM EDTA)。待测化合物用DMSO溶解成100mM母液，进一步用反应缓冲液进行2倍梯度稀释，共11个浓度。在96孔板中加入3CL蛋白酶和不同浓度的化合物，室温孵育10分钟，加入底物并迅速放入酶标仪中读数。整个酶促反应体系的体积为120μL，SARS-CoV、MERS-CoV、H229E-CoV、HKU1-CoV、NL63-CoV和OC43-CoV蛋白酶的终浓度分别为30nM、80nM、30nM、20nM、30nM和10nM，底物终浓度为10μM。读数时激发光和发射光波长分别为340nm和490nm。测试时间为10分钟，每隔1分钟读一次荧光值，最终结果取前5分钟的读值拟合得到反应速率，计算抑制率，计算公式为：抑制率＝1-(测试组反应速率/对照组反应速率)。
实验结果：结果如表3所示，对来源于其他六种冠状病毒的3CL蛋白酶，化合物2展现出较好的抑制效果，提示化合物2可能具有广谱的抗冠状病毒活性。
表3：化合物2对来源于其他冠状病毒3CL蛋白酶的抑制作用
| 3CL蛋白酶来源 | 化合物2IC50(μM) |
| HKU1-CoV | 0.0049 |
| OC43-CoV | 0.010 |
| SARS-CoV-1 | 0.024 |
| MERS-CoV | 0.060 |
| H229E-CoV | 0.13 |
| NL63-CoV | 0.85 |
实施例25-1：化合物2对SARS-CoV-2 WIV04、B.1.351株细胞水平抑制作用
试验使用Vero E6细胞，在48孔板中加入Vero E6细胞(50000个细胞/孔)，加入100μL/孔含梯度浓度化合物的培养基，一小时后加入SARS-CoV-2，感染复数(MOI)为0.01。共孵育1小时后，吸走上清，清洗并重新加入200μL/孔含梯度浓度化合物的培养基，37℃培养24小时。24小时后，收集细胞上清，提取上清病毒RNA并利用实时荧光定量PCR的方法检测上清病毒拷贝数，根据病毒拷贝数算出化合物抑制率，利用prism 6.0计算化合物的EC50。
试验结果显示，化合物2抑制SARS-CoV-2 WIV04株的半数有效浓度EC50为0.57+/-0.04μM，抑制SARS-CoV-2 B.1.351株的EC50为0.73+/-0.06μM，EC50曲线如图1和2所示。
实施例25-2：化合物2对SARS-CoV-2 Vero E6原始株(WIV04)、德尔塔株(B.1.617.2)、奥密克戎株(B.1.1.529)细胞水平抑制作用
实验目的：本试验在Vero E6细胞中通过实时荧光定量PCR法检测培养上清中病毒拷贝数的方法研究了化合物2对SARS-CoV-2原始株(WIV04株)、德尔塔株(B.1.617.2)和奥密克戎株(B.1.1.529)在细胞中复制的抑制作用。由于Vero E6细胞高表达外排转运蛋白P-gp，所以添加0.5μM P-gp抑制剂CP-100356与化合物共孵育。
实验材料：
Vero E6购自ATCC(货号CRL-1586)，SARS-CoV-2原始株(SARS-CoV-2-WIV04株)、Delta株(B.1.617.2)、Omicron株((B.1.1.529)病毒来源于中国科学院武汉病毒研究所微生物菌(毒)种保藏中心。
其他试剂如下表所示：
实验仪器：
生物安全柜(AC2-3S1，ESCO，新加坡)
二氧化碳培养箱(Thermo Scientific HERAcell 150i，Thermo Scientific，美国)
纯水仪(渗源SYS超纯水机，成都)
StepOne Plus Real-time PCR system(4376600，ABI，美国)
TC20TM自动细胞计数器(1450102，BIO-RAD，美国)
T100TM Thermal Cycler(1861096，BIO-RAD，美国)
离心机(Micro21/21R赛默飞，Thermo Scientific，美国)
实验步骤：
使用胰酶消化Vero E6细胞并置于培养基(90％DMEM，10％胎牛血清)中，种入48孔板，每孔50000个细胞，培养过夜。将待测化合物溶解于DMSO配制成40mM母液，进一步用含0.5μM Pgp抑制剂的培养基进行梯度稀释，获得试验所需浓度，实验中待测化合物的最终浓度范围为1μM至0.004μM。移除细胞上清，每孔加入稀释好的化合物(含Pgp抑制剂0.5μM)，孵育1小时，在生物安全3级(BSL-3)实验室里加入SARS-CoV-2不同株系，感染复数(MOI)为0.01或0.001，孵育1小时后，移除上清，PBS洗，加入稀释好的化合物(含Pgp抑制剂0.5μM)200μL/孔，感染后24或者72小时收集上清。提取上清病毒RNA并利用实时荧光定量PCR的方法检测上清病毒拷贝数，根据病毒拷贝数算出化合物抑制率，利用GraphPad Prism 8计算化合物的IC50。
细胞毒性试验中，将Vero E6细胞消化并置于培养基(90％DMEM，10％胎牛血清)中，种入96孔板，每孔20000个细胞，培养过夜。将待测化合物溶解于DMSO配制成40mM母液，进一步用培养基或含0.5μM Pgp抑制剂的培养基进行梯度稀释，获得试验所需浓度，实验中待测化合物的最终浓度范围为500μM至1.95μM。移除96孔板中的细胞上清，加入100μL/孔待测化合物(单药或含Pgp抑制剂0.5μM)的培养基，孵育24小时后，用CCK8检测试剂盒检测细胞活力，计算抑制率和半数细胞毒性浓度(CC50)。
