CN116047062A - 一种多联检量子点定量检测卡及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本申请提供了一种多联检量子点定量检测卡及其制备方法，属于生物检测领域，包括多联排卡壳和检测条；多联排卡壳内设置有多个反应槽，反应槽用于放置检测条；多联排卡壳还包括多个加样孔和多个观察窗，加样孔和所述观察窗和所述反应槽一一对应；检测条包括结合垫，结合垫包被量子点标记的抗体；其中，量子点标记的抗体作为显色物质。本申请提供了一种多联检量子点定量检测卡，同时采用量子点标记定量检测，硝酸纤维素膜上多条检测线，以及多联排卡壳的形式，同时解决了定量和多联检测问题，提高了检测效率及检测准确性；进一步地，实现了快速诊断因吸入性及食入性过敏原对人体造成的各种变态反应性疾病的目的。

Description

一种多联检量子点定量检测卡及其制备方法
技术领域
本申请涉及生物检测领域，特别是涉及一种多联检量子点定量检测卡及其制备方法。
背景技术
目前过敏性疾病的患病率越来越高，我国已有3-4亿的过敏性疾病患者，且还在逐年增加。过敏性疾病的诊断主要包括体内和体外过敏原检测。体外检测因其安全性高，制剂易得，不受患者用药的影响，可同时检测多种过敏原等优点越来越受到重视，特别是对儿童患者。过敏原特异性IgE(sIgE)抗体检测对于反映病情、协助诊断、预测疾病的发生和预后等具有重要作用，被纳入多项临床疾病的诊疗指南。IgE检测结果可以分为定量和定性两种，定性结果只显示阴性或阳性，如免疫印迹法等；全定量过敏原检测可以检测血清中IgE抗体具体含量，更具直观化的数值结果，能够反映与疾病的相关性，更有效地预测疾病的发生和预后，对于诊断过敏性疾病更具有临床意义，且定量检测具有较佳的精密度、重复性，检验结果更可靠。
现有的过敏原特异性定量检测方法，例如，酶联免疫吸附剂测定等方法，检测时间长，操作复杂，需要大型设备辅助检测。因此，荧光免疫分析技术这种荧光物质标记抗体或者抗原分子，通过与检测样本的特异性结合后检测荧光信号的强度变化，实现对检测样本定量检测的方法更适合对过敏原特异性IgE抗体含量的检测。量子点(quantum dot，简称QDS)作为一种新型荧光纳米晶，具有荧光效率高、耐光漂白、荧光寿命长、发射光谱窄且对称、单元激发多元发射、可多指标同时检测等特点；量子点微球标记物中的量子点微球将量子点包裹在微球中，可实现量子点的荧光信号放大，包覆层既可稳定量子点，提高微球的生物相容性和胶体稳定性，又可在微球表面修饰多种功能团，实现微球表面与多种标记物的结合，量子点的上述特性为制备免疫荧光探针，从而实现荧光免疫分析技术对检测样本中过敏原特异性IgE抗体的定量检测提供了很好的选择。
目前市场上的过敏原免疫层析定量检测产品难以同时进行多联检测，且多联检测项目检测时严重干扰等问题，因此，亟需一种保证同时多联检测的过敏原免疫层析定量检测产品。
发明内容
本申请提供一种多联检量子点定量检测卡及其制备方法，以解决目前市场上的过敏原免疫层析定量检测产品难以同时进行多联检测，且多联检测项目检测时严重干扰的问题。
本申请实施例第一方面提供一种多联检量子点定量检测卡，所述检测卡包括：
多联排卡壳和检测条；
所述多联排卡壳内设置有多个反应槽，所述反应槽用于放置检测条；
所述多联排卡壳还包括多个加样孔和多个观察窗，所述加样孔和所述观察窗和所述反应槽一一对应；
所述检测条包括结合垫，所述结合垫包被量子点标记的抗体；
其中，所述量子点标记的抗体作为显色物质。
可选地，所述检测条还包括样品垫、硝酸纤维素膜、吸水纸和底板；
其中，所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸依次均匀粘贴于底板上；
其中，所述硝酸纤维素膜上包被多条检测线和一条质控线；
