CN115968783A - 一种彩叶大戟的快速繁殖方法 - Google Patents
一种彩叶大戟的快速繁殖方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种彩叶大戟的快速繁殖方法。所述快速繁殖方法为：取彩叶大戟幼嫩茎段、茎尖，经处理后得外植体；然后依次进行启动培养、继代培养、生根培养和移栽培养。在所述快速繁殖方法中，最佳效果的启动培养基为MS培养基附加6‑卞基嘌呤1.0mg/L、萘乙酸0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L；最佳效果的继代培养基为MS培养基附加6‑卞基嘌呤1.0mg/L、吲哚丁酸0.1mg/L、蔗30g/L、琼脂7g/L，繁殖系数可达5.2；最佳效果的生根培养基为1/2MS培养基附加吲哚丁酸0.1mg/L、ABT生根粉1mg/L、蔗糖20g/L和琼脂7g/L，生根率可达95％以上，移栽成活率95％以上。
Description
技术领域
本发明属于彩叶大戟组织培养领域，具体涉及一种彩叶大戟的快速繁殖方法。
背景技术
彩叶大戟为多年生草本植物，高30～80厘米，全株含有白色乳汁。根细长，圆锥状。茎直立，上部分枝，表面被白色短柔毛。单叶互生；几乎无柄；长圆形或披针形，长3～6厘米，宽6～12毫米，全缘，下面稍被白粉。杯状聚伞花序，通常5枝，排列成复伞形；基部有叶状苞片5；每枝再作2至数回分枝，分枝处着生近圆形的苞叶4或2，对生；雌、雄花均无花被，花序基部苞叶近肾形；萼状总苞内有雄花多数，每花仅有雄蕊1，花丝细柱形；花序中央有雌花1，仅有雌蕊1，子房圆形，花柱3，顶端分叉，伸出总苞外并常下垂。蒴果三棱状球形，表面具疣状凸起物。种子卵圆形，暗褐色或微光亮，腹面具浅色条纹；种阜近盾状，无柄。花期5～8月，果期6～9月。
大戟植物具有较高的综合价值，如药用和观赏价值，这使得在市场上种苗的价格可达60～140元不等。具体的：
在药用价值方面，其来源于植株根部，在春季未发芽前，或秋季茎叶枯萎时采挖，除去残茎及须根，洗净晒干即得。其味苦、辛，性寒，有小毒；入肺、脾、肾经；有泻水沈、利二便之功效。
在观赏价值方面，其全年都有相当抢眼的彩叶效果，叶子发出金灿灿的光芒，秋季转凉后会渐变出橙红色斑纹；株型紧凑，茎秆直立，密集丛生。并且彩叶大戟在欧美是十分流行的花园植物。国外有些种已经被引种作为栽培的首选，且已选育出许多优良品种，进入商品化生产。随着时代的进步及经济的发展，我国的绿植产业也在不断进步发展，以满足市场的需求，而彩叶大戟是优质盆栽和花园组合的优质首选，有广阔的发展空间。
但目前彩叶大戟多采用种子播种、扦插繁殖。采用种子繁殖时，其繁殖周期长，后代性状分离大，不能保持母本优良性状；采用扦插繁育时，切口分泌乳汁，成活率较低，严重影响具有优良性状植株的繁育系数，且其扦插后期生长势较弱。即大戟栽培繁育技术的不成熟成为大戟广泛应用的障碍，在一定程度上限制了大戟的栽植范围的扩大。
故基于此，提出本发明技术方案。
发明内容
为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种彩叶大戟的快速繁殖方法。所述彩叶大戟的快速繁殖方法，在启动培养阶段约20d可长出侧芽，在继代培养阶段约30d即可完成且繁殖系数可达5.2，在生根培养阶段约13d即可完成且生根率可达95％，根条数可达6.5，最后在移植栽培阶段成活率达95％以上。即本发明繁殖周期短同时成活率高，能够满足现阶段的市场需求。
本发明的方案是提供一种彩叶大戟的快速繁殖方法，包括如下步骤：
(1)准备外植体：取彩叶大戟幼嫩茎段、茎尖，依次冲洗、消毒、剪断，即得到外植体；
(2)启动培养：将所述外植体接入启动培养基中进行培养，待侧芽萌发后转接进行继代培养；其中，所述启动培养基以MS培养基为基本培养基，并且所述启动培养基中还含有6-卞基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂；
(3)继代培养：将萌发后的侧芽切下转入继代培养基进行培养，得到单株体；其中，所述继代培养基以MS培养基为基本培养基，并且所述继代培养基中还含有6-卞基嘌呤、吲哚丁酸、蔗糖和琼脂；