试验结果：如表4所示，与P-gp抑制剂CP-100356联合后，化合物2可剂量依赖的抑制德尔塔株在Vero E6细胞中的复制，IC50为0.040μM。在原始株中化合物2联合P-gp抑制剂也发挥了较强抑制作用，IC50为0.027μM。此外，化合物2联合P-gp抑制剂可显著抑制奥密克戎株在Vero E6细胞中的复制，IC50为0.12μM。化合物2单药以及联合P-gp抑制剂均对VeroE6细胞增殖无明显细胞毒性，CC50＞500μM。
表4：化合物2联合P-gp抑制剂在Vero E6细胞中对SARS-CoV-2复制的抑制作用
实施例26：化合物2在hACE2-K18转基因小鼠上对SARS-CoV-2德尔塔株的体内抗病毒作用
实验目的：本研究评价了化合物2在稳定表达人血管紧张素转换酶2(ACE2)的K18转基因小鼠(K18-hACE2)中对SARS-CoV-2德尔塔株的抗病毒活性。
实验材料：
7-8周龄的K18-hACE2转基因小鼠购自江苏集萃药康生物科技有限公司。SARS-CoV-2 Delta株病毒来源于中国科学院武汉病毒研究所微生物菌(毒)种保藏中心。
利托那韦购自上海迪赛诺化学制药有限公司。
Vero E6细胞购自ATCC(货号CRL-1586)。
其他试剂如下表所示：
实验仪器：
生物安全柜(AC2-3S1，ESCO，新加坡)
二氧化碳培养箱(Thermo Scientific HERAcell 150i，Thermo Scientific，美国)
纯水仪(渗源SYS超纯水机，成都)
StepOne Plus Real-time PCR system(4376600，ABI，美国)
TC20TM自动细胞计数器(1450102，BIO-RAD，美国)
T100TM Thermal Cycler(1861096，BIO-RAD，美国)
离心机(Micro21/21R赛默飞，Thermo Scientific，美国)
组织研磨仪(JXFSTPRP-CL，上海净信，中国)
实验步骤：K18-hACE2转基因小鼠通过滴鼻方式感染SARS-CoV-2德尔塔株，该天为第0天。感染2小时后采用灌胃方式分别给予溶媒、50mg/kg或200mg/kg化合物2(联合50mg/kg的细胞色素P450抑制剂利托那韦)，BID给药2天(其中第0天给药1次，第1天给药2次，第2天给药1次)或4天(其中第0天给药一次，第1、2、3天分别给药2次)。记录小鼠体重变化，终点时收集肺组织和脑组织。其中，左肺甲醛固定，后经包埋、切片和H&E染色用于组织病理学检查。右肺和脑组织各分为两份，一份研磨后取匀浆液提取RNA并进行反转录，通过实时荧光定量PCR检测病毒拷贝数。另一份研磨后取匀浆液通过蚀斑实验检测病毒滴度。蚀斑实验方法如下：Vero E6细胞种于24孔板中，每孔12000个细胞，培养过夜。将组织匀浆液原液在DMEM培养基中进行10倍梯度稀释备用。去除细胞上清，加入稀释好的组织匀浆液并孵育1小时，随后去除上清，加入含1％甲基纤维素纳和2％FBS的培养基，培养4天。随后去除培养基，使用多聚甲醛固定后，用1％(w/v)结晶紫染色，统计每个孔中的空斑数量。
试验结果：如表5所示，在感染2天后，与模型组(病毒平均拷贝数为9.19±0.30log10copies/g)相比，在联合利托那韦的情况下，化合物250mg/kg和200mg/kg均显著减少了肺部的病毒载量，平均拷贝数分别为7.66±0.27log10 copies/g和6.79±0.30log10 copies/g，其中200mg/kg剂量下病毒拷贝数下降程度达到2.4log10 copies/g。在感染4天后，观察到化合物2对病毒拷贝数的持续抑制作用。在病毒滴度方面，如图3所示，观察到化合物2显著的抑制作用，在感染2天后，200mg/kg剂量下完全抑制了病毒复制，未测到滴度，50mg/kg下与模型组相比，病毒滴度下降幅度超过3log10 PFU/g，在感染4天后，化合物2展现了对病毒滴度的持续抑制效果。体重方面如图4所示，在感染4天后，模型组小鼠体重减轻了约10％，而化合物2给药组的体重未明显降低，表明持续给药下化合物2未出现明显毒性。我们进一步检测了小鼠脑内的病毒载量，在感染2天后，各组未出现明显感染。在感染4天后，与模型组相比，化合物2在50mg/kg和200mg/kg剂量下均能显著降低小鼠的脑部的病毒拷贝数，尤其在200mg/kg剂量下脑部的病毒拷贝数与未感染的正常组相当。我们进一步检测了感染4天后脑部的病毒滴度，结果如图5所示，与模型组相比，化合物2在两个剂量下均未测到病毒滴度，显示了化合物2强大的抑制作用。此外，肺部的组织病理学分析表明，与模型组相比，化合物2200mg/kg剂量下显著改善了肺部损伤，包括降低肺泡萎缩或扩张的程度以及肺泡膜增厚的程度。
表5感染2天和4天后小鼠肺部和脑部的病毒载量(平均值±SD)
实施例27：化合物2对激酶的选择性
实验目的：在KinaseProfile实验平台上检测了化合物2对413种激酶的抑制活性，研究化合物2对激酶的选择性。
实验材料：
Full Human Panel[10uM ATP]KinaseProfiler为Eurofins公司提供的测试产品，货号：50-005KP10，此产品包含413个激酶。
实验步骤：
采用Eurofins标准KinaseProfiler分析方法，并遵循相关标准操作程序，对所选的每一种激酶进行化合物测试。蛋白质激酶采用放射法检测，而脂质激酶采用HTRF法检测。实验中ATP浓度为10μM。每个激酶的详细信息可在Eurofins网站上获得，网址如下：https：//www.eurofinsdiscoveryservices.com/catalogmanagement/viewItem/Full-Human-Panel-10-uM-ATP-KinaseProfiler/50-005KP10。