其中，所述多条检测线和一条质控线均匀间隔固定于硝酸纤维素膜上。
可选地，所述多条检测线包被不同过敏原抗原，质控线包被羊抗鸡IgY抗体。
可选地，所述过敏原抗原为猫皮屑、艾蒿、白桦树、梯牧草、蟑螂、狗皮屑、车前草、豚草、户尘螨、交链孢霉(吸入性过敏原)，花生、牛奶、鳕鱼、扇贝、鸡蛋白、虾、蟹、大豆、小麦、杏仁(食入性过敏原)中的至少任意一种。
可选地，所述结合垫包被的量子点标记的抗体为鼠抗人IgE抗体和鸡IgY抗体。
本申请实施例第二方面提供一种多联检量子点定量检测卡的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
制备包含多条检测线与质控线的包被硝酸纤维素膜；
制备包被两种量子点标记抗体的结合垫，所述两种量子点标记抗体包括：量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体；
对所述包被硝酸纤维素膜和所述包被两种量子点标记抗体的结合垫进行组装，得到多联检量子点定量检测卡。
可选地，所述制备包含多条检测线与质控线的包被硝酸纤维素膜，包括：
将硝酸纤维素膜固定粘贴于底板中间；
将稀释到所需包被浓度的过敏原抗原和抗体固定到硝酸纤维素膜上，干燥，制得所述包被硝酸纤维素膜。
可选地，所述制备包被两种量子点标记抗体的结合垫，包括：
获取量子点溶液；
制备量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体；
将量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体按比例混合后固定到结合垫上，干燥，制得所述包被两种量子点标记抗体的结合垫。
可选地，对所述包被硝酸纤维素膜和所述包被两种量子点标记抗体的结合垫进行组装，包括：
对所述包被硝酸纤维素膜、所述包被两种量子点标记抗体的结合垫和样品垫、吸水纸、底板进行组装，得到检测条；
将所述检测条固定放置于多联排卡壳中的放置槽内，得到多联检量子点定量检测卡。
可选地，对所述包被硝酸纤维素膜、所述包被两种量子点标记抗体的结合垫和样品垫、吸水纸、底板进行组装，得到检测条，包括：
在所述包被硝酸纤维素膜靠近质控线的边缘固定粘贴吸水纸，包被硝酸纤维素膜靠近检测线的边缘固定粘贴所述包被两种量子点标记抗体的结合垫；
在所述包被两种量子点标记抗体的结合垫远离检测线的边缘固定粘贴样品垫；
将固定粘贴包被硝酸纤维素膜、吸水纸、包被两种量子点标记抗体的结合垫和样品垫的底板裁切为3mm，得到所述检测条。
所述多联检量子点定量检测卡的检测原理：检测样本中的IgE抗体和量子点标记的鼠抗人IgE抗体(显色物质)结合后沿检测条向检测线及控制线移动，在检测线上与包被的不同的过敏原抗原结合形成“过敏原抗原-sIgE-鼠抗人IgE量子点”的复合物。用激发光源激发量子点，会出现荧光信号。sIgE的浓度越高，检测线上的量子点含量约高，激发的荧光信号值约强。通过检查信号值的强度，可以推算出检测样本中IgE抗体的含量，实现定量检查的目的。当量子点标记的鸡IgY抗体(显色物质)移动到质控线处会形成“羊抗鸡IgY-鸡IgY量子点”复合物而出现信号值，如质控线无荧光信号值的出现，则表明反应系统失效。检测线的荧光信号强度和样本中的特异性IgE抗体含量成正比，根据荧光信号强度对照标准曲线，即可得出样本中特异性IgE的含量。
本申请具有以下优点：
1)本申请同时采用量子点标记定量检测，硝酸纤维素膜上多条检测线，以及多联排卡壳的形式，同时解决了定量检测和多联检测问题，提高了检测效率及检测准确性；
2)本申请从技术上实现了快速诊断因吸入性及食入性过敏原对人体造成的各种变态反应性疾病的目的；
3)本申请提高了检测条的层析反应效果，同时降低多条检测条同时测试的干扰，且操作方便，灵敏度高，定量检测结果可以给医生的临床诊断提供更准确和更有效的帮助；