(4)生根培养：将所述单株体转入生根培养基进行培养，得到生根苗；其中，所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，并且所述生根培养基还含有ABT生根粉1号和吲哚丁酸，或吲哚丁酸和吲哚乙酸，或吲哚丁酸和萘乙酸；
(5)移栽培养：将所述生根苗进行驯化、炼苗和移栽，管理生长30～40d即可。
优选地，步骤(1)中，取彩叶大戟幼嫩茎段、茎尖并剪去叶片，放入容器中加洗衣粉并以水冲洗30～35min，然后在无菌条件下以75％酒精消毒30s，再用0.1％的氯化汞溶液浸泡2～3min，最后用无菌水冲洗4～5次，并剪成0.5～1.0cm的带腋芽茎尖和茎段，以无菌滤纸吸干表面的水分，即得到外植体。
优选地，步骤(2)中，所述启动培养基中6-卞基嘌呤的浓度为1.0～3.0mg/L、萘乙酸的浓度为0.1～0.5mg/L、蔗糖的浓度为30g/L、琼脂的浓度为7.0g/L。
优选地，步骤(2)中，所述外植体接入启动培养基中培养20～22d，待侧芽萌发后长至2～3cm时转接进行继代培养。
优选地，步骤(3)中，所述继代培养基中6-卞基嘌呤的浓度为1.0～2.0mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.1～0.2mg/L、蔗糖的浓度为30g/L和琼脂的浓度为7.0g/L。
优选地，所述继代培养25～30d。
优选地，步骤(5)中，将所述生根苗移至温室，进行驯化3～4d，再炼苗2～3d后移栽。
优选地，所述移栽包括如下步骤：
(S1)将移栽基质依次进行暴晒、混合、搅拌和消毒，得到消毒基质；
(S2)对所述生根苗的根部进行消毒，然后蘸取生根液，并移栽至消毒基质中；
(S3)移栽初期控制温度为18～28℃、相对湿度为70～80％、折光率为50～60％；
(S4)每隔一周施加一次10～20ppm氨基酸水溶肥GGR溶液，管理生长30～40d即可。
优选地，步骤(S1)中，所述移栽基质包括如下重量份的原料：泥炭7份、珍珠岩2份和河沙1份。
优选地，步骤(S1)中，采用稀释800倍的百菌清溶液进行基质消毒。
本发明的有益效果为：
本发明所述彩叶大戟的快速繁殖方法，在启动培养阶段约20d可长出侧芽，在继代培养阶段约30d即可完成且繁殖系数可达5.2，在生根培养阶段约13d即可完成且生根率可达95％，根条数可达6.5，最后在移植栽培阶段成活率达95％以上。即本发明繁殖周期短同时成活率高，能够满足现阶段的市场需求。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是启动培养阶段，各组别外植体诱导芽的生长情况；其中：
图1a是a组外植体诱导芽生长情况；
图1b是b组外植体诱导芽生长情况；
图1c是c组外植体诱导芽生长情况；
图1d是d组外植体诱导芽生长情况；
图1e是e组外植体诱导芽生长情况。
图2是启动培养阶段，对比组外植体诱导芽的生长情况；其中：
图2a1是a1组外植体诱导芽生长情况；
图2a2是a2组外植体诱导芽生长情况。
图3是继代培养阶段，各组别继代增殖的生长情况；其中：
图3a是a组继代增殖的生长情况；
图3b是b组继代增殖的生长情况；
图3c是c组继代增殖的生长情况；
图3d是d组继代增殖的生长情况；
图3e是e组继代增殖的生长情况；
图3f是f组继代增殖的生长情况。
图4是继代培养阶段，对比组继代增殖的生长情况；其中：
图4a1是a1组继代增殖的生长情况；
图4a2是a2组继代增殖的生长情况；
图5是生根培养阶段，各组别的生根情况；其中：
图5a是a组的生根情况；
图5b是b组的生根情况；
图5c是c组的生根情况。
图6是移栽成功后的生长苗。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
实施例
本实施例提供一种彩叶大戟的快速繁殖方法，包括如下步骤：
(1)准备外植体：取大戟幼嫩茎段、茎尖，剪去叶片，放入烧杯中，加少量洗衣粉，在自来水下冲洗30min，然后在无菌室先用75％酒精消毒30s，再用0.1％的氯化汞溶液浸泡2～3min，用无菌水冲洗4～5次，剪成0.5～1.0cm的带腋芽茎尖和茎段，并用无菌滤纸吸干表面的水分，即得到外植体。所述外植体在后续接入培养基过程中，保持培养温度为23～27℃，每日光照10～12h，光照强1000～1500Lx，培养基pH为6.8。