实验结果：对于413种激酶，化合物2在10μM浓度下抑制率均小于30％，无明显抑制作用，提示化合物2具有优秀的选择性。
实施例28：化合物2对安全性靶点的选择性
实验目的：在Safetyscan实验平台上检测了化合物2对47个安全性相关靶点的影响。
实验材料：
Safety47 Panel Dose Response SAFETYscan为Eurofins公司提供的测试产品，货号：87-1003DR。此产品包含47个安全性靶点相关的78个测试。
实验步骤：
对47个安全型靶点相关的78个测试，采用的实验方法包括：cAMP实验、钙流实验、激素核受体实验、激酶结合实验、酶活性实验、神经递质转运体实验、离子通道实验以及转运体实验。每个实验的具体方法可在eurofins网站获得，网址如下：https：//www.eurofinsdiscoveryservices.com/catalogmanagement/viewItem/Safety47-Panel-Dose-Response-SAFETYscan-DiscoverX/87-1003DR。
实验结果：对于47个安全性相关靶点，化合物2在100μM浓度下均无明显抑制或激活作用(EC50均大于100μM)，提示化合物2具有优秀的选择性。
实施例29：化合物2的人血浆蛋白结合试验
实验材料
人血浆购买自BioIVT公司，EDTA K2抗凝，-80℃储存。96孔平衡透析板购买自HTDialysis LLC公司。平衡透析膜购买自Gales Ferry公司。
实验步骤
用超纯水配制浓度为14.2g/L磷酸氢二钠和8.77g/L氯化钠的碱性溶液，该碱性溶液可以在4℃条件下保存7天。用超纯水配制浓度为12.0g/L磷酸二氢钠和8.77g/L氯化钠的酸性溶液，该酸性溶液可以在4℃条件下保存7天。用酸性溶液滴定碱性溶液至pH值为7.4，该缓冲液可以在4℃保存7天。实验当天测试缓冲液pH值，如果超出7.4±0.1范围，则调节其pH值。
将透析膜浸泡在超纯水中60分钟以便将膜分离成两片，然后用20％乙醇浸泡20分钟，最后用透析所用缓冲液浸泡20分钟。
将冷冻的血浆迅速在室温下解冻。
将血浆在4℃、3,220g离心力下离心10分钟去除凝块，并将上清收集到新的离心管中。测定和记录血浆的pH值。
配制10mM待测物的DMSO储备液。用98μL DMSO稀释2μL储备液(10mM)得到工作液(200μM)。取3μL工作液，加入597μL人血浆，终浓度为1μM(0.5％DMSO)。充分涡匀。
在透析膜的一侧加入120μL加药血浆样品，另一侧加入等体积的透析液(磷酸盐缓冲液)。实验为双平行。封上透析板，放入孵育装置，在37℃，5％CO2，大约100rpm转速下孵育6小时。孵育结束后，揭掉封膜，在每个孔的缓冲液和血浆侧吸取50μL到新板子的不同孔中。
在磷酸盐缓冲液样品中加入50μL空白血浆，在血浆样品中加入等体积的空白磷酸盐缓冲液。加300μL室温淬灭剂(含内标乙腈(IS，500nM拉贝洛尔，100nM阿普唑仑和2μM酮洛芬))沉淀蛋白。涡旋5分钟。在4℃下，3220g离心30分钟。转移100μL上清液到新板子。根据待测物的液质响应信号和峰形，用100μL或200μL水对上清液进行稀释。混匀，利用液质进行样品分析。
通过Microsoft Excel进行所有的计算。确定待测物在缓冲液侧和血浆侧的峰面积。计算待测物和对照药的血浆蛋白结合率公式如下：游离率＝(样品峰面积与内标峰面积比值缓冲液侧/样品峰面积与内标峰面积比值血浆侧)*100％，结合率＝1-游离率，回收率＝(样品峰面积与内标峰面积比值缓冲液侧+样品峰面积与内标峰面积比值血浆侧)/(样品峰面积与内标峰面积比值初始血浆样品)*100％。样品峰面积与内标峰面积比值缓冲液侧代表化合物的游离浓度，样品峰面积与内标峰面积比值血浆侧代表化合物的游离浓度和结合浓度之和，样品峰面积与内标峰面积比值初始血浆样品代表样品开始孵育时化合物的总浓度。
试验结果：
见表6。1μM的化合物2在37℃条件下孵育6小时，平均游离率为46.63％，结合率为53.37％，回收率为88.02％。
表6化合物2的人血浆蛋白结合试验结果
实施例30：化合物2单次灌胃的组织分布试验
实验材料：
Balb/c小鼠(购自上海旻敞生物科技有限公司)共60只，雌雄各半，体重为18-25g。
实验步骤：
Balb/c小鼠单次灌胃给予化合物2，给药剂量为100mg/kg，给药体积为10mL/kg。
给药前和给药后5min、0.25、1.0、2.0、3.0、5.0、7.0和10h(每个时间点6只小鼠、雌雄各半)；在以上设定时间点经眼球后静脉丛取血0.2ml，置EDTA-K2试管中，11000rpm离心5min，分离血浆，于-70℃冰箱中冷冻；在0.25、1.0、3.0和7.0h时间点全血采集后立即解剖采集肺组织，组织用冷生理盐水冲净表面残留血液及内容物，吸干后贴好标签，-70℃保存待测。LC/MS-MS法测定血浆和肺组织中化合物2的含量，计算肺血比。
试验结果：
Balb/c小鼠单次灌胃给予化合物2后，肺组织暴露量和血浆暴露量的比值为0.62，化合物2在肺组织暴露量高。
实施例31：化合物2灌胃给药对食蟹猴心血管系统影响的安全药理试验
在食蟹猴2周重复给药毒性研究中，伴随考察了化合物2对心血管系统的影响。
实验材料：
食蟹猴32只，雌雄各半，给药时年龄2.5-5岁。
动物来源：云南英茂生物科技有限公司；广西雄森灵长类实验动物养殖开发有限公司；中科灵瑞(湛江)生物技术有限公司。