4)本申请在量子点标记抗体过程中采用的封闭液，有利于解决检测项目间的交叉及检测样本中的非特异干扰。
附图说明
图1是本申请一实施例提供的一种多联检量子点定量检测卡的结构示意图；
图2是本申请一实施例提供的一种多联检量子点定量检测卡的检测条结构示意图；
图3是本申请一实施例血清样本中的过敏原特异性IgE抗体含量的相关性检测结果图；
附图标记：101多联排卡壳；102观察窗；103加样孔；201底板；202样品垫；203结合垫；204硝酸纤维素膜；205质控线；206检测线；207吸水纸。
具体实施方式
以下通过具体的实施例进一步说明本申请的技术方案，具体实施例不代表对本申请保护范围的限制。其他人根据本申请思路所做的一些非本质的修改和调整仍属于本申请的保护范围。
为使本申请的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施方式对本申请作进一步详细的说明。
实施例一
如图1-2所示，为本实施例的一种多联检量子点定量检测卡100和检测条200。
如图1所示，为本实施例的一种多联检量子点定量检测卡100。
多联检量子点定量检测卡100包括多联排卡壳101和多条检测条200。
多联排卡壳101内设置有多个放置槽(图中未示出)，反应槽用于放置检测条200。
同时，多联排卡壳101还包括多个加样孔103和多个观察窗102，加样孔用于加入检测样本等，观察窗用于观察检测条的具体情况。
优选地，加样孔104周围还设置有缓存区(图中未标记)，由于检测样本和样本稀释液的流动需要一定的时间，缓存区可用于缓存加入加样孔后的检测样本等。
其中，加样孔103、观察窗102和反应槽一一对应，以便于检测条的设置。
优选地，多联排卡壳可对应设置三个放置槽、三个加样孔和三个观察窗。
优选地，所述多联检量子点定量检测卡密封于有干燥剂的铝箔袋中保存。
如图2所示，为本实施例的一种多联检量子点定量检测卡的检测条200。
检测条200包括结合垫203，结合垫203包被量子点标记的抗体。
其中，量子点标记的抗体作为显色物质。
同时，检测条200还包括样品垫202、硝酸纤维素膜204、吸水纸207和底板201；
其中，样品垫202、结合垫203、硝酸纤维素膜204和吸水纸207依次均匀粘贴于底板201上。
优选地，样品垫202为聚酯纤维膜或者玻璃纤维素膜。
优选地，结合垫203为玻璃纤维素膜。
优选地，底板201为PVC板。
优选地，硝酸纤维素膜204上包被多条检测线206和一条质控线205。在使用时，检测线用于显示多联检量子点定量检测卡的检测结果，质控线用于显示多联检量子点定量检测卡的检测结果是否有效。
其中，样品垫的位置与加样孔的位置相对应，以便于检测样本可直接流向样品垫，减少检测样本的损失；硝酸纤维素膜的位置与观察窗的位置相对应，以便于检测检测线和质控线的荧光信号。
其中，多条检测线206和一条质控线205均匀间隔固定于硝酸纤维素膜上。在本申请实施例中，检测线一共设置有三条，且三条检测线和一条质控线沿着检测条的长度方向均匀间隔3mm设置，质控线设置在靠近吸水纸的位置。
其中，三条检测线包被不同过敏原抗原，一条质控线包被羊抗鸡IgY抗体。检测线包被的过敏原抗原可与量子点标记的抗体(显色物质)结合形成复合物，该复合物经激光照射可检测出对应的荧光信号值，将该荧光信号值代入标准曲线中推算出检测样本样本中IgE抗体的含量；质控线包被的羊抗鸡IgY抗体可与量子点标记的抗体结合形成复合物，可通过检测该复合物是否具有信号值来判断多联检量子点定量检测卡的检测结果是否有效。