(2)启动培养：以MS为基本培养基并附加6-卞基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂作为启动培养基，接入所述外植体进行培养，培养20d后可长出侧芽，待侧芽萌发长至2～3cm时转接进行继代培养。
具体的，共设计5组启动培养基(每组重复接种外植体10个，共进行3次；下同)，配方如表1所示。
表1五种启动培养基配方
其中，5组启动培养基均有不同程度的侧芽萌发(如图1所示)，且由表1可知，第一组(a组)启动培养基诱导侧芽平均为4.51个，为最佳培养基。由此也表明，在启动培养阶段，6-卞基嘌呤和萘乙酸的用量对于侧芽平均数有决定性影响，用量过多或过少均不能使侧芽达到最多数量。
为了进一步说明激素种类对启动培养的影响，在a组配方的基础上设置a1和a2组进行对比，结果如表2所示。
表2启动培养基配方(对比组)
由表2可看出，当不添加6-卞基嘌呤时，侧芽平均数仅为1.10个；当不添加萘乙酸时，侧芽平均数仅为1.50个，且植株生长瘦弱。a1和a2组的生长情况如图2所示。
(3)继代培养：根据启动培养基的长势情况，以启动培养a组为基础，继续设计6组继代培养基，配方如表3所示。
表3六种继代培养基配方
在以上6种培养基上，将单芽切下转入其中，培养25～30d，每组的继代增殖培养苗如图3所示，经观察得诱导效果最好的为第一组(a组)继代培养基，在继代增殖中繁殖系数为5.20。
需要强调的是，在继代培养阶段，培养基的成分尤为重要，为进行说明，在继代培养a组的基础上设置对比组a1、a2组，如表4所示。
表4继代培养基配方(对比组)
由表4可看出，当不添加6-卞基嘌呤时，繁殖系数仅为1.20；当不添加吲哚乙酸时，繁殖系数仅为1.51。a1和a2组的生长情况如图4所示。结果显示植株生长不良，个别植株有死亡现象，也无丛芽分化。
(4)生根培养：根据继代培养基的长势情况，以继代培养a组为基础，继续设计3组生根培养基，配方如表5所示。
表5三种生根培养基配方
将生长高约2～3cm的单株转入生根培养基中，培养13d后，效果最好的生根培养基为第一组(a组)，生根率为95％，而且萌发根系早，生根平均数为6.5条，具体统计结果如表6所示，每组的生根状态如图5所示。
表6不同组别对彩叶大戟生根的影响
| 组别 | 生根率(％) | 平均根长(cm) | 根条数(条) |
| a组 | 95 | 1.21 | 6.5 |
| b组 | 76 | 0.65 | 4.2 |
| c组 | 80 | 0.91 | 3.9 |
(5)移栽培养：将生根苗连同培养瓶一起移至温室，进行驯化3～4d，使小苗健壮，打开瓶盖，再炼苗2～3d，然后进行移栽。小苗移栽基质(泥炭、珍珠岩、河沙的重量比为7:2:1)进行暴晒、混合、搅拌，搅拌过程中加入800倍的百菌清溶液进行基质消毒。移栽时用百菌清消毒苗子根部，再用ABT生根粉1号200ppm的溶液进行速蘸处理。移栽初期，温度控制在18～28℃，忌夏季移栽，相对湿度控制在70～80％，遮光率50～60％。移栽一周后，逐渐降低空气湿度，增加光照强度。每隔1周浇一次10～20ppm氨基酸水溶肥GGR溶液。管理生长一个月左右，如图6所示。
经筛选后，在彩叶大戟的快速繁殖方法中，最佳效果的启动培养基为MS培养基附加6-卞基嘌呤1.0mg/L、萘乙酸0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L；最佳效果的继代培养基为MS培养基附加6-卞基嘌呤1.0mg/L、吲哚丁酸0.1mg/L、蔗30g/L、琼脂7g/L，繁殖系数可达5.2；最佳效果的生根培养基为1/2MS培养基附加吲哚丁酸0.1mg/L、ABT生根粉1mg/L、蔗糖20g/L和琼脂7g/L，生根率可达95％以上，移栽成活率95％以上。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。
Claims (10)