使用智能无创血压计BP-98E测量所有清醒动物的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和平均动脉压(MBP)，采用Provantis/v10.2.3.1电子数据采集系统(PV-02)。
实验步骤：32只食蟹猴(第1组和第4组5只动物/性别/组，第2组和第3组3只动物/性别/组，共4组)随机分组，通过鼻饲给药给予化合物2(40，160和600mg/kg/天)或对照制剂(98.9％溶媒制剂+1.1％MTBE，0mg/kg/天)，每天给药两次，共给药14天，给药结束后恢复14天。所有动物均被纳入本研究，以评估给药对ECG参数(包括心率、PR间期、QRS持续时间、QT间期和QTcF)及对给药前阶段、给药期和恢复期的血压的影响。
试验结果：在本试验条件下，食蟹猴鼻饲灌胃给予化合物2(40、160和600mg/kg/day)14天，每天2次，未见供试品相关的心血管系统改变；未见供试品相关的心律失常；整个试验过程中未见供试品相关的ECG参数或血压的改变。
Claims (1)
1.以下氰基化合物或药学上可接受的盐：
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311097958.2A CN117209555A (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
| CN202311114591.0A CN117209556A (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2021111682324 | 2021-09-30 | ||
| CN202111168232 | 2021-09-30 | ||
| CN202210973184 | 2022-08-15 | ||
| CN2022109731844 | 2022-08-15 | ||
| PCT/CN2022/122384 WO2023051657A1 (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
Related Child Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311114591.0A Division CN117209556A (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
| CN202311097958.2A Division CN117209555A (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116113631A CN116113631A (zh) | 2023-05-12 |
| CN116113631B true CN116113631B (zh) | 2023-09-26 |
Family
ID=85781328
Family Applications (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311114591.0A Pending CN117209556A (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
| CN202311097958.2A Pending CN117209555A (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
| CN202280005454.0A Active CN116113631B (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
Family Applications Before (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311114591.0A Pending CN117209556A (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
| CN202311097958.2A Pending CN117209555A (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20240054338A (zh) |
| CN (3) | CN117209556A (zh) |
| AU (1) | AU2022357033A1 (zh) |
| CA (1) | CA3230035A1 (zh) |
| TW (1) | TW202328145A (zh) |
| WO (1) | WO2023051657A1 (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI811812B (zh) | 2020-10-16 | 2023-08-11 | 美商基利科學股份有限公司 | 磷脂化合物及其用途 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2020198062A1 (en) * | 2019-03-22 | 2020-10-01 | Achillion Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical compounds for the treatment of complement mediated disorders |