优选地，该标准曲线是通过将总IgE抗体的国际标准品配置成以下浓度：0.1IU/mL、0.3IU/mL、1.2IU/mL、4.8IU/mL、19.2IU/mL、38.3IU/mL、76.6IU/mL、100IU/mL，对上述浓度的总IgE抗体进行检测得到每个浓度对应的信号值：0.0016、0.0049、0.0199、0.0754、0.2761、0.5004、0.8845、1.1053，将上述数据代入经四参数拟合得标准曲线，该标准曲线公式为y＝(A-D)/[1+(x/C)^B]+D，A＝9.67167，B＝-0.89759，C＝980.14709，D＝-0.00171，R2＝0.99995。
优选地，该总IgE抗体的国际标准品为人血清免疫球蛋白E(IgE)国际标准品，NIBSC代码：11/234。
优选地，每条检测线包被一种过敏原抗原，且每条检测线包被的过敏原抗原不同。
优选地，多种过敏原抗原为猫皮屑、艾蒿、白桦树、梯牧草、蟑螂、狗皮屑、车前草、豚草、户尘螨、交链孢霉(吸入性过敏原)，花生、牛奶、鳕鱼、扇贝、鸡蛋白、虾、蟹、大豆、小麦、杏仁(食入性过敏原)中的任意一种。
示例性地，多条检测线包括第一检测线、第二检测线和第三检测线，其中，第一检测线上包被有花生的粗提物抗原，第二检测线上包被有蟑螂的粗提物抗原，第三检测线上包被有大豆的粗提物抗原。本领域技术人员可以根据需求进行设置，本申请实施例不过多赘述。
优选地，结合垫包被的量子点标记的抗体为鼠抗人IgE抗体和鸡IgY抗体。
该多联检量子点定量检测卡用于同时检测多种不同吸入性和食入性过敏原的检测结果如表1所示，结果显示，该多联检量子点定量检测卡可同时检测出检测样本中不同过敏原的IgE抗体的含量，且经过十次重复检测，十次检测的检测结果精密度较高，较高的检测精密度保证了该多联检量子点定量检测卡检测结果的准确性。因此，本申请同时采用量子点标记定量检测，硝酸纤维素膜上设置多条检测线，以及多联排卡壳的形式，同时解决了定量检测和多联检测的问题，提高了该多联检量子点定量检测卡的检测效率及检测准确性。
表1血清样本中的过敏原特异性IgE抗体含量检测结果(IU/mL)
Figure BDA0004018526720000081
因法迪亚检测试剂盒的结果为过敏原特异性IgE抗体检测中的金标准，故使用法迪亚检测试剂盒与多联检量子点定量检测试剂卡，同时检测包含本申请中所述吸入性过敏原和食入性过敏原中至少任意一种的特异性过敏原IgE抗体的样本。相关检测结果如表2和图3所示(A检测结果为法迪亚检测试剂盒的检测结果，B检测结果为多联检量子点定量检测卡的检测结果)。根据图3可得到法迪亚检测试剂盒和多联检量子点定量检测试剂卡的检测结果相关性公式为y＝0.9244x+0.2388，R2＝0.957。图3示出本申请所做出的检测结果与行业公认金标准的法迪亚检测试剂盒的检测结果的相关性良好。可见，本申请中的多联检量子点定量检测卡检测结果准确性较好。
表2血清样本中的过敏原特异性IgE抗体含量的相关性检测结果(IU/mL)
A检测结果 B检测结果 A检测结果 B检测结果
结果1 0.33 0.23 结果21 6.62 8.22
结果2 1.23 1.01 结果22 51.2 40.6
结果3 0.35 0.52 结果23 5.24 5.29
结果4 1.68 1.45 结果24 1.52 1.77
结果5 8.57 7.21 结果25 14.6 10.5
结果6 77.5 75.4 结果26 6.24 6.91
结果7 4.22 4.17 结果27 3.32 1.25
结果8 1.57 1.02 结果28 62.8 49.5
结果9 2.93 3.35 结果29 3.45 2.93
结果10 9.1 11.4 结果30 21.2 18.9
结果11 5.52 7.89 结果31 0.51 0.44
结果12 37.6 29.9 结果32 0.45 0.27
结果13 2.47 2.98 结果33 0.38 0.31
结果14 2.88 3.41 结果34 1.92 1.67