1.一种彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，所述快速繁殖方法包括如下步骤：
(1)准备外植体：取彩叶大戟幼嫩茎段、茎尖，依次冲洗、消毒、剪断，即得到外植体；
(2)启动培养：将所述外植体接入启动培养基中进行培养，待侧芽萌发后转接进行继代培养；其中，所述启动培养基以MS培养基为基本培养基，并且所述启动培养基中还含有6-卞基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂；
(3)继代培养：将萌发后的侧芽切下转入继代培养基进行培养，得到单株体；其中，所述继代培养基以MS培养基为基本培养基，并且所述继代培养基中还含有6-卞基嘌呤、吲哚丁酸、蔗糖和琼脂；
(4)生根培养：将所述单株体转入生根培养基进行培养，得到生根苗；其中，所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，并且所述生根培养基还含有ABT生根粉1号和吲哚丁酸，或吲哚丁酸和吲哚乙酸，或吲哚丁酸和萘乙酸；
(5)移栽培养：将所述生根苗进行驯化、炼苗和移栽，管理生长30～40d即可。
2.根据权利要求1所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)中，取彩叶大戟幼嫩茎段、茎尖并剪去叶片，放入容器中加洗衣粉并以水冲洗30～35min，然后在无菌条件下以75％酒精消毒30s，再用0.1％的氯化汞溶液浸泡2～3min，最后用无菌水冲洗4～5次，并剪成0.5～1.0cm的带腋芽茎尖和茎段，以无菌滤纸吸干表面的水分，即得到外植体。
3.根据权利要求1所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(2)中，所述启动培养基中6-卞基嘌呤的浓度为1.0～3.0mg/L、萘乙酸的浓度为0.1～0.5mg/L、蔗糖的浓度为30g/L、琼脂的浓度为7.0g/L。
4.根据权利要求3所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(2)中，所述外植体接入启动培养基中培养20～22d，待侧芽萌发后长至2～3cm时转接进行继代培养。
5.根据权利要求1所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(3)中，所述继代培养基中6-卞基嘌呤的浓度为1.0～2.0mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.1～0.2mg/L、蔗糖的浓度为30g/L和琼脂的浓度为7.0g/L。
6.根据权利要求1所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，所述继代培养25～30d。
7.根据权利要求1所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(5)中，将所述生根苗移至温室，进行驯化3～4d，再炼苗2～3d后移栽。
8.根据权利要求7所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，所述移栽包括如下步骤：
(S1)将移栽基质依次进行暴晒、混合、搅拌和消毒，得到消毒基质；
(S2)对所述生根苗的根部进行消毒，然后蘸取生根液，并移栽至消毒基质中；
(S3)移栽初期控制温度为18～28℃、相对湿度为70～80％、折光率为50～60％；
(S4)每隔一周施加一次10～20ppm氨基酸水溶肥GGR溶液，管理生长30～40d即可。
9.根据权利要求8所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(S1)中，所述移栽基质包括如下重量份的原料：泥炭7份、珍珠岩2份和河沙1份。
10.根据权利要求8所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(S1)中，采用稀释800倍的百菌清溶液进行基质消毒。
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