| US11124497B1 (en) * | 2020-04-17 | 2021-09-21 | Pardes Biosciences, Inc. | Inhibitors of cysteine proteases and methods of use thereof |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW201817714A (zh) * | 2016-08-30 | 2018-05-16 | 英商葛蘭素史密斯克藍智慧財產權有限公司 | 抑制3c及3cl蛋白酶之化合物及其使用方法 |
| CN109134419A (zh) * | 2017-06-15 | 2019-01-04 | 国科维思（北京）药物研究有限公司 | 一种2,2-二甲基-1,3-二氧戊环类衍生物、其制备方法和用途 |
| CN113181339B (zh) * | 2020-01-29 | 2022-02-22 | 中国科学院上海药物研究所 | 一种醛基类化合物的药物用途 |
| IL295612A (en) * | 2020-02-14 | 2022-10-01 | Nlc Pharma Ltd | Preparations for the treatment of corona |
| US11123329B1 (en) * | 2020-03-23 | 2021-09-21 | Vicore Pharma Ab | Use of angiotensin II type 2 receptor agonist |
| CN112778310A (zh) * | 2020-04-20 | 2021-05-11 | 中国科学院上海药物研究所 | 核苷类似物或含有核苷类似物的组合制剂在抗病毒中的应用 |
-
2022
- 2022-09-29 TW TW111137006A patent/TW202328145A/zh unknown
- 2022-09-29 WO PCT/CN2022/122384 patent/WO2023051657A1/zh active Application Filing
- 2022-09-29 CN CN202311114591.0A patent/CN117209556A/zh active Pending
- 2022-09-29 KR KR1020247010718A patent/KR20240054338A/ko unknown
- 2022-09-29 CN CN202311097958.2A patent/CN117209555A/zh active Pending
- 2022-09-29 CA CA3230035A patent/CA3230035A1/en active Pending
- 2022-09-29 AU AU2022357033A patent/AU2022357033A1/en active Pending
- 2022-09-29 CN CN202280005454.0A patent/CN116113631B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2020198062A1 (en) * | 2019-03-22 | 2020-10-01 | Achillion Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical compounds for the treatment of complement mediated disorders |
| CN113795249A (zh) * | 2019-03-22 | 2021-12-14 | 艾其林医药公司 | 用于治疗补体介导的病症的药物化合物 |
| US11124497B1 (en) * | 2020-04-17 | 2021-09-21 | Pardes Biosciences, Inc. | Inhibitors of cysteine proteases and methods of use thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN117209556A (zh) | 2023-12-12 |
| CA3230035A1 (en) | 2023-04-06 |
| AU2022357033A1 (en) | 2024-03-21 |
| KR20240054338A (ko) | 2024-04-25 |
| TW202328145A (zh) | 2023-07-16 |
| CN116113631A (zh) | 2023-05-12 |
| WO2023051657A1 (zh) | 2023-04-06 |
| CN117209555A (zh) | 2023-12-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113181339B (zh) | 一种醛基类化合物的药物用途 | |
| CN110317211A (zh) | 一种取代的多环性吡啶酮化合物及其前药 | |
| CN113289018B (zh) | 金诺芬等老药及其组合物在抗单正链rna病毒中的应用 | |
| CN113620929B (zh) | 醛基类化合物及其制备方法、药物组合物和用途 | |