结果15 84.6 88.9 结果35 8.11 5.12
结果16 12.4 16.8 结果36 64.2 48.7
结果17 22.5 33.4 结果37 0.78 1.01
结果18 21.9 18.3 结果38 0.99 0.83
结果19 1.42 1.28 结果39 15.7 10.3
结果20 2.56 2.15 结果40 40.7 49.3
实施例二
本实施例公开一种多联检量子点定量检测卡的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
S1，制备包含多条检测线与质控线的包被硝酸纤维素膜。
具体的，制备包含多条检测线与质控线的包被硝酸纤维素膜，包括：
将硝酸纤维素膜固定粘贴于底板中间；
将稀释到所需包被浓度的过敏原抗原和抗体固定到硝酸纤维素膜上，干燥，制得所述包被硝酸纤维素膜。
其中，过敏原抗原为猫皮屑、艾蒿、白桦树、梯牧草、蟑螂、狗皮屑、车前草、豚草、户尘螨、交链孢霉霉(吸入性过敏原)，花生、牛奶、鳕鱼、扇贝、鸡蛋白、虾、蟹、大豆、小麦、杏仁(食入性过敏原)中的任意一种；抗体为羊抗鸡IgY抗体。
优选地，过敏原抗原的所需包被浓度为0.5～2mg/mL。示例性地，包被的过敏原抗原的浓度可以为0.5mg/mL、1mg/mL、1.5mg/mL、2mg/mL等。本领域技术人员可以根据需求进行设置，本申请实施例不过多赘述。
优选地，所需包被羊抗鸡IgY抗体浓度为1～3mg/mL。示例性地，包被的羊抗鸡IgY抗体浓度可以为1mg/mL、1.5mg/mL、2mg/mL、2.5mg/mL、3mg/mL等。本领域技术人员可以根据需求进行设置，本申请实施例不过多赘述。
优选地，将包被过敏原抗原和抗体的硝酸纤维素膜37℃干燥过夜。
S2，制备包被两种量子点标记抗体的结合垫，所述两种量子点标记抗体包括：量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体。
具体的，制备包被两种量子点标记抗体的结合垫，包括：
获取量子点溶液；
将量子点加入至pH＝6的4-吗啉乙磺酸缓冲液，并依次加入一定质量比例的EDC(1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydro，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺)和NHS(NHS N-Hydroxysuccinimide，N-羟基琥珀酰亚胺)，旋转混合30min后进行活化处理后，离心除去上清液，将量子点固体加入pH＝6的4-吗啉乙磺酸缓冲液或pH＝8的硼酸盐缓冲液中，震荡重悬，得到量子点溶液。
优选地，加入的EDC和NHS的质量比例为1:2。
制备量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体；
将上述量子点溶液中添加鼠抗人IgE抗体或鸡IgY抗体，置于旋转混合仪上，旋转偶联2h后，添加封闭液，旋转封闭30min后除去上清液，将量子点固体用结合垫处理液重悬，得到量子点标记的鼠抗人IgE抗体或量子点标记的鸡IgY抗体。
优选地，量子点标记的鼠抗人IgE抗体或量子点标记的鸡IgY抗体的浓度为20～300μg/mL。示例性地，量子点标记的鼠抗人IgE抗体或量子点标记的鸡IgY抗体的浓度可以为20μg/mL、70μg/mL、110μg/mL、150μg/mL、180μg/mL、220μg/mL、260μg/mL、300μg/mL等。本领域技术人员可以根据需求进行设置，本申请实施例不过多赘述。
优选地，封闭液为包含1-10％的酪蛋白，1-10％的PVP-30(PolyvinylpyrrolidoneK30，聚乙烯吡咯烷酮K30)，1-10％的鼠IgG抗体，1-10％的甘氨酸中至少一种的混合溶液，封闭液有利于解决检测项目间的交叉及检测样本中的非特异干扰的问题。
其中，结合垫处理液包含糖类、大分子聚合物、表面活性剂、稀释液、蛋白、防腐剂。
优选地，糖类为海藻糖、蔗糖、葡聚糖中的至少一种。
优选地，大分子聚合物为PEG-20000(Polyethylene glycol-20000，聚乙二醇-20000)、PVP-30、PVP-10(Polyvinylpyrrolidone K10，聚乙烯吡咯烷酮K10)、PEG-8000(Polyethylene glycol-8000，聚乙二醇-8000)中的至少一种。
优选地，表面活性剂为TX-100(Triton X-100，曲拉通X-100)、TW-20(Tween-20，吐温-20)、S9(Pluracare1307，环氧丙烷-环氧乙烷-乙烯基二元胺共聚物)中的至少一种。
优选地，稀释液为PBS缓冲液(phosphate buffered saline，磷酸缓冲盐溶液)、Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane，三羟甲基氨基甲烷)缓冲液、BBS缓冲液(BorateBuffered Salin，硼酸盐缓冲液)中的至少一种。
优选地，蛋白为酪蛋白，牛血清白蛋白，脱脂牛奶中的至少一种。
优选地，防腐剂为NaN3(Sodium azide，叠氮化钠)、PC300(ProClin300，普罗林300)中的至少一种。
其中，大分子聚合物有利于提高抗体活性，表面活性剂有利于液体进行层析反应，蛋白有利于液体层析及减少样本中的非特异结合，防腐剂有利于提高结合垫的稳定性。
将量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体按比例混合后固定到结合垫上，干燥，制得包被两种量子点标记抗体的结合垫。
优选地，量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体按3:1～10:1的比例混合。示例性地，量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体的比例可以为3:1、5:1、8:1、10:1等。本领域技术人员可以根据需求进行设置，本申请实施例不过多赘述。
优选地，将包被两种量子点标记抗体的结合垫37℃干燥过夜。
S3，对所述包被硝酸纤维素膜和所述包被两种量子点标记抗体的结合垫进行组装，得到多联检量子点定量检测卡。
具体的，对包被硝酸纤维素膜和包被两种量子点标记抗体的结合垫进行组装，包括：
对所述包被硝酸纤维素膜、所述包被两种量子点标记抗体的结合垫和样品垫、吸水纸、底板进行组装，得到检测条；
其中，在所述包被硝酸纤维素膜靠近质控线的边缘固定粘贴吸水纸，包被硝酸纤维素膜靠近检测线的边缘固定粘贴所述包被两种量子点标记抗体的结合垫；在所述包被两种量子点标记抗体的结合垫远离检测线的边缘固定粘贴样品垫；将固定粘贴包被硝酸纤维素膜、吸水纸、包被两种量子点标记抗体的结合垫和样品垫的底板裁切为3mm，得到所述检测条。
将所述检测条固定放置于多联排卡壳中的放置槽内，得到多联检量子点定量检测卡。
以上对本申请所提供的一种多联检量子点定量检测卡及其制备方法，进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本申请的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本申请的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本申请的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本申请的限制。