| US20060014821A1 (en) | Inhibitors of SARS 3C like protease | |
| CN116113631B (zh) | 一类氰基化合物、其制备方法及用途 | |
| WO2014168522A1 (ru) | Производные глутаримидов, их применение, фармацевтическая композиция на их основе, способы их получения | |
| WO2024037520A1 (zh) | 一种酰胺类化合物及其制备方法、药物组合物和用途 | |
| WO2021205290A1 (en) | Compounds and method of treating covid-19 | |
| KR20220134772A (ko) | 케토아미드계 화합물의 약물 용도 | |
| BRPI0713488A2 (pt) | derivados de 4-amino-3arilamino-6arilpirazolo[3,4-d]pirimidina, processos para a sua preparação e seu uso como substáncias ativas antivirais | |
| KR101054464B1 (ko) | 3,5-디아릴-4,5-디히드로 피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 피코르나바이러스 및 코로나바이러스에 의해 유발되는 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| WO2021164689A1 (zh) | 奈非那韦在制备防治新冠肺炎药物中的应用 | |
| TW202304888A (zh) | 醚連接之抗病毒化合物 | |
| WO2023185763A1 (zh) | 一种拟肽类化合物及其制备方法、药物组合物和用途 | |
| CN114699419A (zh) | PLpro蛋白抑制剂在治疗或预防新型冠状病毒感染的药物中的应用 | |
| CN113288907A (zh) | 环烯醚萜化合物在制备抗冠状病毒药物中的应用 | |
| TWI682931B (zh) | 黃嘌呤衍生物、其藥物組成物、其製劑以及其用途 | |
| CN114159445B (zh) | 筛选抑制新型冠状病毒感染的小分子药物的方法及其应用 | |
| CN105777829B (zh) | 一种含有类核苷结构的前药、其制备方法、药物组合物及其用途 | |
| CN116019805B (zh) | 汉黄芩素在抗猪流行性腹泻病毒中的应用 | |
| CN115108970B (zh) | 二酰胺类衍生物及其制药用途 | |
| CN113679701B (zh) | 邻苯三酚及其衍生物作为共价配体反应弹头的用途 | |
| CN108245515A (zh) | 多取代异喹啉衍生物的合成及其应用 | |
| RU2798107C2 (ru) | Производные 2,6-диметил-n-((пиридин-4-ил)метил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина и 2,5-диметил-n-[(пиридин-4-ил)метил]пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-амина для лечения вирусных инфекций |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20230814 Address after: 201203 555 Zhangjiang Road, Zhangjiang, Pudong New Area, Shanghai Applicant after: SHANGHAI INSTITUTE OF MATERIA MEDICA, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES Applicant after: Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of Sciences Applicant after: Hainan Simcere Pharmaceutical Co.,Ltd. Address before: 201203 555 Zhangjiang Road, Zhangjiang, Pudong New Area, Shanghai Applicant before: SHANGHAI INSTITUTE OF MATERIA MEDICA, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES Applicant before: Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of Sciences Applicant before: SIMCERE PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 40091978 Country of ref document: HK |