Claims (10)

1.一种多联检量子点定量检测卡，其特征在于，所述检测卡包括：
多联排卡壳和检测条；
所述多联排卡壳内设置有多个反应槽，所述反应槽用于放置检测条；
所述多联排卡壳还包括多个加样孔和多个观察窗，所述加样孔和所述观察窗和所述反应槽一一对应；
所述检测条包括结合垫，所述结合垫包被量子点标记的抗体；
其中，所述量子点标记的抗体作为显色物质。
2.根据权利要求1所述的多联检量子点定量检测卡，其特征在于，所述检测条还包括样品垫、硝酸纤维素膜、吸水纸和底板；
所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸依次均匀粘贴于底板上；
所述硝酸纤维素膜上包被多条检测线和一条质控线，所述多条检测线和一条质控线均匀间隔固定于硝酸纤维素膜上。
3.根据权利要求2所述的多联检量子点定量检测卡，其特征在于，所述多条检测线包被不同过敏原抗原，质控线包被羊抗鸡IgY抗体。
4.根据权利要求3所述的多联检量子点定量检测卡，其特征在于，所述过敏原抗原为猫皮屑、艾蒿、白桦树、梯牧草、蟑螂、狗皮屑、车前草、豚草、户尘螨、交链孢霉(吸入性过敏原)，花生、牛奶、鳕鱼、扇贝、鸡蛋白、虾、蟹、大豆、小麦、杏仁(食入性过敏原)中的至少任意一种。
5.根据权利要求1所述的多联检量子点定量检测卡，其特征在于，所述结合垫包被的量子点标记的抗体为鼠抗人IgE抗体和鸡IgY抗体。
6.一种多联检量子点定量检测卡的制备方法，其特征在于，用于制备权利要求1-5任一项所述的多联检量子点定量检测卡，所述制备方法包括以下步骤：
制备包含多条检测线与质控线的包被硝酸纤维素膜；
制备包被两种量子点标记抗体的结合垫，所述两种量子点标记抗体包括：量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体；
对所述包被硝酸纤维素膜和所述包被两种量子点标记抗体的结合垫进行组装，得到多联检量子点定量检测卡。
7.根据权利要求6所述的多联检量子点定量检测卡的制备方法，其特征在于，所述制备包含多条检测线与质控线的包被硝酸纤维素膜，包括：
将硝酸纤维素膜固定粘贴于底板中间；
将稀释到所需包被浓度的过敏原抗原和抗体固定到硝酸纤维素膜上，干燥，制得所述包被硝酸纤维素膜。
8.根据权利要求6所述的多联检量子点定量检测卡的制备方法，其特征在于，所述制备包被两种量子点标记抗体的结合垫，包括：
获取量子点溶液；
制备量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体；
将量子点标记的鼠抗人IgE抗体和量子点标记的鸡IgY抗体按比例混合后固定到结合垫上，干燥，制得所述包被两种量子点标记抗体的结合垫。
9.根据权利要求6所述的多联检量子点定量检测卡的制备方法，其特征在于，对所述包被硝酸纤维素膜和所述包被两种量子点标记抗体的结合垫进行组装，包括：
对所述包被硝酸纤维素膜、所述包被两种量子点标记抗体的结合垫和样品垫、吸水纸、底板进行组装，得到检测条；
将所述检测条固定放置于多联排卡壳中的放置槽内，得到多联检量子点定量检测卡。
10.根据权利要求9所述的多联检量子点定量检测卡的制备方法，其特征在于，对所述包被硝酸纤维素膜、所述包被两种量子点标记抗体的结合垫和样品垫、吸水纸、底板进行组装，得到检测条，包括：
在所述包被硝酸纤维素膜靠近质控线的边缘固定粘贴吸水纸，包被硝酸纤维素膜靠近检测线的边缘固定粘贴所述包被两种量子点标记抗体的结合垫；
在所述包被两种量子点标记抗体的结合垫远离检测线的边缘固定粘贴样品垫；
将固定粘贴包被硝酸纤维素膜、吸水纸、包被两种量子点标记抗体的结合垫和样品垫的底板裁切为3mm，得到所述检测条。
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